الحقن داخل العقد لخلايا B16F10-GP في العقدة الليمفاوية الأربية للفئران

ابدأ بشفط 20 ميكرولترا من معلق خلايا سرطان الجلد B16F10-GP باستخدام حقنة أنسولين 100-U. إزالة فقاعات من حقنة. بعد ذلك ، في الفأر الذي خضع لجراحة استئصال الورم ، قم بحقن تعليق الخلية في عقدة ليمفاوية إربية واحدة.

أدخل الإبرة من الطرف البعيد للعقدة الليمفاوية وحركها ببطء إلى مركز العقدة الليمفاوية. لاحظ تورما كبيرا في العقدة الليمفاوية يوضح أن السائل يتم حقنه بدقة. حقن حجم متساو من PBS في العقدة الليمفاوية الأربية على الجانب الآخر.

خياطة شق باستخدام خياطة 3-0. تطهير الجلد المحيط بالجرح مع اليود البوفيدون ، ثم ضع الماوس في قفص نظيف والحفاظ على الدفء باستخدام ضوء الأشعة تحت الحمراء. حافظ على الماوس في وضع الاستلقاء الجانبي وراقبه باستمرار حتى يتم استعادة الوعي.

بعد الزرع بخلايا B16F10-GP ، لوحظ ورم خبيث في العقدة الليمفاوية عن طريق تلطيخ الهيماتوكسيلين ويوزين. في المرحلة المبكرة ، أظهرت العقدة الليمفاوية النقيلي احتلالا جزئيا للخلايا السرطانية مع بعض المناطق التي لا تزال تحتوي على خلايا ليمفاوية غير متأثرة. بحلول المرحلة المتأخرة ، كانت العقدة الليمفاوية النقيلي مليئة بالخلايا السرطانية مصحوبة بتكوين الأوعية الدموية للورم.

علاوة على ذلك ، كان تواتر الخلايا التائية الإيجابية CD8 الخاصة بالمستضد في الدم المحيطي 2.81٪ في المرحلة المبكرة ، والتي انخفضت إلى 1.48٪ في المرحلة المتأخرة. ومن المثير للاهتمام ، في حين أن النسبة المئوية للخلايا التائية الإيجابية CD8 ظلت مستقرة في الغدد الليمفاوية غير النقيلية ، فقد تم تعزيزها بشكل عابر في العقدة الليمفاوية النقيلي في المرحلة المبكرة ، لكنها انخفضت بشكل حاد في المرحلة المتأخرة.