A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • النتائج
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

نصف بروتوكولا عاما يدمج تحليل قياس الطيف الكتلي عالي الدقة والالتحام الجزيئي في أبحاث الطب الصيني التقليدي.

Abstract

يعد فصل وتحليل المكونات الكيميائية المرغوبة من الموضوعات المهمة للبحث الأساسي للطب الصيني التقليدي (TCM). أصبح قياس الطيف الكتلي الترادفي لوقت الرحلة رباعي الأقطاب الكروماتوغرافيا السائل فائق الأداء تدريجيا تقنية رائدة لتحديد مكونات الطب الصيني التقليدي. جينورا ثنائية اللون DC. (BFH) ، عشب معمر بدون جذع يستخدم في الطب والغذاء في الصين له تأثيرات طبية مثل إزالة الحرارة وترطيب الرئة وتخفيف السعال وتشتيت الركود وتخفيف التورم. تحتوي البوليفينول والفلافونويد على العديد من الأيزومرات التي تعيق تحديد المركبات المعقدة في BFH. تقدم هذه الورقة بروتوكولا منهجيا لدراسة المكونات الكيميائية ل BFH بناء على استخراج المذيبات والبيانات المتكاملة عبر UPLC-Q-TOF-MS.

تتضمن الطريقة الموضحة هنا بروتوكولات منهجية للمعالجة المسبقة للعينات، ومعايرة التصلب المتعدد، واكتساب التصلب المتعدد، ومعالجة البيانات، وتحليل النتائج. تشمل المعالجة المسبقة للعينات الجمع والتنظيف والتجفيف والتكسير والاستخراج. تتكون معايرة MS من تصحيح متعدد النقاط ونقطة واحدة. تتضمن معالجة البيانات استيراد البيانات وإنشاء الطريقة ومعالجة التحليل وعرض النتائج. النتائج التمثيلية لنمط التجزئة النموذجي للأحماض الفينولية والإسترات والجليكوسيدات في Gynura bicolor DC. (BFH) معروضة في هذه الورقة. بالإضافة إلى ذلك ، تتم مناقشة اختيار المذيبات العضوية ، والاستخراج ، وتكامل البيانات ، واختيار طاقة التصادم ، وتحسين الطريقة بالتفصيل. يمكن استخدام هذا البروتوكول العالمي على نطاق واسع لتحديد المركبات المعقدة في الطب الصيني التقليدي.

Introduction

يمارس الطب الصيني التقليدي (TCM) سريريا في الصين منذ آلاف السنين ، ويلعب دورا حيويا في الحفاظ على صحة الشعبالصيني 1. تكوين الطب الصيني التقليدي متنوع ومعقد ، وقد تم الإبلاغ عن الطب الصيني التقليدي على نطاق واسع في العديد من الدراسات النوعية التي تركز على التركيب الكيميائي2. يمكن تقسيم المكونات الكيميائية في الطب الصيني التقليدي تقريبا إلى الفئات التالية مثل القلويدات, الأحماض العضوية, فينيل بروبانويد, الكومارين, قشور, الكينونات, الفلافونويد, التربينويدات, الصابونين triterpenoid, الصابونين الستيرويد, جليكوسيدات القلب, والعفص3. نظرا للأعداد الكبيرة من المكونات غير ا....

Protocol

1. معالجة عينة

  1. اغسل عشب BFH بالكامل بالماء النقي حتى لا تكون هناك رواسب وشوائب مرئية. ضع BFH النظيف في طبق ثم ضعه في الفرن (الشكل 1 ب). اضبطي الفرن على 50 درجة مئوية لمدة 24 ساعة.
    ملاحظة: تم جمع مصنع BFH بالكامل في مقاطعة سيتشوان ، الصين.
  2. سحق BFH المجفف في كسارة متعددة الوظائف عالية السرعة. انقل المسحوق الخشن إلى منخل 50 شبكة (الشكل 1 ج). اجمع المسحوق الناعم في كيس محكم الغلق ، وقم بتخزينه في برج تجفيف.
  3. قم بوزن ست عينات BFH بدقة بوزن 0.25 جم لكل منها ، وضعها في ست قوارير مخروطية الشكل. أضف 30 مل من المذيبات العضوية (50٪ ماء ال....

النتائج

تم استخدام تحديد التركيب الكيميائي ل BFH كنموذج لعرض النتائج التمثيلية. كروماتوغرامات ذروة القاعدة من Gynura ثنائي اللون المستخرج بالمذيبات. في الملف التكميلي 1-الشكل التكميلي S1-S6 ، ووقت الاستبقاء المرصود (RT) ، واسم المكون ، والصيغة ، ونسبة الكتلة إلى الشحنة (m / .......

Discussion

إلى جانب مغلي الماء12 ، يعد استخراج المذيبات العضوية طريقة شائعة أخرى للمعالجة المسبقة للطب الصينيالتقليدي 13. وفقا لمبدأ انحلال الطور المماثل ، تم استخراج العديد من المكونات عن طريق الجمع بين المذيبات العضويةالمختلفة 14. يعد الاستخ.......

Disclosures

ويعلن أصحاب البلاغ عدم وجود مصالح مالية متنافسة.

Acknowledgements

تم تمويل هذا العمل من قبل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (82104881) ، وفريق الميراث والابتكار التابع لعلاج الطب الصيني التقليدي للأمراض المناعية ، ومشروع تشونغتشينغ للبحث العلمي الطبي (المشروع المشترك بين لجنة الصحة في تشونغتشينغ ومكتب العلوم والتكنولوجيا) (2022DBXM007) ، مشروع خاص لتحفيز الأداء وتوجيه معهد تشونغتشينغ للبحوث العلمية (cstc2022jxjl120005) ، مشروع خاص لمؤسسة تشونغتشينغ لعلوم ما بعد الدكتوراه (2022CQBSHTB3035) ، برنامج المواهب الطبية العليا في تشونغتشينغ ليونغ ومنتصف العمر ، برنامج المؤسسات العلمية في تشونغتشينغ (مشروع بحثي مستقل رقم 2022GDRC015).

....

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
chloroformSinopharm Chemical ReagentCo., LtdCAS 67-66-3
ethanolChuandongChemicalCAS 64-17-5
ethyl acetateChuandongChemicalCAS 141-78-6
liquid chromatographWatersACQUITY Class 1 plus
MassLynxWatersV4.2MS control software
n-butyl alcoholChuandongChemicalCAS 71-36-3
petroleum etherChuandongChemicalCAS 8032-32-4
Quadrupole time-of-flight mass spectrometryWatersSYNAPT XS
UNIFIWatersData analysis software

References

  1. Lin, P., et al. Qualitative and quantitative analysis of the chemical profile for gualou-xiebai-banxia decoction, a classical traditional chinese medicine formula for the treatment of coronary heart disease, by uplc-q/tof-ms combined with chemometric analysis. J Pharm B....

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

DC UPLC Q TOF MS MS

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Contact Us

Recommend to library

JoVE NEWSLETTERS

Research

Education

Authors

Librarians

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved