الكهربي فصل البروتينات

Summary

في هذا الفيديو ، ونحن يبرهن على وجود طريقة لفصل الكهربي للبروتينات باستخدام بولي acrylimide الكهربائي للهلام (PAGE).

Abstract

ويستخدم الكهربي لفصل مخاليط معقدة من البروتينات (على سبيل المثال ، من الخلايا ، الكسور التحت خلوية ، كسور العمود ، أو immunoprecipitates) ، للتحقيق في التراكيب الوحيدات ، والتحقق من تجانس عينات البروتين. يمكن أن تستخدم أيضا لتنقية البروتينات لاستخدامها في تطبيقات أخرى. في هلام بولي أكريلاميد الكهربائي ، والبروتينات تهاجر ردا على الحقل الكهربائي من خلال المسام في المصفوفة هلام بولي أكريلاميد ؛ حجم المسام يتناقص مع زيادة تركيز مادة الأكريلاميد. مزيج من حجم المسام والمسؤول عن البروتين ، والحجم ، والشكل الذي يحدد معدل الهجرة من البروتين. في هذه الوحدة ، وصفت طريقة قياسية لLaemmli هلام إستشراد متقطع في ظل ظروف تغيير طبيعة ، أي في وجود كبريتات الصوديوم دوديسيل (SDS).

Protocol

بروتوكول النص الكامل لهذا النهج التجريبي هو متاح في البروتوكولات الحالية في البيولوجيا الجزيئية .