للبدء ، يتم حصاد هضم الدجاج المتجانس من أمعاء الدجاج المستخرجة في دوامة لمدة 10 إلى 15 ثانية. نقل العينة المتجانسة إلى الأنبوب الذي يحتوي على وسط التخصيب. بعد الحضانة ، استخدم خلاط دوامة لخلط الأنبوب المخصب جيدا لمدة 10 إلى 15 ثانية.
ثم انقل العينة المختلطة إلى وسط مرق معقم قبل الحضانة كما كان من قبل. بعد ذلك ، قم بتخفيف العينات بشكل متسلسل في محلول ملحي معقم ، بدءا من تخفيف واحد إلى 10 واستمر حتى تخفيف واحد إلى 1000. تجانس العينة جيدا على خلاط دوامة بعد كل تخفيف.
نقل ملليلتر واحد من العينة المخففة إلى طبق بتري تحت ظروف معقمة ولاهوائية. ثم صب 15 إلى 20 مل من وسط أجار الحد الأدنى المذاب في طبق بتري. حرك الطبق برفق لضمان خلط موحد.
عندما يصلب الآجار ، احتضن الأطباق في وضع مقلوب في محطة لاهوائية لمدة 24 ساعة. عند 39 درجة مئوية. يجب أن تظهر المستعمرات كنقاط مدمجة صغيرة متميزة في نهاية الحضانة.
الآن استخدم حلقة تلقيح معقمة لاختيار كل مستعمرة بكتيرية فردية بعناية. نقل المستعمرات إلى أنابيب منفصلة تحتوي على خمسة ملليلتر من الحد الأدنى من وسط مرق. زيادة التعكر في نهاية الحضانة يدل على نمو البكتيريا.
وقد لوحظت المستعمرات البكتيرية قادرة على استخدام ميو-اينوزيتول على الحد الأدنى من وسط أجار.
