DNA Origami Fork Assembly for DNA Origami Nanoantenna (DONA)

للتجميع الذاتي لهيكل اوريغامي الحمض النووي في وعاء واحد ، ابدأ بإعداد خليط من 2.5 نانومولار من حبلا السقالة الدائري M13mp18 و 100 نانومولار من 201 مادة أساسية قصيرة قليلة النوكليوتيد في محلول TAE المكمل ب 15 مليمول كلوريد المغنيسيوم. ثم اضبط الحجم الكلي للمحلول على 100 ميكرولتر باستخدام ماء فائق النقاء. صلب المحلول في جهاز تدوير حراري باستخدام تدرج درجة الحرارة.

ابدأ بالتسخين السريع إلى 80 درجة مئوية واتبع برنامج تدرج درجة الحرارة المعروض خطوة بخطوة. لتنقية الخليط من المواد الغذائية الزائدة ، أضف 100 ميكرولتر من محلول أوريغامي الحمض النووي إلى مرشح أيكون قطع الوزن الجزيئي 100 كيلو دالتون. تليها إضافة 400 ميكرولتر من الماء فائق النقاء.

ثم أجهزة الطرد المركزي في 6،000G لمدة ثماني دقائق في درجة حرارة الغرفة. بعد الطرد المركزي ، قم بإزالة الفلتر واقلب الأنبوب للتخلص من المرشح. أضف 400 ميكرولتر من الماء فائق النقاء إلى المرشح وأجهزة الطرد المركزي كما هو موضح سابقا.

لجمع محلول البنية النانوية المنقى. اقلب الفلتر رأسا على عقب في أنبوب جديد وأجهزة طرد مركزي عند 1،000 جرام لمدة دقيقتين في درجة حرارة الغرفة باتباع تعليمات الشركة المصنعة. تم ضمان التجميع الصحيح لشوكة اوريغامي الحمض النووي باستخدام مجهر القوة الذرية أو تصوير AFM.

كما هو متوقع ، كانت معظم الشوكات صلبة بدون أذرع مكسورة. ومع ذلك ، كان من الصعب تصوير الجسر بين الذراعين بسبب قطره الصغير ومرونته العالية.