قم بإجراء تصوير جزيء واحد في إعداد تجاري ، يجمع بين ملاقط بصرية مزدوجة الحزمة ومجهر متحد البؤر. استخدم قناة الحقن الأولى لمحاصرة الخرز ، والقناة الثانية لربط مركب بروتين الحمض النووي ، والقناة الثالثة للتحقق من وجود CMG والقناتين الرابعة والخامسة كخزانات للبروتين ومواقع تبادل عازلة. تدفق جميع الحلول إلى خلية التدفق عند ضغط ثابت قدره 0.5 بار في منفذ الحقن.
ثم قم بإيقاف تشغيل التدفق في القناتين الرابعة والخامسة. بعد تدفق جميع الحلول في البداية ، قلل الضغط إلى 0.2 بار. حرك ليزر الملائمة لتوجيه واحد حتى يتم التقاط حبة واحدة في كل مصيدة بصرية.
حرك الخرزات المحاصرة إلى القناة الثانية عن طريق تحريك عصا التحكم أثناء الضغط على الزناد. باستخدام عصا التحكم دون الضغط على الزناد ، قم بصيد مركب DNA CMG عن طريق تحريك الخرزة اليمنى باتجاه الخرزة اليسرى وبعيدا عنها حتى يتم احتجاز حبل الحمض النووي. انقل الخرزات إلى القناة الثالثة وأوقف التدفق على الفور في جميع القنوات.
اضبط طاقة الليزر 561 نانومتر على أربعة ميكرووات في لوحة ليزر الإثارة ثم قم بإجراء مسح اختبار إطار واحد للحمض النووي في القناة الثالثة. إذا كان موجودا ، فسيظهر CMG كنقاط محدودة حيود ثنائية الأبعاد. في هذه الحالة، انقل حبل الحمض النووي إلى القناة الرابعة أو الخامسة للتصوير.
خلاف ذلك ، أعد تشغيل التدفق ، وتجاهل الخرز وكرر الخطوات. في القنوات الرابعة أو الخامسة ، أدخل اثنين من piconewtons في لوحة التحليل الطيفي للقوة ، وانقر فوق زر التمكين لبدء مشبك القوة. بمجرد أن يصل التوتر الأولي إلى اثنين من piconewtons ، قم بتعطيل مشبك القوة قبل التصوير بالنقر مرة أخرى على زر التمكين في لوحة التحليل الطيفي للقوة.
انقر فوق الزر بدء المسح الضوئي في لوحة مسح الصور. صورة CMG الفلورية كل خمس ثوان باستخدام ليزر 561 نانومتر بقوة أربعة ميكرووات كما تم قياسه عند الهدف. في تفاعل خال من التجميع ، ظهر CMG كنقاط حيود منفصلة ومتناظرة محدودة تزدحم بشكل ضئيل الحمض النووي.
على العكس من ذلك ، فإن المجاميع أقل تميزا ، وأحيانا تكون النقط غير المتماثلة تزدحم بطول أكبر من الحمض النووي. إذا تم تنفيذ الفحص بنجاح وتم تحقيق نقاء عال للبروتينات المنقاة ، يمكن ملاحظة حركة طويلة المدى ل CMG في وجود ATP.
