للبدء ، رتب جميع المواد المطلوبة لجراحة الماوس على الطاولة الجراحية. ضع الماوس المخدر على الطاولة ، وتأكد من أن الوسادة تحت رقبته. تطهير موقع الجراحة عن طريق تناوب مسحات دائرية من البيتادين أو الكلورهيكسيدين والكحول ثلاث مرات لكل مطهر.
قم بإجراء قرصة إصبع القدم لتأكيد عمق التخدير. باستخدام الشريط الجراحي ، كبح جماح الأطراف الأمامية للماوس. تحت مجهر التشريح ، قم بعرض السطح البطني لعنق الماوس واضبط التكبير لمراقبة موقع الجراحة بشكل مريح.
بعد إجراء شق خط الوسط الطولي الذي يبلغ طوله سنتيمترا واحدا ، أدخل طرف المقص المغلق في الشق وافتحه برفق لإجراء تشريح حاد للنسيج الضام تحت الجلد ، ويفصل بين الغدتين اللعابيتين. بمساعدة ملقط ناعم ، اسحب الغدة اللعابية اليمنى برفق من خلال الشق للراحة على السطح الخارجي ، أو استخدم ضامنا خطافيا حادا لسحب الغدة اللعابية بشكل جانبي. استمر في التشريح الحاد للنسيج الضام حتى تظهر العضلات القصية الترقوية الخشائية وعضلات المعدة.
باستخدام ملقط ذو طرف زاووي ، استمر في التشريح الدقيق للنسيج الضام بالقرب من النهاية الذيلية للمثلث العضلي لكشف الوريد الوداجي والعصب المبهم والشريان السباتي المشترك أو CCA. استمر في تشريح النسيج الضام حول CCA من قاعدة المثلث العضلي إلى العضلة اللامية اللامية. استخدم كرات قطنية صغيرة للسيطرة على أي نزيف بسيط ولامتصاص السوائل المفرزة من الغدد اللعابية.
تشريح النسيج الضام لفصل CCA عن العصب المبهم ، مع الحرص بشكل خاص على تقليل التعامل مع العصب المبهم وتلفه. بعد تعبئة CCA ، ضع قطعة سنتيمتر واحد من خياطة 6-0 على القص وقم بتمرير ملقط الطرف المائل تحت CCA. باستخدام ملقط الطرف المائل في اليد اليمنى والملقط الدقيق في اليد اليسرى ، مرر الخيط إلى ملقط الطرف المائل وأمسك بالقرب من نهاية الخيط.
اسحب برفق نصف طول الخيط أسفل CCA. بعد وضع خياطة ثانية ، اربط كل خياطة بشكل فضفاض حول CCA دون شد العقد أو تقييد تدفق الدم. باستخدام ملقط الطرف المائل ، قم بإزالة النسيج الضام بعناية في الطرف العلوي من المثلث العضلي فوق العضلة اللامية لتحديد موقع CCA وتشعبه في الشريان السباتي الخارجي والشريان السباتي الداخلي.
ثم ضع قطعة من الخيط على القص وقم بإزالة النسيج الضام بعناية من جميع جوانب الشريان السباتي الخارجي بالقرب من التشعب. مرر الملقط ذو الطرف المائل تحت الشريان السباتي الخارجي. باستخدام الملقط الرفيع في اليد اليسرى ، مرر الخيط إلى الملقط ذي الطرف المائل في الفراغ بين الشريان السباتي الداخلي والخارجي واسحب نصف طول الخيط برفق.
اربط الخيط بشكل فضفاض حول الشريان السباتي الخارجي دون شد العقدة. لتحضير الإبرة المثنية ، أمسك إبرة قياس 33 نصف بوصة مع توجيه الشطبة لأعلى. أمسك طرف الإبرة بمحرك إبرة معقم وثنيها حوالي 30 إلى 40 درجة باتجاه شطبة.
شد عقدة الخيط حول الشريان السباتي الخارجي. ثم حرك الخيط السفلي على CCA نحو العضلة القصية الترقوية الخشائية قدر الإمكان ، وشد العقدة. ضع كرة قطنية على حافة التجويف لامتصاص السوائل المفرزة والدم أثناء الحقن.
أمسك المحقنة في اليد اليمنى والملقط الدقيق في اليد اليسرى ، أحضر الإبرة إلى الشريان مباشرة فوق الخيط السفلي على CCA. باستخدام الملقط الناعم ، اسحب الطرف السائب للخياطة السفلية برفق في اتجاه ذيلي لوضع مستوى منخفض من التوتر على CCA. أدخل الإبرة في CCA بعد الشطبة مباشرة وحرر التوتر ببطء من الخيط.
باليد اليسرى ، ادفع مكبس المحقنة لحقن المحلول الذي يحتوي على عامل الاهتمام أو التحكم ببطء. ثم أمسك الخيط العلوي المربوط بشكل فضفاض على CCA بالملقط الناعم وارفعه لثني الشريان. انزع الإبرة وضع المحقنة جانبا.
مع ملقط الطرف المائل في اليد اليمنى ، حافظ على الالتواء في الشريان وشد العقدة في الخيط العلوي على CCA. باستخدام كرات القطن ، تمتص أي دم متبقي داخل التجويف الجراحي. حدد موقع الحقن على CCA وحدد عدد الغرز اللازمة للإغلاق.
قم بري موقع الحقن وتجويف المنطقة المعزولة من CCA جيدا بمحلول ملحي معقم لإزالة الدم المتخثر. باستخدام ملقط الطرف المائل ، أمسك إبرة الخياطة 9-0 بالقرب من مياه الصرف الصحي. امسك الشريان واضغط برفق على جانبي CCA مع الملقط الرفيع.
ثم مرر الإبرة والخياطة عبر جانبي الشريان بعضة واحدة. لإغلاق موقع الشق بعقدة الجراح ، قم بإجراء ربط أداة بالملقط الدقيق والملقط ذو الطرف المائل باستخدام أربع رميات على الأقل. باستخدام الملقط الناعم ، قم بفك وإزالة الخيط حول الشريان السباتي الخارجي ، متبوعا بخياطة علوية على CCA لاستعادة الدورة الدموية.
قم بفك الخيط السفلي ببطء على CCA ، لكن لا تقم بفكه على الفور. بعد التأكد من إغلاق موقع الحقن بشكل كاف ، قم بإزالة خيوط CCA العلوية والسفلية. أعد وضع الغدة اللعابية في التجويف ، وباستخدام حزمة خياطة معقمة ، أغلق الشق بخياطة واحدة توضع كل ثلاثة إلى أربعة ملليمترات.
بعد الحقن داخل الشريان السباتي للخلايا الجذعية الوسيطة البشرية لنخاع العظم المسمى GFP ، كشفت الكيمياء المناعية لأقسام الدماغ عن وجود خلايا إيجابية ل GFP ، مما يشير إلى توجيه الخلايا الجذعية الوسيطة البشرية لنخاع العظم إلى الأورام الدبقية. لم يلاحظ أي فرق كبير في كفاءة توجيه الخلايا الجذعية الوسيطة البشرية GFP بين ربط CCA وإجراءات إصلاح CCA. كشف تشتت الخلايا الجذعية الوسيطة البشرية GFP داخل الورم عن عدم وجود فرق كبير بين متوسط عدد الخلايا الإيجابية ل GFP في الحقول عالية الطاقة بين ربط CCA ومجموعات إصلاح CCA.
