A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Method Article
الليزر التقاط المجهري ، والمعروف أيضا باسم microdissection الليزر (LMD) ، تمكن المستخدم من عزل أعداد صغيرة من الخلايا أو الأنسجة من المجمدة أو الفورمالين الثابتة والمقاطع البارافين جزءا لا يتجزأ من النسيج. تقنيات LMD تعتمد على غشاء عطوب الحرارية وضعت إما في أعلى أو أسفل ، وقسم الأنسجة. في أسلوب واحد ، يتم استخدام طاقة الليزر مركزة لإذابة غشاء الخلايا على الكامنة ، التي يمكن بعد ذلك رفع للخروج من الباب الأنسجة. في الآخر ، وطاقة الليزر يبخر احباط على طول المسار "رسمها" على الأنسجة ، مما يسمح للخلايا محددة للوقوع في جهاز التحصيل. كل أسلوب يسمح للاختيار من الخلايا مع الحد الادنى من القرار ميكرون عدة. قد تكون معزولة DNA ، RNA والبروتين والدهون والعينات وتحليلها من تشريح عينات صغيرة. في هذا الفيديو ، ونحن لشرح استخدام لايكا AS - LMD صك microdissection الليزر في سبع فئات ، بما في ذلك مقدمة لمبادئ LMD ، تهيئة أداة للاستخدام ، والاعتبارات العامة لإعداد العينات ، وتركيب العينة ووضع أنابيب التقاط والتوفيق بين المجهر ، وتعديل الضوابط الطبيعية ، والاستيلاء على عينات الأنسجة. الليزر التقاط الجزئي تشريح تمكن المحقق من عزل عينات من السكان الخلية نقية صغيرة مثل الخلية مكافئات قليلة. هذا يسمح تحليل خلايا الفائدة التي تكون خالية من الملوثات المجاورة ، الأمر الذي قد يشوش النتائج التجريبية.
The authors have nothing to disclose.
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request PermissionThis article has been published
Video Coming Soon
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved