ابدأ بإزالة الطبق الذي يحتوي على HIEs متباينة من الحاضنة. لمزامنة الساعة الجزيئية للمعوية ، أضف ميكرولتر من 100 ميكرومولار ديكساميثازون إلى الطبق واحتضانه عند 37 درجة مئوية مع 5٪ ثاني أكسيد الكربون لمدة ساعة واحدة. أثناء الحضانة ، اضبط نسبة ثاني أكسيد الكربون ودرجة حرارة مقياس الإنارة على 5٪ و 37 درجة مئوية على التوالي.
بعد مزامنة الساعة ، قم بتجديد المعويدات بثلاثة ملليلتر من وسط تمايز الدفء الذي يحتوي على 200 ميكرومولار D-Lucifer. ضع الطبق على طاولة أطباق ثمانية بئر من مقياس الإنارة المحتضن وقم بتغطية طاولة أطباق العينة بغطاءها. ضع غرفتي ترطيب بمنديل مبلل أو إسفنجة أعلى طاولة أطباق العينة وأغلق غطاء الماكينة.
في برنامج التلألؤ الحيوي ، انقر فوق علامة تبويب الحالة لضبط الإعدادات لعدد الأطباق ووقت القياس ومعالجة الخلفية ونوع الفلتر. ثم انقر فوق "موافق" لحفظ الإعدادات. لبدء التجربة، انقر فوق علامة التبويب تشغيل، متبوعة بزر البدء.
ثم انقر فوق علامات التبويب التي تمت تصفيتها أو إلغاء توجيهها في الجزء العلوي من الشاشة لمراقبة إشارات البيانات المحددة. بعد التسجيل ، انقر فوق زر التوقف لإيقاف الجري. انتقل إلى علامة التبويب ملف ، وحدد حفظ باسم واحفظ البيانات بتنسيق Kronos.
أخيرا ، انقر فوق ملف وحدد تصدير بتنسيق Excel لتصدير البيانات إلى جدول بيانات. تقييم تسجيل التلألؤ البيولوجي لإيقاع الساعة البيولوجية ل HIEs تحت ظروف الخلايا الجذعية المخصبة والمحفزة للتمايز. كشف تحليل التحول السريع لمدة أربع سنوات أنه في ظل ظروف التمايز ، أظهر التلألؤ الحيوي B MAL واحد لوسيفيراز تذبذبات يومية قوية بمتوسط دورية يبلغ 22.92 ساعة.
في المقابل ، أظهرت HIEs إيقاعات يومية مضطربة في الظروف المخصبة بالخلايا الجذعية.
