للبدء ، قم بإعداد التجربة والمواد اللازمة لتركيب الزرد وتحديد المواقع. تحت المجهر المجسم ، راقب يرقة الزرد المشلولة للتحقق من توقف حركتها. تقييم صحة اليرقات بصريا عن طريق التحقق من نبضات قلبها.
ثم ، باستخدام ماصة نقل ، ضع يرقة واحدة من الزرد في أنبوب الطرد المركزي الصغير سعة 1.5 ملليلتر الذي يحتوي على هلام الأغاروز. صب هلام الأغاروز في طبق بتري لصنع معطف من واحد إلى ملليمترين. نقل اليرقة من أنبوب الطرد المركزي الصغير إلى طبق بتري باستخدام ماصة نقل.
تأكد من وضع اليرقة في وسط الطبق. باستخدام ملقط ، ضع اليرقة في الاتجاه المطلوب بحيث يكون الرأس والذيل مسطحين. ثم ، باستخدام ملقط ، قم بتدوير اليرقة لتسوية كلتا العينين.
بعد اكتمال المحاذاة ، انتظر حتى يتجمد هلام الأغاروز قبل ملء طبق بتري بماء البيض. ضع الطبق مع اليرقة المضمنة على مرحلة المجهر للحصول على الصور. قم بتشغيل المجهر وحدد موقع اليرقة في وسط مجال الرؤية.
باستخدام برنامج الحصول على الصور ، اضبط معلمات التصوير. إذا كانت الصورة مشبعة ، فقم بتقليل طاقة الليزر. بعد ذلك ، ابحث عن دماغ اليرقة عن طريق تحريك المرحلة ، وحدد سمكها باستخدام وضع العرض المباشر في البرنامج عن طريق تغيير المستويات البؤرية يدويا لأعلى ولأسفل.
اضبط الحدود الدنيا والعليا لمستوى الصوت. ثم تابع الحصول على الصورة لحقل الرؤية المحدد. للتصوير الهيكلي الحجمي ، احصل على صورة 3D للدماغ بأكمله عن طريق الحصول على صور 2D لكل طائرة Z بالتتابع.
للتصوير الوظيفي لطائرة Z واحدة ، احصل على صور متسلسلة زمنية للنشاط العصبي للدماغ على عمق معين.
