تحضير مجموعة خلايا تدفق البيوتين-PEG للفحص المجهري الفلوري للانعكاس الداخلي الكلي لجزيء واحد

لتحضير خلية التدفق ، قم بقص زلة غطاء ربط البيوتين إلى النصف. قم بإعداد قطع زجاجية صغيرة عن طريق حفر شريحة زجاجية وقطعها إلى قطع 2.4 سم × سنتيمتر واحد تقريبا. باستخدام مثقاب مطلي بالماس مقاس 0.8 ملم ، قم بحفر فتحتين ، على بعد 1.4 ملم ، في القطع الزجاجية.

اختبر الثقوب عن طريق إدخال أنابيب مدخل أو مخرج. قطع شريط على الوجهين بنفس شكل القطع الزجاجية. قم بمحاذاة الشريحة على الشريط وطعن إبرة من خلال كل ثقب لتحديد مواقعها على الشريط.

باستخدام شفرة حلاقة ، قم بقطع قناة تشمل كلا الفتحتين. نظف القطعة الزجاجية بالأسيتون. جفف القطعة الزجاجية بالمناديل الورقية وضعها على سطح نظيف.

ثم انزع جانبا واحدا من الشريط اللاصق وألصقه على القطعة الزجاجية بحيث يكون كلا الفتحتين داخل القناة بالكامل. باستخدام طرف ماصة P1000، اضغط بقوة على الشريط لإغلاق الشريط بالقطعة الزجاجية. قشر الجانب الثاني من الشريط لكلتا القطعتين الزجاجيتين.

رتبي الشرائح على سطح نظيف بحيث يكون الجانب اللزج متجها لأعلى. باستخدام ملاقط بلاستيكية ، التقط غطاء ربط البيوتين النصفي من الحافة وقم بخفض الجانب الوظيفي للوتد على المادة اللاصقة. اضغط على زلة الغطاء بإصبعك لتثبيتها في مكانها.

افركي سطح انزلاق الغطاء باستخدام طرف ماصة بضغط معتدل لإزالة فقاعات الهواء. ثم اقلب خلية التدفق. لكل خلية تدفق ، قم بقطع ما يقرب من 10 سم من أنابيب البولي إيثيلين 20 و 60.

قم بقص طرف الأنبوب بزاوية أقل من 45 درجة ، وأدخل الأنبوب في الفتحات الموجودة في الشريحة. إذا كان القطر بالكامل صحيحا ، فإن الأنبوب يقف في الحفرة من تلقاء نفسه. اخلطي مكونات الايبوكسي جيدا.

استخدم طرف ماصة P200 لوضع الإيبوكسي حول الأنبوب وكل قطعة زجاجية. اترك الإيبوكسي يشفى لمدة 30 إلى 60 دقيقة.