تلطيخ كيميائي مناعي فلوري متعدد الفلورسنت لأقسام الأنسجة السرطانية

للبدء ، احصل على شرائح معدة مسبقا تحتوي على أقسام الأنسجة السرطانية. تحضير خليط العمل من الأجسام المضادة الأولية. أضف مركب الأجسام المضادة إلى قسم الشريحة واحتضانه لمدة ساعة في درجة حرارة الغرفة.

ثم اغسل الشريحة ثلاث مرات باستخدام 0.1٪ Tween PBS لمدة خمس دقائق. تحضير خليط الأجسام المضادة الثانوية الفلورية. أضفه قطرة على الشريحة واحتضانه في درجة حرارة الغرفة لمدة ساعة واحدة.

ثم قم بإجراء جولة ثانية من حضانة الأجسام المضادة الأولية في درجة حرارة الغرفة لمدة ساعة واحدة. اغسل الشريحة ثلاث مرات باستخدام 0.1٪ Tween PBS لمدة خمس دقائق لكل منها. وباستخدام ورق الترشيح ، قم بإزالة الماء الزائد من محيط الأنسجة.

وبالمثل ، قم بإجراء جولة ثانية من حضانة الأجسام المضادة الثانوية وغسلها كما هو موضح سابقا. الآن ، أضف كاشف برمنجنات البوتاسيوم إلى الأنسجة. بعد دقيقة واحدة ، شطفه بالماء الجاري لمدة خمس دقائق.

أداء الجفاف مع زيادة تركيزات الكحول. أخيرا ، أضف DAPI لتغطية قسم الأنسجة بالكامل ووضع قسيمة غطاء للتصوير متعدد الأطياف. أشار التصوير المناعي المتعدد إلى وجود خلايا CD ثلاثة إيجابية ، CD ثمانية إيجابية ، CD 20 خلايا إيجابية في أنسجة نقائل الدماغ لسرطان الرئة.