Arteriovenous Blood Sampling Technique in Mice Using Sulzer's Vein and Left Ventricle for Metabolomic Analysis

للبدء ، ضع الماوس على صينية تشريح مجهزة بمخروط الأنف لتوصيل التخدير. تحقق من ردود فعل ، مثل تراجع المخلب ، للتأكد من أن التخدير قد وصل إلى عمق مناسب. ثم ضع الماوس لكشف الجلد الظهري.

بللي البشرة بكمية وافرة من الإيثانول بنسبة 70٪ لمنع انفصال الشعر. قم بعمل شق على طول الظهر ، بدءا من الجزء السفلي من الصدر وقم بتمديده حتى الرقبة. باستخدام ملقط الطرف المثني ، ارفع الأنسجة الدهنية البنية بين الكتفين برفق واقطع الأنسجة المرفقة بعناية.

ارفع وسادة الدهون باتجاه الرأس واستمر في قطع الأنسجة المرفقة لفتح المنطقة بعناية حتى ينكشف وريد سولزر. الآن ، قطع بعناية الوريد سولزر. باستخدام طرف ماصة 200 ميكرولتر وماصة P100 ، اجمع ما يقرب من 40 ميكرولترا من الدم وقم بتخزين الدم الذي تم جمعه في أنبوب جمع الدم.

احتفظ بالأنبوب على الثلج حتى عملية جمع المصل. بللي الجلد البطني بسخاء ب 70٪ إيثانول لمنع انفصال الشعر. باستخدام المقص ، افتح التجويف الصدري بعناية لفضح القلب.

باستخدام حقنة واحدة ملليلتر مجهزة بإبرة قياس 29 نصف بوصة ، ثقب بدقة منطقة قمة البطين الأيسر. أدخل ثلثي الإبرة حوالي ثلاثة إلى خمسة ملليمترات إلى الأفقي الأيمن لقمة القلب، واسحب المحقنة للخلف لجمع الدم من البطين الأيسر. ثم ، أجهزة الطرد المركزي عينات الدم في 10،000G لمدة 10 دقائق عند أربع درجات مئوية.

باستخدام ماصة ، وجمع طاف والمضي قدما في استخراج المستقلب والتحليل.