A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • النتائج
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

يصف هذا البروتوكول نموذج نقص التروية الدماغية البؤري العابر في الفئران من خلال انسداد الشريان الدماغي الأوسط داخل اللمعة. بالإضافة إلى ذلك ، يتم عرض أمثلة لتقييم النتائج باستخدام التصوير بالرنين المغناطيسي والاختبارات السلوكية.

Abstract

تقف السكتة الدماغية كسبب رئيسي للوفاة أو الإعاقة المزمنة على مستوى العالم. ومع ذلك ، تقتصر العلاجات المثلى الحالية على علاجات إعادة التروية خلال المرحلة الحادة من السكتة الدماغية. لاكتساب نظرة ثاقبة في علم الأمراض الفسيولوجي للسكتة الدماغية وتطوير مناهج علاجية مبتكرة ، تلعب نماذج القوارض في الجسم الحي للسكتة الدماغية دورا أساسيا. وقد دفع توافر المعدلة وراثيا بشكل خاص استخدام الفئران كنماذج تجريبية للسكتة الدماغية.

في مرضى السكتة الدماغية ، يعد انسداد الشريان الدماغي الأوسط (MCA) أمرا شائعا. وبالتالي ، فإن النموذج التجريبي الأكثر انتشارا يتضمن انسداد MCA داخل اللمعة ، وهي تقنية طفيفة التوغل لا تتطلب استئصال الجمجمة. يتضمن هذا الإجراء إدخال خيوط أحادية من خلال الشريان السباتي الخارجي (ECA) ودفعها عبر الشريان السباتي الداخلي (ICA) حتى تصل إلى نقطة التفرع من MCA. بعد انسداد الشرايين لمدة 45 دقيقة ، تتم إزالة الشعيرات الأحادية للسماح بإعادة التروية. طوال العملية ، يتم مراقبة تدفق الدم الدماغي لتأكيد الانخفاض أثناء الانسداد والتعافي اللاحق عند إعادة التروية. يتم تقييم النتائج العصبية والأنسجة باستخدام الاختبارات السلوكية ودراسات التصوير بالرنين المغناطيسي (MRI).

Introduction

السكتة الدماغية هي مرض مدمر يصيب ما يقرب من 15 مليون شخص في جميع أنحاء العالم سنويا ، وفقا لمنظمة الصحة العالمية. حوالي ثلث المرضى يستسلمون لهذه الحالة ، بينما يعاني ثلث آخر من إعاقة دائمة. السكتة الدماغية هي أمراض معقدة تشمل أنواعا مختلفة من الخلايا ، مثل الخلايا المناعية العصبية والمحيطية ، والأوعية الدموية ، والاستجابات الجهازية1. لا يمكن حاليا تكرار الشبكة المعقدة من التفاعلات الناتجة عن السكتة الدماغية على مستوى الأنظمة باستخدام النماذج في المختبر . وبالتالي ، فإن النماذج الحيوانية التجريبية ضرورية للتعمق في آليات المرض وتطوير واختبار علاجات جديدة. حاليا ، إعادة تروية الأنسجة المبكرة هي التدخل الوحيد المعتمد ، إما من خلال انحلال ا....

Protocol

تم إجراء العمل الحيواني وفقا للقوانين الكاتالونية والإسبانية (Real Decreto 53/2013) والتوجيهات الأوروبية ، بموافقة اللجنة الأخلاقية (Comité Ètic d'Experimentació Animal ، CEEA) بجامعة برشلونة ، والهيئات التنظيمية المحلية ل Generalitat de Catalunya. يتم الإبلاغ عن الدراسات وفقا لإرشادات ARRIVE. تم تصميم هذا الإجراء ليتم إجراؤه في الفئران البالغة ، بدءا من عمر 8 أسابيع ، بدون حد للسن. يتم توفير أمثلة على الإجراء الجراحي الذي تم تطويره في الفئران C57BL / 6 من عمر 10-12 أسبوعا هنا. يجب مراعاة الاختلافات التشريحية اعتمادا على سلالة الماوس.

1. إعداد

  1. قبل البدء في العملية الجراحية ، قم بجمع وتعقيم جميع المواد والأدوات الم....

النتائج

هناك طرق مختلفة لتقييم نتائج إجراء tMCAo. يتم استخدام طرق التصوير العصبي في الجسم الحي (MRI) والاختبارات السلوكية هنا.

تصاب الفئران بآفات إقفارية في الدماغ ، تؤثر بشكل رئيسي على المنطقة التي يوفرها MCA المماثل للانسداد ، مثل المخطط والقشرة الظهرية الجانبية. توجد عدة طرق لتحد.......

Discussion

إجراء tMCAo داخل اللمعة هو النموذج الأكثر استخداما لنقص تروية الدماغ البؤري مع إعادة التروية في الأبحاث الأساسية. حاليا ، الفئران هي النموذج الحيواني المفضل بسبب توافر السلالات المعدلة وراثيا. ومع ذلك ، من الضروري الاعتراف بأن الفئران المعدلة وراثيا وخلفياتها الجينية يمكن أن تؤثر على الأو?.......

Disclosures

يعلن أصحاب البلاغ عدم وجود تضارب في المصالح.

Acknowledgements

دراسة مدعومة بالمنحة PID2020-113202RB-I00 الممولة من وزارة العلوم والابتكار (MCIN) / الوكالة الحكومية للتحقيق (AEI) ، Gobierno de España / 10.13039 / 501100011033 و "الصندوق الأوروبي للتنمية الإقليمية (ERDF). طريقة لصنع أوروبا". حصل NCC و MAR على زمالات ما قبل الدكتوراه (PRE2021-099481 و PRE2018-085737 ، على التوالي) بتمويل من MCIN / AEI / 10.13039 / 501100011033 ومن قبل "الصندوق الاجتماعي الأوروبي (ESF) الاستثمار في مستقبلك". ونشكر فرانسيسكا رويز - جيان وليوناردو ماركيز - كيسينوسكي على دعمهما التقني. نحن نقر بدعم مرفق التصوير بالرنين المغناطيسي التابع لمعهد التحقيقات الحيوية في أغسطس بي إي سونير (IDIBAPS). يدعم برنامج مراكز أبحاث كاتالونيا ....

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
6/0 suture AragoVascular ligatures
6/0 suture with curved needleAragoSkin sutures
9 mg/mL SalineFresenius KabiCN616003 ECFor hydration
Anaesthesia systemSurgiVet
Blunt retractors, 1 mm wideFine Science Tools18200-09
BuprenorfineBuprexFor pain relief
Clamp applying forcepsFine Science ToolsS&T CAF4
Dumont mini forcepsFine Science ToolsM3S 11200-10
ForcepsFine Science Tools91106-12
GlueLoctiteTo stick LDF probe to the skull
Grip Strength MeterIITC Life Science Inc.#2200
IsofluraneB-BraunCN571105.8
LDF PerimedPerimedPeriflux System 5000
LDF Probe HoldersPerimedPH 07-4
Medical tape
MRI magnetBruker BioSpin, Ettlingen, GermanyBioSpec 70/30 horizontal animal scanner 
Needle Holder with Suture CutterFine Science Tools12002-14
Nylon filamentDoccol701912PK5Re
Recovery cage with heating pad
Sirgical scissorsFine Science Tools91401-12
Small vessel cauterizer kitFine Science Tools18000-00
Stereomicroscope and cold lightLeicaM60
Suture tying forcepsFine Science Tools18025-10
Thermostat, rectal probe and mouse padLetica Science InstrumentsLE 13206
Vannas spring scissors (4mm cutting edge)Fine Science Tools15019-10
Vascular clampsFine Science Tools00396-01

References

  1. Siddiqi, A. Z., Wadhwa, A. Treatment of acute stroke: current practices and future horizons. Cardiovascular Revascularization Medicine. 49, 56-65 (2023).
  2. Tamura, A., Graham, D. I., McCulloch, J., Teasdale, G. M.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

MRI

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved