وأيد هذا العمل من المنح المقدمة من الحكومة الاتحادية البلجيكية (IUAP P6/28)، ومؤسسة أبحاث الفلاندر (FWO) (G.0565.07 وG.0686.09)، وجائزة المؤسسة الأوروبية Astellas 2009 ومجلس البحوث التابع لوفين KU (GOA 2009/07، وEF/95/010 PFV/10/006). PU، ونحن زملاء الدكتوراه من مؤسسة أبحاث الفلاندر (FWO). MB هو زميل ماري كوري. DDR زميل الأساسية السريرية من FWO.

1. مختبر الحيوانات <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ويضم الحيوانات (الفئران والجرذان) في منشأة متخصصة الحيوانية مع ضوء الظلام دورة 12-HR والإعلان باستمرار طيلة فترة التجربة الوصول إلى المياه والغذاء الكريات القياسية. كل سن وجنس الحيوانات المعالم الهامة التي يجب أن تكون موحدة وفقا لاحتياجات. نقوم عادة قياس المثانة في 10 - 12 أسبوعا من العمر 5،6 إناث الحيوانات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم تنفيذ جميع التجارب على الحيوانات وفقا للمبادئ التوجيهية للاتحاد الأوروبي ومجلس الجالية التي وافقت عليها لجنة الأخلاقيات المحلية. </li></ol> 2. خدر <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم استخدام التخدير Isoflurane لأداء العمليات الجراحية الصغيرة، حيث أنه من السهل أن جرعة قصيرة بسبب عمرها النصفي. المناسبة الغاز النفايات الكسح من الضروري عند استخدام isoflurane. <ol class="lalpha" style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> توضع الحيوانات في صندوق مغلق، بالغاز مع 5٪ isoflurane في الأكسجين النقي (1 لتر / دقيقة). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد التخدير، والحث على لتر المناسبةيتم الاحتفاظ من قبل إيفل قناع صغير (قطع حقنة مل 10) من 0،8 حتي 1 لتر / دقيقة الأكسجين مع 1 - 1.5٪ من isoflurane. </li></ol></li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بالنسبة للفئران، ويستخدم التخدير يوريتان خلال التسجيلات الفنية (cfr. أدناه). يتم استخدام التخدير يوريتان خلال التسجيلات الفنية، لأنه على عكس معظم عقاقير التخدير أخرى، لا يتم منع منعكس التبول قبل هذا الوكيل مخدر 4. إدارة يوريتان 1.2 غرام من وزن الجسم / كغ تحت الجلد (SC) 60 دقيقة قبل بدء التسجيلات. إذا لزم الأمر، يمكن معاير جرعة من يوريتان اللازمة للحصول على التخدير المناسب من قبل إدارة جرعات إضافية (0.1 جم / كجم) تحت الجلد. وتجدر الإشارة، مع ذلك، قد يغير هذا التخدير إضافية كفاءة وبالتالي يفرغ تواتر التبول 7،8. وبالتالي، ينبغي أن تراقب عن كثب cystometric التسجيلات والتخلص منها كلما لاحظت انحرافات كبيرة عن سلوك السيطرة. لا ينبغي أن تدار التخدير بينما الاختباريتم تطبيق المركبات لتجنب سوء تفسير البيانات. </li></ol> 3. إجراء العمليات الجراحية - قسطرة المثانة زراعة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم تعقيم الأدوات الجراحية في الأوتوكلاف قبل استخدامها. حلق البطن من الحيوان، مع تطهير 70٪ من الإيثانول وإجراء البطن خط الوسط الأقل إلى فضح المثانة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحت المجهر الجراحي، ضع خياطة محفظة سلسلة في قبة المثانة باستخدام غير قابل للامتصاص خياطة حيدة، (حجم 6-0). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إجراء فغر المثانة الصغيرة (التي نستخدمها بشكل تفضيلي إبرة G 18) داخل السلسلة محفظة وإدراج القسطرة البولي اثيلين PE 50، مع صفعة صغيرة في نهاية (التي تم الحصول عليها عن طريق تسخين بعناية أنابيب) من خلال هذا الثقب. في أيدينا، أرق أنابيب (PE 10) لديها مقاومة أعلى وأكثر متغير. ويمكن تطهيرها الأنبوب وذلك بوضعها في محلول الإيثانول 70٪ أو تعقيمها في الأوتوكلاف. قبل زرع، ينبغي مسح أنابيب بمحلول ملحي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تأمين شارع محفظةجي حول أنبوب مع عقدة الجراح. سحب القسطرة يتم وضع الخارج بلطف حتى تلميح على شكل جرس الحق تحت خياطة. دفع قطعة من القسطرة G 18 نحو لمنع تسرب خياطة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ضخ كمية صغيرة من المياه المالحة (100 - 200 ميكرولتر) بلطف للتأكد من وجود تسرب. إذا تسرب موجودة، يجب وضع لخياطة إضافية. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إغلاق عضلات البطن باستخدام الخيوط الجراحية حيدة، وترك ممر للقسطرة في الجزء العلوي من شق. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> النفق الأنبوب إلى المنطقة بين الكتفين باستخدام قضيب معدني أجوف، وبالتالي منع الحيوانات لدغة الأنبوب أثناء التجربة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم إغلاق الجلد باستخدام الخيوط الجراحية القابلة للامتصاص غير حيدة. يتم مسح القسطرة مزروع مع المالحة للتحقق من نفاذية لها. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قبل الحيوانات توقظ، يتم إعطاء المسكنات تحت الجلد (البوبرينورفين، 0.05 ملغ / كلغ). </li></ol> 4. إعداد وقياس المثانة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> اعتمادا على questi التجريبيةعلى (والأنواع المستخدمة) يتم تنفيذ قياس المثانة في مستيقظا (ضبط النفس أو عدم تقييد) أو تخدير يوريتان-الحيوانات. في حين قياس المثانة قابل للتطبيق تماما في الفئران واعية، والتي تميل إلى الهدوء في بيئة ضبط النفس، ونقوم عادة تحت التخدير يوريتان قياس المثانة (1.2 ملغم / كغم، تحت الجلد) عند استخدام الفئران 3،5،6،9. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> في الفئران تخدير، ويتم رصد درجة حرارة الجسم باستمرار والاحتفاظ بها في 36،5 ° C ± 0.2 ° C عن طريق تحقيق درجة الحرارة ومصباح التدفئة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ومعايرة انشاء قبل كل تجربة وفقا لتعليمات الصانعين. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم توصيل قسطرة مزروع من قبل كعب الأنبوب إلى الصنبور 3-الطريقة، التي يتم توصيلها إلى محول الضغط (إدواردز علوم الحياة) من جهة، ومضخة التسريب من جهة أخرى (هارفارد جهاز). توصيل محول الضغط عبر مكبر للصوت (78534c مراقب، وهيوليت باكارد) لنظام الحصول على البيانات (DI-730-USB، Dataq الصكوك) وشارك فيmputer. ويمكن استخدام Windaq / لايت برنامج للتسجيل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بدء تشغيل مضخة التسريب، وتمكن من ضخ المياه المالحة أو في برنامج تلفزيوني، على سبيل المثال، 100 ميكرولتر / دقيقة (في الفئران) أو 20 ميكرولتر / دقيقة (في الفئران). كما سيتم شغل هذه المثانة بمعدل ثابت، في حين يتم تسجيل الضغط داخل المثانة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الشكل 5 يصور أثر الضغط النموذجية: ضخ السوائل خلال، هناك تراكم الضغط في المثانة بطيئة، حتى يتم التوصل إلى حجم معين / ضغط، عتبة التبول. مرة واحدة يتم التوصل إلى هذا الحد، والمثانة، وبعد ذلك سوف العقد العضلة العاصرة البولية سيتم فتح، والسماح للمرور البول من خلال مجرى البول. على هذا النحو، يتم إفراغ المثانة، ووقف الانكماش والضغط سوف ينخفض ​​مرة أخرى إلى مستوى &quot;القاعدية&quot;. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> كما يتم وضع الفئران في قفص الأيضية والتوازن فوق رقمي، يمكن قياس حجم البول في وقت واحد، تعطي معلومات عن حجم باطلة. نظرا لصغر حجم باطلة في ميلم، ويمكن أن تكون صعبة للغاية باستخدام هذا النظام. لذلك، يتم تحديد حجم البول باستخدام أوراق الترشيح الصغيرة وزنه قبل وبعد يفرغ. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عادة، تركنا النظام تتوازن لمدة 30 دقيقة، تليها فترة تسجيل 30 دقيقة. ثم، يمكن إعطاء الأدوية بشكل منتظم أو intravesically وتسجل آخر 30 دقيقة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يمكن تصدير البيانات المسجلة على هيئة ملفات CSV. التي يمكن استيرادها إلى برامج متخصصة للتحليل الكمي. ونحن عادة استخدام المنشأ (شركة OriginLab، MA، الولايات المتحدة الأمريكية). </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> بعد التجارب، وضحت من قبل خلع عنق الرحم الحيوانات (الفئران) أو تسمم CO 2 (الفئران). </li></ol> 5. ممثل النتائج <img alt="الشكل 1" src="/files/ftp_upload/3869/3869fig1.jpg" /> الشكل 1. نظرة عامة البطن. A) ضع الفئران في موقف ضعيف. B) الحلاقة وإعداد antiseptically الموقع الجراحية. C) شق في الجلد. D) شق سو عضلات البطن، والتعرض المثانة. <img alt="الشكل 2" src="/files/ftp_upload/3869/3869fig2.jpg" /> الشكل 2. A خياطة محفظة السلسلة. <img alt="الشكل 3" src="/files/ftp_upload/3869/3869fig3.jpg" /> الشكل 3. غرس قسطرة. <img alt="الشكل 4" src="/files/ftp_upload/3869/3869fig4.jpg" /> الشكل 4. حفر الأنفاق للقسطرة. وترد أمثلة على قياسات ضغط عليها خلال نضح إينترفسكل من المياه المالحة في الفئران واعية والماوس تخدير في الشكل 5. ويمكن استخراج معلمات متعددة من إشارة الضغط (على سبيل المثال الفاصل intercontractile، والضغط خط الأساس وعتبة الضغط). للحصول على وصف شامل لهذه المعايير، الرجاء راجع أندرسون وآخرون (المرجع 4) وYoshiyama وآخرون. (<html> المرجع 10). وقد استخدمنا قياس المثانة مؤخرا لتحديد الأهداف الجزيئية من زيت الخردل (MO)، وهو مركب شديد التفاعل التي استخدمت طويلا في نماذج تجريبية من الالتهاب وفرط التألم من أجهزة الحشوي مثل المثانة البولية 11،12. التسريب الناجم إينترفسكل من 10 ألف ملي MO زيادة كبيرة في وتيرة يفرغ (النقص في الفترة الفاصلة intercontractile) في الفئران البرية نوع (الشكل 6A، B) وانخفاض حجم باطلة 6. ومن المثير للاهتمام، MO الناجمة تغييرات مماثلة في الفئران خلل في مستقبلات MO TRPA1. في المقابل، بفعل التغيرات MO أضعف بكثير في cystometric المعلمات في الفئران KO TRPV1 من الفئران في WT وكان دون أي تأثير في الفئران KO Trpa1/Trpv1. جنبا إلى جنب مع قياسات الافراج عن الجينات كالسيتونين الببتيد ذات الصلة (CGRP) 6، تشير هذه البيانات إلى إثبات أن TRPV1 قد تلعب دورا رئيسيا في تهيج الحشوي الناجم عن MO. ve_content &quot;&gt; <img alt="الشكل 5" src="/files/ftp_upload/3869/3869fig5.jpg" /> الشكل 5. آثار ممثل الضغط داخل المثانة سجلت في الفئران الإناث واعية (A) والإناث في الماوس لتخدير (B). ويعرف ضغط أقل باسم &quot;الضغط الأساسي&quot; (الأسهم الحمراء). تم وضع علامة على الضغط في نهاية المرحلة ملء مع الأسهم الزرقاء. حجم السوائل التي غرست بين هذه النقاط، مقسوما على فرق الضغط، ويسمح حساب الامتثال للجدار المثانة (الامتثال = غرست حجم / (عتبة الضغط - الضغط الأساسي) و&quot;الفاصل الزمني intercontractile&quot; (ICI) هو الوقت بين 2 تقلصات يفرغ. <img alt="الشكل 6" src="/files/ftp_upload/3869/3869fig6.jpg" /> الشكل 6. آثار تطبيق إينترفسكل من زيت الخردل على نمط قياس المثانة في نوع البرية والفئران خروج المغلوب Trpa1، وTRPV1 Trpa1/Trpv1.(A) أمثلة ممثل تغيرات الضغط داخل المثانة سجلت في WT، KO Trpa1، KO TRPV1 والفئران KO Trpa1/Trpv1 ردا على ضخ MO ملي المالحة و 10. (B) طبعا وقت وتيرة يفرغ حظية المتوسط ​​قبل وأثناء ضخ إينترفسكل من MO. لجميع الفئران، تم تطبيع البيانات إلى تردد متوسط ​​تم الحصول عليها خلال ضخ المالحة. ويتم تكييف هذه البيانات من وآخرون Everaerts. (المرجع 6)، بإذن من السيفير.

<ol>
	<li>Everaerts, W., Gevaert, T., Nilius, B., De Ridder, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=On+the+origin+of+bladder+sensing:+Tr(i)ps+in+urology.">On the origin of bladder sensing: Tr(i)ps in urology.</a> Neurourol. Urodyn. 27, 264-2673 (2008).</li><li>Fry, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+and+their+use+in+understanding+lower+urinary+tract+dysfunction.">Animal models and their use in understanding lower urinary tract dysfunction.</a> Neurourol. Urodyn. 29, 603-608 (2010).</li><li>Gevaert, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deletion+of+the+transient+receptor+potential+cation+channel+TRPV4+impairs+murine+bladder+voiding.">Deletion of the transient receptor potential cation channel TRPV4 impairs murine bladder voiding.</a> J. Clin. Invest. 117, 3453-3462 (2007).</li><li>Andersson, K. E., Soler, R., Fullhase, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rodent+models+for+urodynamic+investigation.">Rodent models for urodynamic investigation.</a> Neurourol. Urodyn. 30, 636-646 (2011).</li><li>Everaerts, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+the+cation+channel+TRPV4+improves+bladder+function+in+mice+and+rats+with+cyclophosphamide-induced+cystitis.">Inhibition of the cation channel TRPV4 improves bladder function in mice and rats with cyclophosphamide-induced cystitis.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 107, 19084-19089 (2010).</li><li>Everaerts, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+capsaicin+receptor+TRPV1+is+a+crucial+mediator+of+the+noxious+effects+of+mustard+oil.">The capsaicin receptor TRPV1 is a crucial mediator of the noxious effects of mustard oil.</a> Curr. Biol. 21, 316-321 (2011).</li><li>Yoshiyama, M., Roppolo, J. R., Thor, K. B., de Groat, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+LY274614,+a+competitive+NMDA+receptor+antagonist,+on+the+micturition+reflex+in+the+urethane-anaesthetized+rat.">Effects of LY274614, a competitive NMDA receptor antagonist, on the micturition reflex in the urethane-anaesthetized rat.</a> Br. J. Pharmacol. 110, 77-86 (1993).</li><li>Yoshiyama, M., Roppolo, J. R., de Groat, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+MK-801+on+the+micturition+reflex+in+the+rat--possible+sites+of+action.">Effects of MK-801 on the micturition reflex in the rat--possible sites of action.</a> J. Pharmacol. Exp. Ther. 265, 844-850 (1993).</li><li>Boudes, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+Characterization+of+a+Chronic+Cyclophosphamide-Induced+Overactive+Bladder+Model+in+mice.">Functional Characterization of a Chronic Cyclophosphamide-Induced Overactive Bladder Model in mice.</a> Neurourol. Urodyn. , (2011).</li><li>Yoshiyama, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sex-related+differences+in+activity+of+lower+urinary+tract+in+response+to+intravesical+acid+irritation+in+decerebrate+unanesthetized+mice.">Sex-related differences in activity of lower urinary tract in response to intravesical acid irritation in decerebrate unanesthetized mice.</a> Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 295, R954-R960 (2008).</li><li>McMahon, S. B., Abel, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+model+for+the+study+of+visceral+pain+states:+chronic+inflammation+of+the+chronic+decerebrate+rat+urinary+bladder+by+irritant+chemicals.">A model for the study of visceral pain states: chronic inflammation of the chronic decerebrate rat urinary bladder by irritant chemicals.</a> Pain. 28, 109-127 (1987).</li><li>Du, S., Araki, I., Yoshiyama, M., Nomura, T., Takeda, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transient+receptor+potential+channel+A1+involved+in+sensory+transduction+of+rat+urinary+bladder+through+C-fiber+pathway.">Transient receptor potential channel A1 involved in sensory transduction of rat urinary bladder through C-fiber pathway.</a> Urology. 70, 826-831 (2007).</li><li>Streng, T., Santti, R., Talo, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Similarities+and+differences+in+female+and+male+rat+voiding.">Similarities and differences in female and male rat voiding.</a> Neurourol. Urodyn. 21, 136-141 (2002).</li><li>Igawa, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cystometric+findings+in+mice+lacking+muscarinic+M2+or+M3+receptors.">Cystometric findings in mice lacking muscarinic M2 or M3 receptors.</a> J. Urol. 172, 2460-2464 (2004).</li><li>Schroder, A., Newgreen, D., Andersson, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detrusor+responses+to+prostaglandin+E2+and+bladder+outlet+obstruction+in+wild-type+and+Ep1+receptor+knockout+mice.">Detrusor responses to prostaglandin E2 and bladder outlet obstruction in wild-type and Ep1 receptor knockout mice.</a> J. Urol. 172, 1166-1170 (2004).</li><li>Chen, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Function+of+the+lower+urinary+tract+in+mice+lacking+alpha1d-adrenoceptor.">Function of the lower urinary tract in mice lacking alpha1d-adrenoceptor.</a> J. Urol. 174, 370-374 (2005).</li><li>May, V., Vizzard, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bladder+dysfunction+and+altered+somatic+sensitivity+in+PACAP-/-+mice.">Bladder dysfunction and altered somatic sensitivity in PACAP-/- mice.</a> J. Urol. 183, 772-779 (2010).</li><li>Thorneloe, K. S., Meredith, A. L., Knorn, A. M., Aldrich, R. W., Nelson, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Urodynamic+properties+and+neurotransmitter+dependence+of+urinary+bladder+contractility+in+the+BK+channel+deletion+model+of+overactive+bladder.">Urodynamic properties and neurotransmitter dependence of urinary bladder contractility in the BK channel deletion model of overactive bladder.</a> Am. J. Physiol. Renal. Physiol. 289, 604-610 (2005).</li></ol>

الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

تقنية قياس المثانة المقدمة هنا يسمح أداء قياسات الجسم الحي في وظيفة المثانة في النماذج الحيوانية. الفئران هي على الأرجح الأكثر استخداما نموذج حيواني. الفئران هي أكثر صعوبة في التعامل معها، ولكن تقدم ميزة استخدام الحيوانات التلاعب وراثيا. بسبب صعوبة استخدام التقنية الفئران واعية، والتي تميل إلى أن تكون نشطة للغاية مما أدى إلى تخفيف زرع القسطرة والتغيرات في الضغوط داخل البطن التي قد تؤثر على الضغط داخل المثانة، فإننا ننصح للحفاظ على تخدير مع يوريتان خلال قياس المثانة الكامل البروتوكول. وبالطبع، فإن فوائد وجود الفئران مخدرا، ينبغي أن يكون وزنه ضد آثار التخدير. على هذا النحو، يمكن أن يكون لها تأثير يوريتان كبير على بعد 7،8 يفرغ حجم المتبقية. ولذلك ننتظر حتى نحصل على درجة مستقرة من التخدير، وقبل أن نبدأ لدينا تسجيلات والتدخلات. يجب على الباحثين النظر في رانه الفرق بين التبول القوارض الذكور والإناث 13. أيضا، عمر الحيوانات له أهمية كبيرة. نقوم قياس المثانة في الحيوانات التي هي 10 - 12 أسبوعا من العمر. يجب أن يتم تنفيذ جميع التجارب في بيئة هادئة، خاصة عند استخدام الحيوانات واعية. وقد وصف عدد من معدلات التسريب لدينا نماذج حيوانية. ونحن عادة استخدام معدلات ضخ 20 ميكرولتر / دقيقة بالنسبة للفئران و 100 ميكرولتر / دقيقة بالنسبة للفئران. كما ذكر أعلاه، التبول في البشر والقوارض تختلف اختلافا كبيرا. على سبيل المثال، ATP هو المساهم الرئيسي في تقلص النافصة في الفئران والجرذان، في حين أنه في البشر، وتوسط أساسا تقلص المثانة، في ظل الظروف الفسيولوجية التي كتبها أستيل 4. ومع ذلك، فإن الاحتمالات لأداء قياسات الغازية التي هي باهظة عموما في سياق السريرية واستخدام الحيوانات المعدلة وراثيا، والسماح استكشاف الحدود الحالية من الفيزيولوجيا المرضية لالمثانةد الصيدلة. وفي هذا الصدد، تم الحصول عليها مؤخرا تقدما كبيرا في توضيح دور المسكارينية البروستاجلاندين، 14 15 والمستقبلات الأدرينالية 16، نيوروببتيد 17، كا 2 + K + تنشيط قنوات 18 و TRP قنوات 3،5،6.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> اسم كاشف </td><td> الاسم التجاري، شركة، </td><td> كتالوج رقم </td><td> تعليقات </td></tr><tr><td> يوريتان </td><td> يوريتان، سيغما الدريخ </td><td> 315419 </td><td> مجموعة 2B مسرطنة </td></tr><tr><td> isoflurane </td><td> Isoba، صحة الحيوان شيرينغ بلاو </td><td></td><td></td></tr><tr><td> البولي ايثيلين القسطرة </td><td> Intramedic البولي ايثيلين أنابيب PE50، بيكتون ديكنسون </td><td> 427411 </td><td></td></tr><tr><td> المجهر الجراحي </td><td> البروتوكول الاختياري لمي 6، كارل زايس </td><td> البروتوكول الاختياري لمي 6 </td><td></td></tr><tr><td> خياطة صارة </td><td> البرولين 6/0، Ethicon </td><td> 8610H </td><td></td></tr><tr><td> اللفافة والجلد خياطة </td><td> Ethilon 4/0 أو 5/0، Ethicon </td><td> 662G 661G أو </td><td></td></tr><tr><td> بعد العملية الجراحية المسكنات </td><td> Temgesic، صحة الحيوان شيرينغ بلاو </td><td></td><td> الجرعة للفئران: 0.05 مغ / كغ </td></tr><tr><td> مكبر الصوت </td><td> 78534c مراقب، وهيوليت باكارد </td><td></td><td></td></tr><tr><td> أرصدة التحليلية والبرامج التوازن الحصول على البيانات </td><td> FZ 300i، A &amp; D </td><td> FZ-300i </td><td></td></tr><tr><td> التسريب مضخات </td><td> مضخة 33، هارفارد جهاز </td><td> HA33 </td><td></td></tr><tr><td> قياس المثانة تسجيل النظام </td><td> الصكوك Dataq، DI-730 سلسلة وWindaq / لايت </td><td> DI-730 USB Windaq / لايت </td><td></td></tr><tr><td> درجة الحرارة التسجيل </td><td> حظ الحرارة 52 KJ </td><td> 52 KJ </td><td></td></tr><tr><td> محولات الضغط </td><td> إدواردز علوم الحياة، وضغط مجموعة الرصد </td><td> T322247A </td><td></td></tr></tbody></table>

the use of cystometry in small rodents: a study of bladder chemosensation

<p class="jove_content"&gt; والمسالك البولية السفلية (LUT) يعمل بمثابة خزان الحيوية التي هي قادرة على تخزين البول وطرد بكفاءة في وقت مناسب. أثناء تخزين البول، ومع ذلك، يتعرض المثانة لفترات طويلة لمنتجات النفايات. من خلال العمل كحاجز ضيقة، بطانة الظهارية للLUT، والظهارة البولية، يتجنب إعادة امتصاص المواد الضارة. وعلاوة على ذلك، والمواد الكيميائية الضارة تحفيز الغدد العرقية في المثانة nociceptive والشروع يفرغ محتويات طرد تقلصات التي في المثانة. ومن المثير للاهتمام، وقد استخدم حساسية المثانة على المواد الكيميائية الضارة بنجاح في الممارسة السريرية، عن طريق غرس intravesically على كبخاخات ناهض TRPV1 لعلاج فرط نشاط المثانة العصبية<sup&gt; 1</sup&gt;. وهذا يؤكد ميزة عرض المثانة كجهاز حسي كيميائي ويطالب المزيد من البحوث السريرية. ومع ذلك، القضايا الأخلاقية تحد بشدة من إمكانيات القيام بها، في مواضيع الإنسان، والقياسات الغازية والتي هي ضرورية لكشف الأسس الجزيئية في علم الصيدلة السريرية LUT. وهناك طريقة للتغلب على هذا القيد هو استخدام عدة نماذج حيوانية<sup&gt; 2</sup&gt;. نحن هنا وصف تنفيذ قياس المثانة لدى الفئران والجرذان، وهي تقنية تسمح قياس الضغط داخل المثانة في المثانة شروط نضح للرقابة.</p&gt;<p class="jove_content"&gt; بعد فتح البطن، يتم زرع قسطرة في المثانة وقبة نفق تحت الجلد للمنطقة بين الكتفين. ويمكن بعد ذلك أن يملأ المثانة بمعدل رقابة، بينما يترك مجرى البول مجانا للتبول. خلال دورات متكررة من التعبئة ويفرغ، يمكن قياس الضغط داخل المثانة عن طريق القسطرة مزروع. على هذا النحو، يمكن كميا تغيرات الضغط وتحليلها. وعلاوة على ذلك، في وقت واحد قياس لحجم باطلة يسمح المميزة تقلصات يفرغ من تقلصات غير يفرغ<sup&gt; 3</sup&gt;.</p&gt;<p class="jove_content"&gt; الأهم من ذلك، لوجود خلافات بين التبول في السيطرة القوارض والبشر، وقياسات cystometric في هذه الحيوانات لها قيمة محدودة فقط متعدية<sup&gt; 4</sup&gt;. ومع ذلك، فهي مفيدة جدا في دراسة الفيزيولوجيا المرضية المثانة والصيدلة في إعدادات ما قبل السريرية التجريبية. أظهرت أبحاث حديثة باستخدام هذه التقنية على الدور الرئيسي للاعبين الجزيئية الرواية في خصائص ميكانو والكيماوي الحسية من المثانة.</p

Watch this Scientific Journal Video about The Use of Cystometry in Small Rodents: A Study of Bladder Chemosensation at JoVE.com

The Use of Cystometry in Small Rodents: A Study of Bladder Chemosensation

قياس المثانة هي تقنية فعالة لقياس وظيفة المثانة من الحيوانات الصغيرة<em&gt; في الجسم الحي</em&gt;. هي التي غرست باستمرار المثانة بمعدلات تسيطر من خلال القسطرة داخل المثانة، في حين يتم ترك مجرى البول مجانا للتبول. وهذا يسمح لتكرار تعبئة وتفريغ المثانة، في حين سجلت الضغط داخل المثانة وحجم البول.

استعمال قياس المثانة في القوارض الصغيرة: دراسة في Chemosensation المثانة

	The lower urinary tract (LUT) functions as a  dynamic reservoir that is able to store urine and to efficiently expel it at a  convenient time. While ...

the-use-cystometry-small-rodents-study-bladder

Google

Research

JoVE Journal

Medicine

22.3K Views.  KU Leuven, Belgium. قياس المثانة هي تقنية فعالة لقياس وظيفة المثانة من الحيوانات الصغيرة في الجسم الحي. هي التي غرست باستمرار المثانة بمعدلات تسيطر من خلال القسطرة داخل المثانة، في حين يتم ترك مجرى البول مجانا للتبول. وهذا يسمح لتكرار تعبئة وتفريغ المثانة، في حين سجلت الضغ...

Video: The Use of Cystometry in Small Rodents: A Study of Bladder Chemosensation

Mouse Bladder Wall Injection

Mouse bladder wall injection is a useful technique to orthotopically study bladder phenomena, including stem cell, smooth muscle, and cancer biology. Before starting injections, the surgical area must be cleaned with soap and water and antiseptic solution. Surgical equipment must be sterilized before use and between each animal. Each mouse is placed under inhaled isoflurane anesthesia (2-5% for induction, 1-3% for maintenance) and its bladder exposed by making a midline abdominal incision with scissors. If the bladder is full, it is partially decompressed by gentle squeezing between two fingers. The cell suspension of interest is intramurally injected into the wall of the bladder dome using a 29 or 30 gauge needle and 1 cc or smaller syringe. The wound is then closed using wound clips and the mouse allowed to recover on a warming pad. Bladder wall injection is a delicate microsurgical technique that can be mastered with practice.

Mouse bladder wall injection is a useful approach to orthotopically study bladder stem cell and cancer biology. This delicate microsurgical method can be mastered with careful technique and practice.

حقن المثانة الماوس الجدار

Mouse bladder wall injection is a useful technique to orthotopically study bladder phenomena, including stem cell, smooth muscle, and cancer biology. ...

Biomarkers in an Animal Model for Revealing Neural, Hematologic, and Behavioral Correlates of PTSD

Identification of biomarkers representing the evolution of the pathophysiology of Post Traumatic Stress Disorder (PTSD) is vitally important, not only for objective diagnosis but also for the evaluation of therapeutic efficacy and resilience to trauma. Ongoing research is directed at identifying molecular biomarkers for PTSD, including traumatic stress induced proteins, transcriptomes, genomic variances and genetic modulators, using biologic samples from subjects' blood, saliva, urine, and postmortem brain tissues. However, the correlation of these biomarker molecules in peripheral or postmortem samples to altered brain functions associated with psychiatric symptoms in PTSD remains unresolved. Here, we present an animal model of PTSD in which both peripheral blood and central brain biomarkers, as well as behavioral phenotype, can be collected and measured, thus providing the needed correlation of the central biomarkers of PTSD, which are mechanistic and pathognomonic but cannot be collected from people, with the peripheral biomarkers and behavioral phenotypes, which can.
Our animal model of PTSD employs restraint and tail shocks repeated for three continuous days - the inescapable tail-shock model (ITS) in rats. This ITS model mimics the pathophysiology of PTSD 17, 7, 4, 10. We and others have verified that the ITS model induces behavioral and neurobiological alterations similar to those found in PTSD subjects 17, 7, 10, 9. Specifically, these stressed rats exhibit (1) a delayed and exaggerated startle response appearing several days after stressor cessation, which given the compressed time scale of the rat's life compared to a humans, corresponds to the one to three months delay of symptoms in PTSD patients (DSM-IV-TR PTSD Criterian D/E 13), (2) enhanced plasma corticosterone (CORT) for several days, indicating compromise of the hypothalamopituitary axis (HPA), and (3) retarded body weight gain after stressor cessation, indicating dysfunction of metabolic regulation.
The experimental paradigms employed for this model are: (1) a learned helplessness paradigm in the rat assayed by measurement of acoustic startle response (ASR) and a charting of body mass; (2) microdissection of the rat brain into regions and nuclei; (3) enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for blood levels of CORT; (4) a gene expression microarray plus related bioinformatics tools 18. This microarray, dubbed rMNChip, focuses on mitochondrial and mitochondria-related nuclear genes in the rat so as to specifically address the neuronal bioenergetics hypothesized to be involved in PTSD.

We describe a rat model of post traumatic stress disorder (PTSD) that reveals the persistent alterations in neuroendocrine function and the delayed long-term, exaggerated fear response, characteristic of PTSD patients. The animal model and methods described here are useful for correlating biomarkers in brain nuclei, which are mechanistic but cannot be measured in patients, with biomarkers in peripheral white blood cells, which can.

المؤشرات الحيوية في نموذج حيواني لكشف الاقتران العصبية، الدموية، والسلوكية للPTSD

Identification of biomarkers representing the evolution of the pathophysiology of Post Traumatic Stress Disorder (PTSD) is vitally important, not only for ...

Human Neuroendocrine Tumor Cell Lines as a Three-Dimensional Model for the Study of Human Neuroendocrine Tumor Therapy

Neuroendocrine tumors (NETs) are rare tumors, with an incidence of two per 100,&#x200A;000 individuals per year, and they account for 0.5% of all human malignancies.1 Other than surgery for the minority of patients who present with localized disease, there is little or no survival benefit of systemic therapy. Therefore, there is a great need to better understand the biology of NETs, and in particular define new therapeutic targets for patients with nonresectable or metastatic neuroendocrine tumors. 3D cell culture is becoming a popular method for drug screening due to its relevance in modeling the in vivo tumor tissue organization and microenvironment.2,3 The 3D multicellular spheroids could provide valuable information in a more timely and less expensive manner than directly proceeding from 2D cell culture experiments to animal (murine) models.
To facilitate the discovery of new therapeutics for NET patients, we have developed an in vitro 3D multicellular spheroids model using the human NET cell lines. The NET cells are plated in a non-adhesive agarose-coated 24-well plate and incubated under physiological conditions (5% CO2, 37 &deg;C) with a very slow agitation for 16-24 hr after plating. The cells form multicellular spheroids starting on the 3rd or 4th day. The spheroids become more spherical by the 6th day, at which point the drug treatments are initiated. The efficacy of the drug treatments on the NET spheroids is monitored based on the morphology, shape and size of the spheroids with a phase-contrast light microscope. The size of the spheroids is estimated automatically using a custom-developed MATLAB program based on an active contour algorithm. Further, we demonstrate a simple method to process the HistoGel embedding on these 3D spheroids, allowing the use of standard histological and immunohistochemical techniques. 
This is the first report on generating 3D spheroids using NET cell lines to examine the effect of therapeutic drugs. We have also performed histology on these 3D spheroids, and displayed an example of a single drug's effect on growth and proliferation of the NET spheroids. Our results support that the NET spheroids are valuable for further studies of NET biology and drug development.

We present a simple agarose overlay platform to grow 3D multicellular spheroids using neuroendocrine cancer cell lines. This method provides a very convenient way to examine the effect of therapeutic drugs on the neuroendocrine tumor cells. It could also help us establish human neuroendocrine tumor spheroids for cancer therapy.

الإنسان الخلية السرطانية الهرموني العصبي خطوط بمثابة نموذج ثلاثي الأبعاد لدراسة الإنسان علاج ورم الغدد الصم العصبية

Neuroendocrine tumors (NETs) are rare tumors, with an incidence of two per 100,&#x200A;000 individuals per year, and they account for 0.5% of all human ...

Urinary Bladder Distention Evoked Visceromotor Responses as a Model for Bladder Pain in Mice

Approximately 3-8 million people in the United States suffer from interstitial cystitis/bladder pain syndrome (IC/BPS), a debilitating condition characterized by increased urgency and frequency of urination, as well as nocturia and general pelvic pain, especially upon bladder filling or voiding. Despite years of research, the cause of IC/BPS remains elusive and treatment strategies are unable to provide complete relief to patients. In order to study nervous system contributions to the condition, many animal models have been developed to mimic the pain and symptoms associated with IC/BPS. One such murine model is urinary bladder distension (UBD). In this model, compressed air of a specific pressure is delivered to the bladder of a lightly anesthetized animal over a set period of time. Throughout the procedure, wires in the superior oblique abdominal muscles record electrical activity from the muscle. This activity is known as the visceromotor response (VMR) and is a reliable and reproducible measure of nociception. Here, we describe the steps necessary to perform this technique in mice including surgical manipulations, physiological recording, and data analysis. With the use of this model, the coordination between primary sensory neurons, spinal cord secondary afferents, and higher central nervous system areas involved in bladder pain can be unraveled. This basic science knowledge can then be clinically translated to treat patients suffering from IC/BPS.

Approximately 3-8 million people in the United States suffer from interstitial cystitis/bladder pain syndrome (IC/BPS), a debilitating condition characterized in part by pelvic pain. In order to study nervous system contributions to the condition, a physiological model of urinary bladder pain is used in mice and rats.

الردود المثانة البولية انتفاخ مستدعى الحشوي الحركي نموذجا لألم المثانة في الفئران

Approximately 3-8 million people in the United States suffer from interstitial cystitis/bladder pain syndrome (IC/BPS), a debilitating condition ...

Remote Limb Ischemic Preconditioning:  A Neuroprotective Technique in Rodents

Sublethal ischemia protects tissues against subsequent, more severe ischemia through the upregulation of endogenous mechanisms in the affected tissue. Sublethal ischemia has also been shown to upregulate protective mechanisms in remote tissues. A brief period of ischemia (5-10 min) in the hind limb of mammals induces self-protective responses in the brain, lung, heart and retina. The effect is known as remote ischemic preconditioning (RIP). It is a therapeutically promising way of protecting vital organs, and is already under clinical trials for heart and brain injuries. This publication demonstrates a controlled, minimally invasive method of making a limb &#8211; specifically the hind limb of a rat &#8211; ischemic. A blood pressure cuff developed for use in human neonates is connected to a manual sphygmomanometer and used to apply 160 mmHg pressure around the upper part of the hind limb. A probe designed to detect skin temperature is used to verify the ischemia, by recording the drop in skin temperature caused by pressure-induced occlusion of the leg arteries, and the rise in temperature which follows release of the cuff. This method of RIP affords protection to the rat retina against bright light-induced damage and degeneration.

Remote ischemic preconditioning (RIP) is a method of conditioning tissues against damaging stress. We have established a method of remote ischemia at the hind limb, by inflating a sphygmomanometer cuff for 5-10 min. The neuroprotective capabilities of RIP have been demonstrated in a model of retinal degeneration in rodents.

أطرافهم بعد الدماغية شروط مسبقة: تقنية اعصاب في القوارض

Sublethal ischemia protects tissues against subsequent, more severe ischemia through the upregulation of endogenous mechanisms in the affected tissue. ...

Performing Subretinal Injections in Rodents to Deliver Retinal Pigment Epithelium Cells in Suspension

The conversion of light into electrical impulses occurs in the outer retina and is accomplished largely by rod and cone photoreceptors and retinal pigment epithelium (RPE) cells. RPE provide critical support for photoreceptors and death or dysfunction of RPE cells is characteristic of age-related macular degeneration (AMD), the leading cause of permanent vision loss in people age 55 and older. While no cure for AMD has been identified, implantation of healthy RPE in diseased eyes may prove to be an effective treatment, and large numbers of RPE cells can be readily generated from pluripotent stem cells. Several interesting questions regarding the safety and efficacy of RPE cell delivery can still be examined in animal models, and well-accepted protocols used to inject RPE have been developed. The technique described here has been used by multiple groups in various studies and involves first creating a hole in the eye with a sharp needle. Then a syringe with a blunt needle loaded with cells is inserted through the hole and passed through the vitreous until it gently touches the RPE. Using this injection method, which is relatively simple and requires minimal equipment, we achieve consistent and efficient integration of stem cell-derived RPE cells in between the host RPE that prevents significant amount of photoreceptor degeneration in animal models. While not part of the actual protocol, we also describe how to determine the extent of the trauma induced by the injection, and how to verify that the cells were injected into the subretinal space using in vivo imaging modalities. Finally, the use of this protocol is not limited to RPE cells; it may be used to inject any compound or cell into the subretinal space.

Here we present a community accepted protocol in multimedia format for subretinally injecting a bolus of RPE cells in rats and mice. This approach can be used for determining rescue potentials, safety profiles, and survival capacities of grafted RPE cells upon implantation in animal models of retinal degeneration.

أداء تحت الشبكية الحقن في القوارض لتسليم خلايا الظهارة الصبغية الشبكية في تعليق

The conversion of light into electrical impulses occurs in the outer retina and is accomplished largely by rod and cone photoreceptors and retinal pigment ...

Evaluation of the Efficacy of the H. pylori Protein HP-NAP as a Therapeutic Tool for Treatment of Bladder Cancer in an Orthotopic Murine Model

Bladder cancer is one of the most common malignancies of the urogenital tract. Intravesical injection of Bacillus Calmette-Gu&#233;rin (BCG) is the gold standard treatment for the high-grade non-muscle invasive bladder cancer (NMIBC). However, since the treatment-related side effects are relevant, newer biological response modifiers with a better benefit/side effects ratio are needed.
The tumour microenvironment can influence both tumour development and therapy efficacy. In order to obtain a good model, it is desirable to implant tumour cells in the organ from which the cancer originates.
In this protocol, we describe a method for establishing a tumour in the bladder cavity of female mice and subsequent delivery of therapeutic agents; the latter are exemplified by our use of Helicobacter pylori neutrophil activating protein (HP-NAP). A preliminary chemical burn of the mucosa, followed by the injection of mouse urothelial carcinoma cell line MB49 via urethral catheterization, enables the cells to attach to the bladder mucosa. After a period, required to allow an initial proliferation of the cells, mice are treated with HP-NAP, administrated again via catheterization. The anti-tumour activity of HP-NAP is evaluated comparing the tumour volume, the extent of necrosis and the degree of vascularization between vehicle- and HP-NAP-treated animals.

Evaluation of the Efficacy of the H. pylori Protein HP-NAP as a Therapeutic Tool for Treatment of Bladder Cancer in an Orthotopic Murine Model

Here the method to establish a syngeneic mouse model of orthotopic bladder tumour to evaluate the anti-tumour efficacy of the bacterial protein HP-NAP is described.

تقييم فعالية<em&gt; H. بيلوري</em&gt; البروتين HP-NAP كأداة علاجية لعلاج سرطان المثانة في مثلي فأري موديل

Bladder cancer is one of the most common malignancies of the urogenital tract. Intravesical injection of Bacillus Calmette-Gu&#233;rin (BCG) is the gold ...

Use of Ultra-high Field MRI in Small Rodent Models of Polycystic Kidney Disease for In Vivo Phenotyping and Drug Monitoring

Several in vivo pre-clinical studies in Polycystic Kidney Disease (PKD) utilize orthologous rodent models to identify and study the genetic and molecular mechanisms responsible for the disease, and are very convenient for rapid drug screening and testing of promising therapies. A limiting factor in these studies is often the lack of efficient non-invasive methods for sequentially analyzing the anatomical and functional changes in the kidney. Magnetic resonance imaging (MRI) is the current gold standard imaging technique to follow autosomal dominant polycystic kidney disease (ADPKD) patients, providing excellent soft tissue contrast and anatomic detail and allowing Total Kidney Volume (TKV) measurements.A major advantage of MRI in rodent models of PKD is the possibility for in vivo imaging allowing for longitudinal studies that use the same animal and therefore reducing the total number of animals required. In this manuscript, we will focus on using Ultra-high field (UHF) MRI to non-invasively acquire in vivo images of rodent models for PKD. The main goal of this work is to introduce the use of MRI as a tool for in vivo phenotypical characterization and drug monitoring in rodent models for PKD.

Use of Ultra-high Field MRI in Small Rodent Models of Polycystic Kidney Disease for In Vivo Phenotyping and Drug Monitoring

The use of ultra-high field MRI as a non-invasive way to obtain phenotypic information of rodent models for polycystic kidney disease and to monitor interventions is described. Compared with the traditional histological approach, MRI images can be acquired in vivo, allowing for longitudinal follow-up.

استخدام فائقة MRI الميداني في القوارض الصغيرة نماذج من مرض الكلى المتعدد الكيسات ل<em&gt; في فيفو</em&gt; Phenotyping والدواء المراقبة

Several in vivo pre-clinical studies in Polycystic Kidney Disease (PKD) utilize orthologous rodent models to identify and study the genetic and molecular ...

Use of a Piglet Model for the Study of Anesthetic-induced Developmental Neurotoxicity (AIDN): A Translational Neuroscience Approach

Anesthesia cannot be avoided in many cases when surgery is required, particularly in children. Recent investigations in animals have raised concerns that anesthesia exposure may lead to neuronal apoptosis, known as anesthesia-induced developmental neurotoxicity (AIDN). Furthermore, some clinical studies in children have suggested that anesthesia exposure may lead to neurodevelopmental deficits later in life. Nonetheless, an ideal animal model for preclinical study has yet to be developed. The neonatal piglet represents a valuable model for preclinical study, as they share a striking number of developmental similarities with humans.
The anatomy and physiology of piglets allow for implementation of rigorous human perioperative conditions in both survival and non-survival procedures. Femoral artery catheterization allows for close monitoring, thus enabling prompt correction of any deviation of the piglet's vital signs and chemistries. In addition, there are multiple developmental similarities between piglets and human neonates. The techniques required to use piglets for experimentation will require experience to master. A pediatric anesthesiologist is a critical member of the investigative team. We describe, in a general sense, the appropriate use of a piglet model for neurodevelopmental study.

Use of a Piglet Model for the Study of Anesthetic-induced Developmental Neurotoxicity AIDN: A Translational Neuroscience Approach

Anesthesia-induced developmental neurotoxicity (AIDN) research has focused on rodents, which are not broadly applicable to humans. Non-human primate models are more relevant, but are cost-prohibitive and difficult to use for experimentation. The piglet, in contrast, is a clinically relevant, practical animal model ideal for the study of anesthetic neurotoxicity.

استخدام نموذج خنزير صغير لدراسة التسمم العصبي التنموي الناجم عن التخدير (إيدن): نهج علم الأعصاب الانتقالي

Anesthesia cannot be avoided in many cases when surgery is required, particularly in children.  Recent investigations in animals have raised concerns that ...

Nerve-sparing Mid-urethral Obstruction (NeMO) in Female Small Rodents

Partial bladder outlet obstruction (pBOO) has a high prevalence, causes significant patient burden, and immense health care costs. The most common animal model to investigate bladder remodeling in pBOO are female rodents undergoing partial obstruction at the proximal urethra. Variability in the degree of obstruction and animal mortality are major concerns with proximal obstruction. Furthermore, dissecting around the proximal urethra and bladder neck jeopardizes bladder innervation.
We developed a nerve-sparing mid-urethral obstruction (NeMO) model for pBOO avoiding the disadvantages of the traditional model. We approached the urethra just inferior to the pubic symphysis, which obviated the need for laparotomy as well as for dissection in this area; also, the striated urethral sphincter remained untouched. We performed NeMO in female Sprague-Dawley rats (12 obstructions, 6 sham animals) as well as in female C57/bl6 mice (20 obstructions, 18 sham animals). After two weeks, we evaluated bladder function, bladder mass, and body mass.
We had no mortalities among obstructed- or sham-operated female rats; as described for the traditional proximal pBOO-method, we tied the suture around the proximal urethra and a temporarily placed 0.9 mm metal rod. NeMO induced an 85% increase in bladder mass after two weeks, average residual urine volume was 0.4 mL in partially obstructed rats while only 0.03 mL in sham animals. In mice, we tested 3 sizes of cannulas that we placed along the urethra when tying the suture. We found that using a 27-gauge cannula resulted in over 50% animal mortality; placing the 25-gauge cannula did not yield the desired response in increasing bladder mass; utilizing a 26-gauge cannula yielded favorable results with minimal animal mortality (1/8) yet a significant 2-fold increase in bladder mass.

Nerve-sparing Mid-urethral Obstruction NeMO in Female Small Rodents

Traditional modeling of partial bladder outlet obstruction in rodents is fraught with animal mortality. A denervation injury from dissection around the proximal urethra and bladder neck is also of major concern. We developed and evaluated a safe and reliable mid-urethral obstruction model, avoiding the shortcomings of the traditional model.

التي تقتصد في العصب منتصف الإحليلية إعاقة (نيمو) في أنثى القوارض الصغيرة

Partial bladder outlet obstruction (pBOO) has a high prevalence, causes significant patient burden, and immense health care costs. The most common animal ...