JoVE Logo
Authors
Contact Us

Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • النتائج
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

Thromboembolic stroke models are vital tools for optimizing the recanalization therapy. Here we report a murine thrombotic stroke model based on transient cerebral hypoxic-ischemic (tHI) insult, which triggers thrombosis and infarction, and responds favorably to tissue plasminogen activator (tPA)-mediated fibrinolysis in a therapeutic window similar to those in stroke patients.

Abstract

وقد عانى البحوث السكتة الدماغية العديد من النكسات في ترجمة العلاجات اعصاب في الممارسة السريرية. في المقابل، فإن العلاج في العالم الحقيقي (TPA الجلطات) نادرا ما تنتج فوائد في النماذج التجريبية الميكانيكية المستندة إلى انسداد، التي تهيمن على أبحاث السكتة الدماغية قبل السريرية. هذا الانقسام بين مقاعد البدلاء، والسرير يوحي الحاجة إلى استخدام نماذج سكتة متجاوبة في مجال البحوث السكتة الدماغية قبل السريرية. تحقيقا لهذه الغاية، واخترع نموذجا السكتة الدماغية الخثاري بسيطة وسكتة التفاعلي وصفها هنا. ويتكون هذا النموذج من انسداد عابرة من جانب واحد مشترك الشريان السباتي والتسليم من 7.5٪ من الأكسجين من خلال القناع عن وجهه في فئران بالغة لمدة 30 دقيقة، مع الحفاظ على درجة حرارة الجسم في الحيوان 37.5 ± 0.5 ° C. على الرغم من أن ربط عكسها من الشريان السباتي من جانب واحد أو نقص الأكسجة قمعت كل تدفق الدم إلى المخ عابر فقط، والجمع بين كل من الشتائم تسبب العجز ضخه، الفيبرين وترسب الصفائح الدموية، وinfar كبير دائمط م في الأراضي التي يتم توفيرها من الشريان الدماغي المتوسطة. الأهم من ذلك، قدمت حقن المؤتلف سكتة عند 0.5، 1، أو 4 ساعات بعد ثي (10 ملغ / كلغ) الوريد ذيل الحد تعتمد على الوقت من معدل الوفيات واحتشاء الحجم. هذا النموذج السكتة الدماغية الجديد هو بسيط، ويمكن أن تكون موحدة في جميع أنحاء مختبرات لمقارنة النتائج التجريبية. وعلاوة على ذلك، فإنه يدفع الجلطة دون قطع القحف أو إدخال الصمات شكلت مسبقا. ونظرا لهذه المزايا الفريدة، ونموذج ثي هو إضافة مفيدة إلى مرجع للبحوث السكتة الدماغية قبل السريرية.

Introduction

الجلطات وإعادة الاستقناء هي العلاج الأكثر فعالية من السكتة الدماغية الحادة في الممارسة السريرية 1. بعد، تم تنفيذ معظم الأبحاث العصبية قبل السريرية في نموذج عابر ميكانيكي عرقلة (داخل اللمعة خياطة المتوسطة انسداد الشريان الدماغي) التي تنتج التعافي السريع من تدفق الدم إلى المخ على إزالة انسداد الأوعية الدموية ويظهر قليل من دون فوائد قبل سكتة الجلطات. وقد أشير إلى أن اختيار مشكوك فيها من نماذج السكتة الدماغية ساهم، جزئيا على الأقل، إلى صعوبة في ترجمة علاج الأعصاب لمرضى 2،3. وبالتالي، هناك دعوة متزايدة لتوظيف نماذج الانسداد التجلطي السكتة الدماغية سكتة متجاوبة في مجال البحوث قبل السريرية، ولكن لديها مثل هذه النماذج أيضا المشاكل التقنية (انظر مناقشة) 4-7. نحن هنا وصف نموذجا السكتة الدماغية الجلطات جديد يقوم على جانب واحد عابرة التأكسج الدماغية (ثي) إهانة وردودها على العلاج عن طريق الحقن الوريدي سكتة 8.

تم تطوير نموذج السكتة الدماغية ثي على أساس الإجراء ليفين (ربط دائم من جانب واحد الشريان السباتي المشترك يليه التعرض لنقص الأكسجين عابرة في غرفة) التي اخترعت لإجراء التجارب مع الفئران الكبار في عام 1960 9. تلاشى الإجراء ليفين الأصلي إلى الغموض ل انها تنتج سوى تلف في الدماغ متغير، ولكن تسبب نفس إهانة الأعصاب ثابت في الجراء القوارض عندما أعيد تطبيقها من قبل روبرت Vannucci وزملاؤه نموذجا من الأطفال حديثي الولادة بنقص التأكسج اعتلال الدماغ الإقفاري (عجل) في عام 1981 (10). وفي السنوات الأخيرة، بعض المحققون أعادت تكييف نموذج ليفين-Vannucci لفئران بالغة عن طريق ضبط درجة الحرارة في غرفة ميتة 11. فمن المعقول أن آفات الدماغ غير متناسقة في الإجراء ليفين الأصلي قد تنشأ من تذبذب درجة حرارة الجسم من القوارض الكبار في غرفة ميتة. لاختبار هذه الفرضية، ونحن تعديل الإجراء ليفين بالإدارة الغاز ميتةمن خلال قناع، مع الحفاظ على درجة الحرارة الأساسية القوارض في 37 ° C على طاولة الجراحة 12. كما هو متوقع، والتحكم في درجة حرارة الجسم صرامة زيادة كبيرة في استنساخ مرحبا الناجم عن أمراض الدماغ. الإهانة مرحبا أيضا يؤدي تجلط الدم، الالتهام الذاتي، وgray- وإصابة 13 بيضاء المسألة. وقد استخدم باحثون آخرون أيضا نموذج مرحبا للتحقيق في ما بعد السكتة الدماغية الاستجابات الالتهابية 14.

ومن المزايا الفريدة لنموذج مرحبا السكتة الدماغية هي أنها تتابع عن كثب ثالوث فيرشو لتشكيل خثرة، بما في ذلك ركود تدفق الدم، والإصابة البطانية (على سبيل المثال بسبب الإجهاد التأكسدي مرحبا يسببها)، وفرط التجلط (تنشيط صفائح الدم مرحبا يسببها) ( الشكل 1A) 15. على هذا النحو، فإن النموذج مرحبا قد قبض على بعض الآليات الفيزيولوجية المرضية ذات الصلة السكتة الدماغية في العالم الحقيقي. مع هذه الفكرة في الاعتبار، ونحن المكرر كذلك نموذج مرحبا مع ربط عكسها للأمم المتحدةilateral الشريان السباتي المشترك (وبالتالي لخلق مرحبا إهانة عابرة)، واختبار ردودها على سكتة الجلطات مع أو بدون Edaravone. Edaravone هو زبال الجذور الحرة وافقت بالفعل في اليابان لعلاج السكتة الدماغية في غضون 24 ساعة من بداية 9. وأظهرت تجاربنا أن مختصرة قدر 30 دقيقة عابرة مرحبا يطلق احتشاء الخثاري، والتي تجمع بين العلاج سكتة-Edaravone تمنح فوائد التآزر 8. نحن هنا وصف العمليات الجراحية مفصلة والاعتبارات المنهجية للنموذج ثي، والتي يمكن استخدامها لتحسين العلاجات ضخه من السكتة الدماغية الحادة.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

تمت الموافقة على هذا البروتوكول من قبل اللجنة المؤسسية رعاية الحيوان واستخدام (IACUC) من جامعة إيموري ويتبع المعاهد الوطنية للصحة المبدأ التوجيهي للرعاية واستخدام الحيوانات المختبرية.

1. إعداد

  1. إعداد السرير الجراحي على لوحة ظاهرة الاحتباس اتصال مع مضخة الحرارة عند 37 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة على الأقل قبل الجراحة. وضع لفة الرقبة باستخدام برميل من 3 مل حقنة على السرير الجراحي. تحضير غاز التخدير مع 2٪ الأيزوفلورين في الهواء الطبي.
  2. إعداد ملقط تعقيمها، مقص، وأصحاب الإبرة الصغيرة، مرقئ، ومسحات القطن والخيوط الجراحية. إعداد الغراء الأنسجة ومرهم للعين.
  3. إعداد نظام نقص الأكسجة وتحكم في درجة الحرارة مع مصباح التدفئة والتحقيق المستقيم. يعد الغاز نقص الأكسجة مع 2٪ الأيزوفلورين في 7.5٪ O 2 متوازنة من 92.5٪ N 2.
  4. ساعة واحدة قبل الجراحة، وanalgesized الفئران عن طريق الحقن تحت الجلد من بطء الإفراج ميلوكسيكام (4.0 ملغ / كلغ).
<ص الطبقة = "jove_title"> 2. عابر الدماغي نقص الأكسجة-نقص التروية (الشكل 1B)

  1. تخدير C57BL الذكور 10-13 أسبوع من العمر / 6 الفئران وزنها 22-30 غ في تحريض غرفة التخدير مع 3٪ الأيزوفلورين حتى الحيوان لا يستجيب لضغط القدم، ثم قم بإزالة الشعر على حق الرقبة باستخدام ماكينة حلاقة الإلكترونية.
  2. وضع الفئران على السرير الجراحي على اتصال مع 2٪ الأيزوفلورين في الهواء الطبي في معدل تدفق 2 لتر / دقيقة. امتدت الأمامية آمنة على طول لفة الرقبة على الجانبين باستخدام شريط الطبي.
  3. تنظيف الموقع الجراحي لشق مع betadine تليها الكحول ثم مسحات القطن.
  4. تحت المجهر تشريح، وجعل شق 0.5 سم بزر الماوس الأيمن عنق الرحم باستخدام ملقط على التوالي، والمقص الصغير حوالي 0.2 سم الوحشي من الجلد خط الوسط.
  5. استخدام زوج من ملقط مسنن غرامة لمزق اللفافة والأنسجة لفضح الصحيح الشريان السباتي المشترك (RCCA). فصل بعناية RCCA من العصب المبهم باستخدام زوج من الملقط السلس الجميلة.
  6. يعيش عقدة اثنين قبل القطع 5-0 خياطة الحرير (نشره) على RCCA، ومن ثم خياطة الجلد باستخدام 4-0 النايلون حيدة خياطة (الشكل 1C).
  7. تطبيق مرهم العين في كلتا العينين لمنع جفاف.
  8. نقل بسرعة الفئران لنظام نقص الأكسجة ووضع الأنف والفم وجها قناع مع 2٪ الأيزوفلورين في 7.5٪ O 2 في معدل تدفق 0.5-1 لتر / دقيقة لمدة 30 دقيقة.
    1. خلال نقص الأكسجة، استخدم تحكم في درجة الحرارة مع مصابيح التدفئة للسيطرة على درجة حرارة الجسم 37.5 ± 0.5 ° C. رصد معدل التنفس في 80-120 الأنفاس / دقيقة. الحفاظ على درجة حرارة الجسم فوق 37 درجة مئوية خلال نقص الأكسجين مهم لخلق احتشاء الدماغ ثابت. انخفاض معدل التنفس يحدث عادة بعد 20 دقيقة نقص الأكسجة. إزالة جها قناع والسماح العرض الجوي العادي في حالة انخفاض معدل التنفس أدناه إلى 40. وهذا يأخذ 1-2 دقيقة ولا يعول في 30 دقيقة مدة نقص الأكسجة.
  9. بعد نقص الأكسجين، ونقلالفئران إلى سرير العمليات الجراحية والافراج عن اثنين من الغرز RCCA. إغلاق الجرح باستخدام الغراء الأنسجة، ومن ثم العودة الفئران إلى القفص. استبعاد الحيوانات إذا تم الإفراج عن كل من هما عقدة الحية بشكل غير متوقع بعد نقص الأكسجين.
  10. مراقبة الفئران لمدة 5-10 دقيقة للتعافي من نقص الأكسجين والتخدير. وضع الغذاء المبللة في القفص وإعادته إلى مرفق للرعاية الحيوان.
    ملاحظة: ترتبط الحيوانات تظهر خفيفة الى سلوك شديد تحلق في 24 ساعة بعد ثي مع مخالفة الدماغ. معظم الحيوانات مع أعراض النوبة يموتون قبل timepoint 24 ساعة بعد ثي.

3. الليزر الرقطة التباين التصوير

ملاحظة: على الرغم من أن هذا ليس إجراء أساسيا من نموذج ثي، لطخة ليزر نظام التصوير النقيض ثنائي الأبعاد 16 يمكن أن تستخدم لوصف التغيرات في تدفق الدم الدماغي (البرازيلي) أثناء أو بعد عابرة نقص الأكسجة نقص التروية. لتوثيق التعديلات من الاتحاد البرازيلي تحت ثي، سجل فورا بعد الحاديالجيش الشعبي 2.6. بدلا من ذلك، لمقارنة الانتعاش البرازيلي بعد ثي إهانة، لا يمكن أن يؤديها هذه الإجراءات التالية الخطوة 2.10.

  1. وضع الماوس تخدير في وضعية الانبطاح وتنفيذ شق خط الوسط 1 سم طويل على فروة الرأس مع الجمجمة المكشوفة ولكن دون فتحها.
  2. رصد الاتحاد البرازيلي في كل من نصفي الكرة المخية تحت تصوير تدفق الدم وفقا لبروتوكول الشركة المصنعة وبدء تسجيل تدفق الدم إلى المخ مباشرة بعد عملية جراحية CCAO (الخطوة 2.6). يستمر لمدة 50 دقيقة.
  3. عرض الاتحاد البرازيلي صورة مع وحدات التعسفي في لوحة 16 لون وتحليل في الوقت الحقيقي في مناطق مختارة باستخدام برنامج MoorFLPI باتباع إرشادات الشركة المصنعة (الشكل 2).
  4. بعد تسجيل الصورة البرازيلي، إغلاق فروة الرأس مع الغراء الأنسجة ويعود الحيوان إلى القفص.

إدارة 4. سكتة

  1. حقن الحيوانات في الوريد الذيل مع المذيب أو 10 مغ / كغ المؤتلف سكتة (220-300 &# 956؛ ل 1 ملغ / م TPA) في 0.5، 1، أو 4 ساعات بعد tCCAo بالإضافة إلى نقص الأكسجة (الشكل 4).

5. تلف في الدماغ كشفها مع عدة خيارات مختلفة

ملاحظة: لجمع عينات من الدماغ، الموت ببطء الفئران في 1 أو 4 أو 24 ساعة بعد ثي.

  1. أداء الكمي لحجم احتشاء قبل في الجسم الحي 2،3،5-Triphenyltetrazolium كلوريد (TTC) طريقة في 24 ساعة بعد ثي إهانة كما هو موضح السابق 17
    1. البريتونى حقن الحيوانات مع 1.4 M حل مانيتول (~ 0.1 مل / غرام من وزن الجسم) 30 دقيقة قبل نضح transcardial. الفئران يروي Transcardial مع PBS تليها 10 مل من 2٪ TTC.
    2. إزالة الدماغ من الحيوانات مع الأدوات الجراحية بعد 10 دقيقة والمكان الى 4٪ امتصاص العرق لتثبيت ليلة وضحاها والقسم إلى 1 مم مع vibratome.
    3. التقاط سلسلة من أربع شرائح الدماغ مقطوع بواسطة المجهر الرقمي وضليع في الرياضياتify حجم احتشاء كنسبة من منطقة محتشية (المنطقة البيضاء في الجانب الأيمن) لمنطقة التالفة، نصف الكرة الأرضية المقابل باستخدام برنامج يماغيج.
  2. بدلا من ذلك، نفذ تشكيل الجلطة المناعي في 1 ساعة بعد ثي الإهانة.
    1. تجميد الدماغ ثابتة في مجمع أكتوبر وقسم العقول في 12 ميكرومتر سمك باستخدام ناظم البرد.
    2. احتضان شريحة الدماغ مع أرنب الأجسام المضادة لمكافحة الفيبرينوجين (1: 100) التالية الماعز المضادة للأرنب اليكسا Fluro 488 صبغ (1: 200) لمراقبة مضان على المجهر الفلورسنت.
  3. بدلا من ذلك، نفذ السفينة عرقلة من قبل الذيل الوريد حقن 100 ميكرولتر 2٪ ايفانز صبغة زرقاء في 4 ساعات بعد ثي الإهانة.
    1. الموت ببطء الفئران وسرعان ما قطع رأسه لإزالة العقول إلى 4٪ امتصاص العرق بعد حقن ايفانز الأزرق. ملاحظة: يستغرق 5-10 دقيقة عن ايفانز تداول الأزرق مع اللون الأزرق من كلا fore- وهند أطرافه.
    2. Sectiعلى العقول ثابتة عند 100 سمك ميكرون باستخدام مشراح انزلاق ومراقبة مضان باستخدام فلتر انبعاث 680 نانومتر على المجهر الفلورسنت.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

النتائج

تم استخدام ثنائي الأبعاد التصوير رقطة الليزر المقابل (LSCI) 16 لمقارنة التغيرات في تدفق الدم الدماغي (البرازيلي) من خلال 30 دقيقة عابرة انسداد الشريان السباتي من جانب واحد (tCCAO)، والتعرض 30 دقيقة لنقص الأكسجة (7.5٪ أكسجين)، و 30 دقيقة من جانب واحد السباتي ربط ظل نقص الأكس...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

السكتة الدماغية هي مسألة صحية رئيسية من تزايد أهمية لأي مجتمع مع شيخوخة السكان. على الصعيد العالمي، والسكتة الدماغية هي ثاني سبب رئيسي للوفاة ما يقدر ب 5.9 مليون الأحداث القاتلة في عام 2010، أي ما يعادل 11.1٪ من مجموع الوفيات 18. السكتة الدماغية هي أيضا السبب الرئيسي ?...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

None.

Acknowledgements

This study was supported by the NIH grant NS074559 (to C. K.). We thank all collaborators who contributed to our research articles that the present methodology report is based upon.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
adult male miceCharles RiverC57BL/6 10-13 weeks old (22-30 g)
Mobile Laboratory Animal Anesthesia SystemVetEquip901807anesthesia
Medical air (Compressed) air tankAirgasUN1002anesthesia
IsofluranePiramal HealthcareNDC 66794-013-25anesthesia
Multi-Station Lab Animal AnesthesiaSystemSurgivetV703501hypoxia system
7.5% O2 balanced by 92.5% N2 tankAirgasUN1956hypoxia system
Temperature Controller with heating lamp Cole Parmer EW-89000-10temperature controllers
Rectal probeCole Parmer NCI-00141PGtemperature controllers
Dissecting microscope Olympus SZ40surgical setup
Heat pump with warming padGaymar TP700surgical setup
Fine curved forceps (serrated)FST11370-31surgical instrument
Fine curved forceps (smooth)FST11373-12surgical instrument
micro scissorsFST15000-03surgical instrument
micro needle holdersFST12060-01surgical instrument
Halsted-Mosquito hemostatsFST13008-12surgical instrument
5-0 silk suture Harvard Apparatus624143surgical supplies
4-0 Nylon monofilament sutureLOOK766Bsurgical supplies
Tissue glueAbbott LaboratoriesNC9855218surgical supplies
Puralube Vet ointmentFisherNC0138063 eye dryness prevention 
MoorFLPI-2 blood flow imagerMoor780-nm laser sourceLaser Speckle Contrast Imaging
MannitolSigmaM4125in vivo TTC
2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) SigmaT8877in vivo TTC
VibratomeStoelting51425brain section for in vivo TTC 
Digital microscopeDino-LiteAM2111whole-brain imaging
O.C.T compoundSakura Finetek4583
goat anti-rabbit Alexa Fluro 488InvitrogenA11008Immunohistochemistry
CryostatVibratomeultrapro 5000brain section for IHC
Evans blueSigmaE2129Detecting vascular perfusion
MicrotomeElectron Microscopy Sciences5000brain section for histology
Avertin (2, 2, 2-Tribromoethanol)SigmaT48402euthanasia
Fluorescent microscopeOlympusDP73
Meloxicam SRZooPharmNSAID analgesia

References

  1. Broderick, J. P., Hacke, W. Treatment of acute ischemic stroke: Part I: recanalization strategies. Circulation. 106 (12), 1563-1569 (2002).
  2. Hossmann, K. A. Pathophysiological basis of translational stroke research. Folia Neuropathol. 47 (3), 213-227 (2009).
  3. Hossmann, K. A. The two pathophysiologies of focal brain ischemia: implications for translational stroke research. J. Cereb. Blood Flow Metab. 32 (7), 1310-1316 (2012).
  4. Macrae, I. M. Preclinical stroke research--advantages and disadvantages of the most common rodent models of focal ischaemia. Br. J. Pharmacol. 164 (4), 1062-1078 (2011).
  5. Niessen, F., Hilger, T., Hoehn, M., Hossmann, K. A. Differences in clot preparation determine outcome of recombinant tissue plasminogen activator treatment in experimental thromboembolic stroke. Stroke. 34 (8), 2019-2024 (2003).
  6. Orset, C., et al. Mouse model of in situ thromboembolic stroke and reperfusion. Stroke. 38 (10), 2771-2778 (2007).
  7. Watson, B. D., Dietrich, W. D., Prado, R., Ginsberg, M. D. Argon laser-induced arterial photothrombosis. Characterization and possible application to therapy of arteriovenous malformations. J. Neurosurgery. 66 (5), 748-754 (1987).
  8. Sun, Y. Y., et al. Synergy of combined tPA-edaravone therapy in experimental thrombotic stroke. PLoS One. 9, e98807(2014).
  9. Levine, S. Anoxic-ischemic encephalopathy in rats. Am. J. Pathol. 36, 1-17 (1960).
  10. Rice, J. E. 3rd, Vannucci, R. C., Brierley, J. B. The influence of immaturity on hypoxic-ischemic brain damage in the rat. Annals Neurol. 9 (2), 131-141 (1981).
  11. Vannucci, S. J., et al. Experimental stroke in the female diabetic, db/db, mouse. J. Cereb. Blood Flow Metab. 21 (2), 52-60 (2001).
  12. Adhami, F., et al. Cerebral ischemia-hypoxia induces intravascular coagulation and autophagy. Am. J. Pathol. 169 (2), 566-583 (2006).
  13. Shereen, A., et al. Ex vivo diffusion tensor imaging and neuropathological correlation in a murine model of hypoxia-ischemia-induced thrombotic stroke. J. Cereb. Blood Flow Metab. 31 (4), 1155-1169 (2011).
  14. Michaud, J. P., Pimentel-Coelho, P. M., Tremblay, Y., Rivest, S. The impact of Ly6C low monocytes after cerebral hypoxia-ischemia in adult mice. J. Cereb. Blood Flow Metab. 34 (7), e1-e9 (2014).
  15. Zoppo, G. J. Virchow's triad: the vascular basis of cerebral injury. Rev. Neurol. Dis. 5, 12-21 (2008).
  16. Dunn, A. K. Laser speckle contrast imaging of cerebral blood flow. Annals Biomed. Eng. 40 (2), 367-377 (2012).
  17. Sun, Y. Y., Yang, D., Kuan, C. Y. Mannitol-facilitated perfusion staining with 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride (TTC) for detection of experimental cerebral infarction and biochemical analysis. J. Neurosci. Methods. 203 (1), 122-129 (2012).
  18. Lozano, R., et al. Global and regional mortality from 235 causes of death for 20 age groups in 1990 and 2010: a systematic analysis for the Global Burden of Disease Study. Lancet. 380 (9859), 2095-2128 (2010).
  19. Murray, C. J., et al. Disability-adjusted life years (DALYs) for 291 diseases and injuries in 21 regions, 1990-2010: a systematic analysis for the Global Burden of Disease Study. Lancet. 380 (9859), 2197-2223 (2012).
  20. Dirnagl, U., Macleod, M. R. Stroke research at a road block: the streets from adversity should be paved with meta-analysis and good laboratory practice. Br. J. Pharm. 157 (7), 1154-1156 (2009).
  21. Dirnagl, U., et al. A concerted appeal for international cooperation in preclinical stroke research. Stroke. 44 (6), 1754-1760 (2013).
  22. Khatri, P., et al. Revascularization end points in stroke interventional trials: recanalization versus reperfusion in IMS-I. Stroke. 36 (11), 2400-2403 (2005).
  23. Rosenberg, R. D., Aird, W. C. Vascular-bed--specific hemostasis and hypercoagulable states. New Eng. J. Med. 340 (20), 1555-1564 (1999).
  24. Majid, A., et al. Differences in vulnerability to permanent focal cerebral ischemia among 3 common mouse strains. Stroke. 31 (11), 2707-2714 (2000).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

102 TPA Edaravone

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Contact Us

Recommend to library

JoVE NEWSLETTERS

Research

Education

Authors

Librarians

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved