إنشاء وتأكيد نموذج ماوس حجم البطين الأيمن بعد الولادة

Summary

يقدم هذا البروتوكول إنشاء وتأكيد نموذج الحمل الزائد لحجم البطين الأيمن بعد الولادة (VO) في الفئران المصابة بالناسور الشرياني الوريدي البطني (AVF) ، والذي يمكن تطبيقه للتحقيق في كيفية مساهمة VO في نمو القلب بعد الولادة.

Abstract

يعد الحمل الزائد لحجم البطين الأيمن (RV) (VO) شائعا لدى الأطفال المصابين بأمراض القلب الخلقية. في ضوء مراحل النمو المتميزة ، قد تستجيب عضلة القلب RV بشكل مختلف ل VO عند الأطفال مقارنة بالبالغين. تهدف الدراسة الحالية إلى إنشاء نموذج RV VO بعد الولادة في الفئران باستخدام ناسور شرياني وريدي بطني معدل. لتأكيد إنشاء VO والتغيرات المورفولوجية والدورة الدموية التالية لعربة سكن متنقلة ، تم إجراء الموجات فوق الصوتية في البطن ، تخطيط صدى القلب ، وتلطيخ الأنسجة الكيميائية لمدة 3 أشهر. ونتيجة لذلك ، أظهر الإجراء في الفئران بعد الولادة معدل بقاء مقبول ونجاح الناسور. في الفئران VO ، تم توسيع تجويف RV بجدار حر سميك ، وزاد حجم السكتة الدماغية بحوالي 30٪ -40٪ في غضون شهرين بعد الجراحة. بعد ذلك ، زاد الضغط الانقباضي RV ، ولوحظ قلس الصمام الرئوي المقابل ، وظهرت إعادة تشكيل الشريان الرئوي الصغيرة. في الختام ، من الممكن إجراء جراحة الناسور الشرياني الوريدي المعدل (AVF) لإنشاء نموذج RV VO في الفئران بعد الولادة. بالنظر إلى احتمال إغلاق الناسور وارتفاع مقاومة الشريان الرئوي ، يجب إجراء الموجات فوق الصوتية في البطن وتخطيط صدى القلب لتأكيد حالة النموذج قبل التطبيق.

Introduction

يعد الحمل الزائد لحجم البطين الأيمن (RV) (VO) شائعا عند الأطفال المصابين بأمراض القلب الخلقية (CHD) ، مما يؤدي إلى إعادة تشكيل عضلة القلب المرضية وسوء التشخيص على المدى^{الطويل 1}،^2،3. يعد الفهم المتعمق لإعادة تشكيل عربة سكن متنقلة والتدخلات المستهدفة المبكرة ذات الصلة أمرا ضروريا لتحقيق نتائج جيدة لدى الأطفال المصابين بأمراض القلب التاجية. هناك العديد من الاختلافات في الهياكل الجزيئية والوظائف الفسيولوجية والاستجابات للمنبهات في قلوب البالغين والأطفال¹،^4،5،6.

Protocol

تتوافق جميع الإجراءات المعروضة هنا مع المبادئ الموضحة في إعلان هلسنكي وتمت الموافقة عليها من قبل لجنة رعاية الحيوان والدراسات الإنسانية في مركز شنغهاي الطبي للأطفال (SCMC-LAWEC-2023-003). تم استخدام C57BL / 6 جرو الفئران (P7 ، الذكور ، 3-4 جم) في هذه الدراسة. تم الحصول على الحيوانات من مصدر تجاري (انظر جدول المواد). تم الاحتفاظ بصغار الفئران وأمهاتها المرضعات (الجراء: الأمهات = 6: 1 في قفص واحد) تحت ظروف مختبرية محددة خالية من مسببات الأمراض تحت دورة ضوء وظلام مدتها 12 ساعة عند 22 ± 2 درجة مئوية مع حرية الوصول إلى الماء واتباع نظام غذائي غذائي. تم تقسيم الجراء بشكل عشوائي إلى مجموعتين: مجموعة VO ومجموعة (وهمية) تديرها الوهم.

....

النتائج

معدل البقاء على قيد الحياة وسالكية AVF في غضون 3 أشهر
نجا ما مجموعه 30 (75٪) من الفئران في مجموعة VO و 19 (95٪) من الفئران في المجموعة الوهمية من جراحة AVF (الشكل 4 أ). في مجموعة VO ، توفيت ثمانية فئران في غضون يوم واحد بعد الجراحة بسبب النزيف المفرط (ن = 5) أو أكل لحوم البشر (ن = 3) ،.......

Discussion

في السابق ، تم إنشاء نموذج RV VO الكلاسيكي باستخدام قلس الصمام²¹ ؛ ومع ذلك ، بالمقارنة مع AVF ، قد تتطلب جراحة صمام القلب المفتوح تقنيات أكثر تطورا وقد تترافق مع معدل وفيات أعلى بكثير ، خاصة في الفئران بعد الولادة. نظرا لأن الدراسات التي أجريت على الحيوانات أظهرت أن نفس تأثير VO قد ت?.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
70% Ethanol	Tiandz,Chia
ACETAMINOPHEN Oral Solution	VistaPharm, Inc. Largo, FL 33771, USA	NDC 66689-054-01
Anesthesia machine	RWD Life Science,China	R550IP
Anesthesia mask	RWD Life Science,China	68680
C57BL/6 mice	Xipu’er-bikai Experimental Animal Co., Ltd (Shanghai, China)
Hair removal cream	Veet, France	VT-200
Hematoxylin and eosin Kit	Beyotime biotech	C0105M
Isoflurane	RWD Life Science,China	R510-22-10
Microscope	Yuyan Instruments, China	SM-301
Surgical suture needles	NINGBO MEDICAL NEEDLE CO.,LTD, China
Thermostatic heating platform	Qingdao Juchuang Environmental Protection Group Co., Ltd, China
Ultrasound device	FUJIFILM VisualSonics, Inc.	Vevo 2100	Image modes includes B-Mode, Color Doppler Mode and Pulsed Wave Doppler Mode
Ultrasound gel	Parker Laboratories,United States	REF 01-08
Ultrasound transducer	FUJIFILM VisualSonics, Inc.	MS 400