للبدء ، قم بتوزيع الفئران التي يكون تجويفها الفموي سلبيا لنمو المبيضات بشكل عشوائي إلى تسع مجموعات ، كل منها يتوافق مع تركيز مختلف من الكركمينويدات مع أو بدون ضوء. في اليوم الأول ، حقن تحت الجلد المخدرات بريدنيزولون المثبطة للمناعة لجميع أعضاء المجموعات. توفير هيدروكلوريد التتراسيكلين بتركيز 0.83 ملليغرام لكل ملليلتر في مياه الشرب من اليوم الأول حتى نهاية التجربة.
في اليوم الثاني ، يتم تطبيق كلوريد الكلوربرومازين عن طريق الحقن العضلي على كل عضلة فخذ لتخدير الفأر للتلقيح داخل الفم. بعد ذلك ، اغمر مسحة معقمة في تعليق موحد طازج من المبيضات البيض. بعد وضع الماوس في وضع ضعيف ، فرك لسانه بمسحة مبللة لمدة 30 ثانية.
في اليوم الخامس، يتم تطبيق حقنة مجانية تحت الجلد من بريدنيزولون للحفاظ على كبت المناعة. في اليوم السابع ، قبل العلاج ، ضع الماوس المخدر في وضع ضعيف على جهاز PAD مزود بخيوط. قم بلف الخيط حول القواطع لإبقاء الفم مفتوحا.
قم بتوزيع 70 ميكرولترا من المحسس الضوئي على ظهر لسان كل فأر ينتمي إلى مجموعات C + L +. بعد ذلك ، حرك اللسان مرة أخرى داخل تجويف الفم واحتفظ بالماوس في بيئة مظلمة لمدة 20 دقيقة كفترة ما قبل التشعيع. بعد فترة التحسس الضوئي ، ضع جهاز LED على ظهر اللسان وقم بإضاءته لمدة سبع دقائق.
ضع المحسس الضوئي على مجموعات C + L كما هو موضح واحتفظ بالفئران في الظلام لمدة 27 دقيقة. مباشرة بعد العلاج مسحة الظهر من اللسان لمدة دقيقة واحدة ، وذلك باستخدام مسحة القطن معقمة لاسترداد المبيضات البيض من اللسان. ضع كل عينة مسحة في أنبوب يحتوي على ملليلتر واحد من المحلول الملحي المعقم والدوامة لمدة دقيقة واحدة لإعادة تعليق الخلايا الميكروبية.
دون تأخير ، قم بإجراء تخفيفات تسلسلية بعشرة أضعاف في PBS ولوحة 25 ميكرولتر من القسمة على ألواح Sabouraud Dextrose Agar في نسختين. احتضان الألواح هوائيا عند 37 درجة مئوية لمدة 48 ساعة. بعد 48 ساعة ، استخدم عداد مستعمرة رقمي لتحديد عدد مستعمرات الخميرة.
حساب حمولة المبيضات البيض لكل. في اليوم الثامن ، بعد القتل الرحيم للحيوان بشكل صحيح ، تابع إزالة اللسان جراحيا ، وقم بإزالة اللسان قبل الحليمات المحيطة لضمان إزالة اللسان بالكامل. أخيرا ، تابع التحليل النسيجي المرضي للسان المعزول.
أظهر نموذج الفئران لداء المبيضات الفموي بقعا بيضاء نموذجية وأغشية زائفة على لسان الفئران المصابة. قلل العلاج الضوئي الديناميكي المضاد للميكروبات من صلاحية المبيضات البيضاء عند تركيز 80 ميكرومولار كوركومينويدس. أظهرت ألسنة غير المصابة أنسجة صحية طبيعية ، بما في ذلك: الصفيحة المخصوصة السليمة ، والغشاء القاعدي ، والحليمات الخيطية.
في مجموعة C-L ، لوحظت الخميرة والخيوط في الطبقة الظهارية الكيراتينية. كانت هناك استجابة التهابية خفيفة في النسيج الضام الأساسي. في المقابل ، كان لدى الفئران التي عولجت بالعلاج الضوئي الديناميكي المضاد للميكروبات بوساطة 80 ميكرومولار كوركومينويدات خلايا فطرية أقل في الطبقة الكيراتينية من ظهارة اللسان.
