تعديل الوريد الذيل وثقب الوريد القضيب لأخذ عينات الدم في نموذج الفئران

Summary

هنا ، نقدم بروتوكولا لتقديم بدائل سريعة وسهلة وموثوقة لجمع الدم لنموذج الفئران. وصفنا ثلاث طرق مختلفة لأخذ عينات الدم وفقا للسياق: ثقب الوريد الذيل تحت التخدير أو على واع ، وثقب الوريد الظهري للقضيب تحت التخدير.

Abstract

عينات الدم مطلوبة في معظم تصاميم الحيوانات التجريبية لتقييم المعلمات الدموية المختلفة. تقدم هذه الورقة إجراءين لجمع الدم في الفئران: ثقب الوريد الجانبي للذيل وثقب الوريد الظهري للقضيب ، والتي توفر مزايا كبيرة على التقنيات الأخرى الموصوفة سابقا. تظهر هذه الدراسة أن هذين الإجراءين يسمحان بأخذ عينات سريعة (أقل من 10 دقائق) وإنتاج كميات دم كافية لمعظم المقايسات (202 ميكرولتر ± 67.7 ميكرولتر). يجب إجراء ثقب الوريد الظهري للقضيب تحت التخدير ، في حين يمكن إجراء ثقب الوريد الجانبي على واع ومقيد.

وبالتالي ، فإن التناوب بين هاتين التقنيتين يتيح سحب الدم في أي موقف. في حين أنه يوصى دائما بمساعدة المشغل أثناء الإجراء لضمان رفاهية الحيوان ، فإن هذه التقنيات تتطلب عاملا واحدا فقط ، على عكس معظم طرق أخذ عينات الدم التي تتطلب اثنين. علاوة على ذلك ، في حين أن هذه الطرق الموصوفة سابقا (على سبيل المثال ، العصا الوداجية ، وسحب الدم من الوريد تحت الترقوة) تتطلب تدريبا مسبقا مكثفا لتجنب إلحاق الأذى بالحيوان أو موته ، فإن الوريد الذيل وثقب الوريد الظهري للقضيب نادرا ما يكون قاتلا. لكل هذه الأسباب ، ووفقا للسياق (على سبيل المثال ، للدراسات التي تشمل ذكور الفئران ، خلال الفترة المحيطة بالجراحة أو فترة ما بعد الجراحة مباشرة ، للحيوانات ذات الأوردة الذيل الرقيقة) ، يمكن استخدام كلتا التقنيتين بالتناوب لتمكين عمليات سحب الدم المتكررة.

Introduction

أخذ عينات الدم ضروري لمعظم الدراسات على الحيوانات ، سواء في الجسم الحي أو في المختبر. في الفئران ، نظرا لأن تواتر وكمية أخذ عينات الدم يمكن أن يكونا كبيرين ، فمن المفيد أن يكون لديك بدائل مختلفة للجمع. تم وصف طرق مختلفة في الدراسات السابقة.

التقنيات الأكثر استخداما هي ثقب الوريد الذيل وسحب الدم الوريدي الصافن. أخذ عينات الوريد الذيل مناسب لجميع سلالات الفئران. مع التدريب المناسب ، يكون الإجراء بسيطا ويسبب الحد الأدنى من الضيق للحيوان¹. وبالمثل ، فإن سحب دم الوريد الصافن ، بشرط أن يتم بشكل صحيح ، هو أيضا طريقة جمع سريعة وبسيطة. لا تتطلب أي من الطريقتين تخديرا ، وكلاهما يسمح بسحب كميات صغيرة من الدم ب....

Protocol

تم تنفيذ الإجراءات على ذكور فئران لويس البالغة من العمر 3 أشهر ، ويزن كل منها 300-400 جم. تم تضمين ما مجموعه 24 حيوانا ، مع ثلاث حالات ثقب: خضع 12 فأرا لثقب وريد الذيل بدون تخدير (تلفزيون المجموعة بدون تخدير) ، وتم تخدير 12 فأرا آخر للخضوع لكل من ثقب الوريد الذيل (مجموعة التلفزيون مع التخدير) وثقب الوريد القضيب (المجموعة PV مع التخدير). تمت الموافقة على جميع الإجراءات واحترام إرشادات اللجنة المؤسسية لرعاية واستخدام الحيوان (IACUC). تم القتل الرحيم لجميع الحيوانات في نهاية الدراسة (بعد متابعة شهر 1) عن طريق جرعة زائدة من ثاني أكسيد الكربون. انظر جدول المواد للحصول على التفاصيل المتعلقة بجميع المواد والأدوات المستخدمة في هذا البروتوكول.

النتائج

تم تعريف النجاح على أنه سحب دم ينتج عنه ما لا يقل عن 100 ميكرولتر من الدم في أقل من 10 دقائق (من وقت البزل إلى نهاية جمع الدم) ، وتم تعريف الفشل على أنه سحب دم ينتج أقل من 100 ميكرولتر من الدم أو يستغرق أكثر من 10 دقائق لاسترداد حجم الدم المطلوب. تم السماح بحد أقصى 250 ميكرولتر من الدم لكل عينة. تم إجرا.......

Discussion

ثقب الوريد الذيل هو وسيلة فعالة للحصول على الدم من الفئران الواعية. ومع ذلك ، عندما يكون الحيوان تحت التخدير ، يمكن أن يؤدي تأثير الأيزوفلوران إلى تشنجات الأوعية الدموية ويجعل ثقب الوريد الذيل غير مناسب¹¹. كما هو موضح في هذه الدراسة ، فإن البديل في هذه الحالة هو جمع الدم من الور.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
0.5 mL | 28 G ½  Insulin Syringes	BD	329424	for tail vein puncture
0.5 mL | 30 G x 5/16 Insulin Syringes	BD	320468	for penile vein puncture
250 L  Microtainer blood collection tubes with K2EDTA	BD	365974
Gauze Sponges	Curity	6939
Isoflurane Auto-Flow Anesthesia Machine	E-Z Systems	EZ-190F	for penile vein puncture
Isoflurane, USP	Patterson Veterinary	1403-704-06	for penile vein puncture
Nosecone for Anesthesia	World Precision Instruments	EZ-112	for penile vein puncture
Rodent Restraint Cone	Harvard Apparatus	ST2 52-95-86	for tail vein puncture
Small Animal Heated Operating Table (Adjustable)	Peco Services Ltd	69023
Webcol Alcohol prep pads	Simply Medical	5110