A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • النتائج
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

يوضح هذا البروتوكول نموذجا فريدا لضربة الماوس مع احتشاء متوسط الحجم ومعدل بقاء ممتاز. يسمح هذا النموذج لباحثي السكتة الدماغية قبل السريرية بتمديد مدة نقص التروية ، واستخدام الفئران المسنة ، وتقييم النتائج الوظيفية طويلة الأجل.

Abstract

في أبحاث السكتة الدماغية التجريبية ، يستخدم انسداد الشريان الدماغي الأوسط (MCAO) بخيوط داخل اللمعة على نطاق واسع لنمذجة السكتة الدماغية الإقفارية في الفئران. يظهر نموذج MCAO الفتيل عادة احتشاء دماغي هائل في الفئران C57Bl / 6 التي تتضمن أحيانا أنسجة المخ في المنطقة التي يوفرها الشريان الدماغي الخلفي ، والذي يرجع إلى حد كبير إلى ارتفاع معدل رتق الشريان الخلفي المتصل. تعتبر هذه الظاهرة مساهما رئيسيا في ارتفاع معدل الوفيات الذي لوحظ في الفئران C57Bl / 6 أثناء التعافي من السكتة الدماغية على المدى الطويل بعد خيوط MCAO. وبالتالي ، فإن العديد من دراسات السكتة الدماغية المزمنة تستغل نماذج MCAO البعيدة. ومع ذلك ، فإن هذه النماذج عادة ما تنتج احتشاء فقط في منطقة القشرة ، وبالتالي ، فإن تقييم العجز العصبي بعد السكتة الدماغية يمكن أن يمثل تحديا. أنشأت هذه الدراسة نموذجا معدلا ل MCAO عبر الجمجمة يتم فيه إغلاق MCA في الجذع جزئيا إما بشكل دائم أو عابر عبر نافذة جمجمة صغيرة. نظرا لأن موقع الانسداد قريب نسبيا من أصل MCA ، فإن هذا النموذج يولد تلفا في الدماغ في كل من القشرة والمخطط. أظهر التوصيف المكثف لهذا النموذج معدل بقاء ممتاز على المدى الطويل ، حتى في الفئران المسنة ، بالإضافة إلى عجز عصبي يمكن اكتشافه بسهولة. لذلك ، يمثل نموذج الماوس MCAO الموصوف هنا أداة قيمة لأبحاث السكتة الدماغية التجريبية.

Introduction

يعاني ما يقرب من 800000 شخص من سكتة دماغية في الولايات المتحدة كل عام ، ومعظم هذه السكتات الدماغية هي نقص تروية في الطبيعة1. استعادة تدفق الدم الدماغي في الوقت المناسب مع منشط البلازمينوجين الأنسجة (tPA) و / أو استئصال الخثرة هو حاليا العلاج الأكثر فعالية لمرضى السكتة الدماغية. ومع ذلك ، فإن الشفاء التام للوظائف العصبية على المدى الطويل أمر نادر الحدوث 2,3. وبالتالي ، فإن البحث عن علاج جديد للسكتة الدماغية يستهدف التحسين الوظيفي هو مجال مكثف للبحث يتطلب نماذج حيوانية ذات صلة سريريا للسكتة الدماغية.

يستخدم نموذج السكتة الدماغية الإقفارية الأكثر شيوعا في القوار....

Protocol

يتم تنفيذ جميع الإجراءات الموضحة في هذا العمل وفقا لإرشادات المعاهد الوطنية للصحة لرعاية واستخدام في البحث ، وقد تمت الموافقة على البروتوكول من قبل لجنة رعاية واستخدام بمعهد ديوك (IACUC). تم استخدام ذكور الفئران الصغيرة (8-10 أسابيع) والذين تتراوح أعمارهم بين (22 شهرا) C57Bl / 6 في الدراسة الحالية. يوضح الشكل 1 نظرة عامة على هذا البروتوكول.

1. التحضير الجراحي

  1. افحص الماوس بحثا عن تشوهات جسيمة وعجز سلوكي.
    ملاحظة: قبل الجراحة ، من المهم أن يرتدي الجراحون معدات الوقاية الشخصية المناسبة (المعدات الشخصية الواقية) ، بما في ذلك القناع الجراحي والقبعة والقفازات والعباءة.
  2. وزن الماو....

النتائج

من خلال عرض مباشر تحت المجهر الجراحي ، يمكن التأكد بصريا من أن تدفق الدم MCA يتم حظره أثناء نقص التروية. أظهرت دراستنا السابقة انخفاضا بنسبة >80٪ في تدفق الدم في المنطقة الإقفارية باستخدام جهاز مراقبة دوبلر بالليزر6. من أجل تحديد تغيرات تدفق الدم بعد MCAO ، يمكن استخدام LSCI لمزيد من ?.......

Discussion

تم إنشاء أول نموذج انسداد MCA عبر الجمجمة في الفئران في عام 198111،12 ، واستبدل بنموذج MCAO بدون استئصال الجمجمة في عام 19894. كان لانسداد MCA الأولي عبر الجمجمة مجال جراحي واسع ، بحيث تمت إزالة القوس الوجني بالكامل وسحب العضلات بشكل جانبي. تورمت الأنسجة ا?.......

Disclosures

جميع المؤلفين ليس لديهم تضارب في المصالح.

Acknowledgements

يشكر المؤلفون كاثي غيج على دعمها التحريري. تم إنشاء أرقام المخطط مع BioRender.com. تم دعم هذه الدراسة بأموال من قسم التخدير (المركز الطبي بجامعة ديوك) ومنح المعاهد الوطنية للصحة (NS099590 و HL157354 و NS117973 و NS127163).

....

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
0.25% bupivacaineHospiraNDC 0409-1159-18
0.9% sodium chlorideICU MedicalNDC 0990-7983-03
2,3,5-Triphenyltetrazolium Chloride (TTC) Sigma or any available vendor
20 G IV catheterBD38153420 GA 1.6 IN
30 G needleBD305106
4-0 silk sutureLookSP116Black braided silk
8-0 suture with needle Ethilon2822G
Alcohol swabsBD326895
Anesthesia induction boxAny suitable vendorPexiglass make 
Electrical grinderJSDAJD 700
High temperature cautery loop tipBovieAA03
IsofluraneCovetrusNDC 11695-6777-2
Laser doppler perfusion monitorMoor InstrumentsmoorVMS-LDF1
Lubricant eye ointmentBausch + Lomb339081
Mouse rectal probePhysitempRET-3
Nitrous OxideAirgasUN1070
OtoscopeWelchallyn7282.5 mm Speculum
OxygenAirgasUN1072
Povidone-iodineCVS955338
Recovery boxBrinsea TLC eco
Rimadyl (carprofen)Zoetis6100701Injectable 50 mg/mL
Rodent ventilatorHarvardModel 683
Temperature controllerPhysitempTCAT-2DF 
Triple antibioric & pain reliefCVSNDC 59770-823-56
VaporizerRWDR583S

References

  1. Tsao, C. W., et al. Heart disease and stroke statistics-2022 update: a report from the American Heart Association. Circulation. 145 (8), e153 (2022).
  2. Nogueira, R. G., et al. T....

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

MCAO MCAO

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved