تعديل مستويات حمض الفوليك أو الكولين الغذائي للأمهات لدراسة تأثير أوجه القصور على النتائج الصحية للنسل

Summary

يصف هذا البروتوكول طريقة الحد من المدخول الغذائي من حمض الفوليك أو الكولين في إناث الفئران قبل الحمل بهدف التحقيق في تأثير النظام الغذائي للأم على النتائج الصحية للنسل.

Abstract

تلعب تغذية الأم أثناء الحمل والرضاعة دورا مهما في النمو العصبي للنسل. يلعب التمثيل الغذائي أحادي الكربون (1C) ، والذي يتمحور حول حمض الفوليك والكولين ، بالإضافة إلى فيتامينات ب الأخرى ، دورا رئيسيا أثناء إغلاق الأنبوب العصبي للجنين النامي. ومع ذلك، فإن تأثير حالات النقص التغذوية للأمهات أثناء الحمل على النتائج الصحية للنسل بعد الولادة لا يزال غير محدد نسبيا. علاوة على ذلك ، قد يؤثر نقص التغذية لدى الأمهات في حمض الفوليك أو الكولين على النتائج الصحية الأخرى في النسل - مما يجعل هذا نموذجا قيما. يهدف هذا البروتوكول إلى تحديد الإجراء الخاص بإحداث نقص في استقلاب 1C في إناث الفئران من خلال التعديلات الغذائية. يتم وضع الإناث على الوجبات الغذائية عند الفطام ، حتى عمر 2 أشهر ، لمدة 4-6 أسابيع قبل التزاوج وتبقى على النظام الغذائي طوال فترة الحمل والرضاعة. يمكن تقييم النسل من هذه الإناث لمعرفة النتائج الصحية. يمكن استخدام الإناث عدة مرات لتوليد نسل ، ويمكن جمع الأنسجة من الإناث لقياس قياسات مستقلب 1C. يقدم هذا البروتوكول لمحة عامة عن كيفية تحفيز نقص التغذية للأمهات في حمض الفوليك أو الكولين لدراسة النتائج الصحية للنسل.

Introduction

تلعب تغذية الأم أثناء الحمل والرضاعة دورا حيويا في نمو النسل. الأيض أحادي الكربون (1C) هو شبكة أيضية رئيسية تدمج الإشارات الغذائية مع التخليق الحيوي ، وتوازن الأكسدة والاختزال ، وعلم التخلق. حمض الفوليك والكولين هي المكونات المركزية ل 1C التي تلعب دورا هاما في إغلاق الأنبوب العصبي. يوصى على نطاق واسع للنساء بتكملة حمض الفوليك والكولين خلال سنوات الإنجاب¹. في حين أن الدور الحاسم لحمض الفوليك في نمو الجنين محدد بوضوح ، إلا أن الآليات الأساسية المعنية لا تزال غير واضحة. ينصح النساء في الإنجاب بتناول حمض الفوليك قبل الحمل لأن إغلاق الأنبوب العصبي يحدث خلال الأشهر الثلاثة الأولى². الأمهات الحوامل اللواتي يعانين من نقص في حمض ....

Protocol

تمت الموافقة على هذا البروتوكول ، وتم استخدام جميع الموضوعات الحيوانية وفقا للمبادئ التوجيهية للجنة المؤسسية لرعاية واستخدام في جامعة الغرب الأوسط (البروتوكول 2983). تم استخدام إناث الفئران C57BL / 6J ، عمر شهرين (وزن الجسم ، ~ 20 جم) ، في هذه الدراسة. بشكل عام ، يمكن استخدام الفئران الإناث في سن الإنجاب¹⁰. لضمان تجنب آثار القمامة ، يجب استخدام العديد من الإناث لكل نظام غذائي¹¹. يتم سرد تفاصيل الكواشف والمعدات المستخدمة في الدراسة في جدول المواد.

1. التحضير التجريبي

1. الحصول على حمض الفوليك أو النظام الغذائي الذي يعاني من نقص الكولين من مصنعي أغذية الق....

النتائج

كان تركيز هذه الدراسة هو التحقيق في تأثير نقص التغذية للأمهات على حمض الفوليك أو الكولين على النتائج الصحية للنسل. تم تحديد الأوزان الأسبوعية لمراقبة الصحة العامة للإناث التي يتم الحفاظ عليها على نظام غذائي يحتوي على حمض الفوليك أو نقص الكولين. في عملنا السابق ، لم يلاحظ أي تغييرات في وزن .......

Discussion

أثناء تنفيذ هذا البروتوكول في مختبرات الأبحاث ، هناك العديد من الملاحظات المهمة التي يحتاج الباحثون إلى أخذها في الاعتبار قبل بدء التجارب. أولا ، في تصنيع النظام الغذائي ، يجب إعطاء مهلة كافية لتصنيع النظام الغذائي قبل بدء الدراسة التجريبية. يمكن أن تختلف المهل الزمنية من شركة إلى أخرى ، ?.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
1.5 mL tubes	Eppendorf
C57BL/6 Female Mice	Charles River	27	Mice can be bred in house as well.
Choline Deficient Diet	Envigo	TD.06119
Control Diet	Envigo	TD.190790
EDTA tubes
Folic Acid Deficient Diet	Envigo	TD.01546
GraphPad prism			https://www.graphpad.com/features
Housing for rodents	Lab Products, LLC	One CageVentilated Racks & Cages
Liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS)	SCIEX, Framingham, MA	5500 QTrap
Ultra-performance liquid chromatography (UPLC)	Shimadzu, Columbia, MD, USA	Nexera