تغليف الخلايا والجسيمات النانوية في قطرات للتصوير الفلوري

للبدء ، املأ حقنة ملليلتر واحدة ب 500 ميكرولتر من الطور المستمر. قم بتوصيل الأنابيب الدقيقة PTFE بإبرة قياس 27 مقاس 0.75 بوصة. قم بتركيب المجموعة على المحقنة ثم على مضخة المحقنة.

ثم قم بعمل ثقب باستخدام لكمة خزعة 0.75 ملم في منتصف فتحة PDMS. اسحب ما يقرب من ثلاثة سنتيمترات من أنابيب PTFE من خلال الفتحة الموجودة في الفتحة ، وادفع التجميع إلى الجزء العلوي من طرف ماصة سعة 200 ميكرولتر. أغلق الموصل بغراء قابل للشفاء بالأشعة فوق البنفسجية أعلى الماصة ، وقم بتوصيل الجانب الآخر من الأنبوب بإبرة قياس 23 مقاس 1.25 بوصة.

بعد ذلك ، املأ حقنتين سعة ملليلتر واحد ب 500 ميكرولتر من الزيت المعدني الخفيف. قم بتوصيل إبرتين قياس 23 مع الملحقات المصنوعة حسب الطلب وقم بتركيبها على مضخة المحقنة. باستخدام برنامج التحكم في مضخة المحقنة ، قم بنضح الجسيمات النانوية الوظيفية ومحلول الخلية في طرف الماصة للمراحل المائية.

بعد تنظيف غرفة المراقبة المعدة ، قم بتثبيت الغرفة في حامل الغرفة المطبوعة المجهز بمغناطيسين من النيوديميوم عند 30 درجة. الآن ، افتح كلا المنفذين وقم بتوصيل منشفة ورقية في المنفذ العلوي لامتصاص المرحلة الخارجية الزائدة أثناء التعبئة. قم بتوصيل المرحلة المستمرة بالمدخل العلوي لشريحة الموائع الدقيقة.

بعد ذلك ، اغسل الشريحة بالطور المستمر لمدة 30 ثانية تقريبا بمعدل تدفق 1800 ميكرولتر في الساعة. قم بتوصيل أطراف الماصة للمحاليل المائية بالمدخلين الأوسطين للرقاقة. ابدأ تدفق المحلول المائي عند 200 ميكرولتر في الساعة لكل محلول.

بمجرد ظهور السائل عند المخرج ، ابدأ تدفق طور الزيت المفلور عند 800 ميكرولتر في الساعة. انتظر حتى يتم إنشاء إنتاج قطرات مستقر ، يشار إليه بمحلول رمادي لامع متجانس في المخرج. ثم قم بتوصيل الأنابيب الدقيقة PTFE بمنفذ المخرج لجمع القطرات.

باستخدام وحدة الطويق لتركيب قطعة واحدة ضيقة الإصبع ، قم بتوجيهها إلى غرفة المراقبة. بمجرد ملء الحجرة ، أوقف التدفق وأغلق المنافذ باستخدام مقابس المنفذ باستخدام ضغط محكم الإصبع. بعد إنتاج القطيرات ، اغسل الشريحة بالزيت المفلور ، متبوعا بالنيتروجين ، لتفجير أي سائل متبقي.

قم بتركيب حامل الحجرة على المجهر باستخدام مرحلة تنسيق لوحة البئر. ثم ، باستخدام هدف 10x ، قم بتبديل المجهر إلى قناة برايتفيلد. ركز على القطرات المجمدة في الحقل الساطع ، وانتقل إلى وسط الغرفة.

بعد ذلك ، قم بتنشيط نظام التركيز الآلي. اضبط مستوى القياس على قناة برايت فيلد بحيث تظهر حواف القطيرات كدوائر سوداء حادة يمكن تمييزها بسهولة عن مرحلة الزيت والخلفية. انتقل من خلال كل قناة من قنوات التألق ، وتحديد مستوى القياس الأمثل لهم.

لقياسات النقل ، ركز على إجمالي الجسيمات النانوية في قنوات FITC و TRITC و Cyanine5.