A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
يصف هذا البروتوكول نموذج نقص التروية الدماغية البؤري العابر في الفئران من خلال انسداد الشريان الدماغي الأوسط داخل اللمعة. بالإضافة إلى ذلك ، يتم عرض أمثلة لتقييم النتائج باستخدام التصوير بالرنين المغناطيسي والاختبارات السلوكية.
تقف السكتة الدماغية كسبب رئيسي للوفاة أو الإعاقة المزمنة على مستوى العالم. ومع ذلك ، تقتصر العلاجات المثلى الحالية على علاجات إعادة التروية خلال المرحلة الحادة من السكتة الدماغية. لاكتساب نظرة ثاقبة في علم الأمراض الفسيولوجي للسكتة الدماغية وتطوير مناهج علاجية مبتكرة ، تلعب نماذج القوارض في الجسم الحي للسكتة الدماغية دورا أساسيا. وقد دفع توافر المعدلة وراثيا بشكل خاص استخدام الفئران كنماذج تجريبية للسكتة الدماغية.
في مرضى السكتة الدماغية ، يعد انسداد الشريان الدماغي الأوسط (MCA) أمرا شائعا. وبالتالي ، فإن النموذج التجريبي الأكثر انتشارا يتضمن انسداد MCA داخل اللمعة ، وهي تقنية طفيفة التوغل لا تتطلب استئصال الجمجمة. يتضمن هذا الإجراء إدخال خيوط أحادية من خلال الشريان السباتي الخارجي (ECA) ودفعها عبر الشريان السباتي الداخلي (ICA) حتى تصل إلى نقطة التفرع من MCA. بعد انسداد الشرايين لمدة 45 دقيقة ، تتم إزالة الشعيرات الأحادية للسماح بإعادة التروية. طوال العملية ، يتم مراقبة تدفق الدم الدماغي لتأكيد الانخفاض أثناء الانسداد والتعافي اللاحق عند إعادة التروية. يتم تقييم النتائج العصبية والأنسجة باستخدام الاختبارات السلوكية ودراسات التصوير بالرنين المغناطيسي (MRI).
السكتة الدماغية هي مرض مدمر يصيب ما يقرب من 15 مليون شخص في جميع أنحاء العالم سنويا ، وفقا لمنظمة الصحة العالمية. حوالي ثلث المرضى يستسلمون لهذه الحالة ، بينما يعاني ثلث آخر من إعاقة دائمة. السكتة الدماغية هي أمراض معقدة تشمل أنواعا مختلفة من الخلايا ، مثل الخلايا المناعية العصبية والمحيطية ، والأوعية الدموية ، والاستجابات الجهازية1. لا يمكن حاليا تكرار الشبكة المعقدة من التفاعلات الناتجة عن السكتة الدماغية على مستوى الأنظمة باستخدام النماذج في المختبر . وبالتالي ، فإن النماذج الحيوانية التجريبية ضرورية للتعمق في آليات المرض وتطوير واختبار علاجات جديدة. حاليا ، إعادة تروية الأنسجة المبكرة هي التدخل الوحيد المعتمد ، إما من خلال انحلال ا....
تم إجراء العمل الحيواني وفقا للقوانين الكاتالونية والإسبانية (Real Decreto 53/2013) والتوجيهات الأوروبية ، بموافقة اللجنة الأخلاقية (Comité Ètic d'Experimentació Animal ، CEEA) بجامعة برشلونة ، والهيئات التنظيمية المحلية ل Generalitat de Catalunya. يتم الإبلاغ عن الدراسات وفقا لإرشادات ARRIVE. تم تصميم هذا الإجراء ليتم إجراؤه في الفئران البالغة ، بدءا من عمر 8 أسابيع ، بدون حد للسن. يتم توفير أمثلة على الإجراء الجراحي الذي تم تطويره في الفئران C57BL / 6 من عمر 10-12 أسبوعا هنا. يجب مراعاة الاختلافات التشريحية اعتمادا على سلالة الماوس.
1. إعداد
هناك طرق مختلفة لتقييم نتائج إجراء tMCAo. يتم استخدام طرق التصوير العصبي في الجسم الحي (MRI) والاختبارات السلوكية هنا.
تصاب الفئران بآفات إقفارية في الدماغ ، تؤثر بشكل رئيسي على المنطقة التي يوفرها MCA المماثل للانسداد ، مثل المخطط والقشرة الظهرية الجانبية. توجد عدة طرق لتحد.......
إجراء tMCAo داخل اللمعة هو النموذج الأكثر استخداما لنقص تروية الدماغ البؤري مع إعادة التروية في الأبحاث الأساسية. حاليا ، الفئران هي النموذج الحيواني المفضل بسبب توافر السلالات المعدلة وراثيا. ومع ذلك ، من الضروري الاعتراف بأن الفئران المعدلة وراثيا وخلفياتها الجينية يمكن أن تؤثر على الأو?.......
يعلن أصحاب البلاغ عدم وجود تضارب في المصالح.
دراسة مدعومة بالمنحة PID2020-113202RB-I00 الممولة من وزارة العلوم والابتكار (MCIN) / الوكالة الحكومية للتحقيق (AEI) ، Gobierno de España / 10.13039 / 501100011033 و "الصندوق الأوروبي للتنمية الإقليمية (ERDF). طريقة لصنع أوروبا". حصل NCC و MAR على زمالات ما قبل الدكتوراه (PRE2021-099481 و PRE2018-085737 ، على التوالي) بتمويل من MCIN / AEI / 10.13039 / 501100011033 ومن قبل "الصندوق الاجتماعي الأوروبي (ESF) الاستثمار في مستقبلك". ونشكر فرانسيسكا رويز - جيان وليوناردو ماركيز - كيسينوسكي على دعمهما التقني. نحن نقر بدعم مرفق التصوير بالرنين المغناطيسي التابع لمعهد التحقيقات الحيوية في أغسطس بي إي سونير (IDIBAPS). يدعم برنامج مراكز أبحاث كاتالونيا ....
Name | Company | Catalog Number | Comments |
6/0 suture | Arago | Vascular ligatures | |
6/0 suture with curved needle | Arago | Skin sutures | |
9 mg/mL Saline | Fresenius Kabi | CN616003 EC | For hydration |
Anaesthesia system | SurgiVet | ||
Blunt retractors, 1 mm wide | Fine Science Tools | 18200-09 | |
Buprenorfine | Buprex | For pain relief | |
Clamp applying forceps | Fine Science Tools | S&T CAF4 | |
Dumont mini forceps | Fine Science Tools | M3S 11200-10 | |
Forceps | Fine Science Tools | 91106-12 | |
Glue | Loctite | To stick LDF probe to the skull | |
Grip Strength Meter | IITC Life Science Inc. | #2200 | |
Isoflurane | B-Braun | CN571105.8 | |
LDF Perimed | Perimed | Periflux System 5000 | |
LDF Probe Holders | Perimed | PH 07-4 | |
Medical tape | |||
MRI magnet | Bruker BioSpin, Ettlingen, Germany | BioSpec 70/30 horizontal animal scanner | |
Needle Holder with Suture Cutter | Fine Science Tools | 12002-14 | |
Nylon filament | Doccol | 701912PK5Re | |
Recovery cage with heating pad | |||
Sirgical scissors | Fine Science Tools | 91401-12 | |
Small vessel cauterizer kit | Fine Science Tools | 18000-00 | |
Stereomicroscope and cold light | Leica | M60 | |
Suture tying forceps | Fine Science Tools | 18025-10 | |
Thermostat, rectal probe and mouse pad | Letica Science Instruments | LE 13206 | |
Vannas spring scissors (4mm cutting edge) | Fine Science Tools | 15019-10 | |
Vascular clamps | Fine Science Tools | 00396-01 |
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request PermissionExplore More Articles
This article has been published
Video Coming Soon
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved