الحصول على عضويات المعدة البشرية المعدة مسبقا لتحديد درجة الحموضة. للبدء ، قم بتوصيل القطب المرجعي بكابل قطب الأس الهيدروجيني عبر الموصل. بعد ذلك ، قم بتوصيل القطب الصغير بمكبر الصوت ومكبر الصوت بجهاز كمبيوتر مؤرض باستخدام البرنامج عبر كابل USB.
ضع القطب الدقيق والقطب المرجعي في ماء منزوع الأيونات لغمر كلا الطرفين سنتيمترا واحدا على الأقل في السائل. املأ الأنابيب المخروطية سعة 50 ملليلتر بمخازن المعايرة المطلوبة. باستخدام مناديل مختبرية دقيقة ، امسح الأنبوب الواقي برفق مع القطب المرجعي.
بعد فتح البرنامج ، ضمن علامة تبويب المعايرة ، حدد مربع Y-Zoom ثم اضبط قراءة إشارة المستشعر على مللي فولت. بدءا من الأقطاب الكهربائية في المخزن المؤقت pH 4.01 ، أدخل 4.01 كقيمة pH المعروفة. حدد إضافة نقطة بمجرد استقرار قراءة المللي فولت ، ثم ضع كلا القطبين مرة أخرى في ماء منزوع الأيونات لشطفهما.
بعد تكرار عملية المخزن المؤقت الأس الهيدروجيني 9.21 ، انقر فوق إضافة نقطة عندما تكون الإشارة مستقرة عند حوالي 83 مللي فولت. تأكد من أن الأقطاب الكهربائية الدقيقة تستجيب خطيا بين الأس الهيدروجيني 4.01 و 9.21 لمنحنى معايرة من نقطتين. ضع علبة الحماية بعناية بشكل مسطح على المقعد واسحب العلبة بحركة سريعة وسريعة لإزالة القطب الكهربائي.
قم بتركيب القطب الدقيق على مناور دقيق ورتب المجسم والمناور الدقيق حتى يتمكن القطب الدقيق من التقدم نحو طبق الاستزراع بحرية. ضع طبق الاستزراع الذي يحتوي على المواد العضوية للتنميط. ثبت القطب المرجعي برفق بالمشبك الموجود على الحامل الحلقي على يسار المجسم.
تقدم بصريا طرف القطب الدقيق حتى يتم غمره بشكل كاف في الوسائط. بمجرد استقرار الإشارة ، سجل ثلاث قراءات لدرجة الحموضة للوسائط. بعد ذلك ، قم بدفع القطب الدقيق ببطء إلى ECM دون لمس أي عضويات.
سجل ثلاث قراءات على الأقل للأس الهيدروجيني لحساب المتوسط. ضع القطب الدقيق على طول المحور العمودي على السطح العضوي ، مما يؤدي برفق إلى مسافة بادئة طفيفة على السطح العضوي القاعدي دون اختراقه. تقدم بعناية microelectrode في العضوية وقياس درجة الحموضة اللمعية.
بعد الانتهاء ، تابع قياس الرقم الهيدروجيني للعضوي التالي. ضع القطب المراد تنظيفه مرة أخرى في أنبوب الحماية الخاص به. اغسل القطب بشكل متسلسل بالماء منزوع الأيونات والإيثانول والعازلة.
ضع القطب المرجعي في كأس زجاجية مملوءة بمحلول كلوريد البوتاسيوم ثلاثي المولات. ردم شعرية زجاجية سعة 2 ميكرولتر بزيت معدني معقم وقم بتحميلها على حاقن ذاتي نانولتر يتم التحكم فيه بواسطة micromanipulator. أخيرا ، املأه بمحلول يحتوي على 0.02٪ ميثيل أحمر و 150 مليمولار حمض الهيدروكلوريك وقم بإجراء الحقن ب 9.2 نانولتر من المحلول.
كان الاختلاف في الرقم الهيدروجيني اللمعي عبر 10 عضويات على نفس لوحة الاستزراع ضئيلا ، مع قياسات ثابتة حول 8.16. كان الرقم الهيدروجيني داخل اللمعة عبر خمسة خطوط عضوية مختلفة متسقا داخل كل ثقافة ، ولكن لوحظ تباين كبير بين الخطوط العضوية. كان الرقم الهيدروجيني اللمعي العضوي أقل باستمرار من ECMs والذي كان بدوره أقل من الرقم الهيدروجيني للوسائط ، مما يشير إلى أن الرقم الهيدروجيني اللمعي ذو صلة من الناحية الفسيولوجية ولا يتم تحديده فقط من خلال بيئة الثقافة المحيطة.
أكد حقن الميثيل الأحمر في التجويف العضوي أن الرقم الهيدروجيني أكبر من 6.2 ، بما يتفق مع قياسات الأقطاب الكهربائية الدقيقة التي أظهرت درجة حموضة شبه محايدة.
