A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
* These authors contributed equally
توضح هذه المقالة استخدام خلايا HepG2 التي يسببها حمض الأوليك كنموذج لمرض الكبد الدهني المرتبط بالخلل الأيضي.
ارتفع معدل انتشار مرض الكبد الدهني المرتبط بالخلل الأيضي (MASLD) بسبب التغيرات في الأنماط الاقتصادية ونمط الحياة ، مما أدى إلى تحديات صحية كبيرة. وقد درست التقارير السابقة إنشاء نماذج حيوانية وخلوية ل MASLD ، مع تسليط الضوء على الاختلافات بينهما. في هذه الدراسة ، تم إنشاء نموذج خلوي عن طريق تحفيز تراكم الدهون في MASLD. تم تحفيز خلايا HepG2 بحمض الأوليك غير المشبع بتركيزات مختلفة (0.125 mM ، 0.25 mM ، 0.5 mM ، 1 mM) لمحاكاة MASLD. تم تقييم فعالية النموذج باستخدام مقايسات مجموعة عد الخلايا -8 ، وتلطيخ Oil Red O ، وتحليل محتوى الدهون. تهدف هذه الدراسة إلى إنشاء نموذج خلوي سهل التشغيل لخلايا MASLD. أظهرت نتائج فحوصات مجموعة عد الخلايا -8 أن بقاء خلايا HepG2 كان يعتمد على تركيز حمض الأوليك ، مع GI50 من 1.875 mM. كانت صلاحية الخلية في مجموعات 0.5 mM و 1 mM أقل بكثير من تلك الموجودة في المجموعة الضابطة (P < 0.05). علاوة على ذلك ، فحص تلطيخ الزيت الأحمر O وتحليل محتوى الدهون ترسب الدهون بتركيزات متفاوتة من حمض الأوليك (0.125 مللي مول ، 0.25 مللي مول ، 0.5 مللي مول ، 1 مللي مول) على خلايا HepG2. كان محتوى الدهون في مجموعات 0.25 mM و 0.5 mM و 1 mM أعلى بكثير من محتوى المجموعة الضابطة (P < 0.05). بالإضافة إلى ذلك ، كانت مستويات الدهون الثلاثية في مجموعات الزراعة العضوية أعلى بكثير من تلك الموجودة في المجموعة الضابطة (P < 0.05).
يشمل مرض الكبد الدهني المرتبط بالخلل الأيضي (MASLD) مجموعة من الحالات ، بما في ذلك التنكس الدهني البسيط ، والتهاب الكبد الدهني غير الكحولي (NASH) ، وتليف الكبد ، وسرطان الخلايا الكبدية1،2،3،4،5،6 ، وكلها تعزى إلى عوامل أخرى غير تكوين الكحول7. MASLD هو مرض الكبد الأكثر انتشارا الناجم عن إصابة الكبد الأيضية ، حيث يؤثر على ما يقرب من ربع سكان العالم8،9،10....
ملاحظة: راجع جدول المواد للحصول على التفاصيل المتعلقة بجميع المواد والأدوات والكواشف المستخدمة في هذا البروتوكول.
1. ثقافة الخلية
2. تأثير حمض الأوليك على صلاحية الخلية كما تم قياسه بواسطة مجموعة عد الخلايا -8
تأثير حمض الأوليك على صلاحية الخلية
تعرضت خلايا HepG2 لتركيزات متفاوتة من الزراعة العضوية (0 mM ، 0.125 mM ، 0.25 mM ، 0.5 mM ، 1 mM) ، مما أدى إلى انخفاض في معدلات بقاء الخلايا عند 0.125 mM و 0.25 mM و 0.5 mM و 1 mM مقارنة ب 0 mM. لوحظت دلالة إحصائية عند 0.5 mM (P < 0.05) و 1 mM (P < 0.05) عند مقارنتها ب 0 mM. تظهر نتائج.......
MASLD هي متلازمة سريرية مرضية تتميز بترسب الدهون المفرط داخل الخلايا في خلايا الكبد بسبب عوامل تتجاوز الكحول وغيرها من العوامل الضارة بالكبد18. يرتبط MASLD بشكل معقد بإصابة الكبد بالإجهاد الأيضي المكتسب ، ولا سيما المرتبطة بمقاومة الأنسولين والقابلية الوراثية. لدراسة الأدوية وفح.......
يعلن أصحاب البلاغ عدم وجود تضارب في المصالح.
تم منح الدراسة الحالية من قبل "دراسة حول القضايا الرئيسية للتأثير العلاجي ل Koumiss على الأمراض الإقليمية للطب المنغولي" في عام 2018 المشروع المدعوم لبرنامج العلوم والتكنولوجيا التابع لقسم العلوم والتكنولوجيا في منطقة منغوليا الداخلية ذاتية الحكم.
....Name | Company | Catalog Number | Comments |
0.22 µm filter | Millex | ||
0.25% Trypsin-EDTA (1x) Trypsin-EDTA | Gibco | 25200-056 | |
0.45 µm filter | Millex | ||
2 mL Crygenic Vials | CORNING | 430659 | |
25 cm2 Cell Culture Flask | CORNING | 430639 | |
6-well cell culture plate | CORNING | 3516 | |
96-well cell culture plate | CORNING | 3599 | |
Blood Count Plate | Shanghai Jing Jing Biochemical Reagent & Instrument Co. | 02270113 | |
Cell Counting Kit-8 assays | Beijing Solarbio Science & Technology Co.,Ltd. | CA1210-1000T | |
CO2 incubator | NUAIRE | NU-5710E | |
DMSO Dimethyl sulfoxide | Beijing Solarbio Science & Technology Co.,Ltd. | D8371 | |
Dulbecco's Modified Eagle Medium | Gibco | 8122691 | |
Enzyme Labeling Equipment | Tecan | Spark | |
Fetal Bovine Serum, Qualified | Gibco | 10099141 | |
HepG2 cells line | Beijing North China Chuanglian Biotechnology Research Institute (BNCC) | 221031 | |
Human Triglyceride (TG) ELISA instruction | Nanjing Jiacheng Bioengineering Institute | 20170301 | |
Inverted Microscope for Cell Culture | Leica | DMi1 | |
Isopropanol | Tianjin Zhiyuan Chemical Reagent Co. | 2021030141 | |
Oil Red Stain Kit, For Cultured Cells | Beijing Solarbio Science & Technology Co.,Ltd. | G1262 | |
Oleic acid | Sangon Biotech (Shanghai) Co., Ltd. | A502071 | |
Penicillin Streptomycin | Gibco | 15140122 | |
SPSS 24.0 | Statistics software |
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request PermissionExplore More Articles
This article has been published
Video Coming Soon
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved