JoVE Logo
Authors
Contact Us

Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • النتائج
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

في التوائم أحادية المشيمة مع تسلسل كثرة الحمر بفقر الدم التوأم (TAPS) ، يكون التوأم المتبرع وحصته المصاحبة من المشيمة شاحبة ، في حين أن التوأم المتلقي وحصته المشيمية لهما جانب متعدد الأطراف. يتم تقديم بروتوكول هنا لتحديد اختلاف اللون في الجانب الأمومي من المشيمة TAPS بعد الولادة.

Abstract

يحدث تسلسل فقر الدم التوأم (TAPS) في 5٪ من التوائم أحادية المشيمة ويتميز باختلافات كبيرة بين الهيموجلوبين بين التوأم. تعتمد معايير تشخيص ما بعد الولادة ل TAPS على المعلمات الدموية وخصائص المشيمة. يظهر فحص المشيمة بعد الولادة أن لون الجانب الأم بين مناطق المشيمة للتوائم المصاب بفقر الدم والتوائم المتعددة الخلايا يختلف بشكل ملحوظ. يكون اختلاف اللون في المشيمة TAPS أعلى مقارنة بالمشيمة أحادية المشيمة مع نقل الدم الحاد للجنين في الفترة المحيطة بالولادة. وبالتالي ، يتم استخدام هذا كمعيار تشخيصي إضافي ل TAPS. تتيح برامج مثل ImageJ القياس المستند إلى الكمبيوتر لكثافة اللون في المشيمة TAPS. ومع ذلك ، لم يتم بعد وصف طريقة مفصلة لحساب الاختلافات اللونية بين المكونات المصابة بفقر الدم ومتعددة الحوات في المشيمة TAPS. يوفر البروتوكول المقدم هنا طريقة خطوة بخطوة لتحليل اختلافات الألوان في الجانب الأمومي من المشيمة TAPS باستخدام برنامج ImageJ.

Introduction

TAPS هو شكل مزمن من متلازمة نقل الدم الجنيني الجنيني ويتميز باختلاف كبير في الهيموجلوبين بين التوأم (Hb) دون علامات على تسلسل قلة السلى1. يرتبط التسبب الرئيسي في TAPS بالهندسة الوعائية المشيمية الفريدة ، مع وجود عدد قليل فقط من مفاغرة صغيرة تسمح بنقل الدم المزمن ومنخفض السرعة من المتبرع (التوأم فقر الدم) إلى المتلقي (التوأم متعدد الحمرات) 2،3،4. يعتمد تشخيص TAPS بعد الولادة على اختبارات الدم التي تظهر فرقا كبيرا في Hb واختلافا كبيرا في عدد الخلايا الشبكية و / أو حقن المشيمة مع صبغة تظهر مفاغرة صغيرةفقط 5. ومع ذلك ، لا يتم قياس عدد الخلايا الشبكية دائما عند الولادة ، ولا يتم إجراء حقن المشيمة بشكل روتيني في معظم مراكز طب الجنين. قد يكون معيار تشخيصي إضافي مفيدا للمساعدة في تشخيص الحالات التي لا تحتوي على قياسات لعدد الخلايا الشبكية وبدون حقن صبغة المشيمة. يوجد اختلاف ملحوظ في اللون بين الجلد الشاحب للتوأم المتبرع والجلد متعدد الأشكال للتوأم المتلقي باستمرار في توائم TAPS عند الولادة. كما تم الكشف عن اختلاف مماثل في اللون في الجانب الأم بين مناطق المشيمة للتوائم المصابة بفقر الدم والتوائم المصابة بفقر الدم عند الفحص الإجمالي.

لقد تم الافتراض مؤخرا أن هذا الاختلاف في لون المشيمة يمكن استخدامه كطريقة بسيطة ودقيقة لتأكيد تشخيص TAPS بعد الولادة6. يعد القياس الكمي لاختلاف اللون في المشيمة TAPS موفرا للوقت مقارنة بحقن المشيمة. بالإضافة إلى ذلك ، يعد القياس الكمي لاختلاف اللون في المشيمة TAPS أكثر فعالية من حيث التكلفة مقارنة بعدد الخلايا الشبكية. المواد المستخدمة في هذه الطريقة متاحة بسهولة في الإعدادات السريرية لذلك ، توفر هذه الطريقة معايير بسيطة ودقيقة لتشخيص TAPS. يصف البروتوكول طريقة مفصلة لقياس الاختلافات اللونية من جانب الأم للمشيمة أحادية المشيمة باستخدام TAPS.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

تمت الموافقة على هذا البروتوكول من قبل لجنة أخلاقيات المركز الطبي بجامعة ليدن ، ويعد فحص ما بعد الولادة للمشيمة التوأم أحادية المشيمة البشرية جزءا من الرعاية القياسية في المركز الطبي بجامعة ليدن. يتم التنازل عن الحصول على الموافقة لفحص ما بعد الولادة للمشيمة التوأم أحادية المشيمة البشرية في المركز الطبي بجامعة ليدن.

1. جمع المشيمة TAPS والفحص الإجمالي

  1. استخدم جميع المشيمة التوأم البشرية أحادية المشيمة مع TAPS التي يتم تسليمها في أي عمر من الحمل. حافظ على المشيمة التوأم البشرية أحادية المشيمة سليمة قدر الإمكان. قم بتوصيل المشيمة أحادية المشيمة بلطف قدر الإمكان، إذا كان الإزالة يدويا ضروريا.
    ملاحظة: بعد الولادة ، يجب على القابلات أو أطباء حديثي الولادة نقل مشيمة TAPS إلى صندوق بلاستيكي ثم إلى المختبر.
  2. عند ولادة الرضيع الأول ، استخدم مشبك واحد لتثبيت الحبل السري لتمييز ترتيب الولادة على أنه أولا. عندما يتم ولادة الرضيع الآخر ، استخدم مشابك لتثبيت الحبل السري لتمييز ترتيب الولادة على أنه الثاني.
  3. فحص المشيمة مجهريا ، بما في ذلك سلامة المشيمة ، وأنواع إدخال الحبل السري ، وعدد الأوعية السرية ، والفحص الإجمالي للغشاء الفاصل لتأكيد المشيمة. اجمع الغشاء بين التوأم للتشخيص المرضي لأحادية المشيمة. يعتمد قطر المشيمة TAPS على عمر الحمل.
    ملاحظة: يجب إجراء الفحص في غضون أسبوع واحد بعد الولادة لتجنب تكوين جلطات دموية لاصقة من جانب الأم.
  4. احتفظ بالمشيمة في الثلاجة (1-4 درجات مئوية) في صندوق بلاستيكي جاف حتى الفحص ، إذا لزم الأمر.

2. تحضير جانب الأم المشيمية

  1. تقليم الغشاء الأمنيوسي على طول حافة المشيمة باستخدام المقص. انتبه إلى الأوعية الموجودة على الغشاء وإذا كان إدخال الحبل الرقيقي موجودا لمنع الدم من التدفق من كتلة المشيمة.
    ملاحظة: في إدخال الحبل السري ، تنتقل الأوعية من الحبل السري إلى سطح الغشاء الأمنيوسي لبعض المسافة قبل التصاق بكتلة المشيمة. إذا تم قطع الأوعية "العارية" ، فقد يتدفق الدم من كتلة المشيمة ويتسبب في حدوث فوضى.
  2. قم بإزالة الجلطات الدموية بعناية لمنع تلف فصوص المشيمة.
  3. تنظيم فصوص المشيمة على جانب الأم لإزالة الفجوة بين الفصوص. عادة ما تحتوي المشيمة على حوالي 15 فصا ويمكن التعرف عليها من جانب الأم.

3. التحضير للتوثيق

  1. ضع المشيمة على لوح بلاستيكي بحيث يكون جانب الأم متجها لأعلى.
  2. تعريض جانب الأم من المشيمة للضوء (توزيع موحد باستخدام مصباحين متطابقين على الجانبين الأيسر والأيمن). استخدم المصابيح التي لها وظيفة لضبط شدة الضوء.
  3. لتقليل الانعكاس ، التقط صورا رقمية بكاميرا (جدول المواد) في ظروف الإضاءة المعتدلة وتجنب التعرض المباشر لمصدر الضوء.
  4. التقط صورا عموديا على جانب الأم من المشيمة.

4. القياس المحوسب باستخدام ImageJ

  1. افتح ImageJ على الكمبيوتر بالنقر فوق أيقونة البرنامج.
  2. انقر فوق "ملف" ، ثم "فتح" لفتح صورة المشيمة. بمجرد فتح الصورة المطلوبة ، انقر فوق "صورة" | "اللون" ، ثم "أداة القنوات" لاختيار "اللون" من القائمة المنسدلة.
    ملاحظة: يمكن للبرنامج تحديد لون الكائن المقاس تلقائيا. المشيمة حمراء. في البرنامج ، بعد النقر فوق "اللون" ، سيتم تحويل صورة المشيمة تلقائيا إلى قناة طيف أحمر.
  3. انقر فوق "الاختيارات اليدوية" لتحديد حصة المشيمة المتعددة والشاحبة على التوالي للتوائم متعددة الحمضات وفقر الدم من خلال الفحص البصري لكثافة اللون المختلفة للجانب الأمومي من المشيمة.
  4. انقر فوق "تحليل" | "الرسم البياني". احصل على الرسم البياني لشدة اللون بعد اختيار المنطقة المتعددة أو المنطقة الباهتة ، على التوالي. يمثل الوضع المعروض في الرسم البياني للشدة اللون الأكثر حضورا في منطقة المشيمة المحددة.
  5. احسب نسبة اختلاف اللون بقسمة وضع شدة اللون للتوأم المصاب بفقر الدم على وضع شدة اللون للتوأم متعدد الحراي.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

النتائج

يوفر فحص المشيمة معلومات قيمة لتشخيص TAPS. تتميز المشيمة TAPS بوجود عدد قليل من مفاغرة الأوعية الدموية الصغيرة1 (الشكل 1 ، الشكل 2). ترتبط هذه الميزة في المشيمة TAPS بالتسبب في TAPS وهي معيار تشخيصي بعد الولادة. على غرار لون حديثي الولا?...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

تشمل النقاط الرئيسية لتحقيق الفحص الأمثل بناء على تجربتنا ما يلي: 1) توصيل المشيمة بلطف قدر الإمكان لتجنب التلف ، خاصة عند الإشارة إلى الإزالة اليدوية ؛ 2) فحص المشيمة MC بعد الولادة بفترة وجيزة لتجنب تكوين جلطات لاصقة (يفضل أن يكون ذلك في غضون أيام قليلة) ؛ 3) إزالة لطيفة لجم...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

المؤلفون ليس لديهم ما يكشفون عنه.

Acknowledgements

تم تمويل هذه الدراسة من قبل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (رقم المنحة: 81801465) ، ومشروع Sanming للطب في Shenzhen (رقم المنحة: SZSM201512012) والبرنامج الوطني للبحث والتطوير الرئيسي في الصين (رقم المنحة: 2018YFC1002900).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
20 ml syringesBD Plastipak300613
Color dyeRoyal Talens Schoolverf36716010 (blue); 36715010 (green); 36712350 (yellow); 36713570 (pink)
Digital cameraCanon Inc.ixus 125 hs
ImageJNational Institute of HealthFor Windows ImageJ bundled with 64-bit Java 1.8.0_112
Umbilical cathetersVygon1270.08 (8 F)
1270.08 (5 F)
1270.04 (4 F)
1270.03 (3.5 F)
1270.02 (2.5 F)

References

  1. Lopriore, E., et al. Twin anemia-polycythemia sequence in two monochorionic twin pairs without oligo-polyhydramnios sequence. Placenta. 28 (1), 47-51 (2007).
  2. Zhao, D., et al. Placental share and hemoglobin level in relation to birth weight in twin anemia-polycythemia sequence. Placenta. 35 (12), 1070-1074 (2014).
  3. Lopriore, E., et al. Assessment of feto-fetal transfusion flow through placental arterio-venous anastomoses in a unique case of twin-to-twin transfusion syndrome. Placenta. 28 (2-3), 209-211 (2007).
  4. Lopriore, E., et al. Quantification of feto-fetal transfusion rate through a single placental arterio-venous anastomosis in a monochorionic twin pregnancy. Placenta. 30 (3), 223-225 (2009).
  5. Tollenaar, L. S. A., et al. Improved prediction of twin anemia-polycythemia sequence by delta middle cerebral artery peak systolic velocity: new antenatal classification system. Ultrasound in Obstetrics and Gynecology. 53 (6), 788-793 (2019).
  6. Tollenaar, L. S., et al. Color Difference in Placentas with Twin Anemia-Polycythemia Sequence: An Additional Diagnostic Criterion. Fetal Diagnosis and Therapy. 40 (2), 123-127 (2016).
  7. Zhao, D. P., et al. Prevalence, size, number and localization of vascular anastomoses in monochorionic placentas. Placenta. 34 (7), 589-593 (2013).
  8. De Paepe, M. E., Burke, S., Luks, F. I., Pinar, H., Singer, D. B. Demonstration of placental vascular anatomy in monochorionic twin gestations. Pediatric and Developmental Pathology. 5 (1), 37-44 (2002).
  9. Lewi, L., et al. Placental sharing, birthweight discordance, and vascular anastomoses in monochorionic diamniotic twin placentas. American Journal of Obstetrics and Gynecology. 197 (6), 581-588 (2007).
  10. Robertson, E. G., Neer, K. J. Placental injection studies in twin gestation. American Journal of Obstetrics and Gynecology. 147 (2), 170-174 (1983).
  11. Lewi, L., et al. The outcome of monochorionic diamniotic twin gestations in the era of invasive fetal therapy: a prospective cohort study. American Journal of Obstetrics and Gynecology. 199 (5), (2008).
  12. Slaghekke, F., et al. Fetoscopic laser coagulation of the vascular equator versus selective coagulation for twin-to-twin transfusion syndrome: an open-label randomised controlled trial. Lancet. 383 (9935), 2144-2151 (2014).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

TAPS ImageJ

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Contact Us

Recommend to library

JoVE NEWSLETTERS

Research

Education

Authors

Librarians

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved