للبدء ، قم بإعداد الفئران المخدرة للإجراء الجراحي. باستخدام المقص الجراحي ، شق الجلد على طول مركز المنطقة المحلوقة من الرأس لكشف الجمجمة. بعد ذلك ، نظف الجمجمة بقطعة قطن معقمة باستخدام بيروكسيد الهيدروجين المخفف لمدة ثانية إلى ثلاث ثوان وجفف الجمجمة بقطعة قطن معقمة جديدة.
لمحاذاة الجمجمة إلى الأمام والخلف ، قم بقياس العمق البطني الظهري عند bregma و lambda. باستخدام bgma كنقطة انطلاق ، حدد موقع المنطقة المطلوبة على القشرة وقم بتمييزها. بعد ذلك ، استخدم مثقاب trephine ومثقاب الأسنان لكشف القشرة.
تأكد من أن زاوية لقمة الحفر متعامدة مع انحناء الجمجمة لتحقيق حج القحف بشكل متساو ومنع التلف. حفر حتى يشعر انخفاض في المقاومة ، ثم وقف عملية الحفر. باستخدام طرف إبرة قياس 23 ، قم بإزالة جزء العظم المنفصل بعناية.
الآن ، نظف القشرة المكشوفة برغوة جراحية مبللة ب ACSF البارد لإزالة أي حطام ووقف أي نزيف. قم بعمل شق لتسهيل إدخال المنشور الدقيق وتخفيف الضغط في القشرة. قم بتوصيل السكين الجراحي بالحامل الموجود على الذراع التجسيمي وقم بتوجيه الشفرة ، أو الذراع التجسيمي لقطع المحور الجانبي الإنسي.
الآن ، حرك السكين إلى الإحداثي الخلفي الأمامي المطلوب. ثم حرك السكين إلى الحافة الإنسية لحج القحف وقم بخفضه ببطء حتى يلامس العظم. استخدم المعادلة المعطاة لتحديد عمق الشق المقطوع مسبقا من سطح الجمجمة.
تأكد من أن طول الشق أكبر من ملليمتر واحد. من الناحية المثالية ، يجب أن يكون حوالي 1.2 ملم. حرك السكين من الحافة الإنسية لحج القحف إلى الإحداثيات الإنسية الأولية للشق ، واخفض السكين ببطء إلى القشرة.
بعد ثقب الجافية ودخول القشرة ، ضع قطرة من ACSF البارد للحفاظ على الأنسجة مشحمة ورطبة. بمجرد الوصول إلى العمق النهائي ، حرك السكين على طول المحور الجانبي الإنسي. إذا سحب المنديل بالسكين ، حرك السكين لأعلى ولأسفل عدة مرات للتأكد من قطع المنديل.
ثم استمر في التحرك بشكل جانبي مع إعادة السكين إلى عمقه النهائي. عند الانتهاء ، ارفع السكين ببطء. إذا ظهر دم ، فقم بتنظيف موقع الشق باستخدام رغوة جراحية مبللة ب ACSF لتخفيف الدم وإزالته.
ضع رغوة مشبعة فوق القشرة المكشوفة حتى تصبح جاهزة لإدخال المنشور الدقيق. قم بتوصيل المنشور الدقيق بمجموعة الزرع. تأكد من أن جانب التصوير من المنشور مقابل برغي لوحة القاعدة.
قم بتوصيل المنشور الدقيق بالإطار التجسيمي وقم بتوجيهه ليتماشى مع الشق. قم بخفض المنشور الدقيق ببطء في موقع الشق. قم بإزالة ACSF في البداية ، ولكن بمجرد أن يصبح المنشور في القشرة ، اغسله باستخدام ACSF البارد.
إذا لزم الأمر ، أضف ACSF إضافيا وقم بتحريك القشرة عن طريق تحريك المنشور لأعلى ولأسفل. قم بتغطية المنطقة القشرية المكشوفة والعدسة بطبقة واقية من لاصق السيليكون لتقليل المادة اللاصقة الزائدة على الجمجمة المحيطة والمنظار الوهمي. الآن ، ضع لوحة الرأس للخلف لوضع الغرسة بشكل صحيح في تطبيق الأسمنت.
قم بمحاذاة خط الوسط للوحة الرأس قليلا على يمين حج القحف المقترح لضمان إمكانية تأمين كلا الجانبين أثناء تجارب تثبيت الرأس. بعد ذلك ، امزج مغرفة واحدة من مسحوق الأسمنت غير الشفاف مع أربع قطرات من وسط الخلط ، وقطرة واحدة من المحفز لتحضير الأسمنت اللاصق للأسنان. ضع الأسمنت على لوحة الرأس والجمجمة ، وثبت لوحة الرأس في مكانها حتى يعالج الأسمنت.
ضع الأسمنت اللاصق لتغطية الجمجمة والأنسجة المكشوفة ، مع دمج المنشور الدقيق ولوحة الرأس حتى تستقر. حرك الذراع المجسمة لأعلى مع تثبيت المنشور المجهري بالملقط لفصل المجهر الوهمي. ضع الغطاء الواقي على العدسة وقم بتثبيته عن طريق شد المسمار.
أظهرت الخلايا العصبية للحيوانات التي تستكشف ساحة مفتوحة في الظلام مستويات مماثلة من التألق ومعدلات إطلاق النار في الجلسات التي كانت تفصل بينها ثلاثة أسابيع.
