JoVE Logo
Authors
Contact Us

Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • النتائج
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

استخدام Toolchain الرسوم المتحركة فيشسيم الرواية، نقدم بروتوكول للتلاعب البصرية غير الغازية للإعلام في سياق ماتي-خيار النسخ في سيلفين مليس. فيشسيم Toolchain الرسوم المتحركة يوفر إطارا سهلة الاستخدام لتصميم والرسوم المتحركة وتقديم المحفزات الأسماك الرسوم المتحركة للتجارب السلوكية مع الأسماك الحية اختبار.

Abstract

على مدى العقد الماضي، زاد استخدام الرسوم المتحركة الكمبيوتر لبحوث سلوك الحيوان نظراً لقدرته على التلاعب غير إينفاسيفيلي بمظهر وسلوك من المحفزات البصرية، مقارنة بالتلاعب بالحيوانات الحية. نقدم هنا، فيشسيم Toolchain الرسوم المتحركة، إطار برنامج وضع لتزويد الباحثين بطريقة سهلة الاستخدام لتنفيذ الكمبيوتر 3D الرسوم المتحركة في التجارب السلوكية مع الأسماك. Toolchain يوفر قوالب لخلق حافز 3D الظاهري من خمسة أنواع مختلفة من الأسماك. المحفزات قابلة للتخصيص في المظهر والحجم، استناداً إلى الصور الفوتوغرافية التي التقطت للأسماك الحية. يمكن أن تكون متحركة المحفزات متعددة عن طريق تسجيل السباحة مسارات في بيئة ظاهرية باستخدام وحدة تحكم لعبة فيديو. زيادة التوحيد القياسي لمحاكاة السلوك، قد يكون ردها مسار السباحة أو المسجلة مسبقاً مع محفزات مختلفة. يمكن في وقت لاحق نظمت في قوائم تشغيل الرسوم المتحركة متعددة وعرضت على شاشات أثناء تجارب مع الأسماك الحية.

في دراسة القضية مع سيلفين مليس (Poecilia لاتيبينا)، نقدم بروتوكولا حول كيفية إجراء تجربة نسخ رفيقه للاختيار مع فيشسيم. نحن استخدام هذا الأسلوب لإنشاء وتحريك الظاهري من الذكور والإناث نموذج ظاهري، وثم عرضت هذه لتعيش الإناث المحورية في تجربة خيار ثنائي. نتائجنا تثبت أن الرسوم المتحركة الحاسوب يمكن أن تستخدم لمحاكاة الأسماك الظاهري في تجربة نسخ رفيقه-اختيار للتحقيق في دور البقع جرابيد الإناث كمؤشر للجودة بالنسبة للإناث نموذجي في ماتي-خيار النسخ.

تطبيق هذا الأسلوب لا يقتصر على تجارب ماتي-خيار النسخ ولكن يمكن استخدامها في تصاميم تجريبية مختلفة. لا يزال، قابليته للاستخدام يعتمد على القدرات البصرية لدراسة الأنواع ويحتاج أولاً التحقق من الصحة. إجمالاً، الرسوم المتحركة الكمبيوتر توفر درجة عالية من التحكم وتوحيدها في التجارب وتحمل الإمكانات 'خفض' و 'استبدال' الحيوانات التحفيز حية، وكذلك بشأن 'تحسين' إجراءات تجريبية.

Introduction

في الآونة الأخيرة، استخدام التقنيات الحديثة لخلق المحفزات الاصطناعية، مثل الرسوم المتحركة الكمبيوتر والواقع الافتراضي، قد حصل على شعبية في البحث1. هذه الأساليب توفير العديد من المزايا مقارنة بالنهج التجريبي الكلاسيكي مع حافز مباشر الحيوانات1،2. الرسوم المتحركة الكمبيوتر يمكن التلاعب غير الغازية بمظهر (الحجم واللون) والسلوك الظاهري التحفيز الحيوانات المستخدمة في التجارب. على سبيل المثال، صدر الاستئصال الجراحي للسيف في سووردتايلس الخضراء الذكور (Xiphophorus helleri) لاختبار تفضيلات رفيقه في الإناث3 غير الضرورية باستخدام الرسوم المتحركة الحاسوب في دراسة لاحقة على هذه الأنواع4. وعلاوة على ذلك، يمكن إنشاء الرسوم المتحركة الكمبيوتر تعمل التي تتم مواجهتها إلا نادراً في الطبيعة5. قد يكون تغيير الميزات المورفولوجية للحيوانات الظاهري حتى خارج النطاق الطبيعي لأن الأنواع4. وبخاصة، التلاعب المنهجي الممكنة للسلوك هو واحد الميزة الرئيسية للرسوم المتحركة الحاسوب، نظراً لأنه من المستحيل تقريبا مع الحيوانات الحية6،7.

وتوجد تقنيات مختلفة حتى الآن لإنشاء الرسوم المتحركة الكمبيوتر. الرسوم المتحركة البسيطة ثنائية الأبعاد (2D) عادة مستمدة من صورة لحافز يتحرك في بعدين فقط، ويمكن أن تنشأ مع البرمجيات الشائعة مثل MS PowerPoint8 أو9من Adobe After Effects. ثلاثي الأبعاد (3D) الرسوم المتحركة، والتي تتطلب أكثر تعقيداً الرسومات 3D النمذجة البرمجيات، تمكين الحافز نقل في ثلاثة أبعاد، زيادة إمكانيات الحركة المادية الواقعية ومعقدة6،7 , 10 , 11 , 12-بل الواقع الافتراضي وكانت التصاميم التي تحاكي بيئة ثلاثية الأبعاد، حيث انتقل الحيوانات الحية المستخدمة13،14. في استعراض حديث شوينار تولي et al. 2 مناقشة هذه التقنيات واحداً تلو الآخر، وتسليط الضوء على مزايا وعيوب في تنفيذها في مجال البحوث، التي تعتمد خاصة على نطاق الدراسة والقدرات البصرية للحيوان الاختبار (انظر "المناقشة"). بالإضافة إلى ذلك، بأول وروزنتال15 إسداء المشورة بشأن تصميم تجريبي مناسب، وما هي الأسئلة التي قد تكون موجهة باستخدام المحفزات الاصطناعية في بحوث سلوك الحيوان.

منذ إنشاء الرسوم المتحركة الكمبيوتر قد تكون صعبة وتستغرق وقتاً طويلاً، نشأت الحاجة إلى برامج لتسهيل وتوحيد عملية تصميم الرسوم المتحركة. في هذه الدراسة، نقدم Toolchain حركة فيشسيم الحرة والمفتوحة المصدر16 (قصيرة: فيشسيم؛ https://bitbucket.org/EZLS/fish_animation_toolchain/)، نهجاً متعدد التخصصات يجمع بين علم الأحياء وعلم الحاسوب لتلبية هذه الاحتياجات. مماثلة إلى ال17، أنيفيشفي وقت سابق نشر الأداة18، وضع toolchain اتباعها هدف تزويد الباحثين بطريقة سهلة الاستخدام لتنفيذ المحفزات 3D الرسوم المتحركة في تجارب مع الأسماك. برنامجنا يتكون من مجموعة من الأدوات التي يمكن أن تستخدم في: (1) إنشاء 3D الأسماك الظاهري (فيشكريتور)، شكل (2) تحريك المسارات حوض السمك ظاهري مع وحدة تحكم لعبة فيديو (فيشستيرينج)، و (3) تنظيم وعرض مسبق الرسوم المتحركة على شاشات تعيش الأسماك المحورية (فيشبلايير). لدينا toolchain يوفر العديد من الميزات التي تعتبر مفيدة بشكل خاص للاختبار في حالة اختيار ثنائي بل تنطبق أيضا على تصاميم تجريبية أخرى. وعلاوة على ذلك، تمكن الحركة الممكنة من اثنين أو أكثر من الأسماك الظاهري محاكاة للضحالة أو الخطوبة. الرسوم المتحركة ليست ملزمة لحافز معين ولكن قد يكون ردها مع المحفزات الأخرى مما يجعل من الممكن تغيير مظهر حافزا ولكن تبقى ثابتة على سلوكه. طبيعة المصدر المفتوح في toolchain، فضلا عن حقيقة أن ذلك يستند إلى نظام تشغيل الروبوت روس (www.ros.org)، تقديم نمطية عالية للنظام وتوفير إمكانيات لا نهاية لها تقريبا تشمل الأجهزة ردود فعل خارجية (كوحدة تحكم أو تتبع النظام) وتكييف toolchain للاحتياجات الذاتية في مجال البحث. وبالإضافة إلى مولى سيلفين، أربعة أنواع أخرى قابلة للاستخدام حاليا: مولى الأطلسي Poecilia المكسيكية، غوبي الشبكي Poecilia، ستيكليباك سبينيد – ثلاثة موتر جاستيروستيوس و cichlid هابلوتشروميس spp. يمكن إنشاء أنواع جديدة في رسومات 3D النمذجة أداة (مثلاً، خلاط، www.blender.org). لتجسيد سير العمل مع فيشسيم وتقديم بروتوكول حول كيفية إجراء تجربة نسخ رفيقه للاختيار مع الرسوم المتحركة الحاسوب، أجرينا دراسة حالة مع مليس سيلفين.

اختيار رفيقه هو واحد من أهم القرارات التي تجعل الحيوانات في تاريخ الحياة. وقد تطورت الحيوانات استراتيجيات مختلفة للعثور على أفضل التزاوج الشركاء. أنها قد تعتمد على المعلومات الشخصية عند تقييم إمكانيات التزاوج الشركاء بشكل مستقل، ربما وفقا لتفضيلات وراثية محددة سلفا لبعض السمات المظهرية19،20. ومع ذلك، قد أيضا مراعاة اختيار رفيقه كونسبيسيفيكس وبالتالي الاستفادة من المعلومات العامة21. إذا كان المراقب ثم تقرر اختيار رفيقه نفسه (أو النمط الظاهري نفسه) كونسبيسيفيك الملاحظة – '' نموذج '' – المختارة مسبقاً، هذا هو ما يسمى ماتي-خيار نسخ (مختصر الآخرة كلجنة التنسيق الإداري)22،23. رفيقه-خيار نسخ شكل من أشكال التعلم الاجتماعي، ومن ثم، غير المستقلة ماتي-اختيار استراتيجية24، التي لوحظت في كلا الفقاريات25،،من2627،28، 29 واللافقاريات30،،من3132. وحتى الآن، تدرس غالباً في الأسماك لجنة التنسيق الإداري وهو العثور على حد سواء تحت ظروف المختبر33،35،34،36،37،38 وفي البرية39،40،،من4142. رفيقه-خيار النسخ ذات قيمة خاصة لفرد إذا كان اثنين أو أكثر الشركاء المحتملين التزاوج متشابهة على ما يبدو في الجودة، واختيار "جيدة" ورفيقه – فيما يتعلق بتحقيق أقصى قدر من اللياقة البدنية-من الصعب إجراء43. نوعية نموذج الأنثى نفسها يمكن أن يؤثر على ما إذا كان نسخ التنسيق الإناث لها الخيار أو عدم44،45،،من4647. على التوالي، نوعية الإناث النموذجي "جيدة" أو "سيئة" قد نسبت إلى بلدها يجري أكثر أو أقل من ذوي الخبرة في اختيار رفيقه، على سبيل المثال فيما يتعلق بالحجم والعمر44،،من4546، أو بكونها كونسبيسيفيك أو هيتيروسبيسيفيك47. في مليس سيلفين بنسخها اختيار رفيقه كونسبيسيفيكس39،،من4849،،من5051، وجد أن تركيز الإناث حتى نسخة رفض الذكور52 . وحيث يعتبر لجنة التنسيق الإداري أن تلعب دوراً هاما في تطور السمات المظهرية، فضلا عن انتواع والتهجين21،23،،من5354، المترتبة على نسخ " قد يكون خيار زائف "هائلة في الحد من لياقة ناسخة55. إذا كان فرد تقرر اختيار فرد، من المهم تقييم إذا كان النموذج الذي لوحظ مصدر موثوق للمعلومات، أي أن النموذج نفسه جعل خيار "جيد" سبب له أو لها خبرة جيدة في ماتي آخر نسخة الاختيار. وهنا تنشأ المسألة: ما هي الميزات المرئية قد تميز نموذج موثوق به لنسخ من الإناث مولى سايلفين؟

هو سمة مرئية متميزة في مليس سيلفين الإناث وأخرى بوسيلييدس بقعة جرابيد (المعروف أيضا من 'سبوت الشرج'، 'أمهات التصحيح' أو 'الحمل الموضعية'). هذه المنطقة مصطبغة مظلم في منطقة الشرج مستمد من شكل الميلانين الأنسجة بطانة الكيس المبيض56. حجم ووجود بقعة جرابيد متغير عبر كونسبيسيفيك الإناث وكذلك تغيير على حدة أثناء التقدم لدورات المبيض56،57. قد تكون البقع جرافيد لجذب الذكور وتسهيل التوجه جونوبوديال للتلقيح الداخلي58 أو كوسيلة للإعلان عن الخصوبة59،60. ونظرا للارتباط بين الفور جرابيد وحالة الإناث الإنجابية، توقعنا أن الحال جرابيد بمثابة علامة على جودة الإناث النموذجي بتوفير المعلومات عن حالتها التناسلية الحالية لمراقبة تركيز الإناث. نحن التحقيق اثنين من فرضيات بديلة. أولاً، إذا كان الحال gravid إشارة عامة لمرحلة النضج، كما تنبأ ب فأر وترافيس59، أنها ترمز إلى نموذج يفترض أن يعول عليها وذوي الخبرة بالمقارنة مع نموذج غير ناضجة (دون الحال). وهنا الإناث المحورية من المرجح أن نسخ اختيار نموذج مع بقعة ولكن ليس هذا النموذج دون بقعة. وثانيا، إذا كانت الحال جرابيد علامات عدم التقبل بسبب الفعل النامية broods، كما تنبأ سومنر et al. 60، هذا النموذج أقل موثوقية من المفترض منذ ستعتبر غير تقبلا الإناث أقل من الاختيار. في هذه الحالة، سوف لا نسخ التنسيق الإناث يختارونها لكن من طرازات دون بقعة. حتى الآن، دور بقعة جرابيد للتنسيق الإداري في سيلفين مولى الإناث قد ابدأ تم اختبارها، لا تجريبيا التلاعب بها.

كنا فيشسيم لإجراء تجربة لجنة التنسيق الإداري بتقديم حافز الظاهري الذكور والإناث نموذج الظاهري على شاشات الكمبيوتر بدلاً من استخدام الحوافز حية والأسماك النموذجية المستخدمة في الإجراء التجريبي الكلاسيكي49،50 ،،من5161. سابقا تم التحقق من قابليتها للاستخدام العام لبرنامجنا لاختبار فرضيات حول اختيار رفيقه في سيلفين مليس12. هنا، قمنا باختبار ما إذا كان عدم وجود أو وجود بقعة جرابيد في نموذج الظاهري الإناث يؤثر على اختيار رفيقه مراقبة الإناث المحورية حية. أولاً ندع الإناث المحورية تأقلم إلى خزان الاختبار (الشكل 1.1) والسماح لهم باختيار بين رجلان التحفيز افتراضية مختلفة في اختبار المساعد الأول للاختيار (الشكل 1، 2). بعد ذلك، قدم ذكر الظاهري السابقة غير المفضلة أثناء فترة المراقبة، جنبا إلى جنب مع نموذج ظاهري أنثى (الشكل 1.3). في اختبار ماتي--الخيار ثاني لاحقة، اختيار الإناث التنسيق مرة أخرى بين الذكور نفس (شكل 1-4). قمنا بتحليل ما إذا كان تركيز الإناث قد نسخ اختيار رفيقه للإناث النموذجي الملاحظ بمقارنة قرار اختيار رفيقه لها في اختبار ماتي-الخيار الأول والثاني. ونحن أداء اثنين العلاجات التجريبية المختلفة التي نحن التلاعب بها بصريا نوعية الأنثى نموذج الظاهري. أثناء فترة المراقبة، أما قدمنا المسبقة غير المفضلة الظاهري الذكور (1) جنبا إلى جنب مع أنثى نموذج ظاهري مع بقعة جرابيد (العلاج "بقعة")؛ أو (2) جنبا إلى جنب مع نموذج ظاهري أنثى دون بقعة جرابيد (المعاملة "لا سبوت"). بالإضافة إلى ذلك، في عنصر تحكم دون أي أنثى النموذجي، نحن اختبار ما إذا كان اختيار الإناث التنسيق دائماً عندما لم تقدم أية معلومات عامة.

figure-introduction-11157
رقم 1. لمحة عامة عن أهم الخطوات التجريبية لتجربة لجنة التنسيق الإداري باستخدام المحفزات الأسماك الظاهري. (1) فترة تأقلم. اختبار المساعد الأول للاختيار (2) : يختار أنثى تنسيق مباشر بين الذكور التحفيز الظاهري. (3) فترة المراقبة: أنثى المحورية الساعات السابقة الذكور غير المفضلة جنبا إلى جنب مع أنثى نموذج ظاهري مع بقعة جرابيد. (4) اختبار ماتي--الخيار الثاني: يختار الأنثى التنسيق مرة أخرى بين الذكور التحفيز الظاهري. في هذا المثال، أنها نسخ اختيار النموذج. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

Protocol

التجارب المنجزة ومناولة الأسماك تتمشى مع قوانين "الرفق بالحيوان الألمانية" (Deutsches تيرشوتزجيسيتز)، ووافق عليها موظف رعاية الحيوان الداخلية الدكتور أورس Gießelmann، جامعة Siegen، و (السلطات الإقليمية Kreisveterinäramt Siegen-فيتجنشتاين؛ تصريح رقم: 53.6 55-05).

1-تصميم الأسماك الظاهرية

ملاحظة: العثور على قائمة الأجهزة والبرامج المطلوبة في قائمة المواد التكميلية. يمكن الاطلاع على وصف مفصل للوظيفة العامة فيشسيم ونصائح إضافية والحيل في "دليل المستخدم" (https://bitbucket.org/EZLS/fish_animation_toolchain/).

  1. إعداد القوام جسد الأنثى مع أو بدون بقعة جرابيد
    1. بدء الأعرج و انقر فوق الملف >> فتح فتح صورة نسيج الجسد الأنثوي "PLF_body_6. بابوا غينيا الجديدة "من مجلد النماذج في الدليل"fishsim_animation_toolchain". استخدام هذه الصورة كمرجع لجميع مواد جديدة جسد الأنثى التي تم إنشاؤها مع بقعة جرابيد. حدد منطقة بقعة مظلمة جرابيد الصورة المرجعية باستخدام أداة التحديد الحر وقطع عليه (انقر فوق تحرير >> قطع).
      ملاحظة: الأعرج (متوفرة في www.gimp.org) هو صورة مجانية تحرير أداة، على غرار "أدوبي فوتوشوب"، والتي يمكن استخدامها للتعامل مع الصور الرقمية والرسومات.
    2. فتح ملف نسيج جسد أنثى ثانية في جيمب (مثلاً، "PLF_body_7.png") ونقل منطقة البقعة على نسيج الجسم الثاني بإدراج (تحرير >> "لصق في") المسبقة قص المنطقة بقعة كطبقة جديدة عائمة. ضبط موضع الحال جرابيد في طبقات الصورة ودمج ثانية بالنقر فوق طبقة >> "طبقة الربط".
      ملاحظة: ضمان أن منطقة الفور جرابيد نفس الحجم والموضع متطابقة في كل نموذج الظاهري أنثى (الشكل 2)!
    3. تصدير (تحرير >> "التصدير ك") مادة "بقعة" الجديدة تحت اسم جديد (على سبيل المثال، PLF_body_7_S. png) في مجلد النماذج . إغلاق كافة فتح صورة windows في جيمب.
      ملاحظة: لا إجراء أية تغييرات أخرى (مثلاً، القياس) لتعيين ملفات منذ تحريرها على وجه التحديد أن تكون لاحقة على الأسماك 3D الملمس.
    4. إنشاء نسيج جسم ثاني دون بقعة جرابيد، استخدام نفس ملف نسيج جسد الأنثى الأصلي مرة ثانية (على سبيل المثال، "PLF_body_7.png"). الآن، تغطي البقع gravid الموجودة بالفعل في الملف الأصلي بمساعدة الأعرج.
    5. فتح نسيج الجسد الأنثوي في جيمب، وقم بتحديد أداة استنساخ. حدد نمط منطقة البطن المحيطة بها (دون تصبغ الظلام) عن طريق الضغط على Ctrl + الأيسر واستخدم هذا التحديد لتغطية تصبغ الظلام الموجود باللوحة أكثر من ذلك باستخدام أداة استنساخ (الشكل 2).
    6. التصدير التي تم إنشاؤها حديثا نسيج "لا بقعة" تحت اسم جديد (على سبيل المثال، PLF_body_7_NS.png) في مجلد النماذج . إغلاق الأعرج.

figure-protocol-2911
رقم 2: القوام الصور أنموذج لجسد الأنثى قبل (الأصل) وبعد التلاعب "سبوت" وعلاج "لا بقعة" تحرير الصورة باستخدام أداة الأعرج. ويمثل الدائرة المتقطعة المنطقة التي تم التلاعب بها. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

  1. ضبط زاوية وإعداد "الساحة" للرسوم المتحركة
    1. بدء تشغيل فيشسيم عن طريق تحديد رمز فيشسيم في المشغل على الجانب الأيمن من سطح المكتب. تكوين القرار لشاشات العرض التقديمي، ثم انقر فوق بدء.
      ملاحظة: من المستحسن القيام بالتعديلات التالية (الخطوات 1.2.2\u20121.2.4) على شاشة واحدة من شاشات العرض (إذا كانت أبعاد العرض وقرارات تختلف).
    2. اضغط F1 على لوحة المفاتيح للتغيير من وضع إلى وضع التحرير (التبديل بين عرض وتحرير الوضع بشكل متكرر الضغط على F1) عرض.
      ملاحظة: التبديل إلى وضع التحرير تمكين شريط أدوات التحرير في الجزء العلوي من الإطار. يصور المشهد كما رأينا في طريقة عرض ما سيقدم على الشاشة من خلال التجارب.
    3. قم بضبط زاوية مطابقة أبعاد شاشات العرض التقديمي عن طريق ضبط زاوية الكاميرا. تدوير الكاميرا بالضغط على زر الماوس الأيسر وتحريك المؤشر. عموم الكاميرا بالضغط على زر الفأرة الأيمن وتحريك المؤشر. التكبير والتصغير بالضغط بالماوس الأوسط (أو كلا أزرار الماوس) وتحريك المؤشر.
    4. انقر فوق إعدادات الكاميرا في شريط أدوات التحرير (رمز الكاميرا)، وانقر فوق نسخ كام ثابت لتعيين وجهة نظر. انقر فوق ملف >> حفظ المشهد لإنقاذ الساحة المعدلة كالساحة الافتراضية الجديدة. لهذا، تجاوز ملف "default_scene.scene" في المجلد مشاهد من الدليل فيشسيم .
      ملاحظة: سوف يظهر المشهد الافتراضي في بداية كل من فيشسيم ومشهد الانطلاق في فيشبلايير. في فيشبلايير الساحة الافتراضية أيضا بمثابة وقفه خلال التجارب (الشكل 3A). ضبط المشهد الذي ينبغي القيام به مرة واحدة فقط.

figure-protocol-5134
الشكل 3: لقطات مشهد في فيشسيم. (أ) المشهد الافتراضي فارغة دون سمكة، (ب) مشهد عرض مشهد يظهر أن نفس ذكر مع أنثى نموذجي مع بقعة، و (د) مشهد يظهر الذكور متطابقة ومتماثلة الطراز الإناث الذكور وحدها، (ج) دون بقعة. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

  1. تصميم المحفزات الذكور الظاهري للعرض أثناء اختبارات الاختيار ماتي
    ملاحظة: إعداد الظاهرية المحفزات الذكور التي سيتم في وقت لاحق المتحركة وقدم العيش الإناث المحورية خلال اختبارات الاختيار رفيقه.
    1. إذا لم يكن بالفعل فتح، بدء تشغيل فيشسيم. اضغط F1 للدخول في وضع التحرير.
    2. انقر فوق ملف >> تحميل الأسماك طراز من القائمة المنسدلة والتحميل الافتراضي الذكور سيلفين مولى قالب "default_PLM.x" بتحديده من المجلد النماذج.
    3. انقر نقراً مزدوجاً فوق يسار على الأسماك المحملة لتحديده. وسيتم إبراز ذلك في شبكة. انقر على رمز الترس في شريط الأدوات لفتح مجموعة أدوات السمك. سوف يطفو على السطح مربع مع خيارات التحرير المستخدمة في تخصيص ذكر الظاهري. اونتيك إظهار الشبكة لعرض أفضل للأسماك.
    4. تغيير اسم الذكور.
      ملاحظة: اسم الرجل مهم ويمثل "دور" أنها ستلعب في وقت لاحق أثناء الحركة. يجب أن يكون هذا الاسم مطابق لكل أنثى ظاهري تم إنشاؤه حديثا التي سيتم استخدامها فيما بعد أثناء التجارب.
    5. تغيير الحجم (أبعاد) من الذكور عن طريق تغيير قيم x، y، و z، إذا لزم الأمر، وانقر فوق تطبيق.
    6. تحرير نسيج للذكور عن طريق النقر فوق القوام في تحرير مربع الأدوات. انقر فوق سمة للأسماك (الجسم، الظهرية، والذيلية) لتغييره.
      ملاحظة: سوف يطفو على السطح مربع اختيار مادة مع جميع ملفات.png التي يمكن استخدامها كمواد. سوف تظهر القوام مع الأسماء الواردة في مجلد النماذج .
    7. انقر فوق على نسيج المعروضة في القائمة (يمين)، وسوف تظهر مباشرة واستبدال نسيج مسبق على الأسماك.
    8. عندما يتم إنشاء الذكر المطلوب، انقر فوق تطبيق قيد التكوين في تحرير أدوات، وانقر فوق حفظ الأسماك إلى القرص. حفظ الذكور الجديدة ك "Male_A.fish" في مجلد النماذج .
    9. بالإضافة إلى ذلك، احفظ المشهد بأكمله (ملف >> احفظ المشهد) بما في ذلك أن أحد الذكور في المجلد مشاهد . هنا، فإنه من المستحسن استخدام اسم "Male_A_alone.scene" (الشكل 3B).
    10. انقر فوق ملف >> مشهد تحميل لتحميل المشهد الافتراضي فارغة وكرر الخطوات 1.3.2 ل 1.3.9 لإنشاء العديد من الذكور الظاهري مختلفة حسب الحاجة وحفظ كل تم إنشاؤه حديثا الذكور تحت اسم فريد في مجلد النماذج و كملف.scene جديدة في المجلد المشهد .
  2. تصميم نموذج الظاهري الأسماك الإناث للعرض أثناء فترة المراقبة
    1. انقر فوق ملف >> مشهد تحميل تحميل المشهد الافتراضي. اتبع الخطوة 1.3.1 وانقر فوق ملف >> تحميل الأسماك نموذج تحميل القالب الافتراضي أنثى "default_PLF.x" من مجلد النماذج .
    2. انقر نقراً مزدوجاً فوق اليسار على الأنثى محملة تحديده وفتح مجموعة أدوات السمك. قم بتغيير الاسم إلى "أنثى". مقياس الأنثى إذا لزم الأمر كما هو موضح في الخطوة 1.3.5.
      ملاحظة: الاسم والقياس ينبغي أن تكون مطابقة لجميع الإناث لأغراض هذه التجربة.
    3. استبدال نسيج جسد الأنثى الافتراضية التي تم إنشاؤها مسبقاً "سبوت"-هيئة نسيج (مدرجة في المربع على اليمين) كما هو موضح في الخطوات 1.3.6 إلى 1.3.7.
    4. انقر فوق تطبيق قيد التكوين في تحرير أدوات، ثم حفظ الأسماك إلى القرص بالنقر فوق حفظ وقم بإنشاء ملف "Female_1S.fish" (S = بقعة).
    5. انقر فوق ملف >> مشهد تحميل تحميل المشهد الافتراضي. كرر الخطوات 1.4.1 إلى 1-4-4 لإنشاء واحد على الأقل (أو ما يصل إلى المطلوب) نموذج متماثلة ولكن الإناث دون جرابيد بقعة وتسميته "Female_1NS.fish" (NS = لا بقعة). حفظ كل الأسماك في مجلد نماذج .
      ملاحظة: لفترة المراقبة لتجربة لجنة التنسيق الإداري، يضطر المشاهد بما في ذلك ذكر واحد وأنثى واحدة يكون إنشاؤها وحفظها.
    6. انقر فوق ملف >> مشهد تحميل تحميل المشهد الافتراضي فارغ. انقر فوق ملف >> تحميل الأسماك نموذج لإدراج ظاهري ذكور "Male_A.fish" من مجلد النماذج . انقر فوق ملف >> تحميل الأسماك النموذجية مرة أخرى لإضافة الظاهري نموذج الأنثى "Female_1S.fish" إلى مكان الحادث. تغيير موضع كل الأسماك بتغيير بهم x-y-والاحداثيات z بحيث لا تتداخل أجسادهم.
      ملاحظة: حذف سمكة من المشهد بالنقر المزدوج فوق عليه والضغط على حذف على لوحة المفاتيح.
    7. حفظ الساحة بما في ذلك الذكور والإناث النموذج بواسطة النقر فوق ملف >> "إنقاذ الساحة" ك "Male_A_with_Female_1S.scene" (الشكل 3).
    8. كرر الخطوات من 1.4.6 إلى 1.4.7 لإنشاء ثلاثة مشاهد إضافية ل: (1) Male_A مع Female_1NS (انظر الشكل 3D) و (2) Male_B مع Female_1S (3) Male_B مع Female_1NS.

2-الرسوم المتحركة من الأسماك الظاهرية المحفزات

ملاحظة: كل نوع من الرسوم المتحركة اللازمة للتجربة يحتاج إلى إعداد باستخدام مرة واحدة فقط مشهد واحد الذكور المثالية والمراقبة المثالي واحد المشهد (الذكور والإناث المتحركة معا). أثناء عملية موحية، مسار سباحة لكل الأسماك يتم إنشاء التي يمكن ردها في وقت لاحق بأي سمكة، ما دام الاسم غير متطابقة (راجع الخطوة رقم 1.3.4).

  1. الرسوم المتحركة الذكور الظاهري للعرض أثناء اختبارات الاختيار ماتي
    ملاحظة: إعداد اثنين من الرسوم المتحركة من الذكور الظاهري: (1) مسار سباحة لمدة دقيقة 7.5، و (2) مسار سباحة لمدة 5 دقائق.
    1. قم بتوصيل وحدة تحكم الألعاب (مثل سوني تلعب المحطة 3) بمنفذ USB للكمبيوتر التشغيل.
    2. افتح فيشسيم ثم انقر فوق ملف >> مشهد تحميل تحميل مسرحا لأحد الذكور من المجلد مشاهد، مثل "Male_A_alone.scene". بدء تشغيل فيشستيرينج بالنقر على أيقونة فيشستيرينج .
    3. تكوين إعدادات وحدة تحكم في إطار منفصل.
      ملاحظة: تشغيل فيشسيم و فيشستيرينج في أن واحد، والأسماك يمكن أما أن يقاد في عرض الوضع، كما هو مبين من خلال التجارب، أو في وضع التحرير بالضغط على F1.
    4. لتحريك الأسماك (الذكور)، قم بتحديده من القائمة المنسدلة للفريق التوجيهي . نموذج أسماء هنا تتطابق مع الاسم الذي يطلق في تحرير أدوات (راجع الخطوة رقم 1.3.4).
    5. انقر فوق بدء تشغيل وضع واستخدام وحدة تحكم لوضع السمك في أي موضع البداية في خزان الظاهري. انقر فوق إيقاف وضع.
    6. البدء بتسجيل مسار حوض السمك بواسطة النقر فوق بدء التسجيل. استخدم وحدة تحكم لنقل الأسماك حول موقع الحادث.
      ملاحظة: تعطي مدة التسجيل في الزاوية اليمنى السفلي من الفريق التوجيهي.
    7. انقر فوق إيقاف التسجيل. انقر فوق حفظ لحفظ مسار السباحة ملف.bag ("سجل") في محرك الأقراص (مثلاً على سطح المكتب). اختر اسم ملف لتمثل مدة السجل، مثل "7_30_min_male_alone.bag".
      ملاحظة: متى يتم إيقاف التسجيل، من غير الممكن لتحرير إجمالي المدة مرة أخرى.
    8. تحرير التسجيل لإضافة حركة زعنفة ظهرية للذكور تقليد سلوك المغازلة الذكور خلال الاختبارات اختيار رفيقه. حدد زعنفة ظهرية من القائمة المنسدلة في ميزة تحرير (يمكن تحريرها ميزة واحدة فقط في كل مرة).
    9. وسوف يكون ردها حدد بداية التحرير ومسار السباحة كاملة. اضغط على زر L1 على وحدة تحكم لرفع زعنفة ظهرية عند نقطة معينة في الوقت. انقر فوق حفظ لحفظ نسخة محررة من مسار السباحة كجديد . حقيبة الملفات.
    10. كرر الخطوتين 2.1.8 و 2.1.9 ولكن حدد جونوبوديوم لإضافة الحركة. حفظ النسخة النهائية لاستخدامها لاحقاً في فيشبلايير. إغلاق فيشستيرينج.
      ملاحظة: من المستحسن حفظ ملفات حقيبة لكل خطوة التحرير تحت اسم فريد. بهذا، من الممكن دائماً العودة إلى إصدار سابق من الحركة إذا كان شيء في عملية التحرير خطأ.
  2. حركة الإناث الذكور ونموذج الظاهري للعرض أثناء فترة المراقبة
    ملاحظة: إعداد الرسوم المتحركة واحد مع ظاهري الذكور والإناث نموذج الظاهري في فترة الخطوبة، وهكذا جنسياً تتفاعل مع بعضها البعض، مع مجموع مدة 10 دقائق.
    1. فتح فيشسيم. اضغط F1 للدخول في وضع التحرير، ثم انقر فوق ملف >> مشهد تحميل تحميل مشهد مع الذكور والإناث، على سبيل المثال، "Male_A_with_Female_1S.scene". بدء تشغيل فيشستيرينج.
    2. تحديد الذكر والأنثى بالتناوب إلى مكان لهم (بواسطة النقر فوق بدء/إيقاف وضع) في خزان الظاهري.
    3. للتسجيل، حدد الأسماك الإناث أولاً من القائمة المنسدلة للفريق التوجيهي وإنشاء مسار سباحة مع مدة 10 دقائق بعد الخطوات 2.1.5 إلى 2.1.6.
      ملاحظة: يمكن تسجيل مسار حوض السمك واحد فقط في كل مرة. بعد موحية الأسماك الأولى، يمكن أن يكون المسار حوض السمك الثانية شملت استخدام الدالة تحرير بينما الأسماك يقاد سابقا سوف يكون ردها جنبا إلى جنب مع طيلة مدة الحركة.
    4. انقر فوق إيقاف التسجيل و حفظ مسار السباحة في محرك الأقراص، مثلاً، أنها "10_00_min_male_with_female.bag". ثم تباعا تحرير مسار السباحة للذكور وحركة زعنفة ظهرية وحركة جونوبوديوم كما هو موضح في الخطوات 2.1.8 إلى 2.1.10. حفظ النسخة النهائية لاستخدامها لاحقاً في فيشبلايير.

3-إعداد قوائم تشغيل الرسوم المتحركة لتجربة لجنة التنسيق الإداري

ملاحظة: استخدام فيشبلايير لعرض الرسوم المتحركة على شاشتين العيش الإناث المحورية. ترتيب قائمة التشغيل لكل جهاز بشكل منفصل لمحاكاة إجراء تجربة لجنة التنسيق الإداري (الشكل 1). الأداة يتكون من إطار رئيسي عرض قائمة التشغيل سجل لكل جهاز (الشكل 4) ونافذة الرسوم متحركة منفصلة لكل جهاز عرض.

  1. الوظيفة العامة وترتيب المشاهد والسجلات
    1. قم بإغلاق كافة الإطارات وفتح فيشبلايير عن طريق النقر فوق الرمز المطابق. تكوين الإعداد للاستخدام مع جهازي عرض للعرض التقديمي (اليسار واليمين)، ثم انقر فوق بدء.
      ملاحظة: المشهد الافتراضية التي تم إنشاؤها في الخطوة 1.2.4 (المحفوظة في scenes/default_scene.scene) سوف دائماً تحميلها وعرضها على حد سواء شاشات كمسرح الانطلاق وخلال أمر الإيقاف مؤقت.
    2. إضافة إدخالات إلى قائمة التشغيل لكل جهاز على حدة. انقر فوق إضافة مشهد تحميل لإضافة مسرح مثلاً بالذكور، من المجلد مشاهد في الدليل فيشسيم . انقر فوق إضافة تشغيل السجل لإضافة سجل من محرك الأقراص، مثلاً، سجل 7.5 دقيقة للذكور وحدها.
      ملاحظة: ثم سيرتبط المشهد والسجل التالي من البرنامج وسوف تكون متحركة الذكور الظاهري صورت في مكان الحادث كما هو معرف في السجل المطابق.
    3. انقر فوق إضافة وقفه لإضافة أمر إيقاف مؤقت لمدة محددة (دقيقة/ثانية) عرض المشهد الافتراضي دون الأسماك كفاصل للأسماك معالجة بين السجلات.
      ملاحظة: مدة الإيقاف المؤقت ينبغي أن يتوقف عموما على الوقت اللازم لمناولة الأسماك. انقر فوق إدخال، ثم اسحب لتغيير ترتيبه في القائمة. يتم تمييز الإدخالات المحددة باللون الأحمر. حذف إدخال من قائمة التشغيل بتحديد الإدخال النقر فوق حذف التحديد.
    4. انقر فوق تشغيل/إيقاف تشغيل وإيقاف العرض تقديمي. إيقاف سوف تنتهي دائماً بقائمة التشغيل الكامل، مثلاً، هناك أية طريقة للتوقف في منتصف الطريق لقائمة التشغيل مرة واحدة قيد التشغيل.
      ملاحظة: سوف العازفين دائماً تبدأ من أول دخول وتشغيل من أعلى إلى أسفل. ولذلك، بالترتيب الصحيح لكافة الإدخالات يجب أن يتم تعيين قبل التجربة ولا يمكن تغييره بعد ذلك دون إيقاف تشغيل العرض التقديمي. جهاز ضبط وقت في الجزء السفلي من الإطار يظهر المدة والوقت الفعلي لقائمة التشغيل الحالية.
  2. ترتيب قائمة التشغيل للعلاجات اثنين والتحكم في تجربة لجنة التنسيق الإداري
    ملاحظة: من حيث الترتيب، ودخول تجربة لجنة التنسيق الإداري ينقسم إلى جزأين: (1) اختبار المساعد الأول للاختيار، وفترة المراقبة (2) متبوعاً بالاختبار الثاني ماتي-اختيار. ولذلك، لكل معاملة، والمراقبة، يضطر العازفين ترتيب أوامر مختلفة اثنين.
    1. عند تشغيل هذه التجربة، أولاً، إعداد قائمة تشغيل لاختبار المساعد الأول للاختيار.
    2. ثانيا، عملية التجربة قيد التشغيل، قم بتغيير ترتيب قائمة التشغيل لفترة المراقبة اللاحقة والاختبار ماتي--الخيار الثاني الذي ذكر الظاهري كان يفضلها الأنثى المحورية في اختبار المساعد الأول للاختيار.
  3. ترتيب قائمة التشغيل المحددة لمعالجة "بقعة"
    1. لاختبار الخيار الأول ورفيقه في 1 معاملة، ترتيب قائمة التشغيل بالضبط كما هو مبين في الشكل
    2. بعد الاختبار المساعد الأول للاختيار، وتأخذ استراحة لحساب ذكر الظاهري الذي كان المفضل (راجع الخطوة 5.9 أدناه). ثم إعادة ترتيب قوائم التشغيل لفترة المراقبة، التي يتم توفيرها الإعلام إلى الإناث المحورية بإظهار الذكور غير المفضلة السابقة جنبا إلى جنب مع نموذج الأنثى.
    3. ترتيب قائمة التشغيل للمراقبة والاختبار ماتي--الخيار الثاني التالية وفقا الرقم 5.
    4. لفترة المراقبة، ربط السجل 10-مين (الإناث الذكور ونموذج معا) بمشهد عرض مسبق يفضل الذكور وحدها.
      ملاحظة: في هذه الحالة، سيتم عرض مسار السباحة للذكور فقط، وأنها مفقودة في المشهد، الأنثى نموذج الظاهري سوف يكون غائبا.
    5. للتشغيل وتتميز الذكور غير المفضلة، ربط السجل 10-دقيقة إلى مكان الحادث بما في ذلك الذكور غير المفضلة السابقة جنبا إلى جنب مع نموذج الأنثى. اختيار المشاهد بما فيها من الإناث نموذجي مع بقعة جرابيد (S) لهذا العلاج.
      ملاحظة: على عكس 3.3.2، هنا، سوف يكون ردها سجل مطابق لكن الآن مرئياً الأنثى النموذجية.

figure-protocol-19274
الشكل 4: لقطة شاشة عرض قوائم التشغيل فيشبلايير المراقبين اليمنى واليسرى في الجزء الأول (هاء أولاً، ماتي الأولى-الاختيار الاختبار) التجربة MCC. يتم ترتيب إدخالات التشغيل حسب الحاجة لاختبار الخيار الأول ورفيقه في 1 معاملة. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

figure-protocol-19816
الرقم 5: لقطة شاشة عرض قوائم التشغيل فيشبلايير المراقبين اليمنى واليسرى في الجزء الثاني (فترة الملاحظة والاختبار ماتي--الخيار الثاني) التجربة MCC. يتم ترتيب إدخالات التشغيل حسب الحاجة لفترة الملاحظة والاختبار ماتي--الخيار الثاني في 1 معاملة. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

  1. ترتيب قائمة التشغيل المحددة لعلاج "لا بقعة"
    1. لمعاملة 2، ترتيب قوائم التشغيل كما هو موضح للعلاج 1 (أرقام 4 و 5)، ولكن بدلاً من ذلك استخدام الساحة بما في ذلك ذكر نموذج ظاهري دون بقعة جرابيد (NS) أثناء المراقبة.
  2. ترتيب قائمة التشغيل المحددة لعنصر التحكم لاتساق الاختيار
    ملاحظة: في عنصر التحكم لاختيار الاتساق، متماثلة إدخالات التشغيل لاختبار اختيار رفيقه إلى علاجات 1 و 2 (الشكل 4). أثناء فترة المراقبة، ومع ذلك، لم تقدم أي معلومات عامة للإناث المحورية و، ومن ثم فلا أنثى النموذجي مرئياً.
    1. ترتيب قوائم التشغيل كما هو موضح في الشكل 5 ولكن الجمع بين الكواليس لكل أنثى وحدها جنبا إلى جنب مع سجل 10-دقيقة.
      ملاحظة: في هذه الحالة، سيتم عرض مسار السباحة فقط من الذكور الأسماك، وأنها مفقودة في المشهد، الأنثى النموذجية ستكون غائبة في كلا الجانبين.

4-الإعداد تجريبي

  1. شاشات الكمبيوتر مكان اثنين كل منهما على طرفي نقيض من خزان للاختبار. ضبط شاشات لتغطية معظم الجدران الزجاجية للدبابة الاختبار وأن يكون 1.5 سم مسافة بين الشاشات وجدران خزان. توفير الإضاءة للدبابة من أعلى.
  2. تغطية الجزء السفلي للدبابات بطبقة رقيقة من الحصى وملئه بالماء المناسب للأسماك الحية إلى ارتفاع الشاشات. علامة منطقة اختيار مع خط عمودي على عمق 20 سم من كل طرف على السطح الخارجي للخزان. يكون اسطوانة زجاج اكريليك وتوفر اثنين في متناول اليد.
  3. قم بتوصيل أجهزة العرض للإمداد بالطاقة وتشغيل الكمبيوتر، ووضع مسافة متر واحد على الأقل بعيداً عن اختبار الدبابة، مثلاً، على طاولة صغيرة (الشكل 6).

figure-protocol-22063
رقم 6: الإعداد التجريبي لتجربة لجنة التنسيق الإداري مع الرسوم المتحركة الكمبيوتر. يتصل الكمبيوتر تشغيل جهازي عرض العرض التقديمي (مراقب 1 و 2) الذي إعادة الرسوم المتحركة لتعيش الإناث التنسيق داخل الصهريج الاختبار. للتوضيح، هي الزاوية شاشات الكريستال السائل على حد سواء لإظهار مشهد الرسوم متحركة. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-

5-تشغيل تجربة لجنة التنسيق الإداري

ملاحظة: اتبع الإجراء أدناه لإجراء محاكمة واحدة للعلاج 1 أو 2 العلاج أو التحكم تجربة لجنة التنسيق الإداري باستخدام أنثى المحورية حية واحدة تجريبية (انظر الشكل 1).

  1. فتح فيشبلايير على الكمبيوتر التشغيل وترتيب قوائم التشغيل اختبار المساعد الأول للاختيار مثل، ووصف للعلاج 1 (الشكل 4). الاختيار التي تقوم بتشغيل أجهزة العرض للعرض التقديمي، والتي تظهر الساحة الافتراضية فارغة.
  2. مكان أنثى المحورية يعيش داخل الصهريج الاختبار. والسماح لها بحرية السباحة ويتأقلم بالدبابات، وعرض الدبابات فارغة على كلا المراقبين لمدة 20 دقيقة.
  3. بعد تأقلم، ضع الأنثى المحورية في اسطوانة اكريليك واضحة في منتصف الدبابة الاختبار ضمان مسافة متساوية لكل المراقبين وتشغيل قوائم التشغيل على حد سواء شاشات في نفس الوقت عن طريق النقر فوق اللعب، بدءاً من المساعد الأول-الخيار اختبار.
    ملاحظة: مسموح بالأنثى المحورية لمشاهدة كلا من الذكور التحفيز الظاهري من داخل الاسطوانة لحوالي 2.5 دقيقة.
  4. قبل أن يصل جهاز ضبط الوقت إلى 02:30 دقيقة، انتقل ببطء إلى خزان التجريبية والإفراج عن الأنثى المحورية من الاسطوانة برفعه بلطف مباشرة من خارج الماء، مثلاً، في 02:15 دقيقة.
    ملاحظة: هنا، يتوقف التوقيت الدقيق على المسافة من الكمبيوتر التشغيل إلى اختبار الدبابة، وينبغي أن تحدد أثناء تشغيل اختبار مسبق. من الأهمية بمكان التصرف ببطء ولطف لتجنب التشديد على الأسماك. إذ قد تتصرف الأسماك سريعة جداً، ينصح بالفعل ساعة توقيت واحد في متناول اليد أثناء تحرير الأنثى البدء مباشرة في قياس الوقت رابطة (راجع الخطوة رقم 6، 1).
  5. العودة إلى جهاز الكمبيوتر التشغيل. مراقبة الأنثى المحورية وقد توفر اثنين في متناول اليد قياس الوقت الرابطة مع كل أنثى التحفيز الظاهري (راجع الخطوة رقم 6، 1).
    ملاحظة: الأنثى المحورية مسموح للسباحة بحرية واختيار بين كلا الذكور لمدة 5 دقائق.
  6. التوقف عن قياس الوقت الرابطة عندما يصل جهاز ضبط الوقت إلى 07:30 دقيقة. ثم سيتم تشغيل دخول وقفه دقيقة 1.5 استخدام الإيقاف المؤقت للتعامل مع الوقت، مرة أخرى، ضع الأنثى التنسيق داخل الاسطوانة وقم بتدوين الوقت لكل أنثى الظاهري في ورقة بيانات.
    ملاحظة: بعد الإيقاف المؤقت، الثانية 07:30 دقيقة الدخول سوف تبدأ والأنثى التنسيق يمكن مشاهدة كلا الذكور لمدة دقيقة 02:30. الآن يتم تبديل موقف الذكور بين اليمين واليسار للتحكم لتحيز جانبية المحتملة في تركيز الإناث (راجع الخطوة 6.3).
  7. قبل أن يصل جهاز ضبط الوقت إلى 11:30 دقيقة، الإفراج عن الأنثى المحورية من الاسطوانة. تدبير الوقت رابطة للمقبل مدة 5 دقائق.
  8. التوقف عن قياس الوقت الرابطة عندما يصل جهاز ضبط الوقت إلى 16:30 دقيقة. سيتم تشغيل الإدخال وقفه للحد الأدنى 1 استخدام هذه المرة التعامل مع وضع الأنثى التنسيق داخل الاسطوانة.
  9. قم بتدوين مرات رابطة لقياس الثانية. لكل أنثى، وخلاصة مرات رابطة كلا نصفي الاختبار المساعد الأول للاختيار (قبل وبعد أن تحولت الذكور). حساب عما إذا كانت الأنثى المحورية بتحيز جانب وكان المفضل الذي ذكر من قبل الإناث التنسيق (انظر الخطوات 6.1 إلى 6.3).
    ملاحظة: لا توجد مشكلة إذا انتهى الإيقاف المؤقت قبل أن يتم الحساب، نظراً للمتابعة إلى الخطوة التالية احتياجات التشغيل للوصول إلى نهايتها، ووقف.
  10. إعادة ترتيب قوائم التشغيل (هل عدم إغلاق فيشبلايير!) كما هو موضح في الشكل 5 (تبعاً للمعاملة الحالية) حيث أنه يفضل المسبقة سوف المتحركة الذكور وحدها خلال فترة الملاحظة والسابقة الذكر غير المفضلة وسوف تكون متحركة جنبا إلى جنب مع نموذج الظاهري أنثى.
    ملاحظة: التغييرات التي تم إجراؤها على قوائم التشغيل غير مرئية للأنثى المحورية.
  11. انقر فوق لعب الاستمرار في الجزء الثاني من التجربة والإدخالات سوف يكون ردها من الأعلى إلى الأسفل بدءاً من الفترة 10-دقيقة الملاحظة.
    ملاحظة: أثناء فترة المراقبة، والأنثى التنسيق يبقى داخل الاسطوانة لكن قادراً على مشاهدة كل العروض.
  12. وبعد فترة الملاحظة، يبدأ وقفه من 0.5 دقيقة. قبل أن يصل جهاز ضبط الوقت إلى 10:30 دقيقة، الإفراج عن الأنثى المحورية من الاسطوانة وبدء الاختبار الثاني للاختيار ورفيقه بسجل 5-دقيقة لكل أنثى. قياس مرات رابطة للمقبل مدة 5 دقائق.
  13. التوقف عن قياس الوقت الرابطة عندما يصل جهاز ضبط الوقت إلى 15:30 دقيقة. دخول وقفه ثم تشغيل ل 1.5 دقيقة مكان الأنثى التنسيق داخل الاسطوانة وقم بتدوين الوقت يقاس لكل أنثى افتراضية.
    ملاحظة: بعد الإيقاف المؤقت، التالي 07:30 سيبدأ دخول دقيقة والأنثى التنسيق يمكن مشاهدة كلا الذكور (تم تبديل موقفها مرة أخرى بين اليمين واليسار) لمدة دقيقة 2.5.
  14. قبل أن يصل جهاز ضبط الوقت إلى 19:30 دقيقة، الإفراج عن الأنثى المحورية من الاسطوانة وقياس الوقت رابطة للماضي مدة 5 دقائق.
  15. التوقف عن قياس الوقت الرابطة عندما يصل جهاز ضبط الوقت إلى 24:30 دقيقة و إنهاء التجربة. قم بتدوين مرات رابطة لكلا الذكور الظاهري والمضي قدما في التحليل.

6-بيانات القياس

  1. قياس الوقت الرابطة خلال الأول والجزء الثاني (قبل وبعد المحفزات يتم تبديل) لكل اختبار اختيار رفيقه، عندما يسمح للأنثى المحورية الاختيار بين الذكور اثنين.
    ملاحظة: بدء قياس عند الأنثى يعبر خط حصر منطقة الاختيار مع رأسها وأوبيركولوم. التوقف عن قياس عند رأسها و operculum خارج منطقة الاختيار.
  2. اختصار الوقت رابطة قياس لكل أنثى في الجزء الأول والثاني من اختبار ماتي--اختيار وتحديد الذكور الذي كان المفضل.
    ملاحظة: ذكر المفضل يتحدد كواحد الأنثى المحورية قضى أكثر من 50% من إجمالي الوقت أمضت في كلا المنطقتين الاختيار داخل اختبار اختيار رفيقه. للتحليل، رابطة الوقت غالباً ما تترجم إلى درجات التفضيل (ماتي-اختيار القيمة النسبية)، الذي يعرف الوقت الذي تستغرقه أنثى تنسيق مع الذكور مقسوماً الوقت أمضت مع كلا الذكور في مناطق رفيقه للاختيار.
  3. حساب ما إذا كانت الإناث التنسيق تظهر تحيزاً جانب أثناء اختبار المساعد الأول للاختيار واستبعاد الإناث متحيزة من التحليل النهائي.
    ملاحظة: وتعتبر الإناث التنسيق تكون متحيزة للجانب إذا قضوا أكثر من 90% من إجمالي الوقت (كلا نصفي الاختبار المساعد الأول للاختيار) في نفس المنطقة خيار، حتى بعد أن تم تبديل موقف الذكور. وتعتبر اختيارها للذكور ثم الجانب متحيزة ويتم إنهاء المحاكمة.
  4. قياس طول كل أنثى التنسيق القياسي (SL).
    ملاحظة: لمنع الأسماك من يجري التشديد خلال التجارب، والقياسات تؤخذ دائماً بعد انتهاء محاكمة التجريبية.

النتائج

وبعد على البروتوكول، كنا فيشسيم لإنشاء الرسوم المتحركة الكمبيوتر الظاهري سيلفين مولى الذكور والإناث. كذلك استخدمنا في toolchain لعرض الرسوم المتحركة تعيش الإناث المحورية في حالة اختيار ثنائي إلى القيام بتجربة لجنة التنسيق الإداري وفقا للإجراء التجريبي المبين في

Discussion

ووصفت الفور جرابيد سيلفين مولى الإناث سابقا لتكون بمثابة وسيلة للإعلان الخصوبة نحو الذكور كونسبيسيفيك59،60. ما إذا كانت بقعة جرابيد قد توفر أيضا معلومات للإناث كونسبيسيفيك في السياق اختيار رفيقه قد لم يتم اختبارها حتى الآن. في دراسة الحالة الراهنة، ونحن الت...

Disclosures

الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.

Acknowledgements

وأيد هذا العمل DFG الأوقيانوغرافية ألماني (أي 1531/12-1 كيلوواط وسان جرمان) وكو 689/11-1 KDK وكم وجمه. ونحن نتقدم بخالص الشكر البرنامج "الضاد صعود" ألمانيا لتقديم وتنظيم داخلي بحوث جامعية بين سان جرمان و DB (التمويل-معرف: 57346313). ونحن ممتنون ميتكس للتمويل DB مع "جائزة" غلوبال ارتفاع البحوث التدريب الداخلي (FR21213). نرجو التكرم أشكر بيرارد آرون على دعوتنا إلى إدخال فيشسيم للقراء جوف واليشا ديسوزا، فضلا عن ثلاثة مراجعين المجهول لتعليقاتها القيمة في إصدار سابق من المخطوطة.

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
Hardware
2x 19" Belinea LCD displaysBelinea GmbH, GermanyModel 1970 S1-P1280 x 1024 pixels resolution
1x 24" Fujitsu LCD displayFujitsu Technology Solutions GmbH, GermanyModel B24-8 TS Pro1920 x 1080 pixels resolution
ComputerIntel Core 2 Quad CPU Q9400 @ 2.66GHz x 4, GeForce GTX 750 Ti/PCIe/SSE2, 7.8 GiB memory, 64-bit, 1TB; keyboard and mouse
SONY Playstation 3 Wireless ControllerSony Computer Entertainment Inc., JapanModel No. CECHZC2EUSB-cable for connection to computer
Glass aquarium100 cm x 40 cm x 40 cm (L x H x W)
Plexiglass cylindercustom-made49.5 cm height, 0.5 cm thickness, 12 cm diameter; eight small holes (approx. 5 mm diameter) drillt close to the end of the cylinder lower the amount of water disturbance while releasing the fish
Gravel
2x OSRAM L58W/965OSRAM GmbH, GermanyIllumination of the experimental setup
2x Stopwatches
NameCompanyCatalog NumberComments
Software
ubuntu 16.04 LTSComputer operating system; Download from: https://www.ubuntu.com/
FishSim Animation Toolchain v.0.9Software download and user manual (PDF) from: https://bitbucket.org/EZLS/fish_animation_toolchain
GIMP Gnu Image Manipulation Program (version 2.8.22)Download from: https://www.gimp.org/

References

  1. Witte, K., Gierszewski, S., Chouinard-Thuly, L. Virtual is the new reality. Current Zoology. 63 (1), 1-4 (2017).
  2. Chouinard-Thuly, L., et al. Technical and conceptual considerations for using animated stimuli in studies of animal behavior. Current Zoology. 63 (1), 5-19 (2017).
  3. Basolo, A. L. Female preference for male sword length in the green swordtail, Xiphophorus helleri (Pisces: Poeciliidae). Animal Behaviour. 40 (2), 332-338 (1990).
  4. Rosenthal, G. G., Evans, C. S. Female preference for swords in Xiphophorus helleri reflects a bias for large apparent size. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 95 (8), 4431-4436 (1998).
  5. Schlupp, I., Waschulewski, M., Ryan, M. J. Female preferences for naturally-occurring novel male traits. Behaviour. 136 (4), 519-527 (1999).
  6. Campbell, M. W., Carter, J. D., Proctor, D., Eisenberg, M. L., de Waal, F. B. M. Computer animations stimulate contagious yawning in chimpanzees. Proceedings of the Royal Society B: Biological Sciences. 276 (1676), 4255-4259 (2009).
  7. Woo, K. L., Rieucau, G. The importance of syntax in a dynamic visual signal: recognition of jacky dragon displays depends upon sequence. Acta Ethologica. 18 (3), 255-263 (2015).
  8. Balzarini, V., Taborsky, M., Villa, F., Frommen, J. G. Computer animations of colour markings reveal the function of visual threat signals in Neolamprologus pulcher. Current Zoology. 63 (1), 45-54 (2017).
  9. Tedore, C., Johnsen, S. Visual mutual assessment of size in male Lyssomanes viridis jumping spider contests. Behavioral Ecology. 26 (2), 510-518 (2015).
  10. Watanabe, S., Troje, N. F. Towards a “virtual pigeon”: a new technique for investigating avian social perception. Animal Cognition. 9 (4), 271-279 (2006).
  11. Culumber, Z. W., Rosenthal, G. G. Mating preferences do not maintain the tailspot polymorphism in the platyfish Xiphophorus variatus. Behavioral Ecology. 24 (6), 1286-1291 (2013).
  12. Gierszewski, S., Müller, K., Smielik, I., Hütwohl, J. -. M., Kuhnert, K. -. D., Witte, K. The virtual lover: variable and easily guided 3D fish animations as an innovative tool in mate-choice experiments with sailfin mollies - II. Validation. Current Zoology. 63 (1), 65-74 (2017).
  13. Thurley, K., Ayaz, A. Virtual reality systems for rodents. Current Zoology. 63 (1), 109-119 (2017).
  14. Stowers, J. R., et al. Virtual reality for freely moving animals. Nature. 14 (10), 995 (2017).
  15. Powell, D. L., Rosenthal, G. G. What artifice can and cannot tell us about animal behavior. Current Zoology. 63 (1), 21-26 (2017).
  16. Müller, K., Smielik, I., Hütwohl, J. -. M., Gierszewski, S., Witte, K., Kuhnert, K. -. D. The virtual lover: variable and easily guided 3D fish animations as an innovative tool in mate-choice experiments with sailfin mollies-I. Design and implementation. Current Zoology. 63 (1), 55-64 (2017).
  17. Veen, T., et al. anyFish: an open- source software to generate animated fish models for behavioural studies. Evolutionary Ecology Research. 15 (3), 361-375 (2013).
  18. Ingley, S. J., et al. anyFish 2. 0: An open-source software platform to generate and share animated fish models to study behavior. SoftwareX. 3, 13-21 (2015).
  19. Bakker, T. C. M., Pomiankowski, A. The genetic basis of female mate preferences. The Journal of Evolutionary Biology. 8 (2), 129-171 (1995).
  20. Andersson, M., Simmons, L. W. Sexual selection and mate choice. Trends in Ecology & Evolution. 21 (6), 296-302 (2006).
  21. Danchin, &. #. 2. 0. 1. ;., Giraldeau, L. -. A., Valone, T. J., Wagner, R. H. Public information: From nosy neighbors to cultural evolution. Science. 305 (5683), 487-491 (2004).
  22. Pruett-Jones, S. Independent Versus Nonindependent Mate Choice: Do Females Copy Each Other?. The American Naturalist. 140 (6), 1000-1009 (1992).
  23. Witte, K., Kniel, N., Kureck, I. M. Mate-choice copying: Status quo and where to go. Current Zoology. 61 (6), 1073-1081 (2015).
  24. Witte, K., Nöbel, S., Brown, C., Laland, K. N., Krause, J. Learning and Mate Choice. Fish Cognition and Behavior. , 81-107 (2011).
  25. Waynforth, D. Mate Choice Copying in Humans. Human nature. 18 (3), 264-271 (2007).
  26. Galef, B. G., White, D. J. Evidence of social effects on mate choice in vertebrates. Behavioural Processes. 51 (1-3), 167-175 (2000).
  27. Kniel, N., Dürler, C., Hecht, I., Heinbach, V., Zimmermann, L., Witte, K. Novel mate preference through mate-choice copying in zebra finches: sexes differ. Behavioral Ecology. 26 (2), 647-655 (2015).
  28. Kniel, N., Schmitz, J., Witte, K. Quality of public information matters in mate-choice copying in female zebra finches. Frontiers in Zoology. 12, 26 (2015).
  29. Kniel, N., Müller, K., Witte, K. The role of the model in mate-choice copying in female zebra finches. Ethology. 123 (6-7), 412-418 (2017).
  30. Mery, F., et al. Public Versus Personal Information for Mate Copying in an Invertebrate. Current Biology. 19 (9), 730-734 (2009).
  31. Dagaeff, A. -. C., Pocheville, A., Nöbel, S., Loyau, A., Isabel, G., Danchin, E. Drosophila mate copying correlates with atmospheric pressure in a speed learning situation. Animal Behaviour. 121, 163-174 (2016).
  32. Monier, M., Nöbel, S., Isabel, G., Danchin, E. Effects of a sex ratio gradient on female mate-copying and choosiness in Drosophila melanogaster. Current Zoology. 64 (2), 251-258 (2018).
  33. Dugatkin, L. A., Godin, J. -. G. J. Reversal of female mate choice by copying in the guppy (Poecilia reticulata). Proceedings of the Royal Society B: Biological Sciences. 249, 179-184 (1992).
  34. Widemo, M. S. Male but not female pipefish copy mate choice. Behavioral Ecology. 17 (2), 255-259 (2006).
  35. Heubel, K. U., Hornhardt, K., Ollmann, T., Parzefall, J., Ryan, M. J., Schlupp, I. Geographic variation in female mate-copying in the species complex of a unisexual fish, Poecilia formosa. Behaviour. 145 (8), 1041-1064 (2008).
  36. Bierbach, D., et al. Male fish use prior knowledge about rivals to adjust their mate choice. Biology Letters. 7 (3), 349-351 (2011).
  37. Munger, L., Cruz, A., Applebaum, S. Mate choice copying in female humpback limia (Limia nigrofasciata, family Poeciliidae). Ethology. 110 (7), 563-573 (2004).
  38. Frommen, J. G., Rahn, A. K., Schroth, S. H., Waltschyk, N., Bakker, T. C. M. Mate-choice copying when both sexes face high costs of reproduction. Evol Ecol. 23 (3), 435-446 (2009).
  39. Witte, K., Ryan, M. J. Mate choice copying in the sailfin molly, Poecilia latipinna, in the wild. Animal Behaviour. 63 (5), 943-949 (2002).
  40. Goulet, D., Goulet, T. L. Nonindependent mating in a coral reef damselfish: evidence of mate choice copying in the wild. Behavioral Ecology. 17 (6), 998-1003 (2006).
  41. Alonzo, S. H. Female mate choice copying affects sexual selection in wild populations of the ocellated wrasse. Animal Behaviour. 75 (5), 1715-1723 (2008).
  42. Godin, J. -. G. J., Hair, K. P. E. Mate-choice copying in free-ranging Trinidadian guppies (Poecilia reticulata). Behaviour. 146, 1443-1461 (2009).
  43. Nordell, S. E., Valone, T. J. Mate choice copying as public information. Ecology Letters. 1 (2), 74-76 (1998).
  44. Vukomanovic, J., Rodd, F. H. Size-Dependent Female Mate Copying in the Guppy (Poecilia reticulata): Large Females are Role Models but Small Ones are not. Ethology. 113 (6), 579-586 (2007).
  45. Dugatkin, L. A., Godin, J. -. G. J. Female mate copying in the guppy (Poecilia reticulata): age-dependent effects. Behavioral Ecology. 4, 289-292 (1993).
  46. Amlacher, J., Dugatkin, L. A. Preference for older over younger models during mate-choice copying in young guppies. Ethology Ecology & Evolution. 17 (2), 161-169 (2005).
  47. Hill, S. E., Ryan, M. J. The role of model female quality in the mate choice copying behaviour of sailfin mollies. Biology Letters. 2 (2), 203-205 (2006).
  48. Gierszewski, S., Keil, M., Witte, K. Mate-choice copying in sailfin molly females: public information use from long-distance interactions. Behavioral Ecology and Sociobiology. 72 (2), 26 (2018).
  49. Schlupp, I., Marler, C., Ryan, M. J. Benefit to male sailfin mollies of mating with heterospecific females. Science. 263 (5145), 373-374 (1994).
  50. Schlupp, I., Ryan, M. J. Male sailfin mollies (Poecilia latipinna) copy the mate choice of other males. Behavioral Ecology. 8 (1), 104-107 (1997).
  51. Witte, K., Ryan, M. J. Male body length influences mate-choice copying in the sailfin molly Poecilia latipinna. Behavioral Ecology. 9 (5), 534-539 (1998).
  52. Witte, K., Ueding, K. Sailfin molly females (Poecilia latipinna) copy the rejection of a male. Behavioral Ecology. 14 (3), 389-395 (2003).
  53. Verzijden, M. N., ten Cate, C., Servedio, M. R., Kozak, G. M., Boughman, J. W., Svensson, E. I. The impact of learning on sexual selection and speciation. Trends in Ecology & Evolution. 27 (9), 511-519 (2012).
  54. Varela, S. A. M., Matos, M., Schlupp, I. The role of mate-choice copying in speciation and hybridization. Biological Reviews. 93 (2), 1304-1322 (2018).
  55. Nöbel, S., Danchin, E., Isabel, G. Mate-copying for a costly variant in Drosophila melanogaster females. Behavioral Ecology. , ary095 (2018).
  56. Norazmi-Lokman, N. H., Purser, G. J., Patil, J. G. Gravid Spot Predicts Developmental Progress and Reproductive Output in a Livebearing Fish, Gambusia holbrooki. PLoS One. 11 (1), e0147711 (2016).
  57. Constantz, G. D., Meffe, G. K., Snelson, F. F. Reproductive biology of poeciliid fishes. Ecology and Evolution of livebearing fishes (Poeciliidae). , 33-50 (1989).
  58. Peden, A. E. Variation in Anal Spot Expression of Gambusiin Females and Its Effect on Male Courtship. Copeia. 1973 (2), 250-263 (1973).
  59. Farr, J. A., Travis, J. Fertility Advertisement by Female Sailfin Mollies, Poecilia latipinna (Pisces: Poeciliidae). Copeia. 1986 (2), 467-472 (1986).
  60. Sumner, I. T., Travis, J., Johnson, C. D. Methods of Female Fertility Advertisement and Variation among Males in Responsiveness in the Sailfin Molly (Poecilia latipinna). Copeia. 1994 (1), 27-34 (1994).
  61. Witte, K., Noltemeier, B. The role of information in mate-choice copying in female sailfin mollies (Poecilia latipinna). Behavioral Ecology and Sociobiology. 52 (3), 194-202 (2002).
  62. Bischoff, R. J., Gould, J. L., Rubenstein, D. I. Tail size and female choice in the guppy (Poecilia reticulata). Behavioral Ecology and Sociobiology. 17 (3), 253-255 (1985).
  63. Forsgren, E. Predation Risk Affects Mate Choice in a Gobiid Fish. The American Naturalist. 140 (6), 1041-1049 (1992).
  64. Berglund, A. Risky sex: male pipefishes mate at random in the presence of a predator. Animal Behaviour. 46 (1), 169-175 (1993).
  65. Kodric-Brown, A. Female choice of multiple male criteria in guppies: interacting effects of dominance, coloration and courtship. Behavioral Ecology and Sociobiology. 32 (6), 415-420 (1993).
  66. Witte, K., Klink, K. B. No pre-existing bias in sailfin molly females, Poecilia latipinna, for a sword in males. Behaviour. 142 (3), 283-303 (2005).
  67. Nöbel, S., Witte, K. Public Information Influences Sperm Transfer to Females in Sailfin Molly Males. PLoS One. 8 (1), e53865 (2013).
  68. Crawley, M. J. . The R Book. , (2007).
  69. Pinheiro, J. C., Bates, D. M. . Mixed-Effects Models in S and S-PLUS. , (2000).
  70. Zuur, A., Ieno, E. N., Walker, N., Saveliev, A. A., Smith, G. M. . Mixed Effects Models and Extensions in Ecology with R. , (2009).
  71. phia: Post-Hoc Interaction Analysis. Available from: https://cran.r-project.org/web/packages/RVAideMemoire (2015)
  72. Korner-Nievergelt, F., Roth, T., von Felten, S., Guélat, J., Almasi, B., Korner-Nievergelt, P. . Bayesian Data Analysis in Ecology Using Linear Models with R, BUGS, and Stan. , (2015).
  73. RVAideMemoire: Testing and Plotting Procedures for Biostatistics. Available from: https://cran.r-project.org/package=RVAideMemoire%0A (2017)
  74. Travis, J., Meffe, G. K., Snelson, F. F. Ecological genetics of life history traits in poeciliid fishes. Ecology and Evolution of livebearing fishes (Poeciliidae). , 185-200 (1989).
  75. Benson, K. E. Enhanced Female Brood Patch Size Stimulates Male Courtship in Xiphophorus helleri. Copeia. 2007 (1), 212-217 (2007).
  76. Hurlbert, S. H. Pseudoreplication and the design of ecological field experiments. Ecological Monographs. 54 (2), 187-211 (1984).
  77. McGregor, P. K. Playback experiments: design and analysis. Acta Ethologica. 3 (1), 3-8 (2000).
  78. Smielik, I., Müller, K., Kuhnert, K. D. Fish motion simulation. ESM 2015-European Simulation and Modelling (EUROSIS) Conference Proc. , 392-396 (2015).
  79. Baird, R. C. Aspects of social behavior in Poecilia latipinna (Lesueur). Revista de Biología Tropical. 21 (2), 399-416 (1974).
  80. Tedore, C., Johnsen, S. Using RGB displays to portray color realistic imagery to animal eyes. Current Zoology. 63 (1), 27-34 (2017).
  81. Calabrese, G. M., Brady, P. C., Gruev, V., Cummings, M. E. Polarization signaling in swordtails alters female mate preference. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 111 (37), 13397-13402 (2014).
  82. Qin, M., Wong, A., Seguin, D., Gerlai, R. Induction of social behavior in zebrafish: live versus computer animated fish as stimuli. Zebrafish. 11 (3), 185-197 (2014).
  83. Scherer, U., Godin, J. -. G. J., Schuett, W. Validation of 2D-animated pictures as an investigative tool in the behavioural sciences A case study with a West African cichlid fish, Pelvicachromis pulcher. Ethology. 123 (8), 560-570 (2017).
  84. Butkowski, T., Yan, W., Gray, A. M., Cui, R., Verzijden, M. N., Rosenthal, G. G. Automated interactive video playback for studies of animal communication. The Journal of Visualized Experiments. (48), 2374 (2011).
  85. Müller, K., Gierszewski, S., Witte, K., Kuhnert, K. -. D. Where is my mate? Real-time 3-D fish tracking for interactive mate-choice experiments. ICPR 2016-23rd International Conference for Pattern Recognition; VAIB 2016, Proc. , 1-5 (2016).
  86. Müller, K., Schlemper, J., Kuhnert, L., Kuhnert, K. -. D. Calibration and 3D ground truth data generation with orthogonal camera-setup and refraction compensation for aquaria in real-time. IEEE 2014 International Conference on Computer Vision Theory and Applications (VISAPP). 3, 626-634 (2014).
  87. Müller, K., Hütwohl, J. M., Gierszewski, S., Witte, K., Kuhnert, K. D. Fish Motion Capture with Refraction Synthesis. Journal of WSCG. , (2018).
  88. . ASAB Guidelines for the treatment of animals in behavioural research and teaching. Animal Behaviour. 135, (2018).
  89. Russell, W. M. S., Burch, R. L. . The Principles of Humane Experimental Technique. , (1959).

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

141 Toolchain Poecilia

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Contact Us

Recommend to library

JoVE NEWSLETTERS

Research

Education

Authors

Librarians

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved