المناعية على أقسام البارافين للبشرة باستخدام الماوس أجسام نيون

Summary

نحن تصف طريقة موثوقة لimmunolocalization داخل البشرة معدلة لكلا الفرعين البارافين المجمد والتي نستخدمها بشكل روتيني جدا في المختبر لدينا.

Abstract

في البشرة ، المناعية هو وسيلة فعالة لإضفاء الطابع المحلي على بروتينات محددة لمقصورة على التعبير النسبية ، وتحديدا في القاعدية ، suprabasal ، والطبقة المتقرنة طبقات. توطين بالضبط داخل البشرة من بروتين معين يضفي القرائن تجاه دورها الوظيفي داخل البشرة. في هذا الفصل ، ونحن تصف طريقة موثوقة لimmunolocalization داخل البشرة تعديل لكلا الفرعين البارافين المجمد والتي نستخدمها بشكل روتيني جدا في المختبر لدينا. أقسام البارافين توفير أفضل بكثير عموما التشكل ، وبالتالي نتائج متفوقة والصور الفوتوغرافية ، ولكن ليس كل الأجسام المضادة ستعمل مع التثبيت والمعاملة القاسية التي ينطوي عليها معالجتها. لذلك ، يتم أيضا تضمين البروتوكول لsectioning المجمدة. في غضون sectioning البارافين ، توصف بروتوكولات تثبيت اثنين (بوين وبارافورمالدهيد) ، وسيتم اختيار تثبيتي علاقة مباشرة للمواصفات والأجسام المضادة قد تتطلب تحديد طريقة أخرى.

Protocol

بروتوكول النص الكامل لهذا النهج التجريبي هو متاح في البروتوكولات سبرينغر .