تحضير مقاطع الأوراق شبه الرقيقة لفهم كفاءة التمثيل الضوئي بناء على الاختلافات التشريحية

ابدأ بقطع مقاطع من المناطق الوربية بجانب منتصف الأوراق من Triticum aestivum على طبق زجاجي. تأكد من أن طول القسم المقطوع يمتد على طول حبة الورقة. ثم ضع المادة النباتية في حقنة مع ملليلتر واحد من المخزن المؤقت للتثبيت.

امسك المحقنة عموديا. قم بإزالة الهواء وضخ المحقنة لإنشاء فراغ يمسك إصبعك على الحافة. بعد تنفيذ بروتوكول التسلل الكامل ، وفقا لتعليمات الشركة المصنعة للراتنج ، قم بتغطية تجاويف قالب التضمين المسطح براتنج 100٪ ، وضع العينات على أحد طرفي التجويف.

قم بإعداد ملصقات ورقية مكتوبة بالقلم الرصاص لكل عينة وضعها على الطرف الآخر من التجويف. قم بتصويب العينات والملصقات إذا تم نقلها. قم بتغطية القالب بفيلم التضمين والبلمرة في الفرن وفقا لإرشادات منتج راتنج الأكريليك.

ثم اضبط الكتلة المبلمرة مع العينة في حامل عينة الميكروتوم الفائق. باستخدام سكين زجاجي خشن ، قم بقص الكتلة حتى تصبح الأنسجة مرئية ويتم التخلص من الراتنج الزائد. بعد ذلك ، باستخدام سكين زجاجي أو ماسي يقطع المقاطع شبه الرقيقة بشكل عرضي.

باستخدام حلقة التلقيح المعدنية ، اجمع الأقسام من سطح الماء وضعها على شريحة زجاجية. جفف الشريحة على طبق ساخن لتثبيت الأقسام على الزجاج. وصمة عار المقاطع الثابتة مع التولويدين الأزرق لمدة خمس ثوان.

أظهرت المقاطع العرضية شبه الرفيعة من Triticum aestivum و Zea mays أن جميع أنسجة الأوراق كانت مرئية وقابلة للقياس. أظهر Zea mays تشريح الكرانس مع خلايا الميزوفيل حول الأوردة وأغلفة الحزمة المملوءة بالبلاستيدات الخضراء مما يسهل التبادل السريع للمستقلب.