In Vivo Visible Light Optical Coherence Tomography (OCT) Mouse Retinal Imaging

ابدأ بوضع الماوس المخدر على حامل وتثبيته بحزامين فيلكرو. قم بتشغيل الكمبيوتر وافتح البرنامج لتنشيط الليزر. اضبط حامل لتوسيط الليزر في عين الماوس.

تصور الجزء الخلفي من خلال معاينة على الوجه ، ومجال رؤية الضفيرة الوعائية السطحية ، والمسح B ، والمقطع العرضي للشبكية داخل مجال الرؤية. احصل على التصوير المقطعي للتماسك البصري للضوء المرئي ، أو حجم OCT بعد إجراء تعديلات طفيفة على التركيز البصري. قم بمحاذاة رأس العصب البصري في كل زاوية من الزوايا الأربع لمجال الرؤية لتغطية مناطق الشبكية المختلفة.

استخدم طريقة عتبة قائمة على الشدة للكشف عن سطح الشبكية ، وتوليد جرامات ألياف OCT من الحجم. قم بقص طبقة الألياف العصبية في شبكية العين ، أو RNFL ، عن طريق اختيار أول عمق 16 ميكرومتر. بعد ذلك ، احسب متوسط الشدة على طول الاتجاه المحوري لتوليد صورة جرام الألياف المكونة من حزم محور خلية العقدة العقدية الشبكية والأوعية الدموية المحيطة.

قم بمحاذاة الأوعية الدموية باستخدام محرر رسومات لمونتاج الصور الأربع بعد المعالجة. تمت مقارنة جرام الألياف المركب مقابل OCT مع الصورة البؤرية المقابلة لشبكية العين المثبتة بشكل مسطح والمناعية مع TUJ1 لمحاور RGC. تظهر الأوعية الدموية هياكل متفرعة مميزة يمكن مطابقتها مع الأوعية الدموية المسماة ICAM II على الصورة متحدة البؤر.

كشفت المقارنة جنبا إلى جنب بين الفحص المجهري متحد البؤر خارج الجسم الحي وفي الجسم الحي مقابل OCT عن شبكات حزمة RGC exon متطابقة والأوعية الدموية المحيطة بالشبكية.