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Protocols for Oral Infection of Lepidopteran Larvae with Baculovirus

Baculoviruses are widely used both as protein expression vectors and as insect pest control agents. This video shows how lepidopteran larvae can be ...

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Protocols for Microapplicator-assisted Infection of Lepidopteran Larvae with Baculovirus

Baculoviruses are widely used both as protein expression vectors and as insect pest control agents. . This video shows how lepidopteran larvae can be ...

Iowa State University

&#x6162;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5B58;&#x5728;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4EBA;&#x53E3;&#x6709;&#x5173;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x578B;&#xFF0C;&#x901A;&#x5E38;&#x6240;&#x8BF4;&#x7684;&#x51C6;&#x79CD;&#x7684;&#x4F53;&#x5185;&#x3002;&#x51C6;&#x79CD;&#x7ED3;&#x6784;&#x662F;&#x590D;&#x6742;&#x9002;&#x5E94;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x548C;&#x8D21;&#x732E;&#x7387;&#x9AD8;&#x7684;&#x6162;&#x75C5;&#x6BD2;&#x4E2D;&#x8E49;&#x8DCE;&#x52AA;&#x529B;&#x5236;&#x8BA2;&#x6709;&#x6548;&#x7684;&#x75AB;&#x82D7;&#x548C;&#x6297;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6CBB;&#x7597;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x6F14;&#x53D8;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C06;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x4ECE;&#x6162;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8C03;&#x8282;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x51AF;&#xFF0C;&#x8FC7;&#x53BB;&#x5728;&#x5C0F;&#x9A6C;&#x5E26;&#x9A6C;&#x4F20;&#x67D3;&#x6027;&#x8D2B;&#x8840;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x611F;&#x67D3;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x9057;&#x4F20;&#x53D8;&#x5F02;&#x7684;&#x7EB5;&#x5411;&#x7814;&#x7A76;&#x9057;&#x4F20;&#x6570;&#x636E;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x3002;&#x6B63;&#x5982;&#x5176;&#x4ED6;&#x7684;&#x6162;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6570;&#x636E;&#x6307;&#x51FA;&#xFF0C;&#x51AF;&#x53D8;&#x79CD;&#x5C55;&#x51FA;&#x51C6;&#x79CD;&#x5B57;&#x7B26;&#x3002;&#x8FDB;&#x5316;&#x548C;&#x5206;&#x533A;&#x5206;&#x6790;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x51AF;&#x51C6;&#x79CD;&#x7EC4;&#x6210;&#x671F;&#x95F4;&#x611F;&#x67D3;&#x5171;&#x5B58;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x4E9A;&#x7FA4;&#x3002;&#x4E00;&#x4E2A;&#x4E9A;&#x7FA4;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x7D2F;&#x79EF;&#x53D8;&#x5316;&#x4EE5;&#x7EBF;&#x6027;&#x3001; &#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x65F6;&#x95F4;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x5176;&#x4ED6;&#x8FDB;&#x5316;&#x5448;&#x653E;&#x5C04;&#x72B6;&#x5730;&#x4ECE;&#x5E38;&#x89C1;&#x7684;&#x53D8;&#x79CD;&#x3002;&#x968F;&#x7740;&#x65F6;&#x95F4;&#x7684;&#x63A8;&#x79FB;&#x4E24;&#x4E9A;&#x7FA4;&#x91CD;&#x5408;&#x7684;&#x4F18;&#x52BF;&#x5728;&#x5FAA;&#x73AF;&#x53D8;&#x5316;&#x5728;&#x75BE;&#x75C5;&#x72B6;&#x6001;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E;&#x4E24;&#x7EC4;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x4F18;&#x52BF;&#x3002;&#x77AC;&#x65F6;&#x8868;&#x8FBE;&#x68C0;&#x6D4B;&#x6307;&#x51FA;&#x7684;&#x4E24;&#x79CD;&#x5C45;&#x6C11;&#x51AF;&#x6838;&#x51FA;&#x53E3;&#x6D3B;&#x52A8;&#x4E2D;&#x5DEE;&#x522B;&#x5F88;&#x5927;&#x3002;Chimeric &#x7EC4;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x514B;&#x9686;&#x542B;&#x6709;&#x51AF;&#x57FA;&#x56E0;&#x578B;&#x4EE3;&#x8868;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x4EBA;&#x53E3;&#x4E0D;&#x540C;&#x7387;&#x548C;&#x4F53;&#x5916;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x590D;&#x5236;&#x7684;&#x6574;&#x4F53;&#x6C34;&#x5E73;&#x3002;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x8868;&#x578B;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x4E0D;&#x540C;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6027;&#x4E9A;&#x7FA4;&#x7684;&#x5171;&#x5B58;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x611F;&#x67D3;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x4E3B;&#x673A;&#x5185;&#x73AF;&#x5883;&#x53D8;&#x5316;&#x7684;&#x9002;&#x5E94;&#x6027;&#x5F3A;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x3002;&#x5177;&#x6709;&#x591A;&#x4E2A;&#x4E9A;&#x7FA4;&#x51C6;&#x79CD;&#x6A21;&#x578B;&#x53EF;&#x80FD;&#x989D;&#x5916;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x7684;&#x6162;&#x75C5;&#x6BD2;&#x50A8;&#x5C42;&#x6027;&#x8D28;&#x548C;&#x6F14;&#x5316;&#x7684;&#x6297;&#x539F;&#x6027;&#x548C;&#x8010;&#x836F;&#x53D8;&#x5F02;&#x3002;

&#x9A6C;&#x4F20;&#x67D3;&#x6027;&#x8D2B;&#x8840;&#x75C5;&#x6BD2;&#x51AF;&#x4E9A;&#x7FA4;&#x5171;&#x5B58;&#x4F53;&#x5185;&#x548C;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x8868;&#x578B;&#x3002;

Lentiviruses exist in vivo as a population of related, nonidentical genotypes, commonly referred to as quasispecies. The quasispecies structure is characteristic of complex adaptive systems and contributes to the high rate of evolution in lentiviruses that confounds efforts to develop effective vaccines and antiviral therapies. Here, we describe analyses of genetic data from longitudinal studies of genetic variation in a lentivirus regulatory protein, Rev, over the course of disease in ponies experimentally infected with equine infectious anemia virus. As observed with other lentivirus data, the Rev variants exhibited a quasispecies character. Phylogenetic and partition analyses suggested that the Rev quasispecies comprised two distinct subpopulations that coexisted during infection. One subpopulation appeared to accumulate changes in a linear, time-dependent manner, while the other evolved radially from a common variant. Over time, the two subpopulations cycled in predominance coincident with changes in the disease state, suggesting that the two groups differed in selective advantage. Transient expression assays indicated the two populations differed significantly in Rev nuclear export activity. Chimeric proviral clones containing Rev genotypes representative of each population differed in rate and overall level of virus replication in vitro. The coexistence of genetically distinct viral subpopulations that differ in phenotype provides great adaptability to environmental changes within the infected host. A quasispecies model with multiple subpopulations may provide additional insight into the nature of lentivirus reservoirs and the evolution of antigenic and drug-resistant variants.

Subpopulations of equine infectious anemia virus Rev coexist in vivo and differ in phenotype.

Lentivirus existent in vivo comme une population de g&eacute;notypes connexes, non identiques, commun&eacute;ment appel&eacute;s quasi-esp&egrave;ces. La structure de quasi-esp&egrave;ces est caract&eacute;ristique des syst&egrave;mes adaptatifs complexes et contribue au taux &eacute;lev&eacute; d&#39;&eacute;volution dans les lentivirus qui confond les efforts visant &agrave; d&eacute;velopper des vaccins efficaces et th&eacute;rapies antivirales. Nous d&eacute;crivons ici les analyses des donn&eacute;es g&eacute;n&eacute;tiques d&#39;&eacute;tudes longitudinales de la variation g&eacute;n&eacute;tique dans une lentivirus prot&eacute;ine r&eacute;gulatrice, Rev, au cours de la maladie chez les poneys exp&eacute;rimentalement infect&eacute;s par le virus de l&#39;an&eacute;mie infectieuse des &eacute;quid&eacute;s. Tel qu&#39;observ&eacute; avec d&#39;autres donn&eacute;es de lentivirus, les variantes de Rev pr&eacute;sentaient un caract&egrave;re de quasi-esp&egrave;ces. Des analyses phylog&eacute;n&eacute;tiques et partition a sugg&eacute;r&eacute; que le Rev quasi-esp&egrave;ces comprenaient deux sous-populations distinctes qui ont coexist&eacute; pendant l&#39;infection. Une sous-population semble accumuler les modifications d&#39;une mani&egrave;re lin&eacute;aire, en fonction du temps, tandis que l&#39;autre &eacute;volu&eacute; radialement &agrave; partir d&#39;une variante courante. Au fil du temps, les deux sous-populations p&eacute;dalent &agrave; pr&eacute;dominance qui co&iuml;ncide avec l&#39;&eacute;volution de l&#39;&eacute;tat de maladie, ce qui sugg&egrave;re que les deux groupes diff&egrave;rent en avantage s&eacute;lectif. Expression transitoire ont r&eacute;v&eacute;l&eacute; que les deux populations diff&egrave;rent significativement dans l&#39;activit&eacute; d&#39;exportation nucl&eacute;aire Rev. Chimeric proviral clones contenant Rev g&eacute;notypes repr&eacute;sentant de chacune des populations diff&egrave;re en fr&eacute;quence et niveau de r&eacute;plication virale in vitro. La coexistence de sous-populations virales g&eacute;n&eacute;tiquement distinctes qui diff&egrave;rent dans le ph&eacute;notype fournit la grande capacit&eacute; d&#39;adaptation aux changements environnementaux au sein de l&#39;h&ocirc;te infect&eacute;. Un mod&egrave;le de quasi-esp&egrave;ces avec plusieurs sous-populations peut-&ecirc;tre fournir mieux comprendre la nature des r&eacute;servoirs de lentivirus et l&#39;&eacute;volution des variants antig&eacute;niques et r&eacute;sistantes aux m&eacute;dicaments.

Sous-populations de virus de l&#39;an&eacute;mie infectieuse des &eacute;quid&eacute;s Rev coexistent in vivo et diff&egrave;rent dans le ph&eacute;notype.

Subpopulationen von infekti&#xF6;ser An&#xE4;mie Virus Rev in vivo nebeneinander und unterscheiden sich in Ph&#xE4;notyp.

Lentiviruses esiste in vivo come una popolazione di genotipi correlati, elaborazione, comunemente indicato come quasispecie. La struttura delle quasispecie &egrave; caratteristica dei sistemi complessi adattivi e contribuisce all&#39;alto tasso di evoluzione in lentivirali che confonde gli sforzi per sviluppare terapie antivirali e vaccini efficaci. Descriviamo qui, analisi dei dati genetici da studi longitudinali di variazione genetica in una lentivirus regolamentare proteine, Rev, nel corso della malattia in pony sperimentalmente infettati con virus anemia infettiva equina. Come osservato con altri dati di lentivirus, le varianti Rev esposto un carattere quasispecie. Phylogenetic e partizione analisi ha suggerito che la quasispecie Rev composto da due distinte sottopopolazioni che coesistettero durante l&#39;infezione. Una sottopopolazione &egrave; apparso ad accumulare le modifiche in maniera lineare, tempo-dipendente, mentre l&#39;altro si &egrave; evoluta radialmente da una variante comune. Nel corso del tempo, le due sottopopolazioni pedalato in predominanza coincidente con i cambiamenti dello stato di malattia, suggerendo che i due gruppi differivano in vantaggio selettivo. Analisi di espressione transiente indicato che le due popolazioni differivano in modo significativo nell&#39;attivit&agrave; di esportazione nucleare Rev. Chimeric proviral cloni contenenti Rev genotipi rappresentativi di ciascuna popolazione differiva in frequenza e in generale livello di replicazione del virus in vitro. La coesistenza delle sottopopolazioni virali geneticamente distinte che si differenziano nel fenotipo fornisce grande adattabilit&agrave; ai cambiamenti ambientali all&#39;interno dell&#39;host infetto. Un modello delle quasispecie con molteplici sottopopolazioni pu&ograve; fornire ulteriore spaccato la natura dei serbatoi lentivirus e l&#39;evoluzione delle varianti antigeniche e farmaco-resistenti.

Sottopopolazioni di virus anemia infettiva equina Rev coesistono in vivo e si differenziano nel fenotipo.

&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x30EC; in vivo &#x6E96;&#x7A2E;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#x3001;&#x95A2;&#x9023;&#x3001;&#x7570;&#x7A2E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x578B;&#x306E;&#x4EBA;&#x53E3;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6E96;&#x7A2E;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x306F;&#x8907;&#x96D1;&#x9069;&#x5FDC;&#x7CFB;&#x306E;&#x7279;&#x5FB4;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3057;&#x3001;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306A;&#x30EF;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x3084;&#x6297;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x7642;&#x6CD5;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x52AA;&#x529B;&#x3092;&#x56F0;&#x60D1;&#x3055;&#x305B;&#x307E;&#x3059;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x30EC;&#x306E;&#x9032;&#x5316;&#x306E;&#x9AD8;&#x7387;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x3001;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C1; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;, Rev&#x3001;&#x30DD;&#x30CB;&#x30FC;&#x99AC;&#x4F1D;&#x67D3;&#x6027;&#x8CA7;&#x8840;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x611F;&#x67D3;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x75BE;&#x60A3;&#x306E;&#x7D4C;&#x904E;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x5909;&#x7570;&#x306E;&#x7E26;&#x65AD;&#x7814;&#x7A76;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4ED6;&#x306E;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C1; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; &#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x3068;&#x89B3;&#x6E2C;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;Rev &#x4E9C;&#x7A2E;&#x6E96;&#x7A2E;&#x6587;&#x5B57;&#x3092;&#x51FA;&#x5C55;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7CFB;&#x7D71;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x89E3;&#x6790; Rev &#x6E96;&#x7A2E;&#x4E2D;&#x306B;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x3092;&#x5408;&#x4F75;&#x3057;&#x305F; 2 &#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B; subpopulations &#x304B;&#x3089;&#x6210;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;1 &#x3064;&#x306E;&#x4E9C;&#x7A2E;&#x4ED6;&#x653E;&#x5C04;&#x72B6;&#x30B3;&#x30E2;&#x30F3;&#x30D0;&#x30EA;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C8;&#x304B;&#x3089;&#x9032;&#x5316;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x9593;&#x3001;&#x7DDA;&#x5F62;&#x3001;&#x6642;&#x9593;&#x4F9D;&#x5B58;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x5909;&#x66F4;&#x3092;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3059;&#x308B;&#x767B;&#x5834;&#x3002;&#x6642;&#x9593;&#x3092;&#x304B;&#x3051;&#x3066;&#x3001;2 &#x3064;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30DD;&#x30D4;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x512A;&#x4F4D;&#x6027;&#x3067;&#x4E00;&#x81F4;&#x306E;&#x75BE;&#x60A3;&#x72B6;&#x614B;&#x306E;&#x5909;&#x66F4;&#x306E; 2 &#x3064;&#x306E;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x3067;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x512A;&#x4F4D;&#x6027;&#x304C;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x5165;&#x308C;&#x76F4;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E00;&#x904E;&#x6027;&#x767A;&#x73FE;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306F;&#x3001;2 &#x3064;&#x306E;&#x4EBA;&#x53E3;&#x306F;&#x5927;&#x5E45;&#x306B; Rev &#x6838;&#x8F38;&#x51FA;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3067;&#x7570;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30D7;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; &#x30AD;&#x30E1;&#x30E9;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF; &#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x5185;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x3068;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x8907;&#x88FD;&#x306E; in vitro &#x3067;&#x306E;&#x5168;&#x4F53;&#x7684;&#x306A;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3054;&#x3068;&#x306E;&#x4EBA;&#x53E3;&#x306E;&#x4EE3;&#x8868;&#x3092;&#x542B;&#x3080; Rev &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x578B;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3067;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x306B;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30DD;&#x30D4;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x5171;&#x5B58;&#x74B0;&#x5883;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3001;&#x611F;&#x67D3;&#x3057;&#x305F;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x5185;&#x3078;&#x306E;&#x5049;&#x5927;&#x306A;&#x9069;&#x5FDC;&#x6027;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6E96;&#x7A2E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30DD;&#x30D4;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C1; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x8CAF;&#x6C34;&#x6C60;&#x306E;&#x6027;&#x8CEA;&#x3068;&#x6297;&#x539F;&#x6027;&#x3068;&#x85AC;&#x5264;&#x8010;&#x6027;&#x306E;&#x4E9C;&#x7A2E;&#x306E;&#x9032;&#x5316;&#x306E;&#x8FFD;&#x52A0;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x99AC;&#x4F1D;&#x67D3;&#x6027;&#x8CA7;&#x8840;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; Rev &#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30DD;&#x30D4;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; in vivo &#x3067;&#x5171;&#x5B58;&#x3057;&#x3001;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3067;&#x7570;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Lentiviruses &#xAD00;&#xB828;, nonidentical genotypes, &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; quasispecies&#xC774; &#xB77C;&#xACE0;&#xB3C4;&#xC758; &#xC778;&#xAD6C;&#xB85C; &#xC11C; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xC874;&#xC7AC;. Quasispecies &#xAD6C;&#xC870;&#xB294; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC801;&#xC751; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC758; &#xD2B9;&#xC9D5; &#xBC0F; confounds &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC778; &#xBC31;&#xC2E0;&#xACFC; &#xD56D; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC694;&#xBC95;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xB178;&#xB825; &#xD558;&#xB294; lentiviruses&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C4;&#xD654;&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xC18D;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; lentivirus &#xADDC;&#xC81C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;, &#xB808; &#xBE0C;, &#xC870;&#xB791;&#xB9D0; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; &#xB9D0; &#xC804;&#xC5FC; &#xC131; &#xBE48; &#xD608;&#xC758;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0; &#xC720;&#xC804; &#xBCC0;&#xC774;&#xC758; &#xC885; &#xC801; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB2E4;&#xB978; lentivirus &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB85C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB808; &#xBE0C; &#xBCC0;&#xC885; quasispecies &#xBB38;&#xC790;&#xB97C; &#xC804;&#xC2DC;. Phylogenetic &#xBC0F; &#xD30C;&#xD2F0;&#xC158; &#xBD84;&#xC11D; &#xACC4; quasispecies &#xAC10;&#xC5FC; &#xC2DC; coexisted &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xBD80;&#xBD84;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD6C;&#xC131; &#xB418;&#xC5B4; &#xC81C;&#xC548; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB2E4;&#xB978; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xBCC0;&#xC885;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD11;&#xC120;&#xC73C;&#xB85C; &#xC9C4;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548;, &#xC2DC;&#xAC04;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC120;&#xD615; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xCD95;&#xC801; &#xD55C; subpopulation &#xB4F1;&#xC7A5;. &#xC2DC;&#xAC04;&#xC774; &#xC9C0;&#xB098;&#xBA74;&#xC11C; &#xB450; &#xC9D1;&#xB2E8;&#xAC04; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xC0C1;&#xD0DC; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; &#xB450; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC758; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; &#xC774;&#xC810; &#xCC28;&#xC774;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58; &#xC6B0;&#xC704;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC21C;&#xD658;. &#xACFC;&#xB3C4; &#xC2DD; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB450; &#xC778;&#xAD6C; &#xACC4; &#xD575; &#xC218;&#xCD9C; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xD06C;&#xAC8C; &#xB2EC;&#xB790;&#xB2E4;. Chimeric proviral &#xD074;&#xB860; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xB808; &#xBE0C; genotypes &#xAC01; &#xC778;&#xAD6C; &#xBE44;&#xC728;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2EC;&#xB790;&#xB2E4; &#xACE0; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xBCF5;&#xC81C; &#xCCB4; &#xC678;&#xC758; &#xC804;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xB300;&#xD45C;. &#xD45C;&#xD604; &#xD615;&#xC5D0; &#xCC28;&#xC774;&#xAC00; &#xC720;&#xC804;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB69C;&#xB837;&#xD55C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC9D1;&#xB2E8;&#xAC04; &#xACF5;&#xC874; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD658;&#xACBD; &#xBCC0;&#xD654;&#xC5D0; &#xC704;&#xB300;&#xD55C; &#xC801;&#xC751;&#xC131;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xB7EC; &#xBD80;&#xBD84;&#xC73C;&#xB85C; quasispecies &#xBAA8;&#xB378; lentivirus &#xC800;&#xC218;&#xC9C0;&#xC758; &#xC790;&#xC5F0; &#xBC0F; &#xD56D; &#xC6D0; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC57D;&#xBB3C; &#xB0B4;&#xC131; &#xBCC0;&#xC885;&#xC758; &#xC9C4;&#xD654; &#xCD94;&#xAC00; &#xD1B5;&#xCC30;&#xB825;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB9D0; &#xC804;&#xC5FC; &#xC131; &#xBE48; &#xD608; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xB808; &#xBE0C;&#xC758; &#xC9D1;&#xB2E8;&#xAC04; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xACF5;&#xC874; &#xD558; &#xACE0; &#xD45C;&#xD604; &#xD615;&#xC5D0; &#xCC28;&#xC774;&#xAC00; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Lentiviruses existen in vivo como una poblaci&oacute;n de genotipos relacionados, no id&eacute;ntico, com&uacute;nmente conocida como quasispecies. La estructura de quasiespecies es caracter&iacute;stico de sistemas adaptativos complejos y contribuye a la alta tasa de evoluci&oacute;n en lentiviruses que confunde los esfuerzos para desarrollar vacunas efectivas y terapias antivirales. Aqu&iacute;, describimos el an&aacute;lisis de los datos gen&eacute;ticos de estudios longitudinales de la variaci&oacute;n gen&eacute;tica en una prote&iacute;na reguladora lentivirus, Rev, en el transcurso de la enfermedad en ponis experimentalmente infectados con el virus de la anemia infecciosa equina. Seg&uacute;n lo observado con otros datos de lentivirus, las variantes de Rev exhibi&oacute; un car&aacute;cter quasispecies. An&aacute;lisis filogen&eacute;tico y partici&oacute;n sugirieron que los Rev quasispecies compuesto por dos distintas subpoblaciones que coexistieron durante la infecci&oacute;n. Una subpoblaci&oacute;n apareci&oacute; acumular cambios de manera lineal, dependiente del tiempo, mientras que el otro radialmente evolucion&oacute; de una variante com&uacute;n. Con el tiempo, las dos subpoblaciones ciclos en predominio coincidente con los cambios en el estado de la enfermedad, lo que sugiere que los dos grupos difer&iacute;an en ventaja selectiva. Ensayos de expresi&oacute;n transitoria indican que las dos poblaciones difieren significativamente en la actividad de exportaci&oacute;n nuclear Rev. Chimeric proviral clones con genotipos Rev representativos de cada poblaci&oacute;n diferido en velocidad y en general nivel de replicaci&oacute;n del virus in vitro. La coexistencia de gen&eacute;ticamente distintas subpoblaciones virales que difieren en su fenotipo proporciona gran adaptabilidad a los cambios ambientales en el host infectado. Un modelo de quasiespecies con subpoblaciones m&uacute;ltiples puede proporcionar la penetraci&oacute;n adicional en la naturaleza de los embalses de lentivirus y la evoluci&oacute;n de las variantes antig&eacute;nicas y resistente a los medicamentos.

Subpoblaciones de virus de la anemia infecciosa equina Rev conviven en vivo y difieren en el fenotipo.

&#x9A6C;&#x4F20;&#x67D3;&#x6027;&#x8D2B;&#x8840;&#x75C5;&#x6BD2; (&#x8D2B;&#x8840;) &#x51AF;&#x662F;&#x5FC5;&#x4E0D;&#x53EF;&#x5C11;&#x7684;&#x8C03;&#x8282;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x75C5;&#x6BD2;&#x57FA;&#x56E0;&#x7F16;&#x7801;&#x7ED3;&#x6784;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4; RNA &#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x5E76;&#x89C4;&#x5B9A;&#x4E86;&#x526A;&#x63A5;&#x7684;&#x987A;&#x8FBE;/&#x51AF; mRNA&#x3002;&#x8D2B;&#x8840;&#x51AF;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x662F;&#x4F53;&#x5185;&#xFF0C;&#x9057;&#x4F20;&#x53D8;&#x5F02;&#x7387;&#x5F88;&#x9AD8;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E14;&#x5DF2;&#x8BC1;&#x660E;&#x51AF;&#x57FA;&#x56E0;&#x578B;&#x548C;&#x8868;&#x578B;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x4EE5;&#x914D;&#x5408;&#x4E34;&#x5E8A;&#x75BE;&#x75C5;&#x4E2D;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x66F4;&#x597D;&#x5730;&#x7406;&#x89E3;&#x5982;&#x4F55;&#x9057;&#x4F20;&#x53D8;&#x5F02;&#x6539;&#x53D8;&#x51AF;&#x8868;&#x578B;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x5220;&#x9664;&#x548C;&#x7A81;&#x53D8;&#x5206;&#x6790;&#x6620;&#x5C04;&#x529F;&#x80FD;&#x57DF;&#xFF0C;&#x5E76;&#x627E;&#x51FA;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x56FE;&#x6848;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x4E8E;&#x8D2B;&#x8840;&#x51AF;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x6240;&#x6709;&#x529F;&#x80FD;&#x57DF;&#x5305;&#x542B;&#x5728;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x4E2A;&#x5916;&#x663E;&#x5B50;&#x7684;&#x8D2B;&#x8840;&#x4FEE;&#x8BA2;&#x7248;&#x5BF9;&#x57DF;&#x5185;&#x51AF;&#x5916;&#x663E;&#x5B50; 2 &#x603B;&#x4F53;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5305;&#x62EC;&#x6838;&#x51FA;&#x53E3;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3001; RNA &#x7ED1;&#x5B9A;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5927;&#x578B;&#x7684;&#x4E2D;&#x592E;&#x533A;&#x57DF;&#x3001; &#x4E00;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x533A;&#x57DF;&#x548C;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x6838;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x548C; RNA &#x7ED1;&#x5B9A; C &#x7EC8;&#x7AEF;&#x533A;&#x57DF;&#x5185;&#x3002;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;-&#x51AF;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x7684;&#x4E9A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x8868;&#x793A;&#x57FA;&#x672C;&#x6B8B;&#x7559;&#x7269;&#x5185;&#x7684; KRRRK C &#x7EC8;&#x7AEF;&#x533A;&#x57DF;&#x7684;&#x51AF;&#x6BCD;&#x9898;&#x7684;&#x51AF;&#x9776;&#x5411;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;&#x51AF;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5355;&#x72EC;&#x533A;&#x57DF;&#x6709;&#x5FC5;&#x8981;&#x4E3A; RNA &#x7ED1;&#x5B9A;&#xFF1A; &#x5305;&#x62EC;&#x6B8B;&#x7559; 57 &#x5230; 130 &#x4E2D;&#x592E;&#x533A;&#x57DF;&#x548C;&#x8DE8;&#x8D8A;&#x6B8B;&#x7559; 144 &#x81F3; 165 C &#x7EC8;&#x7AEF;&#x533A;&#x57DF;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x533A;&#x57DF;&#x5185;&#x662F;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x3001; &#x77ED;&#x5BCC;&#x542B;&#x7CBE;&#x6C28;&#x9178;&#x7684;&#x56FE;&#x6848; RNA &#x5177;&#x6709;&#x7EA6;&#x675F;&#x529B;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x5728;&#x4E2D;&#x90E8;&#x5730;&#x533A;&#x548C; C &#x603B;&#x7AD9;&#x9644;&#x8FD1;&#x7684; KRRRK &#x4E3B;&#x9898; RRDRW &#x4E3B;&#x9898;&#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x8D2B;&#x8840;&#x51AF;&#x5229;&#x7528;&#x5076;&#x7684; RNA &#x7ED3;&#x5408;&#x57DF;&#x3002;

&#x9A6C;&#x4F20;&#x67D3;&#x6027;&#x8D2B;&#x8840;&#x75C5;&#x6BD2;&#x51AF;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x57DF;&#x8868;&#x5F81;&#x8868;&#x660E;&#x5076;&#x7684; RNA &#x7ED3;&#x5408;&#x57DF;&#x3002;

Equine infectious anemia virus (EIAV) Rev is an essential regulatory protein that facilitates expression of viral mRNAs encoding structural proteins and genomic RNA and regulates alternative splicing of the bicistronic tat/rev mRNA. EIAV Rev is characterized by a high rate of genetic variation in vivo, and changes in Rev genotype and phenotype have been shown to coincide with changes in clinical disease. To better understand how genetic variation alters Rev phenotype, we undertook deletion and mutational analyses to map functional domains and to identify specific motifs that are essential for EIAV Rev activity. All functional domains are contained within the second exon of EIAV Rev. The overall organization of domains within Rev exon 2 includes a nuclear export signal, a large central region required for RNA binding, a nonessential region, and a C-terminal region required for both nuclear localization and RNA binding. Subcellular localization of green fluorescent protein-Rev mutants indicated that basic residues within the KRRRK motif in the C-terminal region of Rev are necessary for targeting of Rev to the nucleus. Two separate regions of Rev were necessary for RNA binding: a central region encompassing residues 57 to 130 and a C-terminal region spanning residues 144 to 165. Within these regions were two distinct, short arginine-rich motifs essential for RNA binding, including an RRDRW motif in the central region and the KRRRK motif near the C terminus. These findings suggest that EIAV Rev utilizes a bipartite RNA-binding domain.

Characterization of functional domains of equine infectious anemia virus Rev suggests a bipartite RNA-binding domain.

Virus de l&#39;an&eacute;mie infectieuse des &eacute;quid&eacute;s (EIAV) Rev est une prot&eacute;ine r&eacute;gulatrice essentielle qui facilite l&#39;expression des ARNm viraux codant des prot&eacute;ines structurales et ARN g&eacute;nomique et r&eacute;glemente l&#39;&eacute;pissage alternatif de le bicistronique tat/rev ARNm. EIAV Rev se caract&eacute;rise par un taux &eacute;lev&eacute; de variation g&eacute;n&eacute;tique in vivo, et les changements dans Rev g&eacute;notype et ph&eacute;notype auraient d&ucirc; &ecirc;tre divulgu&eacute;s afin de co&iuml;ncider avec des changements dans les cliniques de la maladie. Pour mieux comprendre comment la variation g&eacute;n&eacute;tique modifie le Rev ph&eacute;notype, nous avons entrepris la suppression et l&#39;analyse mutationnelle pour mapper les domaines fonctionnels et d&#39;identifier les motifs sp&eacute;cifiques qui sont essentiels pour l&#39;activit&eacute; EIAV Rev. Tous les domaines fonctionnels sont contenues dans le deuxi&egrave;me exon du r&eacute;v&eacute;rend EIAV l&#39;organisation globale des domaines au sein de le Rev exon 2 comprend un signal d&#39;exportations nucl&eacute;aires, une grande r&eacute;gion centrale requise pour la liaison de RNA, une r&eacute;gion non essentielle et une r&eacute;gion C-terminale requis pour localisation nucl&eacute;aire et ARN contraignantes. Localisation subcellulaire des mutants vert fluorescent protein-Rev a indiqu&eacute; que des r&eacute;sidus basiques dans le motif KRRRK dans la r&eacute;gion C-terminale de Rev sont n&eacute;cessaires pour le ciblage de Rev dans le noyau. Deux r&eacute;gions distinctes de Rev &eacute;taient n&eacute;cessaires pour la liaison de RNA: une r&eacute;gion centrale, englobant les r&eacute;sidus 57 &agrave; 130 et une r&eacute;gion C-terminale s&#39;&eacute;tendant sur les r&eacute;sidus de 144 &agrave; 165. Au sein de ces r&eacute;gions &eacute;taient deux motifs distincts, courts du riches en arginine essentielle pour ARN contraignantes, y compris un motif RRDRW dans la r&eacute;gion centrale et le motif KRRRK pr&egrave;s de l&#39;extr&eacute;mit&eacute; C terminale. Ces r&eacute;sultats sugg&egrave;rent que les EIAV Rev utilise un domaine de liaison &agrave; l&#39;ARN biparti.

Caract&eacute;risation des domaines fonctionnels du virus de l&#39;an&eacute;mie infectieuse des &eacute;quid&eacute;s Rev sugg&egrave;re un domaine de liaison &agrave; l&#39;ARN biparti.

Equine Infekti&ouml;se An&auml;mie-Virus (EIAV) Rev ist eine wesentliche regulatorische Protein, das Ausdruck der viralen mRNAs kodieren Strukturproteine und genomische RNA erleichtert und regelt, alternatives Splei&szlig;en von der Bicistronic Tat/Umdrehung mRNA. EIAV Rev zeichnet sich durch eine hohe Rate von in-vivo genetische Variation und &Auml;nderungen in Rev Genotyp und Ph&auml;notyp haben gezeigt worden, um mit Ver&auml;nderungen in der klinischen Krankheit zusammenfallen. Zum besseren Verst&auml;ndnis wie genetischer Variation Rev Ph&auml;notyp ver&auml;ndert, unternahmen wir l&ouml;schen und teilhabende Analysen funktionelle Dom&auml;nen zuordnen und bestimmte Motive zu identifizieren, die f&uuml;r EIAV Rev T&auml;tigkeit unerl&auml;sslich sind. Alle funktionelle Dom&auml;nen sind in der zweiten Exon von EIAV Rev. enthalten die Gesamtorganisation der Dom&auml;nen innerhalb Rev Exon 2 eine nukleare Export-Signal, eine gro&szlig;e zentrale Region, die f&uuml;r die Bindung der RNA, eine unwichtige Region und einer C-terminalen Region erforderlich f&uuml;r nukleare Lokalisierung und RNA-Bindung enth&auml;lt. Subzellulare Lokalisation des gr&uuml;n fluoreszierenden Proteins-Rev Mutanten angedeutet, dass grundlegende R&uuml;ckst&auml;nde innerhalb der KRRRK-Motiv in der C-terminalen Region Rev f&uuml;r die Ausrichtung der Rev zum Kern notwendig sind. Zwei separate Regionen des Rev waren notwendig f&uuml;r die RNA-Bindung: eine zentrale Region umfasst R&uuml;ckst&auml;nde 57 bis 130 und einer C-terminalen Region &uuml;ber R&uuml;ckst&auml;nde 144-165. Innerhalb dieser Regionen wurden zwei verschiedene, kurze Arginin-Reich-Motive f&uuml;r RNA-Bindung, einschlie&szlig;lich ein RRDRW Motiv in der central Region und das Motiv KRRRK nahe der Carboxyl-Terminus. Diese Forschungsergebnisse legen nahe, dass EIAV Rev eine zweiseitige RNA-bindende Dom&auml;ne nutzt.

Charakterisierung der funktionalen Bereiche der equine infekti&ouml;se An&auml;mie Virus Rev schl&auml;gt eine zweiseitige RNA-bindende Dom&auml;ne.

Anemia infettiva equina virus (EIAV) Rev &egrave; una proteina essenziale normativa che facilita l&#39;espressione del mRNA virale codifica le proteine strutturali e genomic RNA e regola splicing alternativo della bicistronic tat/rev mRNA. EIAV Rev &egrave; caratterizzata da un alto tasso di variazione genetica in vivo, e hanno mostrati cambiamenti Rev genotipo e fenotipo coincidono con i cambiamenti nella malattia clinica. Per capire meglio come variazione genetica altera Rev fenotipo, abbiamo intrapreso eliminazione e analisi mutazionale di mappa domini funzionali e di identificare i motivi specifici che sono essenziali per l&#39;attivit&agrave; EIAV Rev. Tutti i domini funzionali sono contenuti all&#39;interno del secondo esone del reverendo EIAV l&#39;organizzazione complessiva dei domini nell&#39;esone Rev 2 include un segnale di esportazione nucleare, una grande regione centrale necessaria per RNA binding, una regione non essenziali e una regione C-terminale necessari sia per localizzazione nucleare e RNA binding. Localizzazione sottocellulare di verde fluorescente proteina-Rev mutanti indicato che residui di base entro il motivo KRRRK della regione C-terminale della Rev sono necessarie per il targeting di Rev al nucleo. Due regioni distinte del Rev erano necessarie per l&#39;associazione di RNA: una regione centrale che comprende residui 57 a 130 e una regione C-terminale che abbracciano residui 144-165. All&#39;interno di queste regioni erano due distinte, breve ricco di arginina motivi essenziali per l&#39;associazione di RNA, tra cui un motivo RRDRW nella regione centrale e il motivo KRRRK nei pressi del capolinea C. Questi risultati suggeriscono che la EIAV Rev utilizza un dominio RNA-binding bipartito.

Caratterizzazione dei domini funzionali del virus anemia infettiva equina Rev suggerisce un dominio RNA-binding bipartito.

&#x99AC;&#x4F1D;&#x67D3;&#x6027;&#x8CA7;&#x8840;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; (EIAV) Rev &#x306F;&#x69CB;&#x9020;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3092;&#x7B26;&#x53F7;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E; Mrna &#x3068;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0; RNA &#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3057;&#x3001;bicistronic &#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x898F;&#x5236;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3067;&#x3042;&#x308B; rev tat/mRNA&#x3002;EIAV Rev &#x3092; in vivo &#x3067;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x5909;&#x7570;&#x306E;&#x7387;&#x304C;&#x9AD8;&#x3044;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x3057;&#x3001;Rev &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x578B;&#x3068;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x306F;&#x81E8;&#x5E8A;&#x75C5;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3088;&#x304F;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B; Rev &#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x5909;&#x7570;&#x306E;&#x5909;&#x66F4;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x524A;&#x9664;&#x3068;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x89E3;&#x6790;&#x6A5F;&#x80FD;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x30DE;&#x30C3;&#x30D7;&#x3057;&#x3001;EIAV Rev &#x6D3B;&#x52D5;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x306A;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30E2;&#x30C1;&#x30FC;&#x30D5;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x7740;&#x624B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7B2C; 2 &#x30A8;&#x30AD;&#x30BD;&#x30F3; Rev &#x30A8;&#x30AF;&#x30BD;&#x30F3; 2 &#x5185;&#x306B;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x5168;&#x4F53;&#x7684;&#x306A;&#x7D44;&#x7E54;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x6838;&#x30A8;&#x30AF;&#x30B9;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x4FE1;&#x53F7;&#x3001;RNA &#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x4E2D;&#x592E;&#x5730;&#x57DF;&#x3001;&#x4E0D;&#x8981;&#x4E0D;&#x6025;&#x306E;&#x5730;&#x57DF;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6838;&#x5C40;&#x5728;&#x5316;&#x3068; RNA &#x7D50;&#x5408;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A; C &#x672B;&#x7AEF;&#x9818;&#x57DF;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059; EIAV &#x7267;&#x5E2B;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306B;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7DD1;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; Rev &#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x5C40;&#x5728;&#x5869;&#x57FA;&#x6027;&#x6B8B; Rev &#x306E; C &#x672B;&#x7AEF;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; KRRRK &#x306E;&#x30E2;&#x30C1;&#x30FC;&#x30D5;&#x5185;&#x6838;&#x306B; Rev &#x306E;&#x5BFE;&#x8C61;&#x5316;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3001;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;2 &#x3064;&#x306E;&#x9818;&#x57DF; Rev &#x3055;&#x308C;&#x305F; RNA &#x306E;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;: &#x6B8B;&#x7559; 57 &#x306B; 130 &#x306B;&#x307E;&#x305F;&#x304C;&#x308B;&#x4E2D;&#x592E;&#x5730;&#x57DF;&#x3068;&#x6B8B;&#x7559; 144 &#x306B; 165 &#x30B9;&#x30D1;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0; C &#x672B;&#x7AEF;&#x9818;&#x57DF;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5185;&#x306E;&#x9818;&#x57DF; 2 &#x3064;&#x306E;&#x500B;&#x5225;&#x306E;&#x77ED;&#x3044;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AE;&#x30CB;&#x30F3;&#x306E;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A;&#x30E2;&#x30C1;&#x30FC;&#x30D5;&#x306F; RNA &#x7D50;&#x5408;&#x3001;&#x4E2D;&#x90E8;&#x5730;&#x57DF;&#x3068; KRRRK &#x30E2;&#x30C1;&#x30FC;&#x30D5; C &#x672B;&#x7AEF;&#x8FD1;&#x304F;&#x306E; RRDRW &#x30E2;&#x30C1;&#x30FC;&#x30D5;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;EIAV Rev &#x4E8C;&#x90E8;&#x306E; RNA &#x7D50;&#x5408;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x5229;&#x7528;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x99AC;&#x4F1D;&#x67D3;&#x6027;&#x8CA7;&#x8840;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; Rev &#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x30AD;&#x30E3;&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30EA;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x4E8C;&#x90E8;&#x306E; RNA &#x7D50;&#x5408;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xB9D0; &#xC804;&#xC5FC; &#xC131; &#xBE48; &#xD608; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (EIAV) &#xACC4;&#xB294; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; mRNAs &#xC778;&#xCF54;&#xB529; &#xAD6C;&#xC870; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC640; &#xAC8C;&#xB188; RNA&#xB97C; &#xC6A9;&#xC774; &#xD558; &#xAC8C; &#xD558;&#xB294; bicistronic&#xC758; &#xB300;&#xCCB4; &#xC811;&#xD569; &#xC870;&#xC808; &#xD544;&#xC218; &#xADDC;&#xC81C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; mRNA &#xBB38;&#xC2E0;/&#xACC4;. EIAV &#xB808; &#xBE0C; &#xC720;&#xC804; &#xBCC0;&#xC774; vivo&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xC18D;&#xB3C4; &#xC758;&#xD574; &#xD2B9;&#xC9D5; &#xBC0F; &#xC784;&#xC0C1; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC758; &#xBCC0;&#xD654;&#xC5D0; &#xB9DE;&#xCDB0; &#xACC4; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD615; &#xBC0F; &#xD45C;&#xD604; &#xD615;&#xC758; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC654;&#xB2E4;. &#xB354; &#xB098;&#xC740; &#xC774;&#xD574;&#xB97C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xBCC0;&#xACBD; &#xACC4; &#xD615;, &#xC5B4;&#xB5BB;&#xAC8C; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC57D;&#xC18D; &#xC0AD;&#xC81C; &#xBC0F; mutational &#xBD84;&#xC11D; &#xAE30;&#xB2A5; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC5D0; &#xB9E4;&#xD551;&#xD560; &#xBC0F; EIAV &#xACC4; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xD2B9;&#xC815; &#xBAA8;&#xD2F0;&#xD504;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4;. &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; exon EIAV &#xBAA9;&#xC0AC;&#xAC00; &#xB808; &#xBE0C; exon 2 &#xB0B4; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC758; &#xC804;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xAD6C;&#xC131;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD575; &#xC218;&#xCD9C; &#xC2E0;&#xD638;, RNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xB300;&#xD615; &#xC911;&#xC559; &#xC9C0;&#xC5ED;, &#xC911;&#xC694; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xC9C0;&#xC5ED; &#xBC0F; &#xD575; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;&#xC640; RNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; C &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xC601;&#xC5ED;&#xC758; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xAE30;&#xB2A5; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xD3EC;&#xD568;. &#xB179;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB808; &#xBE0C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC758; subcellular &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; KRRRK &#xBAA8;&#xD2F0;&#xBE0C; &#xB808; &#xBE0C;&#xC758; C-&#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB0B4; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC740; &#xD575;&#xC5D0; &#xB808; &#xBE0C;&#xC758; &#xD0C0;&#xAC9F;&#xD305; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC9C0;&#xC801; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB808; &#xBE0C;&#xC758; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xBCC4;&#xB3C4; &#xC601;&#xC5ED; RNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694; &#xD588;&#xB2E4;: &#xC911;&#xC559; &#xC9C0;&#xC5ED; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C; 57 130 &#xD3EC;&#xAD04; &#xBC0F; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C; 144 165&#xC5D0; &#xAC78;&#xCE5C; C &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xC9C0;&#xC5ED;. &#xC774; &#xC9C0;&#xC5ED; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; RNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529;, &#xC911;&#xC559; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xACFC; C &#xC885;&#xC810; &#xADFC;&#xCC98; KRRRK &#xBAA8;&#xD2F0;&#xBE0C; RRDRW &#xBAA8;&#xD2F0;&#xBE0C;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0;, &#xC9E7;&#xC740; &#xC544;&#xB974;&#xAE30;&#xB2CC;&#xC774; &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; &#xBAA8;&#xD2F0;&#xBE0C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; EIAV &#xB808; &#xBE0C;&#xAC00; &#xBD84; RNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC744; &#xD65C;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB9D0; &#xC804;&#xC5FC; &#xC131; &#xBE48; &#xD608; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; Rev&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC758; &#xBD84; RNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC744; &#xC81C;&#xC548;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Virus de la anemia infecciosa equina (EIAV) Rev es una prote&iacute;na reguladora esencial que facilita la expresi&oacute;n de codificaci&oacute;n prote&iacute;nas estructurales virales mRNAs y RNA gen&oacute;mico y regula el empalme alternativo de la bicistronic tat/rev mRNA. EIAV Rev se caracteriza por una alta tasa de variaci&oacute;n gen&eacute;tica en vivo, y han demostrado cambios en Rev genotipo y fenotipo coincidiendo con cambios en la cl&iacute;nica de la enfermedad. Para entender mejor c&oacute;mo variaci&oacute;n gen&eacute;tica altera Rev fenotipo, realizamos an&aacute;lisis mutacionales mapa dominios funcionales e identificar los motivos espec&iacute;ficos que son esenciales para la actividad EIAV Rev y eliminaci&oacute;n. Todos los dominios funcionales est&aacute;n contenidos en el segundo ex&oacute;n del Reverendo EIAV la organizaci&oacute;n global de dominios dentro del Rev ex&oacute;n 2 incluye una se&ntilde;al de las exportaciones nucleares, una extensa regi&oacute;n central necesaria para el enlace de RNA, una regi&oacute;n no esencial y una regi&oacute;n c-terminal necesaria para localizaci&oacute;n nuclear y vinculante de RNA. Localizaci&oacute;n subcelular de la prote&iacute;na fluorescente verde Rev mutantes indic&oacute; que residuos b&aacute;sicos dentro del adorno KRRRK en la regi&oacute;n c-terminal de Rev necesarios para apuntar de Rev al n&uacute;cleo. Dos regiones separadas de Rev eran necesarias para la Uni&oacute;n de la RNA: una regi&oacute;n central que abarca residuos 57 a 130 y una regi&oacute;n c-terminal que abarcan residuos 144 a 165. Dentro de estas regiones fueron dos distintas, cortas rica en arginina motivos esenciales para la Uni&oacute;n de la RNA, incluyendo un motivo RRDRW en la regi&oacute;n central y el motivo KRRRK cerca de la terminal C. Estos resultados sugieren que EIAV Rev utiliza un dominio de uni&oacute;n de ARN bipartito.

Caracterizaci&oacute;n de dominios funcionales del virus de la anemia infecciosa equina Rev sugiere un dominio de uni&oacute;n de ARN bipartito.

&#x9A6C;&#x4F20;&#x67D3;&#x6027;&#x8D2B;&#x8840;&#x75C5;&#x6BD2; &#xFF08;&#x8D2B;&#x8840;&#xFF09; &#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x4E2D;&#x548C;&#x57DF; (PND) &#x4F4D;&#x4E8E;&#x82CF; V3 &#x5730;&#x533A;&#x3002;&#x5728; PND &#x9057;&#x4F20;&#x53D8;&#x5F02;&#x88AB;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x53D1;&#x6325;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x514D;&#x75AB;&#x9003;&#x9038;&#x548C;&#x8D2B;&#x8840;&#x6301;&#x7EED;&#x5B58;&#x5728; &#xFF1B;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x51E0;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x6709;&#x7279;&#x70B9;&#x9057;&#x4F20;&#x53D8;&#x5F02;&#x82CF;&#x9690;&#x6027;&#x9636;&#x6BB5;&#x7684;&#x75BE;&#x75C5;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x66F4;&#x597D;&#x5730;&#x7406;&#x89E3;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6301;&#x7EED;&#x5B58;&#x5728;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x63A5;&#x79CD;&#x4E0E;&#x5F3A;&#x6BD2;&#x7684; EIAV(Wyo) &#x5C0F;&#x9A6C;&#x82CF;&#x53D8;&#x5316;&#x7684;&#x7EB5;&#x5411;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;&#x9694;&#x79BB;&#x4ECE;&#x63A5;&#x79CD;&#x548C;&#x5E8F;&#x8D2F;&#x8840;&#x6E05;&#x6837;&#x672C;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2; RNA RT-pcr &#x6269;&#x589E;&#x3001; &#x514B;&#x9686;&#xFF0C;&#x548C;&#x4E2A;&#x522B;&#x514B;&#x9686;&#x88AB;&#x6D4B;&#x5E8F;&#x3002;147 &#x82CF;&#x514B;&#x9686;&#x83B7;&#x5F97;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E86; 71 &#x4E0D;&#x540C; V3 &#x53D8;&#x79CD;&#xFF0C;&#x5206;&#x6210;&#x4E94;&#x4E2A;&#x4E3B;&#x8981;&#x975E;&#x91CD;&#x53E0;&#x7EC4;&#xFF0C;&#x6307;&#x5B9A; PND 1 PND 5&#x3001; &#x9694;&#x79BB;&#x4E0E;&#x4E34;&#x5E8A;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x7279;&#x5B9A;&#x9636;&#x6BB5;&#x3002;&#x57FA;&#x56E0;&#x578B;&#x7684;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x7EC4;&#x7684;&#x4EE3;&#x8868;&#x88AB;&#x63D2;&#x5165;&#x5230;&#x611F;&#x67D3;&#x6027;&#x5206;&#x5B50;&#x514B;&#x9686;&#xFF0C;&#x548C;&#x5D4C;&#x5408;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x7684;&#x6613;&#x611F;&#x6027;&#x4E0E;&#x4E2D;&#x6027;&#x5316;&#x7684;&#x8FDE;&#x7EED;&#x65F6;&#x95F4;&#x4E0E;&#x53D7;&#x81EA;&#x4F53;&#x8840;&#x6E05;&#x3002;&#x603B;&#x4F53;&#x800C;&#x8A00;&#xFF0C;&#x6709;&#x7684;&#x75BE;&#x75C5;&#x8FDB;&#x5C55;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x548C;&#x6297;&#x4F53;&#x7684;&#x6297;&#x836F;&#x6027;&#x8D8A;&#x6765;&#x8D8A;&#x5927;&#x7684;&#x8D8B;&#x52BF;&#x3002;&#x665A;&#x5728;&#x611F;&#x67D3;&#x590D;&#x53D1;&#x4E0E;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x7684; PND &#x57FA;&#x56E0;&#x578B;&#x6297;&#x7279;&#x5B9A;&#x7C7B;&#x578B;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x4E2D;&#x548C;&#x6297;&#x4F53;&#xFF0C;&#x5E76;&#x663E;&#x793A;&#x4F53;&#x5916;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684;&#x590D;&#x5236;&#x8868;&#x578B;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x4E2D;&#x548C;&#x6297;&#x4F53;&#x65BD;&#x52A0;&#x5728;&#x611F;&#x67D3;&#x6574;&#x4E2A;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x538B;&#x529B;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x75C5;&#x6BD2;&#x514D;&#x75AB;&#x9003;&#x9038;&#x548C;&#x6301;&#x4E45;&#x6027;&#x7684;&#x6218;&#x7565;&#x6539;&#x53D8;&#x9762;&#x5BF9;&#x4E0D;&#x65AD;&#x53D1;&#x5C55;&#x548C;&#x6210;&#x719F;&#x7684;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;

&#x9A6C;&#x4F20;&#x67D3;&#x6027;&#x8D2B;&#x8840;&#x75C5;&#x6BD2; env &#x53D8;&#x91CF;&#x957F;&#x671F;&#x9690;&#x6027;&#x671F;&#x7684;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x9009;&#x62E9;&#x3002;

The principal neutralizing domain (PND) of equine infectious anemia virus (EIAV) is located in the V3 region of SU. Genetic variation in the PND is considered to play an important role in immune escape and EIAV persistence; however, few studies have characterized genetic variation in SU during the inapparent stage of disease. To better understand the mechanisms of virus persistence, we undertook a longitudinal study of SU variation in a pony experimentally inoculated with the virulent EIAV(Wyo). Viral RNA isolated from the inoculum and from sequential sera samples was amplified by RT-PCR, cloned, and individual clones were sequenced. Of the 147 SU clones obtained, we identified 71 distinct V3 variants that partitioned into five major non-overlapping groups, designated PND-1 to PND-5, which segregated with specific stages of clinical disease. Genotypes representative of each group were inserted into an infectious molecular clone, and chimeric viruses were tested for susceptibility to neutralization by autologous sera from successive times post-infection. Overall, there was a trend for increasing resistance to neutralizing antibody during disease progression. The PND genotype associated with recrudescence late in infection was resistant to both type-specific and broadly neutralizing antibody, and displayed a reduced replication phenotype in vitro. These findings indicate that neutralizing antibody exerts selective pressure throughout infection and suggest that viral strategies of immune evasion and persistence change in the face of an evolving and maturing host immune response.

Immune selection of equine infectious anemia virus env variants during the long-term inapparent stage of disease.

Le domaine principal neutralisant (PND) du virus de l&#39;an&eacute;mie infectieuse des &eacute;quid&eacute;s (EIAV) est situ&eacute; dans la r&eacute;gion de la V3 de SU. La variation g&eacute;n&eacute;tique dans le PND est consid&eacute;r&eacute; comme de jouer un r&ocirc;le important dans l&#39;&eacute;vasion immunitaire et persistance EIAV ; Cependant, peu d&#39;&eacute;tudes ont caract&eacute;ris&eacute; la variation g&eacute;n&eacute;tique dans SU pendant l&#39;&eacute;tape inapparente de la maladie. Pour mieux comprendre les m&eacute;canismes de persistance de virus, nous avons entrepris une &eacute;tude longitudinale de variation SU un poney exp&eacute;rimentalement inocul&eacute; avec le EIAV(Wyo) virulent. Isol&eacute; de l&#39;inoculum et des &eacute;chantillons de s&eacute;rums s&eacute;quentielle de l&#39;ARN viral a &eacute;t&eacute; amplifi&eacute; par RT-PCR, clon&eacute;s et diff&eacute;rents clones ont &eacute;t&eacute; s&eacute;quenc&eacute;s. Des clones SU 147 obtenues, nous avons identifi&eacute; 71 variantes distinctes de V3 qui subdivis&eacute; en cinq grands groupes non chevauchantes, d&eacute;sign&eacute;s PND-1 &agrave; PND-5, qui par une s&eacute;gr&eacute;gation les &eacute;tapes sp&eacute;cifiques de la maladie clinique. Repr&eacute;sentant des g&eacute;notypes de chaque groupe ont &eacute;t&eacute; ins&eacute;r&eacute;es dans un clone mol&eacute;culaire infectieux et virus chim&egrave;res ont &eacute;t&eacute; test&eacute;s pour leur susceptibilit&eacute; &agrave; la neutralisation par s&eacute;rum autologue de post-infection instants successifs. Dans l&#39;ensemble, il y avait une tendance pour augmenter la r&eacute;sistance &agrave; la neutralisation des anticorps au cours de la progression de la maladie. Le g&eacute;notype PND associ&eacute; &agrave; une recrudescence vers la fin de l&#39;infection &eacute;tait r&eacute;sistant &agrave; la fois sp&eacute;cifique au type et largement des anticorps neutralisant et affiche un ph&eacute;notype de r&eacute;plication r&eacute;duit in vitro. Ces r&eacute;sultats indiquent que l&#39;anticorps neutralisant exerce une pression s&eacute;lective tout au long de l&#39;infection et sugg&egrave;rent que strat&eacute;gies virales &eacute;vasion immunitaire et de la persistance du changement face &agrave; une &eacute;volution et de maturation des r&eacute;ponse immunitaire de l&#39;h&ocirc;te.

S&eacute;lection immunitaire des variantes de l&#39;an&eacute;mie infectieuse &eacute;quine virus env pendant l&#39;&eacute;tape inapparente &agrave; long terme de la maladie.

Die wichtigste neutralisierende Dom&auml;ne (PND) des Virus equine infekti&ouml;se An&auml;mie (EIAV) befindet sich in der Region V3 SU. Genetischer Variation in der PND wird als eine wichtige Rolle im Immunsystem entkommen und EIAV Persistenz; Allerdings haben nur wenige Studien genetischen Variation in SU inapparent Phase der Krankheit gekennzeichnet. Zum besseren Verst&auml;ndnis die Mechanismen der Persistenz des Virus unternahmen wir eine Langzeitstudie &uuml;ber SU Variation in ein Pony mit den virulenten EIAV(Wyo) experimentell beimpft. Viraler RNA isoliert aus dem Inokulum und sequenzielle Seren Proben wurde verst&auml;rkt durch RT-PCR, geklonte und individuelle Klone wurden sequenziert. Die 147 SU-Klone, erhalten haben wir festgestellt, 71 verschiedene V3-Varianten, die partitioniert in f&uuml;nf gro&szlig;e nicht &uuml;berlappende Gruppen, PND-1 bis PND-5, die mit spezifischen Stadien der klinischen Krankheit getrennt ausgewiesen. Genotypen Vertreter jeder Gruppe wurden in einer infekti&ouml;sen Molekulare Klon eingef&uuml;gt und Chim&auml;re Viren wurden f&uuml;r die Anf&auml;lligkeit f&uuml;r die Neutralisierung von autologen Seren von aufeinander folgenden Mal Stunden getestet. Insgesamt gab es eine Tendenz f&uuml;r die zunehmende Resistenz gegen neutralisierenden Antik&ouml;rper bei Fortschreiten der Krankheit. Der PND-Genotyp mitverursachten sp&auml;t in Infektion zugeordnet wurde best&auml;ndig gegen sowohl typspezifisch und breit neutralisierenden Antik&ouml;rper und einen reduzierten Replikation Ph&auml;notyp in-vitro-angezeigt. Diese Befunde zeigen, dass neutralisierenden Antik&ouml;rper &uuml;bt selektiven Druck w&auml;hrend Infektion und suggerieren, dass virale Strategien immun Steuerhinterziehung und Persistenz angesichts einer sich entwickelnden und Reifung Host Immunantwort &auml;ndern.

Immun-Auswahl equine infekti&ouml;se An&auml;mie Env Virusvarianten w&auml;hrend der langfristigen inapparent Stadium der Erkrankung.

Il dominio principale neutralizzante (PND) del virus anemia infettiva equina (EIAV) si trova nella regione di SU V3. Variazione genetica in PND &egrave; considerato a giocare un ruolo importante nella fuga immune e persistenza EIAV; Tuttavia, pochi studi hanno caratterizzato la variazione genetica in SU durante la fase latente della malattia. Per comprendere meglio i meccanismi di persistenza del virus, abbiamo intrapreso uno studio longitudinale di variazione SU un pony inoculato sperimentalmente con il EIAV(Wyo) virulento. RNA virale isolato dall&#39;inoculo e da campioni di siero sequenziale &egrave; stato amplificato mediante RT-PCR, clonati e singoli cloni sono stati sequenziati. Dei cloni SU 147 ottenuti, abbiamo identificato 71 distinte varianti V3 che divisa in cinque grandi gruppi non sovrapposte, designati PND-1 per PND-5, che segregati con specifiche fasi della malattia clinica. Rappresentante di genotipi di ogni gruppo sono stati inseriti in un clone molecolare infettivo, e virus chimerico sono stati testati per la suscettibilit&agrave; alla neutralizzazione di sieri autologhi da post-infection in tempi successivi. In generale, c&#39;era una tendenza per aumentare la resistenza alla neutralizzazione dell&#39;anticorpo durante la progressione della malattia. Il genotipo PND associato recrudescenza nel tardo infezione era resistente al tipo specifico sia largamente neutralizzando anticorpo e visualizzato un fenotipo replica ridotta in vitro. Questi risultati indicano che neutralizzando anticorpo esercita una pressione selettiva durante infezione e suggeriscono che virale strategie di evasione immune e persistenza cambiano a fronte di un&#39;evoluzione e maturazione risposta immunitaria.

Sistema immunitaria selezione delle varianti di anemia infettiva equina virus env durante la fase latente a lungo termine della malattia.

&#x99AC;&#x4F1D;&#x67D3;&#x6027;&#x8CA7;&#x8840;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; (EIAV) &#x306E;&#x30D7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B7;&#x30D1;&#x30EB;&#x306E;&#x4E2D;&#x548C;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3; (PND) SU &#x306E; V3 &#x9818;&#x57DF;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;PND &#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x5909;&#x7570;&#x306F;&#x514D;&#x75AB;&#x3092;&#x9003;&#x308C;&#x308B;&#x3068; EIAV &#x306E;&#x6C38;&#x7D9A;&#x6027;&#x3067;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3059;&#x3068;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x308B;;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F; SU &#x4E0D;&#x9855;&#x6027;&#x611F;&#x671F;&#x75BE;&#x60A3;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x304C;&#x3042;&#x308B;.&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x6C38;&#x7D9A;&#x6027;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x3088;&#x308A;&#x3088;&#x304F;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;SU &#x5909;&#x52D5;&#x5B9F;&#x9A13;&#x5287;&#x6BD2;&#x6027;&#x306E; EIAV(Wyo) &#x3092;&#x63A5;&#x7A2E;&#x3057;&#x305F;&#x30DD;&#x30CB;&#x30FC;&#x306E;&#x7E26;&#x65AD;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x3092;&#x5B9F;&#x65BD;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3051;&#x305A;&#x308A;&#x3068;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B7;&#x30E3;&#x30EB;&#x8840;&#x6E05;&#x8A66;&#x6599;&#x304B;&#x3089;&#x5206;&#x96E2;&#x3057;&#x305F;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E; RNA RT-PCR &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5897;&#x5E45;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3001;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x500B;&#x3005; &#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x5869;&#x57FA;&#x914D;&#x5217;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;SU &#x306E; 147 &#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x53D6;&#x5F97;&#x306E; PND-1 &#x81E8;&#x5E8A;&#x75BE;&#x60A3;&#x306E;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x6BB5;&#x968E;&#x306B;&#x5206;&#x96E2; PND-5 &#x306B;&#x6307;&#x5B9A; 5 &#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x91CD;&#x8907;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306B;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x5206;&#x5272; 71 &#x500B;&#x5225; V3 &#x306E;&#x4E9C;&#x7A2E;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5404;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x578B;&#x306E;&#x4EE3;&#x8868;&#x306F;&#x611F;&#x67D3;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x306B;&#x633F;&#x5165;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x30AD;&#x30E1;&#x30E9; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x4E2D;&#x548C;&#x3078;&#x306E;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x3092;&#x9023;&#x7D9A;&#x7684;&#x306B;&#x611F;&#x67D3;&#x5F8C;&#x306E;&#x81EA;&#x5BB6;&#x8840;&#x6E05;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5168;&#x4F53;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x75C5;&#x6C17;&#x306E;&#x9032;&#x884C;&#x4E2D;&#x306B;&#x6297;&#x4F53;&#x3092;&#x4E2D;&#x548C;&#x3059;&#x308B;&#x62B5;&#x6297;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x50BE;&#x5411;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x5F8C;&#x671F;&#x306B;&#x611F;&#x67D3;&#x306E;&#x518D;&#x71C3;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B; PND &#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x578B;&#x306F;&#x578B;&#x56FA;&#x6709;&#x3068;&#x5E83;&#x304F;&#x4E2D;&#x548C;&#x6297;&#x4F53;&#x306B;&#x8010;&#x6027;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3057;&#x3001;in vitro &#x524A;&#x6E1B;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x5F62;&#x8CEA;&#x304C;&#x8868;&#x793A;&#x3002;&#x4E2D;&#x548C;&#x6297;&#x4F53;&#x306F;&#x611F;&#x67D3;&#x3092;&#x901A;&#x3057;&#x3066;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x5727;&#x529B;&#x3092;&#x52A0;&#x3048;&#x308B;&#x3057;&#x3001;&#x514D;&#x75AB;&#x56DE;&#x907F;&#x3068;&#x6C38;&#x7D9A;&#x6027;&#x306E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x6226;&#x7565;&#x3092;&#x9032;&#x5316;&#x3068;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x8D8A;&#x3048;&#x306B;&#x76F4;&#x9762;&#x3057;&#x5909;&#x66F4;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x99AC;&#x4F1D;&#x67D3;&#x6027;&#x8CA7;&#x8840;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; env &#x306E;&#x4E9C;&#x7A2E;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x9078;&#x629E;&#x75BE;&#x60A3;&#x306E;&#x9577;&#x671F;&#x7684;&#x306A;&#x4E0D;&#x9855;&#x6027;&#x611F;&#x6BB5;&#x968E;&#x3002;

&#xC8FC; &#xC911;&#xD654; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; (PND) &#xB9D0; &#xC804;&#xC5FC; &#xC131; &#xBE48; &#xD608; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (EIAV)&#xC758; &#xC218;&#xD638; V3 &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xC704;&#xCE58;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC720;&#xC804; &#xBCC0;&#xC774; PND&#xC5D0;&#xC11C; &#xBA74;&#xC5ED; &#xD0C8;&#xCD9C; &#xBC0F; &#xC9C0; &#xC18D;&#xC131; EIAV;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xAC04;&#xC8FC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC758; inapparent &#xB2E8;&#xACC4; &#xC218;&#xD638;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC804; &#xBCC0;&#xC774; &#xD2B9;&#xC9D5; &#xC774;&#xB2E4;. &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC9C0; &#xC18D;&#xC131; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xB354; &#xC798; &#xC774;&#xD574; &#xD558;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC545;&#xC131; eiav(wyo)&#xC640; &#xC8FC;&#xC0AC; &#xC870;&#xB791;&#xB9D0;&#xC5D0; SU &#xBCC0;&#xD654;&#xC758; &#xACBD;&#xB3C4; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB97C; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; RNA &#xACA9;&#xB9AC;&#xB294; inoculum&#xC640; &#xC21C;&#xCC28; &#xC138;&#xB77C; &#xC0D8;&#xD50C;&#xC5D0;&#xC11C; RT-PCR&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC99D;&#xD3ED; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;, &#xBCF5;&#xC81C;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xAC1C;&#xBCC4; &#xD074;&#xB860; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2F1; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC5BB;&#xC740; 147 &#xC2A4;&#xC640; &#xD074;&#xB860;&#xC758; 5 &#xAC1C; &#xC8FC;&#xC694; &#xACB9;&#xCE58;&#xC9C0; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC784;&#xC0C1; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC758; &#xD2B9;&#xC815; &#xB2E8;&#xACC4;&#xB97C; &#xCC28;&#xBCC4; &#xD558;&#xB294; PND 5 PND-1 &#xC9C0;&#xC815; &#xBD84;&#xD560; 71 &#xBCC4;&#xAC1C; V3 &#xBCC0;&#xC885; &#xD30C;&#xC545;. &#xAC01; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC758; genotypes &#xB300;&#xD45C; &#xC804;&#xC5FC; &#xC131; &#xBD84;&#xC790; &#xBCF5;&#xC81C;&#xC5D0; &#xC0BD;&#xC785; &#xB41C; &#xBC0F; &#xC5F0;&#xC18D; &#xC2DC;&#xAC04; post-infection&#xC5D0;&#xC11C; &#xD5CC; &#xC138;&#xB77C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; chimeric &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xBB34;&#xB825;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;. &#xC804;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC758; &#xC9C4;&#xD589; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xD56D; &#xCCB4;&#xB97C; &#xC911;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC800;&#xD56D;&#xC744; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558;&#xB294; &#xCD94;&#xC138;&#xB294;. PND &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD615; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC5D0; recrudescence&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC720;&#xD615;&#xBCC4;&#xACFC; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD558; &#xAC8C; &#xC911;&#xD654; &#xD56D; &#xCCB4;, &#xC800;&#xD56D; &#xD558;&#xB294; &#xD558; &#xACE0; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF5;&#xC81C; &#xAC10;&#xC18C; &#xD615; &#xD45C;&#xC2DC;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xD45C;&#xC2DC;&#xB294; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; &#xC555;&#xB825;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294; &#xC911;&#xD654; &#xD56D; &#xCCB4;&#xC640; &#xBA74;&#xC5ED; &#xD68C;&#xD53C; &#xBC0F; &#xC9C0; &#xC18D;&#xC131;&#xC758; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; &#xC804;&#xB7B5; &#xC9C4;&#xD654; &#xBC0F; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBA74;&#xC5ED; &#xC751;&#xB2F5; &#xC131;&#xC219; &#xBCC0;&#xACBD; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC9C8;&#xBCD1;&#xC758; &#xC7A5;&#xAE30; inapparent &#xB2E8;&#xACC4; &#xB9D0; &#xC804;&#xC5FC; &#xC131; &#xBE48; &#xD608; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xBCC0;&#xC885; env &#xBA74;&#xC5ED; &#xC120;&#xD0DD;.

El dominio principal de neutralizaci&oacute;n (PND) del virus de la anemia infecciosa equina (EIAV) se encuentra en la regi&oacute;n V3 de SU. Variaci&oacute;n gen&eacute;tica en el PND se considera para jugar un papel importante en el escape inmune y persistencia de EIAV; sin embargo, pocos estudios han caracterizado la variaci&oacute;n gen&eacute;tica en SU durante la etapa no aparente de enfermedad. Para comprender mejor los mecanismos de persistencia del virus, se realiz&oacute; un estudio longitudinal de SU variaci&oacute;n en un pony inoculado experimentalmente con el virulento EIAV(Wyo). ARN viral aislado del in&oacute;culo y de muestras de sueros secuenciales se amplific&oacute; por RT-PCR, clonados y los clones fueron ordenados. De los 147 clones SU obtenidos, se identificaron 71 distintas variantes de V3 que reparten en cinco grandes grupos de no superpuestos, se&ntilde;alados PND-1 al PND-5, que separados con etapas espec&iacute;ficas de la enfermedad cl&iacute;nica. Representante de genotipos de cada grupo fueron insertados en un clon molecular infeccioso y virus quim&eacute;ricos fueron probados para la susceptibilidad a la neutralizaci&oacute;n por suero aut&oacute;logo de post-infecci&oacute;n veces sucesivas. En general, hubo una tendencia para aumentar la resistencia a la neutralizaci&oacute;n de anticuerpos durante la progresi&oacute;n de la enfermedad. El genotipo PND asociado con recrudecimiento finales de infecci&oacute;n era resistente al tipo-espec&iacute;fica y ampliamente neutralizando anticuerpos y exhibi&oacute; un fenotipo reducido replicaci&oacute;n in vitro. Estos resultados indican que neutralizar anticuerpo ejerce presi&oacute;n selectiva a lo largo de la infecci&oacute;n y sugerir que viral estrategias de evasi&oacute;n inmune y persistencia cambian frente a una evoluci&oacute;n y maduraci&oacute;n de la respuesta inmune del hu&eacute;sped.

Inmune selecci&oacute;n de variantes de env del virus de anemia infecciosa equina durante la etapa no aparente a largo plazo de la enfermedad.

&#x9A6C;&#x4F20;&#x67D3;&#x6027;&#x8D2B;&#x8840;&#x75C5;&#x6BD2; (&#x8D2B;&#x8840;) &#x5C55;&#x54C1;&#x7684;&#x4F53;&#x5185;&#xFF0C;&#x9057;&#x4F20;&#x53D8;&#x5F02;&#x7387;&#x5F88;&#x9AD8;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x611F;&#x67D3;&#x9A6C;&#x4E00;&#x4E34;&#x5E8A;&#x53D8;&#x91CF;&#x7684;&#x75BE;&#x75C5;&#x3002;&#x72EC;&#x7279;&#x7684;&#x9057;&#x4F20;&#x4E9A;&#x7FA4;&#x51AF;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x8868;&#x578B;&#x548C;&#x6CE2;&#x52A8;&#x4E2D;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x4E34;&#x5E8A;&#x9636;&#x6BB5;&#x7684;&#x75BE;&#x75C5;&#x4E0E;&#x91CD;&#x5408;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x4E2D;&#x5360;&#x4E3B;&#x5BFC;&#x5730;&#x4F4D;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#xFF0C;&#x7279;&#x70B9;&#x662F;&#x4F53;&#x5185;&#x4EBA;&#x53E3;&#x4F20;&#x67D3;&#x6027;&#x8D2B;&#x8840;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x5BA1;&#x67E5;&#x4E86;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#xFF0C;&#x5F15;&#x8D77;&#x4F53;&#x5185;&#x548C;&#x6539;&#x53D8;&#x8868;&#x578B;&#x3002;&#x51AF;&#x86CB;&#x767D;&#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x4FDD;&#x5B88;&#xFF0C;&#x548C;&#x4EC5; 10 aa &#x7A81;&#x53D8;&#x4E5F;&#x53D1;&#x73B0;&#x9891;&#x7387;&#x5927;&#x4E8E; 10%&#x62BD;&#x6837;&#x4EBA;&#x53E3;&#x4E2D;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7A81;&#x53D8;&#x4E2D;&#x6709; 9 &#x4E2A;&#x662F;&#x503C;&#x7684;&#x80FD;&#x591F;&#x5927;&#x5927;&#x6539;&#x53D8;&#x51AF;&#x6D3B;&#x52A8;&#xFF0C;&#x65E0;&#x8BBA;&#x662F;&#x503C;&#x7684;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5355;&#x4E2A;&#x7A81;&#x53D8;&#x5728;&#x4E0A;&#x4E0B;&#x6587;&#x7684;&#x521B;&#x59CB;&#x4EBA; variant &#x7C7B;&#x578B;&#xFF0C;&#x6216;&#x7D2F;&#x8BA1;&#x56FA;&#x5B9A;&#x7A81;&#x53D8;&#x7684;&#x4E0A;&#x4E0B;&#x6587;&#x4E2D;&#x3002;&#x7ED3;&#x679C;&#x663E;&#x793A;&#xFF0C;&#x51AF;&#x4EE5;&#x5916;&#x57FA;&#x672C;&#x529F;&#x80FD;&#x57DF;&#x6709;&#x9650;&#x9057;&#x4F20;&#x53D8;&#x5F02;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6539;&#x53D8;&#x8868;&#x578B;&#x548C;&#x53EF;&#x6388;&#x4E88;&#x5728;&#x4F53;&#x5185;&#x5177;&#x6709;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x4F18;&#x52BF;&#x3002;

&#x81EA;&#x7136;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x9A6C;&#x4F20;&#x67D3;&#x6027;&#x8D2B;&#x8840;&#x75C5;&#x6BD2;&#x51AF;&#x975E;&#x5FC5;&#x8981;&#x57DF;&#x4E2D;&#x7684;&#x70B9;&#x7A81;&#x53D8;&#x6539;&#x53D8;&#x51AF;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6838;&#x51FA;&#x53E3;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;

Equine infectious anemia virus (EIAV) exhibits a high rate of genetic variation in vivo, and results in a clinically variable disease in infected horses. In vivo populations of EIAV have been characterized by the presence of distinct, genetic subpopulations of Rev that differ in phenotype and fluctuate in dominance in a manner coincident with each clinical stage of disease. This study examined the specific mutations that arose in vivo and altered the phenotype. The Rev protein was found to be highly conserved, and only 10 aa mutations were observed at a frequency greater than 10 % in the sample population. Nine of these mutations were capable of significantly altering Rev activity, either as single mutations in the context of the founder variant, or in the context of cumulatively fixed mutations. The results indicated that limited genetic variation outside the essential functional domains of Rev can alter the phenotype and may confer a selective advantage in vivo.

Naturally arising point mutations in non-essential domains of equine infectious anemia virus Rev alter Rev-dependent nuclear-export activity.

Virus de l&#39;an&eacute;mie infectieuse des &eacute;quid&eacute;s (EIAV) montre un taux &eacute;lev&eacute; de variation g&eacute;n&eacute;tique in vivo et se traduit par une maladie cliniquement variable chez les chevaux infect&eacute;s. Populations in vivo de EIAV ont &eacute;t&eacute; caract&eacute;ris&eacute;es par la pr&eacute;sence des sous-populations distinctes, g&eacute;n&eacute;tiques de Rev qui diff&egrave;rent dans le ph&eacute;notype et fluctuer dans la dominance d&#39;une mani&egrave;re qui co&iuml;ncide avec chaque stade clinique de la maladie. Nous avons &eacute;tudi&eacute; les mutations sp&eacute;cifiques qui a surgi in vivo et alt&eacute;r&eacute; le ph&eacute;notype. La prot&eacute;ine Rev s&#39;est av&eacute;r&eacute;e &ecirc;tre tr&egrave;s conserv&eacute;es, et seulement 10 mutations aa ont &eacute;t&eacute; observ&eacute;es &agrave; une fr&eacute;quence sup&eacute;rieures &agrave; 10 % dans la population &eacute;chantillonn&eacute;e. Neuf de ces mutations &eacute;taient susceptibles de modifier sensiblement l&#39;activit&eacute; Rev, soit comme des mutations unique dans le contexte de la variante de fondateur, ou dans le contexte des mutations cumulativement fixes. Les r&eacute;sultats indiquent que la variation g&eacute;n&eacute;tique limit&eacute;e en dehors des domaines fonctionnels essentiels de Rev peut modifier le ph&eacute;notype et peut-&ecirc;tre conf&eacute;rer un avantage s&eacute;lectif in vivo.

Naturellement d&eacute;coulant des mutations ponctuelles dans des domaines non essentiels du virus de l&#39;an&eacute;mie infectieuse des &eacute;quid&eacute;s Rev alt&eacute;rer l&#39;activit&eacute; Rev-d&eacute;pendante d&#39;exportations nucl&eacute;aires.

Equine Infekti&ouml;se An&auml;mie-Virus (EIAV) weist eine hohe Rate der genetischen Variationen beim in-vivo und f&uuml;hrt zu einer klinisch Variable Krankheit infizierten Pferden. In-vivo Populationen von EIAV waren durch das Vorhandensein von unterschiedlichen, genetische Subpopulationen von Rev gepr&auml;gt, die unterscheiden sich in Ph&auml;notyp und schwanken in Dominanz in einer Weise, die mit jeder klinischen Stadium der Erkrankung. Diese Studie untersucht die spezifischen Mutationen, die in-vivo entstand und der Ph&auml;notyp ver&auml;ndert. Das Rev-Protein wurde festgestellt, dass stark konserviert werden, und nur 10 aa-Mutationen bei einer Frequenz gr&ouml;&szlig;er als 10 % der Bev&ouml;lkerung Probe beobachtet. Neun von diesen Mutationen konnten Rev Aktivit&auml;t, entweder als einzelne Mutationen im Zusammenhang mit der Gr&uuml;nder-Variante oder im Zusammenhang mit kumulativ feste Mutationen deutlich zu ver&auml;ndern. Die Ergebnisse zeigten, dass eingeschr&auml;nkte genetischer Variation au&szlig;erhalb der grundlegenden funktionalen Dom&auml;nen von Rev der Ph&auml;notyp ver&auml;ndern kann und kann einen selektiven Vorteil in-vivo verleihen.

Nat&uuml;rlich ver&auml;ndern entstehende Punktmutationen in wesentlicher Bereiche der equine infekti&ouml;se An&auml;mie Virus Rev Rev-abh&auml;ngigen nuklearen Exportt&auml;tigkeit.

Virus anemia infettiva equina (EIAV) esibisce un alto tasso di variazione genetica in vivo e si traduce in una malattia clinicamente variabile nei cavalli infetti. Popolazioni in vivo di EIAV sono state caratterizzate dalla presenza di sottopopolazioni distinte, genetiche di Rev che si differenziano nel fenotipo e fluttuano in posizione dominante in modo coincida con ogni fase clinica della malattia. Questo studio ha esaminato le specifiche mutazioni che sorsero in vivo e alterato il fenotipo. La proteina Rev &egrave; stata trovata per essere altamente conservati, e solo 10 aa sono state osservate mutazioni a una frequenza superiore al 10% della popolazione campione. Nove di queste mutazioni sono state in grado di alterare significativamente Rev attivit&agrave;, sia come singole mutazioni nel contesto della variante fondatore, o nel contesto di mutazioni cumulativamente fisse. I risultati hanno indicato che variazione genetica limitata di fuori dei domini funzionali essenziali di Rev pu&ograve; alterare il fenotipo e pu&ograve; conferire un vantaggio selettivo in vivo.

Naturalmente presentante mutazioni puntiformi in domini non essenziali di virus anemia infettiva equina Rev alter attivit&agrave; nucleare-export Rev-dipendente.

&#x99AC;&#x4F1D;&#x67D3;&#x6027;&#x8CA7;&#x8840;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; (EIAV) &#x306F;&#x9AD8;&#x7387;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x3067;&#x306E;&#x5C55;&#x793A;&#x3057;&#x3001;&#x81E8;&#x5E8A;&#x7684;&#x306B;&#x53EF;&#x5909;&#x75C5;&#x611F;&#x67D3;&#x99AC;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x7D50;&#x679C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;EIAV &#x306E; in vivo &#x3067;&#x306E;&#x500B;&#x4F53;&#x7FA4;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3068;&#x306F;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x3068;&#x5404;&#x81E8;&#x5E8A;&#x75C5;&#x671F;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3059;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x512A;&#x52E2;&#x3067;&#x5909;&#x52D5;&#x3059;&#x308B;&#x500B;&#x5225;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30DD;&#x30D4;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; Rev &#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3057;&#x3001;in vivo &#x3067;&#x751F;&#x3058;&#x305F;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Rev &#x86CB;&#x767D;&#x304C;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x306B;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x767A;&#x898B;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x306E;&#x307F; 10 aa &#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x983B;&#x5EA6;&#x3067;&#x30B5;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x306E;&#x4EBA;&#x53E3;&#x306E; 10 &#xFF05; &#x4EE5;&#x4E0A;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x306E;&#x3046;&#x3061; 9 Rev &#x6D3B;&#x52D5;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5358;&#x4E00;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x5275;&#x59CB;&#x8005;&#x30D0;&#x30EA;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30AD;&#x30B9;&#x30C8;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x7D2F;&#x7A4D;&#x7684;&#x56FA;&#x5B9A;&#x306E;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30AD;&#x30B9;&#x30C8;&#x3092;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x5909;&#x3048;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306E;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;Rev &#x306E;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x5916;&#x9650;&#x5B9A;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x5909;&#x7570;&#x304C;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3092;&#x5909;&#x3048;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3057;&#x3001;in vivo &#x3067;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x512A;&#x4F4D;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x81EA;&#x7136;&#x99AC;&#x4F1D;&#x67D3;&#x6027;&#x8CA7;&#x8840;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; Rev &#x306E;&#x975E;&#x672C;&#x8CEA;&#x7684;&#x306A;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x70B9;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x306F; Rev &#x4F9D;&#x5B58;&#x6838;&#x8F38;&#x51FA;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3092;&#x5909;&#x3048;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xB9D0; &#xC804;&#xC5FC; &#xC131; &#xBE48; &#xD608; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (EIAV) &#xC720;&#xC804; &#xBCC0;&#xC774; vivo&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xC18D;&#xB3C4; &#xC804;&#xC2DC;&#xC640; &#xC784;&#xC0C1;&#xC801; &#xBCC0;&#xC218; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC5D0; &#xAC10;&#xC5FC; &#xB41C; &#xB9D0;&#xC5D0;. EIAV&#xC758; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xC778;&#xAD6C; &#xD45C;&#xD604; &#xD615;&#xC5D0; &#xCC28;&#xC774;&#xAC00; &#xC9C0;&#xBC30; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC758; &#xC784;&#xC0C1; &#xB2E8;&#xACC4; &#xAC01; &#xC77C;&#xCE58;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCC0;&#xB3D9; &#xD558; &#xB808; &#xBE0C;&#xC758; &#xB69C;&#xB837;&#xD55C;, &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC9D1;&#xB2E8;&#xAC04;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD2B9;&#xC9D5; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xC77C;&#xC5B4;&#xB0AC;&#xB2E4; &#xACE0; phenotype &#xBCC0;&#xACBD; &#xD2B9;&#xC815; &#xBCC0;&#xC774; &#xC870;&#xC0AC;. Rev &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xACE0;&#xB3C4;&#xB85C; &#xBCF4;&#xC874;&#xC744; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD558; &#xACE0; 10 aa &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC0D8;&#xD50C; &#xC778;&#xAD6C;&#xC758; 10% &#xC774;&#xC0C1;&#xC758; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xD588;&#xB2E4;. 9 &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC758; &#xD06C;&#xAC8C; &#xBCC0;&#xACBD; &#xACC4; &#xD65C;&#xB3D9;, &#xC124;&#xB9BD;&#xC790; variant&#xC758; &#xCEE8;&#xD14D;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB610;&#xB294; &#xB204;&#xC801; &#xACE0;&#xC815;&#xB41C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC758; &#xB9E5;&#xB77D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E8;&#xC77C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC11C;&#xC758; &#xB2A5;&#xB825;&#xC744; &#xD588;&#xB2E4;. &#xACB0;&#xACFC; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB808; &#xBE0C;&#xC758; &#xD544;&#xC218; &#xAE30;&#xB2A5; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xBC16;&#xC5D0; &#xC11C; &#xC81C;&#xD55C; &#xB41C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; phenotype &#xBCC0;&#xACBD;&#xD560; &#xC218; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; &#xC6B0;&#xC704;&#xB97C; &#xC218; &#xC5EC; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC790;&#xC5F0;&#xC2A4;&#xB7FD; &#xAC8C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD3EC;&#xC778;&#xD2B8; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xB9D0; &#xC804;&#xC5FC; &#xC131; &#xBE48; &#xD608; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xB808; &#xBE0C;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC5D0; &#xB808; &#xBE0C;&#xC5D0; &#xC885;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; &#xD575; &#xC218;&#xCD9C; &#xD65C;&#xB3D9; &#xBCC0;&#xACBD;.

Virus de la anemia infecciosa equina (EIAV) exhibe una alta tasa de variaci&oacute;n gen&eacute;tica en vivo y da lugar a una enfermedad cl&iacute;nico variable en caballos infectados. Poblaciones en vivo de EIAV se han caracterizado por la presencia de gen&eacute;ticas, distintas subpoblaciones de Rev que difieren en fenotipo y fluctuar en la dominaci&oacute;n de manera coincidente con cada etapa cl&iacute;nica de la enfermedad. Este estudio examin&oacute; las mutaciones espec&iacute;ficas que se presentaron en vivo y alteraci&oacute;n el fenotipo. La prote&iacute;na Rev fue encontrada para ser altamente conservadas, y s&oacute;lo 10 mutaciones aa observaron con una frecuencia superiores al 10% en la poblaci&oacute;n de la muestra. Nueve de estas mutaciones eran capaces de alterar significativamente la actividad de Rev, ya sea como solas mutaciones en el contexto de la variante del fundador, o en el contexto de mutaciones acumulativamente fijos. Los resultados indicaron que la variaci&oacute;n gen&eacute;tica limitada fuera de los dominios funcionales esenciales de Rev puede alterar el fenotipo y puede conferir una ventaja selectiva en vivo.

Naturalmente que se presentan mutaciones de punto en dominios no esenciales del virus de la anemia infecciosa equina Rev alterar la actividad de exportaci&oacute;n nuclear Rev-dependiente.

&#x51AF;&#x662F;&#x5FC5;&#x4E0D;&#x53EF;&#x5C11;&#x7684;&#x8C03;&#x8282;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x9A6C;&#x4F20;&#x67D3;&#x6027;&#x8D2B;&#x8840;&#x75C5;&#x6BD2; &#xFF08;&#x8D2B;&#x8840;&#xFF09; &#x548C;&#x5176;&#x4ED6;&#x7684;&#x6162;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x827E;&#x6ECB;&#x75C5;&#x6BD2; 1&#x3002;&#x5B83;&#x5C06;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x672A;&#x5B8C;&#x5168;&#x62FC;&#x63A5;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6027; mRNAs &#x548C;&#x5F80;&#x8FD4;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x4ECE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x5411;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x3001; &#x75C5;&#x6BD2;&#x7ED3;&#x6784;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4; RNA &#x7684;&#x751F;&#x4EA7;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x524D;&#x63D0;&#x3002;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x5176;&#x4F20;&#x67D3;&#x6027;&#x75C5;&#x6BD2;&#x751F;&#x4EA7;&#x4E2D;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5168;&#x957F;&#x86CB;&#x767D;&#x901A;&#x8FC7;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x786E;&#x5B9A;&#x7ED3;&#x6784;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x963B;&#x788D;&#x4E86;&#x9488;&#x5BF9;&#x51AF;&#x7684;&#x6297;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6CBB;&#x7597;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x7528;&#x7EC4;&#x5408;&#x8BA1;&#x7B97;&#x548C;&#x751F;&#x5316;&#x65B9;&#x6CD5;&#x6765;&#x751F;&#x6210;&#x548C;&#x8BC4;&#x4EF7;&#x51AF;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7ED3;&#x6784;&#x6A21;&#x578B;&#x3002;&#x6A21;&#x578B;&#x5316;&#x7684;&#x8D2B;&#x8840;&#x51AF; (ERev) &#x7ED3;&#x6784;&#x5305;&#x62EC;&#x603B;&#x6570;&#x4E3A; 6 &#x87BA;&#x65CB;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x56DB;&#x4E2A;&#x7EC4;&#x6210;&#x8C03;&#x538B;&#x56DB;&#x87BA;&#x65CB;&#x675F;&#x3002;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x87BA;&#x65CB;&#x5305;&#x542B;&#x5BCC;&#x542B;&#x4EAE;&#x6C28;&#x9178;&#x7684;&#x6838;&#x51FA;&#x53E3;&#x4FE1;&#x53F7; &#xFF08;NES&#xFF09;&#x3002;&#x5BCC;&#x542B;&#x7CBE;&#x6C28;&#x9178;&#x7684; RNA &#x7ED3;&#x5408;&#x4E3B;&#x9898;&#xFF0C;RRDRW&#xFF0C;&#x4F4D;&#x4E8E;&#x6EB6;&#x5242;&#x66B4;&#x9732;&#x5FAA;&#x73AF;&#x533A;&#x57DF;&#x3002;ERLE &#x6BCD;&#x9898;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x51AF;&#x6D3B;&#x52A8;&#x9884;&#x8BA1;&#x5C06;&#x57CB;&#x5728;&#x6A21;&#x578B;&#x5316;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x6838;&#x5FC3;&#x5B83;&#x7A33;&#x5B9A;&#x51AF;&#x6298;&#x4E2D;&#x7684;&#x4EBA;&#x53D1;&#x6325;&#x4E86;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6B64;&#x7ED3;&#x6784;&#x6A21;&#x578B;&#x88AB;&#x652F;&#x6301;&#x7531;&#x73B0;&#x6709;&#x7684;&#x9057;&#x4F20;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x6570;&#x636E;&#x4EE5;&#x53CA;&#x6709;&#x9488;&#x5BF9;&#x6027;&#x8BF1;&#x53D8;&#x7684;&#x9884;&#x6D4B;&#xFF0C;&#x5FC5;&#x987B;&#x6574;&#x4F53;&#x7ED3;&#x6784;&#x5B8C;&#x6574;&#x6027;&#x7684;&#x6B8B;&#x7559;&#x7269;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x9884;&#x6D4B;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x5E94;&#x589E;&#x52A0;&#x51AF;&#x4E2D;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x4E0E;&#x529F;&#x80FD;&#x5173;&#x7CFB;&#x7684;&#x7406;&#x89E3;&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x4E3A;&#x6162;&#x75C5;&#x6BD2;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x65B0;&#x7597;&#x6CD5;&#x7684;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x57FA;&#x7840;&#x3002;

&#x51AF;&#x4ECE;&#x9A6C;&#x4F20;&#x67D3;&#x6027;&#x8D2B;&#x8840;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x8C03;&#x8282;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x6A21;&#x578B;&#x3002;

Rev is an essential regulatory protein in the equine infectious anemia virus (EIAV) and other lentiviruses, including HIV-1. It binds incompletely spliced viral mRNAs and shuttles them from the nucleus to the cytoplasm, a critical prerequisite for the production of viral structural proteins and genomic RNA. Despite its important role in production of infectious virus, the development of antiviral therapies directed against Rev has been hampered by the lack of an experimentally-determined structure of the full length protein. We have used a combined computational and biochemical approach to generate and evaluate a structural model of the Rev protein. The modeled EIAV Rev (ERev) structure includes a total of 6 helices, four of which form an anti-parallel four-helix bundle. The first helix contains the leucine-rich nuclear export signal (NES). An arginine-rich RNA binding motif, RRDRW, is located in a solvent-exposed loop region. An ERLE motif required for Rev activity is predicted to be buried in the core of modeled structure where it plays an essential role in stabilization of the Rev fold. This structural model is supported by existing genetic and functional data as well as by targeted mutagenesis of residues predicted to be essential for overall structural integrity. Our predicted structure should increase understanding of structure-function relationships in Rev and may provide a basis for the design of new therapies for lentiviral diseases.

Structural model of the Rev regulatory protein from equine infectious anemia virus.

Rev est une prot&eacute;ine r&eacute;gulatrice essentielle dans le virus de l&#39;an&eacute;mie infectieuse des &eacute;quid&eacute;s (EIAV) et autres lentivirus, y compris le VIH-1. Il lie incompl&egrave;tement &eacute;piss&eacute;s ARNm viraux et les navettes depuis le noyau vers le cytoplasme, un pr&eacute;alable essentiel pour la production de prot&eacute;ines virales et ARN g&eacute;nomique. Malgr&eacute; son r&ocirc;le important dans la production de virus infectieux, au d&eacute;veloppement de traitements antiviraux dirig&eacute;s contre Rev a &eacute;t&eacute; entrav&eacute; par l&#39;absence d&#39;une structure d&eacute;termin&eacute;e exp&eacute;rimentalement de la prot&eacute;ine pleine longueur. Nous avons utilis&eacute; une approche computationnelle et biochimique de g&eacute;n&eacute;rer et d&#39;&eacute;valuer un mod&egrave;le de structure de la prot&eacute;ine Rev. La structure mod&eacute;lis&eacute;e de EIAV Rev (ERev) comprend un total de 6 h&eacute;lices, dont quatre forment un faisceau de quatre h&eacute;lices antiparall&egrave;le. La premi&egrave;re h&eacute;lice contient le signal d&#39;exportations nucl&eacute;aires riches en leucine (NES). Un motif de fixation de la RNA riches en arginine, RRDRW, est situ&eacute; dans une r&eacute;gion de la boucle expos&eacute;s au solvant. Un motif ERLE requis pour l&#39;activit&eacute; Rev est pr&eacute;vu pour &ecirc;tre enterr&eacute; dans le c&oelig;ur de la structure mod&eacute;lis&eacute;e o&ugrave; il joue un r&ocirc;le essentiel dans la stabilisation du pli Rev. Ce mod&egrave;le de la structure est soutenu par des donn&eacute;es g&eacute;n&eacute;tiques et fonctionnelles existantes, ainsi que par mutagen&egrave;se cibl&eacute;e des r&eacute;sidus devrait pour &ecirc;tre essentiels pour l&#39;int&eacute;grit&eacute; structurale globale. Notre structure pr&eacute;vue devrait am&eacute;liorer la compr&eacute;hension des relations structure-fonction de Rev et peut servir de base &agrave; la conception de nouvelles th&eacute;rapies pour les maladies des g&egrave;nes.

Mod&egrave;le de structure de la prot&eacute;ine r&eacute;gulatrice Rev du virus de l&#39;an&eacute;mie infectieuse des &eacute;quid&eacute;s.

Rev ist eine wesentliche regelndes Protein in der equine infekti&ouml;se An&auml;mie-Virus (EIAV) und andere Lentiviruses, einschlie&szlig;lich HIV-1. Es unvollst&auml;ndig gesplei&szlig;ten virale mRNAs bindet und sie aus den Zellkern, Zytoplasma, eine wichtige Voraussetzung f&uuml;r die Produktion von viralen Strukturproteine und genomische RNA shuttles. Trotz ihrer wichtigen Rolle in der Produktion des ansteckenden Virus hat die Entwicklung der antiviralen Therapien gegen Rev durch das Fehlen einer experimentell bestimmt Struktur des Proteins in voller L&auml;nge behindert. Wir haben einen kombinierten computational und biochemischen Ansatz verwendet, zu generieren und zu bewerten ein strukturelles Modell des Proteins Rev. Die modellierten EIAV Rev (ERev) Struktur umfasst insgesamt 6 Helices, von die vier einer antiparallelen vier-Helix-B&uuml;ndel bilden. Die erste Spirale enth&auml;lt das Leucin-reiche nukleare Export-Signal (NES). Eine Arginin-reiche RNA verbindlichem Motiv, RRDRW, befindet sich in einer Schleife L&ouml;sungsmittel ausgesetzt-Region. Ein ERLE-Motiv f&uuml;r Rev T&auml;tigkeit erforderlichen ist voraussichtlich im Kern des modellierten Struktur wo spielt es eine wesentliche Rolle in der Stabilisierung der Rev Falte begraben werden. Diese strukturellen Modells wird durch vorhandene genetische und funktionelle Daten sowie durch gezielte Mutagenese von R&uuml;ckst&auml;nden, die voraussichtlich f&uuml;r insgesamt strukturelle Integrit&auml;t wesentlich unterst&uuml;tzt. Unsere vorhergesagten Struktur sollte Verst&auml;ndnis von Struktur-Funktionsbeziehungen in Rev erh&ouml;hen und m&ouml;glicherweise bilden die Grundlage f&uuml;r das Design neuer Therapien f&uuml;r Lentivirale Krankheiten.

Strukturmodell des Rev regulatorischen Proteins aus Ansteckende Blutarmut der Pferde.

Rev &egrave; una proteina essenziale normativa in virus dell&#39;anemia infettiva equina (EIAV) e altri lentiviruses, compreso l&#39;HIV-1. Si lega in modo incompleto impiombato mRNA virale e fa la spola dal nucleo al citoplasma, un prerequisito fondamentale per la produzione di proteine virali strutturali e genomic RNA. Nonostante il suo ruolo importante nella produzione di virus infettivo, lo sviluppo di terapie antivirali diretti contro Rev &egrave; stato ostacolato dalla mancanza di una struttura della proteina piena lunghezza determinata sperimentalmente. Abbiamo utilizzato un approccio combinato computazionale e biochimico per generare e valutare un modello strutturale della proteina Rev. La struttura modellata EIAV Rev (ERev) comprende un totale di 6 eliche, di cui quattro formano un fascio di quattro-elica anti-parallelo. La prima elica contiene il segnale di esportazione nucleare ricchi di leucina (NES). Un motivo obbligatorio di RNA ricche di arginina, RRDRW, si trova in una regione del ciclo esposte al solvente. Un motivo ERLE necessario per attivit&agrave; Rev &egrave; previsto per essere sepolto nel nucleo della struttura modellata dove gioca un ruolo essenziale nella stabilizzazione della piega Rev. Questo modello strutturale &egrave; supportato da dati genetici e funzionali esistenti nonch&eacute; di mutagenesi mirata dei residui predetto essere essenziale per l&#39;integrit&agrave; strutturale complessiva. La nostra struttura prevista dovrebbe aumentare la comprensione delle relazioni struttura-funzione in Rev e possa fornire una base per la progettazione di nuove terapie per le malattie lentivirali.

Modello strutturale della proteina da virus anemia infettiva equina normativa Rev.

Rev &#x99AC;&#x4F1D;&#x67D3;&#x6027;&#x8CA7;&#x8840;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; (EIAV) &#x3068; HIV-1 &#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x30EC;&#x3067;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x898F;&#x5236;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x4E0D;&#x5B8C;&#x5168;&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; Mrna &#x3092;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306B;&#x30B7;&#x30E3;&#x30C8;&#x30EB;&#x304B;&#x3089;&#x6838;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x306B;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3068;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0; RNA &#x306E;&#x751F;&#x7523;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x524D;&#x63D0;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;&#x751F;&#x7523;&#x4F1D;&#x67D3;&#x6027;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x76E3;&#x7763;&#x306E; Rev &#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x6297;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x7642;&#x6CD5;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x5B8C;&#x5168;&#x9577;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x5B9F;&#x9A13;&#x7684;&#x306B;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x6B20;&#x5982;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x59A8;&#x3052;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x3001;Rev &#x86CB;&#x767D;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x305F;&#x8A08;&#x7B97;&#x7684;&#x30FB;&#x751F;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306E; EIAV Rev (&#x30B7;&#x30C6;&#x30A3;&#x30AB;&#x30FC;) &#x69CB;&#x9020;&#x306B;&#x306F;&#x3001;4 &#x3064;&#x306E;&#x3046;&#x3061;&#x3001;&#x30A2;&#x30F3;&#x30C1;&#x30D1;&#x30E9;&#x30EC;&#x30EB; 4 &#x672C;&#x30D8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x675F;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B; 6 &#x672C;&#x306E;&#x30D8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x5408;&#x8A08;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x521D;&#x306E; helix &#x306B;&#x306F;&#x30ED;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A;&#x6838;&#x30A8;&#x30AF;&#x30B9;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x4FE1;&#x53F7; (&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30B3;&#x30F3;) &#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AE;&#x30CB;&#x30F3;&#x306E;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A; RNA &#x7D50;&#x5408;&#x30E2;&#x30C1;&#x30FC;&#x30D5;&#x3001;RRDRW &#x304C;&#x6EB6;&#x5A92;&#x9732;&#x51FA;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x9818;&#x57DF;&#x5185;&#x306B;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Rev &#x6D3B;&#x52D5;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A; ERLE &#x30E2;&#x30C1;&#x30FC;&#x30D5; &#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x30B3;&#x30A2;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x304C; Rev &#x500D;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x5316;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x57CB;&#x846C;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3068;&#x4E88;&#x6E2C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x6B8B;&#x57FA;&#x306E;&#x5168;&#x4F53;&#x7684;&#x306A;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x6574;&#x5408;&#x6027;&#x306B;&#x3068;&#x3063;&#x3066;&#x304D;&#x308F;&#x3081;&#x3066;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x4E88;&#x6E2C;&#x306E;&#x5BFE;&#x8C61;&#x3068;&#x306A;&#x308B;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x8A98;&#x767A;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x65E2;&#x5B58;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B66;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306A;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x4E88;&#x6E2C;&#x69CB;&#x9020; Rev &#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x95A2;&#x6570;&#x306E;&#x95A2;&#x4FC2;&#x306E;&#x7406;&#x89E3;&#x3092;&#x5897;&#x3084;&#x3059;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3001;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C1; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x75BE;&#x60A3;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x8A2D;&#x8A08;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x57FA;&#x790E;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x99AC;&#x4F1D;&#x67D3;&#x6027;&#x8CA7;&#x8840;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E; Rev &#x8ABF;&#x7BC0;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3002;

&#xB808; &#xBE0C; &#xB9D0; &#xC804;&#xC5FC; &#xC131; &#xBE48; &#xD608; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (EIAV) &#xBC0F; h i V-1&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xB2E4;&#xB978; lentiviruses&#xC5D0;&#xC11C; &#xD544;&#xC218; &#xADDC;&#xC81C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC774;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xBD88;&#xC644;&#xC804; &#xD558; &#xAC8C; &#xC811;&#xD569;&#xB41C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; mRNAs &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558;&#xACE0; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xD575;, &#xAC8C;&#xB188; RNA &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xAD6C;&#xC870; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC804;&#xC81C; &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC154;&#xD2C0;. &#xC804;&#xC5FC; &#xC131; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xD56D; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xCE58;&#xB8CC; &#xACC4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC10;&#xB3C5;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC740; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xACB0;&#xC815; &#xC804;&#xCCB4; &#xAE38;&#xC774; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xAD6C;&#xC870;&#xC758; &#xBD80;&#xC871; &#xBC29;&#xD574; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC0DD;&#xC131; &#xACC4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xAD6C;&#xC870; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD558; &#xACB0;&#xD569;&#xB41C; &#xC804;&#xC0B0; &#xBC0F; &#xC0DD; &#xD654; &#xD655; &#xC801;&#xC778; &#xC811;&#xADFC;&#xC744; &#xC774;&#xC6A9; &#xD588;&#xB2E4;. &#xBAA8;&#xB378;&#xB41C; EIAV &#xB808; &#xBE0C; (ERev) &#xAD6C;&#xC870;&#xB294; 4 &#xAC1C; anti-parallel 4 &#xB098;&#xC120; &#xBC88;&#xB4E4; &#xD615;&#xD0DC;&#xB85C; 6 &#xD3EC;&#xD568; &#xCD1D; &#xD3EC;&#xD568; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xB098;&#xC120; &#xC2E0;&#xC774; &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; &#xD575; &#xC218;&#xCD9C; &#xC2E0;&#xD638; (NES)&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC544;&#xB974;&#xAE30;&#xB2CC;&#xC774; &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; RNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xBAA8;&#xD2F0;&#xD504;, RRDRW, &#xC6A9; &#xB9E4;&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C; &#xB41C; &#xB8E8;&#xD504; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xC704;&#xCE58; &#xD558; &#xACE0; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB808; &#xBE0C; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; ERLE &#xBAA8;&#xD2F0;&#xBE0C; &#xADF8;&#xAC83; &#xACC4; &#xACB9;&#xC758; &#xC548;&#xC815;&#xD654;&#xC5D0; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4; &#xBAA8;&#xB378; &#xAD6C;&#xC870;&#xC758; &#xD575;&#xC2EC;&#xC5D0; &#xAC00;&#xB824;&#xC9C8; &#xC804;&#xB9DD; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC774; &#xAD6C;&#xC870; &#xBAA8;&#xB378;&#xC740; &#xC804;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xBB34;&#xACB0;&#xC131;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xC608;&#xCE21; &#xD558;&#xB294; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC758; &#xD0C0;&#xAC9F;&#xB41C; mutagenesis &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xAE30;&#xC874; &#xC720;&#xC804;&#xACFC; &#xAE30;&#xB2A5; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC608;&#xCE21;&#xB41C; &#xAD6C;&#xC870; &#xACC4;&#xC5D0; &#xAD6C;&#xC870;-&#xAE30;&#xB2A5; &#xAD00;&#xACC4;&#xC758; &#xC774;&#xD574;&#xB97C; &#xC99D;&#xAC00; &#xD55C;&#xB2E4; &#xACE0; lentiviral &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xCE58;&#xB8CC;&#xBC95;&#xC758; &#xB514;&#xC790;&#xC778;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAE30;&#xBC18;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB9D0; &#xC804;&#xC5FC; &#xC131; &#xBE48; &#xD608; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACC4; &#xADDC;&#xC81C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xAD6C;&#xC870; &#xBAA8;&#xB378;.

Rev es una prote&iacute;na reguladora esencial en el virus de la anemia infecciosa equina (EIAV) y otros lentivirus, incluyendo el VIH-1. ATA incompleto empalmado mRNAs viral y los traslados desde el n&uacute;cleo hacia el citoplasma, un requisito previo esencial para la producci&oacute;n de prote&iacute;nas estructurales virales y RNA gen&oacute;mico. Pese a su importante papel en la producci&oacute;n de virus infeccioso, el desarrollo de terapias antivirales contra Rev ha sido obstaculizado por la falta de una estructura determinada experimentalmente de la prote&iacute;na del cuerpo entero. Hemos utilizado un enfoque combinado de computacional y bioqu&iacute;mico para generar y evaluar un modelo estructural de la prote&iacute;na Rev. La estructura modelada de EIAV Rev (ERev) incluye un total de 6 h&eacute;lices, cuatro de los cuales forman un paquete de cuatro-h&eacute;lice encapsulado. La primera h&eacute;lice contiene la se&ntilde;al de las exportaciones nucleares ricas en leucina (NES). Un motivo de uni&oacute;n del RNA ricas en arginina, RRDRW, est&aacute; situado en una regi&oacute;n de loop expuestos al solvente. Un motivo ERLE necesario para la actividad de Rev se predice para ser enterrado en la base de la estructura modelada donde juega un papel esencial en la estabilizaci&oacute;n del doblez Rev. Este modelo estructural es apoyado por datos gen&eacute;ticos y funcionales existentes, as&iacute; como mediante mutag&eacute;nesis dirigida de residuos sea indispensable para la integridad estructural general. Nuestra estructura prevista debe aumentar la comprensi&oacute;n de las relaciones estructura-funci&oacute;n en Rev y puede proporcionar una base para el dise&ntilde;o de nuevas terapias para enfermedades lentivirales.

Modelo estructural de la prote&iacute;na reguladora de la Rev del virus de la anemia infecciosa equina.

&#x82DC;&#x84FF;&#x5C3A;&#x8816;&#x591A;&#x591A;&#x89D2;&#x4F53;&#x75C5;&#x6BD2; (AcMNPV) odv e56 &#x57FA;&#x56E0;&#x7F16;&#x7801;&#x95ED;&#x585E;&#x6E90;&#x6027;&#x75C5;&#x6BD2; &#xFF08;ODV&#xFF09;-&#x5177;&#x4F53;&#x4FE1;&#x5C01;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;ODV E56&#x3002;&#x5728;&#x4EE5;&#x524D;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x4E2D;&#xFF0C;odv e56 &#x57FA;&#x56E0;&#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#x79EF;&#x6781;&#x9009;&#x62E9;&#x538B;&#x529B;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E;&#x5B83;&#x53EF;&#x80FD;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5BC4;&#x4E3B;&#x8303;&#x56F4;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x51B3;&#x5B9A;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x5728;&#x53E3;&#x8154;&#x4F20;&#x67D3;&#x6027;&#x548C;&#x4E3B;&#x673A;&#x8303;&#x56F4;&#x5185;&#x8BC4;&#x4F30; ODV E56 &#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x9020;&#x7684;&#x91CD;&#x7EC4; AcMNPV &#x514B;&#x9686; (Ac69GFP-e56lacZ &#x548C; AcIEGFP e56lacZ) &#x5728;&#x54EA;&#x4E9B; ODV E56 &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5408;&#x6210;&#x88AB;&#x6DD8;&#x6C70;&#x4E86;&#x7684; &beta;-&#x534A;&#x4E73;&#x7CD6;&#x82F7;&#x9176; (lacZ) &#x8868;&#x8FBE;&#x76D2;&#x63D2;&#x5165; odv e56 &#x5F00;&#x653E;&#x8BFB;&#x6846;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x5EFA;&#x9020;&#x91CD;&#x7EC4;&#x75C5;&#x6BD2;&#xFF0C;Ac69GFP Roe56&#xFF0C;&#x5728;&#x5176;&#x4E2D;&#x7684;&#x672C;&#x673A; AcMNPV odv e56 &#x7F16;&#x7801;&#x5E8F;&#x5217;&#x53D6;&#x4EE3; Rachiplusia ou &#x7684;&#x591A;&#x4F53;&#x75C5;&#x6BD2; &#xFF08;RoMNPV&#xFF09;&#xFF0C;&#x662F;&#x5B9E;&#x73B0;&#x4E00;&#x4E9B;&#x663E;&#x8457;&#x66F4;&#x6076;&#x6BD2;&#x7684;&#x5BC6;&#x5207;&#x76F8;&#x5173;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7269;&#x79CD;&#x6BD4; AcMNPV&#x3002;Odv e56 &#x91CD;&#x7EC4;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5C55;&#x793A;&#x4EFB;&#x4F55;&#x6539;&#x52A8;&#x6216;&#x4F20;&#x67D3;&#x6027; budded &#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57F9;&#x517B;&#x751F;&#x4EA7;&#x4E2D;&#x591A;&#x9762;&#x4F53;&#x751F;&#x4EA7;&#x548C;&#x5F62;&#x6001;&#x53D1;&#x751F;&#x3002;&#x5728;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E09;&#x79CD;&#x9CDE;&#x7FC5;&#x76EE;&#x4E3B;&#x673A;&#x7269;&#x79CD;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x9274;&#x5B9A;&#xFF0C;odv e56 &#x7A81;&#x53D8;&#x75C5;&#x6BD2; Ac69GFP e56lacZ &#x548C; AcIEGFP e56lacZ &#x53E3;&#x8154; infectivities &#x662F;&#x6DF1;&#x523B;&#x5730;&#x53D7;&#x635F;&#x4E0E;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x76F8;&#x6BD4;&#x548C;&#x63A7;&#x5236;&#x91CD;&#x7EC4;&#x75C5;&#x6BD2;&#x3002;&#x53E3;&#x8154;&#x4F20;&#x67D3;&#x6027;&#x662F;&#x901A;&#x8FC7; odv e56 &#x7A81;&#x53D8;&#x75C5;&#x6BD2; AcMNPV &#x6216; RoMNPV odv e56 &#x57FA;&#x56E0;&#x6807;&#x8BB0;&#x62EF;&#x6551;&#x5B8C;&#x5168;&#x8FD8;&#x539F;&#x3002;&#x5728;&#x4F7F;&#x7528;&#x66F4;&#x5BB9;&#x6613;&#x53D7;&#x5230;&#x6BD4;&#x5BF9; AcMNPV RoMNPV &#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4E3B;&#x673A;&#x7269;&#x79CD;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x9274;&#x5B9A;&#xFF0C;Ac69GFP Roe56 &#x6740;&#x5E7C;&#x866B;&#x5177;&#x6709;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x91CD;&#x7EC4;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8868;&#x8FBE; AcMNPV ODV E56 LC50 &#x503C;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E00;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x4E0E; RoMNPV orthologue AcMNPV odv e56 &#x57FA;&#x56E0;&#x7F6E;&#x6362;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x589E;&#x52A0;&#x5BF9;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7269;&#x79CD;&#x7684;&#x6BD2;&#x529B;&#x3002;

&#x82DC;&#x84FF;&#x5C3A;&#x8816;&#x591A;&#x591A;&#x89D2;&#x4F53;&#x75C5;&#x6BD2; ODV E56 &#x4FE1;&#x5C01;&#x86CB;&#x767D;&#x4E3A;&#x9700;&#x8981;&#x53E3;&#x8154;&#x4F20;&#x67D3;&#x6027;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x53D6;&#x4EE3;&#x591A;&#x4E2A;&#x591A;&#x89D2;&#x4F53;&#x75C5;&#x6BD2; ODV E56 &#x529F;&#x80FD; Rachiplusia ou&#x3002;

The Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus (AcMNPV) odv-e56 gene encodes an occlusion-derived virus (ODV)-specific envelope protein, ODV-E56. In a previous analysis, the odv-e56 gene was found to be under positive selection pressure, suggesting that it may be a determinant of virus host range. To assess the role of ODV-E56 in oral infectivity and host range, we constructed recombinant AcMNPV clones (Ac69GFP-e56lacZ and AcIEGFP-e56lacZ) in which ODV-E56 protein synthesis was eliminated by inserting a beta-galactosidase (lacZ) expression cassette into the odv-e56 open reading frame. We also constructed a recombinant virus, Ac69GFP-Roe56, in which the native AcMNPV odv-e56 coding sequence was replaced with that of Rachiplusia ou multiple nucleopolyhedrovirus (RoMNPV), a closely related virus that is significantly more virulent towards some host species than AcMNPV. The odv-e56 recombinant viruses exhibited no alterations in polyhedron production and morphogenesis or in the production of infectious budded virus in cell culture. In bioassays using three lepidopteran host species, the oral infectivities of the odv-e56 mutant viruses Ac69GFP-e56lacZ and AcIEGFP-e56lacZ were profoundly impaired compared with those of wild-type and control recombinant viruses. Oral infectivity was restored fully by marker rescue of the odv-e56 mutant viruses with either the AcMNPV or the RoMNPV odv-e56 gene. In bioassays using two host species that are more susceptible to RoMNPV than to AcMNPV, Ac69GFP-Roe56 killed larvae with LC50 values similar to those of recombinant viruses expressing AcMNPV ODV-E56. This result indicated that replacement of the AcMNPV odv-e56 gene with the RoMNPV orthologue did not increase virulence against these two species.

Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus ODV-E56 envelope protein is required for oral infectivity and can be substituted functionally by Rachiplusia ou multiple nucleopolyhedrovirus ODV-E56.

Le nucl&#xE9;opoly&#xE9;drovirus californica Autographa multiple (AcMNPV) ODV-e56 g&#xE8;ne code pour une occlusion d&#xE9;riv&#xE9; du virus (ODV) sp&#xE9;cifique prot&#xE9;ine d&#x26;#39;enveloppe, ODV-E56. Dans une analyse pr&#xE9;c&#xE9;dente, le g&#xE8;ne ODV-e56 a &#xE9;t&#xE9; jug&#xE9; sous la pression de s&#xE9;lection positive, ce qui sugg&#xE8;re qu&#x26;#39;il peut &#xEA;tre un facteur d&#xE9;terminant de la gamme d&#x26;#39;h&#xF4;tes du virus. Pour &#xE9;valuer le r&#xF4;le de l&#x26;#39;ODV-E56 de l&#x26;#39;infectiosit&#xE9; par voie orale et la gamme d&#x26;#39;h&#xF4;tes, nous avons construit recombinant clones AcMNPV (Ac69GFP-e56lacZ et AcIEGFP-e56lacZ) dans lesquelles la synth&#xE8;se ODV-E56 prot&#xE9;ines a &#xE9;t&#xE9; &#xE9;limin&#xE9;e en ins&#xE9;rant une cassette b&#xEA;ta-galactosidase (lacZ) dans le cadre ODV-e56 de lecture ouvert. Nous avons &#xE9;galement construit un virus recombinant, Ac69GFP-Roe56, dans laquelle le natif de AcMNPV ODV-e56 s&#xE9;quence codante a &#xE9;t&#xE9; remplac&#xE9; par celui de Rachiplusia ous nucl&#xE9;opoly&#xE9;drovirus multiples (RoMNPV), un virus &#xE9;troitement apparent&#xE9; qui est beaucoup plus virulent &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;gard de certaines esp&#xE8;ces d&#x26;#39;accueil que AcMNPV. Les virus recombinants ODV-E56 ne pr&#xE9;sentait aucune alt&#xE9;ration dans la production de poly&#xE8;dre et de la morphogen&#xE8;se ou dans la production de virus infectieux bourgeonn&#xE9; en culture cellulaire. Dans les essais biologiques en utilisant trois esp&#xE8;ces h&#xF4;tes l&#xE9;pidopt&#xE8;res, les infectivit&#xE9;s orales des ODV des virus mutants E56 Ac69GFP-e56lacZ et AcIEGFP-e56lacZ ont &#xE9;t&#xE9; profond&#xE9;ment alt&#xE9;r&#xE9;e par rapport &#xE0; ceux de type sauvage et de contr&#xF4;ler les virus recombinants. Infectiosit&#xE9; orale a &#xE9;t&#xE9; restaur&#xE9; enti&#xE8;rement par le sauvetage marqueur des virus mutants ODV-E56 soit avec le AcMNPV ou l&#x26;#39;ODV RoMNPV-e56 g&#xE8;ne. Dans les essais biologiques en utilisant deux esp&#xE8;ces h&#xF4;tes qui sont plus sensibles aux RoMNPV que de AcMNPV, Ac69GFP-Roe56 tu&#xE9; les larves avec des valeurs de la CL50 similaires &#xE0; celles des virus recombinants exprimant AcMNPV ODV-E56. Ce r&#xE9;sultat indique que le remplacement de l&#x26;#39;ODV AcMNPV-e56 g&#xE8;ne avec l&#x26;#39;orthologue RoMNPV n&#x26;#39;a pas augment&#xE9; la virulence contre ces deux esp&#xE8;ces.

Autographa californica Nucl&#xE9;opoly&#xE9;drovirus multiples prot&#xE9;ines ODV-E56 Enveloppe est requise pour l&#x26;#39;infectivit&#xE9; par voie orale et peut &#xEA;tre remplac&#xE9; par le plan fonctionnel Rachiplusia Ou Nucl&#xE9;opoly&#xE9;drovirus multiples ODV-E56

Die Autographa Californica mehrere Nucleopolyhedrovirus (AcMNPV) unbeh&uuml;llte-e56-Gen kodiert f&uuml;r einen Okklusion abgeleitete Virus (Unbeh&uuml;llte)-spezifischen Umschlag Protein, Unbeh&uuml;llte-E56. In einer fr&uuml;heren Analyse erschien das unbeh&uuml;llte-e56-gen, unter positiven Selektionsdruck, was darauf hindeutet, dass es m&ouml;glicherweise ein ausschlaggebender Faktor f&uuml;r Virus-Host-Bereich. Um die Rolle der Unbeh&uuml;llte-E56 in m&uuml;ndlichen Infektiosit&auml;t und Host-Bereich zu beurteilen, errichteten wir rekombinante AcMNPV (Ac69GFP-e56lacZ und AcIEGFP-e56lacZ) Klone in welche Unbeh&uuml;llte-E56-Protein-Synthese durch Einf&uuml;gen einer Beta-Galaktosidase (LacZ) Ausdruck Kassette in die offene Leseraster unbeh&uuml;llte-e56 eliminiert wurde. Auch konstruierten wir einen rekombinanten Virus, Ac69GFP-Roe56, in der die native AcMNPV unbeh&uuml;llte-e56 kodierende Sequenz mit ersetzt wurde, der Rachiplusia Ou mehrere Nucleopolyhedrovirus (RoMNPV), ein eng verwandten Virus, das ist deutlich mehr virulenten gegen&uuml;ber einige Arten als AcMNPV gehostet werden. Die unbeh&uuml;llte-e56 rekombinante Viren stellte keine Ver&auml;nderungen im Polyeder Produktions- und Morphogenese oder bei der Herstellung von infekti&ouml;sen budded Virus in der Zellkultur. Bioassays mit drei Lepidopteren Host-Arten, die m&uuml;ndliche Infectivities unbeh&uuml;llte-e56 mutierten Viren Ac69GFP-e56lacZ und AcIEGFP-e56lacZ waren zutiefst beeintr&auml;chtigt im Vergleich zu denen der Wildtyp und rekombinante Viren zu kontrollieren. M&uuml;ndliche Infektiosit&auml;t wurde von Markierung Rettung der unbeh&uuml;llte-e56 mutierten Viren mit der AcMNPV oder das RoMNPV unbeh&uuml;llte-e56-gen vollst&auml;ndig restauriert. Bioassays mit zwei Host-Arten, die zu RoMNPV als zu AcMNPV anf&auml;lliger sind, get&ouml;tet Ac69GFP-Roe56 Larven mit LC50-Werte &auml;hnlich denen von rekombinanten Viren AcMNPV Unbeh&uuml;llte-E56 zum Ausdruck zu bringen. Dieses Ergebnis zeigte, dass Ersatz im AcMNPV unbeh&uuml;llte-e56-gen mit der RoMNPV-Orthologue Virulenz gegen diese beiden Arten nicht gestiegen.

Autographa Californica mehrere Nucleopolyhedrovirus Unbeh&uuml;llte-E56 Umschlag Protein f&uuml;r m&uuml;ndliche Infektiosit&auml;t ist erforderlich und kann durch Rachiplusia Ou mehrere Nucleopolyhedrovirus Unbeh&uuml;llte-E56 funktionell ersetzt.

La Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus (AcMNPV) odv-e56 gene codifica un virus derivato da occlusione (ODV)-proteina specifica busta, ODV-E56. Nell&#39;analisi precedente, il gene odv-e56 &egrave; stato trovato per essere sotto la pressione di selezione positiva, suggerendo che potrebbe essere un fattore determinante della gamma di virus. Per valutare il ruolo di ODV-E56 infettivit&agrave; orale e la gamma di host, abbiamo costruito ricombinante che acmnpv cloni (Ac69GFP-e56lacZ e AcIEGFP-e56lacZ) nella quale sintesi proteica ODV-E56 &egrave; stata eliminata mediante l&#39;inserimento di una cassetta di espressione di beta-galattosidasi (lacZ) in open reading frame del odv-e56. Abbiamo anche costruito un virus ricombinante, Ac69GFP-Roe56, in cui il nativa AcMNPV odv-e56 sequenza codifica &egrave; stata sostituita con che di Rachiplusia ou multiple nucleopolyhedrovirus (RoMNPV), un virus strettamente correlato che &egrave; significativamente pi&ugrave; virulento verso alcuni ospitano specie di AcMNPV. I virus ricombinanti odv-e56 non esposto alterazioni nella produzione di poliedro e morfogenesi o nella produzione di virus infettivo germinata in coltura cellulare. Nelle analisi biologiche utilizzando tre specie di lepidotteri ospite, il infectivities orale dei virus mutante odv-e56 Ac69GFP-e56lacZ e AcIEGFP-e56lacZ erano profondamente alterata rispetto a quelli di tipo selvatico e controllo virus ricombinanti. Infettivit&agrave; orale fu restaurata completamente dal salvataggio di marcatore dei virus con il AcMNPV o il RoMNPV odv-e56 gene mutante odv-e56. Nelle analisi biologiche utilizzando due specie ospite che sono pi&ugrave; suscettibili a RoMNPV rispetto a AcMNPV, Ac69GFP-Roe56 ucciso larve con valori di LC50 simili a quelli di virus ricombinanti che esprimono AcMNPV ODV-E56. Questo risultato ha indicato che sostituzione del gene odv-e56 AcMNPV con il RoMNPV orthologue non aumenta virulenza contro queste due specie.

Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus ODV-E56 busta proteina &egrave; necessaria per infettivit&agrave; orale e pu&ograve; essere sostituito funzionalmente da ou Rachiplusia multiple nucleopolyhedrovirus ODV-E56.

&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A1;&#xB7;&#x30AB;&#x30EA;&#x30D5;&#x30A9;&#x30EB;&#x30CB;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x6838;&#x591A;&#x89D2;&#x4F53;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#xFF08;AcMNPV&#xFF09;ODV-E56&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x9589;&#x585E;&#x7531;&#x6765;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#xFF08;ODV&#xFF09;&#x56FA;&#x6709;&#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30D9;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D7;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3001;ODV-E56&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x3067;&#x306F;&#x3001;ODV-E56&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x304C;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x57DF;&#x306E;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x8981;&#x56E0;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3001;&#x6B63;&#x306E;&#x9078;&#x629E;&#x5727;&#x306E;&#x4E0B;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5224;&#x660E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D4C;&#x53E3;&#x611F;&#x67D3;&#x3068;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7BC4;&#x56F2;&#x306E;ODV-E56&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;ODV-E56&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5408;&#x6210;&#x306F;&#x3B2;-&#x30AC;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30B7;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;lacZ&#xFF09;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x30AB;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x306B;&#x633F;&#x5165;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x9664;&#x53BB;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;AcMNPV&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#xFF08;Ac69GFP-e56lacZ&#x3068;AcIEGFP-e56lacZ&#xFF09;&#x3092;&#x69CB;&#x7BC9;ODV-E56&#x30AA;&#x30FC;&#x30D7;&#x30F3;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x30D5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30E0;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x30CD;&#x30A4;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;AcMNPV ODV-E56&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x914D;&#x5217;&#x304C;Rachiplusia OU&#x306B;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x6838;&#x591A;&#x89D2;&#x4F53;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#xFF08;RoMNPV&#xFF09;&#x3001;AcMNPV&#x3088;&#x308A;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7A2E;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x306F;&#x308B;&#x304B;&#x306B;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x5BC6;&#x63A5;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x305F;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x3082;&#x306E;&#x3068;&#x7F6E;&#x63DB;&#x3057;&#x305F;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3001;Ac69GFP-Roe56&#x3092;&#x69CB;&#x7BC9;&#x3057;&#x305F;&#x3002; ODV-E56&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x9762;&#x4F53;&#x306E;&#x751F;&#x7523;&#x3068;&#x5F62;&#x614B;&#x5F62;&#x6210;&#x3084;&#x7D30;&#x80DE;&#x57F9;&#x990A;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x611F;&#x67D3;&#x6027;&#x51FA;&#x82BD;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x7523;&#x751F;&#x306B;&#x306F;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x793A;&#x3055;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002; 3&#x9C57;&#x7FC5;&#x76EE;&#x306E;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7A2E;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3067;&#x306F;&#x3001;ODV-E56&#x5909;&#x7570;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;Ac69GFP-e56lacZ&#x3068;AcIEGFP-e56lacZ&#x306E;&#x7D4C;&#x53E3;&#x611F;&#x67D3;&#x6027;&#x306F;&#x6DF1;&#x304F;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x306E;&#x3082;&#x306E;&#x3068;&#x6BD4;&#x3079;&#x3066;&#x969C;&#x5BB3;&#x8005;&#x3068;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D4C;&#x53E3;&#x611F;&#x67D3;&#x6027;&#x306F;AcMNPV&#x307E;&#x305F;&#x306F;RoMNPV ODV-E56&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x3067;ODV-E56&#x5909;&#x7570;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x30EC;&#x30B9;&#x30AD;&#x30E5;&#x30FC;&#x3067;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x5FA9;&#x5143;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002; AcMNPV&#x3088;&#x308A;&#x3082;RoMNPV&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3055;&#x308C;&#x3084;&#x3059;&#x3044;2&#x5BBF;&#x4E3B;&#x306E;&#x7A2E;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3067;&#x306F;&#x3001;Ac69GFP-Roe56&#x306F;AcMNPV ODV-E56&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;LC50&#x5024;&#x3067;&#x5E7C;&#x866B;&#x3092;&#x6BBA;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;RoMNPV&#x306E;&#x30AA;&#x30EB;&#x30BD;&#x30ED;&#x30B0;&#x3068;AcMNPV ODV-E56&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x7F6E;&#x63DB;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;2&#x3064;&#x306E;&#x7A2E;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x3092;&#x5897;&#x52A0;&#x3055;&#x305B;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;

&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A1;&#xB7;&#x30AB;&#x30EA;&#x30D5;&#x30A9;&#x30EB;&#x30CB;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x6838;&#x591A;&#x6838;ODV-E56&#x30A8;&#x30F3;&#x30D9;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D7;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x7D4C;&#x53E3;&#x611F;&#x67D3;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3055;&#x308C;&#x3001;Rachiplusia&#x738B;&#x306E;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x6838;&#x591A;&#x6838;ODV-E56&#x3067;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306B;&#x7F6E;&#x63DB;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;

Autographa californica &#xC5EC;&#xB7EC; nucleopolyhedrovirus (AcMNPV) odv e56 &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD3D0;&#xC0C9; &#xD30C;&#xC0DD; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (ODV)-&#xD2B9;&#xC815; &#xBD09;&#xD22C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;, ODV E56. &#xC774;&#xC804; &#xBD84;&#xC11D; odv e56 &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBC94;&#xC704; &#xACB0;&#xC815; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xC120;&#xD0DD; &#xC555;&#xB825; &#xC218; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB410;&#xB2E4;. &#xAD6C;&#xAC15; infectivity &#xBC0F; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xBC94;&#xC704; ODV e56&#xC758; &#xC5ED;&#xD560; &#xD3C9;&#xAC00;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xAC74;&#xC124; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; AcMNPV &#xD074;&#xB860; (Ac69GFP-e56lacz&#xC640; AcIEGFP-e56lacZ)&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5B4;&#xB5A4; ODV E56 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD569;&#xC131; odv e56 &#xC5F4;&#xB824;&#xC788;&#xB294; &#xB3C5;&#xC11C; &#xD504;&#xB808;&#xC784;&#xC5D0; &#xBCA0;&#xD0C0;-galactosidase (lacZ) &#xC2DD; &#xCE74;&#xC138;&#xD2B8;&#xB97C; &#xC0BD;&#xC785; &#xD558; &#xC5EC; &#xD0C8;&#xB77D; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB610;&#xD55C; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xD615; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;, Ac69GFP-Roe56&#xB294; &#xB124;&#xC774;&#xD2F0;&#xBE0C; AcMNPV odv e56 &#xCF54;&#xB529; &#xC21C;&#xC11C;&#xB294; &#xBC14;&#xB01D;&#xB2C8;&#xB2E4; Rachiplusia ou&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; nucleopolyhedrovirus (RoMNPV), &#xC5B4;&#xB5A4; &#xCABD;&#xC73C;&#xB85C; &#xD6E8;&#xC52C; &#xB354; &#xC545;&#xC131;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC00;&#xC811; &#xD558; &#xAC8C; &#xAD00;&#xB828;&#xB41C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; AcMNPV &#xBCF4;&#xB2E4; &#xC885; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xAD6C;&#xC131; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Odv e56 &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xD615; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xAC10;&#xC5FC; budded &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC30;&#xC591;&#xC758; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xB610;&#xB294; &#xB2E4;&#xBA74;&#xCCB4; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xACFC; morphogenesis&#xC5D0; &#xC544;&#xBB34; &#xBCC0;&#xACBD; &#xC804;&#xC2DC;. Bioassays 3 lepidopteran &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC885;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, Ac69GFP-e56lacZ &#xBC0F; AcIEGFP e56lacZ odv e56 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; &#xAD6C;&#xB450; infectivities &#xD588;&#xB2E4; &#xBFCC;&#xB9AC;&#xAE4A;&#xC740; &#xC7A5;&#xC560;&#xC778; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785;&#xC758; &#xADF8;&#xB4E4;&#xACFC; &#xBE44;&#xAD50; &#xB41C; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558; &#xACE0; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAD6C;&#xAC15; infectivity odv e56 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xB294; AcMNPV &#xB610;&#xB294; RoMNPV odv e56 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD45C;&#xC2DD; &#xAD6C;&#xC870;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC644;&#xBCBD; &#xD558; &#xAC8C; &#xBCF5;&#xC6D0; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Bioassays &#xBCF4;&#xB2E4; Acmnpv&#xC5D0; Romnpv&#xC5D0; &#xB354; &#xCDE8;&#xC57D; &#xB450; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC885;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, Ac69GFP-Roe56 LC50 &#xAC12;&#xC774; AcMNPV ODV E56 &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xD615; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC640; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xC560;&#xBC8C;&#xB808;&#xB97C; &#xC8FD;. &#xC774; &#xACB0;&#xACFC; &#xD45C;&#xC2DC; RoMNPV orthologue&#xC640; &#xD568;&#xAED8; AcMNPV odv e56 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xBCF4;&#xCDA9;&#xC774; &#xB450; &#xC885;&#xC5D0; &#xB300;&#xD574; &#xB3C5;&#xC131;&#xC744; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;.

Autographa californica &#xC5EC;&#xB7EC; nucleopolyhedrovirus ODV E56 &#xBD09;&#xD22C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xAD6C;&#xAC15; infectivity&#xC5D0; &#xD544;&#xC694; &#xD558;&#xBA70; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC5EC;&#xB7EC; nucleopolyhedrovirus ODV E56 Rachiplusia ou&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB300;&#xCCB4;.

El nucleopoliedrovirus Autographa californica m&#xFA;ltiple (AcMNPV) ODV-E56 gen codifica un virus derivado de la oclusi&#xF3;n (ODV) espec&#xED;fica prote&#xED;na de la envoltura, ODV-E56. En un an&#xE1;lisis anterior, el gen ODV-E56 se encontr&#xF3; que era bajo presi&#xF3;n de selecci&#xF3;n positiva, lo que sugiere que puede ser un factor determinante de la gama de virus hu&#xE9;sped. Para evaluar el papel de ODV-E56 en la infectividad por v&#xED;a oral y la gama de hu&#xE9;spedes, hemos construido recombinante clones AcMNPV (Ac69GFP-e56lacZ y AcIEGFP e56lacZ-) en la que fue eliminado ODV-E56 la s&#xED;ntesis de prote&#xED;nas mediante la inserci&#xF3;n de una beta-galactosidasa (lacZ) cassette de expresi&#xF3;n en el marco ODV-E56 de lectura abierta. Tambi&#xE9;n se construy&#xF3; un virus recombinante, Ac69GFP-Roe56, en el que fue sustituido el nativo de AcMNPV ODV-E56 secuencia de codificaci&#xF3;n con la de Rachiplusia nucleopoliedrovirus ou m&#xFA;ltiple (RoMNPV), un virus estrechamente relacionado que es significativamente m&#xE1;s virulento hacia algunas especies hospederas que AcMNPV. Los virus recombinantes ODV-E56 exhibieron ninguna alteraci&#xF3;n en la producci&#xF3;n de poliedro y la morfog&#xE9;nesis o en la producci&#xF3;n de virus infeccioso reverdeci&#xF3; en cultivo celular. En bioensayos con tres especies de lepid&#xF3;pteros de acogida, los infectividad orales de las ODV los virus mutantes Ac69GFP E56-e56lacZ y AcIEGFP e56lacZ-se deterioraron profundamente en comparaci&#xF3;n con los de tipo salvaje y control de los virus recombinantes. Infectividad oral fue totalmente restaurado en el rescate de marcador de los virus mutantes ODV-E56 ya sea con el AcMNPV o el gen RoMNPV ODV-E56. En bioensayos con dos especies de acogida que son m&#xE1;s susceptibles a RoMNPV que a AcMNPV, Ac69GFP-Roe56 mat&#xF3; las larvas con valores de LC50 similares a las de los virus recombinantes que expresan AcMNPV ODV-E56. Este resultado indica que la sustituci&#xF3;n del AcMNPV ODV-E56 gen con la orthologue RoMNPV no aument&#xF3; la virulencia en contra de estas dos especies.

Autographa californica Nucleopolyhedrovirus m&#xFA;ltiple ODV-E56 prote&#xED;na de la envoltura es necesaria para la infectividad oral y puede ser sustituido por el punto de vista funcional Rachiplusia Nucleopolyhedrovirus Ou m&#xFA;ltiple ODV-E56

&#x5982;&#x4F55;&#x963B;&#x6B62;&#x7531;&#x869C;&#x866B;&#x4F20;&#x64AD;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x53EF;&#x80FD;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5C0F;&#x8BF4;&#x548C;&#x63A7;&#x5236;&#x690D;&#x7269;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x5E7F;&#x8C31;&#x624B;&#x6BB5;&#x3002;&#x869C; obligately &#x4EE5;&#x6301;&#x4E45;&#x65B9;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x9700;&#x8981;&#x75C5;&#x6BD2;&#x4F53;&#x79EF;&#x7D2F;&#x7684;&#x869C;&#x866B;&#x4F53;&#x8154;&#x4F20;&#x4E2D;&#x589E;&#x5F3A;&#x7684; Luteoviridae &#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7B49;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x8F93;&#x5165;&#x4F53;&#x8154;&#xFF0C;&#x75C5;&#x6BD2;&#x4F53;&#x5FC5;&#x987B;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x548C;&#x904D;&#x5386;&#x869C;&#x80A0;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x7B5B;&#x9009;&#x566C;&#x83CC;&#x4F53;&#x5C55;&#x793A;&#x5E93;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A;&#x5C06;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x7684;&#x4E2D;&#x80A0;&#x548C;&#x540E;&#x7684;&#x80A0;&#x9053;&#x5BF9;&#x8C4C;&#x8C46;&#x869C;&#x866B;&#x869C;&#x8C4C;&#x8C46; 12 &#x6B8B;&#x7559;&#x80A0;&#x7ED3;&#x5408;&#x80BD; (GBP3.1)&#x3002;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x8D34;&#x6807; GBP3.1 &#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x878D;&#x5408;&#x7684;&#x869C;&#x866B;&#x80A0;&#x3002;GBP3.1 &#x4ECE;&#x8C4C;&#x8C46;&#x869C;&#x866B;&#x80A0;&#x5230;&#x4F53;&#x8154;&#x51CF;&#x5C11;&#x5438;&#x6536;&#x8C4C;&#x8C46; enation &#x82B1;&#x53F6;&#x75C5;&#x6BD2; &#xFF08;Luteoviridae&#xFF09;&#x3002;GBP3.1 &#x8FD8;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x7EFF;&#x8272;&#x6843;&#x869C;&#x548C;&#x5927;&#x8C46;&#x869C;&#x7684;&#x80A0;&#x4E0A;&#x76AE;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x81F3;&#x5C11;&#x4E09;&#x4E2A;&#x4E3B;&#x8981;&#x7684;&#x869C;&#x866B;&#x5BB3;&#x866B;&#x79CD;&#x7C7B;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x690D;&#x7269;&#x75C5;&#x6BD2;&#x4F20;&#x64AD;&#x7684;&#x65B0;&#x7B56;&#x7565;&#x3002;

&#x8C4C;&#x8C46;&#x869C;&#x866B;&#x80A0;&#x7684;&#x591A;&#x80BD;&#x6210;&#x869C;&#x4F53;&#x8154;&#xFF0C;&#x59A8;&#x788D;&#x4E86;&#x8C4C;&#x8C46; enation &#x82B1;&#x53F6;&#x75C5;&#x6BD2;&#x5165;&#x5883;&#x3002;

Development of ways to block virus transmission by aphids could lead to novel and broad-spectrum means of controlling plant viruses. Viruses in the Luteoviridae enhanced are obligately transmitted by aphids in a persistent manner that requires virion accumulation in the aphid hemocoel. To enter the hemocoel, the virion must bind and traverse the aphid gut epithelium. By screening a phage display library, we identified a 12-residue gut binding peptide (GBP3.1) that binds to the midgut and hindgut of the pea aphid Acyrthosiphon pisum. Binding was confirmed by labeling the aphid gut with a GBP3.1-green fluorescent protein fusion. GBP3.1 reduced uptake of Pea enation mosaic virus (Luteoviridae) from the pea aphid gut into the hemocoel. GBP3.1 also bound to the gut epithelia of the green peach aphid and the soybean aphid. These results suggest a novel strategy for inhibiting plant virus transmission by at least three major aphid pest species.

A peptide that binds the pea aphid gut impedes entry of Pea enation mosaic virus into the aphid hemocoel.

D&#xE9;veloppement de moyens de bloquer la transmission du virus par les pucerons pourrait conduire &#xE0; de nouveaux moyens et &#xE0; large spectre de contr&#xF4;ler les virus de plantes. Les virus de la meilleure Luteoviridae sont obligatoirement, transmis par les pucerons de fa&#xE7;on persistante qui n&#xE9;cessite l&#x26;#39;accumulation dans le virion h&#xE9;moc&#xE8;le pucerons. Pour entrer dans le h&#xE9;moc&#xE8;le, le virion doit se lier et de traverser l&#x26;#39;&#xE9;pith&#xE9;lium intestinal pucerons. Par criblage d&#x26;#39;une banque d&#x26;#39;expression phagique, nous avons identifi&#xE9; un peptide de 12 r&#xE9;sidus intestin contraignant (GBP3.1) qui se lie &#xE0; l&#x26;#39;intestin moyen et post&#xE9;rieur de l&#x26;#39;Acyrthosiphon pisum puceron du pois. La liaison a &#xE9;t&#xE9; confirm&#xE9;e par l&#x26;#39;&#xE9;tiquetage de l&#x26;#39;intestin puceron avec une fusion GBP3.1-prot&#xE9;ine fluorescente verte. GBP3.1 absorption r&#xE9;duite du virus de la mosa&#xEF;que du pois enation (Luteoviridae) &#xE0; partir de l&#x26;#39;intestin puceron du pois dans la h&#xE9;moc&#xE8;le. GBP3.1 &#xE9;galement li&#xE9; &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;pith&#xE9;lium intestinal du puceron vert du p&#xEA;cher et le puceron du soya. Ces r&#xE9;sultats sugg&#xE8;rent une nouvelle strat&#xE9;gie pour la transmission de virus v&#xE9;g&#xE9;tal inhibant par au moins trois grandes esp&#xE8;ces de ravageurs pucerons.

Un peptide qui se lie le puceron du pois Gut entravent l&#x26;#39;entr&#xE9;e du virus de la mosa&#xEF;que Enation pois dans le puceron h&#xE9;moc&#xE8;le

Entwicklung von M&ouml;glichkeiten zur Viren&uuml;bertragung durch Blattl&auml;use blockieren k&ouml;nnte f&uuml;r neuartige und Breitspektrum Mittel zur Beherrschung von Pflanzenviren. Viren in der Luteoviridae verbessert werden obligat von Blattl&auml;usen dauerhaft &uuml;bertragen, die Virion Akkumulation in der Blattlaus Hemocoel erfordert. Um das Hemocoel einzugeben, muss das Virion binden und durchqueren das Blattlaus Darm Epithel. Durch ein Bakteriophagenbildschirmanzeigebibliothek screening, haben wir ein 12-R&uuml;ckstand Darm binden Peptid (GBP3.1), das an den Mitteldarm und Enddarm von der Erbse Blattlaus Acyrthosiphon Pisum bindet identifiziert. Bindung wurde durch das Beschriften von Blattl&auml;usen Darm mit einem GBP3.1-gr&uuml;n fluoreszierendes Protein Fusion best&auml;tigt. GBP3.1 Aufnahme von Pea Enation-Mosaik-Virus (Luteoviridae) von der Erbse Blattlaus Gut in das Hemocoel reduziert. GBP3.1 zwangsl&auml;ufig auch die Darm-Epithelien der gr&uuml;ne Pfirsich-Blattlaus und die Sojabohnen von Blattl&auml;usen. Diese Ergebnisse legen nahe, eine neuartige Strategie f&uuml;r die Hemmung der Pflanze Viren&uuml;bertragung durch mindestens drei gro&szlig;e Blattlaus-Pest-Arten.

Ein Peptid, das bindet Erbse Blattlaus Darm behindert Eintrag von Pea Enation-Mosaik-Virus in der Blattlaus Hemocoel.

Lo sviluppo di modi per bloccare la trasmissione del virus da afidi potrebbe portare a romanzo e mezzo ad ampio spettro per controllare virus vegetali. Virus in Luteoviridae enhanced Omofermentativi sono trasmessi da afidi in modo persistente che richiede accumulo virione nell&#39;emocele afide. Per immettere l&#39;emocele, il virione deve associare e attraversare l&#39;epitelio intestinale dell&#39;afide. Da una libreria dei fagi della visualizzazione di screening, abbiamo individuato un peptide di associazione gut 12-residuo (GBP3.1) che si lega all&#39;intestino e hindgut del pisello afide Acyrthosiphon pisum. Associazione &egrave; stata confermata da etichettare il budello di afidi con una fusione di proteina fluorescente verde-GBP3.1. GBP3.1 ridotto assorbimento del virus del mosaico del pisello enation (Luteoviridae) dall&#39;intestino afide pisello nell&#39;emocele. GBP3.1 associato anche per l&#39;epitelio gut di afide verde pesco e afide soia. Questi risultati suggeriscono una romanzo strategia per inibire la trasmissione del virus vegetali da almeno tre specie di parassiti afidi principali.

Un peptide che lega il budello di afide pisello impedisce l&#39;entrata del virus del mosaico del pisello enation nell&#39;emocele afide.

&#x30A2;&#x30D6;&#x30E9;&#x30E0;&#x30B7;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x9001;&#x4FE1;&#x3092;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3059;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306F;&#x3001;&#x690D;&#x7269;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x65B0;&#x898F;&#x306A;&#x5E83;&#x3044;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x306E;&#x624B;&#x6BB5;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002; Luteoviridae&#x5F37;&#x5316;&#x306E;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306F;&#x504F;&#x6027;&#x30A2;&#x30D6;&#x30E9;&#x30E0;&#x30B7;&#x8840;&#x4F53;&#x8154;&#x306B;&#x30D3;&#x30EA;&#x30AA;&#x30F3;&#x306E;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x6C38;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x3001;&#x30A2;&#x30D6;&#x30E9;&#x30E0;&#x30B7;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x9001;&#x4FE1;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8840;&#x4F53;&#x8154;&#x3092;&#x5165;&#x529B;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x30D3;&#x30EA;&#x30AA;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30D6;&#x30E9;&#x30E0;&#x30B7;&#x8178;&#x4E0A;&#x76AE;&#x3068;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x3001;&#x6A2A;&#x65AD;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30C7;&#x30A3;&#x30B9;&#x30D7;&#x30EC;&#x30A4;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA;&#x30FC;&#x3092;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30A6;&#x30D2;&#x30B2;&#x30CA;&#x30AC;&#x30A2;&#x30D6;&#x30E9;&#x30E0;&#x30B7;&#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30A6;&#x306E;&#x4E2D;&#x8178;&#x3068;&#x5F8C;&#x8178;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;12&#x6B8B;&#x57FA;&#x306E;&#x8178;&#x7D50;&#x5408;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#xFF08;GBP3.1&#xFF09;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;GBP3.1&#x7DD1;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x878D;&#x5408;&#x3068;&#x30A2;&#x30D6;&#x30E9;&#x30E0;&#x30B7;&#x8178;&#x3092;&#x6A19;&#x8B58;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x8840;&#x4F53;&#x8154;&#x306B;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30A6;&#x30D2;&#x30B2;&#x30CA;&#x30AC;&#x30A2;&#x30D6;&#x30E9;&#x30E0;&#x30B7;&#x306E;&#x8178;&#x304B;&#x3089;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30A6;&#x9686;&#x8D77;&#x751F;&#x9577;&#x30E2;&#x30B6;&#x30A4;&#x30AF;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;GBP3.1&#x7E2E;&#x5C0F;&#x53D6;&#x308A;&#x8FBC;&#x307F;&#xFF08;Luteoviridae&#xFF09;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x30E2;&#x30E2;&#x30A2;&#x30AB;&#x30A2;&#x30D6;&#x30E9;&#x30E0;&#x30B7;&#x3068;&#x30C0;&#x30A4;&#x30BA;&#x30A2;&#x30D6;&#x30E9;&#x30E0;&#x30B7;&#x306E;&#x8178;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;GBP3.1&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082;3&#x3064;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x30A2;&#x30D6;&#x30E9;&#x30E0;&#x30B7;&#x306E;&#x5BB3;&#x866B;&#x7A2E;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x690D;&#x7269;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x4F1D;&#x9001;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x6226;&#x7565;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30A6;&#x30D2;&#x30B2;&#x30CA;&#x30AC;&#x30A2;&#x30D6;&#x30E9;&#x30E0;&#x30B7;&#x306E;&#x30AC;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30D6;&#x30E9;&#x30E0;&#x30B7;&#x8840;&#x4F53;&#x8154;&#x306B;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30A6;&#x8C46;&#x306E;&#x9686;&#x8D77;&#x751F;&#x9577;&#x30E2;&#x30B6;&#x30A4;&#x30AF;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x4FB5;&#x5165;&#x3092;&#x59A8;&#x3052;&#x308B;

&#xC18C;&#xC124;&#xACFC; &#xC2DD;&#xBB3C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB294; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC; &#xC218;&#xB2E8; aphids&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC804;&#xC1A1;&#xC744; &#xCC28;&#xB2E8; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; Luteoviridae&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; obligately &#xC9C4;&#xB527;&#xBB3C; hemocoel&#xC5D0;&#xC11C; virion &#xCD95;&#xC801;&#xC744; &#xD544;&#xC694;&#xB85C; &#xD558;&#xB294; &#xC601;&#xAD6C; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC5D0;&#xC11C; aphids&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC804;&#xC1A1; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. Hemocoel&#xB97C; &#xC785;&#xB825; &#xD558;&#xB294; virion &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xD558; &#xACE0; &#xC9C4;&#xB527;&#xBB3C; &#xCC3D; &#xC790; &#xC0C1;&#xD53C;&#xB97C; &#xD1B5;&#xACFC; &#xD574;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC0B4; &#xADE0; &#xC18C; &#xC804;&#xC2DC; &#xB3C4;&#xC11C;&#xAD00; &#xC0C1;&#xC601;, &#xC6B0;&#xB9AC; midgut&#xC640; &#xC644;&#xB450;&#xCF69; &#xC9C4;&#xB527;&#xBB3C; Acyrthosiphon pisum hindgut&#xB294; 12-&#xCC0C; &#xAEBC; &#xAE30; &#xC6A9;&#xAE30; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xD3A9;&#xD0C0;&#xC774;&#xB4DC; (GBP3.1) &#xD30C;&#xC545;. &#xBC14;&#xC778;&#xB529; GBP3.1 &#xB179;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD4E8;&#xC804; &#xC9C4;&#xB527;&#xBB3C; &#xC6A9;&#xAE30; &#xB77C;&#xBCA8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. GBP3.1&#xB97C; hemocoel&#xC5D0; &#xC644;&#xB450;&#xCF69; &#xC9C4;&#xB527;&#xBB3C; &#xCC3D; &#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC644;&#xB450;&#xCF69; enation &#xBAA8;&#xC790;&#xC774;&#xD06C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (Luteoviridae)&#xC758; &#xAE00;&#xADC0;&#xB97C; &#xAC10;&#xC18C;. GBP3.1&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xB179;&#xC0C9; &#xBCF5;&#xC22D;&#xC544; &#xC9C4;&#xB527;&#xBB3C;&#xACFC; &#xCF69; &#xC9C4;&#xB527;&#xBB3C;&#xC758; &#xCC3D; &#xC790; &#xC0C1;&#xD53C;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC2DD;&#xBB3C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC804;&#xC1A1; &#xC801;&#xC5B4;&#xB3C4; &#xC138; &#xAC1C;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xC9C4;&#xB527;&#xBB3C; &#xD574;&#xCDA9; &#xC885;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC5B5;&#xC81C;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC804;&#xB7B5; &#xC81C;&#xC548;.

&#xC644;&#xB450;&#xCF69; &#xC9C4;&#xB527;&#xBB3C; &#xC6A9;&#xAE30;&#xB294; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; &#xC9C4;&#xB527;&#xBB3C; hemocoel&#xC5D0; &#xC644;&#xB450;&#xCF69; enation &#xBAA8;&#xC790;&#xC774;&#xD06C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; &#xD56D;&#xBAA9;&#xC744; &#xBC29;&#xD574; &#xD55C;&#xB2E4;.

El desarrollo de formas de bloquear la transmisi&#xF3;n del virus por los &#xE1;fidos podr&#xED;a conducir a nuevos medios y de amplio espectro de control de virus de plantas. Los virus en la mayor Luteoviridae est&#xE1;n obligados, transmitidos por &#xE1;fidos en forma persistente que requiere la acumulaci&#xF3;n de viriones en el hemocele de &#xE1;fidos. Para entrar en el hemocele, el viri&#xF3;n debe unirse y atravesar el epitelio intestinal de &#xE1;fidos. Mediante un cribado de una biblioteca de fagos, se identificaron un p&#xE9;ptido de 12 residuos de intestino vinculante (GBP3.1) que se une al medio y posterior de la pisum pulg&#xF3;n del guisante Acyrthosiphon. La uni&#xF3;n se confirm&#xF3; mediante el etiquetado de los intestinos de &#xE1;fidos con una prote&#xED;na de fusi&#xF3;n GBP3.1-verde fluorescente. GBP3.1 reducci&#xF3;n de la absorci&#xF3;n del virus del mosaico del guisante Enation (Luteoviridae) en el intestino pulg&#xF3;n del guisante en el hemocele. GBP3.1 tambi&#xE9;n vinculada al epitelio intestinal del pulg&#xF3;n verde del melocotonero y el pulg&#xF3;n de la soja. Estos resultados sugieren una nueva estrategia para inhibir la transmisi&#xF3;n del virus de la planta por al menos tres de las principales especies de &#xE1;fidos plagas.

Un p&#xE9;ptido que se une la Tripa pulg&#xF3;n del guisante impide la entrada del virus del mosaico del guisante Enation en el hemocele pulg&#xF3;n

&#x82DC;&#x84FF;&#x5C3A;&#x8816;&#x591A;&#x591A;&#x89D2;&#x4F53;&#x75C5;&#x6BD2; (AcMNPV) &#x95ED;&#x585E;&#x6E90;&#x6027;&#x75C5;&#x6BD2; &#xFF08;ODV&#xFF09; &#x4FE1;&#x5C01;&#x86CB;&#x767D; ODV E56 &#x53E3;&#x8154;&#x611F;&#x67D3;&#x7684;&#x5E7C;&#x866B;&#x7684;&#x9752;&#x83C7;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x3002;&#x751F;&#x7269;&#x91CD;&#x7EC4; AcMNPV &#x7F3A;&#x4E4F;&#x529F;&#x80FD;&#x6027; odv e56 &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x514B;&#x9686;&#x4E0E;&#x9274;&#x5B9A;&#x8868;&#x660E; ODV E56 &#x611F;&#x67D3;&#x529B;&#x7684;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x591A;&#x9762;&#x4F53;&#x548C;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x8F83;&#x8F7B;&#xFF0C;&#x7EAF;&#x51C0; ODV &#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x5177;&#x6709;&#x7EA6;&#x675F;&#x529B;&#x548C;&#x878D;&#x5408;&#x68C0;&#x6D4B;&#x8868;&#x660E;&#x7F3A;&#x4E4F; ODV E56 ODV &#x7ED1;&#x5B9A;&#x548C;&#x5404;&#x7EA7;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E; ODV &#x7684;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x75C5;&#x6BD2;&#x4E2D;&#x80A0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x878D;&#x5408;&#x3002;&#x8367;&#x5149;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x7684;&#x5E7C;&#x866B;&#x4ECE;&#x80A0;&#x63A5;&#x79CD; ODV E56 &#x9633;&#x6027;&#x548C;&#x8868;&#x8FBE;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x6D88;&#x6781;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6307;&#x51FA; ODV E56 &#x4E2D;&#x80A0;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x611F;&#x67D3;&#x6240;&#x9700;&#x3002;&#x7EAF;&#x51C0;&#x7684; ODV E56 &#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x51E0;&#x4E2A;&#x86CB;&#x767D;&#x4E2D;&#x80A0;&#x6E90;&#x6027;&#x7684;&#x5237;&#x72B6;&#x7F18;&#x819C;&#x56CA;&#xFF0C;&#x4F46;&#x672A;&#x80FD;&#x62EF;&#x6551;&#x8DE8; ODV &#x9634;&#x6027; E56 &#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x4F20;&#x67D3;&#x6027;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E; ODV E56 &#x662F;&#x6BCF; os &#x4F20;&#x67D3;&#x56E0;&#x5B50; (pif-5&#xFF09; &#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x4E3B;&#x80A0;&#x70B9;&#x4E4B;&#x524D;&#x6216;&#x540E;&#x611F;&#x67D3;&#x75C5;&#x6BD2;&#x4F53;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x548C;&#x878D;&#x5408;&#x3002;

&#x591A;&#x4E2A;&#x591A;&#x89D2;&#x4F53;&#x75C5;&#x6BD2; ODV E56 &#x662F;&#x82DC;&#x84FF;&#x5C3A;&#x8816;&#x6BCF; os &#x4F20;&#x67D3;&#x6027;&#x56E0;&#x7D20;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x4E3B;&#x673A;&#x4E2D;&#x80A0;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x548C;&#x878D;&#x5408;&#x7684;&#x95ED;&#x585E;&#x6E90;&#x6027;&#x75C5;&#x6BD2;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x3002;

The Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus (AcMNPV) occlusion-derived virus (ODV) envelope protein ODV-E56 is essential for oral infection of larvae of Heliothis virescens. Bioassays with recombinant clones of AcMNPV lacking a functional odv-e56 gene showed that ODV-E56 was required for infectivity of both polyhedra and to a lesser extent, purified ODV. However, binding and fusion assays showed that ODV lacking ODV-E56 bound and fused to midgut cells at levels similar to ODV of wild-type virus. Fluorescence microscopy of midguts from larvae inoculated with ODV-E56-positive and -negative viruses that express GFP indicated that ODV-E56 was required for infection of the midgut epithelium. Purified ODV-E56 bound to several proteins in midgut-derived brush border membrane vesicles, but failed to rescue infectivity of ODV-E56-negative viruses in trans. These results indicate that ODV-E56 is a per os infectivity factor (pif-5) required for primary midgut infection at a point before or after virion binding and fusion.

Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus ODV-E56 is a per os infectivity factor, but is not essential for binding and fusion of occlusion-derived virus to the host midgut.

Le nucl&#xE9;opoly&#xE9;drovirus californica Autographa multiple (AcMNPV) occlusion d&#xE9;riv&#xE9; prot&#xE9;ine d&#x26;#39;enveloppe du virus (ODV) ODV-E56 est indispensable pour l&#x26;#39;infection orale des larves de Heliothis virescens. Les tests biologiques par des clones recombinants d&#xE9;pourvus de AcMNPV fonctionnelle ODV-e56 g&#xE8;ne a montr&#xE9; que l&#x26;#39;ODV-E56 a &#xE9;t&#xE9; n&#xE9;cessaire pour l&#x26;#39;infectivit&#xE9; des deux poly&#xE8;dres et dans une moindre mesure, purifi&#xE9; ODV. Cependant, des essais de liaison et de fusion ont montr&#xE9; que l&#x26;#39;ODV manque ODV-E56 li&#xE9; et fusionn&#xE9;e &#xE0; l&#x26;#39;intestin moyen des cellules &#xE0; des niveaux similaires &#xE0; ODV des virus de type sauvage. La microscopie &#xE0; fluorescence de estomacs de larves inocul&#xE9;es avec les virus ODV-E56-positives et n&#xE9;gatives qui expriment la GFP ont indiqu&#xE9; que l&#x26;#39;ODV-E56 a &#xE9;t&#xE9; n&#xE9;cessaire &#xE0; l&#x26;#39;infection de l&#x26;#39;&#xE9;pith&#xE9;lium de l&#x26;#39;intestin. Purifi&#xE9;e ODV-E56 li&#xE9; &#xE0; plusieurs prot&#xE9;ines dans les v&#xE9;sicules de pinceau intestin d&#xE9;riv&#xE9;s membrane de bordure, mais n&#x26;#39;a pas r&#xE9;ussi &#xE0; sauver l&#x26;#39;infectiosit&#xE9; des ODV-E56-n&#xE9;gatifs virus en trans. Ces r&#xE9;sultats indiquent que l&#x26;#39;ODV-E56 est un facteur d&#x26;#39;infectiosit&#xE9; par voie orale (pif-5) n&#xE9;cessaire &#xE0; l&#x26;#39;infection primaire intestin moyen &#xE0; un point avant ou apr&#xE8;s virion contraignant et la fusion.

Autographa californica Nucl&#xE9;opoly&#xE9;drovirus multiples ODV-E56 est un facteur de l&#x26;#39;infectiosit&#xE9; par voie orale, mais n&#x26;#39;est pas essentiel pour la liaison et la fusion de l&#x26;#39;occlusion d&#xE9;riv&#xE9; du virus de l&#x26;#39;intestin moyen d&#x26;#39;h&#xF4;te

Die Autographa Californica unbedingt mehrere Nucleopolyhedrovirus (AcMNPV) Okklusion abgeleitete Virus (Unbeh&uuml;llte) Umschlag Protein Unbeh&uuml;llte-E56 orale Infektion der Larven von Heliothis Virescens. Bioassays mit rekombinanter Klone von AcMNPV fehlt ein funktionaler unbeh&uuml;llte-e56-gen zeigte, dass Unbeh&uuml;llte-E56 f&uuml;r Infektiosit&auml;t beide Polyeder und in geringerem Ma&szlig;e, gereinigte Unbeh&uuml;llte erforderlich. Verbindlich und Fusion Assays zeigte allerdings, dass Unbeh&uuml;llte fehlt Unbeh&uuml;llte-E56 gebunden und Mitteldarm Zellen auf Ebenen Unbeh&uuml;llte Wildtyp-Virus &auml;hnlich verschmolzen. Fluoreszenzmikroskopie der Midguts von Larven mit Unbeh&uuml;llte-E56-positivem beimpft und - negative Viren, die GFP exprimieren zeigten, dass Unbeh&uuml;llte-E56 f&uuml;r Infektion der das Epithel des Mitteldarms erforderlich. Gereinigte Unbeh&uuml;llte-E56 an mehreren Proteinen im Mitteldarm abgeleitete Pinsel Grenze Membran Vesikel gebunden, aber vers&auml;umt, Infektiosit&auml;t Unbeh&uuml;llte-E56-negativ-Viren im Trans zu retten. Diese Ergebnisse zeigen, dass Unbeh&uuml;llte-E56 ist ein pro os Infektiosit&auml;t Faktor (Pif-5) f&uuml;r die prim&auml;re Mitteldarm-Infektion zu einem Zeitpunkt vor oder nach dem Virion Bindung und Fusion.

Autographa Californica mehrere Nucleopolyhedrovirus Unbeh&uuml;llte-E56 ist ein pro os Infektiosit&auml;t Faktor, ist aber nicht notwendig f&uuml;r Bindung und Fusion der Okklusion abgeleitete Virus auf die Host-Mitteldarm.

La Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus (AcMNPV) derivato da occlusione virus (ODV) busta proteina ODV-E56 &egrave; essenziale per l&#39;infezione orale di larve di Heliothis virescens. Analisi biologiche con cloni ricombinanti di AcMNPV manca un gene funzionale odv-e56 ha mostrato che ODV-E56 &egrave; stato richiesto di infettivit&agrave; di entrambi poliedri e in misura minore, ODV purificato. Tuttavia, vincolante e fusion dosaggi hanno mostrato che ODV manca ODV-E56 associato e fuso a cellule intestino a livelli simili a ODV del virus wild-type. Microscopia di fluorescenza di intestino medio da larve inoculate con ODV-E56-positivo e - virus negativo che esprimono GFP indicato che ODV-E56 era necessaria per l&#39;infezione dell&#39;epitelio intestino. ODV-E56 purificato legato a diverse proteine in vescicole di membrana confine pennello derivato da intestino, ma non &egrave; riuscito a salvare l&#39;infettivit&agrave; dei virus ODV-E56-negativo in trans. Questi risultati indicano che l&#39;ODV-E56 &egrave; al fattore di infettivit&agrave; di os (pif-5) necessaria per l&#39;infezione di intestino primario in un punto prima o dopo il legame del virione e fusione.

Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus ODV-E56 &egrave; al fattore di infettivit&agrave; del sistema operativo, ma non &egrave; essenziale per l&#39;associazione e la fusione del virus derivato da occlusione dell&#39;intestino dell&#39;ospite.

&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A1;&#xB7;&#x30AB;&#x30EA;&#x30D5;&#x30A9;&#x30EB;&#x30CB;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x6838;&#x591A;&#x89D2;&#x4F53;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#xFF08;AcMNPV&#xFF09;&#x9589;&#x585E;&#x7531;&#x6765;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#xFF08;ODV&#xFF09;&#x30A8;&#x30F3;&#x30D9;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D7;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;ODV-E56 Heliothis virescens&#x306E;&#x5E7C;&#x866B;&#x306E;&#x7D4C;&#x53E3;&#x611F;&#x67D3;&#x306B;&#x5FC5;&#x9808;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306A;ODV-E56&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x6B20;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x308B;AcMNPV&#x306E;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3067;&#x306F;&#x3001;ODV-E56&#x306F;&#x3001;ODV&#x3092;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3057;&#x3001;&#x591A;&#x9762;&#x4F53;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x3088;&#x308A;&#x5C11;&#x306A;&#x3044;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x306B;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x611F;&#x67D3;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x3001;&#x7D50;&#x5408;&#x3068;&#x878D;&#x5408;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306F;&#x3001;ODV&#x306F;ODV-E56&#x306F;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;ODV&#x306B;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x4E2D;&#x8178;&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x878D;&#x5408;&#x3057;&#x305F;&#x6B20;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x305F;&#x3002; GFP&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x304C;&#x3001;ODV-E56&#x306F;&#x3001;&#x4E2D;&#x8178;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x611F;&#x67D3;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;ODV-E56&#x967D;&#x6027;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x9670;&#x6027;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3092;&#x63A5;&#x7A2E;&#x3057;&#x305F;&#x5E7C;&#x866B;&#x4E2D;&#x8178;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3002;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3055;&#x308C;&#x305F;ODV-E56&#x8178;&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x5237;&#x5B50;&#x7E01;&#x819C;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;ODV-E56&#x9670;&#x6027;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x611F;&#x67D3;&#x3092;&#x6551;&#x3046;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5931;&#x6557;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;ODV-E56&#x306F;&#x3001;&#x30D3;&#x30EA;&#x30AA;&#x30F3;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x3068;&#x878D;&#x5408;&#x306E;&#x524D;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5F8C;&#x306E;&#x6642;&#x70B9;&#x3067;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x8178;&#x611F;&#x67D3;&#x75C7;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;OS&#x3054;&#x3068;&#x306E;&#x611F;&#x67D3;&#x6027;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF08;PIF-5&#xFF09;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A1;&#xB7;&#x30AB;&#x30EA;&#x30D5;&#x30A9;&#x30EB;&#x30CB;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x6838;&#x591A;&#x6838;ODV-E56&#x306F;&#x3001;&#x30D1;&#x30FC;Os&#x306E;&#x611F;&#x67D3;&#x6027;&#x56E0;&#x5B50;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x4E2D;&#x8178;&#x306B;&#x9589;&#x585E;&#x306B;&#x7531;&#x6765;&#x3059;&#x308B;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x3068;&#x878D;&#x5408;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x9808;&#x3067;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;

Autographa californica nucleopolyhedrovirus (AcMNPV)&#xC5D0; &#xAC8C; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xD3D0;&#xC0C9; &#xD30C;&#xC0DD; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (ODV) &#xBD09;&#xD22C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; ODV E56 Heliothis virescens&#xC758; &#xC560;&#xBC8C;&#xB808;&#xC758; &#xAD6C;&#xAC15; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. AcMNPV &#xBD80;&#xC871; &#xD55C; &#xAE30;&#xB2A5; odv e56 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; &#xD074;&#xB860;&#xC640; bioassays ODV E56 infectivity &#xB450; &#xB2E4;&#xBA74;&#xCCB4;&#xC758; &#xACE0; &#xC815;&#xD654; ODV &#xB0AE;&#xC740; &#xBC94;&#xC704;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694; &#xD588;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xBC0F; &#xC735;&#xD569; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; ODV ODV E56 &#xBD80;&#xC871; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB418;&#xBA70; midgut &#xC140; ODV&#xC758; &#xC57C;&#xC0DD; &#xD615; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC640; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC735;&#xD569;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC560;&#xBC8C;&#xB808;&#xC5D0;&#xC11C; midguts&#xC758; &#xD615;&#xAD11; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; ODV E56 &#xC591;&#xC131;&#xC73C;&#xB85C; &#xC8FC;&#xC0AC; &#xD558; &#xACE0;-GFP &#xC775;&#xC2A4;&#xD504;&#xB808;&#xC2A4; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xD45C;&#xC2DC; ODV E56 midgut &#xC0C1;&#xD53C;&#xC758; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC815;&#xD654; ODV E56 midgut &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xBE0C;&#xB7EC;&#xC2DC; &#xD14C;&#xB450;&#xB9AC; &#xB9C9; &#xC18C;&#xD3EC;, &#xC5EC;&#xB7EC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; infectivity ODV E56 &#xC74C;&#xC218;&#xAC00; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xD2B8;&#xB79C;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xAD6C;&#xCD9C;&#xC744; &#xD558;&#xC9C0; &#xBABB;&#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xACB0;&#xACFC; ODV E56 &#xC784;&#xC744; &#xD45C;&#xC2DC;&#xB294; &#xAE30;&#xBCF8; midgut &#xAC10;&#xC5FC; &#xC2DC;&#xC810; &#xC774;&#xC804; &#xB610;&#xB294; virion &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xBC0F; &#xD4E8;&#xC804; &#xD6C4;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; os infectivity &#xC694;&#xC18C; (pif-5) &#xB2F9;.

Autographa californica &#xC5EC;&#xB7EC; nucleopolyhedrovirus ODV E56 &#xC774;&#xB2E4;&#xB294; os infectivity &#xC694;&#xC18C; &#xB2F9; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC911;&#xC694; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD3D0;&#xC0C9; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xC758; &#xC735;&#xD569;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; midgut &#xD558;.

El nucleopoliedrovirus Autographa californica m&#xFA;ltiple (AcMNPV) oclusi&#xF3;n de un virus derivado de (ODV) prote&#xED;na de la envoltura ODV-E56 es esencial para la infecci&#xF3;n oral de larvas de Heliothis virescens. Los bioensayos con los clones recombinantes de AcMNPV que carecen de una funcional ODV-E56 gen mostraron que ODV-E56 se requiere para la infectividad de ambos poliedros y en menor medida, purificado ODV. Sin embargo, los ensayos de uni&#xF3;n y de fusi&#xF3;n mostr&#xF3; que carece de ODV ODV-E56 atado y fusionado a las c&#xE9;lulas del intestino medio en niveles similares a ODV del virus de tipo salvaje. La microscopia de fluorescencia de intestino medio de larvas inoculadas con el virus de ODV-E56-positivos y negativos-que expresan las buenas pr&#xE1;cticas agrarias indicaron que ODV-E56 fue necesario para la infecci&#xF3;n del epitelio del intestino medio. Purificada unida a las prote&#xED;nas en el intestino medio de varios derivados de ves&#xED;culas de membrana del borde en cepillo, pero ODV-E56 fallido de rescatar a la infectividad de ODV-E56-negativos virus en trans. Estos resultados indican que ODV-E56 es un factor de por OS infectividad (PIF-5) necesaria para la infecci&#xF3;n del intestino medio primario en un punto antes o despu&#xE9;s de viri&#xF3;n de uni&#xF3;n y fusi&#xF3;n.

Autographa californica m&#xFA;ltiple Nucleopolyhedrovirus ODV-E56 es un factor por S infectividad, pero no es esencial para la uni&#xF3;n y fusi&#xF3;n de la oclusi&#xF3;n de un virus derivado del intestino medio de host

&#x6746;&#x72B6;&#x75C5;&#x6BD2;&#x611F;&#x67D3;&#x901A;&#x8FC7;&#x95ED;&#x585E;&#x6E90;&#x6027;&#x75C5;&#x6BD2; &#xFF08;ODV&#xFF09; &#x548C;&#x878D;&#x5408;&#x5728;&#x75C5;&#x6BD2;&#x4FE1;&#x5C01;&#x548C; microvillar &#x819C;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5176;&#x9CDE;&#x7FC5;&#x76EE;&#x4E3B;&#x673A;&#x901A;&#x8FC7;&#x80A0;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x8981;&#x786E;&#x5B9A;&#x57FA;&#x56E0;&#x548C;&#x53C2;&#x4E0E;&#x8FD9;&#x4E00;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x7684;&#x5E8F;&#x5217;&#xFF0C;&#x968F;&#x673A;&#x566C;&#x83CC;&#x4F53;&#x5C55;&#x793A;&#x5E93;&#x88AB;&#x7B5B;&#x67E5;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5237;&#x72B6;&#x7F18;&#x819C;&#x56CA; &#xFF08;BBMV&#xFF09; &#x6765;&#x81EA;&#x9752;&#x83C7;&#x4E2D;&#x80A0;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7684;&#x80BD;&#x3002;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; BBMV &#x7684;&#x5341;&#x4E03;&#x80BD;&#x88AB;&#x5BFB;&#x56DE;&#x3002;&#x5176;&#x4E2D;&#x4E24;&#x4E2A;&#xFF0C;HV1 &#x548C; HV2&#xFF0C;&#x4E86;&#x5E8F;&#x5217;&#x76F8;&#x4F3C;&#x6027; ODV &#x4FE1;&#x5C01;&#x86CB;&#x767D; ODV E66 &#x7684; alphabaculoviruses &#x4E94;&#x4E2A;&#x7269;&#x79CD;&#x4E2D;&#x53D1;&#x73B0;&#x7684;&#x3002;&#x6765;&#x81EA;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x5E8F;&#x5217;&#x7684;&#x82DC;&#x84FF;&#x5C3A;&#x8816;&#x591A;&#x591A;&#x89D2;&#x4F53;&#x75C5;&#x6BD2; (AcMNPV) &#x7684;&#x5316;&#x5B66;&#x5408;&#x6210;&#x7684;&#x7248;&#x672C;&#x7684; HV1 &#x548C; HV2 &#x548C;&#x4E24;&#x4E2A;&#x80BD; &#xFF08;AcE66A &#x548C; AcE66B&#xFF09; ODV E66&#xFF0C;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x975E;&#x56FA;&#x5B9A; cryosections &#x7684;&#x6574;&#x80A0;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x3002;AcE66A&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F; HV1 &#x4E0A;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; H.&#x83C7;&#x80A0; BBMV &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x8FDC;&#x897F;&#x90E8;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6C61;&#x70B9;&#x3002;&#x7ADE;&#x4E89;&#x68C0;&#x6D4B;&#x4E0E; HV1&#xFF0C;&#x7EAF;&#x51C0;&#x7684; AcMNPV ODV &#x5BFC;&#x81F4;&#x51CF;&#x5C11;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7387;&#x7684; H.&#x83C7;&#x5E7C;&#x866B;&#x5728;&#x5242;&#x91CF; 1 LD(50) &#x548C;&#x5728;&#x8F83;&#x9AD8;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6D53;&#x5EA6;&#x7684;&#x5B58;&#x6D3B;&#x65F6;&#x95F4;&#x663E;&#x8457;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x4F5C;&#x7528;&#x4E3A; ODV E66 &#x9CDE;&#x7FC5;&#x76EE;&#x5E7C;&#x866B;&#x4E2D;&#x80A0;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6746;&#x72B6;&#x75C5;&#x6BD2;&#x611F;&#x67D3;&#x3002;

&#x80BD;&#x7684;&#x6746;&#x72B6;&#x75C5;&#x6BD2; ODV E66 &#x76F8;&#x4F3C;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x9752;&#x83C7;&#x7684;&#x80A0;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5E76;&#x963B;&#x788D;&#x591A;&#x591A;&#x89D2;&#x4F53;&#x75C5;&#x6BD2;&#x7684;&#x611F;&#x67D3;&#x4E0E;&#x82DC;&#x84FF;&#x5C3A;&#x8816;&#x3002;

Baculoviruses infect their lepidopteran hosts via the midgut epithelium through binding of occlusion-derived virus (ODV) and fusion between the virus envelope and microvillar membranes. To identify genes and sequences that are involved in this process, a random phage display library was screened for peptides that bound to brush border membrane vesicles (BBMV) derived from the midgut epithelium of Heliothis virescens. Seventeen peptides that bound to BBMV were recovered. Two of these, HV1 and HV2, had sequence similarity to the ODV envelope protein ODV-E66 that is found in five species of alphabaculoviruses. Chemically synthesized versions of HV1 and HV2, and two peptides (AcE66A and AcE66B) derived from similar sequences of Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus (AcMNPV) ODV-E66, bound to unfixed cryosections of whole midgut tissues. AcE66A, but not HV1, bound to H. virescens gut BBMV proteins on a far-Western blot. Competition assays with HV1 and purified AcMNPV ODV resulted in decreased mortality of H. virescens larvae at a dose of 1 LD(50), and a significant increase in survival time at higher virus concentrations. These results suggest a role for ODV-E66 in baculovirus infection of lepidopteran larval midgut epithelium.

A peptide with similarity to baculovirus ODV-E66 binds the gut epithelium of Heliothis virescens and impedes infection with Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus.

Baculovirus infectent leurs h&#xF4;tes l&#xE9;pidopt&#xE8;res via le &#xE9;pith&#xE9;lium de l&#x26;#39;intestin gr&#xE2;ce &#xE0; la consolidation de l&#x26;#39;occlusion virus d&#x26;#39;origine (ODV) et de la fusion entre l&#x26;#39;enveloppe du virus et des membranes microvillosit&#xE9;s. Pour identifier les g&#xE8;nes et les s&#xE9;quences qui sont impliqu&#xE9;es dans ce processus, une biblioth&#xE8;que de phages al&#xE9;atoire d&#x26;#39;affichage a &#xE9;t&#xE9; projet&#xE9; pour des peptides qui lient de se brosser les v&#xE9;sicules membranaires fronti&#xE8;res (BBMV) provenant de l&#x26;#39;&#xE9;pith&#xE9;lium de l&#x26;#39;intestin de Heliothis virescens. Dix-sept peptides qui li&#xE9;s &#xE0; BBMV ont &#xE9;t&#xE9; r&#xE9;cup&#xE9;r&#xE9;s. Deux d&#x26;#39;entre eux, HV1 et HV2, avait une similarit&#xE9; de s&#xE9;quence de la prot&#xE9;ine d&#x26;#39;enveloppe ODV ODV-E66 qui se trouve dans cinq esp&#xE8;ces de alphabaculoviruses. Versions synth&#xE9;tis&#xE9;es par voie chimique de HV1 et HV2, et deux peptides (AcE66A et AcE66B) d&#xE9;riv&#xE9;s de s&#xE9;quences similaires de Autographa californica nucl&#xE9;opoly&#xE9;drovirus multiple (AcMNPV) ODV-E66, li&#xE9; &#xE0; cryosections non fix&#xE9;es de l&#x26;#39;intestin moyen des tissus entiers. AcE66A, mais pas HV1, li&#xE9; &#xE0; H. virescens prot&#xE9;ines intestinales BBMV sur un blot loin-Ouest. Essais de comp&#xE9;tition avec HV1 et purifi&#xE9; AcMNPV ODV a entra&#xEE;n&#xE9; la mortalit&#xE9; a diminu&#xE9; de H. virescens larves &#xE0; une dose de 1 LD (50), et une augmentation significative du temps de survie &#xE0; des concentrations plus &#xE9;lev&#xE9;es de virus. Ces r&#xE9;sultats sugg&#xE8;rent un r&#xF4;le pour l&#x26;#39;ODV-E66 dans l&#x26;#39;infection des larves de l&#xE9;pidopt&#xE8;res de baculovirus intestin &#xE9;pith&#xE9;lium.

Un peptide pr&#xE9;sentant une similitude avec Baculovirus ODV-E66 Li&#xE9; l&#x26;#39;&#xE9;pith&#xE9;lium intestinal de Heliothis virescens et emp&#xEA;che l&#x26;#39;infection avec Autographa californica Nucl&#xE9;opoly&#xE9;drovirus multiples

Baculoviruses infizieren ihre Lepidopteren Hosts &uuml;ber das Epithel des Mitteldarms durch Bindung von Okklusion abgeleitete Virus (Unbeh&uuml;llte) und Fusion zwischen den Virus Umschlag und microvillar Membranen. Ermittlung von Genen und Sequenzen, die an diesem Prozess beteiligt sind, wurde eine zuf&auml;llige Bakteriophagenbildschirmanzeigebibliothek f&uuml;r Peptide gezeigt, die Grenze Membran Vesikel (BBMV) abgeleitet aus dem Mitteldarm Epithel von Heliothis Virescens B&uuml;rste gebunden. Siebzehn Peptide, die an BBMV gebunden wurden wiederhergestellt. Zwei davon HV1 und HV2, hatten die Sequenz &Auml;hnlichkeit zum Unbeh&uuml;llte Umschlag Protein Unbeh&uuml;llte-E66, die f&uuml;nf Arten des Alphabaculoviruses gefunden wird. Chemisch synthetisierte Versionen von HV1 und HV2 und zwei Peptide (AcE66A und AcE66B), die von &auml;hnlichen Sequenzen von Autographa Californica mehrere Nucleopolyhedrovirus (AcMNPV) abgeleitete Unbeh&uuml;llte-E66, an ungebundenen Cryosections ganze Mitteldarm Gewebe gebunden. AcE66A, aber nicht HV1, verpflichtet, H. Virescens Darm BBMV Proteine auf einer weit-Western-Blot. Wettbewerb-Proben mit HV1 und gereinigten AcMNPV ODV verursachte verminderte Mortalit&auml;t von H. Virescens Larven in einer Dosierung von 1 LD(50) und eine deutliche Zunahme der &Uuml;berlebenszeit bei h&ouml;heren Konzentrationen der Virus. Diese Ergebnisse weisen auf eine Rolle f&uuml;r Unbeh&uuml;llte-E66 Baculovirus-Infektion der Lepidopteren larvalen Mitteldarm Epithel.

Ein Peptid mit &Auml;hnlichkeit mit Baculovirus Unbeh&uuml;llte-E66 bindet das Darm Epithel von Heliothis Virescens und behindert die Infektion mit Autographa Californica mehrere Nucleopolyhedrovirus.

Baculoviruses infettare loro lepidotteri host tramite l&#39;epitelio dell&#39;intestino tramite l&#39;associazione di virus derivato da occlusione (ODV) e fusione tra le membrane microvillare e busta del virus. Per identificare i geni e le sequenze che sono coinvolti in questo processo, una libreria di visualizzazione casuale dei fagi &egrave; stata proiettata per peptidi che associato a vescicole di membrana confine (BBMV) derivate dall&#39;epitelio intestino di Heliothis virescens di pennello. Diciassette peptidi associati a BBMV sono stati recuperati. Due di questi, HV1 e HV2, aveva somiglianza di sequenza con la proteina busta ODV ODV-E66 che &egrave; trovato in cinque specie di alphabaculoviruses. Chimicamente sintetizzate versioni HV1 e HV2 e due peptidi (AcE66A e AcE66B) derivano da sequenze simili di Autographa californica nucleopolyhedrovirus multipli (AcMNPV) ODV-E66, associato a unfixed cryosections dei tessuti intero intestino. AcE66A, ma non HV1, associata a H. virescens gut BBMV proteine su un lontano-Western blot. Concorso dosaggi con HV1 e purificato AcMNPV ODV ha provocato una riduzione mortalit&agrave; delle larve di H. virescens alla dose di 1 LD(50) e un aumento significativo del tempo di sopravvivenza a concentrazioni pi&ugrave; elevate di virus. Questi risultati suggeriscono un ruolo per ODV-E66 in baculovirus infezione dell&#39;epitelio intestino larvale lepidotteri.

Un peptide con somiglianza di baculovirus ODV-E66 associa l&#39;epitelio intestinale di Heliothis virescens e impedisce l&#39;infezione con Autographa californica nucleopolyhedrovirus multiple.

&#x30D0;&#x30AD;&#x30E5;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30A8;&#x30F3;&#x30D9;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D7;&#x3068;&#x5FAE;&#x7D68;&#x6BDB;&#x819C;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x9589;&#x585E;&#x7531;&#x6765;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#xFF08;ODV&#xFF09;&#x3068;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x4E2D;&#x8178;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x9C57;&#x7FC5;&#x76EE;&#x306E;&#x30DB;&#x30B9;&#x30C8;&#x306B;&#x611F;&#x67D3;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3068;&#x914D;&#x5217;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C0;&#x30E0;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30C7;&#x30A3;&#x30B9;&#x30D7;&#x30EC;&#x30A4;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;Heliothis&#x306E;virescens&#x4E2D;&#x8178;&#x4E0A;&#x76AE;&#x304B;&#x3089;&#x6D3E;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x7E01;&#x819C;&#x5C0F;&#x80DE;&#xFF08;BBMV&#xFF09;&#x3092;&#x30D6;&#x30E9;&#x30B7;&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x3092;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3057;&#x305F;&#x3002; BBMV&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30BB;&#x30D6;&#x30F3;&#x30C6;&#x30A3;&#x30FC;&#x30F3;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x3092;&#x56DE;&#x53CE;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x4E8C;&#x3064;&#x3001;HV1&#x3068;HV2&#x306F;&#x3001;alphabaculoviruses&#x306E;5&#x7A2E;&#x3067;&#x767A;&#x898B;&#x3055;&#x308C;ODV&#x30A8;&#x30F3;&#x30D9;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D7;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;ODV-E66&#x306B;&#x914D;&#x5217;&#x985E;&#x4F3C;&#x6027;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x306B;&#x5408;&#x6210;&#x3055;HV1&#x3068;HV2&#x306E;&#x30D0;&#x30FC;&#x30B8;&#x30E7;&#x30F3;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x4E2D;&#x8178;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x4E0D;&#x5B9A;&#x51CD;&#x7D50;&#x5207;&#x7247;&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A1;&#xB7;&#x30AB;&#x30EA;&#x30D5;&#x30A9;&#x30EB;&#x30CB;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x6838;&#x591A;&#x89D2;&#x4F53;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#xFF08;AcMNPV&#xFF09;ODV-E66&#x306E;&#x985E;&#x4F3C;&#x3057;&#x305F;&#x914D;&#x5217;&#x306B;&#x7531;&#x6765;&#x3059;&#x308B;2&#x3064;&#x306E;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#xFF08;AcE66A&#x3068;AcE66B&#xFF09;&#x3002;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30A6;&#x30A7;&#x30B9;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C8;&#x4E0A;&#x3067;H. virescens&#x306E;&#x8178;BBMV&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x305F;AcE66A&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;HV1&#x3001;&#x3002; HV1&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7CBE;&#x88FD;AcMNPV ODV&#x3068;&#x306E;&#x7AF6;&#x5408;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x306F;&#x3001;1 LD&#xFF08;50&#xFF09;&#x3001;&#x3088;&#x308A;&#x9AD8;&#x3044;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3067;&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x671F;&#x9593;&#x306E;&#x6709;&#x610F;&#x306A;&#x5897;&#x52A0;&#x306E;&#x7528;&#x91CF;&#x3067;H. virescens&#x306E;&#x5E7C;&#x866B;&#x306E;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x7387;&#x306E;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x9C57;&#x7FC5;&#x76EE;&#x5E7C;&#x866B;&#x306E;&#x4E2D;&#x8178;&#x4E0A;&#x76AE;&#x306E;&#x30D0;&#x30AD;&#x30E5;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x611F;&#x67D3;&#x306E;ODV-E66&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x30D0;&#x30AD;&#x30E5;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3068;&#x306E;&#x985E;&#x4F3C;&#x6027;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x306F;&#x3001;ODV-E66&#x306F;&#x3001;Heliothis&#x306E;Virescens&#x306E;&#x8178;&#x4E0A;&#x76AE;&#x3092;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A1;&#xB7;&#x30AB;&#x30EA;&#x30D5;&#x30A9;&#x30EB;&#x30CB;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x6838;&#x591A;&#x89D2;&#x4F53;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x611F;&#x67D3;&#x3092;&#x59A8;&#x3052;&#x308B;

Baculoviruses &#xD3D0;&#xC0C9; &#xD30C;&#xC0DD; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; (ODV) &#xBC0F; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xBD09;&#xD22C; &#xBC0F; microvillar &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC735;&#xD569; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; midgut &#xC0C1;&#xD53C;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; lepidopteran &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB97C; &#xAC10;&#xC5FC;. &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC640;&#xC774; &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0; &#xCC38;&#xC5EC; &#xD558;&#xB294; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xB294; &#xC784;&#xC758;&#xC758; &#xC0B4; &#xADE0; &#xC18C; &#xC804;&#xC2DC; &#xB3C4;&#xC11C;&#xAD00; &#xD14C;&#xB450;&#xB9AC; &#xB9C9; &#xC18C;&#xD3EC; (BBMV) Heliothis virescens&#xC758; midgut &#xC0C1;&#xD53C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xBE0C;&#xB7EC;&#xC2DC;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C1;&#xC601; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. 17 &#xAC1C;&#xC758; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; BBMV&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C; &#xD68C;&#xC218; &#xD588;&#xB2E4;. HV1 &#xBC0F; HV2, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB450; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; ODV &#xBD09;&#xD22C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; ODV E66 alphabaculoviruses 5 &#xC885;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xB294; &#xC720;&#xC0AC;&#xB97C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xB7EC; nucleopolyhedrovirus (AcMNPV) Autographa californica&#xC758; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; HV1 HV2, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; (AcE66A &#xBC0F; AcE66B)&#xC758; &#xD654;&#xD559;&#xC801; &#xD569;&#xC131;&#xB41C; &#xBC84;&#xC804; ODV E66, &#xC804;&#xCCB4; midgut &#xC870;&#xC9C1;&#xC758; &#xACE0;&#xC815; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; cryosections&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C;. AcE66A, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD558;&#xC9C0; HV1 H. virescens &#xC6A9;&#xAE30; BBMV &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C; &#xBA40;&#xB9AC; &#xC11C;&#xCABD; &#xC624; &#xC810;. Hv1&#xC640; &#xACBD;&#xC7C1; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xD558; &#xACE0; &#xC21C;&#xD654; AcMNPV ODV &#xAC10;&#xC18C; &#xC0AC;&#xB9DD;&#xB960; 1 LD(50) &#xBC0F; &#xB354; &#xB192;&#xC740; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0DD;&#xC874; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC774; &#xD06C;&#xAC8C; &#xC99D;&#xAC00; &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9;&#xC5D0; H. virescens &#xC560;&#xBC8C;&#xB808;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC;. &#xC774; &#xACB0;&#xACFC; ODV E66 lepidopteran &#xC560;&#xBC8C;&#xB808; midgut &#xC0C1;&#xD53C;&#xC758; &#xC7A0;&#xC7AC; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC81C;&#xC548;.

&#xC7A0;&#xC7AC; ODV E66 &#xC720;&#xC0AC;&#xC131;&#xACFC; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; Heliothis virescens&#xC758; &#xCC3D; &#xC790; &#xC0C1;&#xD53C;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558;&#xACE0; &#xC5EC;&#xB7EC; nucleopolyhedrovirus Autographa californica &#xAC10;&#xC5FC;&#xC744; &#xBC29;&#xD574; &#xD55C;&#xB2E4;.

Los baculovirus infectar a sus anfitriones de lepid&#xF3;pteros a trav&#xE9;s del epitelio del intestino medio a trav&#xE9;s de la uni&#xF3;n de un virus derivado de la oclusi&#xF3;n (ODV) y la fusi&#xF3;n entre la envoltura del virus y las membranas microvillar. Para identificar los genes y las secuencias que est&#xE1;n involucrados en este proceso, una biblioteca de fagos aleatoria se proyect&#xF3; para p&#xE9;ptidos que unidas a cepillar las ves&#xED;culas de membrana de frontera (BBMV) derivados del epitelio del intestino medio de Heliothis virescens. Diecisiete p&#xE9;ptidos que unidas a BBMV fueron recuperados. Dos de ellos, HV1 y HV2, ten&#xED;a secuencia similar a la prote&#xED;na de la envoltura ODV ODV-E66 que se encuentra en cinco especies de alphabaculoviruses. Versiones de s&#xED;ntesis qu&#xED;mica de HV1 y HV2 y dos p&#xE9;ptidos (AcE66A y AcE66B) derivados de las secuencias similares de Autographa californica nucleopoliedrovirus m&#xFA;ltiple (AcMNPV) ODV-E66, con destino a la cryosections o ejecuciones de los tejidos del intestino medio enteros. AcE66A, no HV1, pero, unido a las prote&#xED;nas de H. virescens intestinal BBMV sobre una mancha de gran occidental. Ensayos de competici&#xF3;n con HV1 y purificado AcMNPV ODV redujo la mortalidad de las larvas de H. virescens a una dosis de 1 LD (50), y un aumento significativo en el tiempo de supervivencia a concentraciones m&#xE1;s altas de virus. Estos resultados sugieren un papel de ODV-E66 en la infecci&#xF3;n por baculovirus del lepid&#xF3;ptero larvas epitelio del intestino medio.

Un p&#xE9;ptido con similitud con baculovirus ODV-E66 liga el epitelio intestinal de Heliothis virescens e impide la infecci&#xF3;n con el Autographa californica Nucleopolyhedrovirus m&#xFA;ltiple

&#x8FDB;&#x7EB8;&#x5668;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8F90;&#x7167;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x901A;&#x5E38;&#x7528;&#x4E8E;&#x4E00;&#x822C;&#x5FC5;&#x9700;&#x7684;&#x3001; &#x4F53;&#x5916;&#x7EF4;&#x62A4;&#x548C;&#x8BB8;&#x591A;&#x8BB2;&#x7A76;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x957F;&#x7684;&#x7C7B;&#x578B;&#xFF0C;&#x7279;&#x522B;&#x662F;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6216;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x591A;&#x80FD;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x5B9A;&#x91CF;&#x548C;&#x534A;&#x5B9A;&#x91CF;&#x514D;&#x75AB;&#x7684;&#x57F9;&#x517B;&#x6DB2;&#x6765;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E00;&#x4E9B;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x3001; &#x8D8B;&#x5316;&#x56E0;&#x5B50;&#x3001; &#x86CB;&#x767D;&#x6FC0;&#x7D20;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x77E9;&#x9635;/&#x7C98;&#x9644;&#x5206;&#x5B50;&#xFF0C;&#x901A;&#x5E38;&#x4ECE;&#x4E24;&#x4E2A;&#x9610;&#x8FF0;&#x4E86;&#x4F7F;&#x7528;&#x8FDB;&#x7EB8;&#x5668;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x7533;&#x901A;&#x5FEB;&#x9012;&#x548C; CF-1&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5B9A;&#x91CF;&#x6D4B;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x6700;&#x4E30;&#x5BCC;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x86CB;&#x767D;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x8FDB;&#x7EB8;&#x5668;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x5F53;&#x4E2D;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7D20; A&#x3001; &#x809D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50; (HGF)&#x3001; &#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x6837;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;-1&#x3001; &#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x6837;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;-2&#xFF0C;&#x80F0;&#x5C9B;&#x7D20;&#x6837;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D; (IGFBP)-6&#x3001; &#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x96C6;&#x843D;&#x523A;&#x6FC0;&#x56E0;&#x5B50; (&#x5373;&#x8111;&#x810A;&#x6DB2;-1&#xFF09; &#x548C;&#x8272;&#x7D20;&#x4E0A;&#x76AE;&#x884D;&#x751F;&#x56E0;&#x5B50; (&#x5373;&#x4E1D;&#x6C28;&#x9178;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#xFF0C;&#x514B;&#x62C9;&#x5FB7;&#x6210;&#x5458; 1 &#x697C;&#xFF09;&#x3002;CF-1 &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x8868;&#x793A;&#x591A;&#x5341;&#x500D;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7D20; A &#x6BD4; STO &#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5E76;&#x8FD8;&#x4EA7;&#x751F;&#x5927;&#x91CF;&#x7684;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;-6 &#x548C; &prime;-3 &prime; 2&#x3001; &prime;-4 &prime;-5&#x3002;&#x76F8;&#x53CD;&#xFF0C;STO &#x7EC6;&#x80DE;&#x4EA7;&#x751F;&#x4E86;&#x51E0;&#x4E4E;&#x5341;&#x500D;&#x4EE5;&#x4E0A;&#x7684;&#x809D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x548C;&#x4E94;&#x500D;&#x66F4;&#x591A;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50; &#xFF08;&#x5373; c &#x8BD5;&#x5242;&#x76D2;&#x914D;&#x4F4D;&#xFF09; &#x6BD4; CF-1 &#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;Semiquantitatively &#x6D4B;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x76F8;&#x5BF9;&#x5927;&#x91CF;&#x7684;&#x8D8B;&#x5316;&#x56E0;&#x5B50;&#x5236;&#x4F5C;&#x4E86;&#x5305;&#x62EC; fractalkine (CX3CL1) &#x5E72;&#x6270;&#x7D20;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x86CB;&#x767D; 10 (&#x5373; CXCL10 &#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x53CD;&#x5E94;&#x57FA;&#x56E0;-2&#xFF0C;CRG-2&#xFF09;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x8FDB;&#x7EB8;&#x5668;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5355;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D8B;&#x5316;&#x86CB;&#x767D; (MCP)-1 (&#x5373; CCL2 &#x548C;&#x7259;&#x9F88;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D8B;&#x5316;&#x56E0;&#x5B50; (&#x6D41;&#x884C;&#x6027;&#x4E59;&#x578B;&#x8111;&#x708E;&#xFF09;&#xFF0C;MCP-5/CCL12)&#xFF0C;&#x89D2;&#x8D28;&#x5F62;&#x6210;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D8B;&#x5316; &#xFF08;&#x5373; CXCL1 &#x548C;&#x589E;&#x957F;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x764C;&#x57FA;&#x56E0; alpha&#xFF0C;GRO&alpha;&#xFF09;&#xFF0C;&#x80BE;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7624;&#x6297;&#x539F;&#x57FA;&#x56E0; (CCN3&#xFF0C;&prime;-9)&#x3001; &#x57FA;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x884D;&#x751F;&#x56E0;&#x5B50; 1 (CXCL12) &#x53CA;&#x4E1D;&#x6C28;&#x9178;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x6291;&#x5236; E1 (PAI-1)&#x3002;&#x7533;&#x901A;&#x5FEB;&#x9012;&#x4E0E;&#x53E6;&#x4E00;&#x4E2A;&#xFF0C;&#x5236;&#x4F5C;&#x66F4;&#x591A; CXCL16 &#x6BD4; CF-1 &#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x548C; CF 1 &#x7EC6;&#x80DE;&#x4EA7;&#x751F;&#x66F4;&#x591A;&#x7684;&#x591A;&#x8FB9;&#x534F;&#x5546;&#x7A0B;&#x5E8F;-5 (CCL12)&#x3001; &#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x708E;&#x75C7;&#x86CB;&#x767D; (MIP)-1&alpha; (CCL3)&#xFF0C;&#x6309;&#x63ED;&#x4FDD;&#x9669;&#x8BA1;&#x5212;-1&beta; (CCL4)&#x3001; pentraxin-3 (TSG-14&#xFF09; &#x548C;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x56E0;&#x5B50;-4 &#xFF08;CXCL4&#xFF09; &#x6BD4; STO &#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x7C98;&#x9644;&#x5206;&#x5B50;&#x3001; &#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x7C98;&#x9644;&#x5206;&#x5B50; CD54 &#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x7C98;&#x9644;&#x5206;&#x5B50;-1&#xFF09;&#xFF0C;&#x6709;&#x4EBA;&#x7528; CF-1 &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F; STO &#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x548C;&#x540C;&#x6837;&#xFF0C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x77E9;&#x9635;&#x76F8;&#x5173;&#x5206;&#x5B50; endocan (&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x5206;&#x5B50; 1&#xFF09;&#x3001; &#x5185;&#x76AE;&#x6291;&#x7D20; (&#x80F6;&#x539F; XVIII) &#x548C;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176; 3 &#x63D0;&#x51FA;&#x4E86;&#x66F4;&#x591A; CF-1 &#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x91D1;&#x5C5E;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x5242; 1 &#x575A;&#x51B3;&#x8868;&#x793A;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x8FDB;&#x7EB8;&#x5668;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x4E3B;&#x8981;&#x4ECE; CF 1 &#x5355;&#x5143;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x5176;&#x4ED6;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5305;&#x62EC;&#x89C6;&#x9EC4;&#x9187;&#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D; 4 &#x4E0E; FGF21&#xFF0C;&#x867D;&#x7136; STO &#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x6CCC;&#x66F4;&#x591A;&#x7684;&#x5E72;&#x6270;&#x7D20;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x8FDB;&#x7EB8;&#x5668;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0D;&#x4EA7;&#x751F;&#x6216;&#x4F4E;&#x91D1;&#x989D; LIF&#xFF0C;&#x80BF;&#x7624;&#x574F;&#x6B7B;&#x56E0;&#x5B50; &alpha;&#x3001; &#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50; (VEGF) &#x7684; VEGF-B&#x3001; &#x50AC;&#x4E73;&#x7D20;&#x3001; &#x5404;&#x79CD;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x7D20;&#x3001; &#x78B1;&#x6027;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50; (FGF)-1&#xFF0C;FGF-2&#x3001; FGF-7&#x3001; &#x8868;&#x76AE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF0C;HB-&#x8868;&#x76AE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x53CC;&#x8C03;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x7ED3;&#x679C;&#x53EF;&#x80FD;&#x89E3;&#x91CA;&#x4E00;&#x4E9B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x957F;&#x548C;&#x7EF4;&#x62A4;&#x54CD;&#x5E94;&#x7531;&#x5404;&#x79CD;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x7533;&#x901A;&#x5FEB;&#x9012;&#x4E0A;&#x5171;&#x57F9;&#x517B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6216; CF 1 &#x8FDB;&#x7EB8;&#x5668;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;

&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x5728;&#x7533;&#x901A;&#x5FEB;&#x9012;&#x548C; CF-1 &#x9F20;&#x6807;&#x9001;&#x7EB8;&#x5668;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x57F9;&#x517B;&#x6DB2;&#x4E2D;&#x514D;&#x75AB;&#x5B9A;&#x91CF;&#x548C;&#x534A;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x3002;

Feeder cells of irradiated mouse fibroblasts are commonly used for, and are generally necessary for, the in vitro maintenance and growth of many fastidious cell types, particularly embryonic stem cells or induced pluripotent stem cells. Quantitative and semiquantitative immunoassays of conditioned media were performed to identify some of the soluble cytokines, chemokines, protein hormones, and cell matrix/adhesion molecules that are elaborated from two commonly used feeder cells, STO and CF-1. Among those quantitatively assayed, the most abundant cytokine proteins expressed by the feeder cells were activin A, hepatocyte growth factor (HGF), insulin-like growth factor 1, insulin-like growth factor 2, insulin-like growth factor binding protein (IGFBP)-6, macrophage colony-stimulating factor (a.k.a. CSF-1), and pigment epithelium-derived factor (a.k.a. serine protease inhibitor, clade F, member 1). CF-1 cells expressed ten times more activin A than STO cells and also produced larger amounts of interleukin-6 and IGFBP-2, IGFBP-3, IGFBP-4, and IGFBP-5. Conversely, STO cell produced almost ten times more HGF and five times more stem cell factor (a.k.a. c-kit ligand) than CF-1 cells. Assayed semiquantitatively, relatively large amounts of chemokines were produced by both feeder cells including fractalkine (CX3CL1), interferon-inducible protein 10 (a.k.a. CXCL10 and cytokine-responsive gene-2, CRG-2), monocyte chemotactic protein (MCP)-1 (a.k.a. CCL2 and junctional epithelium chemokine (JE), MCP-5/CCL12), keratinocyte-derived chemokine (a.k.a. CXCL1 and growth-related oncogene alpha, GROÎ±), nephroblastoma overexpressed gene (CCN3, IGFBP-9), stromal cell-derived factor 1 (CXCL12), and serpin E1 (PAI-1). In contrast to one another, STO produced more CXCL16 than CF-1 cells, and CF-1 cell produced more MCP-5 (CCL12), macrophage inflammatory protein (MIP)-1Î± (CCL3), MIP-1Î² (CCL4), pentraxin-3 (TSG-14), and platelet factor-4 (CXCL4) than STO cells. Soluble adhesion molecule, sICAM (ICAM-1, CD54), was expressed by CF-1 cells, but not STO cells, and similarly, the cell matrix-associated molecules endocan (endothelial cell-specific molecule 1), endostatin (collagen XVIII), and matrix metalloproteinase 3 were expressed more by CF-1 cells. Tissue inhibitor of metalloproteinases 1 was robustly expressed by both feeder cells. Other proteins primarily detected from CF-1 cells included retinol-binding protein 4 and FGF21, while STO cells secreted more interferon gamma. Both feeder cells produced no or low amounts of LIF, tumor necrosis factor alpha, vascular endothelial growth factor (VEGF), VEGF-B, prolactin, various interleukins, fibroblast growth factor (FGF)-1, FGF-2, FGF-7, EGF, HB-EGF, and amphiregulin. The results may explain some of the cell growth and maintenance responses by various types of cells co-cultured on STO or CF-1 feeder cells.

Quantitative and semiquantitative immunoassay of growth factors and cytokines in the conditioned medium of STO and CF-1 mouse feeder cells.

Sont couramment utilis&eacute;s pour des cellules nourrici&egrave;res des fibroblastes de souris irradi&eacute;es et sont g&eacute;n&eacute;ralement n&eacute;cessaires, au maintien in vitro et croissance de cellule fastidieux de nombreux types de cellules souches embryonnaires en particulier, ou induite par les cellules souches pluripotentes. Les immunoessais quantitatives et semi-quantitative de milieux conditionn&eacute;s ont &eacute;t&eacute; r&eacute;alis&eacute;s pour identifier certaines des hormones prot&eacute;iques solubles cytokines, chimiokines et mol&eacute;cules de matrice/adh&eacute;rence de cellules qui sont &eacute;labor&eacute;s &agrave; partir de deux couramment utilis&eacute; des cellules nourrici&egrave;res, STO et CF-1. Parmi ces quantitativement dos&eacute;, les prot&eacute;ines les plus abondantes cytokines exprim&eacute;s par les cellules nourrici&egrave;res &eacute;taient l&#39;activine A, facteur de croissance des h&eacute;patocytes (HGF), insulin-like growth factor 1, insulin-like growth factor 2, prot&eacute;ine de liaison de l&#39;insuline-like growth factor (IGFBP) -6, macrophage colony-stimulating factor (a.k.a. CSF-1) et facteur de d&eacute;riv&eacute; de l&#39;&eacute;pith&eacute;lium pigmentaire (alias l&#39;inhibiteur de prot&eacute;ase de s&eacute;rine, clade F, membre 1). CF-1 cellules exprim&eacute; l&#39;activin A dix fois plus que les cellules de la STO et a &eacute;galement produisent des quantit&eacute;s plus grandes de l&#39;interleukine-6 et IGFBP-2, IGFBP-3, IGFBP-4 et IGFBP-5. &Agrave; l&#39;inverse, cellule STO produit presque dix fois plus HGF et cinq fois plus stem cell factor (alias c-kit ligand) que les cellules CF-1. Analys&eacute;s selon une m&eacute;thode semi-quantitative, des quantit&eacute;s relativement importantes de chimiokines ont &eacute;t&eacute; produites par les deux cellules nourrici&egrave;res, y compris la fractalkine (CX3CL1), prot&eacute;ine interf&eacute;ron-inducible 10 (alias CXCL10 et sensibles aux cytokines g&egrave;ne-2, CRG-2), prot&eacute;ine chimiotactique monocytes (MCP) -1 (alias CCL2 et &eacute;pith&eacute;lium jonctionnel chemokine (EJ), MCP-5/CCL12), d&eacute;riv&eacute; de k&eacute;ratinocytes chemokine (alias CXCL1 et alpha oncog&egrave;ne li&eacute;s &agrave; la croissance, GRO&alpha;), n&eacute;phroblastome surexprim&eacute; g&egrave;ne (CCN3, IGFBP-9), d&eacute;riv&eacute; de cellules stromales facteur 1 (CXCL12) et serpin E1 (PAI-1). Contrairement &agrave; un autre, STO a produit plus de CXCL16 que les cellules CF-1, et CF-1 cellule produit plus MCP-5 (CCL12), prot&eacute;ine inflammatoire macrophage (MIP)-1&alpha; (CCL3), MIP-1&beta; (CCL4), PENTRAXINE-3 (STG-14) et facteur plaquettaire-4 (CXCL4) que les cellules de la STO. La mol&eacute;cule d&#39;adh&eacute;rence soluble, sICAM (ICAM-1, CD54), a &eacute;t&eacute; exprim&eacute;e par les cellules CF-1, mais pas les cellules STO, et de m&ecirc;me, l&#39;endocan de mol&eacute;cules associ&eacute;es &agrave; la matrice cellulaire (mol&eacute;cule sp&eacute;cifique des cellules endoth&eacute;liale, 1), endostatine (collag&egrave;ne XVIII) et m&eacute;talloprot&eacute;inase matricielle 3 ont &eacute;t&eacute; exprim&eacute;es plus de cellules CF-1. Inhibiteur tissulaire des m&eacute;talloprot&eacute;inases 1 a exprim&eacute; avec force les deux cellules nourrici&egrave;res. Autres prot&eacute;ines d&eacute;tect&eacute;es principalement de cellules CF-1 partie retinol-binding protein 4 et FGF21, tandis que les cellules STO s&eacute;cr&eacute;t&eacute;e plus interf&eacute;ron gamma. Chargeur de deux cellules non produites ou faibles montants de FRV, facteur de n&eacute;crose tumorale alpha, vascular endothelial growth factor (VEGF), VEGF-B, prolactine, diverses interleukines, facteur de croissance fibroblastique (FGF) -1, FGF-2, 7-FGF, EGF, HB-EGF et AMPHIREGULINE. Les r&eacute;sultats peuvent expliquer en partie de la croissance cellulaire et r&eacute;ponses de l&#39;entretien par divers types de cellules de co-culture sur STO ou cellules nourrici&egrave;res CF-1.

Dosage immunologique quantitative et semi-quantitative des facteurs de croissance et des cytokines dans le milieu conditionn&eacute; de STO et CF-1 cellules nourrici&egrave;res de souris.

Zuf&uuml;hrung Zellen der bestrahlten Maus-Fibroblasten allgemein benutzt und sind im Allgemeinen notwendig, f&uuml;r die in-vitro-Pflege und Wachstum viele anspruchsvolle Zelle eingibt, vor allem embryonalen Stammzellen oder induzierten pluripotenten Stammzellen. Quantitative und semiquantitative Immunoassays konditionierten Medien wurden durchgef&uuml;hrt, um einige der l&ouml;slichen Zytokine, Chemokine, Proteinhormone identifizieren und Matrix/ZELLADH&Auml;SIONSMOLEK&Uuml;LE, die h&auml;ufig von zwei erarbeitet werden verwendet Zuf&uuml;hrung Zellen, STO und CF-1. Unter diesen quantitativ analysiert waren die am h&auml;ufigsten vorkommenden Cytokine Proteine, die durch die Zubringer-Zellen Activin A, Hepatozyten-Wachstumsfaktor (HGF), Insulin-Like Growth Factor 1, Insulin-Like Growth Factor 2, Insulin-Like Growth Factor Binding Protein (IGFBP)-6, Makrophagen-Kolonie-stimulierende Faktor (a.k.a. CSF-1) und Pigment Epithel derived Factor (a.k.a. Serin-Proteasen Inhibitor, Klade F, Bauteil 1). CF-1 Zellen ausgedr&uuml;ckt zehnmal mehr Activin A als STO Zellen und auch gr&ouml;&szlig;ere Mengen von Interleukin-6 und IGFBP-2, IGFBP-3, IGFBP-4 und IGFBP-5 hergestellt. Umgekehrt produziert STO-Zelle fast zehnmal mehr HGF und f&uuml;nfmal mehr Stammzellen-Faktor (auch bekannt als c-Kit-Ligand) als CF-1 Zellen. Hemmende semiquantitatively, relativ gro&szlig;e Mengen an Chemokine wurden von beiden Zubringer-Zellen, einschlie&szlig;lich Fractalkine (CX3CL1), Interferon-inducible Protein 10 (a.k.a. CXCL10 und Zytokin-responsive Gen-2, CRG-2), produziert Monozyte chemotaktische Protein (MCP)-1 (a.k.a. CCL2 und junktionale Epithel Chemokine (JE), MCP-5/CCL12), Keratinozyten abgeleitete Chemokine (a.k.a. CXCL1 und Wachstum-bezogene Onkogen Alpha, GRO&alpha;), Nephroblastom Pleuramesotheliom gen (CCN3, IGFBP-9), stromal Cell-derived Faktor 1 (CXCL12) und Serpin E1 (PAI-1). Im Gegensatz zu einem anderen, STO hergestellten mehr CXCL16 als CF-1-Zellen, und CF-1 Zelle weitere MCP-5 (CCL12), Makrophagen entz&uuml;ndliche Protein (MIP)-1&alpha; (CCL3), MIP-1&beta; (CCL4), Pentraxin-3 (TSG-14) und Thrombozyten Faktor-4 (CXCL4) als STO-Zellen. L&ouml;sliche Adh&auml;sion Molek&uuml;l, sICAM (ICAM-1, CD54), von CF-1-Zellen, aber nicht STO Zellen ge&auml;u&szlig;ert wurde, und ebenso der Zelle Matrix-assoziierter Molek&uuml;le Endocan (endothelial Zelle-spezifischen Molek&uuml;l 1), Endostatin (Kollagen XVIII) und Matrix-Metalloproteasen 3 wurden mehr durch ausgedr&uuml;ckt CF-1 Zellen. Gewebe-Inhibitor der Metalloproteinasen 1 &auml;u&szlig;erten robust beide Feeder-Zellen. Andere Proteine, die in erster Linie aus CF-1 Zellen erkannt enthielt Retinol-Binding Protein 4 und FGF21, w&auml;hrend STO Zellen mehr Interferon-Gamma abgesondert. Beide Zuf&uuml;hrung Zellen produzierte keine oder geringe Mengen von LIF, ob Tumornekrosefaktor alpha, vaskul&auml;ren endothelialen Wachstumsfaktor (VEGF), VEGF-B, Prolaktin, verschiedene Interleukine, Fibroblasten-Wachstumsfaktor (FGF) 1, FGF-2, FGF-7, EGF, HB-EGF und Amphiregulin. Die Ergebnisse k&ouml;nnen einige von Zellwachstum und Wartung Antworten von verschiedenen Arten von Zellen, die co-cultured auf STO oder CF-1 Zuf&uuml;hrung erkl&auml;ren.

Quantitative und semiquantitative Immunoassay Wachstumsfaktoren und Zytokine im konditionierten Medium der STO und CF-1 Maus-Feeder-Zellen.

Alimentatore cellule di fibroblasti di topo irradiati sono comunemente utilizzate per e sono in genere necessarie per il mantenimento in vitro e crescita di molte cellule fastidiosi i tipi, le cellule staminali embrionali particolarmente o indotta da cellule staminali pluripotenti. Analisi immunologica quantitativa e semiquantitativa dei media condizionata sono stati eseguiti per identificare alcune delle citochine solubili, chemochine, ormoni della proteina, e molecole di matrice/adesione delle cellule che vengono elaborate da due comunemente utilizzato cellule di alimentatore, STO e CF-1. Tra quelli analizzati quantitativamente, il pi&ugrave; abbondante cytokine proteine espresse dalle cellule feeder erano activin A, fattore di crescita degli epatociti (HGF), fattore di crescita insulino-simile 1, insulin-like growth factor 2, insulin-like growth factor binding protein (IGFBP) -6, colony-stimulating factor di macrofago (a.k.a. CSF-1) e fattore di epitelio-derivato di pigmento (aka inibitore della proteasi Serina, clade F, membro 1). CF-1 cellule espresso activin dieci volte di pi&ugrave; A cellule STO e produssero anche grandi quantit&agrave; di interleuchina-6 e IGFBP-2, IGFBP-3, IGFBP-4 e IGFBP-5. Al contrario, cella STO prodotto HGF quasi dieci volte di pi&ugrave; e cinque volte pi&ugrave; stem cell factor (aka c-kit ligando) CF-1 delle cellule. Sostanza saggiata, relativamente grandi quantit&agrave; di chemochine sono state prodotte da entrambe le cellule di alimentatore incluso fractalkine (CX3CL1), l&#39;interferone-inducible protein 10 (aka CXCL10 e gene-2 cytokine-reattivo, CRG-2), proteina chemiotattica monocita (MCP) -1 (aka CCL2 ed epitelio giunzionale chemokine (JE), MCP-5/CCL12), derivate da cheratinociti chemokine (aka CXCL1 e crescita-related oncogene alpha, GRO&alpha;), nefroblastoma overexpressed gene (CCN3, IGFBP-9), derivato da cellule stromali di fattore 1 (CXCL12) e Serpina E1 (PAI-1). Contrariamente ad uno altro, STO prodotto pi&ugrave; CXCL16 CF-1 delle cellule, e CF-1 cellula prodotta pi&ugrave; MCP-5 (CCL12), proteina infiammatoria macrofagica (MIP)-1&alpha; (CCL3), MIP-1 &beta; (CCL4), pentraxin-3 (TSG-14) e Fattore piastrinico-4 (CXCL4) che le cellule STO. Molecola di adesione solubili, sICAM (ICAM-1, CD54), &egrave; stata espressa da cellule CF-1, ma non STO cellule, e allo stesso modo, la cellula matrice associata molecole endocan (endothelial cellula specifica molecola 1), endostatina (collagene XVIII) e matrix metalloproteinase 3 sono stati espressi pi&ugrave; da cellule CF-1. Inibitore di tessuto delle metalloproteinasi 1 robustamente &egrave; stata espressa da entrambe le cellule di alimentatore. Altre proteine rilevate principalmente da cellule CF-1 includevano retinol-binding protein 4 e FGF21, mentre le cellule STO secreto pi&ugrave; gamma interferone. Entrambi feeder cells non prodotto o bassa quantit&agrave; di LIF, fattore di necrosi tumorale alfa, vascular endothelial growth factor (VEGF), VEGF-B, prolattina, varie interleuchine, fattore di crescita dei fibroblasti (FGF) -1, FGF-2, FGF-7, EGF, HB-EGF e Anfiregulina. I risultati possono spiegare alcuni la crescita cellulare e le risposte di manutenzione di vari tipi di cellule co-cultured su STO o cellule di CF-1 alimentatore.

Immunodosaggio semiquantitativa e quantitativa dei fattori di crescita e citochine in medium condizionato di cellule di alimentatore del mouse STO e CF-1.

&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30C0;&#x30FC;&#x7D30;&#x80DE;&#x7167;&#x5C04;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3057;&#x3001;in vitro &#x3067;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C6;&#x30CA;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x6F54;&#x7656;&#x306A;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x6210;&#x9577;, &#x7279;&#x306B;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7A2E;&#x985E;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x3002;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30E1;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;&#x306E;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x3001;&#x30B1;&#x30E2;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30DB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30F3;&#x985E;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x884C;&#x308F;&#x308C;&#x305F;&#x3001;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30C0;&#x30FC;&#x7D30;&#x80DE;&#x3001;STO &#x3068; CF 1 2 &#x3064;&#x304B;&#x3089;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306B;&#x8A73;&#x8FF0;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x30BB;&#x30EB; &#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;/&#x63A5;&#x7740;&#x5206;&#x5B50;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684; assayed &#x9593;&#x3067;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30C0;&#x30FC;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x6700;&#x3082;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30D3;&#x30F3; A&#x3001;&#x809D;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x56E0;&#x5B50; (HGF), &#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x69D8;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50; 1, &#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x69D8;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50; 2, &#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30EA;&#x30F3;&#x69D8;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;&#x7D50;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; (IGFBP)-6&#x3001;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8; &#x30B3;&#x30ED;&#x30CB;&#x30FC;&#x523A;&#x6FC0;&#x56E0;&#x5B50; (&#x5225;&#x540D;&#x3001;CSF-1), &#x3068;&#x8272;&#x7D20;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7531;&#x6765;&#x56E0;&#x5B50; (&#x5225;&#x540D;&#x30BB;&#x30EA;&#x30F3; &#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x963B;&#x5BB3;&#x3001;&#x30AF;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C9; &#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC; 1 F&#xFF09; &#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;CF 1 &#x7D30;&#x80DE;&#x306F; STO &#x7D30;&#x80DE;&#x3088;&#x308A;&#x3082; 10 &#x500D;&#x4EE5;&#x4E0A;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30D3;&#x30F3; A &#x3092;&#x8868;&#x660E;&#x3057;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30ED;&#x30A4;&#x30AD;&#x30F3; 6 &#x3068; IGFBP 2 IGFBP 3&#x3001;IGFBP 4&#x3001;IGFBP 5 &#x306E;&#x5927;&#x91CF;&#x751F;&#x7523;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9006;&#x306B;&#x3001;STO &#x7D30;&#x80DE;&#x306F; HGF &#x306E;&#x307B;&#x307C; 10 &#x500D;&#x4EE5;&#x4E0A;&#x3068; CF 1 &#x7D30;&#x80DE;&#x3088;&#x308A;&#x3082; 5 &#x500D;&#x4EE5;&#x4E0A;&#x306E;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50; (&#x5225;&#x540D; c &#x30AD;&#x30C3;&#x30C8; &#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;) &#x751F;&#x7523;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x8A66;&#x91D1;&#x3001;&#x6BD4;&#x8F03;&#x7684;&#x5927;&#x91CF;&#x306E;&#x30B1;&#x30E2;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3; &#x30D5;&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30EB;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3; (CX3CL1) &#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30F3;&#x8A98;&#x5C0E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; 10 &#xFF08;&#x5225;&#x540D; CXCL10 &#x3068;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x5FDC;&#x7B54;&#x6027;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50; 2&#x3001;CRG 2&#xFF09; &#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x4E21;&#x65B9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30C0;&#x30FC;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x751F;&#x7523;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5358;&#x7403;&#x306E;&#x8D70;&#x5316;&#x6027;&#x86CB;&#x767D; (MCP)-1 &#xFF08;&#x5225;&#x540D; CCL2 &#x3068;&#x4ED8;&#x7740;&#x4E0A;&#x76AE;&#x30B1;&#x30E2;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3; (JE) MCP 5/CCL12&#xFF09; &#x8868;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x7531;&#x6765;&#x30B1;&#x30E2;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3; &#xFF08;&#x5225;&#x540D; CXCL1 &#x3068;&#x6210;&#x9577;&#x95A2;&#x9023;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1;&#x3001;GRO&alpha;&#xFF09; &#x814E;&#x82BD;&#x816B;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50; (CCN3, IGFBP-9), &#x9593;&#x8CEA;&#x7D30;&#x80DE;&#x7531;&#x6765;&#x56E0;&#x5B50; 1 (cxcl 12&#xFF09; &#x3068;&#x306A;&#x3063;&#x305F;&#x30BB;&#x30EB;&#x30D4;&#x30F3; E1 (PAI-1)&#x3002;&#x5225;&#x3068;&#x306F;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684; CF 1 &#x7D30;&#x80DE;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x3088;&#x308A;&#x591A;&#x304F;&#x306E; CXCL16 STO &#x3092;&#x751F;&#x7523;&#x3057;&#x3001;CF 1 &#x30BB;&#x30EB;&#x751F;&#x7523;&#x8A73;&#x7D30;&#x306E; MCP-5 (CCL12), &#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x708E;&#x75C7;&#x6027;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; &#xFF08;MIP&#xFF09;-1 &alpha; (CCL3)&#x3001;MIP il-1 (CCL4)&#x3001;pentraxin 3 (TSG 14)&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x56E0;&#x5B50;-4 (CXCL4) STO &#x7D30;&#x80DE;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x3002;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x63A5;&#x7740;&#x5206;&#x5B50;&#x3001;&#x3057;&#x3066; sicam-1 &#x3057;&#x305F; &#xFF08;ICAM-1, CD54), CF 1 &#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x306A;&#x3044; STO &#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8868;&#x73FE;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3057;&#x3001;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x3001;&#x30BB;&#x30EB; &#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x95A2;&#x9023;&#x5206;&#x5B50; endocan (&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x5206;&#x5B50; 1&#xFF09;&#x3001;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30C1;&#x30F3; (xviii &#x578B;&#x30B3;&#x30E9;&#x30FC;&#x30B2;&#x30F3;) &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x30E1;&#x30BF;&#x30ED;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC; 3 &#x306F;&#x3088;&#x308A; CF 1 &#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8868;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Timp &#x7523;&#x751F; 1 &#x9811;&#x5065;&#x4E21;&#x65B9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30C0;&#x30FC;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;.&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A7;&#x30ED;&#x30F3; &gamma; STO &#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x5206;&#x6CCC;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x9593;&#x4E3B;&#x306B; CF 1 &#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x4ED6;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30EC;&#x30C1;&#x30CE;&#x30FC;&#x30EB;&#x7D50;&#x5408;&#x86CB;&#x767D; 4 &#x3068; FGF21&#x3001;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30C0;&#x30FC;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E; LIF&#x3001;&#x816B;&#x760D;&#x58CA;&#x6B7B;&#x56E0;&#x5B50;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1;&#x3001;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x5897;&#x6B96;&#x56E0;&#x5B50; (VEGF) &#x306E;&#x306A;&#x3044;&#x751F;&#x7523;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x4F4E;&#x91CF; VEGF B, &#x30D7;&#x30ED;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;, &#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50; (FGF)-1 &#x3067;&#x3001;FGF 2, FGF 7, EGF, &#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC;&#x30ED;&#x30A4;&#x30AD;&#x30F3; HB-EGF &#x3068; amphiregulin&#x3002;&#x7D50;&#x679C;&#x30BB;&#x30EB;&#x6210;&#x9577;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C6;&#x30CA;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E; sto &#x57FA;&#x677F;&#x4E0A;&#x5171;&#x57F9;&#x990A;&#x7D30;&#x80DE;&#x307E;&#x305F;&#x306F; CF 1 &#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30C0;&#x30FC;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x7A2E;&#x985E;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3002;

&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;&#x3068;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E; STO &#x3068; CF 1 &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9; &#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30C0;&#x30FC;&#x7D30;&#x80DE;&#x99B4;&#x5316;&#x57F9;&#x5730;&#x3067;&#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x30A4;&#x30E0;&#x30CE;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;

&#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xBC29;&#xC0AC;&#xB2A5;&#xB41C; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xAC8C;&#xC7AC;&#xC758; &#xD53C;&#xB354; &#xC138;&#xD3EC;, &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xBA70; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xCCB4; &#xC678; &#xC720;&#xC9C0; &#xBCF4;&#xC218;&#xB97C; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xB9CE;&#xC740; &#xAE4C;&#xB2E4;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC140;&#xC758; &#xC131;&#xC7A5; &#xC720;&#xD615;, &#xD2B9;&#xD788; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xB098; &#xC720;&#xB3C4; &#xB9CC;&#xB2A5; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;. &#xBC14;&#xB978;&#xB41C; &#xBBF8;&#xB514;&#xC5B4;&#xC758; &#xC591;&#xC801; &#xBC0F; semiquantitative immunoassays &#xC77C;&#xBD80; &#xC218;&#xC6A9; &#xC131; cytokines, chemokines, &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD638;&#xB974;&#xBAAC;, &#xC2DD;&#xBCC4;&#xC744; &#xC218;&#xD589; &#xD558; &#xACE0; &#xC140; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4;/&#xC811;&#xCC29; &#xBD84;&#xC790;&#xB294; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; 2&#xC5D0;&#xC11C; &#xC815;&#xAD50; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD53C;&#xB354; &#xC140; STO&#xACFC; CF 1. &#xADF8; &#xC591;&#xC801; assayed &#xAC00;&#xC6B4;&#xB370; &#xD53C;&#xB354; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD45C;&#xD604; &#xB41C; &#xAC00;&#xC7A5; &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; cytokine &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; activin A, hepatocyte &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; (HGF), &#xC778;&#xC290;&#xB9B0;&#xACFC; &#xAC19;&#xC740; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; 1, &#xC778;&#xC290;&#xB9B0; &#xAC19;&#xC740; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; 2, &#xC778;&#xC290;&#xB9B0; &#xAC19;&#xC740; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; &#xC758;&#xBB34;&#xC801;&#xC778; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (IGFBP)-6, &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC; &#xCF5C;&#xB85C; &#xB2C8; &#xC790;&#xADF9; &#xC778;&#xC790; (&#xC77C;&#xBA85;: CSF-1), &#xC548;&#xB8CC; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC720;&#xB798; &#xC778;&#xC790; (&#xC77C;&#xBA85; &#xB5A0;&#xB4E4;&#xACE0; protease &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;, clade &#xD68C;&#xC6D0; 1 F)&#xB97C; &#xD588;&#xB2E4;. CF-1 &#xC140; STO &#xC140; &#xBCF4;&#xB2E4; 10 &#xBC30;&#xB098; &#xB354; activin A &#xD45C;&#xD604;&#xACFC; &#xC778;&#xD130; &#xB8E8; &#xD0A8;-6 &#xBC0F; IGFBP 2, IGFBP 3, IGFBP 4, IGFBP-5&#xC758; &#xB354; &#xD070; &#xAE08;&#xC561;&#xC744; &#xC0DD;&#xC0B0;. &#xBC18;&#xB300;&#xB85C;, STO &#xC140; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xAC70;&#xC758; 10 &#xBC30;&#xB098; &#xB354; HGF CF-1 &#xC140; &#xBCF4;&#xB2E4; 5 &#xBC30; &#xB354; &#xB9CE;&#xC740; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xBE44;&#xC728; (&#xC77C;&#xBA85; c &#xD0A4;&#xD2B8; ligand). Semiquantitatively &#xBD84;&#xC11D; chemokines &#xC0C1;&#xB300;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB9CE;&#xC740; &#xC591;&#xC758; fractalkine (CX3CL1), &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xB860;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; 10 (&#xC77C;&#xBA85;: CXCL10 &#xBC0F; CRG-2 &#xC9C4; 2 cytokine &#xBC18;&#xC751;)&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xBAA8;&#xB450; &#xD53C;&#xB354; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4; monocyte &#xD608; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (MCP)-1 (&#xC77C;&#xBA85; CCL2 &#xBC0F; &#xC811;&#xD569; &#xC0C1;&#xD53C; chemokine (JE), MCP-5/CCL12) keratinocyte &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; chemokine (&#xC77C;&#xBA85;: CXCL1 &#xBC0F; &#xC131;&#xC7A5; &#xAD00;&#xB828; oncogene &#xC54C;&#xD30C;, GRO&alpha;) nephroblastoma overexpressed &#xC720;&#xC804;&#xC790; (CCN3, IGFBP-9), &#xC2E4;&#xC9C8; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xB798; 1 (CXCL12) &#xBC0F; serpin E1 &#xC694;&#xC18C; (&#xD30C;&#xC774;-1). &#xC11C;&#xB85C; &#xB2EC;&#xB9AC; STO CF-1 &#xC140; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB354; &#xB9CE;&#xC740; cxcl16&#xB97C; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD558; &#xACE0; CF-1 &#xC140; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xB354; MCP-5 (CCL12), &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC5FC;&#xC99D; &#xC131; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (MIP)-1&alpha; (CCL3) &#xC131;&#xB2A5; &#xCE21;&#xC815;-1&beta; (CCL4), pentraxin-3 (TSG-14), &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xD608;&#xC18C;&#xD310; &#xACC4;&#xC218;-4 (CXCL4) STO &#xC140; &#xBCF4;&#xB2E4;. &#xC218;&#xC6A9; &#xC131; &#xC811;&#xCC29; &#xBD84;&#xC790;, sICAM (ICAM-1, CD54)&#xB294; CF 1 &#xC140;&#xB9CC; &#xD558;&#xC9C0; STO &#xC140;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD45C;&#xD604;&#xACFC; &#xB9C8;&#xCC2C;&#xAC00;&#xC9C0;&#xB85C;, &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xC790; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0; endocan (&#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xAD00;&#xB828; &#xBD84;&#xC790; 1), endostatin (&#xCF5C;&#xB77C;&#xAC90; 18 &#xC138;), &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; metalloproteinase 3 &#xD45C;&#xD604; &#xD588;&#xB2E4; &#xB354; CF-1 &#xC140;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574;. Metalloproteinases 1&#xC758; &#xC870;&#xC9C1; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; &#xB450; &#xD53C;&#xB354; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xACAC;&#xACE0; &#xD558; &#xAC8C; &#xD45C;&#xD604; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC8FC;&#xB85C; CF-1 &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC10;&#xC9C0; &#xB2E4;&#xB978; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD3EC;&#xD568; retinol &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; 4&#xC640; FGF21, STO &#xC140; &#xB354; &#xC778;&#xD130;&#xD398;&#xB860; &#xAC10;&#xB9C8; &#xBD84; &#xBE44; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548;. &#xB450; &#xD53C;&#xB354; &#xC138;&#xD3EC;&#xAC00; &#xB354; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xB610;&#xB294; &#xB0AE;&#xC740; &#xC591;&#xC758; LIF, &#xC885;&#xC591; &#xAD34; &#xC0AC; &#xC694;&#xC778; &#xC54C;&#xD30C;, &#xD608;&#xAD00; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; (VEGF), VEGF B, prolactin, &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; interleukins, &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; (FGF)-1, FGF 2, EGF, FGF 7 HB EGF&#xC640; amphiregulin. &#xACB0;&#xACFC; &#xC140; STO&#xC5D0; co-cultured &#xB610;&#xB294; CF 1 &#xD53C;&#xB354; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC885;&#xB958;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC138;&#xD3EC; &#xC131;&#xC7A5; &#xBC0F; &#xC720;&#xC9C0; &#xAD00;&#xB9AC; &#xC751;&#xB2F5;&#xC758; &#xC77C;&#xBD80;&#xB97C; &#xC124;&#xBA85;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; &#xBC0F; STO CF 1 &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xD53C;&#xB354; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xBC14;&#xB978;&#xB41C; &#xB9E4;&#xCCB4;&#xC5D0;&#xC11C; cytokines&#xC758; &#xC591;&#xC801; &#xBC0F; semiquantitative immunoassay.

Fibroblastos de fibroblastos de rat&oacute;n irradiados son usados com&uacute;nmente para y son generalmente necesarios para el mantenimiento in vitro y crecimiento de la c&eacute;lula fastidioso muchos tipos, las c&eacute;lulas madre embrionarias particularmente o inducida de c&eacute;lulas madre pluripotentes. Inmunoensayos cuantitativos y semicuantitativos de acondicionado medios fueron realizados para identificar algunas de las citoquinas soluble, quimiocinas, hormonas proteicas, y mol&eacute;culas de matriz/adhesi&oacute;n celular que son elaboradas a partir de dos com&uacute;nmente utilizan fibroblastos, STO y CF-1. Entre &eacute;sos cuantitativamente ensayado, las prote&iacute;nas m&aacute;s abundantes de cytokine expresadas por las c&eacute;lulas de alimentaci&oacute;n fueron activina A, factor de crecimiento (HGF), factor de crecimiento insul&iacute;nico tipo 1, factor de crecimiento insulina-like 2, prote&iacute;na de uni&oacute;n a factor de crecimiento insul&iacute;nico (IGFBP) -6, factor estimulante de colonias de macr&oacute;fagos (a.k.a. CSF-1) y factor derivado del epitelio de pigmento (a.k.a. serina proteasa inhibidor, clade F, miembro 1). Las c&eacute;lulas CF-1 expresaron activina diez veces m&aacute;s A que las c&eacute;lulas STO y tambi&eacute;n producen grandes cantidades de interleucina-6 y IGFBP-2, IGFBP-3, IGFBP-4 y IGFBP-5. Por el contrario, la c&eacute;lula STO hab&iacute;a producido HGF casi diez veces m&aacute;s y m&aacute;s de cinco veces factor de c&eacute;lulas madre (a.k.a. ligand del c-kit) que las c&eacute;lulas CF-1. Analizar semiquantitatively, cantidades relativamente grandes de quimiocinas fueron producidos por ambos fibroblastos como fractalkine (CX3CL1), prote&iacute;na inducible por interfer&oacute;n 10 (a.k.a. CXCL10 y GEN-2 cytokine-sensible, CRG-2), prote&iacute;na quimiot&aacute;ctica de monocitos (MCP) -1 (a.k.a. CCL2 y epitelio junctional chemokine (JE), MCP-5/CCL12), derivados de queratinocitos chemokine (a.k.a., CXCL1 y relacionadas con el crecimiento del oncog&eacute;n alfa, GRO&alpha;), nephroblastoma sobreexpresa gene (CCN3, IGFBP-9), derivados de c&eacute;lulas stromal factor 1 (CXCL12) y serpin E1 (PAI-1). En contraste con uno al otro, STO produjo m&aacute;s CXCL16 que las c&eacute;lulas CF-1 y CF-1 c&eacute;lula produce m&aacute;s MCP-5 (CCL12), prote&iacute;na inflamatoria de macr&oacute;fagos (MIP)-1&alpha; (CCL3), MIP-1&beta; (CCL4), pentraxina-3 (TSG-14) y plaquetas factor-4 (CXCL4) que las c&eacute;lulas STO. Mol&eacute;cula de adhesi&oacute;n solubles, sICAM (ICAM-1, CD54), fue expresada por las c&eacute;lulas CF-1, pero no estoy c&eacute;lulas, y del mismo modo, la c&eacute;lula matriz asociada de mol&eacute;culas endocan (endotelial celular inespec&iacute;fico mol&eacute;cula 1), ENDOSTATINA (col&aacute;geno XVIII) y metaloproteinasa de la matriz 3 se expresaron m&aacute;s por las c&eacute;lulas CF-1. Inhibidor de tejido de metaloproteinasas 1 robusta fue expresada por ambos fibroblastos. Otras prote&iacute;nas detectadas principalmente de las c&eacute;lulas CF-1 incluyen retinol-obligatorio prote&iacute;na 4 y FGF21, mientras que las c&eacute;lulas STO secretan m&aacute;s interfer&oacute;n gamma. Alimentador de ambas c&eacute;lulas no producidos o bajas cantidades de LIF, factor de necrosis tumoral alfa, vascular factor de crecimiento endotelial (VEGF), VEGF-B, prolactina, diversas interleuquinas, factor de crecimiento fibrobl&aacute;stico (FGF) -1, FGF-2, FGF-7, EGF, HB-EGF y amphiregulin. Los resultados entre el crecimiento de la c&eacute;lula y las respuestas de mantenimiento pueden explicar por varios tipos de c&eacute;lulas co-cultured en STO o fibroblastos CF-1.

Inmunoensayo cuantitativa y semicuantitativa de factores de crecimiento y citocinas en el medio condicionado de STO y CF-1 fibroblastos de rat&oacute;n.

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Publication title	2008
Publication title	2008

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Subpopulations of equine infectious anemia virus Rev coexist in vivo and differ in phenotype. Journal of virology\| PubMed ID: 14581549	2003
Characterization of functional domains of equine infectious anemia virus Rev suggests a bipartite RNA-binding domain. Journal of virology\| PubMed ID: 16571801	2006
Immune selection of equine infectious anemia virus env variants during the long-term inapparent stage of disease. Virology\| PubMed ID: 17328936	2007
Naturally arising point mutations in non-essential domains of equine infectious anemia virus Rev alter Rev-dependent nuclear-export activity. The Journal of general virology\| PubMed ID: 18343848	2008
Structural model of the Rev regulatory protein from equine infectious anemia virus. PloS one\| PubMed ID: 19137065	2009
Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus ODV-E56 envelope protein is required for oral infectivity and can be substituted functionally by Rachiplusia ou multiple nucleopolyhedrov... The Journal of general virology\| PubMed ID: 20032203	2010
A peptide that binds the pea aphid gut impedes entry of Pea enation mosaic virus into the aphid hemocoel. Virology\| PubMed ID: 20223498	2010
Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus ODV-E56 is a per os infectivity factor, but is not essential for binding and fusion of occlusion-derived virus to the host midgut. Virology\| PubMed ID: 20970820	2011
A peptide with similarity to baculovirus ODV-E66 binds the gut epithelium of Heliothis virescens and impedes infection with Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus. The Journal of general virology\| PubMed ID: 21228132	2011
Quantitative and semiquantitative immunoassay of growth factors and cytokines in the conditioned medium of STO and CF-1 mouse feeder cells. In vitro cellular & developmental biology. Animal\| PubMed ID: 22179674	2012

Wendy Sparks

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