للبدء ، احصل على أجنة من أنثى الفأر المتزاوجة حديثا. قم بإعداد 12 قطرة صغيرة من وسط البوتاسيوم البسيط المحسن في قاع طبق بتري 35 ملم. قم بتغطية القطرات الدقيقة بثلاثة إلى خمسة ملليلتر من الزيت المعدني ، وضع أطباق بتري في حاضنة عند 37 درجة مئوية مع 5٪ ثاني أكسيد الكربون لتحقيق التوازن.
باستخدام ماصة نقل ، انقل أجنة الفأر من وسط M2 إلى وسط KSOM. ضع الأجنة المغسولة في قطرات KSOM الدقيقة المحضرة ، واحتضنها عند 37 درجة مئوية مع 5٪ ثاني أكسيد الكربون لمدة أربعة أيام. حدد الكيسات الأريمية المفيدة وفقا لحجمها وكتلة الخلية الداخلية وعدد خلايا الأرومة الغاذية ودرجة التمدد.
أضف ملليلتر واحد من الجيلاتين 2٪ إلى طبق استزراع مكون من 12 بئرا ، واحتضانه عند 37 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة. ثم استنشق الجيلاتين الزائد ، واترك الجزء السفلي من اللوحة يجف تماما. قم بزرع خلايا سرطان بطانة الرحم الغدي البشري أو خلايا إيشيكاوا في صفيحة 12 بئرا المغلفة بالجيلاتين ، واحتضان اللوحة لمدة 24 ساعة.
ضع برفق خمسة إلى 15 كيسا أريميا طازجا في كل بئر من الصفيحة المكونة من 12 بئرا والتي تحتوي على الخلايا. بعد 48 ساعة ، راقب الأجنة تحت المجهر لتقييم حالة ارتباطها بعد تحريك اللوحة ثلاث مرات. سوف تطفو الأجنة غير المرتبطة أو تتدحرج على سطح الخلايا.
أخيرا ، احسب معدل زرع الجنين في وجود تركيزات مختلفة من هرمون الاستروجين. أظهرت النتائج أن التركيزات الفسيولوجية القريبة من 17 بيتا استراديول زادت من معدلات زرع الجنين مقارنة بالسيطرة دون 17 بيتا استراديول. ومع ذلك ، فإن التركيزات العالية جدا من 17 بيتا استراديول حوالي 100 نانومول قللت بشكل كبير من معدلات زرع الجنين.
