للبدء ، اغسل بذور الصنوبر المعتمدة في ماء الصنبور الجاري لإزالة الحطام الأكبر. ثم اغسل الحطام الدقيق باستخدام محلول منظف شائع مع تحريض قوي. في غطاء التدفق ، أضف محلول مبيض تجاري حتى يتم تغطية البذور واخلطها بقوة لمدة 15 دقيقة.
بعد التخلص من محلول التبييض ، اشطف البذور ثلاث مرات بماء الصنبور المعقم. الآن اغمر البذور في 80٪ من الإيثانول لمدة 15 دقيقة مع تحريض قوي. بعد التخلص من الإيثانول ، اغسل البذور ثلاث مرات بماء معقم فائق النقاء.
لإنبات الصنوبر ، قم بكسر طبقات البذور المعقمة بمخرطة ميكانيكية معقمة. اعزل الصنوبر وضعه في وعاء مغلق بورق ترشيح مبلل معقم لترطيبه طوال الليل. في اليوم التالي ، قم بتقسيم الصنوبر الرطب إلى طبقات عند أربع درجات مئوية لمدة سبعة أيام لكسر السكون ومزامنة الإنبات.
ثم احتفظ بالصنوبر في الظلام عند 25 درجة مئوية حتى الإنبات. انقل أشجار الصنوبر النابتة المعقمة إلى ظروف بيئية خاضعة للرقابة لمدة أسبوعين ، أو حتى يبدأ الجذع الرئيسي في النمو. بعد أسبوعين ، قم بقص الجزء الجوي من الشتلات فوق الجذر بمشرط ونقله إلى وسط استزراع Schenk Hildebrandt المعقم.
الحفاظ على الثقافة في ظروف بيئية خاضعة للرقابة كما هو موضح سابقا. الزراعة الفرعية بشكل دوري عن طريق قطع الأنسجة القاسية في قاعدة اللقطة بمشرط معقم. انقل مجموعة البراعم باستخدام ملاقط معقمة إلى وسط ثقافة الضرب الجديد.
بعد ذلك ، قم بتلقيح البراعم الدقيقة في وسط استزراع Schenk Hildebrandt الذي يحتوي على ثلاثة جرامات لكل لتر من الفحم المنشط لاستطالة الساق الدقيقة. الآن ضع البراعم الممدودة في وسط استزراع Schenk Hildebrandt بدون هرمونات نباتية أو فحم منشط. أضف 100 إلى 150 من الديدان الخيطية المعقمة من خشب الصنوبر في مرحلة الحياة المختلطة في الجزء السفلي من microshoot.
الحفاظ على الثقافة في ظروف بيئية خاضعة للرقابة كما هو موضح سابقا. أظهر إنشاء براعم الصنوبر في المختبر والإصابة بظهور إبر صفراء في غضون شهر من الزراعة المشتركة مع الديدان الخيطية من خشب الصنوبر.