للبدء ، احصل على فيروس موضح من الخلايا المستزرعة. ضع أنابيب الطرد المركزي الفائقة في رف على جانب الإخراج للمضخة التمعجية متعددة القنوات. باستخدام ماصة مصلية ، قم بتوزيع 10 ملليلتر من الفيروس الموضح بعناية في كل أنبوب طرد مركزي فائق.
ثم انقل 22 ملليلترا من جزء اليوديكسانول 15٪ إلى أنبوب مخروطي نظيف سعة 50 ملليلتر. ضع الشعيرات الدموية على الجانب الأيمن من المضخة في الأنبوب وابدأ المضخة. أوقف المضخة.
عندما يصل جزء اليوديكسانول إلى نهاية الشعيرات الدموية على جانب الإخراج من المضخة ، أدخل شعرية الإخراج في كل أنبوب طرد مركزي فائق مع فيروس موضح وابدأ المضخة. أوقف المضخة عندما يكون آخر جزء من 15٪ على وشك أن يؤخذ إلى الشعيرات الدموية المدخلة. بعد ذلك ، انقل 22 ملليلترا من جزء اليوديكسانول 25٪ إلى الأنبوب المخروطي 15 ملليلتر.
بعد تشغيل المضخة ، دع الكسر بأكمله يؤخذ إلى الشعيرات الدموية المدخلة وأوقف المضخة. إذا لزم الأمر ، أضف المزيد من الكسر بنسبة 60٪ ، واملأ كل أنبوب حتى تصنع المحللة قبة فوق القمة ولكنها لا تفيض. أوقف المضخة وقم بإزالة الشعيرات الدموية الناتجة بعناية.
قم بتغطية أنبوب الطرد المركزي الفائق بفاصل وقم بتحميله في دوار من النوع 70 TI. بعد الطرد المركزي ، قم بتثبيت أنبوب الطرد المركزي الفائق بحامل دعم. باستخدام منديل خال من النسالة ، قم بإزالة الغطاء من أنبوب الطرد المركزي الفائق.
بعد ذلك ، قم بتوصيل إبرة قياس 20 بحقنة 5 ملليلتر واخترق جدار أنبوب الطرد المركزي الفائق بالإبرة حوالي 3 ملليلتر أسفل واجهة 40 و 60٪ يوديكسانول. استنشاق ببطء الواجهة وجزء من جزء 40٪. أمسك إصبعا واحدا على الجزء العلوي المفتوح من أنبوب الطرد المركزي الفائق ، واسحب المحقنة وانقل جزء AAV المستنشق إلى أنبوب مخروطي سعة 50 ملليلتر.
أخيرا ، قم بتخفيف جزء الفيروس المستنشق مرتين في المخزن المؤقت لتحلل AAV إلى حجم 40 ملليلتر. بعد شطف الأنبوب التمعجي ، قم بتحميل 20 ملليلتر من جزء AAV المخفف في أنبوب طرد مركزي فائق جديد للجولة الثانية من التجزئة.
