تقنية معدلة لتحريض متلازمة المبيض المتعدد الكيسات في الفئران

Summary

يقدم هذا البروتوكول تقنية لتحفيز نماذج متلازمة المبيض المتعدد الكيسات (PCOS) في الفئران من خلال إطلاق الليتروزول المتحكم فيه باستخدام مضخات صغيرة. تحت التخدير الكافي ، تم زرع المضخة الصغيرة تحت الجلد ، وتم إحداث متلازمة تكيس المبايض بنجاح في الفئران بعد فترة معينة من إطلاق المضخة الصغيرة.

Abstract

متلازمة المبيض المتعدد الكيسات (PCOS) هي أحد الأسباب الرئيسية للعقم عند النساء. تستخدم النماذج الحيوانية على نطاق واسع لدراسة الآليات المسببة لمتلازمة تكيس المبايض وتطوير الأدوية ذات الصلة. تكرر نماذج الفئران التي يسببها Letrozole الأنماط الظاهرية الأيضية والإنجابية لمرضى متلازمة تكيس المبايض. تتطلب الطريقة التقليدية لعلاج الليتروزول في فئران متلازمة تكيس المبايض جرعات يومية على مدى فترة معينة ، والتي يمكن أن تكون كثيفة العمالة وتسبب ضغطا كبيرا على الفئران. تصف هذه الدراسة طريقة بسيطة وفعالة لتحفيز متلازمة تكيس المبايض في الفئران عن طريق زرع مضخة صغيرة تتحكم فيها تطلق الليتروزول. تم تصنيع مضخة صغيرة قادرة على الإطلاق المستقر والمستمر لكمية كمية كمية من الليتروزول وزرعها تحت الجلد في الفئران تحت التخدير. أظهرت هذه الدراسة أن نموذج الفأر نجح في محاكاة ميزات متلازمة تكيس المبايض بعد زرع مضخة الليتروزول الصغيرة. المواد والمعدات المستخدمة في هذه الدراسة متاحة بسهولة لمعظم المختبرات ، ولا تتطلب تخصيصا خاصا. بشكل جماعي ، توفر هذه المقالة طريقة فريدة وسهلة الأداء لإحداث متلازمة تكيس المبايض في الفئران.

Introduction

متلازمة المبيض المتعدد الكيسات (PCOS) هي واحدة من أكثر الحالات شيوعا بين النساء في سن الإنجاب¹. يصيب ما يصل إلى 18٪ من النساء على مستوى العالم وهو السبب الرئيسي للعقم عند النساء في جميع أنحاء العالم^2،3. تتميز متلازمة تكيس المبايض بسلسلة من التشوهات الإنجابية المترابطة ، بما في ذلك إفراز موجهة الغدد التناسلية المضطربة ، وانقطاع الإباضة المزمن ، وزيادة إنتاج الأندروجين ، ومورفولوجيا المبيض المتعدد^{الكيسات 4}. بالإضافة إلى اضطرابات أمراض النساء ، تزيد متلازمة تكيس المبايض أيضا من خطر الإصابة بأمراض القلب والأوعية الدموية

Protocol

تمت الموافقة على جميع البروتوكولات التجريبية الحيوانية في هذه الدراسة من قبل لجنة أخلاقيات بجامعة فودان. تم استخدام إناث الفئران C57BL / 6J ، التي تتراوح أعمارها بين 4 أسابيع ، هنا. تفاصيل والكواشف والمعدات المستخدمة في هذه الدراسة مدرجة في جدول المواد.

1. تحضير المضخة الصغيرة

1. خذ مسحوق الليتروزول (50 مجم) المخزن في زجاجة العبوة الأصلية ، وقم بالطرد المركزي لمسحوق الليتروزول في الزجاجة عند 300 × جم لمدة 5 ثوان (في درجة حرارة الغرفة) ، ثم افتح الغطاء.
2. أضف ببطء 625 ميكرولتر من DMSO إلى مسحوق الليتروزول باستخدام ماصة واخلطه جيدا للحصول على محلول مخز....

النتائج

يظهر البروتوكول التجريبي وبعض الخطوات الحاسمة في الشكل 1 والشكل 2. يتم عرض مستويات هرمون التستوستيرون في الدم في الشكل 3 أ. أظهرت الفئران المعالجة بالمضخة الصغيرة Letrozole (المشار إليها فيما يلي باسم فئران LTZ) مستويات مرتفعة بش.......

Discussion

يوضح هذا التقرير بروتوكولا بسيطا لتحفيز متلازمة تكيس المبايض في الفئران باستخدام مواد يسهل الوصول إليها. يعد نموذج متلازمة تكيس المبايض في الفأر ضروريا لاستكشاف آليات متلازمة تكيس المبايض وفحص الأدوية²⁶. من بين الطرق المتاحة لتحفيز نماذج متلازمة تكيس المب?.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Syringe	Bofeng Biotech	BD300841	1ML (sterile)
Centrifugation tube	Biological Hope	1850-K	15ML (sterile)
Pipette	Eppendorf	3123000268-A	100μL-1000μL (sterile)
Pipette	TopPette	7010101008	10μL-100μL (sterile)
Letrozole powder	Sigma	L6545-50MG	Primary acting drugs (sterile)
PEG(Poly(ethylene glycol))	Solarbio	P8250	Used for dissolution (sterile)
Sterile Physiological Saline Solution	Biosharp	BL158A	Mini-pump storage
Osmotic Pumps	ALZET	1004	Letrozole storage and sustained release (sterile)
Dimethyl sulfoxide	Biosharp	BS087	Used for dissolution (sterile)
Small Animal Anesthesia Machine	RWD	R500IP	Used for anesthesia
Isoflurane	RWD	20071302	Used for anesthesia
Hemostats	Biosharp	BS-HF-S-125	Surgical instrument
Scissors	Biosharp	BS-SOR-S-100P	Surgical instrument
Needle holder	ShangHaiJZ	J32010	Surgical instrument
Forceps	RWD	F12028	Surgical instrument
Needle and the 4-0 absorbable suture	JINGHUAN	CR413	Surgical instrument
Povidone-iodine swabs	SingleLady	GB26368-2010	Skin disinfection
Depilatory cream	ZIKER BIOTECHNOLOGY	ZK-L2701	Depilation agent for laboratory animals
Nitrile Gloves	Biosharp	BC040-L	Used for aseptic operation
Sterile gauze	ZHENDE	BA69087	Used for wiping liquids
C57BL/6J Mice	Shanghai Model Organisms Center	N/A	Age: 4 weeks
Pet Eye Lubricant	BAITE	SHF021153	Used for mouse eye lubricant
Meloxicam Injection	MEIDAJIA	R21064-21	Used for mouse analgesia (sterile)