للبدء ، قم بإعداد اللقاح لدراسة حركية نمو Chlorella sorokiniana و Haematococcus pluvialis قم بإعداد الحجم المطلوب من وسط الاستزراع المعقم وفقا للإجراءات المعملية القياسية. قم بتكوين مصدر الضوء لكل من المفاعل الضوئي والقارورة إلى طيف الألوان المطلوب. قم بتغطية كلا النظامين لمنع تداخل الضوء الخارجي.
بعد ضبط إعدادات الفترة الضوئية ، قم بتوصيل نظام مدة ثاني أكسيد الكربون بالمفاعل الضوئي الحيوي لتوفير ثاني أكسيد الكربون لمدة 12 ساعة إلى الكلوريلا. بعد ذلك ، قم بتلقيح وعاء الاستزراع لتحقيق كثافة خلية تبدأ تبلغ 300 ، 000 خلية لكل مليلتر أو كثافة بصرية تبلغ 0.180 عند 550 نانومتر. أخذ عينات من المزرعة على فترات منتظمة مدتها 12 ساعة من أجل Chlorella sorokiniana وثماني ساعات للمكورات الدموية البلوفياليس.
ضع 40 مل من العينة في أنبوب طرد مركزي مخروطي بلاستيكي. قم بالطرد المركزي للأنبوب عند 3000 جم لمدة 20 دقيقة عند 15 درجة مئوية. صب المادة الطافية وإضافة ثلاثة ملليلتر من محلول الأسيتون النقي بنسبة 90٪ لإعادة تعليق الخلايا ، ثم انقل الخلايا إلى أنبوب زجاجي مغطى بورق الألمنيوم لمنع الأكسدة والخلط باستخدام دوامة.
قم بتقطيع العينة المعلقة في حمام جليدي لمدة دورتين مدة كل منهما خمس دقائق ، واترك العينة ترتاح عند أربع درجات مئوية لمدة 16 ساعة. بعد الراحة ، قم بصوتنة العينة مرة أخرى لمدة دورتين مدة كل منهما خمس دقائق في نفس الظروف ، وقم بالطرد المركزي للعينة عند 3000 جم لمدة 20 دقيقة عند 15 درجة مئوية. افصل مستخلص الصبغة باستخدام ماصة باستور وانقله إلى أنبوب نظيف آخر محمي من الضوء.
ثم ضع مستخلص الصبغة في خلية كوارتز واقرأها في مقياس الطيف الضوئي عند 600 و 647 و 664 نانومتر. احسب تركيزات الكلوروفيل باستخدام المعادلة. كان محتوى الكلوروفيل في Chlorella sorokiniana أعلى في المعالجة الرابعة ، في ظل ظروف إضافة ثاني أكسيد الكربون العالي ، والضوء الأرجواني ، وكثافة الضوء العالية.
أظهرت مخطط التأثيرات الرئيسية أن شدة الضوء كان لها تأثير أقل مقارنة بتأثيرات ثاني أكسيد الكربون والضوء الأرجواني. في Chlorella sorokiniana ، لوحظت زيادة ثابتة في الكلوروفيل A و B طوال التجربة ، حيث تجاوز الكلوروفيل A الكلوروفيل B في 50 ساعة. ولوحظ انخفاض في تركيز الكلوروفيل في المكورات الدموية البلوفيالية بعد 50 ساعة، مع انخفاض الكلوروفيل B بشكل ملحوظ بينما ظل الكلوروفيل A أعلى.
