A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Method Article
يمكن تضاءل الخوف مكيفة من خلال عملية تسمى المثبطة الانقراض، ولكن يمكن تطفو على السطح في ظل ظروف مثل مرور الوقت أو التعرض للإجهاد. لدينا بروتوكول يقدم طريقة جديدة لمنع الانتعاش عن طريق إدخال الخوف الانقراض خلال فترة الانتقالات إعادة الوحدة (المرحلة إعادة تخزين ذاكرة تنشيط).
الخوف هو غير القادرة على التأقلم عندما استمرت لفترة طويلة بعد الظروف أصبحت آمنة. ولذلك فمن الأهمية بمكان وضع نهج يمنع استمرار عودة الخوف. ويعمل عادة الجنوني الخوف تكييف النماذج لإنشاء رقابة وتكوين الجمعيات الخوف رواية في المختبر. بعد الإقران حافزا حميدة (المثير الشرطي، CS) مع نتائج مكره (المثير غير الشرطي، الولايات المتحدة) يمكننا استثارة رد فعل الخوف (استجابة مشروطة، أو CR) من خلال تقديم الحوافز وحدها فقط 1،2. مرة واحدة يتم الحصول الخوف، يمكن تضاءلت باستخدام التدريب الانقراض، حيث يتم تقديم المثير الشرطي مرارا وتكرارا دون نتيجة مكره حتى لم يعد أعرب الخوف 3. هذا التعلم المثبطة يخلق جديدة، والتمثيل آمنة للCS، التي تتنافس للتعبير الخوف مع 4 الذاكرة الأصلي. على الرغم من انقراض فعال في تثبيط الخوف، فإنه ليست دائمة. يمكن عفويا الخوفاسترداد مع مرور الوقت. يمكن التعرض للإجهاد أو العودة إلى سياق التعلم الأولي أيضا أن يسبب الخوف لتطفو على السطح 3،4.
لدينا بروتوكول يتناول طبيعة عابرة للانقراض من خلال استهداف إطار إعادة الوحدة لتعديل الذاكرة العاطفية بطريقة أكثر دواما. أدلة وافرة تشير إلى أن إعادة تنشيط ذاكرة الموحدة يعود ذلك إلى حالة عطوب خلالها الذاكرة مرة أخرى للتشويش 5-9. هذه الفرصة السانحة لفتح يظهر بعد وقت قصير من إعادة تنشيط وإغلاق ما يقرب من 6hrs في وقت لاحق 5،11،16، ورغم أن هذا قد تختلف اعتمادا على القوة والذاكرة سن 15. من خلال السماح معلومات جديدة على أن تدرج في تتبع الذاكرة الأصلي، قد يتم تحديث هذه الذاكرة كما reconsolidates 10،11. منعت دراسات شملت الحيوانات غير البشرية بنجاح التعبير عن الخوف من خلال إدخال الذاكرة التلاعب الدوائية في إعادةنافذة الدمج، إلا أن معظم وكلاء المستخدمة هي إما سامة للإنسان أو تظهر آثار ملتبسة عند استخدامها في الدراسات الإنسانية 12-14. بروتوكول لدينا يعالج هذه التحديات من خلال تقديم فعالة، ولكن غير الغازية، والتلاعب السلوكية التي هي آمنة للبشر.
من دفع الخوف استرجاع الذاكرة قبل الانقراض، ونحن أساسا تؤدي عملية إعادة الوحدة، والسماح لإدراجها جديدة معلومات السلامة (أي الانقراض) في حين أن الذاكرة الخوف لا يزال عرضة للتدخل. قد منعت دراسة حديثة تستخدم هذا التلاعب السلوكية في الفئران بنجاح باستخدام هذه الذاكرة الخوف المعلمات الزمنية 11. وقد أظهرت دراسات إضافية في البشر أن إدخال معلومات جديدة بعد انتشال السيارات المجمعة من قبل 16 و 17 العرضية، أو مصرحة ذكريات 18 يؤدي إلى التدخل في تتبع الذاكرة الأصلية 14. نحن الخطوط العريضة أدناه الموالية روايةتستخدم لمنع الانتعاش tocol الخوف لدى البشر.
نظرة عامة
وأجرى الدراسة وصفنا في هذا البروتوكول على مدى ثلاثة أيام متتالية، مع تصميم بين موضوع-ثلاث مجموعات تجريبية. في يوم 1، تكييف جميع المواد الخضوع والخوف، حيث يتعلمون التمييز بين اثنين من العظة واحد أن يتنبأ صدمة وآخر لا. في يوم 2، جميع المواد تدريبا الانقراض، ولكنها تختلف فيما يتعلق بما يحدث مسبقا: مجموعتان الحصول على جديلة تذكير لإعادة تنشيط ذاكرة الخوف قبل التدريب الانقراض في حين أن المجموعة الثالثة لا يتلقى أي إشارة من هذا القبيل. مجموعة واحدة يتلقى تذكير جديلة 10 دقيقة قبل الانقراض، وبالتالي فإنها تخضع الانقراض في حين أن الذاكرة الخوف reconsolidating. المجموعة الأخرى يتلقى تذكير جديلة 6 ساعة قبل الانقراض، وبالتالي فإنها تخضع الانقراض بعد هذه النافذة قد أغلقت المفترض. المجموعة الثالثة لا يتلقى أي إشارة تذكير قبل ان يخضع الانقراض، وبالتالي فإنها تخضع لمعيار التدريب الانقراض. في اليوم 3، ص جميع الموادeturn لدورة أخرى الانقراض. مستوى الخوف عند لهم أولا راجع جديلة مكيفة في اليوم 3 إلى ما إذا كانت ذاكرة الخوف لا يزال قائما. وتجرى كل ثلاثة أيام في الإعداد التجريبية نفسه، وهو الصوت الموهن، ودرجة الحرارة التي تسيطر عليها الغرفة. المحفزات هي مكيفة المربعات الملونة المعروضة على شاشة الكمبيوتر. نحن لحث وقياس الخوف مع صدمة كهربائية خفيفة وتصرف الجلد، على التوالي، وذلك باستخدام وحدة نمطية نظام Biopac (انظر الجدول 1). يتم استخدام كمبيوتر سطح المكتب لتشغيل البرنامج برنامج AcqKnowledge التي تسمح لتسجيل ورصد SCR في حين يستخدم كمبيوتر منفصل لتشغيل وتقديم النصي التجريبية لهذا الموضوع. تخضع جميع المواد المراحل الثلاث في نفس الوقت تقريبا من اليوم.
1. تقييم استجابة الخوف مع المواصلة الجلد (SCR) - تطبيق والتسجيل الكهربائي
2. الحث الخوف مع خفيفة تحفيز الصدمة الكهربائية - تطبيق الإجراءات والعمل الكهربائي المتابعة
3. يوم 1 - اكتساب
4. اليوم 2 - إعادة تنشيط وتدريب الانقراض
موضوع انهيار:
تقسيم عشوائيا جميع المواضيع التي أظهرت اقتناء كافية من الخوف من يوم 1 (انظر معايير الاستبعاد أدناه) إلى ثلاث مجموعات:
المجموعة 1 (تنشيط-10 دقيقة): يتلقى التدريب الانقراض بعد 10 دقائق استرجاع ضمن إطار إعادة الوحدة
مجموعة2 (تنشيط-6 ساعة): يتلقى التدريب الانقراض 6 ساعات بعد استرجاع خارج إطار إعادة الوحدة
المجموعة 3 (عدم تنشيط): يتلقى التدريب القياسية الانقراض دون أي استرجاع
5. اليوم 3 - الفحص التلقائي استرداد الخوف
6. قبل معالجة البيانات وسجل SCR
توقيت
يوم 1
إعداد: 5-7 دقائق
سيناريو الشراء: ≈ 9 دقائق
المجموع: 15 دقيقة
يوم 2
إعداد: 5-7 دقائق
سيناريو تنشيط: ≈ 30 ثانية
استراحة: 10 دقيقة
SS = "jove_content"> سكربت الانقراض: ≈ 5،5 دقيقة
المجموع: 20 دقيقة
اليوم 3
إعداد: 5-7 دقائق
إعادة الانقراض البرنامج: ≈ 6،5 دقيقة
المجموع: 15 دقيقة
7. ممثل النتائج لكل مجموعة
في نهاية اليوم 1 (الاستحواذ)، والموضوعات ينبغي أن تظهر الفرق SCR إلى المغلق، وهو ما يعني زيادة الاستجابة لCS + مقارنة فيما يتعلق CS-(انظر الشكل 4، واقتناء، للحصول على مثال من المواضيع الفردية). بحلول نهاية اليوم 2 (تنشيط / الانقراض)، ينبغي أن يقلل هذا الرد الفرق، بحيث لم يعد هناك فرق بين CS + وCS-(انظر الشكل 4، وانقراض، للحصول على مثال من المواضيع الفردية). عند النظر في الشفاء التلقائي في اليوم 3، فإننا نتوقع أن نرى عدم وجود انتعاش الخوف في المجموعة تنشيط-10 دقيقةإذ تلقى هذه المجموعة التدريب الانقراض ضمن إطار إعادة الوحدة، مما يسمح لتتبع الذاكرة الأصلية لreconsolidate مع هذه المعلومات الجديدة السلامة، ومنع استعادة ردود الخوف (انظر الشكل 4، اللوحة العلوية، للحصول على مثال من موضوع على حدة). فإننا نتوقع أن نرى انتعاش كبير من الخوف، ومع ذلك، ل+ CS (لا CS-) في المجموعة تنشيط-6 ساعة التي تلقت التدريب الانقراض خارج إطار إعادة الوحدة (انظر الشكل 4، وسط الفريق، للحصول على مثال من أي فرد الموضوع) وكذلك مجموعة عدم تنشيط القياسية التي تلقت التدريب الانقراض (انظر الشكل 4، لوحة أسفل، للحصول على مثال من موضوع على حدة).
الشكل 1. مثال SCR خلال انشاء القطب. أسود، وأسهم تشير العمودي النقطة التي تلقى تعليمات باتخاذ الموضوعنفسا عميقا مما أدى إلى زيادة ملحوظة في SCR. اضغط هنا لمشاهدتها بشكل اكبر شخصية .
الشكل 2. مثال SCR أثناء إجراء أعمال المتابعة الصدمة. السهام السوداء العمودية تشير النقطة التي كانت تدار الصدمة. الأسهم تشير إلى رمادي ذروة ارتفاع تصرف الجلد استجابة لصدمة. اضغط هنا لمشاهدتها بشكل اكبر شخصية .
الشكل 3 مثال لاستجابة مشروطة (CR) إلى بداية CS + تليها استجابة أكبر دون شروط (اور) لإيصال الصدمة (الولايات المتحدة)؛ محاكمة لاحقة هي صورة CS-. الأسهم تشير إلى رمادي بداية CS وتعويض؛ السوداء الأسهم الهنديةيأكل من تسليم الولايات المتحدة. اضغط هنا لمشاهدتها بشكل اكبر شخصية .
الشكل 4 مثال لاسترداد حيازة والانقراض وعفوية في الموضوع من كل فرد حالة تجريبية (اللوحة العلوية: تنشيط-10 دقيقة؛ وحة الأوسط: تنشيط-6 ساعة؛ اللوحة السفلية: لا إعادة تنشيط).
الجدول 1. جدول المنتجات ذات الصلة والمعدات.
بروتوكول إعادة الوحدة الجدول 2. والجدول الزمني.
الجدول 3. مثال على ذلك محاكمة لكل مرحلة من مراحلالتجربة. مذكرة واحدة إضافية CS-ينبغي أن تضاف إلى يوم 2.2 (الانقراض) في كلا المجموعتين من أجل تذكير لحساب تنشيط + CS. وتجاهل أول CS للمحاكمة في يوم 3 (الرمز مع خلفية رمادية) نتيجة لاستجابة توجيه في بداية الدورة.
تعيين ما يصل التجريبي
الإعداد يتضمن تشغيل PC-E الوزراء، تشغيل ماك الاعتراف، ونظام Biopac MP100، وصندوق الصدمة. وتمت برمجة في سطر التعليمات البرمجية في البرنامج النصي E-الوزراء على التواصل مع البرنامج والاعتراف مربع الصدمة. وهذا يتيح E-رئيس لإرسال إشارات إلى الاعتراف onsets الحدث تدل، وإشارات إلى مربع صدمة لتحريك إدارة الصدمة. يتم إرسال الإخراج من خلال E-الوزراء منفذ الطابعة لنظام Biopac، والذي بدوره يرسل إشارة الحدث لعلم وظائف الأعضاء تسجيل ماك مع الاعتراف عبر اتصال USB المتوفرة مع نظام Biopac، وكذلك إلى مربع الصدمة (انظر الجدول 1 للهمزUCT المعلومات).
استبعاد المعايير
ينبغي استبعاد المواد قبل الانتهاء من جميع الدورات التجريبية أو من تحليل البيانات إذا كانت تظهر أي مما يلي:
بروتوكول قدمنا هنا يمكن خلق بسيطة استجابة الخوف مكيفة لحافز محايدة يقترن نتيجة مكره. وبعد يوم ونحن تنشيط ذاكرة الخوف من أجل إعادة الوحدة لتحريك لها. خلال هذه المرحلة التي يسببها لنا التدخل في شكل تدريب الانقراض. للتحقق من أن يؤثر انقراض إعادة الوحدة كنا مجموعات ال...
الإعلان عن أي تضارب في المصالح.
نشكر D. جونسون وDoelling K. للحصول على المساعدة في جمع البيانات. نشكر أيضا M.-H. ميلاد مونفيس، LeDoux J.، M. ونيف Y. لتقديم المشورة بشأن البروتوكولات التجريبية. وقد تم تمويل هذه الدراسة من قبل مؤسسة جيمس ماكدونيل S. والمعاهد الوطنية للصحة (NIH) منحة R21 MH072279 (EAP)، NIH منح R37 MH038774، P50 MH058911، RO1 MH046516 وMH067048 K05 (JEL)، زمالات ما بعد الدكتوراه NSERC، وCIHR AHFMR (M.-HM)، وفولبرايت والجوائز بلافاتنيك (DS).
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request PermissionThis article has been published
Video Coming Soon
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved