This research was supported by the Australian Research Council through the ARC Centre of Excellence in Vision Science (CE0561903), the National Health and Medical Research Council (1049990), and Progetto regionale speciale multiasse 'Reti per l'Alta Formazione' - PO FSE Abruzzo 2007-2013 - Azione 4.II.iii.

وكانت جميع التجارب التي أجريت وفقا للبيان ARVO لاستخدام الحيوانات في العيون والبحوث الرؤية، وبموافقة من جامعة لاكويلا جنة الأخلاقيات الحيوانية ولجنة أخلاقيات التجارب على الحيوانات الجامعة الوطنية الاسترالية. واستخدمت الجرذان الكبار (P100-200) طوال هذه الدراسة. 1. إعداد الكريات كوبوليمر الراتنج <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع 20 الكريات Elvax 40W في كوب زجاجي صغير في خزانة الدخان. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ملء كوب مع الإيثانول بنسبة 100٪ ضمان لتغطية جميع الكريات. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تغطية الكأس مع parafilm، ونقع الكريات في الإيثانول بنسبة 100٪ في درجة حرارة الغرفة لمدة 7-10 أيام. ملاحظة: من هذه الخطوة فصاعدا، لا تستخدم المعدن أو البلاستيك لمعالجة أو تخزين الراتنج. </li></ol> 2. إعداد محلول الدواء للتحميل <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حل العقار المفضل في 0.1٪ ثنائي ميثيل سلفوكسيد (DMSO). جعل محلول الدواء تصل إلى 40 ميكرولتر في الحجم.تحميل الراتنج مع ثلاثة أضعاف تركيز الدواء التي من شأنها أن تعطى في جرعة واحدة. </li></ol> 3. إعداد وتحميل مجمع المخدرات الراتنج <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نقل 20 الكريات غسلها إلى دورق زجاجي صغير آخر. حل الكريات في 4 مل ثنائي كلورو ميثان لحوالي 45 دقيقة. تغطية الكأس مع parafilm بينما الكريات تم إلغاؤها. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يعد حل سريع الخضراء FCF عن طريق إذابة في 0.1٪ DMSO إلى تركيز 0.001 ملغ / مل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> اتخاذ ماصة واحدة، ووضع 40 ميكرولتر من محلول الدواء أعدت في وقت سابق. تحميل ماصة أخرى مع 40 ميكرولتر من الحل الأخضر سريع. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إضافة حلول اثنين في وقت واحد في الكأس. مزيج بسرعة باستخدام كوب اثارة قضيب حتى يتم توزيع الصبغة الخضراء بشكل موحد في جميع أنحاء الخليط. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> على الفور نقل الكأس على الجليد الجاف لمدة 10 دقيقة على الصيام تجميد الراتنج. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> انشاء &quot;غرفة التبخر&quot; لتتبخر المذيبات. ملءتصل الحاوية أكبر لثلث مع الحصى كبريتات الكالسيوم. إنشاء جيدا في الحصى، ووضع بعناية الكأس في البئر بحيث الحصى تصل إلى نصف الكأس، لتحقيق الاستقرار في الدورق في الغرفة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تغطية الحاويات خارج أكبر مع parafilm. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نقل غرفة التبخر إلى الثلاجة. تبقي في -20 درجة مئوية لمدة 2-3 أسابيع. </li></ol> 4. إعداد مجمع المخدرات الراتنج لزرع جراحة <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة غرفة التبخر من الفريزر. نقل كتلة صلبة المخدرات الراتنج إلى صحن الزجاج أبقى على الجليد. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مع المعونة من مجهر أو مكبرة، وقطع قطعة حوالي 0.05 ملم وقطرها 0.1 ملم في الطول من كتلة باستخدام أداة منقب أو لكمة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> التفاف تبقى من كتلة في مواد واقية من تجميد (مثل رقائق الألومنيوم) والاحتفاظ في -20 درجة مئوية حتى المطلوبة. </li></ol> 5. جراحيا مجمع زراعة المخدرات الراتنج في الجرذ العين </P&gt; <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إعداد الحيوان للجراحة. تخدير باستخدام حقن داخل الصفاق من خليط من الكيتامين (100 ملغ / كغ من وزن الجسم) وزيلازين (12 ملغم / كغم من وزن الجسم). مراقبة الحيوانات حتى يتحقق التخدير الكامل. ملاحظة: يجب أن يكون للحيوان فقدان الحركات (باستثناء التنفس)، وفقدان ردود الفعل قرصة القرنية وأخمص قدميه. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> نقل الحيوانات تخدير كامل إلى طاولة الجراحة. استخدام mydriaticum (مثل الأتروبين سلفات)، ومخدر موضعي (على سبيل المثال، تتراكائين هيدروكلوريد) يسقط على العين (ق) خضوعه لعملية جراحية. تطبيق الدموع الاصطناعية للحفاظ على القرنية رطبة أثناء الجراحة. استخدام الإبر والأدوات المعقمة المتاح طوال الجراحة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> استقرار العين باستخدام زوج من ملقط منحنية حادة بعد المتوسعة التلميذ بالكامل. استخدام المجهر التشغيل لجعل كامل عمق ثقب الجرح للوصول إلى زجاجي، حوالي 2 مم من حوف باستخدام إبرة 25 G. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إدراج قطعة من استعداد رانه مجمع المخدرات الراتنج في ثقب الجرح باستخدام زوج من غرامة، ملقط مدبب (على سبيل المثال، ملاقط) القادرة على اختراق الموقع ثقب. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> كوقاية لعدوى بكتيرية، وتطبيق مرهم مضاد حيوي للعين، لمنع الالتهاب، وكذلك منع جفاف القرنية في حين أن الحيوان يتعافى. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مراقبة الحيوان حتى الشفاء التام. لا تترك الحيوان غير المراقب حتى استعاد وعيه عليه. لا عودة الحيوان إلى الشركة من الحيوانات الأخرى حتى تعافى تماما. إذا يظهر الحيوان علامات الإجهاد أو عدم الراحة، والمسكنات وينبغي أن تستخدم وفقا لبروتوكول الأخلاق المعتمدة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> اتبع الإجراءات المعتادة تجريبية لجمع وتحليل الأنسجة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> عند الانتهاء من التجارب، الموت ببطء الحيوان مع حقنة داخل الصفاق من بنتوباربيتال (60 ملغم / كغم من وزن الجسم) 2٪ ليدوكائين هيدروكلوريد حل. </li></ol> ملاحظة: يجنوكائين هيدروكلوريد دقيقةimizes الانزعاج المحلي.

<ol>
	<li>Access Economics, . <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+global+economic+cost+of+visual+impairment.">The global economic cost of visual impairment.</a> AMD Alliance International. , 26-27 (2010).</li><li>Jager, R., Aiello, L., Patel, S., Cunningham, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Risks+of+intravitreous+injection:+A+comprehensive+review.">Risks of intravitreous injection: A comprehensive review.</a> Retina. 24 (5), 676-698 (2004).</li><li>Rosenfeld, P. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ranibizumab+for+neovascular+age-related+macular+degeneration.">Ranibizumab for neovascular age-related macular degeneration.</a> New England Journal of Medicine. 355 (14), 1419-1431 (2006).</li><li>Cunningham, M. A., Edelman, J. L., Kaushal, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intravitreal+steroids+for+macular+edema:+The+past,+the+present,+and+the+future.">Intravitreal steroids for macular edema: The past, the present, and the future.</a> Survey of Ophthalmology. 53 (2), 139-149 (2008).</li><li>Folkman, J., Long, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+silicone+rubber+as+a+carrier+for+prolonged+drug+therapy.">The use of silicone rubber as a carrier for prolonged drug therapy.</a> Journal of Surgical Research. 4 (3), 139-142 (1964).</li><li>Herrero-Vanrell, R., Refojo, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biodegradable+microspheres+for+vitreoretinal+drug+delivery.">Biodegradable microspheres for vitreoretinal drug delivery.</a> Advanced Drug Delivery Reviews. 52 (1), 5-16 (2001).</li><li>Kim, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+scleral+diffusion+of+anticancer+drugs+from+solution+and+nanoparticle+formulation.">Human scleral diffusion of anticancer drugs from solution and nanoparticle formulation.</a> Pharmaceutical Research. 26 (5), 1155-1161 (2009).</li><li>Bochot, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intravitreal+delivery+of+oligonucleotides+by+sterically+stabilized+liposomes.">Intravitreal delivery of oligonucleotides by sterically stabilized liposomes.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 43 (1), 253-259 (2002).</li><li>Bochot, A., Fattal, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Liposomes+for+intravitreal+drug+delivery:+A+state+of+the+art.">Liposomes for intravitreal drug delivery: A state of the art.</a> Journal of Controlled Release. 161 (2), 628-634 (2012).</li><li>Okabe, K., Kimura, H., Okabe, J., Kato, A., Kunou, N., Ogura, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraocular+tissue+distribution+of+betamethasone+after+intrascleral+administration+using+a+non-biodegradable+sustained+drug+delivery+device.">Intraocular tissue distribution of betamethasone after intrascleral administration using a non-biodegradable sustained drug delivery device.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 44 (6), 2702-2707 (2003).</li><li>Langer, R., Folkman, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Polymers+for+the+sustained+release+of+proteins+and+other+macromolecules.">Polymers for the sustained release of proteins and other macromolecules.</a> Nature. 263 (5580), 797-800 (1976).</li><li>Silberstein, G. B., Daniel, C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Elvax+40P+implants:+Sustained,+local+release+of+bioactive+molecules+influencing+mammary+ductal+development.">Elvax 40P implants: Sustained, local release of bioactive molecules influencing mammary ductal development.</a> Developmental Biology. 93 (1), 272-278 (1982).</li><li>Smith, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+investigation+of+the+role+of+auditory+cortex+in+sound+localization+using+muscimol-releasing+Elvax.">An investigation of the role of auditory cortex in sound localization using muscimol-releasing Elvax.</a> European Journal of Neuroscience. 19 (11), 3059-3072 (2004).</li><li>Anomal, R., De Villers-Sidani, E., Merzenich, M. M., Panizzutti, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Manipulation+of+BDNF+signaling+modifies+the+experience-dependent+plasticity+induced+by+pure+tone+exposure+during+the+critical+period+in+the+primary+auditory+cortex.">Manipulation of BDNF signaling modifies the experience-dependent plasticity induced by pure tone exposure during the critical period in the primary auditory cortex.</a> PloS one. 8 (5), e64208 (2013).</li><li>Tu, S., Butt, C. M., Pauly, J. R., Debski, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activity-dependent+regulation+of+substance+P+expression+and+topographic+map+maintenance+by+a+cholinergic+pathway.">Activity-dependent regulation of substance P expression and topographic map maintenance by a cholinergic pathway.</a> The Journal of Neuroscience. 20 (14), 5346-5357 (2000).</li><li>Sernagor, E., Grzywacz, N. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+spontaneous+activity+and+visual+experience+on+developing+retinal+receptive+fields.">Influence of spontaneous activity and visual experience on developing retinal receptive fields.</a> Current Biology. 6 (11), 1503-1508 (1996).</li><li>Leitch, E., Coaker, J., Young, C., Mehta, V., Sernagor, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=GABA+type-A+activity+controls+its+own+developmental+polarity+switch+in+the+maturing+retina.">GABA type-A activity controls its own developmental polarity switch in the maturing retina.</a> The Journal of Neuroscience. 25 (19), 4801-4805 (2005).</li><li>Park, C. M., Hollenberg, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Basic+fibroblast+growth+factor+induces+retinal+regeneration+in+vivo.">Basic fibroblast growth factor induces retinal regeneration in vivo.</a> Developmental Biology. 134 (1), 201-205 (1989).</li><li>Whitsel, A. I., Johnson, C. B., Forehand, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+in+ovo+chicken+model+to+study+the+systemic+and+localized+teratogenic+effects+of+valproic+acid.">An in ovo chicken model to study the systemic and localized teratogenic effects of valproic acid.</a> Teratology. 66 (4), 153-163 (2002).</li><li>Prusky, G. T., Ramoa, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+method+of+chronically+blocking+retinal+activity.">Novel method of chronically blocking retinal activity.</a> Journal of Neuroscience Methods. 87 (1), 105-110 (1999).</li><li>Colonnese, M. T., Constantine-Paton, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+NMDA+receptor+blockade+from+birth+increases+the+sprouting+capacity+of+ipsilateral+retinocollicular+axons+without+disrupting+their+early+segregation.">Chronic NMDA receptor blockade from birth increases the sprouting capacity of ipsilateral retinocollicular axons without disrupting their early segregation.</a> The Journal of Neuroscience. 21 (5), 1557-1568 (2001).</li><li>Oliveira-Silva, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Matrix+metalloproteinase-9+is+involved+in+the+development+and+plasticity+of+retinotectal+projections+in+rats.">Matrix metalloproteinase-9 is involved in the development and plasticity of retinotectal projections in rats.</a> Neuroimmunomodulation. 14 (3-4), 144-149 (2007).</li><li>Trindade, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evidence+for+a+role+of+calcineurin+in+the+development+of+retinocollicular+fine+topography.">Evidence for a role of calcineurin in the development of retinocollicular fine topography.</a> Neuroscience Letters. 487 (1), 47-52 (2011).</li><li>Kauper, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Two-year+intraocular+delivery+of+ciliary+neurotrophic+factor+by+encapsulated+cell+technology+implants+in+patients+with+chronic+retinal+degenerative+diseases.">Two-year intraocular delivery of ciliary neurotrophic factor by encapsulated cell technology implants in patients with chronic retinal degenerative diseases.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 53 (12), 7484-7491 (2012).</li><li>Birch, D. G., Weleber, R. G., Duncan, J. L., Jaffe, G. J., Tao, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Randomized+of+ciliary+neurotrophic+factor+delivered+by+encapsulated+cell+intraocular+implants+for+retinitis+pigmentosa.">Randomized of ciliary neurotrophic factor delivered by encapsulated cell intraocular implants for retinitis pigmentosa.</a> American Journal of Ophthalmology. 156 (2), 283-292 (2013).</li><li>Rauck, B. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biocompatible+reverse+thermal+gel+sustains+the+release+of+intravitreal+bevacizumab+in+vivo.">Biocompatible reverse thermal gel sustains the release of intravitreal bevacizumab in vivo.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 55 (1), 469-476 (2014).</li><li>Liu, Y. C., Peng, Y., Lwin, N. C., Venkatraman, S. S., Wong, T. T., Mehta, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+biodegradable,+sustained-released,+prednisolone+acetate+microfilm+drug+delivery+system+effectively+prolongs+corneal+allograft+survival+in+the+rat+keratoplasty+model.">A biodegradable, sustained-released, prednisolone acetate microfilm drug delivery system effectively prolongs corneal allograft survival in the rat keratoplasty model.</a> PloS one. 8 (8), e70419 (2013).</li><li>Slaughter, M. M., Miller, R. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=2-amino-4-phosphonobutyric+acid:+a+new+pharmacological+tool+for+retina+research.">2-amino-4-phosphonobutyric acid: a new pharmacological tool for retina research.</a> Science. 211 (4478), 182-185 (1981).</li><li>Bodnarenko, S., Jeyarasasingam, G., Chalupa, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+and+regulation+of+dendritic+stratification+in+retinal+ganglion+cells+by+glutamate-mediated+afferent+activity.">Development and regulation of dendritic stratification in retinal ganglion cells by glutamate-mediated afferent activity.</a> The Journal of Neuroscience. 15 (11), 7037-7045 (1995).</li><li>Deplano, S., Gargini, C., Maccarone, R., Chalupa, L. M., Bisti, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+treatment+of+the+developing+retina+with+the+metabotropic+glutamate+agonist+APB+induces+long-term+changes+in+the+stratification+of+retinal+ganglion+cell+dendrites.">Long-term treatment of the developing retina with the metabotropic glutamate agonist APB induces long-term changes in the stratification of retinal ganglion cell dendrites.</a> Dev Neurosci. 26 (5-6), 396-405 (2004).</li><li>Horton, J., Sherk, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Receptive+field+properties+in+the+cat's+lateral+geniculate+nucleus+in+the+absence+of+on-center+retinal+input.">Receptive field properties in the cat's lateral geniculate nucleus in the absence of on-center retinal input.</a> The Journal of Neuroscience. 4 (2), 374-380 (1984).</li><li>Smith, A. L., Cordery, P. M., Thompson, I. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Manufacture+and+release+characteristics+of+Elvax+polymers+containing+glutamate+receptor+antagonists.">Manufacture and release characteristics of Elvax polymers containing glutamate receptor antagonists.</a> Journal of Neuroscience Methods. 60 (1), 211-217 (1995).</li><li>Gargini, C., Bisti, S., Demontis, G. C., Valter, K., Stone, J., Cervetto, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electroretinogram+changes+associated+with+retinal+upregulation+of+trophic+factors:+observations+following+optic+nerve+section.">Electroretinogram changes associated with retinal upregulation of trophic factors: observations following optic nerve section.</a> Neuroscience. 126 (3), 775-783 (2004).</li><li>Maccarone, R., Di Marco, S., Bisti, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Saffron+supplement+maintains+morphology+and+function+after+exposure+to+damaging+light+in+mammalian+retina.">Saffron supplement maintains morphology and function after exposure to damaging light in mammalian retina.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 49 (3), 1254-1261 (2008).</li><li>Tsai, T., Bui, B., Vingrys, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dimethyl+sulphoxide+dose-response+on+rat+retinal+function.">Dimethyl sulphoxide dose-response on rat retinal function.</a> Documenta Ophthalmologica. 119 (3), 199-207 (2009).</li></ol>

الكتاب ليس لديهم ما الإفصاح.

وأظهرت هذه الدراسة استخدام مجمع المخدرات الراتنج لبطء التسليم النشر من المخدرات إلى شبكية العين. نحن تهدف إلى تقديم الطريقة التي هي غير مكلفة نسبيا وسهلة التطبيق في نموذج حيوان صغير. وبالنظر إلى أن وظيفة APB هي بمثابة التناظرية ال...

علاج الأمراض المزمنة مثل السكري وارتفاع ضغط الدم ويعرض العديد من التحديات، وهذه الأمراض عموما تتطلب العلاج لفترات طويلة من الوقت، وغالبا ما للحياة. وقد دعا هذا لتطوير نظم لتقديم الأدوية الافراج بطيئة، والتي تقلل من الحاجة لجرعات متكررة. وقد أثبتت فعالية هذه الأساليب الافراج بطيئة من خلال تطوير مضخات الأنسولين، للحد من عدد من حقن الانسولين اللازمة لعلاج مرض السكري. الأمراض المزمنة للعين، وخاصة تلك التي تؤثر على طبقات الداخلية، يتطلب بالإدارة متكررة من المخدرات من خلال إجراءات الغازية. أحد هذه الأمراض المزمنة التي تؤثر على العين البشرية هو العمر المتعلقة التنكس البقعي (AMD). أنه يؤثر على الشبكية المركزية، وهي طبقة من الأنسجة العصبية تقع في الجزء الخلفي من العين المسؤولة عن الشروع في الرؤية. AMD هي السبب الرئيسي للعمى في العالم الغربي 1. وهناك تحد خاص مع علاج إعادةالأمراض tinal هي أن يطلب من المخدرات للوصول إلى هذه الطبقة العميقة في العين، والتي غالبا ما يتطلب أساليب الغازية التسليم. عادة تدار المخدرات إلى غرفة الزجاجي والشبكية باستخدام حقن intravitreal. ومع ذلك، مع كل حقنة هناك خطر حدوث مضاعفات تال للحقن، بما في ذلك التهاب باطن المقلة، انفصال الشبكية، المياه البيضاء ونزيف الجسم الزجاجي 2. يتم ضرب هذا الخطر مع كل إعادة حقن من الدواء. ان الحد من الحاجة إلى حقن متعددة تكون ذات فائدة كبيرة في علاج AMD. لعلاج الشكل الرطب من AMD، حيث نمو الأوعية الجديدة هو السمة المميزة، واستراتيجية العلاجية أنشئت في استهداف عوامل نمو بطانة الأوعية الدموية (VEGF) باستخدام مثبطات VEGF 3. في الوقت الحاضر، يتم تسليم هذه الحقن من خلال intravitreal المتكررة. وبالمثل، في علاج وذمة البقعة الصفراء، اختلاط شائع من اعتلال الشبكية السكري، ويتم تسليم القشرية من خلال تكرار الحقن <sتصل&gt; 4. يمكن تسليم هذه المخدرات عبر طرق الإفراج بطيئة بالفعل تقلل من خطر حدوث مضاعفات تال للحقن. وقد وصفت مفهوم نظام تسليم المخدرات الافراج بطيئة أولا باستخدام سيارة مطاط السيليكون لتقديم جزيئات صغيرة في الأنسجة الحيوانية 5. منذ ذلك الحين، تم تطوير أساليب الافراج بطيئة أخرى لتقديم جزيئات أكبر، والعديد منها قد تم اختبارها في العين. ناقلات الجسيمات، مثل المجهرية القابلة للتحلل، بولي lactide-شارك في glycolide (PLGA) النانوية والحويصلات فوسفورية (الجسيمات الشحمية) يمكن أن تكون مفيدة كوسائل تسليم 6،7. وقد تم مقارنة PLGA النانوية والجسيمات الشحمية في بيئة المختبر لقدرتها على تقديم وكلاء المضادة للسرطان عبر الصلبة مع مرور الوقت 7. وكانت كل من المركبات الفعالة في الافراج ببطء المخدرات. ومع ذلك، أجريت الدراسة إلا في بيئة المختبر. Bochot وآخرون (2002) 8 اختبارفعالية الليبوزومات لتسليم الجزيئات لشبكية العين في الجسم الحي. وقد أثبت أنه الليبوزومات تقديم بنجاح أليغنوكليوتيد] صغيرة لشبكية العين أرنب. ويرى المؤلفون أن الجسيمات الشحمية يمكن أن تكون مفيدة في علاج أمراض الشبكية 8. ومع ذلك، فإن طبيعة هذه الحويصلات في التحرك في الجسم الزجاجي يعني أنها من المرجح أن يضعف الرؤية أو طمس 9. اوكابي وآخرون (2003) 10 تستخدم أقراص غير القابلة للتحلل البوليمر يتكون من 33٪ الاثيلين فينيل اسيتات لتطبيق بيتا methasone في الأرانب. انهم مزروع في الجيب أقراص الصلبة وأظهرت الإفراج الفعلي للدواء في الجسم الزجاجي والشبكية لشهر واحد 10. ومع ذلك، في هذا البروتوكول معين، كان الزرع كبير نسبيا وجامدة، ويتطلب عملية جراحية أكثر تعقيدا بما في ذلك شق الصلبة كبيرة وخياطة. حققت دراسة سابقة للTISSUاستجابة البريد للمركبات البوليمر المختلفة عن طريق زرعها في القرنية من عيون الأرانب، ووجدت أن بوليمرات الاثيلين خلات الفينيل غسلها في الكحول لا تسبب التهاب أو تهيج. عرضت هذه المجمعات للحفاظ على تسليم المركبات الكبيرة إلى الأنسجة الحيوانية لفترات طويلة من الوقت، وبعض تتجاوز ما يصل إلى 100 ​​أيام تعتمد على المخدرات 11. وقد وضعت واحدة هذا النوع من الراتنج كوبوليمر صناعيا في شكل Elvax 40W (40٪ من الوزن الإيثيلين فينيل أسيتات المحتوى comonomer مع &#39;W&#39; أميد المضافة لتحسين معالجة بيليه). هذا الراتنج كوبوليمر هو مادة خاملة الذي هو مستقر في كل من الغرفة ودرجة حرارة الجسم. لم يظهر أن يسبب الحساسية أو السمية في الأنسجة البيولوجية. وقد القى هذا الراتنج فعال مجموعة كبيرة ومتنوعة من الأدوية في النماذج التجريبية المختلفة التي تحقق وظائف نظم مختلفة، مثل نظام الأقنية الثديية 12، القشرة السمعية الأولية 13،14 &lt;/ سوب&gt;، والضفدع النظام البصري 15. كما تم استخدام هذا الراتنج في العين لتوصيل الأدوية لتطوير سلحفاة 16،17، 18،19 الدجاج الجنين، والنمس الكبار شبكية العين 20. في الجهاز العصبي المركزي الفئران، تم فقط استخدام الراتنج في الدماغ 21-23، ولكن لم يتم توثيقها استخدامه في العين الفئران. مزايا استخدام هذا الراتنج كوبوليمر لتوصيل الأدوية ببطء إلى الشبكية عبر طرق أخرى، هو أنه مركب مستقر لا يسبب التهاب أو تهيج في العين. خلافا لناقلات الجسيمات، فإن المجمع المخدرات الراتنج لا يضعف الرؤية بعد الزرع، لأنه لا يزال عادة في موقع التسليم بدلا من العائمة في الجسم الزجاجي. فإنه لا تتطلب سوى عملية زرع بسيطة في تجويف الجسم الزجاجي بالقرب من حوف العين، ولن تتطلب خياطة بعد الزرع. مؤخرا، كان هناك ظهور في عدة أنظمة تسليم جديدة، مثلتكنولوجيا خلايا مغلفة (ECT) 24،25، 26 الهلاميات المائية، والميكروفيلم 27. ومع ذلك، فإن الطريقة المستخدمة في الدراسة الحالية لإعداد وتسليم مجمع المخدرات الراتنج على حد سواء سهلة لمتابعة وغير مكلفة، وبالتالي يكون أكثر فائدة للاستخدام في بيئة البحوث الأساسية. التحدي المتمثل في استخدام هذا المجمع لتقديم العلاج بالعقاقير طويل المدى هو تحديد تركيز الأمثل للدواء من شأنها تحقيق أقصى قدر من الفوائد العلاجية من وجود عدد أقل من الحقن intravitreal. تهدف هذه الورقة إلى شرح استخدام المجمع المخدرات الراتنج لعلاج طويل الأجل للشبكية الفئران الكبار. يتم اختبار فعالية هذا النمط من تسليم باستخدام الغلوتامات التناظرية 2-الأمينية-4-phosphonobutyrate (APB) مثل المخدرات. كتل APB الاستجابة الخفيفة للخلايا القطبين على طريق محاكاة الغلوتامات، وهو ناقل عصبي الذاتية في شبكية العين 28. عندما تتنافس APB مع مستقبلات الغلوتامات ل، فإنه يمنع من lighر الاستجابة. وقد استخدم الأساليب المحاسبية في الدراسات الفسيولوجية للسيطرة على وظيفة الشبكية وقياس أثره باستخدام أساليب الكهربية مثل تخطيط كهربية الشبكية (أرج). في الدراسات السابقة، وقد استخدمت الأساليب المحاسبية لكلا قصيرة الأجل 29 و علاج طويل الأجل من شبكية العين النامية؛ يشارك هذا الأخير إعطاء جرعة واحدة يوميا عن طريق الحقن داخل العين لمدة 30 يوما 30. تم استخدام نفس الكمية من APB (0.092 ملغ في المياه المالحة عقيمة، بتركيز 50 ميكرومتر) لجميع الحقن كما هو مقترح في 28،29،31 الأعمال السابقة. اخترنا APB لاختبار المجمع المخدرات الراتنج وسيلة بطيئة الافراج لتسليم المخدرات إلى العين. الطرق الموضحة في هذه الدراسة مشابهة لأساليب الموصوفة سابقا تتضمن إعداد الدواء الراتنج معقدة 16،32. ولكن نحن أيضا التفاصيل استخدامه تحديدا في العين الفئران البالغين. بعد الزرع الجراحية من الراتنج APB تحميلها في العين، أجريت أرج لتحديد ما إذا APB يلغي صاستجابة ضوء etinal، وبالتالي ما إذا كان قد تم الافراج عن APB بنجاح في الجسم الزجاجي والشبكية.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Elvax 40W Pellets</td>
			<td>Du Pont, DE, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dimethyl sulfoxide (DMSO)</td>
			<td>Sigma-Aldrich Co. LLC., MO, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-amino-4-phosphonobutyric acid (APB)</td>
			<td>Sigma-Aldrich Co. LLC., MO, USA</td>
			<td>A1910</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dichloromethane</td>
			<td>Sigma-Aldrich Co. LLC., MO, USA</td>
			<td>34856</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fast Green FCF</td>
			<td>Sigma-Aldrich Co. LLC., MO, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Drierite, calcium sulfate</td>
			<td>Sigma-Aldrich Co. LLC., MO, USA</td>
			<td>238910</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine, Ilium Ketamil</td>
			<td>Troy Laboratories Pty. Ltd., NSW, Australia</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine, Ilium Xylazil-20</td>
			<td>Troy Laboratories Pty. Ltd., NSW, Australia</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Atropine Sulphate, Minims eye drops</td>
			<td>Bausch &#38; Lomb Pty. Ltd., NSW, Australia</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tetracaine Hydrochloride, Minims eye drops</td>
			<td>Bausch &#38; Lomb Pty. Ltd., NSW, Australia</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chloramphenicol, Chlorsig ointment</td>
			<td>Aspen Pharma Pty. Ltd., NSW, Australia</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pentobarbital, Lethabarb</td>
			<td>Virbac Australia Pty. Ltd., NSW, Australia</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lignocaine Hydrochloride, Ilium Lignocaine-20</td>
			<td>Troy Laboratories Pty. Ltd., NSW, Australia</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Uni-Core Punch Tool</td>
			<td>World Precision Instruments Inc., FL, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved Forceps</td>
			<td>World Precision Instruments Inc., FL, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Operating Microscope, Zeiss OPMI 99</td>
			<td>Zeiss, West Germany</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>25G Insulin Needle</td>
			<td>Terumo Corp., Tokyo, Japan</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dumont Tweezers</td>
			<td>World Precision Instruments Inc., FL, USA</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

slow-release drug delivery through elvax 40w to the rat retina: implications for the treatment of chronic conditions

أمراض شبكية العين هي صعبة لعلاج شبكية العين كما تكمن عميقا داخل العين. وغالبا ما يحتاج أساليب الغازية من تسليم المخدرات لعلاج هذه الأمراض. أمراض شبكية العين المزمنة مثل وذمة الشبكية أو اتساع الأوعية الدموية عادة ما تتطلب الحقن داخل العين متعددة لعلاج الحالة بشكل فعال. ومع ذلك، فإن المخاطر المرتبطة بهذه الحقن تزيد مع تسليم المتكررة من المخدرات. ولذلك، أساليب التوزيع البديلة يجب وضع من أجل تقليل مخاطر إعادة حقن. وقد وضعت عدة تحقيقات غيرها من وسائل لتوصيل الأدوية الموسعة مع مرور الوقت، من خلال مواد قادرة على إطلاق المواد الكيميائية ببطء في العين. في هذا التحقيق، ونحن الخطوط العريضة استخدام Elvax 40W، الراتنج كوبوليمر، ليكون بمثابة وسيلة لتوصيل الدواء إلى شبكية العين الفئران البالغين. يتم إجراء الراتنج وتحميلها مع المخدرات. ثم يتم زرع مجمع المخدرات الراتنج في تجويف الجسم الزجاجي، حيث انها ستفرج ببطء الدواء على منظمة الشفافية الدوليةلي. تم اختبار هذه الطريقة باستخدام 2-الأمينية-4-phosphonobutyrate (APB)، والتماثلية الغلوتامات الذي يمنع استجابة ضوء من شبكية العين. وقد تبين أن APB صدر ببطء من الراتنج، وكان قادرا على منع استجابة الشبكية بنسبة 7 أيام بعد غرس. هذا يدل على أن تسليم المخدرات بطء الإفراج استخدام هذا الراتنج كوبوليمر فعالة لعلاج شبكية العين، ويمكن استخدامها علاجيا مع إجراء مزيد من التجارب.

تم استخدام تخطيط كهربية الشبكية الميدان الكامل (أرج) للكشف عن تأثير APB على شبكية العين. للحصول على تفاصيل حول كيفية تم إجراء أرج، الرجوع إلى الدراسات التالية 33،34. باختصار، بعد التخدير الحيوان، وضعت قطب الذهب على قرنية العين، ووضعت الإلكترود المرجعي في فروة الرأ...

Watch this Scientific Journal Video about Slow-release Drug Delivery through Elvax 40W to the Rat Retina: Implications for the Treatment of Chronic Conditions at JoVE.com

Slow-release Drug Delivery through Elvax 40W to the Rat Retina: Implications for the Treatment of Chronic Conditions

تفاصيل هذه الورقة كيف Elvax 40W يمكن استخدامها كوسيلة من وسائل بطء الإفراج عن تسليم المخدرات إلى شبكية العين الفئران البالغين. يوصف بروتوكول لإعداد والتحميل، وتقديم مجمع المخدرات الراتنج للعين.

بطء الإفراج تسليم المخدرات من خلال Elvax 40W إلى الجرذ الشبكية: الآثار المترتبة على علاج الحالات المزمنة

Diseases of the retina are difficult to treat as the retina lies deep within the eye. Invasive methods of drug delivery are often needed to treat these ...

slow-release-drug-delivery-through-elvax-40w-to-rat-retina

Research

JoVE Journal

Medicine

11.4K Views.  University of L'Aquila.  تفاصيل هذه الورقة كيف Elvax 40W يمكن استخدامها كوسيلة من وسائل بطء الإفراج عن تسليم المخدرات إلى شبكية العين الفئران البالغين. يوصف بروتوكول لإعداد والتحميل، وتقديم مجمع المخدرات الراتنج للعين. 

Video: Slow-release Drug Delivery through Elvax 40W to the Rat Retina: Implications for the Treatment of Chronic Conditions

The Measurement and Treatment of Suppression in Amblyopia

Amblyopia, a developmental disorder of the visual cortex, is one of the leading causes of visual dysfunction in the working age population. Current estimates put the prevalence of amblyopia at approximately 1-3%1-3, the majority of cases being monocular2. Amblyopia is most frequently caused by ocular misalignment (strabismus), blur induced by unequal refractive error (anisometropia), and in some cases by form deprivation.
Although amblyopia is initially caused by abnormal visual input in infancy, once established, the visual deficit often remains when normal visual input has been restored using surgery and/or refractive correction. This is because amblyopia is the result of abnormal visual cortex development rather than a problem with the amblyopic eye itself4,5 . Amblyopia is characterized by both monocular and binocular deficits6,7 which include impaired visual acuity and poor or absent stereopsis respectively. The visual dysfunction in amblyopia is often associated with a strong suppression of the inputs from the amblyopic eye under binocular viewing conditions8. Recent work has indicated that suppression may play a central role in both the monocular and binocular deficits associated with amblyopia9,10 .
Current clinical tests for suppression tend to verify the presence or absence of suppression rather than giving a quantitative measurement of the degree of suppression. Here we describe a technique for measuring amblyopic suppression with a compact, portable device11,12 . The device consists of a laptop computer connected to a pair of virtual reality goggles. The novelty of the technique lies in the way we present visual stimuli to measure suppression. Stimuli are shown to the amblyopic eye at high contrast while the contrast of the stimuli shown to the non-amblyopic eye are varied. Patients perform a simple signal/noise task that allows for a precise measurement of the strength of excitatory binocular interactions. The contrast offset at which neither eye has a performance advantage is a measure of the "balance point" and is a direct measure of suppression. This technique has been validated psychophysically both in control13,14 and patient6,9,11 populations.
In addition to measuring suppression this technique also forms the basis of a novel form of treatment to decrease suppression over time and improve binocular and often monocular function in adult patients with amblyopia12,15,16 . This new treatment approach can be deployed either on the goggle system described above or on a specially modified iPod touch device15.

Amblyopia is a developmental disorder of the visual cortex that is often accompanied by strong suppression of one eye. We present a new technique for measuring and treating interocular suppression in patients with amblyopia that can be deployed using virtual reality goggles or a portable iPod Touch device.

قياس وعلاج الحول في قمع

Amblyopia, a developmental disorder of the visual cortex, is one of the leading causes of visual dysfunction in the working age population. Current ...

A Model of Chronic Nutrient Infusion in the Rat

Chronic exposure to excessive levels of nutrients is postulated to affect the function of several organs and tissues and to contribute to the development of the many complications associated with obesity and the metabolic syndrome, including type 2 diabetes. To study the mechanisms by which excessive levels of glucose and fatty acids affect the pancreatic beta-cell and the secretion of insulin, we have established a chronic nutrient infusion model in the rat. The procedure consists of catheterizing the right jugular vein and left carotid artery under general anesthesia; allowing a 7-day recuperation period; connecting the catheters to the pumps using a swivel and counterweight system that enables the animal to move freely in the cage; and infusing glucose and/or Intralipid (a soybean oil emulsion which generates a mixture of approximately 80% unsaturated/20% saturated fatty acids when infused with heparin) for 72 hr. This model offers several advantages, including the possibility to finely modulate the target levels of circulating glucose and fatty acids; the option to co-infuse pharmacological compounds; and the relatively short time frame as opposed to dietary models. It can be used to examine the mechanisms of nutrient-induced dysfunction in a variety of organs and to test the effectiveness of drugs in this context.

A protocol for chronic infusions of glucose and Intralipid in rats is described. This model can be used to study the impact of nutrient excess on organ function and physiological parameters.

نموذج من تسريب المغذيات المزمنة في الفئران

Chronic exposure to excessive levels of nutrients is postulated to  affect the function of several organs and tissues and to contribute to the  ...

Osmotic Drug Delivery to Ischemic Hindlimbs and Perfusion of Vasculature with Microfil for Micro-Computed Tomography Imaging

Preclinical research in animal models of peripheral arterial disease plays a vital role in testing the efficacy of therapeutic agents designed to stimulate microcirculation. The choice of delivery method for these agents is important because the route of administration profoundly affects the bioactivity and efficacy of these agents1,2. In this article, we demonstrate how to locally administer a substance in ischemic hindlimbs by using a catheterized osmotic pump. This pump can deliver a fixed volume of aqueous solution continuously for an allotted period of time. We also present our mouse model of unilateral hindlimb ischemia induced by ligation of the common femoral artery proximal to the origin of profunda femoris and epigastrica arteries in the left hindlimb. Lastly, we describe the in vivo cannulation and ligation of the infrarenal abdominal aorta and perfusion of the hindlimb vasculature with Microfil, a silicone radiopaque casting agent. Microfil can perfuse and fill the entire vascular bed (arterial and venous), and because we have ligated the major vascular conduit for exit, the agent can be retained in the vasculature for future ex vivo imaging with the use of small specimen micro-CT3.

We show here the in vivo insertion of an osmotic pump for constant local drug delivery and the creation of hindlimb ischemia in a mouse model. Moreover, the hindlimb vasculature is perfused with Microfil, a silicone radiopaque agent, to prepare for micro-computed tomography (micro-CT) imaging.

ناضح تسليم المخدرات إلى Hindlimbs الدماغية ونضح من الأوعية الدموية مع Microfil للمشاريع المتناهية الصغر التصوير المقطعي التصوير

Preclinical research in animal models of peripheral arterial disease plays a vital role in testing the efficacy of therapeutic agents designed to ...

Heterotopic Mucosal Engrafting Procedure for Direct Drug Delivery to the Brain in Mice

Delivery of therapeutics into the brain is impeded by the presence of the blood-brain barrier (BBB) which restricts the passage of polar and high molecular weight compounds from the bloodstream and into brain tissue. Some direct delivery success in humans has been achieved via implantation of transcranial catheters; however this method is highly invasive and associated with numerous complications. A less invasive alternative would be to dose the brain through a surgically implanted, semipermeable membrane such as the nasal mucosa that is used to repair skull base defects following endoscopic transnasal tumor removal surgery in humans. Drug transfer though this membrane would effectively bypass the BBB and diffuse directly into the brain and cerebrospinal fluid. Inspired by this approach, a surgical approach in mice was developed that uses a donor septal mucosal membrane engrafted over an extracranial surgical BBB defect. This model has been shown to effectively allow the passage of high molecular weight compounds into the brain. Since numerous drug candidates are incapable of crossing the BBB, this model is valuable for performing preclinical testing of novel therapies for neurological and psychiatric diseases.

A mouse model of human endoscopic skull base reconstruction has been developed that creates a semipermeable interface between the brain and nose using nasal mucosal grafts. This method allows researchers to study delivery to the central nervous system of high molecular weight therapeutics which are otherwise excluded by the blood-brain barrier when administered systemically.

منتبذ المخاطي Engrafting إجراءات تسليم المخدرات مباشرة الى المخ في الفئران

Delivery of therapeutics into the brain is impeded by the presence of the blood-brain barrier (BBB) which restricts the passage of polar and high ...

Intraluminal Drug Delivery to the Mouse Arteriovenous Fistula Endothelium

Delivery of therapeutic agents to enhance arteriovenous fistula (AVF) maturation can be administered either via intraluminal or external routes. The simple murine AVF model was combined with intraluminal administration of drug solution to the venous endothelium at the same time as fistula creation. Technical aspects of this model are discussed. Under general anesthesia, an abdominal incision is made and the aorta and inferior vena cava (IVC) are exposed. The infra-renal aorta and IVC are dissected for clamping. After proximal and distal clamping, the puncture site is exposed and a 25 G needle is used to puncture both walls of the aorta and into the IVC. Immediately after the puncture, a reporter gene-expressing viral vector was infused in the IVC via the same needle, followed by 15 min of incubation. The intraluminal administration method enabled more robust viral gene delivery to the venous endothelium compared to administration by the external route. This novel method of delivery will facilitate studies that explore the role of the endothelium in AVF maturation and enable intraluminal drug delivery at the time of surgical operation.

After puncturing the aorta through the inferior vena cava (IVC) to create an aorto-caval fistula in the mouse, solution containing a drug is infused into the IVC via the same needle, followed by incubation. This method enables more robust drug delivery to the venous endothelium compared to the external route.

داخل اللمعة توصيل الدواء للماوس شرياني الناسور البطانة Endothelium

Delivery of therapeutic agents to enhance arteriovenous fistula (AVF) maturation can be administered either via intraluminal or external routes. The ...

Intravascular Delivery of Biologics to the Rat Kidney

The renal microvascular compartment plays an important role in the progression of kidney disease and hypertension, leading to the development of End Stage Renal Disease with high risk of death for cardiovascular events. Moreover, recent clinical studies have shown that renovascular structure and function may have a great impact on functional renal recovery after surgery. Here, we describe a protocol for the delivery of drugs into the renal artery of rats. This procedure offers significant advantages over the frequently used systemic administration as it may allow a more localized therapeutic effect. In addition, the use of rodents in pharmacodynamic analysis of preclinical studies may be cost effective, paving the way for the design of translational experiments in larger animal models. Using this technique, infusion of rat recombinant Vascular Endothelial Growth Factor (VEGF) protein in rats has induced activation of VEGF signaling as shown by increased expression of FLK1, pAKT/AKT, pERK/ERK. In summary, we established a protocol for the intrarenal delivery of drugs in rats, which is simple and highly reproducible.

The administration of drugs for recovery of kidney function requires control of the localization and distribution of the therapeutic compound. Here, we describe in detail a simple technique for intrarenal delivery of drugs in rats. This procedure may be easily performed with no mortality and high reproducibility.

تسليم داخل الأوعية الدموية من البيولوجيات إلى الكلى الجرذ

The renal microvascular compartment plays an important role in the progression of kidney disease and hypertension, leading to the development of End Stage ...

Network Analysis of Foramen Ovale Electrode Recordings in Drug-resistant Temporal Lobe Epilepsy Patients

Approximately 30% of epilepsy patients are refractory to antiepileptic drugs. In these cases, surgery is the only alternative to eliminate/control seizures. However, a significant minority of patients continues to exhibit post-operative seizures, even in those cases in which the suspected source of seizures has been correctly localized and resected. The protocol presented here combines a clinical procedure routinely employed during the pre-operative evaluation of temporal lobe epilepsy (TLE) patients with a novel technique for network analysis. The method allows for the evaluation of the temporal evolution of mesial network parameters. The bilateral insertion of foramen ovale electrodes (FOE) into the ambient cistern simultaneously records electrocortical activity at several mesial areas in the temporal lobe. Furthermore, network methodology applied to the recorded time series tracks the temporal evolution of the mesial networks both interictally and during the seizures. In this way, the presented protocol offers a unique way to visualize and quantify measures that considers the relationships between several mesial areas instead of a single area.

This protocol describes a procedure to track the evolution of mesial network measures in temporal lobe epilepsy (TLE) patients. It is based on the combination of intracranial recordings with a novel numerical technique for data analysis. Specifically, we present a protocol for network analyses of foramen ovale recordings.

تحليل شبكة الثقبة البيضوية الكهربائي تسجيلات في الفص الصدغي الصرع المرضى المقاوم للأدوية

Approximately 30% of epilepsy patients are refractory to antiepileptic drugs. In these cases, surgery is the only alternative to eliminate/control ...

Optimized LC-MS/MS Method for the High-throughput Analysis of Clinical Samples of Ivacaftor, Its Major Metabolites, and Lumacaftor in Biological Fluids of Cystic Fibrosis Patients

Defects in the cystic fibrosis trans-membrane conductance regulator (CFTR) are the cause of cystic fibrosis (CF), a disease with life-threatening pulmonary manifestations. Ivacaftor (IVA) and ivacaftor-lumacaftor (LUMA) combination are two new breakthrough CF drugs that directly modulate the activity and trafficking of the defective CFTR-protein. However, there is still a dearth of understanding on pharmacokinetic/pharmacodynamic parameters and the pharmacology of ivacaftor and lumacaftor. The HPLC-MS technique for the simultaneous analysis of the concentrations of ivacaftor, hydroxymethyl-ivacaftor, ivacaftor-carboxylate, and lumacaftor in biological fluids in patients receiving standard ivacaftor or ivacaftor-lumacaftor combination therapy has previously been developed by our group and partially validated to FDA standards. However, to allow the high-throughput analysis of a larger number of patient samples, our group has optimized the reported method through the use of a smaller pore size reverse-phase chromatography column (2.6 &#181;m, C8 100 &#197;; 50 x 2.1 mm) and a gradient solvent system (0-1 min: 40% B; 1-2 min: 40-70% B; 2-2.7 min: held at 70% B; 2.7-2.8 min: 70-90% B; 2.8-4.0 min: 90% B washing; 4.0-4.1 min: 90-40% B; 4.1-6.0 min: held at 40% B) instead of an isocratic elution. The goal of this study was to reduce the HPLC-MS analysis time per sample dramatically from ~15 min to only 6 min per sample, which is essential for the analysis of a large amount of patient samples. This expedient method will be of considerable utility for studies into the exposure-response relationships of these breakthrough CF drugs.

Ivacaftor and ivacaftor-lumacaftor combination are two new CF drugs. However, there is still a dearth of understanding on their PK/PD and pharmacology. We present an optimized HPLC-MS technique for the simultaneous analysis of ivacaftor and its major metabolites, and lumacaftor.

أسلوب LC-MS/MS الأمثل لتحليل العينات السريرية إيفاكافتور، والايضات الرئيسية، ولوماكافتور في السوائل البيولوجية لمرضى التليف الكيسي الفائق

Defects in the cystic fibrosis trans-membrane conductance regulator (CFTR) are the cause of cystic fibrosis (CF), a disease with life-threatening ...

Improved Method for the Establishment of an In Vitro Blood-Brain Barrier Model Based on Porcine Brain Endothelial Cells

The aim of this protocol presents an optimized procedure for the purification and cultivation of pBECs and to establish in vitro blood-brain barrier (BBB) models based on pBECs in mono-culture (MC), MC with astrocyte-conditioned medium (ACM), and non-contact co-culture (NCC) with astrocytes of porcine or rat origin. pBECs were isolated and cultured from fragments of capillaries from the brain cortices of domestic pigs 5-6 months old. These fragments were purified by careful removal of meninges, isolation and homogenization of grey matter, filtration, enzymatic digestion, and centrifugation. To further eliminate contaminating cells, the capillary fragments were cultured with puromycin-containing medium. When 60-95% confluent, pBECs growing from the capillary fragments were passaged to permeable membrane filter inserts and established in the models. To increase barrier tightness and BBB characteristic phenotype of pBECs, the cells were treated with the following differentiation factors: membrane permeant 8-CPT-cAMP (here abbreviated cAMP), hydrocortisone, and a phosphodiesterase inhibitor, RO-20-1724 (RO). The procedure was carried out over a period of 9-11 days, and when establishing the NCC model, the astrocytes were cultured 2-8 weeks in advance. Adherence to the described procedures in the protocol has allowed the establishment of endothelial layers with highly restricted paracellular permeability, with the NCC model showing an average transendothelial electrical resistance (TEER) of 1249 &#177; 80 &#937; cm2, and paracellular permeability (Papp) for Lucifer Yellow of 0.90 10-6 &#177; 0.13 10-6 cm sec-1 (mean &#177; SEM, n=55). Further evaluation of this pBEC phenotype showed good expression of the tight junctional proteins claudin 5, ZO-1, occludin and adherens junction protein p120 catenin. The model presented can be used for a range of studies of the BBB in health and disease and, with the highly restrictive paracellular permeability, this model is suitable for studies of transport and intracellular trafficking.

Improved Method for the Establishment of an In Vitro Blood-Brain Barrier Model Based on Porcine Brain Endothelial Cells

The aim of the protocol is to present an optimized procedure for the establishment of an in vitro blood-brain barrier (BBB) model based on primary porcine brain endothelial cells (pBECs). The model shows high reproducibility, high tightness, and is suitable for studies of transport and intracellular trafficking in drug discovery.

تحسين أسلوب لإنشاء في المختبر حاجز الدم – المخ نموذج استناداً إلى خلايا المخ الخنزيري بطانية

The aim of this protocol presents an optimized procedure for the purification and cultivation of pBECs and to establish in vitro blood-brain barrier (BBB) ...

Trans-Tympanic Drug Delivery for the Treatment of Ototoxicity

The systemic administration of protective agents to treat drug-induced ototoxicity is limited by the possibility that these protective agents could interfere with the chemotherapeutic efficacy of the primary drugs. This is especially true for the drug cisplatin, whose anticancer actions are attenuated by antioxidants which provide adequate protection against hearing loss. Other current or potential otoprotective agents could pose a similar problem, if administered systemically. The application of various biologicals or protective agents directly to the cochlea would allow for high levels of these agents locally with limited systemic side effects. In this report, we demonstrate a trans-tympanic method of delivery of various drugs or biological reagents to the cochlea, which should enhance basic science research on the cochlea and provide a simple way of directing the use of otoprotective agents in the clinics. This report details a method of trans-tympanic drug delivery and provides examples of how this technique has been used successfully in experimental animals to treat cisplatin ototoxicity.

We present a technique for localized administration of drugs through the trans-tympanic route into the cochlea. Drug delivery through this route would not interfere with the anti-cancer efficacy of the chemotherapeutic drugs such as cisplatin.

تسليم المخدرات العابرة تيمبانيك لعلاج مؤقت

The systemic administration of protective agents to treat drug-induced ototoxicity is limited by the possibility that these protective agents could ...