الأوعية ثنائي الأبعاد بالأشعة السينية لدراسة هيكل الأوعية الدموية الدقيقة باستخدام مركب حقن مطاط سيليكون

Summary

تقدم هذه الدراسة أسلوب angiographic ثنائي الأبعاد بسيط لدراسة هياكل الأوعية الدموية غرامة استخدام سيليكون مطاط حقن المركب ولينة نسيج النظام بالأشعة السينية.

Abstract

الأوعية أداة أساسية لدراسة هياكل الأوعية الدموية في مختلف المجالات البحثية. الهدف من هذه الدراسة هو الأخذ بأسلوب أنجيوجرافيك بسيط لفحص بنية الأوعية الدموية غرامة الأنسجة غير المثبتة، الطازجة باستخدام سيليكون مطاط حقن المركب ولينة نسيج النظام بالأشعة السينية. هذه الدراسة خاصة تركز على رفرف الأراضي المستخدمة في جراحة. وتستخدم هذه الدراسة الأوعية بحقنه مطاط سيليكون مركبة في مختلف الظروف التجريبية باستخدام الفئران سبراغ داولي. أولاً، يتم خلط 15 مل من المركب بالسيارات و 15 مل من مخفف. ثم، على استعداد 1.5 مل عامل التجفيف، وهو مقني ز 24 قسطرة في الشريان السباتي المشترك من الفئران. محبس الحنفية الثلاثية ثم متصلاً قسطرة، والوكيل راديوباك، بعد خلطها مع عامل علاج المعدة، يتم حقن فورا دون تسرب. أخيرا، كما يتصلب الوكيل، يتم حصاد العينة، وصورة أنجيوجرافيك يتم الحصول عليها باستخدام أنسجة لينة النظام بالأشعة السينية. هذا الأسلوب يشير إلى أن الأوعية عالية الجودة عرض هياكل الأوعية الدموية الدقيقة ويمكن بسهولة وببساطة الحصول على داخل في فترة قصيرة من الزمن.

Introduction

دراسة هياكل الأوعية الدموية مثل الشرايين والاوردة مجال هام للاهتمام، لا سيما في جراحة. في هذا الحقل، يتم إجراء جراحة رفرف على نطاق واسع. ذلك، يتم استخدام التصوير أنجيوجرافيك بنشاط دراسة الأراضي رفرف، وأنجيوسومي، وإمدادات الأوعية الدموية للأنسجة الطازجة¹. على وجه التحديد، كانت هناك جهود مستمرة لمراقبة المفرج غرامة، بما في ذلك سفن غرامة مثل ثاقبات (السفن الخارجة من سفن عميقة تصل إلى الجلد)، وخنق السفن (ربط السفن بين أنجيوسوميس المجاورة)² . مهمة هذين النوعين من السفن في ميدان التعمير رفرف مخرز وهي المحور الرئيسي ل بحوث^3،4.

وتستخدم مواد مختلفة في الأوعية. أولاً، هناك الحبر الهند، ومفيدة في رصد تشريح الإجمالي للأوعية الدموية. ومع ذلك، راديولوسينت، حيث لا يمكن الحصول على الصور أنجيوجرافيك. المواد راديوباك أكثر شيوعاً المستخدمة هي أكسيد الرصاص والباريوم. ومع ذلك، سمية عيب حاسمة من أكسيد الرصاص، وأنها غير مريح للاستخدام عند مختلطة مع المياه بسبب شكلها مسحوق. الباريوم خال من السمية؛ ومع ذلك، ليس من مجدية جداً، كما ينبغي أن تستخدم بعد التخفيف. كل من هذه المواد راديوباك لا يمكن عبور الشعيرات الدموية؛ ولذلك، إذا كان يجب أن يكون تحليل بنية الأوعية الدموية عموما، من الضروري أن لهم بحقن الشريان والوريد بشكل منفصل من⁵. وباﻹضافة إلى ذلك، تسبب المواد اثنين صبغ التسرب أثناء تشريح التشريحية، حيث أنها ينبغي أن تكون جنبا إلى جنب مع الجيلاتين. خليط أكسيد-الجيلاتين والجيلاتين الباريوم يؤدي اتخاذ يوم واحد على الأقل ترسيخ^1،،من⁶⁷.

التصوير المقطعي (CT) الأوعية هو أسلوب آخر يستخدم على نطاق واسع، ويمكن أن تساعد في عرض هياكل ثلاثية الأبعاد (3D)⁸. ومع ذلك، لا يمكن أن تكون الأوردة تصور فعالية⁵. في هذه الطريقة، يصعب التصور الواضح للمفرج غرامة مثل خنق الأوردة، فيما عدا عند استخدام معدات معينة. الحاجة إلى معدات مكلفة أكثر يمكن وضع غير مؤات، حيث لا يمكن استخدام الأوعية CT في جميع مختبرات. وفي المقابل، الأنسجة اللينة نظام الأشعة السينية رخيصة نسبيا ويمكن أن تعمل بسهولة أكبر. هذا النظام هو الأمثل لعرض أنسجة لينة ويمكن أن توفر أعلى جودة الصور الأنسجة اللينة من النظام بالأشعة السينية بسيطة. على الرغم من أن الأنسجة اللينة نظام الأشعة السينية نفسها لا تظهر الصور الثلاثية الأبعاد، يمكن أن يساعد تصور جيد هياكل الأوعية الدموية أكثر وضوحاً من الأوعية CT. ولذلك، فقد استخدمنا الأنسجة اللينة نظام الأشعة السينية في العديد من التجارب، لا سيما في مختلف نماذج رفرف والتشريح الأساسية^2،9.

وأخيراً، استخدام سيليكون المطاط حقن الأوعية مجمع مزايا عديدة. لأنه يتم إعداد وكلاء الألوان المختلفة، فإنه يمكن حقن وعرض ألوان مميزة مثل الحبر الهند. ولذلك، من الممكن في الوقت نفسه دراسة التشريح الإجمالي والأوعية. ويمكن على حد سواء المرور عبر الشعيرات الدموية والسماح الأوردة تصور، مما يجعل من الممكن امتحانات هياكل الأوعية الدموية الدقيقة. وخلافا لخليط الجيلاتين، يتصلب حقن المطاط سيليكون مجمع ضمن فترة زمنية قصيرة، ما يقرب من 15 دقيقة، دون أية إجراءات إضافية. ويرد العملية برمتها في الصورة التخطيطي في الشكل 1.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

جميع الإجراءات، بما في ذلك المواد الحيوانية، أقرها برعاية الحيوان المؤسسية واستخدام اللجان من سول الوطنية المستشفى الجامعي (IACUC رقم 10-0184). هذا البروتوكول هو الأمثل لبحث في رفرف المفرج. ويستند هذا المثال نموذج رفرف أربعة أراضي في تقاريرنا السابقة.

1-وضع شرط رفرف

ملاحظة: من المهم لتوليد تغيير الأوعية الدموية في نموذج الفئران رفرف 4 إلى 5 أيام قبل تقدير مرئية^6،7.

1. استخدام ذكور الفئران سبراغ داولي عمرها 7 أسبوع وزنها 200-250 غم.
2. تخدير الفئران باستخدام إيسوفلوراني في 3-5% للاستقراء و 2-2.5% للصيانة. إجراء اختبار انعكاس انسحاب قرصه إصبع القدم التأكد من أن عمق التخدير كافية.  حقن ميلوكسيكام 5 ملغ/كغ تحت الجلد لتخفيف الألم.
3. يحلق الجذع استخدام ماكينة قص الشعر الحيواني وكريم لإزالة الشعر (ثيوجليكوليك الحمضية، 80%). إعداد حقل جراحية معقمة مع 10% بوفيدون وثني عقيمة للحفاظ على شرط عقيمة طوال الإجراءات. تطبيق مرهم التعليم والتدريب المهني للعين لمنع جفاف. الحفاظ على جميع الصكوك في حالة معقمة.
4. إنشاء الشرط رفرف المناسبة.
   1. وضع علامة على تصميم رفرف جلد كفافى من أسفل البطن إلى الخلف، قياس 4 x 12 سم. تحديد موقع مركز رفرف في منتصف الطريق بين عملية الرهابه والقضيب (الشكل 1).
   2. جعل الشق كما تم وضع علامة باستخدام شفرة جراحية.
   3. تشريح رفرف استخدام مقص، بما في ذلك كارنوسوس الجلد وبانيكولوس.
   4. تشريح حول بيديكلي الأوعية الدموية [الثنائية العميقة علامة سيركوفليكس حرقفي (الحركة) سفن وثنائية سطحية أدنى شرسوفي (SIE) سفن] في أسفل البطن وفضح بيديكلي الأوعية الدموية استخدام العدسة اللاصقة جراحية وأدوات ميكروسورجيكال.
   5. المحافظة على أو سد الأوعية تبعاً للشروط المطلوبة.
   6. تقسيم رفرف على طول خط الوسط الظهرية استخدام شفرة جراحية أو المقص.
   7. تكمن رفرف في موضعه الأصلي وإصلاحه بدباسة جلد.
   8. تنطبق مرهم موضعي للجرح الجراحي لمدة 3 أيام ويقدم التسكين بعد العملية الجراحية بإدارة ميلوكسيكام بجرعة 5 ملغ/كغ شفويا مرة واحدة يوميا لمدة 3 أيام.
   9. وتؤكد أن الفئران يستعيد وعيه كافية للحفاظ على ريكومبينسي القصية. عودة الفئران في القفص ونقله إلى منطقة سكنية. تطبيق الاليزابيثي ذوي الياقات البيضاء لكل الفئران.

2-إعداد الصكوك

1. إعداد قسطرة ز 24 ومحبس الحنفية الثلاثية.
2. إعداد البعوض الملقط ومقص صغير ومشرط جراحة وشفرة جراحية.
3. إعداد الوكيل angiographic (سيليكون المطاط حقن المركب).
   1. مزيج عامل اللون المركب مع مخفف في كأس جمع العينات العقيمة. ضمان كمية متساوية من حيث الوزن: 15 مل عامل اللون المركب و 15 مل من MV مخفف في أحد الفئران (فأر سبراغ داولي، 200-250 غم).
   2. إضافة عامل المعالجة الواحدة 5% وزن أو حجم الحل الخليط فورا قبل الحقن: 1.5 مل من علاج عامل في أحد الفئران (فأر سبراغ داولي، 200-250 غم).

3-فأر الشريان إعداد

1. استخدم إيسوفلوراني لتخدير الفئران (3-5% لتحريض) و 2-2.5% للصيانة. إجراء اختبار انعكاس انسحاب قرصه إصبع القدم التأكد من أن عمق التخدير كافية.
2. حلق الرقبة استخدام ماكينة قص الشعر الحيواني وكريم لإزالة الشعر (ثيوجليكوليك الحمضية، 80%).
3. كشف الشريان السباتي المشترك¹⁰.
   1. جعل شق خط الوسط 2-سم بين سكابولاي.
   2. تشريح أعمق باستخدام الملقط البعوض ومقص حادة حتى يتم كشف المجمع الغدة اللعابية.
   3. التراجع عن الغدة اللعابية وصراحة تشريح العضلات أوموهيويد طوليا.
   4. تشريح حول الشريان السباتي المشترك.
4. ربط الجانبين الرأسي ووالذيليه الشريان السباتي المشترك مع الحرير الأسود وإلصاق ذلك.
   1. جعل تعادل على خياطة الدانية وإبقاء الجر للحفاظ على تحفل الشريان.
   2. إعداد واحدة خياطة الحرير إلى جانب والذيلية لتأمين القسطرة ز 24.

4-كانوليشن

1. كانولاتي الشريان السباتي المعدة باستخدام قسطرة ز 24.
2. تشديد التعادل مسبقة الصنع في الجانب والذيلية، ويجب الحرص على عدم إزالة القسطرة أثناء الحقن.
3. إعداد الوكيل علاج (الخطوة 1.3.2).
4. الاتصال محبس الحنفية الثلاثية بشكل أمن بالقسطرة المدرج.
   1. تأكيد الدم متقيا في القسطرة بإضافة استخدام المحاقن فارغة الضغط السلبي.

5-حقن

1. حقن حقن المطاط سيليكون مجمع حتى تغير لون العين والقدم.
   ملاحظة: يجب أن تظهر تغير اللون كما تقدم السائل المحقون (كمية الحقن حوالي 25-30 مل لكل فأر).
2. قفل محبس الحنفية الثلاثية والانتظار حتى يتصلب الوكيل.
   1. احرص على عدم تلويث مع العامل، لا سيما عند إزالة المحاقن من محبس الحنفية الثلاثية. استخدام حاجز وقائي مثل الشاش أو الفينيل لفصل الفضاء حقن من المناطق المحيطة بها.
      تنبيه: أي التلوث يجعل من الصعب تحليل الصورة أنجيوجرافيك لأن المجمع راديو-كامد.
   2. تأكيد وقف دقات القلب والتنفس. إيقاف التخدير.
   3. مراقبة معدل صلابة مع عامل المتبقية كمرجع (حوالي 15 دقيقة اللازمة).

6-جمع العينة

1. جعل شق استخدام شفرة جراحية إلى كارنوسوس بانيكولوس 1 سم خارج رفرف لمنع الأضرار بأي بنية الأوعية الدموية داخل رفرف.
2. تشريح على طول الطائرة تشريح سابقا من الخطوة 1، 4 (تحت الطائرة كارنوسوس بانيكولوس) والحصاد الأنسجة بما في ذلك رفرف والأوعية الدموية بيديكلي استخدام مقص (يتم تضمين بنية الأوعية الدموية في رفرف).
3. سد بيديكلي رفرف استخدام خياطة حرير 5-0 وفصل رفرف من الجسم. أن الحرص على عدم الأضرار بنية الأوعية الدموية.

7-التقاط الصورة أنجيوجرافيك

1. انتشرت العينة، ضمان عدم إضعاف، ووضعه برفق على ثني الجراحية باستخدام الملقط.
2. تأخذ صورة الأشعة.
   1. نقل العينة الكذب كاسيت الفيلم إلى عينة تحميل الفضاء.
   2. تعيين الأنسجة اللينة نظام الأشعة السينية إلى 60 كفب، 5 ماجستير، و 5 s التعرض.
3. وضع الفيلم في غرفة مظلمة باستخدام جهاز تنمية تلقائي.
4. المسح الضوئي الأفلام في أعلى دقة ممكنة.

8-تحليل الصورة^6،،من⁷¹¹

1. التمييز بين الشرايين والاوردة استناداً إلى استمرار تدفق والقطر.
   1. بدء من تدفق الشريان بيديكلي والتركيز على متن السفينة المستهدفة يجري بحثها.
   2. قياس الأقطار مع البرمجيات عن طريق فتح أول الصورة.
      1. انقر فوق الزر مستقيم ورسم خط على شريط مقياس هو نفس الطول.
      2. تحليل فتح | ضبط مقياس القائمة وقم بإدخال قيمة شريط مقياس إلى تعرف المسافة.
      3. انقر فوق الزر مستقيم ورسم خط على ظهر السفينة التي القطر يحتاج إلى قياس.
      4. تحليل فتح | قياس القائمة وتأكيد طول.
2. تحليل نمط الأوعية الدموية النظر في مجال بقاء رفرف.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

النتائج

من خلال اتباع هذا البروتوكول، تم فحص الأوعية الدموية رفرف من الفئران سبراغ داولي. واتسم رفرف جلد كفافى من أسفل البطن إلى الظهر أن قياس 4 × 12 سم استناداً إلى تقاريرنا السابقة. وكان كل عينة في حالة الأوعية الدموية مختلفة.

جميع اللوحات كانت مر...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

سيليكون المطاط حقن الأوعية المركبة يمكن أن يؤديها بسهولة، لا تتطلب معدات باهظة الثمن، ويوفر العديد من المزايا. على النقيض من التقييمات قبل الجراحة والمضاعفات للمرضى، تجارب باستخدام الحيوانات والجثث يمكن تقديم تفاصيل عن ظروف محددة، تمكن أكثر من دراسات متعمقة ومتنوعة. الطراز رفرف باستخدا...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
MICROFIL Silicone Rubber Injection Compounds	Flow Tech Inc.	MV-112	White color agent
MICROFIL Silicone Rubber Injection Compounds	Flow Tech Inc.	MV-117	Orange color agent
MICROFIL Silicone Rubber Injection Compounds	Flow Tech Inc.	MV-120	Blue color agent
MICROFIL Silicone Rubber Injection Compounds	Flow Tech Inc.	MV-122	Yellow color agent
MICROFIL Silicone Rubber Injection Compounds	Flow Tech Inc.	MV-130	Red color agent
MICROFIL Silicone Rubber Injection Compounds	Flow Tech Inc.	MV-132	Clear agent
MICROFIL Silicone Rubber Injection Compounds	Flow Tech Inc.	MV-Diluent	Diluent
MICROFIL CP-101 For Cast Corrosion Preparations	Flow Tech Inc.	CP-101	Curing agent
SOFTEX X-ray film photographing inspection equipment	SOFTEX	CMB-2	Soft tissue x-ray system
Film	Fujifilm	Industrial X-ray Film (FR 12x16.5cm)
Automatic Development Machine	Fujifilm	FPM 2800
Rat			Sprague-Dawley rat weighing 200-250 g
Three-way stopcock
24-guage catheter
Image J	National Institutes of Health		https://imagej.nih.gov/ij/