آثار Desmodium caudatum على هرمونات الجهاز الهضمي والنباتات المعوية في الفئران المصابة بالتهاب المعدة

Summary

يصف البروتوكول الحالي طريقة تحليل النباتات المعوية باستخدام تسلسل الجينات 16S rRNA القائم على Illumina ويوفر إطارا لتقييم فعالية decoctions العشبية.

Abstract

من أجل استكشاف مبدئي لآثار Desmodium caudatum على التهاب المعدة والنباتات المعوية في الفئران ، تم إنشاء نموذج فئران التهاب المعدة المزمن باستخدام طريقة ساليسيلات الصوديوم الكلاسيكية. تم تقسيم ثمانية عشر فأرا SPF إلى ثلاث مجموعات: المجموعة الضابطة (المجموعة C) ، والمجموعة النموذجية (المجموعة M) ، ومجموعة العلاج (المجموعة T). تم أخذ الأقسام المرضية لجدار المعدة من الفئران في كل مجموعة. علاوة على ذلك ، تم تحديد تركيزات الغاسترين والمالوندالديهيد في مصل الفئران في كل مجموعة بواسطة ELISA. بالإضافة إلى ذلك ، تم استكشاف آثار D. caudatum على النباتات المعوية للفئران المصابة بالتهاب المعدة من خلال مقارنة مفصلة للمجتمعات البكتيرية المعوية في المجموعات الثلاث ، باستخدام تسلسل جين 16S rRNA القائم على Illumina. أشارت النتائج إلى أن ديكوتيون D. caudatum يمكن أن يقلل من محتوى malondialdehyde ويزيد من محتوى الغاسترين. علاوة على ذلك ، تم العثور على D. caudatum decoction لتعزيز تنوع ووفرة النباتات المعوية ، مما يمارس تأثيرا إيجابيا على علاج التهاب المعدة من خلال تنظيم واستعادة النباتات المعوية.

Introduction

يتميز التهاب المعدة المزمن (CG) ، أحد أكثر الأمراض السريرية شيوعا ، بتغيرات التهابية مزمنة ومستمرة في ظهارة الغشاء المخاطي في المعدة ، والتي تتعرض للهجوم بشكل متكرر ومتكرر من قبل عوامل مسببة للأمراض^{المختلفة 1}. يحتل معدل الإصابة ب CG المرتبة الأولى بين جميع أنواع أمراض المعدة ، وهو ما يمثل 40٪ إلى 60٪ من معدل خدمة العيادات الخارجية في قسم أمراض الجهاز الهضمي². علاوة على ذلك ، يزداد معدل الإصابة بشكل عام مع تقدم العمر ، خاصة في الأفراد الذين هم في منتصف العمر وكبار^{السن 3}. مما لا شك فيه أن CG يقلل بشكل كبير من نوعية حياة الناس ، مما يؤكد الحاجة الماسة لاكتشاف عوامل علاجية جديدة.

Protocol

تمت الموافقة على إجراءات رعاية واستخدام من قبل لجنة الأخلاقيات بجامعة ميانيانغ العادية ، وتم اتباع جميع اللوائح المؤسسية والحكومية ذات الصلة المتعلقة بالاستخدام الأخلاقي للحيوانات بدقة. بالنسبة للدراسة الحالية ، تم استخدام فئران SPF (أنواع كونمينغ ، ذكورا وإناثا ، تزن 180-220 جم). تم الحصول على من مصدر تجاري (انظر جدول المواد). تم إيواء جميع في بيئة خالية من مسببات الأمراض ووفرت الوصول إلى الغذاء.

1. إعداد الكواشف

1. قم بإعداد محلول ساليسيلات الصوديوم بنسبة 5٪ بوزن 2.5 جم من مسحوق ساليسيلات الصوديوم (انظر جدول المواد) بميزان إلكتروني. يذوب المسحوق في كمية صغيرة من الماء المق....

النتائج

يوضح الشكل 1 نتائج القسم المرضي لجدار المعدة. بالمقارنة مع المجموعة C ، أظهرت المجموعة M ضمور جدار المعدة الخفيف والتهاب خفيف. ومع ذلك ، عند مقارنتها بالمجموعة M ، لم تظهر المجموعة T أي التهاب واضح أو حؤول معوي أو ضمور. هذا يشير إلى أن D. caudatum ديكوتيون يمكن أن يحسن بشكل فعال.......

Discussion

D. caudatum ، وهو دواء شعبي شائع الاستخدام من قبل جنسية تشيانغ¹² ، أظهر فعالية كبيرة في علاج أمراض الجهاز الهضمي. مع تقدم البحوث الدوائية الحديثة ، يتم تحديد اختلال توازن النباتات الناتج عن اختلال توازن البيئة الدقيقة المعدية المعوية كعامل رئيسي في أمراض الجهاز الهضمي الحادة ?.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Alpha diversity analysis	Mothur 1.30.2
AxyPrep deoxyribonucleic acid (DNA) gel extraction kit	Axygen Biosciences	AP-GX-50
Beta diversity analysis	Qiime 1.9.1
Cryogenic refrigerator	Forma-86C ULT freezer
Desmodium caudatum	The Traditional Chinese Medicine Hospital of Beichuan Qiang Autonomous County
E.Z.N.A. soil kit	Omega Bio-tek	D5625-01
Illumina MiSeq Platform	Illumina Miseq PE300/NovaSeq PE250
Multiskan Spectrum	spectraMax i3
OTU clustering	Uparse 7.0.1090
OTU statistics	Usearch 7.0
PCR instrument	TransGen AP221-02
PCR instrument	ABI GeneAmp 9700
QuantiFluor-ST double-stranded DNA (dsDNA) system	Promega Corp.
Sequence classification annotation	RDP Classifier 2.11
Sodium salicylate	Sichuan Xilong Chemical Co., Ltd	54-21-7
SPF rats	Chengdu Dashuo Experimental Animal Co., Ltd
SPSS 18.0	IBM