نحن نعترف بدعم تمويلي من "الجمعية اليابانية" لتعزيز العلوم (كاكينهي-المنح إلى K.N [26893261])، ومعهد أوكيناكا التذكاري للبحوث الطبية (ل KN)، ووزارة الصحة والعمل والرعاية الاجتماعية (إلى تينيسي)؛ السيدة كوتشي كاماتا واتسوشي سيما في قسم علم الأمراض في المركز الطبي سايتاما الطبية الجامعة الدولية لتقديم المساعدة الممتازة في histochemical وتلطيخ المناعي؛ كذلك الدكتور سيلسو هاء غوميز-سانشيز لتوفير الماوس [مونوكلونل] جسم CYP11B2 والفئران [مونوكلونل] جسم CYP11B1.

هذه الدراسة كان وافق المؤسسية استعراض المجالس من سايتاما الجامعة الدولية الطبية مركز طبي ومستشفى روسي يوكوهاما (الموافقة #: 16-093 و 26-38، على التوالي). كتب تم الحصول على موافقة من جميع المرضى قبل الإجراء.
 1-"إعداد المريض" <ol><li>تعيين المريض على سرير الفحص.</li>
	<li>وضع خط وريدي في العضد (أو الساق اليسرى) لإدارة الأدوية أثناء الإجراء.</li>
	<li>إدراج غمد الوصول في هذا السياق حق فخذي بعد تطهير الجلد المناسبة والتخدير الموضعي.</li>
	<li>جمع عينة دم (1 مل) من المنطلق حق فخذي (عينة الدم المحيطي أمام إدارة كوسينتروبين).</li>
</ol> 2. قسطرة <ol><li><ol><li>سأفس تلفزيونات الغدة الكظرية حق إدراج أما القسطرة مع الشكل MK الكظرية-R ( الشكل 1A و 1B) أو شكل القسطرة مع X عضو الكنيست ( الشكل 1) في الغدة الكظرية اليمنى الوريد (راف) كما ذكر سابقا 15 ، 16، جمع عينة دم (1 مل)، وإزالة القسطرة (كليفلاند الحق عينة أمام إدارة كوسينتروبين). استخدام القسطرة الصغيرة-إذا لزم الأمر-</li>
		حدد <li>قسطرة أصل مناسب للغدة الكظرية اليمنى: عندما &#34; طويلة قطرها IVC &#34; هو أقصر من 25 مم، استخدام MK الكظرية-ر. وإلا، استخدم عاشرا عضو الكنيست</li>
		إعادة تشكيل <li>القسطرة الأصل إذا لزم الأمر.
		الصور <ol><li>استناداً إلى الأشعة المقطعية وإعادة تشكيل عرض القسطرة مختارة (الأسهم الحمراء ثنائي الاتجاه في الشكل 1A أو ج 1) لتناسب &#34; طويلة قطرها IVC &#34; 15 (انظر أيضا قضية #1) وزاوية طرف القسطرة لتناسب &#34; تعديل زاوية عرضية راف &#34; 15 (انظر أيضا قضية #1).</li>
			إعادة تشكيل <li>القسطرة أثناء تطبيق بخار الحرارة العالية من الماء المغلي (مثل غلاية الإلكترونية) للقسطرة. يتم وصف الإجراءات المفصلة في أماكن أخرى 15-</li>
		</ol></li> <li>ضع طرف القسطرة الأصل إلى راف بزاوية مناسبة (متوسط تعديل زاوية عرضية راف: 123.6 °) 15 وعمق (1-2 مم). 
		ملاحظة: الأصل دقيقة قسطرة التنسيب ضروري لتسليم الصغير-القسطرة في التلفزيون الهدف.</li>
		<li>التعامل مع القسطرة الأصل لتغيير اتجاه طرف القسطرة لهدف واحد من أجهزة التلفزيون اليمنى، وإدراج مملوءة بالمياه المالحة الصغرى-قسطرة مع جويديويري. 
		ملاحظة: دفع وسحب القسطرة الأصل سيتم تغيير زاوية عمودي القسطرة الأصل، أي عندما يتم سحب القسطرة 3D من نوع تجاه القدم، نصيحة القسطرة تتجه صعودا، بينما يوجه نصيحة القسطرة نزولا عند يتم دفع القسطرة (انظر القضية رقم 1 أدناه). مجرد غيض القسطرة ويتم إدراج قد تكون إدراج خروج راف بزاوية مناسبة والعمق، والصغرى-القسطرة. من المهم للفاحص لمنع مريض من التنفس العميق أو قد تتغير زاوية عمودي. الصغير-القسطرة الموصوفة أعلاه ويتم إدراج جهاز تلفزيون مع جويديويري.</li>
		فينوغرافي <li>إجراء استخدام الأوعية الطرح الرقمي عن طريق مايكرو-القسطرة مع كمية صغيرة من المحلول الملحي المخفف (1:1) التباين-المتوسطة (0.1-0.3 مل؛ حقن إيوبروميدي) وطرد بلطف. جمع عينة دم 1 مل ببطء لقياس تركيزات البلازما الدوستيرون (PAC) وتركيزات البلازما الكورتيزول (PCC)-</li>
		<li>الانسحاب الجزئي-القسطرة قليلاً إلى الوراء، ومسح الخط الصغير-قسطرة مع مالا يقل عن 0.5 مل من المحلول الملحي. تهدف نصيحة القسطرة الأصل في التلفزيون المقبل.</li>
		<li>كرر الخطوتين 2.1.6 و 2.1.7 أعلاه لأجهزة التلفاز كل الحق.</li>
	</ol></li> <li>سأفس من اليسار تلفزيونات الغدة الكظرية <ol><li>إدراج قسطرة شكل L ( الشكل 2) في الوريد الأيسر الغدة الكظرية (LAV) وجمع عينة دم (1 مل)، وإزالة القسطرة (عينة اليسرى كليفلاند قبل إدارة كوسينتروبين). استخدام مايكرو-القسطرة.</li>
		<li>مكان القسطرة الأصل. 
		ملاحظة: تشريحيا، الوريد المركزي الغدة الكظرية الأيسر المتلاقية مع المنطلق فرنك أقل شأنا، والدم الوريدي في الأوردة هذه التدفقات إلى لاف 8. ولذلك فقط جمع الدم الوريدي ترك عينات من أنسجة الغدة الكظرية، قسطرة إلى اليسار الوريد المركزي الغدة الكظرية المسبق، أي، قسطرة إلى النقطة قبل الدمج مع المنطلق فرنك أقل شأنا، الأمر الذي يتطلب عادة قسطرة الصغرى، حتى بالنسبة كليفلاند. مماثلة على الجانب الأيمن، أثناء أداء الغدة الكظرية فينوغرافي المركزية، من الأهمية بمكان لتحديد أجهزة التلفاز الغدة الكظرية اليمنى، والوحشي لا سيما التلفزيون (انظر &#34; حالة #2 كمثال على لاف-سأفس &#34;). قسطرة مع الشكل L كان المفضل للاستخدام. أجزاء #1 و #2 و #3 ( الشكل 2) من القسطرة تناسب IVC، الوريد الكلوي، فضلا عن جذع مشترك أدنى من المنطلق فرنك ومركبة مصفحة خفيفة، على التوالي، مما يسمح لجزء 3 # ستابلي الجلوس في الجذع المشترك-</li>
		<li>إدراج الصغرى-القسطرة تلفزيونات الغدة الكظرية اليمنى وجمع عينات دم من شاشات الأيسر. راجع الخطوات 2.1.5-2.1.6 أعلاه لتلفزيونات حق الغدة الكظرية للإجراءات العامة. 
		ملاحظة: القسطرة الدقيقة وجويديويري (نفس كتلك الموجودة في سأفس الصحيح) يتم إدراجها في أجهزة التلفاز (عادة شاشات متفوقة-الوسيط، متفوقة الجانبي والأفقي) كما هو موضح في حالة #2 أدناه، وهي جمع عينات الدم.</li>
	</ol></li></ol> 3. بعد الحقن <ol><li>حقن 200 ميكروغرام الاصطناعية هرمون ﻫﺭﻣﻭﻧ (كوسينتروبين، بلعه) عن طريق خط وريدي تليها إدارة كوسينتروبين بمعدل 50 ميكروغرام/دقيقة متواصلة</li>
	<li>خمس عشرة دقيقة بعد حقن بلعه cosyntropin، أداء كليفلاند مرة أخرى، كما هو موضح أعلاه، وسافس، كما هو موضح في الخطوات 2.1 و 2.2. جمع 1 مل الدم كل.</li>
	<li>جمع عينة دم من الوريد حق فخذي.</li>
	<li>إزالة جميع القسطرة وغمد الوصول، واستكمال الفحوص كليفلاند وسافس بعد أستريكشن- 
	ملاحظة: فيما يتعلق بمزيد من التفاصيل عن هذه التقنية العامة أخذ العينات وريدي الغدة الكظرية (الخطوات باستثناء 3.2)، الرجوع إلى الكتب أو المجلات الأخرى 17.</li>
</ol>

<ol>
	<li>Funder, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Management+of+Primary+Aldosteronism:+Case+Detection,+Diagnosis,+and+Treatment:+An+Endocrine+Society+Clinical+Practice+Guideline.">The Management of Primary Aldosteronism: Case Detection, Diagnosis, and Treatment: An Endocrine Society Clinical Practice Guideline.</a> J Clin Endocrinol Metab. 101 (5), 1889-1916 (2016).</li><li>Akehi, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Proposed+diagnostic+criteria+for+subclinical+Cushing's+syndrome+associated+with+adrenal+incidentaloma.">Proposed diagnostic criteria for subclinical Cushing's syndrome associated with adrenal incidentaloma.</a> Endocr J. 60 (7), 903-912 (2013).</li><li>Choi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=K++channel+mutations+in+adrenal+aldosterone-producing+adenomas+and+hereditary+hypertension.">K+ channel mutations in adrenal aldosterone-producing adenomas and hereditary hypertension.</a> Science. 331 (6018), 768-772 (2011).</li><li>Beuschlein, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Somatic+mutations+in+ATP1A1+and+ATP2B3+lead+to+aldosterone-producing+adenomas+and+secondary+hypertension.">Somatic mutations in ATP1A1 and ATP2B3 lead to aldosterone-producing adenomas and secondary hypertension.</a> Nat Genet. 45 (4), 440-444 (2013).</li><li>Scholl, U. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Somatic+and+germline+CACNA1D+calcium+channel+mutations+in+aldosterone-producing+adenomas+and+primary+aldosteronism.">Somatic and germline CACNA1D calcium channel mutations in aldosterone-producing adenomas and primary aldosteronism.</a> Nat Genet. 45 (9), 1050-1054 (2013).</li><li>Azizan, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Somatic+mutations+in+ATP1A1+and+CACNA1D+underlie+a+common+subtype+of+adrenal+hypertension.">Somatic mutations in ATP1A1 and CACNA1D underlie a common subtype of adrenal hypertension.</a> Nat Genet. 45 (9), 1055-1060 (2013).</li><li>Tamura, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Somatic+KCNJ5+mutation+occurring+early+in+adrenal+development+may+cause+a+novel+form+of+juvenile+primary+aldosteronism.">Somatic KCNJ5 mutation occurring early in adrenal development may cause a novel form of juvenile primary aldosteronism.</a> Mol Cell Endocrinol. 441, 134-139 (2017).</li><li>McLachlan, M. S., Roberts, E. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Demonstration+of+the+normal+adrenal+gland+by+venography+and+gas+insufflation.">Demonstration of the normal adrenal gland by venography and gas insufflation.</a> Br J Radiol. 44 (525), 664-671 (1971).</li><li>Nishikawa, T., Matsuzawa, Y., Saito, J., Omura, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Is+it+Possible+to+Extirpate+Cardiovascular+Events+in+Primary+Aldosteronism+After+Surgical+Treatment.">Is it Possible to Extirpate Cardiovascular Events in Primary Aldosteronism After Surgical Treatment.</a> Jpn Clin Med. 1, 21-23 (2010).</li><li>Nishikawa, T., Matsuzawa, Y., Saito, J., Omura, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Super-selective+ACTH-stimulated+adrenal+venous+sampling+can+simply+differentiated+bilateral+adrenal+hyperplasia+from+bilateral+adenomas+in+primary+aldosteronism.">Super-selective ACTH-stimulated adrenal venous sampling can simply differentiated bilateral adrenal hyperplasia from bilateral adenomas in primary aldosteronism.</a> , 35-36 (2009).</li><li>Nishimoto, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Case+Report:+Nodule+Development+From+Subcapsular+Aldosterone-Producing+Cell+Clusters+Causes+Hyperaldosteronism.">Case Report: Nodule Development From Subcapsular Aldosterone-Producing Cell Clusters Causes Hyperaldosteronism.</a> J Clin Endocrinol Metab. 101 (1), 6-9 (2016).</li><li>Miekos, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anatomical+basis+of+radiodiagnosis+of+the+adrenal+gland.">Anatomical basis of radiodiagnosis of the adrenal gland.</a> Int Urol Nephrol. 11 (3), 193-200 (1979).</li><li>Omura, M., Saito, J., Matsuzawa, Y., Nishikawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Supper-selective+ACTH-stimulated+adrenal+vein+sampling+is+necessary+for+detecting+precisely+functional+state+of+various+lesions+in+unilateral+and+bilateral+adrenal+disorders,+inducing+primary+aldosteronism+with+subclinical+Cushing's+syndrome.">Supper-selective ACTH-stimulated adrenal vein sampling is necessary for detecting precisely functional state of various lesions in unilateral and bilateral adrenal disorders, inducing primary aldosteronism with subclinical Cushing's syndrome.</a> Endocr J. 58 (10), 919-920 (2011).</li><li>Nishikawa, T., Omura, M., Saito, J., Matsuzawa, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Primary+aldosteronism:+comparison+between+guidelines+of+the+Japanese+and+the+US+Endocrine+Society.">Primary aldosteronism: comparison between guidelines of the Japanese and the US Endocrine Society.</a> Expert Rev. Endocrinol. Metab. 7 (6), 637-645 (2012).</li><li>Araki, T., Okada, H., Onishi, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Does+catheter+shape+influence+the+success+of+right+adrenal+venous+sampling?+The+interaction+of+catheter+shape+to+anatomical+factors+on+CT.">Does catheter shape influence the success of right adrenal venous sampling? The interaction of catheter shape to anatomical factors on CT.</a> Jpn J Radiol. 34 (11), 707-717 (2016).</li><li>Young, W. F., Stanson, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=What+are+the+keys+to+successful+adrenal+venous+sampling+(AVS)+in+patients+with+primary+aldosteronism?.">What are the keys to successful adrenal venous sampling (AVS) in patients with primary aldosteronism?.</a> Clin Endocrinol (Oxf). 70 (1), 14-17 (2009).</li><li>Harsha, A., Trerotola, S. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Technical+aspects+of+adrenal+vein+sampling.">Technical aspects of adrenal vein sampling.</a> J Vasc Interv Radiol. 26 (2), 239 (2015).</li><li>Nishikawa, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Guidelines+for+the+diagnosis+and+treatment+of+primary+aldosteronism--the+Japan+Endocrine+Society+2009.">Guidelines for the diagnosis and treatment of primary aldosteronism--the Japan Endocrine Society 2009.</a> Endocr J. 58 (9), 711-721 (2011).</li><li>Nishimoto, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunohistochemistry+of+aldosterone+synthase+leads+the+way+to+the+pathogenesis+of+primary+aldosteronism.">Immunohistochemistry of aldosterone synthase leads the way to the pathogenesis of primary aldosteronism.</a> Mol Cell Endocrinol. , (2016).</li><li>Nishimoto, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adrenocortical+zonation+in+humans+under+normal+and+pathological+conditions.">Adrenocortical zonation in humans under normal and pathological conditions.</a> J Clin Endocrinol Metab. 95 (5), 2296-2305 (2010).</li><li>Funder, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Case+detection,+diagnosis,+and+treatment+of+patients+with+primary+aldosteronism:+an+endocrine+society+clinical+practice+guideline.">Case detection, diagnosis, and treatment of patients with primary aldosteronism: an endocrine society clinical practice guideline.</a> J Clin Endocrinol Metab. 93 (9), 3266-3281 (2008).</li><li>Heitzer, E., Auer, M., Ulz, P., Geigl, J. B., Speicher, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Circulating+tumor+cells+and+DNA+as+liquid+biopsies.">Circulating tumor cells and DNA as liquid biopsies.</a> Genome Med. 5 (8), 73 (2013).</li><li>Alix-Panabieres, C., Pantel, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+Applications+of+Circulating+Tumor+Cells+and+Circulating+Tumor+DNA+as+Liquid+Biopsy.">Clinical Applications of Circulating Tumor Cells and Circulating Tumor DNA as Liquid Biopsy.</a> Cancer Discov. 6 (5), 479-491 (2016).</li><li>Pinzani, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+of+circulating+tumor+cells+in+patients+with+adrenocortical+carcinoma:+a+monocentric+preliminary+study.">Detection of circulating tumor cells in patients with adrenocortical carcinoma: a monocentric preliminary study.</a> J Clin Endocrinol Metab. 98 (9), 3731-3738 (2013).</li><li>Pantel, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Circulating+epithelial+cells+in+patients+with+benign+colon+diseases.">Circulating epithelial cells in patients with benign colon diseases.</a> Clin Chem. 58 (5), 936-940 (2012).</li><li>Chiu, L. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+differentially+expressed+microRNAs+in+human+hepatocellular+adenoma+associated+with+type+I+glycogen+storage+disease:+a+potential+utility+as+biomarkers.">Identification of differentially expressed microRNAs in human hepatocellular adenoma associated with type I glycogen storage disease: a potential utility as biomarkers.</a> J Gastroenterol. 49 (8), 1274-1284 (2014).</li><li>Nishimoto, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aldosterone-stimulating+somatic+gene+mutations+are+common+in+normal+adrenal+glands.">Aldosterone-stimulating somatic gene mutations are common in normal adrenal glands.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 112 (33), E4591-E4599 (2015).</li></ol>

الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.

ووصفت الأسلوب سأفس مع نتائج القضايا ممثلة هنا. الحالات #1-2 والقضية رقم 3 وكانت النتائج سأفس على أساس المعالجة جراحيا وطبياً، على التوالي. وعلاوة على ذلك، أوضحت النتائج المتحصل عليها للحالات #1-3 أن تركيزات هرمون الستيرويد في عينات سأفس يعكس بوضوح النشاط الهرموني لانسجة الغدة الكظرية المنبع، لا سيما أورام، يفترض أنه نظراً لتدفق الدم الورم يتم الحصول عليها مباشرة. الأسلوب سأفس الذي قد يؤدي دوراً قيماً في تحديد أجزاء الغدة الكظرية المتضررة من الآفات البطاني الثنائية (مثلحالات #1-2) وفي التشخيص النهائي للجمعية (مثلاً، القضية رقم 3)، وفي بحوث العلوم الأساسية توضيح باثوفيسيولوجيس أمراض البطاني واكتشاف رواية المؤشرات الحيوية لهذه الأمراض كما هو مبين أدناه.
وتوصي المبادئ التوجيهية للسلطة الفلسطينية1،،من1821 أداء كليفلاند لتحديد آفة الغدة كظرية انفرادية للسلطة الفلسطينية عن طريق حساب نسبة لاتيراليزيد ([أعلى باك/المجلس المركزي الفلسطيني]/[السفلي باك/المجلس المركزي الفلسطيني]). ومع ذلك، هذا الحساب قد يؤدي خطأ في تشخيص عند إنتاج الكورتيزول آفات تتعايش. الغدي المنتجة لهرمون الكورتيزول المحتملة في حالة #2 وضوح تنتج كميات مفرطة من هرمون الكورتيزول في الغدة الكظرية اليمنى، وأوقفت إنتاج الكورتيزول في الغدة الكظرية اليمنى كان. من المهم ملاحظة أن العديد من التسعير أيضا إنتاج كميات مفرطة من هرمون الكورتيزول لأنه غالباً ما يعربون عن CYP11B2 و CYP11B120. قيد آخر لنسبة لاتيراليزيد في كليفلاند أنه لا يمكن التمييز بين التسعير الثنائية من مجهول السبب هايبرالدوستيرونيسم (مثلاً، القضية رقم 3).
وعلاوة على ذلك، عينات الدم سأفس قد يسهم إسهاما كبيرا في النهوض بالبحوث في مجال الأمراض الزائدة الهرمون والعلاجات. على سبيل المثال، قد يحتوي على الدليل الدم سأفس التي تم جمعها من الورم الحميد تركيزات عالية من تعميم خلايا الورم وعلى الحمض النووي22،23. دراسات سابقة أفادت أن الأسلوب خزعة سائلة سريرياً مفيدة للتمييز بين سرطان البطاني من الورم الحميد24 وتشخيص الورم الحميد حميدة الأمراض،من25إلى26. ولإثبات هذا المفهوم، تبذل المحاولات الجارية للكشف عن الطفرات المرتبطة بالجمعية البرلمانية الآسيوية بما في ذلك KCNJ5 باستخدام عينات سأفس وعالية أداء المقبل جيل المنظم7،11،19 ،27، التي قد تسهم في المستقبل أبا العلاجات. وقد توفر خلايا السائل-فحص الباحثين فرصة لإجراء التحليلات الجزيئية في الجمعية، وحاليا لا يمكن لأن هذا المرض لا يمكن معالجته جراحيا. بالإضافة إلى الأسلوب خزعة سائلة، قد يكون من المفيد لدراسة جميع لتحديد المؤشرات الحيوية ستيرويد رواية عينات التدفق ورم النقي.
الخطوات التقنية الحاسمة للأسلوب سأفس: (ط) تحديد كل رافد الوريد أثناء فينوغرافي الغدة الكظرية المركزية. (ثانيا) أثناء فينوغرافي، استخدام كمية صغيرة من التباين المتوسطة (0.1-0.3 مل) وطرد برفق لتجنب نزيف الغدة الكظرية. (ثالثا) المضي قدما في جويديويري بلطف ودون استخدام القوة أكثر من اللازم لتجنب عروق رافد اختراق. (رابعا) إنهاء الأسلوب فورا عند حدوث نزيف الغدة الكظرية أو يشتبه.
اختيار القسطرة الأصل أيضا ذات أهمية حاسمة لنجاح سأفس. بخصوص كليفلاند راف، أراكي et al. مؤخرا عن فائدة ثلاثية الأبعاد (3D)--نوع القسطرة مع شكل الثلاثي الأبعاد15. قسطرة مع الشكل R (الشكل 1A و 1B) وقسطرة مع الشكل العاشر (الشكل 1) متاحة القسطرة 3D من نوع سأفس. أراكي et al. حلل العديد من المعلمات التشريحية استناداً إلى نتائج الأشعة المقطعية وفيما يتعلق بمعدل نجاح القسطرة 3D من نوع15. في وحيد المتغير يحلل (ط) أقصر "قصيرة قطرها الأجوف فينا أدنى (IVC)" (ثانيا) أكبر "نسبة القطر الطويلة إلى قصيرة قطرها IVC" (ثالثا) أصغر "عرضية زاوية راف" (رابعا) أصغر "زاوية عرضية من راف تعديل"، و (v) أصغر " زاوية عمودي راف "يرتبط بمعدل النجاح في راف. في تحليل متعدد المتغيرات، فقط (رابعا) أصغر "تعديل زاوية عرضية راف" كان توقع مستقلة ناجحة راف قسطرة. وخلصوا إلى أن نتائج تحليل متعدد المتغيرات قد تكون سبب الاستقرار للقسطرة في IVC؛ إلا وهي عرض 3D من نوع القسطرة (السهم الأحمر ثنائي الاتجاه في الشكل 1A وج 1) يناسب جيدا في "قطر IVC طويلة،" وبالتالي تحقيق استقرار هذه القسطرة. عموما، عندما يكون "قطر IVC طويلة" تقل عن 25 مم، واستخدام MK الكظرية-R، خلاف ذلك عضو الكنيست العاشر.
عموما، أهمية سأفس: (ط) مساهمته في النهوض بالبحوث في مجال الأمراض الزائدة الهرمون (ثانيا) ترويجه لاستئصال الكظر جزئية عن طريق عزل آفة المنتجة للهرمونات على مستوى الغدة الكظرية الجزء (انظر القضية رقم 1) (ثالثا) تعزيز تقييم التجاوزات الكورتيزول بجمع افلوكس الغدة الكظرية النقي (انظر القضية رقم 2) (رابعا) الكشف عن هايبرالدوستيرونيسم مجهول السبب الفعلي (انظر القضية رقم 3) (v) مساهمته في النهوض بتطوير علاجات الرواية، التي قد تشمل ترانس-وريدي الاجتثاث المجزأ للغدة الكظرية. وهكذا، إذا كان يؤديها كما هو موضح هنا، أي أنجيوجرافير قد بنجاح تنفيذ بروتوكول سأفس بالإضافة إلى كليفلاند وتسهم في النهوض بالبحوث بشأن وعلاج الأمراض الزائد الهرمونية الكظرية.
سأفس مع كليفلاند تتم بشكل روتيني في مستشفى روسي يوكوهاما وجامعة سايتاما الطبية للمرضى السلطة الفلسطينية. بين تشرين الأول/أكتوبر 2014 و 2015 أيلول/سبتمبر، تنفيذ أنجيوجرافيرس اثنين (كم و SM) سأفس على 125 حالة (78 و 47 حالة، على التوالي) مع نسبة نجاح 100% وخلال فترة زمنية معقولة (58-130 دقيقة) دون تمزق الغدة الكظرية أو تجلط الدم التي تتطلب عملية جراحية. في هذا الأسلوب، تكبد تكلفة إضافية للصغير-القسطرة (10 إضعاف أكثر تكلفة في اليابان من القسطرة التقليدية) وقياسات باك/المجلس المركزي الفلسطيني من عينات رافد. ومع ذلك، نظراً لفوائد الإجراءات السريرية والعلمية، تكلفة إضافية له ما يبرره، على الأقل في البلدان الصناعية. واحد الحد الهامشي من سأفس واستئصال الكظر ثنائي هو أنه لا يجوز علاج آفات ثنائية، وهناك حاجة إلى تقييمات المتابعة، التي تشمل تقييم تكرار السلطة الفلسطينية (انظر القضية رقم 1). ولكن هذا ينطبق أيضا على الحالات الانفرادية في السلطة الفلسطينية. ونتيجة لذلك، تشير هذه النتائج إلى أن أي أنجيوجرافير لديه القدرة على أداء سأفس بنسبة نجاح عالية باتباع البروتوكول المنصوص عليه في هذه المادة الفيديو. وتعزيزا للدائماً يقدم ه سأفس الأسلوب في جميع أنحاء العالم، والتدريب العملي على التدريب في مستشفى روسي يوكوهاما وجامعة طب سايتاما. لا تتردد في الاتصال هذه المؤسسات إذا كنت مهتما بهذا الأسلوب.

الدوستيرونيسم الابتدائي (السلطة الفلسطينية) وتحت اﻻكلينيكي كوشينغ (SCS) هي الشروط التي الغدد الكظرية مستقلة تنتج كميات زائدة من الدوستيرون وهرمون الكورتيزول، على التوالي. في البالغين، السلطة الفلسطينية هو السبب الرئيسي بإنتاج الدوستيرون الورم الحميد (APA) أو مجهول السبب هايبرالدوستيرونيسم (الجمعية)1، بينما الطوائف المنبوذة ناجم أساسا إنتاج كورتيزول الورم الحميد2. طفرات جسدية في أيون قناة/مضخة الجينات، بما في ذلك قناة البوتاسيوم، تصحيح الداخل الفصيلية ي من الأعضاء 5 (KCNJ5)، تم تحديدها في التسعير، والمرتبطة بالحكم الذاتي الدوستيرون الإنتاج3،4 , 5 , 6-العائلية هايبرالدوستيرونيسم أنواع 1-3 أنواع نادرة من السلطة الفلسطينية، ونوع 3 بسبب طفرة جرثومية-خط KCNJ5 3. وكان حالة من نوع جديد من الأحداث السلطة الفلسطينية، والتي كان يفترض أن سبب mosaicism الوراثية عادي والخلايا KCNJ5 البطاني متحولة، التي تم تحديدها مؤخرا7. في حالة السلطة الفلسطينية الأحداث، كورتيسيس الكظرية يتألف من جزء طبيعي والآفات المنتجة الدوستيرون (hyperplastic)، مع الجزء العادي التي حددتها في رواية 'انتقائية فائقة' الغدة الكظرية وريدي أخذ العينات (سأفس، وتسمى أيضا الكظرية القطاعي أسلوب أخذ العينات وريدي) الموضحة هنا. ويسمح الأسلوب سأفس هذا المريض السلطة الفلسطينية الثنائية معالجتها جراحيا باستئصال الكظر ثنائي بينما تدخر جزء طبيعي7.
أخذ العينات وريدي الغدة الكظرية في البداية أفادت التقارير في عام 19718 عند التصوير المقطعي (CT) لم توضع بعد. في "التقليدية" الغدة الكظرية وريدي أخذ العينات (كليفلاند)، يتم إدراج قسطرة في الأوردة المركزية كلا الغدة الكظرية، يتم جمع عينات من الدم الذي. وهكذا، كليفلاند فقط مفيدة للحكم على لاتيراليتي للسلطة الفلسطينية وليس لتحديد الخيارات الجراحية لثنائية السلطة الفلسطينية. وضع الدكتور ماساو اومورا وكوهزوه ماكيتا (المؤلف من هذه المادة) في مستشفى روساي يوكوهاما الأسلوب سأفس من أجل التحقيق في خيارات العلاج الجراحي إضافية للسلطة الفلسطينية7،،من89، 10،11، التي قد تكون مفيدة أيضا للجان الدائمة، كما هو موضح في الحالة رقم 2 (انظر نتائج الممثل).
في سأفس، جمعت عينات الدم من الأوردة الصغيرة رافد الغدة الكظرية (تلفزيونات: أصغر من المنبع فروع الأوردة المركزية الغدة الكظرية) استخدام سبليت-نصيحة القسطرة الصغيرة متخصصة9. الغدة الكظرية اليمنى واليسرى وعادة ما يكون ثلاثة رافد عروق كل، أي، شاشات متفوقة، والأفقي، وأدنى في الغدة الكظرية اليمنى وكذلك تلفزيونات متفوقة-الوسيط والأطراف العليا والأفقي في الغدة الكظرية اليمنى. وقد حددت عدد قليل جداً من اتصالات بين هذه التلفزيونات12. ولذلك، تمكن سأفس من segment(s) الغدة الكظرية محددة لا تنتج الدوستيرون مستقلة داخل الكظرية المتضررة، مما يسمح لجراحة الغدة الكظرية الثنائية المراد تنفيذها على ثنائية السلطة الفلسطينية بينما تدخر الكظرية لا تتأثر الوقوف segment(s). وعلاوة على ذلك، الأسلوب سأفس المنطبقة على التحقيقات في الفسيولوجيا المرضية لأنواع رواية السلطة الفلسطينية مثل السلطة الفلسطينية الأحداث (الموصوفة أعلاه7) والثنائية أبا13،14. نظراً لأنها ذات أهمية حاسمة لمعالجة ثنائية نظام تقييم الأداء وتوضيح تلك المرضية، التي قد تشمل هايبرالدوستيرونيسم "مجهولة"، ينصح سأفس في جميع أنحاء العالم، ومن هنا، قدمت وصفاً مفصلاً للطريقة التي ينطوي عليها هنا.

<table><tbody><tr><td>CX-Catheter EII with the MK Adrenal-R shape</td><td>Silux co.</td><td>GA-E5F-MK1-60S</td><td>3D catheter for right adrenal venous sampling</td></tr><tr><td>CX-Catheter EII with the MK X shape</td><td>Silux co.</td><td>GA-E5F [MK-X] 60S</td><td>3D catheter for right adrenal venous sampling</td></tr><tr><td>Aqua V3 guidewire</td><td>Formec co.</td><td>HS8616H</td><td>guidewire for the micro-catheter</td></tr><tr><td>Gold Crest Micro-Catheter</td><td>Goldcrest Medic Inc.</td><td>KCV29S1S-OM</td><td>micro-catheter for superselective adrenal venous sampling</td></tr><tr><td>CX catheter-UII with the MK ADRENAL-L shape</td><td>Silux co.</td><td>GA-US5F [MK-3] B65S</td><td>3D catheter for left adrenal venous sampling</td></tr></tbody></table>

a novel method: super-selective adrenal venous sampling

الدوستيرونيسم الابتدائي (السلطة الفلسطينية) وتحت اﻻكلينيكي كوشينغ (SCS) هي الشروط التي الغدد الكظرية مستقلة تنتج كميات مفرطة من الدوستيرون وهرمون الكورتيزول، على التوالي. أسلوب أخذ العينات وريدي الغدة الكظرية التقليدية (كليفلاند) جمع عينات دم من كلا الأوردة المركزية الغدة الكظرية وهي مفيدة لتحديد لاتيراليتي إنتاج هرمون الزائدة في lesion(s) انفرادية، موثقة في حالات السلطة الفلسطينية. في كليفلاند، تستخدم تركيزات البلازما الكورتيزول (الكمفين) لتطبيع تركيزات البلازما الدوستيرون (PACs). تم تطوير أسلوب أخذ عينات وريدي الغدة كظرية (سأفس) "انتقائية فائقة" رواية باستخدام مايكرو-قسطرة، التي تقوم بجمع عينات الدم من الأوردة الكظرية رافد (تلفزيون). الدوريات في عينات سأفس لا تتطلب تطبيع المجلس المركزي الفلسطيني لعينات تحتوي على كمية محدودة من الدم الوريدية الجهازية، أن وجدت. تمكين أسلوب سأفس lesion(s) القطاعي ليتم اكتشافها في كلا الغدد الكظرية، التي يجوز أن تعامل باستئصال الكظر ثنائية، وبالتالي تجنيب خالية من الآفة segment(s). الغدة الكظرية اليمنى واليسرى وعادة ما يكون ثلاثة تلفزيونات كل، أي، شاشات متفوقة، والأفقي، وأقل شأنا في الغدة الكظرية اليمنى وكذلك تلفزيونات متفوقة-الوسيط والأطراف العليا والأفقي في اليسار الغدة الكظرية. في أسلوب سأفس، القسطرة الأصل محددة وأسلوب للتعامل معهم هي المطلوبة، وقد ورد وصف هذه الوثيقة. وعلاوة على ذلك، يتم عرض النتائج سأفس من ثلاث حالات للسلطة الفلسطينية: الورم الحميد الثنائية المنتجة الدوستيرون (APA) (القضية رقم 1)، وأبا الأيسر وحق ممكن الورم الحميد المنتجة لهرمون الكورتيزول يسبب المنبوذة (القضية رقم 2)، وهايبرالدوستيرونيسم مجهول السبب الذي الثنائية شرائح الغدة الكظرية تنتج كميات مفرطة من الدوستيرون (الحالة رقم 3). الأسلوب سأفس ليست صعبة للخبراء أنجيوجرافيرس، وهكذا، يوصي في جميع أنحاء العالم لعلاج حالات السلطة الفلسطينية التي كليفلاند لا تمثل خياراً صالحاً علاج جراحي.

Watch this Scientific Journal Video about A Novel Method: Super-selective Adrenal Venous Sampling at JoVE.com

A Novel Method: Super-selective Adrenal Venous Sampling

'انتقائية فائقة' أخذ العينات وريدي الغدة الكظرية (سأفس، تسمى أيضا أخذ العينات وريدي الغدة الكظرية القطاعي: sAVS) أجرى باستخدام مايكرو-قسطرة لتحديد segment(s) الغدة الكظرية التي تنتج كميات كبيرة من الهرمونات. وصفت هذه التقنية سأفس والحالات التي حددتها lesion(s) القطاعي الغدة الكظرية سأفس وعرضت ونوقشت فائدة سأفس في البحوث الغدة الكظرية في المستقبل.

أسلوب رواية: انتقائية فائقة الغدة الكظرية وريدي أخذ العينات

Primary aldosteronism (PA) and subclinical Cushing&#39;s syndrome (SCS) are conditions in which the adrenal glands autonomously produce excessive amounts ...

a-novel-method-super-selective-adrenal-venous-sampling

Research

JoVE Journal

Medicine

23.2K Views.  Nerima Hikarigaoka Hospital. 'انتقائية فائقة' أخذ العينات وريدي الغدة الكظرية (سأفس، تسمى أيضا أخذ العينات وريدي الغدة الكظرية القطاعي: sAVS) أجرى باستخدام مايكرو-قسطرة لتحديد segment(s) الغدة الكظرية التي تنتج كميات كبيرة من الهرمونات. وصفت هذه التقنية سأفس والحالات التي حددتها lesion(s) القطاعي الغ?...

Video: A Novel Method: Super-selective Adrenal Venous Sampling

Femoral Arterial and Venous Catheterization for Blood Sampling, Drug Administration and Conscious Blood Pressure and Heart Rate Measurements

In multiple fields of study, access to the circulatory system in laboratory studies is necessary. Pharmacological studies in rats using chronically implanted catheters permit a researcher to effectively and humanely administer substances, perform repeated blood sampling and assists in conscious direct measurements of blood pressure and heart rate. Once the catheter is implanted long-term sampling is possible. Patency and catheter life depends on multiple factors including the lock solution used, flushing regimen and catheter material. This video will demonstrate the methodology of femoral artery and venous catheterization of the rat. In addition the video will demonstrate the use of the femoral venous and arterial catheters for blood sampling, drug administration and use of the arterial catheter in taking measurements of blood pressure and heart rate in a conscious freely-moving rat. A tether and harness attached to a swivel system will allow the animal to be housed and have samples taken by the researcher with minimal disruption to the animal. To maintain patency of the catheter, careful daily maintenance of the catheter is required using lock solution (100 U/ml heparinized saline), machine-ground blunt tip syringe needles and the use of syringe filters to minimize potential contamination. With careful aseptic surgical techniques, proper catheter materials and careful catheter maintenance techniques, it is possible to sustain patent catheters and healthy animals for long periods of time (several weeks).

Chronic catheterization of blood vessels in the rat is often required for administration of substances, obtain blood sample over a period of time or for direct conscious blood pressure measurements. Femoral arterial catheterization of the rat and corresponding measurements of blood pressure in the conscious animal will be demonstrated.

الفخذ قسطرة الشرايين والأوردة لاخذ عينات من الدم ، وإدراكا منها الدواء وضغط الدم وقياسات معدل ضربات القلب

In multiple fields of study, access to the circulatory system in laboratory studies is necessary. Pharmacological studies in rats using chronically ...

A Convenient Method for Extraction and Analysis with High-Pressure Liquid Chromatography of Catecholamine Neurotransmitters and Their Metabolites

The extraction and analysis of catecholamine neurotransmitters in biological fluids is of great importance in assessing nervous system function and related diseases, but their precise measurement is still a challenge. Many protocols have been described for neurotransmitter measurement by a variety of instruments, including high-pressure liquid chromatography (HPLC). However, there are shortcomings, such as complicated operation or hard-to-detect multiple targets, which cannot be avoided, and presently, the dominant analysis technique is still HPLC coupled with sensitive electrochemical or fluorimetric detection, due to its high sensitivity and good selectivity. Here, a detailed protocol is described for the pretreatment and detection of catecholamines with high pressure liquid chromatography with electrochemical detection (HPLC-ECD) in real urine samples of infants, using electrospun composite nanofibers composed of polymeric crown ether with polystyrene as adsorbent, also known as the packed-fiber solid phase extraction (PFSPE) method. We show how urine samples can be easily precleaned by a nanofiber-packed solid phase column, and how the analytes in the sample can be rapidly enriched, desorbed, and detected on an ECD system. PFSPE greatly simplifies the pretreatment procedures for biological samples, allowing for decreased time, expense, and reduction of the loss of targets. 
Overall, this work illustrates a simple and convenient protocol for solid-phase extraction coupled to an HPLC-ECD system for simultaneous determination of three monoamine neurotransmitters (norepinephrine (NE), epinephrine (E), dopamine (DA)) and two of their metabolites (3-methoxy-4-hydroxyphenylglycol (MHPG) and 3,4-dihydroxy-phenylacetic acid (DOPAC)) in infants' urine. The established protocol was applied to assess the differences of urinary catecholamines and their metabolites between high-risk infants with perinatal brain damage and healthy controls. Comparative analysis revealed a significant difference in urinary MHPG between the two groups, indicating that the catecholamine metabolites may be an important candidate marker for early diagnosis of cases at risk for brain damage in infants.

We present a convenient solid-phase extraction coupled to high-pressure liquid chromatography (HPLC) with electrochemical detection (ECD) for simultaneous determination of three monoamine neurotransmitters and two of their metabolites in infants' urine. We also identify the metabolite MHPG as a potential biomarker for the early diagnosis of brain damage for infants.

طريقة مريحة لاستخراج وتحليل مع اللوني السائل عالي الضغط الكاتيكولامينات العصبية وعلى نواتج الأيض

The extraction and analysis of catecholamine neurotransmitters in biological fluids is of great importance in assessing nervous system function and ...

Chemistry

استكشاف تبادل الأيض في الأنسجة الدهنية البنية

Arteriovenous Metabolomics to Measure In Vivo Metabolite Exchange in Brown Adipose Tissue

Brown adipose tissue (BAT) plays a crucial role in regulating metabolic homeostasis through a unique energy expenditure process known as non-shivering thermogenesis. To achieve this, BAT utilizes a diverse menu of circulating nutrients to support its high metabolic demand. Additionally, BAT secretes metabolite-derived bioactive factors that can serve as either metabolic fuels or signaling molecules, facilitating BAT-mediated intratissue and/or intertissue communication. This suggests that BAT actively participates in systemic metabolite exchange, an interesting feature that is beginning to be explored. Here, we introduce a protocol for in vivo mouse-level optimized BAT arteriovenous metabolomics. The protocol focuses on relevant methods for thermogenic stimulations and an arteriovenous blood sampling technique using Sulzer's vein, which selectively drains interscapular BAT-derived venous blood and systemic arterial blood. Next, a gas chromatography-based metabolomics protocol using those blood samples is demonstrated. The use of this technique should expand the understanding of BAT-regulated metabolite exchange at the inter-organ level by measuring the net uptake and release of metabolites by BAT.

تسليط الضوء على المؤلف: إلقاء الضوء على طرق جديدة لاستقلاب الأنسجة الدهنية والوقاية من الأمراض 

In this protocol, methods relevant for BAT-optimized arteriovenous metabolomics using GC-MS in a mouse model are outlined. These methods allow for the acquisition of valuable insights into BAT-mediated metabolite exchange at the organismal level.

الأيض الشرياني الوريدي لقياس تبادل الأيض في الجسم الحي في الأنسجة الدهنية البنية

Brown adipose tissue (BAT) plays a crucial role in regulating metabolic homeostasis through a unique energy expenditure process known as non-shivering ...

Biochemistry

Subclavian Vein Puncture As an Alternative Method of Blood Sample Collection in Rats

Blood collection with enough blood volume is essential in animal experiments. Blood collection from the tail vein of rats is popular and less stressful compared to other more aggressive methods such as retro-orbital plexus sample collection. However, this blood collection method is sometimes limited by an unsatisfactory success rate. Here, we introduce a method for blood collection through the subclavian vein puncture. The subclavian vein is located just under the clavicle and this vein is large enough to fulfill the volume requirements of blood collection. Our results show that this method is safe and applicable for blood collection sampling with the required blood volume. Blood collection through the subclavian vein puncture could serve as an alternative blood collection method in case of failed tail vein blood sampling in rats.

Here, we present a protocol to collect blood samples from the rat subclavian vein.

ثقب الوريد Subclavian كطريقة بديلة لجمع عينات الدم في الفئران

Blood collection with enough blood volume is essential in animal experiments. Blood collection from the tail vein of rats is popular and less stressful ...

Confocal Microscopy to Measure Three Modes of Fusion Pore Dynamics in Adrenal Chromaffin Cells

Dynamic fusion pore opening and closure mediate exocytosis and endocytosis and determine their kinetics. Here, it is demonstrated in detail how confocal microscopy was used in combination with patch-clamp recording to detect three fusion modes in primary culture bovine adrenal chromaffin cells. The three fusion modes include 1) close-fusion (also called kiss-and-run), involving fusion pore opening and closure, 2) stay-fusion, involving fusion pore opening and maintaining the opened pore, and 3) shrink-fusion, involving shrinkage of the fusion-generated &#937;-shape profile until it merges completely at the plasma membrane.
To detect these fusion modes, the plasma membrane was labeled by overexpressing mNeonGreen attached with the PH domain of phospholipase C &#948; (PH-mNG), which binds to phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate (PtdIns(4,5)P2) at the cytosol-facing leaflet of the plasma membrane; vesicles were loaded with the fluorescent false neurotransmitter FFN511 to detect vesicular content release; and Atto 655 was included in the bath solution to detect fusion pore closure. These three fluorescent probes were imaged simultaneously at ~20-90 ms per frame in live chromaffin cells to detect fusion pore opening, content release, fusion pore closure, and fusing vesicle size changes. The analysis method is described to distinguish three fusion modes from these fluorescence measurements. The method described here can, in principle, apply to many secretory cells beyond chromaffin cells.

This protocol describes a confocal imaging technique to detect three fusion modes in bovine adrenal chromaffin cells. These fusion modes include 1) close-fusion (also called kiss-and-run), involving fusion pore opening and closure, 2) stay-fusion, involving fusion pore opening and maintaining the opened pore, and 3) shrink-fusion, involving fused vesicle shrinkage.

المجهر البؤري لقياس ثلاثة أنماط من ديناميكيات مسام الانصهار في خلايا الكرومافين الكظرية

Dynamic fusion pore opening and closure mediate exocytosis and endocytosis and determine their kinetics. Here, it is demonstrated in detail how confocal ...

Neuroscience

Fecal Glucocorticoid Analysis: Non-invasive Adrenal Monitoring in Equids

Adrenal activity can be assessed in the equine species by analysis of feces for corticosterone metabolites. During a potentially aversive situation, corticotrophin releasing hormone (CRH) is released from the hypothalamus in the brain. This stimulates the release of adrenocorticotrophic hormone (ACTH) from the pituitary gland, which in turn stimulates release of glucocorticoids from the adrenal gland. In horses the glucocorticoid corticosterone is responsible for several adaptations needed to support equine flight behaviour and subsequent removal from the aversive situation. Corticosterone metabolites can be detected in the feces of horses and assessment offers a non-invasive option to evaluate long term patterns of adrenal activity. Fecal assessment offers advantages over other techniques that monitor adrenal activity including blood plasma and saliva analysis. The non-invasive nature of the method avoids sampling stress which can confound results. It also allows the opportunity for repeated sampling over time and is ideal for studies in free ranging horses. This protocol describes the enzyme linked immunoassay (EIA) used to assess feces for corticosterone, in addition to the associated biochemical validation.

Adrenal activity can be assessed in the equine species by analysis of feces for corticosterone metabolites. The method offers a non-invasive option to assess long term patterns in both domestic and free ranging horses. This protocol describes the enzyme linked immunoassay involved and the associated biochemical validation.

برازي تحليل جلايكورتيكود: رصد الغدة الكظرية غير الغازية في الخيليات

Adrenal activity can be assessed in the equine species by analysis of feces for corticosterone metabolites. During a potentially aversive situation, ...

Biology

السائل الدماغي الشوكي وسحب الدم من الفئران مع تسجيل EEG المتزامن

Sampling Cerebrospinal Fluid and Blood from Lateral Tail Vein in Rats During EEG Recordings

Because the composition of body fluids reflects many physiological and pathological dynamics, biological liquid samples are commonly obtained in many experimental contexts to measure molecules of interest, such as hormones, growth factors, proteins, or small non-coding RNAs. A specific example is the sampling of biological liquids in the research of biomarkers for epilepsy. In these studies, it is desirable to compare the levels of molecules in cerebrospinal fluid (CSF) and in plasma, by withdrawing CSF and plasma in parallel and considering the time distance of the sampling from and to seizures. The combined CSF and plasma sampling, coupled with video-EEG monitoring in epileptic animals, is a promising approach for the validation of putative diagnostic and prognostic biomarkers. Here, a procedure of combined CSF withdrawal from cisterna magna and blood sampling from the lateral tail vein in epileptic rats that are continuously video-EEG monitored is described. This procedure offers significant advantages over other commonly used techniques. It permits rapid sampling with minimal pain or invasiveness, and reduced time of anesthesia. Additionally, it can be used to obtain CSF and plasma samples in both tethered and telemetry EEG recorded rats, and it may be used repeatedly across multiple days of experiment. By minimizing the stress due to sampling by shortening isoflurane anesthesia, measures are expected to reflect more accurately the true levels of investigated molecules in biofluids. Depending on the availability of an appropriate analytical assay, this technique may be used to measure the levels of multiple, different molecules while performing EEG recording at the same time.

تسليط الضوء على المؤلف: الحصول على عينات عالية الجودة من السائل الدماغي الشوكي والدم لاكتشاف العلامات الحيوية للصرع 

The protocol shows repeated cerebrospinal fluid and blood collections from epileptic rats performed in parallel with continuous video-electroencephalogram (EEG) monitoring. These are instrumental for exploring possible links between changes in various body fluid molecules and seizure activity.

أخذ عينات من السائل الدماغي الشوكي والدم من الوريد الذيل الجانبي في الفئران أثناء تسجيلات EEG

Because the composition of body fluids reflects many physiological and pathological dynamics, biological liquid samples are commonly obtained in many ...

أسلوب رواية: انتقائية فائقة الغدة الكظرية وريدي أخذ العينات

Summary

Explore More Videos

PLAYLIST