ابدأ بطحن 10 ملليغرام من المتفطرة السلية المجففة بالتجميد إلى مسحوق ناعم باستخدام هاون ومدقة. أضف خمسة ملليلتر من مساعد Freund غير المكتمل للحصول على 10 ملليغرام لكل ملليلتر من محلول المخزون. قم بتخزين المرق في درجة حرارة أربع درجات مئوية تحت الصفر.
قبل التحصين ، تمييع حل الأسهم. ثم قم بتخفيف الببتيد MOG 35-55 إلى ملليغرام لكل ملليلتر وقم بتخزينه عند 20 درجة مئوية تحت الصفر. امزج كميات متساوية من MOG 35-55 مع المادة المساعدة في أنبوب سعة خمسة ملليلتر مع خالط حتى يتم تشكيل مستحلب سميك.
بعد كل 10 ثوان من الخلط ، ضع المحلول على الثلج لمدة 20 ثانية وقم بتدوير الأنبوب لاستعادة كل المحلول. انقل المستحلب إلى حقنة سعة ملليلتر واحد ، مع التأكد من خلوه من فقاعات الهواء. ثم قم بتركيبه بإبرة قياس 27.
تحت الجلد ، حقن 200 ميكرولتر من المستحلب في أسفل الظهر من الماوس المخدر. ثم ، حقن جرعة من سم السعال الديكي داخل الصفاق في اليوم صفر والثاني بعد التحصين. أظهرت جميع الفئران مرضا أحادي الطور حادا ، يتميز بذروة واحدة من الإعاقة التي لوحظت في 14 إلى 17 يوما ، يليها انتعاش جزئي للأعراض خلال الأيام العشرة التالية.
أظهرت الفئران المحصنة ب M.paratuberculosis بداية مبكرة بعد التحصين وشدة أكبر في المرحلة الحادة. أظهرت كلتا المجموعتين أوزان جسم متشابهة. أظهر اختبار الانتشار مع دمج الثيميدين المعاير الذي تم إجراؤه على خلايا طحال الفئران EAE استجابة تكاثرية قوية للببتيد MOG 35-55 ، ولكن ليس للألبومين البيضاوي.
أظهر تحليل قياس الخلايا الفلورية زيادة الخلايا اللمفاوية التائية والخلايا المتغصنة والوحيدات في طحال فئران EAE المحصنة ضد السل مقارنة بالفئران المحصنة ضد CFA. كشف تحليل أنسجة الهيماتوكسيلين واليوزين عن تسلل التهابي أحادي النواة نموذجي في الدماغ والحبل الشوكي.
