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Isolation of Normal and Cancer-associated Fibroblasts from Fresh Tissues by Fluorescence Activated Cell Sorting (FACS)

Cancer-associated fibroblasts (CAFs) are the most prominent cell type within the tumor stroma of many cancers, in particular breast carcinoma, and their ...

Tel Aviv University

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P53 &#x6291;&#x764C;&#x57FA;&#x56E0;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x548C;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x7684; DNA &#x4FEE;&#x590D;&#x9014;&#x5F84;&#x4E2D;&#x5177;&#x6709;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x4F4E;&#x5242;&#x91CF;&#x4F3D;&#x739B;&#x5200;&#x7167;&#x5C04;&#x6216;&#x987A;&#x94C2;&#x6CBB;&#x7597;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4F9D;&#x8D56; p53 &#x7684; DNA &#x4FEE;&#x590D;&#xFF0C;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x57FA;&#x5207;&#x9664;&#x4FEE;&#x590D; (BER) &#x6D3B;&#x52A8;&#x7ACB;&#x5373;&#x52A0;&#x5F3A;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x7EC6;&#x80DE; DNA &#x7834;&#x574F;&#x4EE3;&#x7406;&#x5546;&#x7684;&#x9AD8;&#x5242;&#x91CF;&#x6CBB;&#x7597;&#x5BFC;&#x81F4;&#x51CF;&#x5C11;&#x4F9D;&#x8D56; p53 &#x7684; DNA &#x4FEE;&#x590D;&#x548C;&#x8BF1;&#x5BFC; p53 &#x4F9D;&#x8D56;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x3002;P53 &#x4E0A;&#x6E38;&#x5206;&#x5B50;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x7684; p53 &#x76F8;&#x5173; DNA &#x4FEE;&#x590D;&#x7684;&#x8C03;&#x63A7;&#x662F; ATM &#x4F9D;&#x8D56;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6CE8;&#x610F;&#x5230;&#x867D;&#x7136;&#x8131;&#x6C2E;&#x9664;&#x78F7;&#x7684; p53 &#x86CB;&#x767D;&#x603B;&#x7AD9; C Ser376 &#x662F;&#x4E0E;&#x589E;&#x5F3A; DNA &#x4FEE;&#x590D;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#xFF0C;&#x5728; N &#x7EC8;&#x7AEF; Ser15 &#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x5BFC;&#x81F4; DNA &#x4FEE;&#x590D;&#x51CF;&#x5C11;&#x3002;&#x540E;&#x8005;&#x4E5F;&#x662F;&#x589E;&#x5F3A;&#x5728;&#x7279;&#x5B9A; DNA &#x7ED3;&#x5408;&#x6D3B;&#x6027;&#x548C;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x7684;&#x76F8;&#x5173;&#x6027;&#x3002;&#x6CBB;&#x7597;&#x4E0E;&#x534A;&#x80F1;&#x6C28;&#x9178;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#xFF0C;&#x5177;&#x6709;&#x7834;&#x574F;&#x6027;&#x7684;&#x4EE3;&#x7406;&#x963B;&#x6B62;&#x51CB;&#x4EA1;&#x4E4B;&#x524D;, &#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x5E76;&#x4E0D;&#x5F71;&#x54CD; DNA &#x4FEE;&#x590D;&#x6A21;&#x5F0F;&#x3002;&#x4E24;&#x8005;&#x5408;&#x8BA1;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E;&#x8BF1;&#x5BFC; p53 &#x4F9D;&#x8D56;&#x7684; DNA &#x4FEE;&#x590D;&#x6216;&#x51CB;&#x4EA1;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51B3;&#x5B9A;&#x5F88;&#x53EF;&#x80FD;&#x7531;&#x9057;&#x4F20;&#x6BD2;&#x6027;&#x5242;&#x5F15;&#x5165;&#x5230;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x6C34;&#x5E73;&#x63A7;&#x5236;&#x3002;

&#x53D1;&#x75C5;&#x7684; p53 &#x4F9D;&#x8D56; DNA &#x4FEE;&#x590D;&#x6216;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CB;&#x4EA1;&#x7531;&#x7D2F;&#x79EF;&#x53D7;&#x635F; DNA &#x7684;&#x6C34;&#x5E73;&#x3002;

The p53 tumor suppressor gene plays an important role in both apoptosis and DNA repair pathways that are pivotal for genomic stability. Here we show that the treatment of cells with low doses of gamma-irradiation or cisplatin resulted in an immediate enhancement of p53-dependent DNA repair, measured by base excision repair (BER) activity. However, treatment of cells with high doses of DNA damaging agents resulted in a reduction in p53-dependent DNA repair and in the induction of p53-dependent apoptosis. Analysis of p53 upstream molecular events suggested that regulation of p53-associated DNA repair is ATM-dependent. Furthermore, we observed that while dephosphorylation of Ser376 at the C-terminus of the p53 protein was associated with enhancement in DNA repair, phosphorylation at the N-terminal Ser15 resulted in the reduction in DNA repair. The latter is also in correlation with an enhancement in the specific DNA binding activity and in the induction of apoptosis. Treatment of cells with a caspase inhibitor, prior to the damaging agent-blocked apoptosis, had no effect on the DNA repair pattern. Taken together, this suggests that the decision of cells to induce a p53-dependent DNA repair or apoptosis is most probably controlled by the level of genotoxic agent introduced to cells.

The onset of p53-dependent DNA repair or apoptosis is determined by the level of accumulated damaged DNA.

Le g&egrave;ne suppresseur de tumeur p53 joue un r&ocirc;le important dans l&#39;apoptose et voies de r&eacute;paration de l&#39;ADN qui sont essentielles pour la stabilit&eacute; g&eacute;nomique. Nous montrons ici que le traitement des cellules avec de faibles doses d&#39;irradiation gamma ou cisplatine sold&eacute;e par une am&eacute;lioration imm&eacute;diate de la r&eacute;paration de l&#39;ADN d&eacute;pendante p53, mesur&eacute;e par l&#39;activit&eacute; de r&eacute;paration (BER) de base de l&#39;excision. Toutefois, le traitement des cellules avec des doses &eacute;lev&eacute;es de l&#39;ADN endommagent les agents a entra&icirc;n&eacute; une r&eacute;duction dans la r&eacute;paration de l&#39;ADN d&eacute;pendante p53 et dans l&#39;induction de l&#39;apoptose d&eacute;pendante de p53. Analyse des &eacute;v&eacute;nements mol&eacute;culaires en amont de p53 sugg&egrave;re que la r&eacute;gulation de p53 associ&eacute;e &agrave; la r&eacute;paration de l&#39;ADN est d&eacute;pendante de l&#39;ATM. En outre, nous avons observ&eacute; que la d&eacute;phosphorylation du Ser376 &agrave; l&#39;extr&eacute;mit&eacute; C-terminale de la prot&eacute;ine p53 &eacute;tait associ&eacute;e &agrave; la mise en valeur dans la r&eacute;paration de l&#39;ADN, la phosphorylation &agrave; la Ser15 de N-terminal sold&eacute;e par la r&eacute;duction de la r&eacute;paration de l&#39;ADN. Ce dernier est aussi en corr&eacute;lation avec une augmentation dans l&#39;activit&eacute; de liaison ADN sp&eacute;cifique et dans l&#39;induction de l&#39;apoptose. Traitement des cellules avec un inhibiteur de la caspase, avant l&#39;apoptose bloqu&eacute;s par l&#39;agent pr&eacute;judiciable, reste sans effet sur le mod&egrave;le de r&eacute;paration de l&#39;ADN. Globalement, il semble donc que la d&eacute;cision de cellules pour induire une r&eacute;paration de l&#39;ADN de p53 d&eacute;pendant ou l&#39;apoptose est probablement contr&ocirc;l&eacute;e par le niveau d&#39;agent g&eacute;notoxique introduit aux cellules.

L&#39;apparition de l&#39;ADN d&eacute;pendante de la p53 r&eacute;parer ou l&#39;apoptose est d&eacute;termin&eacute; par le niveau de l&#39;ADN endommag&eacute; accumul&eacute;.

Des p53 Tumor-Suppressor-Gens spielt eine wichtige Rolle in Apoptosis und DNA-Reparatur-Bahnen, die zentrale f&uuml;r genomische Stabilit&auml;t sind. Hier zeigen wir, dass die Behandlung der Zellen mit niedrigen Dosen von Gamma-Bestrahlung oder Cisplatin eine sofortige Verbesserung der p53-abh&auml;ngige DNA-Reparatur, gemessen an der Basis Exzision Reparatur (BER) Aktivit&auml;t gef&uuml;hrt. Behandlung der Zellen mit hohen Dosen von DNA Besch&auml;digung Agenten f&uuml;hrte jedoch ein R&uuml;ckgang p53-abh&auml;ngige DNA-Reparatur und die Induktion von p53-abh&auml;ngige Apoptose. Analyse p53 upstream molekularen Ereignisse vorgeschlagen, dass die Regulierung der p53-assoziierten DNA-Reparatur ATM-abh&auml;ngig ist. Des weiteren beobachteten wir, dass w&auml;hrend Dephosphorylierung von Ser376 im C-Terminus des Proteins p53 mit Erweiterung in der DNA-Reparatur verbunden war, die Verringerung der DNA-Reparatur Phosphorylierung an der N-terminalen Ser15 gef&uuml;hrt. Letzteres ist auch im Zusammenhang mit einer Erweiterung in die spezifische Aktivit&auml;t der DNA-Bindung und die Induktion von Apoptose. Behandlung der Zellen mit einem Caspase-Inhibitor, vor den sch&auml;dlichen Agent blockiert Apoptosis, hatte keine Auswirkung auf die DNA-Reparatur-Muster. Zusammengenommen bedeutet dies, dass die Entscheidung der Zellen, p53-abh&auml;ngige DNA-Reparatur oder Apoptose induzieren h&ouml;chstwahrscheinlich von der Ebene des genotoxischen Agent eingef&uuml;hrt, um Zellen gesteuert wird.

Beginn der p53-abh&auml;ngige DNA reparieren oder Apoptosis richtet sich nach der H&ouml;he der kumulierten besch&auml;digte DNA.

Il gene soppressore tumorale p53 svolge un ruolo importante in apoptosi e percorsi di riparazione del DNA che sono fondamentale per la stabilit&agrave; genomica. Qui ci mostra che il trattamento delle cellule con basse dosi di radiazioni gamma o cisplatino ha portato a un miglioramento immediato della riparazione del DNA di p53-dependent, misurata dall&#39;attivit&agrave; di riparazione (BER) base di escissione. Tuttavia, trattamento delle cellule con dosi elevate di DNA, danneggiando gli agenti ha provocato una riduzione nella riparazione del DNA di p53-dipendente e l&#39;induzione di apoptosi p53-dipendente. Analisi di eventi molecolari a Monte p53 suggeriscono che regolamento di riparazione del DNA di p53-associated ATM-dipendente. Inoltre, abbiamo osservato che mentre la defosforilazione del Ser376 al C-terminale della proteina p53 &egrave; stato associato con miglioramento nella riparazione del DNA, la fosforilazione alla Ser15 N-terminale ha portato a riduzione nella riparazione del DNA. Quest&#39;ultimo &egrave; anche in correlazione con un miglioramento dell&#39;attivit&agrave; di associazione del DNA specifico e l&#39;induzione di apoptosi. Trattamento delle cellule con un inibitore di caspasi, prima il apoptosis bloccato da agente dannoso, ha avuto alcun effetto sul modello di riparazione del DNA. Presi insieme, questo suggerisce che la decisione di cellule per indurre una riparazione del DNA di p53-dipendente o apoptosi probabilmente &egrave; controllata dal livello di Agente genotossico introdotto alle cellule.

L&#39;insorgenza di p53-dependent DNA riparazione o apoptosi sono determinata dal livello di DNA danneggiato accumulato.

P53 &#x764C;&#x6291;&#x5236;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3068;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x6975;&#x3081;&#x3066;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3059; DNA &#x4FEE;&#x5FA9;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3067;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x3068;&#x4F4E;&#x7528;&#x91CF;&#x306E; &gamma; &#x7DDA;&#x7167;&#x5C04;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30B7;&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C1;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5869;&#x57FA;&#x9664;&#x53BB;&#x4FEE;&#x5FA9; (BER) &#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F; p53 &#x4F9D;&#x5B58;&#x6027; DNA &#x4FEE;&#x7406;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x62E1;&#x5F35;&#x306B;&#x5373;&#x6642;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;DNA &#x640D;&#x50B7;&#x5264;&#x306E;&#x9AD8;&#x7528;&#x91CF;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306F; p53 &#x4F9D;&#x5B58;&#x6027; DNA &#x4FEE;&#x5FA9;&#x3068; p53 &#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306B;&#x524A;&#x6E1B;&#x7D50;&#x679C;&#x3002;P53 &#x4E0A;&#x6D41;&#x5206;&#x5B50;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x5206;&#x6790;&#x306F;&#x3001;p53 &#x95A2;&#x9023; DNA &#x4FEE;&#x7406;&#x306E;&#x898F;&#x5236; ATM &#x4F9D;&#x5B58;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;Ser376 p53 &#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E; C &#x672B;&#x7AEF;&#x306E;&#x8131;&#x71D0;&#x9178;&#x5316; DNA &#x4FEE;&#x5FA9;&#x306E;&#x4FC3;&#x9032;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x304C;&#x3001;N &#x672B;&#x7AEF; Ser15 &#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316; DNA &#x4FEE;&#x5FA9;&#x306E;&#x524A;&#x6E1B;&#x3067;&#x7D50;&#x679C;&#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5F8C;&#x8005;&#x3082;&#x76F8;&#x95A2;&#x6A5F;&#x80FD;&#x62E1;&#x5F35;&#x306B;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E; DNA &#x7D50;&#x5408;&#x6D3B;&#x6027;&#x3068;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6709;&#x5BB3;&#x306A;&#x30A8;&#x30FC;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x30C8; &#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF; &#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;, &#x524D;&#x306E;&#x30AB;&#x30B9;&#x30D1;&#x30FC;&#x30BC;&#x963B;&#x5BB3;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x306B;&#x306F;&#x3001;DNA &#x4FEE;&#x5FA9;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306B;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x5F71;&#x97FF;&#x306F;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x53D6;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x306F; p53 &#x4F9D;&#x5B58;&#x6027; DNA &#x4FEE;&#x5FA9;&#x3084;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x306F;&#x3001;&#x304A;&#x305D;&#x3089;&#x304F;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x5C0E;&#x5165;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x907A;&#x4F1D;&#x6BD2;&#x6027;&#x30A8;&#x30FC;&#x30B8;&#x30A7;&#x30F3;&#x30C8; &#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5236;&#x5FA1;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

P53 &#x4F9D;&#x5B58;&#x7684;&#x306A; DNA &#x306E;&#x767A;&#x75C7;&#x3092;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x7D2F;&#x7A4D;&#x640D;&#x50B7; DNA &#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6C7A;&#x307E;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

P53 &#xC885;&#xC591; &#xC5B5;&#xC81C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; apoptosis &#xBC0F; &#xAC8C;&#xB188; &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC911;&#xCD94;&#xB294; DNA &#xBCF5;&#xAD6C; &#xACBD;&#xB85C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xAC10;&#xB9C8; &#xBC29;&#xC0AC;&#xC120; &#xB610;&#xB294; cisplatin&#xC758; &#xB0AE;&#xC740; &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9;&#xACFC; &#xC140; &#xCE58;&#xB8CC; p53 &#xC885;&#xC18D; DNA &#xC218;&#xB9AC;, &#xAE30;&#xBCF8; &#xC808;&#xB2E8; &#xBCF5;&#xAD6C; (BER) &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCE21;&#xC815;&#xC758; &#xC989;&#xAC01;&#xC801;&#xC778; &#xAC1C;&#xC120; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xACE0;&#xC6A9;&#xB7C9; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8; &#xC190;&#xC0C1; DNA&#xC640; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xCE58;&#xB8CC; &#xACB0;&#xACFC; p53 &#xC885;&#xC18D; DNA &#xC218;&#xB9AC;&#xC640; p53 &#xC885;&#xC18D; apoptosis &#xC720;&#xB3C4; &#xAC10;&#xC18C;. P53 &#xC5C5;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9BC; &#xBD84;&#xC790; &#xC0AC;&#xAC74;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D; &#xC81C;&#xC548; p53 &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; DNA &#xC218;&#xB9AC;&#xC758; &#xADDC;&#xC81C;&#xB294; ATM&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2E4;&#xB985;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; p53 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; C-&#xB9D0;&#xB2E8;&#xC5D0; ser376&#xC758; dephosphorylation &#xAE30;&#xB2A5; &#xCD94;&#xAC00; DNA &#xBCF5;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xB3D9;&#xC548;, N-&#xD130;&#xBBF8;&#xB110; ser15&#xC5D0;&#xC11C; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; DNA &#xBCF5;&#xAD6C; &#xAC10;&#xC18C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACB0;&#xACFC; &#xAD00;&#xCC30; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD6C4;&#xC790;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xD2B9;&#xC815; DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xD65C;&#xB3D9; &#xBC0F; apoptosis &#xC720;&#xB3C4; &#xAC15;&#xD654;&#xC640;&#xC758; &#xC0C1;&#xAD00; &#xAD00;&#xACC4;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC190;&#xC0C1; &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8; &#xCC28;&#xB2E8; apoptosis caspase &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xB85C; &#xC138;&#xD3EC; &#xCE58;&#xB8CC;&#xAC00; &#xD588;&#xB2E4; DNA &#xC218;&#xB9AC; &#xD328;&#xD134;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC8FC;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD568;&#xAED8; &#xCC0D;&#xC740;&#xC774; p53 &#xC885;&#xC18D; DNA &#xC218;&#xB9AC; &#xB610;&#xB294; apoptosis&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC140;&#xC758; &#xACB0;&#xC815; &#xC140; &#xB3C4;&#xC785; genotoxic &#xC5D0;&#xC774;&#xC804;&#xD2B8;&#xC758; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC81C;&#xC5B4; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xC544;&#xB9C8; &#xB098;&#xC654;&#xB2E4;.

P53 &#xC885;&#xC18D; DNA&#xC758; &#xBC1C;&#xBCD1; &#xC218;&#xB9AC; &#xB610;&#xB294; apoptosis &#xCD95;&#xC801; &#xB41C; &#xC190;&#xC0C1; &#xB41C; DNA&#xC758; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xACB0;&#xC815; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

El gene de supresor del tumor p53 desempe&ntilde;a un papel importante en las v&iacute;as de reparaci&oacute;n del ADN que son cruciales para la estabilidad gen&oacute;mica y la apoptosis. Aqu&iacute; mostramos que el tratamiento de las c&eacute;lulas con dosis bajas de radiaci&oacute;n gamma o cisplatino result&oacute; en una mejora inmediata de la reparaci&oacute;n del ADN dependiente de p53, midiendo la actividad de reparaci&oacute;n (BER) supresi&oacute;n de base. Sin embargo, el tratamiento de c&eacute;lulas con altas dosis de ADN da&ntilde;ando agentes result&oacute; en una reducci&oacute;n en la reparaci&oacute;n del ADN dependiente de p53 y en la inducci&oacute;n de apoptosis dependiente de p53. An&aacute;lisis de eventos moleculares aguas arriba de la p53 sugieren que la regulaci&oacute;n de reparaci&oacute;n del ADN asociada a p53 es ATM-dependiente. Adem&aacute;s, observamos que mientras que desfosforilaci&oacute;n de Ser376 en el c-terminal de la prote&iacute;na p53 se asoci&oacute; con el realce en la reparaci&oacute;n del ADN, fosforilaci&oacute;n en el N-terminal Ser15 dio lugar a la reducci&oacute;n en la reparaci&oacute;n del ADN. El &uacute;ltimo tambi&eacute;n est&aacute; en correlaci&oacute;n con una mejora en la actividad espec&iacute;fica de la Uni&oacute;n de ADN y en la inducci&oacute;n de apoptosis. Tratamiento de c&eacute;lulas con un inhibidor de la caspasa, antes de la apoptosis bloqueado agente perjudicial, no influy&oacute; en el patr&oacute;n de reparaci&oacute;n del ADN. Tomados en conjunto, esto sugiere que la decisi&oacute;n de c&eacute;lulas para inducir una reparaci&oacute;n del ADN dependiente de p53 o apoptosis probablemente es controlada por el nivel de agente genot&oacute;xico introducido a las c&eacute;lulas.

La aparici&oacute;n de DNA dependiente de p53 reparar o apoptosis es determinado por el nivel de ADN da&ntilde;ado acumulada.

&#x65B0;&#x578B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x957F;&#x8C03;&#x8282;&#x5242;&#xFF0C;&#x540D;&#x4E3A; Falkor&#xFF0C;&#x662F;&#x4F7F;&#x7528;&#x51FD;&#x6570;&#x65B9;&#x6CD5;&#x5BF9;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x514B;&#x9686;&#x3001; &#x57FA;&#x56E0;&#x6291;&#x764C;&#x5143;&#x7D20; (GSE) &#x65B9;&#x6CD5;&#x786E;&#x5B9A;&#x7684;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x5C4F;&#x5E55;&#x4E2D;&#xFF0C;Falkor &#x7684; C &#x672B;&#x7AEF;&#x57DF;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E0E;&#x987A;&#x94C2;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x751F;&#x957F;&#x62D2;&#x6355;&#x8D4B;&#x4E88;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;C &#x603B;&#x7AD9; Falkor&#xFF0C;&#x800C;&#x4E0D;&#x662F;&#x5168;&#x957F;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x589E;&#x5F3A;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x751F;&#x957F;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x9057;&#x4F20;&#x6BD2;&#x6027;&#x5E94;&#x529B;&#x548C;&#x5728;&#x6B63;&#x5E38;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x63D0;&#x51FA;&#x7684;&#x8FD9;&#x79CD;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x957F;&#x63A7;&#x5236;&#x7684;&#x4E00;&#x822C;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x5F71;&#x54CD; C &#x603B;&#x7AD9;&#x7247;&#x6BB5;&#x88AB;&#x6B63;&#x5F0F;&#x5E9F;&#x6B62;&#x7684;&#x8FC7;&#x91CF;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x5168;&#x957F; Falkor&#xFF0C;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E;&#x8BE5;&#x7247;&#x6BB5;&#x62B5;&#x6D88;&#x5168;&#x957F;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;Falkor &#x88AB;&#x7F16;&#x7801;&#x7684; 2 kb mRNA &#x662F;&#x76EE;&#x524D;&#x5728;&#x4E0D;&#x540C;&#x7EA7;&#x522B;&#x7684;&#x5404;&#x79CD;&#x7EC4;&#x7EC7;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x4E2D;&#x8FDB;&#x884C;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x3002;Falkor&#xFF0C;&#x4ECE; GSE &#x5E93;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x5B64;&#x7ACB;&#x7684; C &#x672B;&#x7AEF;&#x57DF;&#x4E2D;&#x5177;&#x6709;&#x91CD;&#x5927;&#x540C;&#x6E90;&#x5230;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5DF2;&#x77E5;&#x7684;&#x4EBA;&#x6743;&#x548C;&#x5927;&#x9F20;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x957F;&#x8C03;&#x8282;&#x5242;&#xFF0C;SM-20 &#x548C;&#x7EBF;&#x866B;&#x86CB;&#x767D; EGL 9&#xFF0C;&#x6700;&#x8FD1;&#x6240;&#x793A;&#x4FEE;&#x6539;&#x7F3A;&#x6C27;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x56E0;&#x5B50;-1alpha&#x3002;&#x540C;&#x6E90;&#x6027;&#x8868;&#x660E;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5171;&#x4EAB;&#x529F;&#x80FD;&#x57DF;&#xFF0C;&#x4FDD;&#x5B88;&#x7684;&#x751F;&#x957F;&#x8C03;&#x63A7;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x3002;

Falkor &#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x9057;&#x4F20;&#x5C4F;&#x5E55;&#x88AB;&#x9694;&#x79BB;&#x7684;&#x65B0;&#x578B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x957F;&#x8C03;&#x8282;&#x5242;&#x3002;

A novel cell growth regulator, named Falkor, was identified using a functional approach to mammalian gene cloning, the Genetic Supressor Elements (GSE) method. In this screen, expression of the C-terminal domain of Falkor conferred cells with resistance to cisplatin-induced growth arrest. Expression of the C-terminus of Falkor, but not of the full-length protein, enhanced cell growth both following genotoxic stress and under normal conditions suggesting a general role for this protein in cell growth control. This effect of the C-terminus fragment was abrogated by over-expression of the full-length Falkor, suggesting that the fragment counteracts the function of the full-length protein. Falkor is encoded by a 2-kb mRNA which is present at different levels in various tissues, and is localized in the nucleus of cells. The C-terminal domain of Falkor, isolated from the GSE library, has significant homology to a known human and rat cell growth regulator, SM-20, and to the C. elegans protein EGL-9, recently shown to modify the Hypoxia Inducible Factor-1alpha. The homology suggests that these proteins share a functional domain that is conserved among a family of growth regulation proteins.

Falkor, a novel cell growth regulator isolated by a functional genetic screen.

Un r&eacute;gulateur de croissance de nouvelles cellules, appel&eacute; Falkor, a &eacute;t&eacute; identifi&eacute; &agrave; l&#39;aide d&#39;une approche fonctionnelle de clonage, la m&eacute;thode g&eacute;n&eacute;tique montrant des &eacute;l&eacute;ments (GSE) de g&egrave;nes chez les mammif&egrave;res. Dans cet &eacute;cran, expression du domaine C-terminal de Falkor conf&eacute;r&eacute; des cellules r&eacute;sistantes &agrave; l&#39;arr&ecirc;t de la croissance induite par le cisplatine. Expression de l&#39;extr&eacute;mit&eacute; C-terminale de Falkor, mais pas de la prot&eacute;ine sur toute la longueur, la croissance cellulaire am&eacute;lior&eacute; les deux suite &agrave; un stress g&eacute;notoxiques et dans des conditions normales, ce qui sugg&egrave;re un r&ocirc;le g&eacute;n&eacute;ral de cette prot&eacute;ine dans le contr&ocirc;le de la croissance cellulaire. Cet effet du fragment C-terminal a &eacute;t&eacute; abrog&eacute; par la surexpression de la Falkor sur toute la longueur, ce qui sugg&egrave;re que le fragment s&#39;oppose &agrave; la fonction de la prot&eacute;ine de pleine longueur. Falkor est cod&eacute;e par un ARNm de 2 Ko qui est pr&eacute;sent &agrave; diff&eacute;rents niveaux dans divers tissus et est localis&eacute;e dans le noyau des cellules. Le domaine C-terminal de Falkor, isol&eacute; de la biblioth&egrave;que GSE, a une homologie significative &agrave; un homme connu et un r&eacute;gulateur de croissance de cellules de rat, SM-20 et &agrave; la prot&eacute;ine c. elegans EGL-9, a r&eacute;cemment d&eacute;montr&eacute; que modifier l&#39;Hypoxia Inducible Factor-1alpha. L&#39;homologie sugg&egrave;re que ces prot&eacute;ines partagent un domaine fonctionnel qui est conserv&eacute; parmi une famille de prot&eacute;ines de r&eacute;gulation de la croissance.

Falkor, un r&eacute;gulateur de croissance de nouvelles cellules isol&eacute; par un d&eacute;pistage g&eacute;n&eacute;tique fonctionnelle.

Eine neuartige Zelle Wachstumsregler, benannt Fuchur, nannte eine funktionale Ansatz an S&auml;ugetier-gen Klonen, die genetische Tumorsuppressorgens Elemente (GSE)-Methode. In diesem Bildschirm konferierte Ausdruck der C-terminalen Dom&auml;ne von Fuchur Zellen mit Resistenz gegen Cisplatin-induzierten Wachstumanhalten. Ausdruck von der C-Terminus Fuchur, nicht aber das in Protein, verst&auml;rkten Zellwachstum sowohl nach genotoxischen Stress und unter normalen Bedingungen schl&auml;gt eine allgemeine Rolle f&uuml;r dieses Protein in Zelle Wachstum-Steuerelement. Dieser Effekt des Fragments C-Terminus wurde aufgehoben durch &Uuml;berexpression von der in Fuchur, was darauf hindeutet, dass das Fragment die Funktion des Proteins in entgegenwirkt. Fuchur ist durch eine 2-kb-mRNA kodiert, die auf verschiedenen Ebenen in verschiedenen Geweben vorhanden ist und wird in den Kern der Zellen lokalisiert. Die C-terminalen Dom&auml;ne von Fuchur, isoliert aus der GSE-Bibliothek hat deutliche Homologie zu einem bekannten humanen und Ratte Zelle Wachstumsregler, SM-20, und das Protein C. Elegans EGL-9, k&uuml;rzlich gezeigt, dass die Hypoxia Inducible Factor-1alpha &auml;ndern. Die Homologie legt nahe, dass diese Proteine eine funktionale Dom&auml;ne teilen, die unter einer Familie der Wachstum Verordnung Proteine erhalten bleibt.

Fuchur, eine neuartige Zelle Wachstumsregler durch einen funktionalen genetischer Schirm isoliert.

Un regolatore di crescita delle cellule romanzo, denominato Falkor, &egrave; stato identificato usando un approccio funzionale al gene mammifero clonazione, il metodo genetico soppressore elementi (GSE). In questa schermata, espressione del dominio C-terminale di Falkor conferito le cellule con resistenza all&#39;arresto della crescita indotta da cisplatino. Espressione di C-terminale di Falkor, ma non della proteina full-length, crescita cellulare avanzata sia seguendo lo stress genotossici e in condizioni normali, suggerendo un ruolo generale di questa proteina nel controllo della crescita cellulare. Questo effetto del frammento C-terminale &egrave; stato abrogato dalla sovraespressione di Falkor il full-length, suggerendo che il frammento contrasta la funzione della proteina full-length. Falkor &egrave; codificato da un 2-kb mRNA che &egrave; presente a diversi livelli in vari tessuti ed &egrave; localizzato nel nucleo delle cellule. Il dominio C-terminale di Falkor, isolato dalla libreria GSE, ha notevole omologia ad un uomo conosciuto e regolatore di crescita di cellule di ratto, SM-20 e per la proteina c. elegans EGL-9, recentemente mostrato a modificare l&#39;Hypoxia Inducible Factor-1alpha. L&#39;omologia suggerisce che queste proteine condividono un dominio funzionale che &egrave; conservato tra una famiglia di proteine di regolazione di crescita.

Falkor, un regolatore di crescita cellulare romanzo isolato da uno schermo di genetico funzionale.

Falkor&#x3001;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x540D;&#x524D;&#x306E;&#x65B0;&#x898F;&#x7D30;&#x80DE;&#x6210;&#x9577;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x6291;&#x5236;&#x8981;&#x7D20; (GSE) &#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x3092;&#x30D5;&#x30A1;&#x30F3;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30CA;&#x30EB; &#x30FB; &#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x753B;&#x9762;&#x3067;&#x306F;&#x3001;Falkor &#x306E; C &#x672B;&#x7AEF;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x7D30;&#x80DE;&#x30B7;&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C1;&#x30F3;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x902E;&#x6355;&#x306B;&#x62B5;&#x6297;&#x3092;&#x6388;&#x4E0E;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Falkor &#x306E;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x30D5;&#x30EB;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B0;&#x30B9;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x306F;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E; C &#x672B;&#x7AEF;&#x306E;&#x5F0F;&#x306F;&#x3001;&#x6B21;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x6BD2;&#x6027;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x3001;&#x901A;&#x5E38;&#x306E;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x3067;&#x3053;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x7D30;&#x80DE;&#x6210;&#x9577;&#x5236;&#x5FA1;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x306E; C &#x672B;&#x7AEF;&#x30D5;&#x30E9;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x30D5;&#x30E9;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306F;&#x30D5;&#x30EB;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B0;&#x30B9;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x6253;&#x3061;&#x6D88;&#x3059;&#x793A;&#x5506;&#x30D5;&#x30EB;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B0;&#x30B9;&#x306E; Falkor &#x306E;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x3088;&#x308B; abrogated &#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;Falkor &#x306F;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x7D44;&#x7E54;&#x3067;&#x306F;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6838;&#x3067;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B; 2 kb &#x306E; mRNA &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;GSE &#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA;&#x304B;&#x3089;&#x5206;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x305F; Falkor &#x306E; C &#x672B;&#x7AEF;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x304C;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x76F8;&#x540C;&#x3092;&#x65E2;&#x77E5;&#x306E;&#x30D2;&#x30C8;&#x3068;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x7D30;&#x80DE;&#x6210;&#x9577;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;SM-20 &#x3068;&#x7DDA;&#x866B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; EGL-9 &#x6700;&#x8FD1;&#x4F4E;&#x9178;&#x7D20;&#x8A98;&#x5C0E;&#x56E0;&#x5B50; 1 &alpha; &#x306E;&#x5909;&#x66F4;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x76F8;&#x540C;&#x6027;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x5BB6;&#x65CF;&#x306E;&#x9593;&#x3067;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306A;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x5171;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Falkor &#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B66;&#x7684;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5206;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x65B0;&#x898F;&#x7D30;&#x80DE;&#x6210;&#x9577;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x3002;

Falkor, &#xB77C;&#xB294; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC138;&#xD3EC; &#xC131;&#xC7A5; &#xC870;&#xC808;&#xAE30; functional &#xC811;&#xADFC; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD074;&#xB85C;&#xB2DD;, &#xC720;&#xC804;&#xC790; Supressor &#xC694;&#xC18C; (GSE) &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xD654;&#xBA74; &#xD45C;&#xD604;&#xC758; Falkor&#xC758; C-&#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; cisplatin &#xC720;&#xBC1C; &#xC131;&#xC7A5; &#xCCB4;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC800;&#xD56D; &#xC140; &#xC218; &#xC5EC;. C-&#xB9D0;&#xB2E8; Falkor, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC804;&#xCCB4; &#xAE38;&#xC774; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;, &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC131;&#xC7A5; &#xD558;&#xC9C0; &#xC2DD; &#xCC28;&#xC801;&#xC778; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xC640; &#xC138;&#xD3EC; &#xC131;&#xC7A5; &#xC81C;&#xC5B4;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC774; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC77C;&#xBC18; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xC870;&#xAC74; &#xD558;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. C-&#xB9D0;&#xB2E8; &#xC870;&#xAC01;&#xC740;&#xC774; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC870;&#xAC01; &#xC911;&#xD654; &#xC804;&#xCCB4; &#xAE38;&#xC774; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; &#xC804;&#xCCB4; &#xAE38;&#xC774; Falkor&#xC758; over-expression&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD3D0;&#xC9C0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC11C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xC788;&#xACE0; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD575;&#xC5D0; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;&#xB294; 2 kb Mrna&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; Falkor&#xAC00; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. Falkor, GSE &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB7EC;&#xB9AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACE0;&#xB9BD; &#xB41C;&#xC758; C-&#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC740; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC0C1; &#xB3D9; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4; &#xC778;&#xAC04;&#xACFC; &#xC950; &#xC138;&#xD3EC; &#xC131;&#xC7A5; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;, SM 20 C. elegans &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; EGL-9, &#xCD5C;&#xADFC; Hypoxia &#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xD329;&#xD130; 1alpha &#xC218;&#xC815; &#xD45C;&#xC2DC;&#xB97C; &#xD558; &#xACE0;. Homology &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC131;&#xC7A5; &#xC870;&#xC808; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xAC00;&#xC871; &#xAC00;&#xC6B4;&#xB370; &#xBCF4;&#xC874; &#xAE30;&#xB2A5; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC744; &#xACF5;&#xC720; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Falkor, &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD654;&#xBA74;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xACE0;&#xB9BD; &#xB41C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC138;&#xD3EC; &#xC131;&#xC7A5; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;.

Un regulador del crecimiento de nuevas c&eacute;lulas, llamado Falkor, fue identificado usando un enfoque funcional para mam&iacute;fero gene clonaci&oacute;n, el m&eacute;todo de elementos de un gen&eacute;tico (GSE). En esta pantalla, expresi&oacute;n del dominio c-terminal de Falkor confiri&oacute; c&eacute;lulas con resistencia a la detenci&oacute;n de crecimiento inducida por cisplatino. Expresi&oacute;n de la c-terminal de Falkor, pero no de la prote&iacute;na integral, celular de mayor crecimiento despu&eacute;s de estr&eacute;s genot&oacute;xico y bajo condiciones normales, sugiriendo un papel general para esta prote&iacute;na en el control del crecimiento celular. Este efecto del fragmento c-terminal fue abrogada por la sobreexpresi&oacute;n de la larga duraci&oacute;n Falkor, sugiriendo que el fragmento contrarresta la funci&oacute;n de la prote&iacute;na integral. Falkor est&aacute; codificada por un mRNA de 2 kb que est&aacute; presente en diferentes niveles en varios tejidos y se localiza en el n&uacute;cleo de las c&eacute;lulas. El dominio c-terminal de Falkor, aislado de la biblioteca GSE, tiene homolog&iacute;a significativa a un humano conocido y regulador de crecimiento de la c&eacute;lula de rata, SM-20 y a la prote&iacute;na C. elegans EGL-9, demostrado recientemente para modificar el Factor-1 alfa inducible por la hipoxia. La homolog&iacute;a sugiere que estas prote&iacute;nas comparten un dominio funcional que se conserva en una familia de prote&iacute;nas de regulaci&oacute;n del crecimiento.

Falkor, un regulador del crecimiento celular novela aislado por una pantalla gen&eacute;tica funcional.

Many tumorigenic p53 mutants gain a common antigenic epitope that is recognized by the PAb-240 antibody. Database search identified the presence of this epitope in several other proteins, including several antibodies and the catalytic subunit of mouse telomerase, mTERT. These antibodies may represent a part of the previously demonstrated anti-idiotypic network built around p53. In the present study we demonstrate that the PAb-240 antibody was able to inhibit telomerase activity in extracts from both mouse and human tumor cells. The recognition of mTERT by PAb-240 is demonstrated by Western blotting and by using blocking peptides derived from mTERT. The existence of a shared epitope between mutant p53 and telomerase may suggest that the two proteins contribute to malignant transformation through a common pathway.

The murine telomerase catalytic subunit shares the PAb-240 mutant specific epitope of the p53 protein.

&#x8BB8;&#x591A;&#x81F4;&#x7624; p53 &#x7A81;&#x53D8;&#x83B7;&#x5F97;&#x5171;&#x540C;&#x7684;&#x6297;&#x539F;&#x591A;&#x80BD;&#x662F;&#x8BC6;&#x522B;&#x7684; PAb 240 &#x6297;&#x4F53;&#x3002;&#x6570;&#x636E;&#x5E93;&#x641C;&#x7D22;&#x786E;&#x5B9A;&#x6B64;&#x6297;&#x539F;&#x8868;&#x4F4D;&#x5728;&#x51E0;&#x4E2A;&#x5176;&#x4ED6;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x51E0;&#x4E2A;&#x6297;&#x4F53;&#x548C; mTERT &#x9F20;&#x6807;&#xFF0C;&#x7AEF;&#x7C92;&#x9176;&#x50AC;&#x5316;&#x4E9A;&#x5355;&#x4F4D;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6297;&#x4F53;&#x53EF;&#x80FD;&#x4EE3;&#x8868;&#x56F4;&#x7ED5; p53 &#x4EE5;&#x524D;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x7684;&#x6297;&#x72EC;&#x7279;&#x578B;&#x7F51;&#x7EDC;&#x7684;&#x4E00;&#x90E8;&#x5206;&#x3002;&#x5728;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC1;&#x660E; PAb 240 &#x6297;&#x4F53;&#x662F;&#x80FD;&#x591F;&#x6291;&#x5236;&#x63D0;&#x53D6;&#x7269;&#x9F20;&#x6807;&#x548C;&#x80BF;&#x7624;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x7AEF;&#x7C92;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x627F;&#x8BA4;&#x7684; PAb 240 mTERT &#x7684;&#x8868;&#x73B0;&#x662F;&#x901A;&#x8FC7;&#x897F;&#x65B9;&#x86CB;&#x767D;&#x5370;&#x8FF9;&#x548C;&#x4F7F;&#x7528;&#x4ECE; mTERT &#x6D3E;&#x751F;&#x7684;&#x963B;&#x585E;&#x591A;&#x80BD;&#x3002;&#x5171;&#x4EAB;&#x7684;&#x6297;&#x539F;&#x8868;&#x4F4D;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7A81;&#x53D8;&#x7684; p53 &#x548C;&#x7AEF;&#x7C92;&#x9176;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x53EF;&#x80FD;&#x8868;&#x660E;&#x4E24;&#x4E2A;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x901A;&#x8FC7;&#x5171;&#x540C;&#x901A;&#x8DEF;&#x7684;&#x6076;&#x6027;&#x8F6C;&#x5316;&#x3002;

&#x5C0F;&#x9F20;&#x7AEF;&#x7C92;&#x9176;&#x50AC;&#x5316;&#x4E9A;&#x5355;&#x4F4D;&#x5171;&#x4EAB; p53 &#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x6297;&#x539F; PAb 240&#x3002;

Plusieurs mutants p53 tumorig&egrave;nes gagnent un &eacute;pitope antig&eacute;nique commun qui est reconnu par l&#39;anticorps PAb-240. Recherche de base de donn&eacute;es identifi&eacute; la pr&eacute;sence de cet &eacute;pitope dans plusieurs autres prot&eacute;ines, y compris plusieurs anticorps et la sous-unit&eacute; catalytique de la t&eacute;lom&eacute;rase souris, mTERT. Ces anticorps peuvent repr&eacute;senter une partie du r&eacute;seau anti-idiotypiques d&eacute;montr&eacute;e pr&eacute;c&eacute;demment construit autour de p53. Dans la pr&eacute;sente &eacute;tude, nous d&eacute;montrons que l&#39;anticorps de PAb-240 est capable d&#39;inhiber l&#39;activit&eacute; de la t&eacute;lom&eacute;rase dans les extraits de souris et de cellules tumorales humaines. La reconnaissance des mTERT par PAb-240 est d&eacute;montr&eacute;e en &eacute;pongeant occidental et blocage des peptides d&eacute;riv&eacute;s de la mTERT. L&#39;existence d&#39;un &eacute;pitope partag&eacute; entre les mutants de p53 et de la t&eacute;lom&eacute;rase pourrait sugg&eacute;rer que les deux prot&eacute;ines contribuent &agrave; la transformation maligne par une voie commune.

La sous-unit&eacute; catalytique de la t&eacute;lom&eacute;rase murin partage la PAb-240 mutant &eacute;pitope sp&eacute;cifique de la prot&eacute;ine p53.

Viele tumorigenic p53-Mutanten gewinnen, eine gemeinsame Antigene Epitope, die von der PAb-240-Antik&ouml;rper erkannt wird. Suche in der Datenbank identifiziert das Vorhandensein dieser Epitop in mehreren anderen Proteinen, darunter mehrere Antik&ouml;rper und die katalytische Untereinheit der Maus Telomerase, mTERT. Diese Antik&ouml;rper k&ouml;nnen einen Teil der zuvor nachgewiesene Anti-Idiotypic-Netzwerk rund um p53 vertreten. In der vorliegenden Studie zeigen wir, dass der PAb-240-Antik&ouml;rper Telomerase-Aktivit&auml;t in Ausz&uuml;ge aus Maus und menschlichen Tumorzellen hemmen konnte. Die Anerkennung der mTERT von PAb-240 wird von westlichen befleckenden und mithilfe von blockierenden Peptide aus mTERT demonstriert. Die Existenz einer gemeinsamen Epitop zwischen mutierten p53 und Telomerase schl&auml;gt m&ouml;glicherweise vor, dass zwei Proteine zur malignen Transformation durch einen gemeinsamen Weg beitragen.

Die katalytische Untereinheit der murinen Telomerase teilt die PAb-240 mutant spezifische Epitope des Proteins p53.

Molti mutanti di p53 tumorigeno guadagnano un epitopo antigenico comune che &egrave; riconosciuto dall&#39;anticorpo PAb-240. Ricerca nei database identificato la presenza di questo epitopo in diverse altre proteine, tra cui diversi anticorpi e la subunit&agrave; catalitica della telomerasi mouse, mTERT. Questi anticorpi possono rappresentare una parte della rete in precedenza dimostrato anti-idiotypic costruita intorno a p53. Nel presente studio ci dimostrano che l&#39;anticorpo PAb-240 &egrave; stata in grado di inibire l&#39;attivit&agrave; telomerasica in estratti da mouse e da cellule tumorali umane. Il riconoscimento di mTERT da PAb-240 &egrave; dimostrato macchiantesi occidentali e utilizzando blocchi peptidi derivati da mTERT. L&#39;esistenza di un epitopo condiviso tra p53 mutante e telomerasi pu&ograve; suggerire che le due proteine contribuiscono alla trasformazione maligna attraverso un percorso comune.

La subunit&agrave; catalitica della telomerasi murino condivide l&#39;epitopo specifico mutante PAb-240 della proteina p53.

&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x767A;&#x764C;&#x6027; p53 &#x5909;&#x7570; PAb 240 &#x6297;&#x4F53;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A8D;&#x8B58;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x5171;&#x901A;&#x306E;&#x6297;&#x539F;&#x6027;&#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7;&#x3092;&#x5F97;&#x308B;&#x3002;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x691C;&#x7D22;&#x3053;&#x306E;&#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x6297;&#x4F53;&#x3068; mTERT &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9; &#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x89E6;&#x5A92;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x4ED6;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6297;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;p53 &#x306E;&#x5468;&#x308A;&#x3092;&#x69CB;&#x7BC9;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6297;&#x30A4;&#x30C7;&#x30A3;&#x30AA; &#x30BF;&#x30A4;&#x30D7; &#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x306E;&#x90E8;&#x5206;&#x3092;&#x8868;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F; PAb 240 &#x6297;&#x4F53;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x3072;&#x3068;&#x816B;&#x760D;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x62BD;&#x51FA;&#x7269;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;PAb 240 mTERT &#x306E;&#x8A8D;&#x8B58;&#x306F;&#x897F;&#x90E8;&#x306E;&#x3057;&#x307F;&#x304C;&#x4ED8;&#x304F;&#x3068; mTERT &#x304B;&#x3089;&#x6D3E;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AD;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C3;&#x30C9;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5171;&#x6709;&#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7;&#x9593;&#x5909;&#x7570; p53 &#x3068;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x306F;&#x3001;2 &#x3064;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x304C;&#x60AA;&#x6027;&#x306E;&#x5909;&#x63DB;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x8CA2;&#x732E;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3002;

&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x89E6;&#x5A92;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8; p53 &#x86CB;&#x767D;&#x306E; PAb 240 &#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x30A8;&#x30D4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30D7;&#x3068;&#x5171;&#x6709;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xB9CE;&#xC740; tumorigenic p53 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; PAb 240 &#xD56D; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC778;&#xC2DD; &#xB418;&#xB294; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; antigenic epitope&#xB97C; &#xC5BB;&#xC744;. &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xBCA0;&#xC774;&#xC2A4; &#xAC80;&#xC0C9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC00;&#xC9C0; &#xD56D; &#xCCB4;&#xC640; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; telomerase, Mtert&#xC758; &#xCD09;&#xB9E4; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xB2E4;&#xB978; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC00;&#xC9C0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC774;&#xC774; epitope&#xC758; &#xC874;&#xC7AC; &#xD655;&#xC778;. &#xC774; &#xD56D; &#xCCB4;&#xB294; p53 &#xC911;&#xC2EC;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD6C;&#xCD95; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xAC80;&#xC99D; &#xB41C; &#xC548;&#xD2F0;-idiotypic &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C;&#xC758; &#xC77C;&#xBD80;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0BC; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD604;&#xC7AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; PAb 240 &#xD56D; &#xCCB4;&#xB294; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC640; &#xC778;&#xAC04; &#xC885;&#xC591; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCD94;&#xCD9C;&#xC5D0;&#xC11C; telomerase &#xD65C;&#xB3D9; &#xC5B5;&#xC81C; &#xC218; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC11C; &#xB7FD; &#xACE0; Mtert&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xCC28;&#xB2E8; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; PAb 240 &#xC5EC; Mtert&#xC758; &#xC778;&#xC2DD;&#xC740; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; p53 telomerase &#xC0AC;&#xC774; &#xACF5;&#xC720; epitope&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xB294; &#xB450; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xACBD;&#xB85C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC545;&#xC131; &#xBCC0;&#xD658;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xC81C;&#xC548;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Murine telomerase &#xCD09;&#xB9E4; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; p53 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; PAb 240 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xD2B9;&#xC815; epitope&#xB97C; &#xACF5;&#xC720;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Muchos mutantes de p53 tumor&iacute;geno ganan un ep&iacute;topo antig&eacute;nico com&uacute;n que es reconocido por el anticuerpo PAb-240. Base de datos b&uacute;squeda identific&oacute; la presencia de este ep&iacute;topo en varias otras prote&iacute;nas, incluyendo varios anticuerpos y la subunidad catal&iacute;tica de la telomerasa de rat&oacute;n, mTERT. Estos anticuerpos pueden representar una parte de la red anti-idiot&iacute;pica previamente demostrada en torno a p53. En este estudio demostramos que el anticuerpo PAb-240 fue capaz de inhibir la actividad de la telomerasa en extractos de rat&oacute;n y c&eacute;lulas tumorales humanas. El reconocimiento de mTERT por PAb-240 es demostrado por Western Blot y mediante bloqueo p&eacute;ptidos derivados de mTERT. La existencia de un ep&iacute;tope compartido entre mutante p53 y la telomerasa puede sugerir que las dos prote&iacute;nas contribuyen a la transformaci&oacute;n maligna a trav&eacute;s de un camino com&uacute;n.

La subunidad catal&iacute;tica de la telomerasa murino comparte el PAb-240 mutante epitopo espec&iacute;fico de la prote&iacute;na p53.

&#x7AEF;&#x7C92;&#x7F29;&#x77ED;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x539F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x590D;&#x5236;&#x8870;&#x8001;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x514B;&#x670D;&#x7531;&#x7AEF;&#x7C92;&#x9176; (hTERT) &#x8FC7;&#x5EA6;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x6C38;&#x751F;&#x5316;&#x662F;&#x6076;&#x6027;&#x8F6C;&#x5316;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x4E4B;&#x4E00;&#xFF0C;hTERT &#x6C38;&#x751F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x4ED4;&#x7EC6;&#x5206;&#x6790;&#x662F;&#x7406;&#x89E3;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x7684;&#x6781;&#x4E3A;&#x91CD;&#x8981;&#x3002;&#x4E3A;&#x6B64;&#x76EE;&#x7684;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x643A;&#x5E26; hTERT &#x57FA;&#x56E0;&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;&#x75C5;&#x6BD2;&#x611F;&#x67D3; WI-38 &#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x671F;&#x95F4; 600 &#x5929; [&#x5E76;&#x5927;&#x7EA6; 500 &#x4EBA;&#x53E3;&#x5408;&#x6570; (&#x4E13;&#x7EBF;)] &#x7684;&#x8FDE;&#x7EED;&#x57F9;&#x517B;&#x5206;&#x6790;&#x5176;&#x589E;&#x6B96;&#x6027;&#x7684;&#x884C;&#x4E3A;&#x3002;&#x540E;&#x7AEF;&#x7C92;&#x9176;&#x611F;&#x67D3;&#xFF0C;&#x5176;&#x6B21;&#x662F;&#x6E10;&#x8FDB;&#x7684;&#x52A0;&#x901F;&#x589E;&#x957F;&#x4E09;&#x79CD;&#x6587;&#x5316;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#xFF0C;&#x4E09;&#x4E2A;&#x72EC;&#x7ACB;&#x7684;&#x5927;&#x4F17;&#x6587;&#x5316;&#x7684;&#x589E;&#x957F;&#x662F;&#x7EDF;&#x4E00;&#x4E3A;&#x5927;&#x7EA6; 150 &#x4E13;&#x7EBF;&#x3002;P16(INK4A) &#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x662F;&#x5927;&#x5927;&#x63D0;&#x5347;&#x7684;&#x6C38;&#x751F;&#x5316;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x4F46;&#x9010;&#x6E10;&#x6D88;&#x5931;&#x5728;&#x52A0;&#x901F;&#x7684;&#x589E;&#x957F;&#x9636;&#x6BB5;&#x3002;&#x6B64;&#x6539;&#x5EFA;&#x4E0E;&#x5931;&#x53BB;&#x63A5;&#x89E6;&#x6291;&#x5236;&#x54CD;&#x5E94;&#x76F8;&#x5173;&#x548C;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x5546;&#x91CF;&#x5BF9; H-Ras &#x8BF1;&#x5BFC;&#x8F6C;&#x5316;&#x7684;&#x654F;&#x611F;&#x6027;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;p53 &#x548C; pRb &#x4ECB;&#x5BFC;&#x68C0;&#x67E5;&#x7AD9;&#x7B49; DNA &#x635F;&#x4F24;&#x53CD;&#x5E94;&#x3001; &#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x7684;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x548C;&#x5E73;&#x9759;&#x8FDB;&#x5165;&#x4ECD;&#x4FDD;&#x6301;&#x4E0D;&#x53D8;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x8BBA; INK4A &#x8F68;&#x8FF9;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;WI-38/hTERT &#x6587;&#x5316;&#x4E4B;&#x4E00;&#x7684;&#x52A0;&#x901F;&#x7684;&#x589E;&#x957F;&#x9636;&#x6BB5;&#x7684;&#x8BE6;&#x7EC6;&#x7684;&#x68C0;&#x67E5;&#x53D1;&#x73B0; c-myc &#x548C; Bmi-1 &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8FC7;&#x5EA6;&#x8868;&#x8FBE;&#x4EE5;&#x53CA; p14(ARF) &#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x635F;&#x5931;&#x3002;&#x96C6;&#x4F53;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x663E;&#x793A;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x5728;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21; 150 &#x4E13;&#x7EBF; hTERT &#x6C38;&#x751F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x540C;&#x6837;&#x884C;&#x4E3A;&#x539F;&#x4EE3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6587;&#x5316;&#x7684;&#x957F;&#x671F;&#x589E;&#x957F;&#x53EF;&#x80FD;&#x9752;&#x7750;&#x7684;&#x514B;&#x9686;&#x6267;&#x884C;&#x6F5C;&#x5728;&#x6076;&#x6027;&#x6539;&#x53D8;&#x5916;&#x89C2;&#x3002;

&#x957F;&#x671F;&#x7684;&#x57F9;&#x517B;&#x7684;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7AEF;&#x7C92;&#x9176;&#x6C38;&#x751F;&#x5BFC;&#x81F4;&#x764C;&#x524D;&#x7684;&#x8868;&#x578B;&#x3002;

Telomere shortening in primary human fibroblasts results in replicative senescence, which can be overcome by telomerase (hTERT) overexpression. However, because immortalization is one of the hallmarks of malignant transformation, careful analysis of hTERT-immortalized cells is of crucial importance for understanding both processes. To this end, we infected WI-38 fibroblasts with a retrovirus carrying the hTERT cDNA and analyzed their proliferative behavior during 600 days [ approximately 500 population doublings (PDLs)] of continuous culture. Growth of three independent mass cultures was uniform for approximately 150 PDLs after telomerase infection, followed by a progressive acceleration of growth in two of three cultures. Expression of p16(INK4A) was significantly elevated in the immortalized cells but gradually disappeared during the accelerated growth phase. This alteration correlated with loss of the contact inhibition response and conferred the cells with sensitivity to H-Ras-induced transformation. In contrast, the p53- and pRb-mediated checkpoints such as the DNA damage response, chromosomal stability and entry into quiescence remained intact, irrespective of INK4A locus expression. Importantly, detailed examination of one of the WI-38/hTERT cultures during the accelerated growth phase revealed overexpression of the c-myc and Bmi-1 oncogenes, as well as loss of p14(ARF) expression. Collectively, our results indicate that although hTERT-immortalized cells behave similarly to primary cells during the first 150 PDLs, long-term growth in culture may favor the appearance of clones carrying potentially malignant alterations.

Prolonged culture of telomerase-immortalized human fibroblasts leads to a premalignant phenotype.

T&eacute;lom&egrave;res raccourcissement dans les fibroblastes humains primaires se traduit par la s&eacute;nescence r&eacute;plicative, qui peut &ecirc;tre surmont&eacute;e par la surexpression de la t&eacute;lom&eacute;rase (hTERT). Cependant, parce que l&#39;immortalisation est l&#39;une des caract&eacute;ristiques de la transformation maligne, une analyse minutieuse des cellules immortalis&eacute;es par hTERT est d&#39;une importance cruciale pour comprendre les deux processus. &Agrave; cette fin, nous infect&eacute; par un r&eacute;trovirus transportant l&#39;ADNc hTERT fibroblastes WI-38 et analyser leur comportement prolif&eacute;rative pendant 600 jours [doublements de population environ 500 (PDLs)] de culture continue. La croissance des trois cultures de masse ind&eacute;pendants &eacute;tait uniforme pour environ 150 pr&ecirc;ts sur salaire apr&egrave;s l&#39;infection de la t&eacute;lom&eacute;rase, suivie d&#39;une acc&eacute;l&eacute;ration progressive de la croissance dans deux des trois cultures. Expression de p16(INK4A) &eacute;tait significativement plus &eacute;lev&eacute;e dans les cellules immortalis&eacute;es, mais peu &agrave; peu disparue au cours de la phase de croissance acc&eacute;l&eacute;r&eacute;e. Cette alt&eacute;ration en corr&eacute;lation avec la perte de la r&eacute;ponse de l&#39;inhibition de contact et a conf&eacute;r&eacute; les cellules pr&eacute;sentant une sensibilit&eacute; &agrave; la transformation induite par H-Ras. En revanche, les points de contr&ocirc;le par p53 et pRb comme l&#39;ADN endommagent r&eacute;ponse, stabilit&eacute; chromosomique et entr&eacute;e en quiescence est rest&eacute; intacts, sans tenir compte de l&#39;expression locus INK4A. Ce qui est important, un examen d&eacute;taill&eacute; de l&#39;une des cultures WI-38/hTERT pendant la phase de croissance acc&eacute;l&eacute;r&eacute;e a r&eacute;v&eacute;l&eacute; la surexpression des oncog&egrave;nes Bmi-1 et c-myc, ainsi qu&#39;une perte d&#39;expression p14(ARF). Dans l&#39;ensemble, nos r&eacute;sultats montrent que, bien que les cellules immortalis&eacute;es par hTERT ont un comportement semblable pour les piles primaires au cours des premi&egrave;re 150 pr&ecirc;ts sur salaire, la croissance &agrave; long terme dans la culture peut-&ecirc;tre favoriser l&#39;apparition de clones portant des modifications potentiellement malignes.

Culture prolong&eacute;e des fibroblastes humains immortalis&eacute;s de t&eacute;lom&eacute;rase m&egrave;ne &agrave; un ph&eacute;notype pr&eacute;canc&eacute;reux.

Telomere Verk&uuml;rzung im prim&auml;ren menschlichen Fibroblasten f&uuml;hrt Zellalterung, die durch Telomerase (hTERT) eine &Uuml;berexpression &uuml;berwunden werden kann. Da jedoch Immortalization ist eines der Kennzeichen einer malignen Transformation, ist sorgf&auml;ltiger Analyse der hTERT-verewigt Zellen von entscheidender Bedeutung f&uuml;r das Verst&auml;ndnis der beiden Prozesse. Zu diesem Zweck wir WI-38 Fibroblasten mit einen Retrovirus tragen das cDNA hTERT infiziert und analysiert ihre proliferative Verhalten w&auml;hrend 600 Tage [etwa 500 Einwohner Verdoppelungen (PDLs)] der kontinuierlichen Kultur. Wachstum von drei unabh&auml;ngigen mass Kulturen war f&uuml;r etwa 150 PDLs einheitlich nach Telomerase-Infektion, gefolgt von eine progressive Beschleunigung des Wachstums in zwei der drei Kulturen. Ausdruck der p16(INK4A) war deutlich erh&ouml;hte in den verewigt Zellen aber allm&auml;hlich verschwand w&auml;hrend der Beschleunigung des Wachstums-Phase. Diese Ver&auml;nderung korreliert mit Verlust der Kontakt Hemmung Antwort und &uuml;bertragen die Zellen mit Sensibilit&auml;t f&uuml;r H-Ras-induzierte Transformation. Im Gegensatz dazu die Pr&uuml;fpunkte p53 und pRb-vermittelten, wie die DNA besch&auml;digen Antwort, chromosomalen Stabilit&auml;t und Einstieg in Ruhe blieb erhalten, unabh&auml;ngig von INK4A Locus Ausdruck. Wichtig ist, offenbart eingehende Pr&uuml;fung eines der WI-38/hTERT Kulturen w&auml;hrend der Beschleunigung des Wachstums-Phase eine &Uuml;berexpression des c-Myc und Bmi-1 Onkogene, sowie Verlust von p14(ARF) Ausdruck. Gemeinsam zeigen unsere Ergebnisse, dass obwohl hTERT verewigt Zellen &auml;hnlich zu Prim&auml;rzellen w&auml;hrend der ersten 150 PDLs Verhalten, langfristiges Wachstum in der Kultur die Darstellung der Klone, die Ausf&uuml;hrung potenziell b&ouml;sartiger Ver&auml;nderungen beg&uuml;nstigen kann.

Verl&auml;ngerte Kultur der Telomerase-verewigt menschlichen Fibroblasten f&uuml;hrt zu einem pr&auml;maligne Ph&auml;notyp.

Telomero accorciamento in fibroblasti umani primari risultati in senescenza replicativa, che pu&ograve; essere superata mediante sovraespressione della telomerasi (hTERT). Tuttavia, poich&eacute; immortalization &egrave; uno dei tratti distintivi di una trasformazione maligna, un&#39;attenta analisi delle cellule immortalato hTERT &egrave; di cruciale importanza per la comprensione di entrambi i processi. A tal fine, abbiamo infettato da un retrovirus che trasportano il cDNA hTERT fibroblasti WI-38 e analizzato il loro comportamento proliferativo durante i 600 giorni [circa 500 popolazione raddoppi (PDL)] della cultura continua. Crescita delle tre culture di massa indipendenti era uniforme per circa 150 PDL dopo l&#39;infezione la telomerasi, seguita da una progressiva accelerazione della crescita in due delle tre culture. Espressione di p16(INK4A) era significativamente elevato nelle celle immortalate ma sparirono gradualmente durante la fase di crescita accelerata. Questa alterazione correlata con la perdita della risposta contatto inibizione e conferito le cellule con sensibilit&agrave; alla trasformazione indotta da H-Ras. Al contrario, i checkpoint mediata da p53 e pRb come il DNA danno risposta, stabilit&agrave; cromosomica ed entrata in quiescenza &egrave; rimasto intatti, a prescindere dalla espressione locus INK4A. Soprattutto, esame dettagliato di una delle culture WI-38/hTERT durante la fase di crescita accelerata rivelato sovraespressione di c-myc e Bmi-1 oncogeni, cos&igrave; come la perdita di espressione di p14(ARF). Collettivamente, i nostri risultati indicano che, sebbene immortalato hTERT cellule si comportano analogamente alle cellule primarie durante i primi 150 PDL, crescita a lungo termine nella cultura pu&ograve; favorire la comparsa di cloni che trasportano alterazioni potenzialmente maligne.

Coltura prolungata di fibroblasti umani immortalato telomerasi conduce ad un fenotipo precancerose.

&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30A2;&#x306E;&#x77ED;&#x7E2E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA;&#x3072;&#x3068;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; &#xFF08;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF09; overexpression &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x514B;&#x670D;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3001;&#x8907;&#x88FD;&#x8001;&#x5316;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E0D;&#x6B7B;&#x306E;&#x60AA;&#x6027;&#x306E;&#x7279;&#x5FB4;&#x306E;&#x4E00;&#x3064;&#x3067;&#x3059;&#x306E;&#x3067;&#x3001;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3092;&#x4E0D;&#x6B7B;&#x5316;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x614E;&#x91CD;&#x306A;&#x5206;&#x6790;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3001;WI 38 &#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; cDNA &#x3092;&#x904B;&#x3076;&#x30EC;&#x30C8;&#x30ED; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306B;&#x611F;&#x67D3;&#x3057;&#x3066;&#x3001;600 &#x65E5;&#x9593; [&#x7D04; 500 &#x4EBA;&#x53E3; doublings (Pdl)] &#x9023;&#x7D9A;&#x57F9;&#x990A;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x6319;&#x52D5;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;3 &#x3064;&#x306E;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x305F;&#x5927;&#x91CF;&#x306E;&#x6587;&#x5316;&#x306E;&#x6210;&#x9577; 2 &#x3064; 3 &#x3064;&#x306E;&#x6587;&#x5316;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x9032;&#x6B69;&#x7684;&#x306A;&#x52A0;&#x901F;&#x304C;&#x7D9A;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3001;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x611F;&#x67D3;&#x5F8C;&#x304A;&#x3088;&#x305D; 150 &#x306E; Pdl &#x306E;&#x5747;&#x4E00;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;P16(INK4A) &#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x4E0D;&#x6B7B;&#x5316;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x6709;&#x610F;&#x306A;&#x4E0A;&#x6607;&#x304C;&#x5F90;&#x3005; &#x306B;&#x52A0;&#x901F;&#x6210;&#x9577;&#x30D5;&#x30A7;&#x30FC;&#x30BA;&#x4E2D;&#x306B;&#x59FF;&#x3092;&#x6D88;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x5909;&#x8CEA;&#x306F;&#x63A5;&#x89E6;&#x963B;&#x5BB3;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x95A2;&#x3057;&#x3001;&#x30BB;&#x30EB;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x611F;&#x5EA6; H Ras &#x8A98;&#x8D77;&#x5909;&#x614B;&#x3092;&#x6388;&#x4E0E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;p53 &#x3068; pRb &#x3092;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x30C1;&#x30A7;&#x30C3;&#x30AF;&#x30DD;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C8;&#x306A;&#x3069;&#x306E; DNA &#x640D;&#x50B7;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3001;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x306E;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x3068;&#x9759;&#x7A4F;&#x5316;&#x3078;&#x306E;&#x53C2;&#x5165;&#x3092; INK4A &#x8ECC;&#x8DE1;&#x5F0F;&#x306B;&#x95A2;&#x4FC2;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x6B8B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x306F;&#x3001;WI-38/&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x6587;&#x5316;&#x306E;&#x4E00;&#x3064;&#x306E;&#x8A73;&#x7D30;&#x306A;&#x691C;&#x67FB;&#x3001;&#x6210;&#x9577;&#x52A0;&#x901F;&#x6BB5;&#x968E; c &#x2010; myc &#x304A;&#x3088;&#x3073; Bmi 1 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x3001;p14(ARF) &#x5F0F;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3002;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x3001;&#x7DCF;&#x79F0;&#x3057;&#x3066;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3092;&#x4E0D;&#x6B7B;&#x5316;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x4E2D;&#x306B;&#x307E;&#x305A; 150 Pdl &#x521D;&#x4EE3;&#x57F9;&#x990A;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x52D5;&#x4F5C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x9577;&#x671F;&#x7684;&#x306A;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x6587;&#x5316;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x60AA;&#x6027;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x904B;&#x3076;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x51FA;&#x73FE;&#x3092;&#x652F;&#x6301;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x4E0D;&#x6B7B;&#x5316;&#x3072;&#x3068;&#x7E4A;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x9577;&#x671F;&#x57F9;&#x990A;&#x524D;&#x764C;&#x72B6;&#x614B;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306B; &#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Telomere &#xB2E8;&#xCD95; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC778;&#xAC04; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; telomerase (hTERT) overexpression&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xADF9;&#xBCF5; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC77C;&#xCC28; &#xB178;&#xD654; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; immortalization &#xC545;&#xC131; &#xBCC0;&#xD658;&#xC758; &#xD2B9;&#xC9D5; &#xC911; &#xD558;&#xB098; &#xC774;&#xBBC0;&#xB85C; &#xC140; hTERT &#xBD88;&#xD6C4;&#xC758; &#xC2E0;&#xC911; &#xD558; &#xAC8C; &#xBD84;&#xC11D; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; &#xBAA8;&#xB450;&#xB97C; &#xC774;&#xD574; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC911;&#xC694;&#xC131; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC704;&#xD574; &#xC6B0;&#xB9AC; hTERT Cdna&#xB97C; &#xB4E4;&#xACE0; &#xB808;&#xD2B8; WI-38 &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xAC10;&#xC5FC; &#xD558; &#xACE0; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; &#xBB38;&#xD654; 600 &#xC77C; [&#xC57D; 500 &#xC778;&#xAD6C; doublings (PDLs)] &#xB3D9;&#xC548; &#xC99D;&#xC2DD; &#xD589;&#xD0DC;&#xB97C; &#xBD84;&#xC11D;. 3 &#xAC1C;&#xC758; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; &#xC9D1;&#xB2E8; &#xBB38;&#xD654;&#xC758; &#xC131;&#xC7A5;&#xC740; &#xB4A4;&#xC5D0; &#xB450; &#xC138; &#xAC00;&#xC9C0; &#xBB38;&#xD654; &#xC131;&#xC7A5;&#xC758; &#xC9C4;&#xBCF4;&#xC801;&#xC778; &#xAC00;&#xC18D; telomerase &#xAC10;&#xC5FC; &#xD6C4; &#xC57D; 150 PDLs &#xC720;&#xB2C8;&#xD3FC;. P16(ink4a)&#xC758; &#xC2DD; &#xBD88;&#xBA78; &#xD558; &#xAC8C; &#xC140;&#xC5D0; &#xD06C;&#xAC8C; &#xC0C1;&#xC2B9; &#xD588;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC810;&#xCC28; &#xAC00;&#xC18D;&#xB41C; &#xC131;&#xC7A5; &#xB2E8;&#xACC4; &#xB3D9;&#xC548; &#xC0AC;&#xB77C;&#xC84C;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBCC0;&#xACBD; &#xC5F0;&#xB77D;&#xCC98; &#xC800;&#xD574; &#xBC18;&#xC751;&#xC758; &#xAC10;&#xC18C;&#xC640; &#xC0C1;&#xAD00; &#xD558; &#xACE0; h &#xC870;-Ras-&#xC720;&#xB3C4; &#xBCC0;&#xD615; &#xAC10;&#xB3C4;&#xC640; &#xC140;&#xC744; &#xC218; &#xC5EC;. &#xBC18;&#xBA74;, p 53&#xACFC; pRb &#xC911;&#xC7AC; &#xAC80;&#xC0AC;&#xC810; DNA &#xB4F1; &#xC190;&#xC0C1; &#xC751;&#xB2F5;, &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xACFC; &#xC785;&#xAD6D; &#xC815;&#xC9C0; INK4A &#xB85C;&#xCEE4; &#xC2A4; &#xC2DD;&#xC5D0; &#xAD00;&#xACC4; &#xC5C6;&#xC774; &#xC628;&#xC804; &#xD558; &#xAC8C; &#xB0A8;&#xC544; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAC83;&#xC740;, &#xAC00;&#xC18D;&#xB41C; &#xC131;&#xC7A5; &#xB2E8;&#xACC4; &#xB3D9;&#xC548; WI-38/hTERT &#xBB38;&#xD654; &#xC911;&#xC758; &#xC0C1;&#xC138;&#xD55C; &#xC2DC;&#xD5D8; c-myc &#xBC0F; Bmi 1 oncogenes overexpression &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; p14(ARF) &#xC2DD;&#xC758; &#xC190;&#xC2E4;&#xC744; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC9D1;&#xB2E8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; hTERT &#xBD88;&#xD6C4; &#xC140; &#xCC98;&#xC74C; 150 PDLs &#xC911; 1 &#xCC28; &#xC140;&#xC744; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD558;&#xAC8C; &#xC791;&#xB3D9;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0; &#xC7A5;&#xAE30;&#xC801;&#xC778; &#xC131;&#xC7A5; &#xD074;&#xB860; &#xB4E4;&#xACE0; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC545;&#xC131; &#xBCC0;&#xACBD;&#xC758; &#xBAA8;&#xC591;&#xC744; &#xBD80;&#xD0C1; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xAC8C;&#xC7AC; telomerase &#xBD88;&#xD6C4;&#xC758; &#xC7A5;&#xAE30;&#xAC04;&#xB41C; &#xBB38;&#xD654; premalignant &#xD615;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xC5B4;&#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Acortamiento en fibroblastos humanos primarios resultados en senescencia replicativa, que puede ser superada por la sobreexpresi&oacute;n de la telomerasa (hTERT) del tel&oacute;mero. Sin embargo, porque inmortalizaci&oacute;n es uno de los sellos de transformaci&oacute;n maligna, el an&aacute;lisis cuidadoso de las c&eacute;lulas hTERT-inmortalizada es de crucial importancia para la comprensi&oacute;n de ambos procesos. Para ello, hemos infectados fibroblastos WI-38 con un retrovirus que lleva el cDNA hTERT y analizado su comportamiento proliferativo durante 600 d&iacute;as [(PPL) de la poblaci&oacute;n aproximadamente 500 doblajes] de cultivo continuo. Crecimiento de las tres culturas de masas independientes fue uniforme para aproximadamente 150 PPL despu&eacute;s de la infecci&oacute;n de la telomerasa, seguida por una aceleraci&oacute;n progresiva de crecimiento en dos de las tres culturas. Expresi&oacute;n de p16(INK4A) fue significativamente elevado en las c&eacute;lulas inmortalizadas pero desapareci&oacute; gradualmente durante la fase de crecimiento acelerado. Esta alteraci&oacute;n correlaciona con la p&eacute;rdida de la respuesta de inhibici&oacute;n de contacto y confiere a las c&eacute;lulas con sensibilidad a la transformaci&oacute;n inducida por H-Ras. En contraste, los puestos de control mediada por p53 y pRb como el ADN da&ntilde;an respuesta, estabilidad cromos&oacute;mica y entrada en quietud permanec&iacute;an intactos, cualquiera que sea la expresi&oacute;n de locus INK4A. Lo importante, examen detallado de una de las culturas WI-38/hTERT durante la fase de crecimiento acelerado revel&oacute; sobreexpresi&oacute;n de c-myc y Bmi-1 oncogenes, as&iacute; como la p&eacute;rdida de expresi&oacute;n de la p14(ARF). En conjunto, nuestros resultados indican que aunque las c&eacute;lulas hTERT-inmortalizado comportan de manera similar a c&eacute;lulas primarias durante los primeros 150 PPL, crecimiento a largo plazo en la cultura puede favorecer la aparici&oacute;n de clones con alteraciones potencialmente malignas.

La cultura prolongada de fibroblastos humanos telomerasa-inmortalizado conduce a un fenotipo premaligno.

&#x4F4E;&#x6C27;&#x5E94;&#x6FC0;&#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5B9E;&#x4F53;&#x80BF;&#x7624;&#x7684;&#x5FAE;&#x73AF;&#x5883;&#x4E2D;&#x4E3B;&#x8981;&#x7684;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x538B;&#x529B;&#x548C;&#x514B;&#x670D;&#x8FD9;&#x79CD;&#x9650;&#x5236;&#x662F;&#x80BF;&#x7624;&#x7684;&#x5F62;&#x6210;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;&#x9A7E;&#x9A76;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53CD;&#x5E94;&#x53CA;&#x4F9B;&#x6C27;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x56E0;&#x7D20;&#x4E4B;&#x4E00;&#x662F;&#x7F3A;&#x6C27;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x56E0;&#x5B50; (HIF) &#x8F6C;&#x5F55;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;HIF-1 &alpha; &#x4E9A;&#x57FA;&#x7684;&#x6C34;&#x5E73;&#x88AB;&#x53D7;&#x8FC5;&#x901F;&#x964D;&#x89E3;&#xFF0C;&#x7531;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x7684;&#x812F;&#x6C28;&#x9170; hydroxylases (&#x535A;&#x58EB;/EGLNs&#xFF09;&#xFF0C;&#x8BE5;&#x6D3B;&#x52A8;&#x63A7;&#x5236;&#x5176;&#x4E2D;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x6C27;&#x6C14;&#x4F9B;&#x5E94;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x5F02;&#x4F4D;&#x8868;&#x8FBE; HIF 1alpha mPHD1 &#x538B;&#x5236;&#x79EF;&#x7D2F;&#x4E0E;&#x5206;&#x6CCC;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E;&#x7F3A;&#x6C27;&#x4EFF;&#x751F;&#x836F;&#x7269;&#x6CBB;&#x7597;&#x540E;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#x65F6;&#x8868;&#x793A; mPHD1 &#x7ED3;&#x80A0;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x88AB;&#x6CE8;&#x5165;&#x88F8;&#x5C0F;&#x9F20;&#xFF0C;, &#x80BF;&#x7624;&#x751F;&#x957F;&#x88AB;&#x6291;&#x5236;&#xFF0C;&#x5E76;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x574F;&#x6B7B;&#x53CA;&#x5FAE;&#x8840;&#x7BA1;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x663E;&#x8457;&#x51CF;&#x5C11;&#x4E0E;&#x76F8;&#x5173;&#x80BF;&#x7624;&#x751F;&#x957F;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x6291;&#x5236; HIF 1alpha HIF-&#x7F9F;&#x5316;&#x9176;&#x7684;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x901A;&#x8FC7;&#x4F4E;&#x6C27;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6291;&#x5236;&#x80BF;&#x7624;&#x7684;&#x751F;&#x957F;&#x548C;&#x65B0;&#x751F;&#x8840;&#x7BA1;&#x63D0;&#x4F9B;&#x65B0;&#x578B;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x7B56;&#x7565;&#x548C;&#x652F;&#x6301;&#x57FA;&#x4E8E; HIF-&#x812F;&#x6C28;&#x9170; hydroxylases &#x7684;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8F6C;&#x79FB;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x3002;

&#x812F;&#x6C28;&#x9170;&#x7F9F;&#x5316;&#x9176;-1 &#xFF08;PHD1/EGLN2&#xFF09; &#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x6291;&#x5236;&#x4F4E;&#x6C27;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x56E0;&#x5B50;-1alpha &#x6FC0;&#x6D3B;&#x548C;&#x6291;&#x5236;&#x80BF;&#x7624;&#x751F;&#x957F;&#x3002;

Hypoxic stress is one of the major selective pressures in the microenvironment of solid tumors, and overcoming this restriction is essential for tumor progression. One of the key factors driving the cellular response to lack of oxygen is hypoxia inducible factor (HIF), a key transcriptional factor. The level of the alpha subunit of HIF-1 is regulated by rapid degradation that is controlled by a family of prolyl hydroxylases (PHDs/EGLNs), the activity of which depends on oxygen availability. Our study shows that ectopic expression of mPHD1 suppressed accumulation of HIF-1alpha and secretion of Vascular Endothelial Growth Factor after treatment of cells with a hypoxia-mimetic drug. Furthermore, when colon carcinoma cells expressing mPHD1 were injected into nude mice, tumor growth was inhibited, and the inhibition of tumor growth was correlated with increased necrosis and a striking decrease in microvessel density. These data demonstrate that inhibition of hypoxia-induced activation of HIF-1alpha through activation of HIF-hydroxylase can provide a novel therapeutic strategy for inhibition of tumor growth and neovascularization and support the development of gene transfer approaches based on the activation of HIF-prolyl hydroxylases.

Expression of prolyl-hydroxylase-1 (PHD1/EGLN2) suppresses hypoxia inducible factor-1alpha activation and inhibits tumor growth.

Stress hypoxique est l&#39;une des principales pressions s&eacute;lectives dans le micro-environnement des tumeurs solides, et surmonter cette restriction est essentielle &agrave; la progression tumorale. Parmi les facteurs cl&eacute;s responsables de la r&eacute;ponse cellulaire &agrave; l&#39;absence d&#39;oxyg&egrave;ne est facteur d&#39;inductibles par l&#39;hypoxie (HIF), un facteur de transcription cl&eacute;. Le niveau de la sous-unit&eacute; alpha de HIF-1 est r&eacute;gul&eacute; par une d&eacute;gradation rapide qui est contr&ocirc;l&eacute;e par une famille de prolyl hydroxylase (doctorat/EGLNs), l&#39;activit&eacute; qui d&eacute;pend de la disponibilit&eacute; d&#39;oxyg&egrave;ne. Notre &eacute;tude montre que l&#39;expression ectopique d&#39;accumulation mPHD1 supprim&eacute;e de HIF-1alpha et s&eacute;cr&eacute;tion de Vascular Endothelial Growth Factor apr&egrave;s traitement des cellules avec un m&eacute;dicament mim&eacute;tique &agrave; l&#39;hypoxie. En outre, lorsque les cellules de carcinome du c&ocirc;lon exprimant mPHD1 ont &eacute;t&eacute; inject&eacute;es &agrave; des souris nus, inhibe la croissance tumorale et l&#39;inhibition de la croissance tumorale &eacute;tait en corr&eacute;lation avec une augmentation de la n&eacute;crose et une diminution remarquable de densit&eacute; des microvaisseaux. Ces r&eacute;sultats d&eacute;montrent que l&#39;inhibition de l&#39;activation induite par l&#39;hypoxie de HIF-1alpha gr&acirc;ce &agrave; l&#39;activation de HIF-hydroxylase peut fournir une nouvelle strat&eacute;gie th&eacute;rapeutique pour l&#39;inhibition de la croissance tumorale et une n&eacute;ovascularisation et soutenir l&#39;&eacute;laboration de m&eacute;thodes de transfert de g&egrave;ne bas&eacute;e sur l&#39;activation de HIF-prolyl hydroxylase.

Expression de la prolyl-hydroxylase-1 (PHD1/EGLN2) supprime l&#39;activation inducible factor-1alpha hypoxie et inhibe la croissance tumorale.

Hypoxie, Stress ist eine der wichtigsten selektiven Druck in der Mikroumgebung von soliden Tumoren, und diese Einschr&auml;nkung zu &uuml;berwinden ist essentiell f&uuml;r Tumor Fortschreiten. Einer der wichtigsten Faktoren f&uuml;r die zellul&auml;re Reaktion Sauerstoff Mangel an Fahrt ist Hypoxie-durch Induktion-Faktor (HIF), ein Schl&uuml;sselfaktor transkriptionelle. Das Ma&szlig; f&uuml;r die alpha-Untereinheit des HIF-1 ist durch raschen Abbau geregelt, die von einer Familie der Prolyl Tryptophanhydroxylase (Doktoranden/EGLNs), die Aktivit&auml;t gesteuert wird Sauerstoff Verf&uuml;gbarkeit davon abh&auml;ngt. Unsere Studie zeigt, dass ektopische Expression von mPHD1 unterdr&uuml;ckt Anh&auml;ufung von HIF-1alpha und Sekretion des Vascular Endothelial Growth Factor nach Behandlung der Zellen mit einer Hypoxie-mimetischen Droge. Dar&uuml;ber hinaus Wenn Doppelpunkt-Karzinom-Zellen, die zum Ausdruck mPHD1 in nackten M&auml;usen injiziert wurden, wurde Tumorwachstum gehemmt war, und die Hemmung von Tumorwachstum mit erh&ouml;hten Nekrose und einen markanten R&uuml;ckgang der Microvessel Dichte. Diese Daten zeigen, dass die Hemmung der Hypoxie-induzierten Aktivierung von HIF-1alpha durch Aktivierung von HIF-Hydroxylase kann eine neuartige therapeutische Strategie f&uuml;r Hemmung von Tumorwachstum und Neovaskularisation und unterst&uuml;tzen die Entwicklung von Gen-Transfer Ans&auml;tzen f&uuml;r die Aktivierung von HIF-Prolyl Tryptophanhydroxylase.

Ausdruck der Prolyl-Hydroxylase-1 (PHD1/EGLN2) Hypoxie-durch Induktion Faktor-1alpha-Aktivierung unterdr&uuml;ckt und hemmt das Tumorwachstum.

Lo stress ipossico &egrave; una delle principali pressioni selettive nel microambiente dei tumori solidi, e superare questa limitazione &egrave; essenziale per la progressione del tumore. Uno dei fattori chiavi che guida la risposta cellulare per mancanza di ossigeno &egrave; fattore viscoelastico di ipossia (HIF), un fattore trascrizionale. Il livello della subunit&agrave; alfa di HIF-1 &egrave; regolato da rapido degrado che &egrave; controllato da una famiglia di idrossilasi di prolyl (dottorati di ricerca/EGLNs), l&#39;attivit&agrave; che dipende dalla disponibilit&agrave; di ossigeno. Il nostro studio dimostra che espressione ectopica di accumulo mPHD1 soppresso di HIF-1alpha e secrezione di Vascular Endothelial Growth Factor dopo il trattamento delle cellule con un farmaco ipossia-mimetico. Inoltre, quando le cellule di carcinoma del colon che esprimono mPHD1 sono state iniettate in topi nudi, &egrave; stata inibita la crescita tumorale e l&#39;inibizione della crescita tumorale &egrave; stata correlata con necrosi aumentata e una diminuzione nella densit&agrave; del microvessel sorprendente. Questi dati dimostrano che l&#39;inibizione dell&#39;attivazione indotta da ipossia del HIF-1alpha attraverso l&#39;attivazione di HIF-idrossilasi pu&ograve; fornire una nuova strategia terapeutica per l&#39;inibizione della crescita tumorale e neovascolarizzazione e sostenere lo sviluppo del gene transfer approcci basati sull&#39;attivazione di HIF Prolil idrossilasi.

Espressione di Prolil-idrossilasi-1 (PHD1/EGLN2) sopprime l&#39;attivazione inducible factor-1alpha ipossia e inibisce la crescita tumorale.

&#x4F4E;&#x9178;&#x7D20;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x306E;&#x56FA;&#x5F62;&#x816B;&#x760D;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x74B0;&#x5883;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x9078;&#x629E;&#x5727;&#x306E;&#x4E00;&#x3064;&#x3067;&#x3059;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x5236;&#x9650;&#x3092;&#x514B;&#x670D;&#x3059;&#x308B;&#x816B;&#x760D;&#x306E;&#x9032;&#x884C;&#x306E;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x4F4E;&#x9178;&#x7D20;&#x8A98;&#x5C0E;&#x56E0;&#x5B50; &#xFF08;HIF&#xFF09; &#x8EE2;&#x5199;&#x306E;&#x30AD;&#x30FC;&#x30D5;&#x30A1;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306F;&#x9178;&#x7D20;&#x306E;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x4E3B;&#x8981;&#x56E0;&#x306E; 1 &#x3064;&#x3067;&#x3059;&#x3002;HIF 1 &#x306E;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1; &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x9178;&#x7D20;&#x7A7A;&#x5BA4;&#x30D7;&#x30ED;&#x30EA;&#x30EB;&#x6C34;&#x9178;&#x5316;&#x9175;&#x7D20; (PHDs/EGLNs)&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D3;&#x30C6;&#x30A3;&#x306E;&#x5BB6;&#x65CF;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5236;&#x5FA1;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x6025;&#x901F;&#x306A;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x898F;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x305D;&#x306E; hif-1 &#x306E;&#x6291;&#x5236; mPHD1 &#x84C4;&#x7A4D;&#x3068;&#x4F4E;&#x9178;&#x7D20;&#x30DF;&#x30E1;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x85AC;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x5F8C;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x5897;&#x6B96;&#x56E0;&#x5B50;&#x5206;&#x6CCC;&#x306E;&#x7570;&#x6240;&#x6027;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x5927;&#x8178;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E; mPHD1 &#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x88F8;&#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306B;&#x6CE8;&#x5165;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x306F;&#x3001;&#x816B;&#x760D;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x306E;&#x816B;&#x760D;&#x5897;&#x6B96;&#x6291;&#x5236;&#x5897;&#x52A0;&#x58CA;&#x6B7B;&#x3068;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x8840;&#x7BA1;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x306E;&#x9855;&#x8457;&#x306A;&#x6E1B;&#x5C11;&#x76F8;&#x95A2;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;HIF &#x6C34;&#x9178;&#x5316;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x3001;hif-1 &#x306E;&#x4F4E;&#x9178;&#x7D20;&#x8A98;&#x5C0E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x304C;&#x816B;&#x760D;&#x5897;&#x6B96;&#x3068;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x963B;&#x5BB3;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x6CBB;&#x7642;&#x6226;&#x7565;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3067;&#x304D; HIF &#x30D7;&#x30ED;&#x30EA;&#x30EB;&#x6C34;&#x9178;&#x5316;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x304F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x79FB;&#x8EE2;&#x624B;&#x6CD5;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30D7;&#x30ED;&#x30EA;&#x30EB;-&#x30D2;&#x30C9;&#x30ED;&#x30AD;&#x30B7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;-1 &#xFF08;PHD1/EGLN2) &#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x4F4E;&#x9178;&#x7D20;&#x8A98;&#x5C0E;&#x56E0;&#x5B50; 1 &alpha; &#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3057;&#x3001;&#x816B;&#x760D;&#x5897;&#x6B96;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Hypoxic &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4; &#xACE0;&#xCCB4; &#xC885;&#xC591;&#xC758; microenvironment&#xC5D0;&#xC11C; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801; &#xC555;&#xB825;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xC911; &#xD558;&#xB098; &#xC774;&#xBA70; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC81C;&#xD55C;&#xC744; &#xADF9;&#xBCF5; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC740; &#xC885;&#xC591; &#xC9C4;&#xD589;&#xC5D0; &#xD544;&#xC218;&#xC801;. &#xC0B0;&#xC18C;&#xC758; &#xBD80;&#xC871;&#xC73C;&#xB85C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xC6B4;&#xC804; &#xD558;&#xB294; &#xD575;&#xC2EC; &#xC694;&#xC18C; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xAC00; hypoxia &#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC778;&#xC790; (HIF) &#xD575;&#xC2EC; transcriptional &#xC694;&#xC18C;. HIF 1 &#xC54C;&#xD30C; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xAE09;&#xACA9; &#xD55C; &#xC800;&#xD558;&#xB294; &#xC0B0;&#xC18C;&#xC758; &#xAC00;&#xC6A9;&#xC131;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2EC;&#xB77C; &#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4; prolyl hydroxylases (&#xBC15;&#xC0AC; &#xD559;&#xC704;/EGLNs), &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xAC00;&#xC871;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC81C;&#xC5B4; &#xB418;&#xB294; &#xC758;&#xD574; &#xADDC;&#xC81C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; HIF 1alpha&#xC758; mPHD1 &#xC5B5;&#xC555; &#xCD95;&#xC801;&#xACFC; &#xBD84; &#xBE44;: &#xD608;&#xAD00; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790;&#xC758; hypoxia &#xC704;&#xC7A5; &#xC57D;&#xC73C;&#xB85C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD6C4;&#xC758; &#xC18C;&#xC131; &#xC2DD;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, Mphd1&#xC744; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xACB0; &#xC7A5; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; &#xB204;&#xB4DC; &#xC950;&#xB85C; &#xC8FC;&#xC785; &#xD588;&#xB2E4;, &#xC885;&#xC591;&#xC758; &#xC131;&#xC7A5;&#xC744; &#xC800;&#xD574; &#xD588;&#xB2E4; &#xBC0F; &#xC885;&#xC591;&#xC758; &#xC131;&#xC7A5; &#xC5B5;&#xC81C; &#xC99D;&#xAC00; &#xAD34; &#xC0AC; &#xBC0F; microvessel &#xBC00;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB208;&#xC5D0; &#xB744;&#xB294; &#xAC10;&#xC18C;&#xC640; &#xC0C1;&#xAD00; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; HIF hydroxylase&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; HIF 1alpha&#xC758; hypoxia &#xC720;&#xBC1C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC758; &#xC800;&#xD574; &#xC5B5;&#xC81C; &#xC885;&#xC591;&#xC758; &#xC131;&#xC7A5; &#xBC0F; neovascularization&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xCE58;&#xB8CC; &#xC804;&#xB7B5;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5;&#xD560; &#xC218; &#xBC0F; HIF prolyl hydroxylases&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC804;&#xC1A1; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC744; &#xC9C0; &#xC6D0;&#xD558;&#xB294; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Prolyl hydroxylase 1 (PHD1/EGLN2)&#xC758; &#xD45C;&#xD604; hypoxia &#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xD329;&#xD130; 1alpha &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558; &#xACE0; &#xC885;&#xC591;&#xC758; &#xC131;&#xC7A5;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD55C;&#xB2E4;.

Estr&eacute;s hip&oacute;xico es una de las principales presiones selectivas en el microambiente de tumores s&oacute;lidos, y superar esta restricci&oacute;n es esencial para la progresi&oacute;n del tumor. Uno de los factores claves que impulsan la respuesta celular a la falta de ox&iacute;geno es factor inducible por hipoxia (HIF), un factor transcripcional clave. El nivel de la subunidad alfa de HIF-1 est&aacute; regulado por la r&aacute;pida degradaci&oacute;n que est&aacute; controlada por una familia de prolil hidroxilasas (doctorados/EGLNs), la actividad de la que depende de la disponibilidad de ox&iacute;geno. Nuestro estudio muestra que la expresi&oacute;n ect&oacute;pica de acumulaci&oacute;n mPHD1 suprimido de HIF-1alfa y secreci&oacute;n de Vascular Endothelial Growth Factor despu&eacute;s del tratamiento de c&eacute;lulas con un f&aacute;rmaco hipoxia-mim&eacute;tico. Adem&aacute;s, cuando las c&eacute;lulas del carcinoma del colon expresando mPHD1 fueron inyectadas en ratones desnudos, se inhibi&oacute; el crecimiento tumoral y la inhibici&oacute;n del crecimiento del tumor se correlacion&oacute; con necrosis creciente y una disminuci&oacute;n notable de microvasos densidad. Estos datos demuestran que la inhibici&oacute;n de la activaci&oacute;n inducida por hipoxia de HIF-1alfa a trav&eacute;s de la activaci&oacute;n de HIF-hidroxilasa puede proporcionar una nueva estrategia terap&eacute;utica para la inhibici&oacute;n del crecimiento tumoral y la neovascularizaci&oacute;n y apoyar el desarrollo de enfoques de transferencia g&eacute;nica basada en la activaci&oacute;n de HIF-prolil hidroxilasas.

Expresi&oacute;n de prolil-hidroxilasa-1 (PHD1/EGLN2) suprime la activaci&oacute;n del factor-1alfa inducible de hipoxia e inhibe el crecimiento del tumor.

&#x4F4E;&#x6C27;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x56E0;&#x5B50; (HIF) &#x812F;&#x6C28;&#x9170; hydroxylases &#x6700;&#x8FD1;&#x9274;&#x5B9A; (PHD1&#xFF0C;2 &#x548C; 3&#xFF09;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x4FEE;&#x6539; HIF-1 &alpha; &#x5728;&#x6C27;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x6C27;&#x6C14;&#x4F9B;&#x5E94;&#x548C;&#x4F4E;&#x6C27;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x8054;&#x7CFB;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x4E86;&#x89E3;&#x751A;&#x5C11;&#x7684;&#x535A;&#x58EB;&#x89C4;&#x7BA1;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x8C03;&#x67E5;&#x7684; PHD1 &#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x8C03;&#x63A7;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x514B;&#x9686; PHD1 &#x57FA;&#x56E0;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684; PHD1 &#x51CF;&#x5C11;&#x5728;&#x7F3A;&#x6C27;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E3A;&#x82B3;&#x9999;&#x70C3;&#x6838;&#x8F6C;&#x8FD0; &#xFF08;ARNT/HIF-1 &#x6D4B;&#x8BD5;&#x7248;&#xFF09; PHD1 &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x5185;, &#x7ED3;&#x5408;&#x4F4D;&#x70B9;&#x548C;&#x663E;&#x793A; ARNT &#x5173;&#x8054;&#x4F53;&#x5185;&#x540E;&#x7F3A;&#x6C27;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x610F;&#x5473;&#x7740;&#x89D2;&#x8272;&#x4E3A; ARNT &#x4F4E;&#x6C27;&#x4F9D;&#x8D56;&#x8C03;&#x8282;&#x7684; PHD1 PHD1 &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x3002;&#x4E24;&#x8005;&#x5408;&#x8BA1;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x4F4E;&#x6C27;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x89C4;&#x7BA1;&#x5FAA;&#x73AF; PHD1 &#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;ARNT &#x4ECB;&#x5BFC;&#x3002;

PHD1 &#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x7F3A;&#x6C27;&#x7684;&#x89C4;&#x7BA1;&#xFF1A; &#x514B;&#x9686;&#x53CA;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7684; PHD1/EGLN2 &#x57FA;&#x56E0;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x7684;&#x8868;&#x5F81;&#x3002;

The recent identification of hypoxia-inducible-factor (HIF) prolyl hydroxylases (PHD1, 2, and 3), which modify HIF-1 alpha in an oxygen-dependent manner, provided an important link between oxygen availability and hypoxia-induced gene expression. However, little is known about the regulation of the PHDs. To investigate the transcriptional regulation of PHD1, we cloned the PHD1 gene promoter. Here, we report that the expression of PHD1 is reduced under hypoxic conditions. Furthermore, we identified binding sites for aryl hydrocarbon nuclear translocator (ARNT/HIF-1 beta) within the PHD1 promoter, and showed that ARNT is associated in vivo with the PHD1 promoter following hypoxia, which implies a role for ARNT in the hypoxia-dependent regulation of PHD1. Taken together, our findings suggest a hypoxia-induced regulatory loop of PHD1 expression, mediated by ARNT.

Hypoxia-dependent regulation of PHD1: cloning and characterization of the human PHD1/EGLN2 gene promoter.

L&#39;identification r&eacute;cente d&#39;hypoxie-inducible factor (HIF) prolyl hydroxylase (PHD1, 2 et 3), lequel modifier HIF-1 alpha de fa&ccedil;on d&eacute;pendante de l&#39;oxyg&egrave;ne, fourni un lien important entre la disponibilit&eacute; d&#39;oxyg&egrave;ne et de l&#39;expression des g&egrave;nes induits par l&#39;hypoxie. Toutefois, on conna&icirc;t peu la r&eacute;gulation des doctorats. Pour &eacute;tudier la r&eacute;gulation transcriptionnelle de PHD1, nous avons clon&eacute; le promoteur du g&egrave;ne PHD1. Nous rapportons ici que l&#39;expression de PHD1 est r&eacute;duite dans des conditions hypoxiques. En outre, nous avons identifi&eacute; sites de fixation pour translocator nucl&eacute;aire d&#39;arylique d&#39;hydrocarbure (ARNT/HIF-1 b&ecirc;ta) dans le promoteur PHD1 et a montr&eacute; que l&#39;ARNT est associe in vivo avec le promoteur PHD1 suite &agrave; l&#39;hypoxie, ce qui implique un r&ocirc;le pour l&#39;ARNT dans la r&eacute;gulation de l&#39;hypoxie d&eacute;pendant de PHD1. Ensemble, nos r&eacute;sultats sugg&egrave;rent une boucle de r&eacute;gulation induite par l&#39;hypoxie d&#39;expression PHD1, m&eacute;di&eacute;e par l&#39;ARNT.

R&eacute;gulation de l&#39;hypoxie d&eacute;pendante de PHD1 : clonage et caract&eacute;risation du promoteur du g&egrave;ne humain des PHD1/EGLN2.

Die j&uuml;ngsten Identifizierung der Hypoxie-durch Induktion-Faktor (HIF) Prolyl Tryptophanhydroxylase (PHD1, 2 und 3), ein wichtiges Bindeglied zwischen Sauerstoff Verf&uuml;gbarkeit und Hypoxie-induzierte Genexpression bereitgestellt die HIF-1-Alpha in Sauerstoff-abh&auml;ngigen Weise &auml;ndern. Jedoch ist wenig bekannt &uuml;ber die Verordnung von den Doktoranden. Um die transkriptionelle Regulation der PHD1 zu untersuchen, geklont wir PHD1 gen Projekttr&auml;ger. Hier berichten wir, dass der Ausdruck der PHD1 unter Hypoxie Bedingungen reduziert wird. Dar&uuml;ber hinaus wir Websites f&uuml;r Aryl Kohlenwasserstoff nukleare Translokator (ARNT/HIF-1-Beta) innerhalb der Projekttr&auml;ger PHD1 verbindlich identifiziert und zeigte, dass ARNT verkn&uuml;pft ist mit dem PHD1 Projekttr&auml;ger nach Hypoxie, die eine Rolle bei der Hypoxie-abh&auml;ngigen Regulation des PHD1 f&uuml;r ARNT impliziert in-vivo. Zusammengenommen empfehlen unsere Ergebnisse eine Hypoxie-induzierten regulatorische Schleife PHD1 Ausdrucks, von ARNT vermittelt.

Hypoxie-abh&auml;ngige Regelung der PHD1: Klonierung und Charakterisierung des menschlichen PHD1/EGLN2 gen Veranstalters.

La recente identificazione di ipossia-inducible factor (HIF) idrossilasi di prolyl (PHD1, 2 e 3), che modificare HIF-1 alfa in un modo ossigeno-dipendente, fornito un importante collegamento tra la disponibilit&agrave; di ossigeno e di espressione genica indotta da ipossia. Tuttavia, poco si sa circa il regolamento dei dottorati di ricerca. Per studiare la regolazione trascrizionale di PHD1, abbiamo clonato il promotore del gene PHD1. Qui, segnaliamo che l&#39;espressione di PHD1 &egrave; ridotto nelle circostanze hypoxic. Inoltre, abbiamo identificato siti di legame per Aril translocator nucleare dell&#39;idrocarburo (ARNT/HIF-1 beta) all&#39;interno del promotore PHD1 e ha mostrato che ARNT &egrave; associato in vivo con il promotore PHD1 seguendo l&#39;ipossia, che implica un ruolo per ARNT nel regolamento ipossia-dipendente di PHD1. Presi insieme, i nostri risultati suggeriscono un ciclo normativo indotta da ipossia dell&#39;espressione PHD1, mediata da ARNT.

Regolazione di ipossia-dipendente di PHD1: clonazione e caratterizzazione del promotore del gene umano di PHD1/EGLN2.

&#x4F4E;&#x9178;&#x7D20;&#x8A98;&#x5C0E;&#x56E0;&#x5B50; &#xFF08;HIF&#xFF09; &#x30D7;&#x30ED;&#x30EA;&#x30EB;&#x6C34;&#x9178;&#x5316;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x6700;&#x8FD1;&#x540C;&#x5B9A; (PHD1&#x3001;2&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073; 3&#xFF09;&#x3001;HIF 1 &#x30A2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1;&#x3001;&#x9178;&#x7D20;&#x4F9D;&#x5B58;&#x7684;&#x306B;&#x5909;&#x66F4;&#x9178;&#x7D20;&#x53EF;&#x7528;&#x6027;&#x3068;&#x4F4E;&#x9178;&#x7D20;&#x8A98;&#x5C0E;&#x6027;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3068;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x3001;&#x535A;&#x58EB;&#x53F7;&#x53D6;&#x5F97;&#x8005;&#x306E;&#x898F;&#x5236;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;PHD1 &#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3092;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;PHD1 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x4F5C;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x4F4E;&#x9178;&#x7D20;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x3067; PHD1 &#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x524A;&#x6E1B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x30A2;&#x30EA;&#x30FC;&#x30EB;&#x70AD;&#x5316;&#x6C34;&#x7D20;&#x306E;&#x6838;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA; (ARNT/HIF-1 &#x30D9;&#x30FC;&#x30BF;) PHD1 &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x5185;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x90E8;&#x4F4D;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x3001;ARNT &#x304C;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F; in vivo &#x5F79;&#x5272; ARNT &#x306E;&#x610F;&#x5473; PHD1 &#x306E;&#x4F4E;&#x9178;&#x7D20;&#x4F9D;&#x5B58;&#x5236;&#x5FA1;&#x3067;&#x4F4E;&#x9178;&#x7D20;&#x75C7;&#x3001;&#x6B21; PHD1 &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x53D6;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3001;&#x79C1;&#x9054;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C;&#x306F; PHD1 &#x5F0F;&#x3001;ARNT &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5A92;&#x4ECB;&#x306E;&#x4F4E;&#x9178;&#x7D20;&#x8A98;&#x5C0E;&#x898F;&#x5236;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

PHD1 &#x4F4E;&#x9178;&#x7D20;&#x4F9D;&#x5B58;&#x7684;&#x306A;&#x8ABF;&#x7BC0;&#xFF1A; &#x4EBA;&#x9593;&#x306E; PHD1/EGLN2 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3068;&#x30AD;&#x30E3;&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30EA;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3002;

Hypoxia &#xC720;&#xB3C4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC778;&#xC790; (HIF) prolyl hydroxylases&#xC758; &#xCD5C;&#xADFC; &#xC2DD;&#xBCC4; (PHD1, 2 &#xBC0F; 3), &#xC0B0;&#xC18C; &#xAC00;&#xC6A9;&#xC131; &#xBC0F; hypoxia &#xC720;&#xBC1C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5F0;&#xACB0;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xC0B0;&#xC18C;-&#xC885;&#xC18D; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC5D0;&#xC11C; HIF 1 &#xC54C;&#xD30C; &#xC218;&#xC815;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC57D;&#xAC04;&#xC740; Phds&#xC758; &#xADDC;&#xC81C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xB2E4;. PHD1 transcriptional &#xADDC;&#xC81C; &#xC870;&#xC0AC;, &#xC6B0;&#xB9AC; PHD1 &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD504;&#xB85C;&#xBAA8;&#xD130;&#xB97C; &#xBCF5;&#xC81C;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBCF4;&#xACE0; PHD1 &#xC2DD; hypoxic &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC10;&#xC18C;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC6B0;&#xB9AC; aryl &#xD0C4;&#xD654;&#xC218;&#xC18C; &#xD575; translocator (ARNT/HIF 1 &#xBCA0;&#xD0C0;) &#xB0B4;&#xC758; PHD1 &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC744; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558; &#xACE0; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900; ARNT &#xAD00;&#xB828; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; PHD1 hypoxia &#xC885;&#xC18D; &#xADDC;&#xCE59;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; ARNT&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC758;&#xBBF8; &#xD558;&#xB294; hypoxia &#xB2E4;&#xC74C; PHD1 &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC73C;&#xB85C;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xD568;&#xAED8; &#xCC0D;&#xC740; ARNT &#xC911;&#xC7AC; PHD1 &#xD45C;&#xD604;&#xC758; hypoxia &#xC720;&#xBC1C; &#xADDC;&#xC81C; &#xB8E8;&#xD504;&#xB97C; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

PHD1 hypoxia &#xC885;&#xC18D; &#xADDC;&#xC81C;: &#xBCF5;&#xC81C;&#xC640; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; PHD1/EGLN2 &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD504;&#xB85C;&#xBAA8;&#xD130;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131; &#xBD84;&#xC11D;.

La reciente identificaci&oacute;n de factor inducible por hipoxia (HIF) prolil hidroxilasas (PHD1, 2 y 3), que modifican HIF-1 alfa de una manera dependiente de ox&iacute;geno, proporcionado un v&iacute;nculo importante entre la disponibilidad de ox&iacute;geno y de la expresi&oacute;n g&eacute;nica inducida por hipoxia. Sin embargo, poco se sabe sobre la regulaci&oacute;n de los doctores. Para investigar la regulaci&oacute;n transcripcional de PHD1, hemos reproducido el promotor del gen PHD1. Aqu&iacute;, Divulgamos que se reduce la expresi&oacute;n de PHD1 bajo condiciones hip&oacute;xicas. Adem&aacute;s, se identificaron sitios de Uni&oacute;n para aril el translocador nuclear hidrocarburos (ARNT/HIF-1 beta) en el promotor de PHD1 y demostr&oacute; que est&aacute; asociado el ARNT en vivo con el promotor PHD1 despu&eacute;s de hipoxia, lo que implica un papel para ARNT en la regulaci&oacute;n de la hipoxia dependiente de PHD1. Tomados en conjunto, nuestros resultados sugieren un bucle de regulaci&oacute;n inducida por hipoxia de expresi&oacute;n PHD1, mediada por ARNT.

Regulaci&oacute;n de la hipoxia dependiente de PHD1: clonaci&oacute;n y caracterizaci&oacute;n del promotor del gen PHD1/EGLN2 humano.

&#x590D;&#x5236;&#x8870;&#x8001;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x662F;&#x4E0D;&#x53EF;&#x9006;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x902E;&#x6355;&#xFF0C;&#x9650;&#x5236;&#x4E86;&#x53D7;&#x635F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x589E;&#x6B96;&#x548C;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x4F53;&#x5185;&#x4E00;&#x79CD;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x80BF;&#x7624;&#x6291;&#x5236;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E00;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x88AB;&#x53D7;&#x80BF;&#x7624;&#x6291;&#x5236; p53 &#x5728;&#x5173;&#x952E;&#x6B65;&#x9AA4;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x6807;&#x8BC6;&#x53EF;&#x89C4;&#x7BA1;&#x8870;&#x8001;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x8870;&#x8001;&#x3001; &#x5E74;&#x8F7B;&#x589E;&#x6B96;&#xFF0C;&#x548C; hTERT &#x6C38;&#x751F;&#x5C0F;&#x5B66;&#x4EBA;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6267;&#x884C; cDNA &#x82AF;&#x7247;&#x5206;&#x6790;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x7EC4;&#x86CB;&#x767D;&#x7532;&#x57FA; &#xFF08;HMTase&#xFF09; EZH2&#xFF0C;&#x662F;&#x4E13;&#x95E8;&#x5728;&#x8870;&#x8001;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x7F16;&#x7801;&#x3002;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684; p53 &#x6291;&#x5236; EZH2 &#x901A;&#x8FC7;&#x538B;&#x5236; EZH2 &#x57FA;&#x56E0;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x6D3B;&#x52A8;&#x7684; p53 &#x9700;&#x8981;&#x5B8C;&#x597D;&#x65E0;&#x635F;&#x7684; p53 &#x8F6C;&#x5F55;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x548C; DNA &#x7ED3;&#x5408;&#x57DF;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x9547;&#x538B; EZH2 &#x7531; p53 &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x662F;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E; p53 &#x8F6C;&#x5F55;&#x76EE;&#x6807; p21(Waf1) &#x706D;&#x6D3B; RB/E2F &#x901A;&#x8DEF;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;EZH2 &#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x7EC4;&#x5408;&#x5F0F;&#x5EF6;&#x7F13;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x5E76;&#x8BF1;&#x5BFC; G2/M &#x902E;&#x6355;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE; EZH2 &#x8868;&#x8FBE;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E; p53 &#x7684;&#x5236;&#x6B62;&#x662F;&#x65B0;&#x578B;&#x7684;&#x9014;&#x5F84;&#xFF0C;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E; p53 &#x4ECB;&#x5BFC; G2/M &#x902E;&#x6355;&#x3002;EZH2 &#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x590D;&#x6742;&#x62E5;&#x6709; HMTase &#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x548C;&#x6240;&#x6D89;&#x53CA;&#x7684;&#x8868;&#x89C2;&#x9057;&#x4F20;&#x8C03;&#x63A7;&#x3002;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684; p53 &#x6291;&#x5236; EZH2 &#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E; p53 &#x5728;&#x8868;&#x89C2;&#x9057;&#x4F20;&#x8C03;&#x63A7;&#x548C;&#x7EF4;&#x62A4;&#x9057;&#x4F20;&#x7A33;&#x5B9A;&#x6027;&#x7684;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;EZH2 &#x8868;&#x8FBE;&#x7684; p53 &#x80BF;&#x7624;&#x6291;&#x5236;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x65B0;&#x529E;&#x6CD5;&#x6765;&#x63A7;&#x5236;&#x764C;&#x75C7;&#x8FDB;&#x5C55;&#x3002;

&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684; p53 &#x6291;&#x5236;&#x7EC4;&#x86CB;&#x767D; EZH2 &#x7532;&#x57FA;&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176;&#x57FA;&#x56E0;&#x3002;

Replicative senescence is an irreversible cell cycle arrest that limits the proliferation of damaged cells and may be an important tumor suppression mechanism in vivo. This process is regulated at critical steps by the tumor suppressor p53. To identify genes that may regulate the senescence process, we performed cDNA microarray analysis of gene expression in senescent, young proliferating, and hTERT-immortalized primary human fibroblasts. The histone methyltransferase (HMTase), EZH2, was specifically downregulated in senescent cells. Activated p53 suppressed EZH2 gene expression through repression of the EZH2 gene promoter. This activity of p53 requires intact p53 transactivation and DNA binding domains. Furthermore, the repression of EZH2 promoter by p53 is dependent on p53 transcriptional target p21(Waf1) inactivating RB/E2F pathways. In addition, the knockdown of EZH2 expression retards cell proliferation and induces G2/M arrest. We suggest that the p53-dependent suppression of EZH2 expression is a novel pathway that contributes to p53-mediated G2/M arrest. EZH2 associated complex possesses HMTase activity and is involved in epigenetic regulation. Activated p53 suppresses EZH2 expression, suggesting a further role for p53 in epigenetic regulation and in the maintenance of genetic stability. Suppression of EZH2 expression in tumors by p53 may lead to novel approaches to control cancer progression.

Activated p53 suppresses the histone methyltransferase EZH2 gene.

La s&eacute;nescence r&eacute;plicative est un arr&ecirc;t du cycle de cellules irr&eacute;versible qui limite la prolif&eacute;ration des cellules endommag&eacute;es et peut &ecirc;tre un m&eacute;canisme de suppression tumorale importante in vivo. Ce processus est r&eacute;gl&eacute; aux &eacute;tapes cruciales par le suppresseur de tumeur p53. Afin d&#39;identifier les g&egrave;nes qui peuvent r&eacute;glementer le processus de s&eacute;nescence, nous avons effectu&eacute; analyse de microarray de cDNA de l&#39;expression g&eacute;nique dans s&eacute;nescentes, jeunes multiplient et hTERT-immortalis&eacute; les fibroblastes humains primaires. L&#39;histone m&eacute;thyltransf&eacute;rase (HMTase), EZH2, a &eacute;t&eacute; sp&eacute;cifiquement r&eacute;prim&eacute;s dans les cellules s&eacute;nescentes. P53 activ&eacute;e a supprim&eacute; l&#39;expression des g&egrave;nes par le biais de la r&eacute;pression du promoteur du g&egrave;ne de EZH2 EZH2. Cette activit&eacute; de p53 n&eacute;cessite la transactivation de p53 intacts et des domaines de liaison de l&#39;ADN. En outre, la r&eacute;pression de EZH2 promoteur de p53 est d&eacute;pendante des voies des RB/E2F inactivation de p53 cible transcriptionnelle p21(Waf1). En outre, le knockdown de l&#39;expression EZH2 retarde la prolif&eacute;ration cellulaire et induit l&#39;arrestation de G2/M. Nous croyons que la suppression de la p53 d&eacute;pendant d&#39;expression EZH2 est une nouvelle voie qui contribue &agrave; l&#39;arrestation de G2/M induite par la p53. EZH2 complexe associ&eacute; poss&egrave;de une activit&eacute; HMTase et est impliqu&eacute; dans la r&eacute;gulation &eacute;pig&eacute;n&eacute;tique. P53 activ&eacute;e supprime l&#39;expression EZH2, sugg&eacute;rant un autre r&ocirc;le de p53 dans la r&eacute;gulation &eacute;pig&eacute;n&eacute;tique et dans le maintien de la stabilit&eacute; g&eacute;n&eacute;tique. Suppression de l&#39;expression EZH2 dans les tumeurs de p53 peut conduire &agrave; de nouvelles approches pour contr&ocirc;ler la progression du cancer.

Le g&egrave;ne de l&#39;histone m&eacute;thyltransf&eacute;rase EZH2 supprime la p53 activ&eacute;e.

Zellalterung ist eine irreversible Zellzyklus-Verhaftung, die Grenzen die Verbreitung von gesch&auml;digten Zellen und kann einen wichtigen Tumor-Unterdr&uuml;ckung-Mechanismus, der in-vivo. Dieser Proze&szlig; ist der Tumorsuppressor p53 bei kritischen Schritten geregelt. Um Gene zu identifizieren, die den Altern-Prozess regulieren kann, f&uuml;hrten wir cDNA-Microarray-Analyse der Genexpression in alternde, junge vermehren und prim&auml;ren menschlichen Fibroblasten hTERT verewigt. Die Histon-Methyltransferase (Histon-), EZH2, wurde speziell Downregulated in alternde Zellen. Aktivierte p53 unterdr&uuml;ckt EZH2 Genexpression durch Unterdr&uuml;ckung des Projekttr&auml;gers EZH2 gen. Diese Aktivit&auml;t von p53 erfordert intakt p53 Transactivation und DNA-Bindung-Dom&auml;nen. Dar&uuml;ber hinaus ist die Unterdr&uuml;ckung des EZH2-Promotors durch p53 p53 transcriptional Ziel p21(Waf1) inaktivierende RB/E2F Bahnen abh&auml;ngig. Dar&uuml;ber hinaus den Niederschlag des EZH2 Ausdrucks verz&ouml;gert Zellproliferation und G2/M Verhaftung induziert. Wir schlagen vor, da&szlig; die p53-abh&auml;ngige-Unterdr&uuml;ckung von EZH2 Ausdruck einen neuartigen Weg ist, der p53-vermittelte G2/M Verhaftung beitr&auml;gt. EZH2 zugeordnete Komplex besitzt Histon-T&auml;tigkeit und epigenetische Regulierung beteiligt ist. Aktivierte p53 unterdr&uuml;ckt EZH2 Ausdruck, was auf eine weitere Rolle f&uuml;r p53 epigenetischen Verordnung und bei der Wartung der genetische Stabilit&auml;t. Unterdr&uuml;ckung der EZH2 Ausdruck in Tumoren von p53 f&uuml;hren zu neuartige Ans&auml;tze Fortschreiten zu steuern.

Aktivierte p53 unterdr&uuml;ckt das Histon-Methyltransferase EZH2-gen.

Senescenza replicativa &egrave; un arresto del ciclo cellulare irreversibile che limita la proliferazione delle cellule danneggiate e pu&ograve; essere un meccanismo di soppressione tumorale importante in vivo. Questo processo &egrave; regolato a fasi critiche dal soppressore tumorale p53. Per identificare i geni che possono regolare il processo di senescenza, abbiamo eseguito il cDNA microarray analysis of gene expression in senescenti, giovane proliferando e immortalato hTERT primari fibroblasti umani. L&#39;istone metiltransferasi (HMTase), EZH2, &egrave; stato specificamente downregolata nelle cellule senescenti. P53 attivata soppressa EZH2 espressione genica attraverso la repressione del promotore del gene EZH2. Questa attivit&agrave; di p53 richiede transactivation p53 intatto e domini di legame del DNA. Inoltre, la repressione di EZH2 promotore di p53 &egrave; dipendente su percorsi con RB/E2F inattivanti di p53 transcriptional destinazione p21(Waf1). Inoltre, l&#39;atterramento dell&#39;espressione EZH2 ritarda la proliferazione cellulare e induce arresto G2/M. Suggeriamo che la soppressione di p53-dipendente dell&#39;espressione EZH2 &egrave; un percorso di romanzo che contribuisce all&#39;arresto di G2/M mediata da p53. EZH2 complesso associato possiede attivit&agrave; HMTase ed &egrave; coinvolto nella regolazione epigenetica. P53 attivata sopprime l&#39;espressione EZH2, suggerendo un ulteriore ruolo di p53 nella regolazione epigenetica e nel mantenimento della stabilit&agrave; genetica. Soppressione dell&#39;espressione di EZH2 in tumori di p53 pu&ograve; portare a nuovi approcci per controllare la progressione del cancro.

P53 attivata sopprime il gene di istone metiltransferasi EZH2.

&#x8907;&#x88FD;&#x8001;&#x5316;&#x3001;&#x640D;&#x50B7;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x3092;&#x5236;&#x9650;&#x3057;&#x3001;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x3067;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x816B;&#x760D;&#x6291;&#x5236;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3001;&#x4E0D;&#x53EF;&#x9006;&#x7684;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x5468;&#x671F;&#x306E;&#x505C;&#x6B62;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3067;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x306F;&#x816B;&#x760D;&#x6291;&#x5236;&#x56E0;&#x5B50; p53 &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x898F;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8001;&#x5316;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x8ABF;&#x6574;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E; cDNA &#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; &#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#x89E3;&#x6790;&#x8001;&#x9F62;&#x3001;&#x82E5;&#x3044;&#x306E;&#x5897;&#x6B96;&#x3068;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x4E0D;&#x6B7B;&#x5316;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA;&#x3072;&#x3068;&#x7E4A;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x5B9F;&#x884C;&#x3002;&#x30D2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30F3; &#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; (HMTase) ezh2 &#x306F;&#x3001;&#x8001;&#x5316;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; downregulated &#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316; p53 ezh2 &#x306F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x6291;&#x5727; ezh2 &#x306F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x3002;P53 &#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x6D3B;&#x52D5;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x307E;&#x307E; p53 &#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3068; DNA &#x7D50;&#x5408;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;ezh2 &#x306F;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x308B; p53 &#x306E;&#x5F3E;&#x5727;&#x306F; p53 &#x8EE2;&#x5199;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8; p21(Waf1) &#x4E0D;&#x6D3B;&#x5316; RB/E2F &#x7D4C;&#x8DEF;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;ezh2 &#x306F;&#x5F0F;&#x306E;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x3092;&#x9045;&#x3089;&#x305B;&#x308B;&#x3057;&#x3001;G2/M &#x902E;&#x6355;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;P53 &#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x305F;&#x6291;&#x5727; ezh2 &#x306F;&#x5F0F;&#x306E; p53 &#x3092;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B; G2/M &#x902E;&#x6355;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3059;&#x308B;&#x65B0;&#x898F;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3068;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x308B;.Ezh2 &#x306F;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306F; HMTase &#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x3082;&#x3064;&#x3057;&#x3001;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x5236;&#x5FA1;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;P53 &#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x5F79;&#x5272; p53 &#x30A8;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x5236;&#x5FA1;&#x3068;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x5B89;&#x5B9A;&#x6027;&#x306E;&#x7DAD;&#x6301;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3001;ezh2 &#x306F;&#x5F0F;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6291;&#x5236;&#x306B;&#x3088;&#x308B; p53 &#x816B;&#x760D;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; ezh2 &#x306F;&#x8868;&#x73FE;&#x306E;&#x65AC;&#x65B0;&#x306A;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306B;&#x764C;&#x306E;&#x9032;&#x884C;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x6D3B;&#x6027;&#x5316; p53 &#x30D2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30F3; &#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; ezh2 &#x306F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC77C;&#xCC28; &#xB178;&#xD654;&#xB294; &#xB3CC;&#xC774;&#xD0AC; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC; &#xC8FC;&#xAE30; &#xCCB4;&#xD3EC; &#xC190;&#xC0C1; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD655;&#xC0B0;&#xC744; &#xC81C;&#xD55C; &#xD558;&#xB294; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC885;&#xC591; &#xC5B5;&#xC81C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xC788;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xB294; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC885;&#xC591; &#xC5B5;&#xC81C;&#xAE30; p53&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xADDC;&#xC81C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB178;&#xD654; &#xACFC;&#xC815;&#xC744; &#xC870;&#xC808;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB178;&#xD654;, &#xC80A;&#xC740; &#xD655;&#xC0B0;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xAE30;&#xBCF8; &#xAC8C;&#xC7AC; hTERT &#xBD88;&#xD6C4;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC758; cDNA microarray &#xBD84;&#xC11D; &#xC218;&#xD589;. &#xD788;&#xC2A4;&#xD1A4; methyltransferase (HMTase), EZH2, &#xB178;&#xD654; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD2B9;&#xD788; downregulated &#xC774;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB41C; p53 EZH2 &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD504;&#xB85C;&#xBAA8;&#xD130;&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; EZH2 &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C;. P53&#xC758;&#xC774; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0;&#xB294; &#xADF8;&#xB300;&#xB85C; p53 transactivation &#xBC0F; DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xD544;&#xC694;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, p53, EZH2 &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC758; &#xC5B5;&#xC555; p53 transcriptional &#xB300;&#xC0C1; p21(Waf1) inactivating RB/E2F &#xACBD;&#xB85C;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2EC;&#xB77C; &#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, EZH2 &#xC2DD;&#xC758; &#xCD5C;&#xC800; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558; &#xACE0; G2/M &#xCCB4;&#xD3EC;&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4; &#xD55C;&#xB2E4;. EZH2 &#xC2DD;&#xC758; p53 &#xC885;&#xC18D; &#xC5B5;&#xC81C; p53 &#xC911;&#xC7AC; G2/M &#xCCB4;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD558;&#xB294; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xD1B5;&#xB85C; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. EZH2 &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; HMTase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xBCF4;&#xC720; &#xD558; &#xACE0; &#xBC0F; epigenetic &#xC870;&#xC808;&#xC5D0; &#xAD00;&#xC5EC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB41C; p53 EZH2 &#xC2DD;&#xC744;, p53 epigenetic &#xADDC;&#xC81C; &#xBC0F; &#xC720;&#xC804;&#xC801; &#xC548;&#xC815;&#xC131;&#xC758; &#xC720;&#xC9C0; &#xBCF4;&#xC218;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCD94;&#xAC00; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. EZH2 &#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; p53 &#xC885;&#xC591; &#xC5B5;&#xC81C; &#xC554; &#xC9C4;&#xD589;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xC18C;&#xC124; &#xC811;&#xADFC;&#xBC95;&#xC744; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB41C; p53 &#xD788;&#xC2A4;&#xD1A4; methyltransferase EZH2 &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Senescencia replicativa es una detenci&oacute;n irreversible de ciclo celular que limita la proliferaci&oacute;n de las c&eacute;lulas da&ntilde;adas y puede ser un mecanismo de supresi&oacute;n de importante tumor in vivo. Este proceso est&aacute; regulado en pasos cr&iacute;ticos por la p53 supresora de tumor. Para identificar los genes que pueden regular el proceso de senescencia, realizamos an&aacute;lisis de microarrays de cDNA de la expresi&oacute;n g&eacute;nica en senescentes, joven proliferando y fibroblastos humanos primarios hTERT-inmortalizado. La histona metiltransferasa (HMTase), EZH2, fue regulada espec&iacute;ficamente en las c&eacute;lulas senescentes. P53 activado hab&iacute;a reprimida EZH2 gene expresi&oacute;n a trav&eacute;s de la represi&oacute;n del promotor del gen EZH2. Esta actividad de p53 requiere transactivaci&oacute;n p53 intacto y dominios de uni&oacute;n a DNA. Adem&aacute;s, depende de la represi&oacute;n del promotor de la EZH2 por p53 inactivadoras RB/E2F v&iacute;as de p53 transcripcional destino p21(Waf1). Adem&aacute;s, la ca&iacute;da de expresi&oacute;n EZH2 retarda la proliferaci&oacute;n celular e induce la detenci&oacute;n de G2/M. Sugerimos que la supresi&oacute;n dependiente de p53 de expresi&oacute;n EZH2 es una v&iacute;a novedosa que contribuye a la detenci&oacute;n de G2/M mediada por p53. Complejo asociado EZH2 posee actividad HMTase y participa en la regulaci&oacute;n epigen&eacute;tica. P53 activado suprime expresi&oacute;n EZH2, sugiriendo un papel m&aacute;s para p53 en regulaci&oacute;n epigen&eacute;tica y en el mantenimiento de la estabilidad gen&eacute;tica. Supresi&oacute;n de la expresi&oacute;n de EZH2 en tumores por p53 puede conducir a nuevos enfoques para controlar la progresi&oacute;n del c&aacute;ncer.

P53 activado suprime gen histona metiltransferasa EZH2.

&#x706D;&#x6D3B;&#x7684; p53 &#x548C;&#x7AEF;&#x7C92;&#x9176;&#x7684;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x53D1;&#x751F;&#x5728;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x764C;&#x75C7;&#xFF0C;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4E24;&#x4E2A;&#x8DEF;&#x5F84;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x8054;&#x7CFB;&#x7684;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3002;&#x91CE;&#x751F;&#x578B; p53 &#x8868;&#x8FBE;&#x5411;&#x4E0B;&#x8C03;&#x8282;&#x901A;&#x8FC7;&#x5176;&#x50AC;&#x5316;&#x4E9A;&#x5355;&#x4F4D;&#xFF0C;&#x7AEF;&#x7C92;&#x9176;&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;&#x9176; &#xFF08;&#x7AEF;&#x7C92;&#x9176;&#xFF09; &#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6291;&#x5236;&#x5404;&#x79CD;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7AEF;&#x7C92;&#x9176;&#x7684;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x91CD;&#x65B0;&#x8BC4;&#x4F30;&#x4F7F;&#x7528;&#x8868;&#x793A;&#x751F;&#x7406;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684; p53 &#x57FA;&#x56E0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7AEF;&#x7C92;&#x9176;&#x8C03;&#x8282; p53 &#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC1;&#x660E;&#xFF0C;&#x5185;&#x6E90;&#x6027;&#x7684;&#x91CE;&#x751F;&#x578B; p53 &#x662F;&#x80FD;&#x591F;&#x5411;&#x4E0B;&#x8C03;&#x8282;&#x7AEF;&#x7C92;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x3001; hTERT mRNA &#x6C34;&#x5E73;&#x548C;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x6D3B;&#x6027; &#xFF1B;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x538B;&#x5236; hTERT &#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x662F;&#x53D1;&#x73B0;&#x7279;&#x5B9A;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;DNA &#x7ED3;&#x5408;&#x6838;&#x5FC3;&#x57DF;&#x3001; N &#x7EC8;&#x7AEF;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x57DF;&#x548C; C &#x7EC8;&#x7AEF;&#x9F50;&#x805A;&#x57DF;&#x7684; p53 &#x7684;&#x5B8C;&#x6574;&#x6027;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981; hTERT &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x9547;&#x538B;&#xFF0C;&#x800C;&#x5BCC;&#x542B;&#x812F;&#x6C28;&#x9178;&#x7684;&#x57DF;&#x548C;&#x6781;&#x7AEF;&#x7684; C &#x603B;&#x7AD9;&#x5E76;&#x4E0D;&#x9700;&#x8981;&#x3002;&#x897F;&#x5357;&#x548C;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x6C89;&#x6DC0;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x8868;&#x660E;&#x7F3A;&#x4E4F; p53 &#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; hTERT &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#xFF0C;&#x63D0;&#x9AD8;&#x95F4;&#x63A5;&#x538B;&#x5236;&#x6027;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3002;HTERT &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x6D3B;&#x6027;&#x4E0B;&#x8C03;&#x5E9F;&#x9664;&#x4E86;&#x4E00;&#x4E2A;&#x663E;&#x6027;&#x8D1F; E2F1 &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x3002;&#x7A81;&#x53D8;&#x5206;&#x6790;&#x786E;&#x5B9A;&#x67D0;&#x4E2A;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684; E2F &#x7F51;&#x7AD9;&#x8D1F;&#x8D23; p53 &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x9547;&#x538B;&#x3002;&#x2477; &#x5173;&#x952E; p53 &#x8F6C;&#x5F55;&#x76EE;&#x6807;&#xFF0C;p21&#xFF0C;&#x8DB3;&#x4EE5;&#x6D88;&#x9664; hTERT &#x7684;&#x4F9D;&#x8D56; p53 &#x7684;&#x9547;&#x538B;&#x3002;&#x706D;&#x6D3B;&#x7684; Rb &#x5BB6;&#x5EAD;&#x4F7F;&#x7528;&#x75C5;&#x6BD2;&#x764C;&#x57FA;&#x56E0;&#x86CB;&#x767D;&#x6216; RNA &#x5E72;&#x6270;&#x51CF;&#x6BD2;&#x9547;&#x538B;&#x3002;&#x7EC4;&#x86CB;&#x767D;&#x5316;&#x9176;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x4E5F;&#x7531; p53 &#x5E72;&#x6270; hTERT &#x7684;&#x9547;&#x538B;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E; hTERT &#x7684;&#x5185;&#x6E90;&#x6027; p53 &#x7684;&#x9547;&#x538B;&#x4ECB;&#x5BFC; p21 &#x548C; E2F&#x3002;

&#x7AEF;&#x7C92;&#x9176;&#x4F9D;&#x8D56; p53 &#x7684;&#x4E0B;&#x8C03;&#x88AB;&#x4ECB;&#x5BFC; p21waf1&#x3002;

Inactivation of p53 and activation of telomerase occur in the majority of human cancers, raising the possibility of a link between these two pathways. Overexpression of wild-type p53 down-regulates the enzymatic activity of telomerase in various cancer cell lines through transcriptional repression of its catalytic subunit, human telomerase reverse transcriptase (hTERT). In this study, we re-evaluated the role of p53 in telomerase regulation using isogenic cell lines expressing physiological levels of p53. We demonstrate that endogenous wild-type p53 was able to down-regulate telomerase activity, hTERT mRNA levels, and promoter activity; however, the ability to repress hTERT expression was found to be cell type-specific. The integrity of the DNA-binding core domain, the N-terminal transactivation domain, and the C-terminal oligomerization domains of p53 was essential for hTERT promoter repression, whereas the proline-rich domain and the extreme C terminus were not required. Southwestern and chromatin immunoprecipitation experiments demonstrated lack of p53 binding to the hTERT promoter, raising the possibility of an indirect repressive mechanism. The down-regulation of hTERT promoter activity was abolished by a dominant-negative E2F1 mutant. Mutational analysis identified a specific E2F site responsible for p53-mediated repression. Knockdown of the key p53 transcriptional target, p21, was sufficient to eliminate the p53-dependent repression of hTERT. Inactivation of the Rb family using either viral oncoproteins or RNA interference attenuated the repression. Inhibition of histone deacetylases also interfered with the repression of hTERT by p53. Therefore, our results suggest that repression of hTERT by endogenous p53 is mediated by p21 and E2F.

p53-dependent down-regulation of telomerase is mediated by p21waf1.

L&#39;inactivation de p53 et l&#39;activation de la t&eacute;lom&eacute;rase se produisent dans la plupart des cancers chez l&#39;humain, la possibilit&eacute; d&#39;un lien entre ces deux voies. La surexpression de p53 sauvage down-r&eacute;glemente l&#39;activit&eacute; de la t&eacute;lom&eacute;rase dans diverses lign&eacute;es de cellules canc&eacute;reuses au moyen de la r&eacute;pression transcriptionnelle de la sous-unit&eacute; catalytique, la transcriptase inverse de la t&eacute;lom&eacute;rase humaine (hTERT). Dans cette &eacute;tude, nous avons r&eacute;&eacute;valu&eacute; le r&ocirc;le de p53 dans la R&egrave;glement de t&eacute;lom&eacute;rase en utilisant des lign&eacute;es isog&eacute;niques exprimant des niveaux physiologiques de la p53. Nous d&eacute;montrons que p53 sauvage endog&egrave;ne put down-r&eacute;glementer l&#39;activit&eacute; t&eacute;lom&eacute;rase, hTERT ARNm et l&#39;activit&eacute; de promoteur ; Toutefois, la possibilit&eacute; de r&eacute;primer l&#39;expression de hTERT s&#39;est av&eacute;r&eacute;e pour &ecirc;tre sp&eacute;cifique au type de cellule. L&#39;int&eacute;grit&eacute; du domaine du noyau de liaison &agrave; l&#39;ADN, le domaine de transactivation N-terminal et les domaines d&#39;oligom&eacute;risation C-terminale de la p53 &eacute;tait essentielle pour la r&eacute;pression de promoteur hTERT, tandis que le domaine riche en proline et la partie C terminale extr&ecirc;me n&#39;&eacute;taient pas n&eacute;cessaires. Exp&eacute;riences d&#39;immunopr&eacute;cipitation de la chromatine et de sud-ouest a fait preuve de manque de liaison de p53 au promoteur hTERT, &eacute;voquant la possibilit&eacute; d&#39;un m&eacute;canisme de r&eacute;pression indirecte. La r&eacute;gulation &agrave; la baisse de l&#39;activit&eacute; du promoteur hTERT abolit un dominant n&eacute;gatif E2F1 mutant. Analyse mutationnelle a identifi&eacute; un site E2F sp&eacute;cifique responsable de la r&eacute;pression induite par la p53. Knockdown de l&#39;expression de la cible transcriptionnelle cl&eacute;s p53, p21, &eacute;tait suffisante pour &eacute;liminer la r&eacute;pression p53 d&eacute;pendant de hTERT. L&#39;inactivation de la famille de Rb oncoprot&eacute;ines virales ou interf&eacute;rence ARN a att&eacute;nu&eacute; la r&eacute;pression. L&#39;inhibition de l&#39;histone d&eacute;sac&eacute;tylases &eacute;galement perturb&eacute; la r&eacute;pression de hTERT par p53. Par cons&eacute;quent, nos r&eacute;sultats sugg&egrave;rent que la r&eacute;pression de hTERT par p53 endog&egrave;ne est v&eacute;hicul&eacute;e par p21 et E2F.

r&eacute;gulation p53 d&eacute;pendant de la t&eacute;lom&eacute;rase est m&eacute;di&eacute;e par p21waf1.

Inaktivierung von p53 und Aktivierung der Telomerase treten in den meisten menschlichen Krebserkrankungen erh&ouml;hen die M&ouml;glichkeit, eine Verbindung zwischen diesen zwei Wege. Eine &Uuml;berexpression von Wildtyp p53 reguliert die enzymatische Aktivit&auml;t der Telomerase in verschiedenen Krebs-Zelllinien durch transkriptionelle Unterdr&uuml;ckung von seine katalytische Untereinheit, menschlichen Telomerase Reverse Transkriptase (hTERT) nach unten. In dieser Studie neu wir bewertet die Rolle von p53 in Telomerase-Verordnung mit isogene Zelllinien, die Ausdruck der physiologischer Ebenen von p53. Wir demonstrieren, dass die endogene Wildtyp-p53 nach unten regulieren-Telomerase-Aktivit&auml;t, hTERT-mRNA-Stufen und Promotor-Aktivit&auml;t konnte; jedoch fand die F&auml;higkeit hTERT Ausdruck unterdr&uuml;cken Zelle Typ abgestimmt sein. Die Integrit&auml;t des die DNA-bindenen zentrale Dom&auml;ne, der N-terminalen Transactivation Dom&auml;ne und Dom&auml;nen auf den C-terminalen Oligomerisierung von p53 war f&uuml;r hTERT Projekttr&auml;ger Repression, w&auml;hrend die Prolin-reiche-Dom&auml;ne und die extreme Carboxyl-Terminus nicht erforderlich waren. Southwestern und Chromatin Immunopr&auml;zipitation Experimente demonstrierte Mangel an p53-Bindung an den hTERT-Projekttr&auml;ger, die M&ouml;glichkeit eines indirekten repressiven Mechanismus ausl&ouml;sen. Die Herunterregulation der hTERT-Promotor-Aktivit&auml;t wurde durch ein Dominant-negativen E2F1 Mutant abgeschafft. Teilhabende Analyse identifiziert eine bestimmte E2F-Site f&uuml;r p53-vermittelte Repression verantwortlich. Niederschlag von transkriptionelle vorbei wesentliche p53, p21, reichte die p53-abh&auml;ngige Unterdr&uuml;ckung der hTERT zu beseitigen. Inaktivierung der Rb-Familie mit viralen Oncoproteinen oder RNA-Interferenz vermindert die Unterdr&uuml;ckung. Hemmung der Histon Deacetylases auch beeintr&auml;chtigt die Unterdr&uuml;ckung der hTERT durch p53. Unsere Ergebnisse empfehlen daher die Unterdr&uuml;ckung der hTERT durch endogene p53 von p21 und E2F vermittelt wird.

p53-abh&auml;ngige Herunterregulation Telomerase ist durch p21waf1 vermittelt.

Inattivazione di p53 e l&#39;attivazione della telomerasi si verificano nella maggior parte dei tumori umani, aumentare la possibilit&agrave; di un collegamento tra questi due percorsi. Sovraespressione di p53 wild-type gi&ugrave;-regola l&#39;attivit&agrave; enzimatica della telomerasi in varie linee di cellule di cancro attraverso transcriptional repressione della sua subunit&agrave; catalitica, human telomerase reverse transcriptase (hTERT). In questo studio, abbiamo rivalutato il ruolo di p53 nel regolamento telomerasi utilizzando linee cellulari isogeni esprimendo livelli fisiologici di p53. Noi dimostrare che quello endogeno selvaggio-tipo p53 &egrave; stato in grado di down-regolano l&#39;attivit&agrave; telomerasica, livelli di hTERT mRNA e l&#39;attivit&agrave; di promotore; Tuttavia, la capacit&agrave; di reprimere l&#39;espressione di hTERT &egrave; stata trovata per essere specifiche per il tipo di cella. L&#39;integrit&agrave; del DNA-binding core dominio, il dominio di transattivazione N-terminale e i domini di oligomerizzazione C-terminale di p53 era essenziale per la repressione di hTERT promotore, considerando che il dominio ricco di prolina ed extreme C terminale non erano necessari. Del sud-ovest e della cromatina immunoprecipitazione esperimenti ha dimostrato mancanza di p53 associazione al promotore hTERT, aumentare la possibilit&agrave; di un meccanismo repressivo indiretta. La down-regulation dell&#39;attivit&agrave; di promotore di hTERT &egrave; stata abolita da un mutante E2F1 dominante-negativo. Analisi mutazionale identificato un sito specifico di E2F responsabile della repressione mediata da p53. Atterramento del target trascrizionale chiave p53, p21, era sufficiente ad eliminare la repressione di p53-dipendente di hTERT. Inattivazione della famiglia Rb utilizzando oncoproteins virale o interferenza del RNA attenuato la repressione. Inibizione dei deacetylases dell&#39;istone anche interferito con la repressione di hTERT da p53. Pertanto, i nostri risultati suggeriscono che la repressione di hTERT da p53 endogeno &egrave; mediata da p21 ed E2F.

p53-dipendente down-regulation della telomerasi &egrave; mediata da p21waf1.

P53 &#x306E;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x5316;&#x3068;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x304C;&#x3093;&#x306E;&#x5927;&#x534A;&#x3092;&#x3053;&#x308C;&#x3089; 2 &#x3064;&#x306E;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x91CE;&#x751F;&#x578B; p53 &#x306E;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x305D;&#x306E;&#x89E6;&#x5A92;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3001;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x9006;&#x8EE2;&#x5199;&#x9175;&#x7D20; &#xFF08;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF09; &#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x6291;&#x5236;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x764C;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x9175;&#x7D20;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;-&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;, &#x751F;&#x7406;&#x7684;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E; p53 &#x8868;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x540C;&#x8CEA;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7CFB;&#x7D71;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x898F;&#x5236;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; p53 &#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x518D;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x305D;&#x306E;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x306E;&#x91CE;&#x751F;&#x578B; p53 &#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x306F;-&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x3001;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E; mRNA &#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x305F;&#x3092;&#x793A;&#x3059;;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x578B;&#x7279;&#x7570;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x30D7;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3068;&#x6975;&#x7AEF;&#x306A;&#x306E; C &#x672B;&#x7AEF;&#x306F;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3001;DNA &#x7D50;&#x5408;&#x30B3;&#x30A2; &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3001;N &#x672B;&#x7AEF;&#x8EE2;&#x5199;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x304A;&#x3088;&#x3073; p53 &#x306E; C &#x672B;&#x7AEF;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30E1;&#x30EA;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; &#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x6574;&#x5408;&#x6027;&#x306F;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x6291;&#x5727;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x5357;&#x897F;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x514D;&#x75AB;&#x6C88;&#x964D;&#x5B9F;&#x9A13; p53 &#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x9593;&#x63A5;&#x306E;&#x6291;&#x5727;&#x7684;&#x306A;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x308B;&#x3001;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC; &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x6B20;&#x5982;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; &#x30C9;&#x30DF;&#x30CA;&#x30F3;&#x30C8; &#x30CD;&#x30AC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6; E2F1 &#x5909;&#x7570;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5EC3;&#x6B62;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5909;&#x7570;&#x89E3;&#x6790;&#x306F; p53 &#x3092;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x6291;&#x5727;&#x306E;&#x8CAC;&#x4EFB;&#x7279;&#x5B9A; E2F &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3002;P21&#x3001;&#x30AD;&#x30FC; p53 &#x8EE2;&#x5199;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x306F;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E; p53 &#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x306E;&#x6291;&#x5727;&#x3092;&#x6392;&#x9664;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5341;&#x5206;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x5316;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x816B;&#x760D;&#x5316;&#x56E0;&#x5B50;&#x307E;&#x305F;&#x306F; RNA &#x5E72;&#x6E09;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F; Rb &#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x5F3E;&#x5727;&#x306F;&#x3001;&#x6E1B;&#x8870;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30F3;&#x8131;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x3082;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x6291;&#x5727;&#x3068; p53 &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x59A8;&#x3052;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F; p21 &#x304A;&#x3088;&#x3073; E2F &#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5185;&#x56E0;&#x6027; p53 &#x306E;&#x6291;&#x5236;&#x3092;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

p53 &#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x306E;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3; &#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E; p21waf1 &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

P53 &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBC0F; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; telomerase&#xC758; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB450; &#xACBD;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC5F0;&#xACB0;&#xC758; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC744; &#xC81C;&#xAE30; &#xD558;&#xB294; &#xC778;&#xAC04; &#xC554;&#xC758; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC57C;&#xC0DD; &#xD615; p53&#xC758; overexpression &#xB2E4;&#xC6B4;-&#xC870;&#xC815;&#xC758; &#xCD09;&#xB9E4; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704;, &#xC778;&#xAC04;&#xC758; telomerase &#xC5ED;&#xC804;&#xC0AC; (hTERT)&#xC758; transcriptional &#xC5B5;&#xC555;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778;&#xC5D0;&#xC11C; telomerase &#xD6A8;&#xC18C; &#xD65C;&#xB3D9;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; p53 &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xD45C;&#xD604; isogenic &#xC140; &#xB77C;&#xC778;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; telomerase &#xADDC;&#xC815;&#xC5D0; p53&#xC758; &#xC5ED;&#xD560; &#xC7AC;&#xD3C9;&#xAC00;. &#xADF8; &#xC0DD; &#xC57C;&#xC0DD; &#xD615; p53 telomerase &#xD65C;&#xB3D9;, hTERT mRNA &#xC218;&#xC900; &#xBC0F; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xD65C;&#xB3D9;; &#xB2E4;&#xC6B4; &#xADDC;&#xC81C; &#xC218; &#xC788;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; hTERT &#xC2DD; &#xC8FC;&#xCCB4; &#xD560; &#xC218; &#xC140; &#xC720;&#xD615;&#xBCC4; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. DNA &#xBB36;&#xB294; &#xCF54;&#xC5B4; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;, N &#xB9E8;&#xB05D; transactivation &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xBC0F; p53&#xC758; C-&#xD130;&#xBBF8;&#xB110; oligomerization &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xBB34;&#xACB0;&#xC131; &#xD504;&#xB864;&#xB9B0; &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xBC0F; &#xADF9;&#xB2E8;&#xC801;&#xC778; C &#xB9D0;&#xB2E8; &#xD544;&#xC694; &#xD588;&#xB2E4; &#xBC18;&#xBA74; hTERT &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xC5B5;&#xC555;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC218;&#xC801; &#xC774;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xB0A8;&#xC11C;&#xBD80;&#xC640; chromatin immunoprecipitation &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC2DC;&#xC5F0; p53 &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xAC04;&#xC811; &#xC5B5;&#xC555; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC758; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131; &#xC81C;&#xAE30; hTERT &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC758; &#xBD80;&#xC871;. HTERT &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xD65C;&#xB3D9; &#xADDC;&#xC815; &#xB2E4;&#xC6B4; &#xC9C0;&#xBC30;&#xC801;&#xC778; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; E2F1 &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC758;&#xD574; &#xD3D0;&#xC9C0; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. Mutational &#xBD84;&#xC11D; p53 &#xC911;&#xC7AC; &#xC5B5;&#xC555;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCC45;&#xC784; &#xD2B9;&#xC815; E2F &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Transcriptional &#xB300;&#xC0C1; &#xD0A4; p53, p21, &#xCD5C;&#xC800;&#xC758; hTERT p53 &#xC885;&#xC18D; &#xC5B5;&#xC555;&#xC744; &#xC81C;&#xAC70; &#xD558;&#xAE30;&#xC5D0; &#xCDA9;&#xBD84; &#xD588;&#xB2E4;. &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC131; oncoproteins &#xB610;&#xB294; RNA &#xAC04;&#xC12D; Rb &#xAC00;&#xC871;&#xC758; &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xAC10;&#xC1E0; &#xC5B5;&#xC555;. &#xD788;&#xC2A4;&#xD1A4; deacetylases&#xC758; &#xC800;&#xD574;&#xB3C4; Htert&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC640; p53&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC29;&#xD574;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; hTERT &#xC0DD; p53&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC5B5;&#xC555; p21&#xC640; E2F &#xC911;&#xC7AC;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

p53 &#xC885;&#xC18D; &#xB2E4;&#xC6B4;-&#xADDC;&#xC81C; telomerase&#xC758; p21waf1&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC911;&#xC7AC;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Inactivaci&oacute;n de p53 y la activaci&oacute;n de la telomerasa se producen en la mayor&iacute;a de los c&aacute;nceres humanos, incrementa la posibilidad de un v&iacute;nculo entre estas dos v&iacute;as. Sobreexpresi&oacute;n de p53 de tipo salvaje abajo-regula la actividad enzim&aacute;tica de la telomerasa en varias l&iacute;neas celulares de c&aacute;ncer a trav&eacute;s de la represi&oacute;n transcripcional de la subunidad catal&iacute;tica, la telomerasa humana de la transcriptasa reversa (hTERT). En este estudio, nos a evaluar el papel de p53 en el Reglamento de la telomerasa utilizando l&iacute;neas de celulares isog&eacute;nicas expresando los niveles fisiol&oacute;gicos de p53. Demostramos que end&oacute;gena p53 de tipo salvaje fue capaz de abajo-regulan la actividad de la telomerasa, los niveles de mRNA de hTERT y actividad de promotor; sin embargo, la capacidad de reprimir la expresi&oacute;n hTERT fue encontrada para ser espec&iacute;ficos del tipo de la c&eacute;lula. La integridad de los dominios de Oligomerizaci&oacute;n de c-terminal de p53, el dominio de la base de uni&oacute;n al ADN y el dominio N-terminal de transactivaci&oacute;n era esencial para la represi&oacute;n del promotor de hTERT, Considerando que no se requer&iacute;a el dominio ricos en prolina y el extremo C terminal. Experimentos de inmunoprecipitaci&oacute;n de Southwestern y cromatina demostraron falta de p53 vinculante al promotor hTERT, incrementa la posibilidad de un mecanismo represivo indirecto. La abajo-regulaci&oacute;n de la actividad del promotor de hTERT fue abolida por un mutante de E2F1 dominante negativo. El an&aacute;lisis mutacional identific&oacute; un sitio espec&iacute;fico de E2F responsable de represi&oacute;n mediada por p53. Ca&iacute;da del blanco transcripcional clave de p53, p21, fue suficiente para eliminar la represi&oacute;n hTERT dependiente de p53. Inactivaci&oacute;n de la familia de Rb utilizando ARN de interferencia u oncoprote&iacute;nas virales aten&uacute;a la represi&oacute;n. Inhibici&oacute;n de la histona desacetilasas tambi&eacute;n interfiere con la represi&oacute;n de hTERT p53. Por lo tanto, nuestros resultados sugieren que la represi&oacute;n de hTERT por end&oacute;gena p53 est&aacute; mediada por p21 y E2F.

dependiente de p53 abajo-regulaci&oacute;n de la telomerasa es mediada por p21waf1.

DNA &#x6297;&#x4F53;&#x662F;&#x5404;&#x79CD;&#x81EA;&#x8EAB;&#x514D;&#x75AB;&#x6027;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6807;&#x8BB0;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x4E3A;&#x81F4;&#x75C5;&#x6027; &#xFF1B;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x8FD9;&#x4E00;&#x4EE3;&#x4E0D;&#x662F;&#x7406;&#x89E3;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x6B64;&#x524D;&#x62A5;&#x9053; anti-DNA &#x6297;&#x4F53;&#x53EF;&#x4EE5; PAb-421&#xFF0C;DNA &#x7ED3;&#x5408;&#x57DF;&#x7684; p53 &#x6297;&#x4F53;&#x72EC;&#x7279;&#x578B;&#x514D;&#x75AB;&#x6CE8;&#x5C04;&#x6240;&#x81F4;&#x5C0F;&#x9F20;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x73B0;&#x5728;&#x7684;&#x62A5;&#x544A;&#x4E2D;&#x6709;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5355;&#x514B;&#x9686;&#x6297;&#x4F53;&#x7684;&#x6E29;&#x548C;&#x4EB2;&#x548C;&#x529B; (K(D) &#x6E10;&#x8FD1;&#x7B49;&#x4E8E; 10(-7))&#xFF0C;&#x4ECE; PAb 421 &#x514D;&#x75AB;&#x5C0F;&#x9F20;&#xFF0C;&#x63D0;&#x51FA;&#x5177;&#x4F53;&#x8BA4;&#x8BC6;&#x5230; PAb 421 &#x548C; DNA&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6297;&#x4F53;&#x529F;&#x80FD;&#x4E2D;&#x7684;&#x6297;&#x539F;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x7AD9;&#x70B9;&#xFF0C;&#x4E00;&#x79CD;&#x72EC;&#x7279;&#x7684;&#x75BE;&#x75C5;&#x5173;&#x8054; anti-DNA &#x6297;&#x4F53; &#xFF1B; &#x591A;&#x4E2A;&#x7CBE;&#x6C28;&#x9178;&#x6B8B;&#x7559;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B; anti-DNA &#x7684;&#x6297;&#x4F53;&#x901A;&#x8FC7; p53 &#x7684; PAb 421 &#x7ED1;&#x5B9A;&#x4E0E;&#x7ADE;&#x4E89;&#x5230; PAb 421 &#x663E;&#x793A;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x4E92;&#x8865;&#x6027;&#x548C;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684; p53 &#x7684;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x8BC6;&#x522B;&#x5B9A;&#x4E49;&#x5BE1;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x7814;&#x7A76;&#x4EA4;&#x53C9;&#x627F;&#x8BA4;&#x7684; PAb 421 &#x548C; DNA &#x7531; anti-DNA &#x6297;&#x4F53;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x57FA;&#x7840;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x9020;&#x8BA1;&#x7B97;&#x673A;&#x6A21;&#x578B; &#xFF08;&#x901A;&#x8FC7;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;-&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5206;&#x5B50;&#x5BF9;&#x63A5;&#x5FAE;&#x8C03;&#xFF09; &#x7684; PAb 421 &#x548C;&#x4E00; anti-DNA &#x5355;&#x514B;&#x9686;&#x6297;&#x4F53;&#x3002;&#x6A21;&#x578B;&#x5316;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x8868;&#x73B0;&#x4E3A;&#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x4E92;&#x8865;&#x6027;&#x3002;&#x6700;&#x503C;&#x5F97;&#x6CE8;&#x610F;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x6A21;&#x578B;&#x5316;&#x7684; PAb 421 &#x7ED3;&#x6784;&#x76F8;&#x4F3C;&#x8D1F;&#x7535;&#x8377;&#x7684;&#x7FA4;&#x4F53;&#x548C;&#x82B3;&#x9999;&#x4FA7;&#x94FE;&#x7684;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x7531; DNA &#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x4E00;&#x79CD;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5206;&#x5B50;&#x53EF;&#x80FD;&#x6A21;&#x4EFF; DNA &#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x548C;&#x96BE;&#x4EE5;&#x6349;&#x6478;&#x7684; anti-DNA &#x6297;&#x4F53;&#x751F;&#x6210;&#x53EF;&#x4EE5;&#x89E3;&#x91CA;&#x5230; DNA &#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x50CF; p53 &#x7684;&#x72EC;&#x7279;&#x578B;&#x514D;&#x75AB;&#x3002;

&#x5355;&#x514B;&#x9686;&#x6297;&#x4F53;&#x7684; DNA &#x7ED3;&#x5408;&#x57DF;&#x7684; p53 &#x6A21;&#x4EFF; DNA &#x7684;&#x6536;&#x8D39;&#x7ED3;&#x6784;&#xFF1A; &#x53CD;&#x5168;&#x8EAB;&#x6297; p53 &#x6297;&#x4F53;&#x662F; anti-DNA&#x3002;

Antibodies to DNA are important markers of various autoimmune diseases and can be pathogenic; however, their generation is not understood. We previously reported that anti-DNA antibodies could be induced in mice by idiotypic immunization to PAb-421, an antibody to a DNA-binding domain of p53. We now report that two monoclonal antibodies of moderate affinity (K(D) asymptotically equal to 10(-7)), raised from PAb-421-immunized mice, specifically recognized both PAb-421 and DNA. These antibodies feature multiple arginine residues in the antigen-binding site, a unique characteristic of disease-associated anti-DNA antibodies; nevertheless, these anti-DNA antibodies show specific complementarity to PAb-421 by competing with p53 for PAb-421 binding and recognize defined oligonucleotides with a specificity similar to that of p53. To study the structural basis for the cross-recognition of PAb-421 and DNA by the anti-DNA antibodies, we constructed computer models (fine-tuned by protein-protein docking) of PAb-421 and one of the monoclonal anti-DNA antibodies. The modeled structures manifested structural complementarity. Most notably, the modeled structure of PAb-421 resembled the structure of DNA by the positions of negatively charged groups and aromatic side chains. Thus, a protein molecule may mimic the structure of DNA and the elusive generation of anti-DNA antibodies could be explained by idiotypic immunity to a DNA-binding protein, like p53.

Monoclonal antibody to a DNA-binding domain of p53 mimics charge structure of DNA: anti-idiotypes to the anti-p53 antibody are anti-DNA.

Anticorps anti-ADN est des marqueurs importants de diverses maladies auto-immunes et peut &ecirc;tre pathog&egrave;nes ; Cependant, leur production n&#39;est pas comprise. Nous avons d&eacute;j&agrave; indiqu&eacute; qu&#39;anticorps anti pourraient &ecirc;tre induites chez les souris par immunisation idiotypiques &agrave; PAb-421, un anticorps &agrave; un domaine de liaison &agrave; l&#39;ADN de p53. Nous rapportons que deux anticorps monoclonaux d&#39;affinit&eacute; mod&eacute;r&eacute;e (empirique asymptotiquement &eacute;gal au rendement, provenant de souris immunis&eacute;es PAb-421, express&eacute;ment reconnu PAb-421 et l&#39;ADN. Ces anticorps pr&eacute;sentent plusieurs r&eacute;sidus d&#39;arginine dans le site de liaison antig&egrave;ne, une caract&eacute;ristique unique d&#39;anticorps anti associ&eacute;s &agrave; la maladie ; N&eacute;anmoins, ces anticorps anti Voir la compl&eacute;mentarit&eacute; sp&eacute;cifique &agrave; PAb-421 en comp&eacute;titionnant avec p53 pour la liaison de la PAb-421 et reconnaissent des oligonucl&eacute;otides d&eacute;finis avec une sp&eacute;cificit&eacute; similaire &agrave; celle de p53. Pour &eacute;tudier la base structurale de la reconnaissance mutuelle de la PAb-421 et l&#39;ADN par les anticorps anti, nous avons construit des mod&egrave;les informatiques (mise au point par les prot&eacute;ines d&#39;ancrage) du carnet d&#39;adresses personnel-421 et celui de l&#39;anticorps monoclonal anti. Les structures mod&eacute;lis&eacute;es manifestent compl&eacute;mentarit&eacute; structurelle. Plus particuli&egrave;rement, la structure mod&eacute;lis&eacute;e du PAb-421 ressemble &agrave; la structure de l&#39;ADN par la position des groupements charg&eacute;s n&eacute;gativement et cha&icirc;nes lat&eacute;rales aromatiques. Ainsi, une mol&eacute;cule de prot&eacute;ine peut-&ecirc;tre imiter la structure de l&#39;ADN et l&#39;insaisissable g&eacute;n&eacute;ration d&#39;anticorps anti-nucl&eacute;osome pourrait s&#39;expliquer par idiotypiques l&#39;immunit&eacute; &agrave; une prot&eacute;ine de liaison &agrave; l&#39;ADN, comme p53.

Anticorps monoclonaux &agrave; un domaine de liaison &agrave; l&#39;ADN de la p53 refl&egrave;te la structure de la charge de l&#39;ADN : anti-idiotypes &agrave; l&#39;anticorps anti-p53 sont nucl&eacute;osome.

Antik&ouml;rper gegen DNA sind wichtige Markierungen der verschiedenen Autoimmunerkrankungen und pathogenen werden k&ouml;nnen; jedoch wird ihre Generation nicht verstanden. Wir berichteten bereits, dass Anti-Antik&ouml;rper in M&auml;usen durch Idiotypic Immunisierung zu PAb-421, einen Antik&ouml;rper zu einer DNA-bindenden Dom&auml;ne von p53 verursacht werden k&ouml;nnte. Wir berichten nun, dass zwei monoklonalen Antik&ouml;rpern moderate Affinit&auml;t (K(D) 10(-7)), ausgel&ouml;st von PAb-421-geimpft M&auml;use, asymptotisch gleich erkannt speziell PAb-421 und DNA. Diese Antik&ouml;rper bieten mehrere Arginin-R&uuml;ckst&auml;nde in der Antigen-Bindungsstelle, ein einzigartiges Merkmal der Krankheit-assoziierten Anti-Antik&ouml;rper; Dennoch, diese Anti-Antik&ouml;rper zeigen spezifische Komplementarit&auml;t PAb-421 durch Wettbewerb mit p53 f&uuml;r PAb-421 Bindung und definierten Oligonukleotide mit einer Besonderheit des p53 vergleichbar zu erkennen. Um die strukturelle Grundlage f&uuml;r die gegenseitige Anerkennung von PAb-421 und DNA durch die Anti-Antik&ouml;rper zu studieren, errichteten wir Computer-Modelle (verfeinert durch Protein-Protein-docking) von PAb-421 und von der monoklonale Anti-Antik&ouml;rper. Die modellierten Strukturen manifestiert strukturelle Komplementarit&auml;t. Vor allem &auml;hnelte die modellierte Struktur der PAb-421 die Struktur der DNA durch die Positionen von negativ geladenen Gruppen und aromatischen Seitenketten. So kann ein Protein-Molek&uuml;l der DNA-Struktur zu imitieren und die schwer fassbare Generation von Anti-Antik&ouml;rpern k&ouml;nnte durch Idiotypic Immunit&auml;t zu einem DNA-bindenden Protein, wie p53 erl&auml;utert werden.

Monoclonal Antik&ouml;rper zu einer DNA-bindenden Dom&auml;ne von p53 imitiert kostenlos-Struktur der DNA: Anti-Idiotypen an der Anti-p53-Antik&ouml;rper sind Anti.

Anticorpi anti-DNA sono indicatori importanti di varie malattie autoimmuni e possono essere patogeni; Tuttavia, non &egrave; compresa la loro generazione. Abbiamo precedentemente riportato che gli anticorpi anti potevano essere indotta in topi da immunizzazione idiotypic di PAb-421, un anticorpo a un dominio DNA-binding di p53. Riportiamo ora che due anticorpi monoclonali di moderata affinit&agrave; (K(D) asintoticamente uguale a 10(-7)), generato da topi immunizzati PAb-421, riconosciuto in particolare DNA e PAb-421. Questi anticorpi presentano pi&ugrave; residui di arginina nel sito di legame dell&#39;antigene, una caratteristica unica di anticorpi anti associata a malattia; Tuttavia, questi anticorpi anti Visualizza complementarit&agrave; specifico per PAb-421 da competizione con p53 per associazione PAb-421 e riconoscono oligonucleotides definito con una specificit&agrave; simile a quella di p53. Per studiare la base strutturale per il cross-riconoscimento della PAb-421 e DNA dagli anticorpi anti, abbiamo costruito modelli di computer (perfezionati da docking proteina-proteina) di PAb-421 e quella degli anticorpi monoclonali anti. Le strutture modellate manifestano complementarit&agrave; strutturale. Pi&ugrave; in particolare, la struttura modellata del PAb-421 somigliava la struttura del DNA dalle posizioni dei gruppi caricati negativamente e catene laterali aromatiche. Cos&igrave;, una molecola proteica pu&ograve; simulare la struttura del DNA e la generazione di anticorpi anti elusiva potrebbe essere spiegata da idiotypic immunit&agrave; a una DNA-binding protein, come p53.

Anticorpo monoclonale per un dominio DNA-binding di p53 imita carica la struttura del DNA: anti-idiotypes all&#39;anticorpo anti-p53 sono anti.

DNA &#x6297;&#x4F53;&#x69D8;&#x3005; &#x306A;&#x81EA;&#x5DF1;&#x514D;&#x75AB;&#x75BE;&#x60A3;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3068;&#x75C5;&#x539F;&#x6027;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x4E16;&#x4EE3;&#x306F;&#x7406;&#x89E3;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x3001;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x6297; dna &#x6297;&#x4F53;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067; PAb-421, p53 &#x306E; DNA &#x7D50;&#x5408;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x6297;&#x4F53;&#x3092;&#x30A4;&#x30C7;&#x30A3;&#x30AA; &#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x4E88;&#x9632;&#x63A5;&#x7A2E;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x4ECA;&#x305D;&#x306E; 2 &#x5831;&#x544A; &#xFF08;K(D) &#x6F38;&#x8FD1;&#x7684;&#x306B;&#x7B49;&#x3057;&#x304F; 10(-7))&#x3001;PAb 421 &#x514D;&#x75AB;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x306F;&#x3001;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x306B;&#x8A8D;&#x8B58; PAb 421 &#x304A;&#x3088;&#x3073; DNA &#x9069;&#x5F53;&#x306A;&#x985E;&#x7E01;&#x306E;&#x30E2;&#x30CE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CA;&#x30EB;&#x6297;&#x4F53;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6297;&#x4F53;&#x306E;&#x6297;&#x539F;&#x7D50;&#x5408;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3001;&#x75BE;&#x60A3;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x6297;&#x4F53;&#x306E;&#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF;&#x306A;&#x7279;&#x5FB4;&#x306E;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AE;&#x30CB;&#x30F3;&#x6B8B;&#x57FA;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6297; dna &#x6297;&#x4F53;&#x306F; p53 &#x306E; PAb 421 &#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3068;&#x7AF6;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;PAb-421 &#x306B;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x76F8;&#x88DC;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3001;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x7279;&#x7570;&#x6027; p53 &#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x8A8D;&#x8B58;&#x3002;&#x6297; dna &#x6297;&#x4F53;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x8A8D;&#x8B58;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9; PAb 421 &#x3068; DNA &#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x7684;&#x57FA;&#x76E4;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;PAb 421 &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30E2;&#x30CE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CA;&#x30EB;&#x6297; dna &#x6297;&#x4F53;&#x306E;&#x4E00;&#x3064;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D4;&#x30E5;&#x30FC;&#x30BF; &#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306E; &#xFF08;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;-&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30C9;&#x30C3;&#x30AD;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5FAE;&#x8ABF;&#x6574;&#xFF09; &#x3092;&#x5EFA;&#x8A2D;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x69CB;&#x9020;&#x306F;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x76F8;&#x88DC;&#x6027;&#x3092;&#x660E;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6700;&#x3082;&#x7279;&#x306B;&#x3001;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x306E; PAb 421 &#x8CA0;&#x8377;&#x96FB;&#x306E;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x3068;&#x82B3;&#x9999;&#x65CF;&#x5074;&#x9396;&#x306E;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x306B;&#x3088;&#x308B; DNA &#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x306B;&#x4F3C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x5206;&#x5B50; DNA &#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x3092;&#x6A21;&#x5023;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3001;&#x3068;&#x3089;&#x3048;&#x3069;&#x3053;&#x308D;&#x306E;&#x306A;&#x3044;&#x4E16;&#x4EE3;&#x6297; dna &#x6297;&#x4F53;&#x306E;&#x30A4;&#x30C7;&#x30A3;&#x30AA; &#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x514D;&#x75AB;&#x306B; p53 &#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x306E; DNA &#x7D50;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

P53 &#x306E; DNA &#x7D50;&#x5408;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x30E2;&#x30CE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CA;&#x30EB;&#x6297;&#x4F53;&#x306E;&#x6A21;&#x5023; DNA &#x306E;&#x96FB;&#x8377;&#x69CB;&#x9020;: &#x53CD;-&#x95D8;&#x6297; p53 &#x6297;&#x4F53;&#x306F;&#x6297;&#x3002;

&#xD56D; &#xCCB4; DNA &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC790;&#xAC00; &#xBA74;&#xC5ED; &#xC9C8;&#xD658;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xD45C;&#xC2DD; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xBCD1;&#xC6D0; &#xC131;; &#xC218; &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC138;&#xB300;&#xB294; &#xC774;&#xD574; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; PAb-421, p53&#xC758; DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC5D0; &#xD56D; &#xCCB4;&#xB97C; &#xBA74;&#xC5ED; idiotypic&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; anti-DNA &#xD56D; &#xCCB4; &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xBC1C; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xBCF4;&#xACE0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC9C0;&#xAE08; &#xB450; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C; &#xB2E8;&#xC77C; &#xD074;&#xB860; &#xD56D; &#xCCB4;&#xC758; &#xC628;&#xAC74;&#xD55C; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; (K(D) 10(-7)), PAb 421 &#xC811;&#xC885; &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC81C;&#xAE30; asymptotically &#xD06C;&#xAC70;&#xB098; &#xD2B9;&#xBCC4;&#xD788; &#xBAA8;&#xB450; &#xC778;&#xC815; PAb-421 DNA. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD56D; &#xCCB4; &#xD56D; &#xC6D0; &#xBB36;&#xB294; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;, &#xC9C8;&#xBCD1; &#xAD00;&#xB828; anti-DNA &#xD56D; &#xCCB4;;&#xC758; &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; &#xD2B9;&#xC131;&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC544;&#xB974;&#xAE30;&#xB2CC; &#xC794;&#xB958;&#xBB3C; &#xAE30;&#xB2A5; &#xADF8;&#xB7FC;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; anti-DNA &#xD56D; &#xCCB4; PAb-421 &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC5D0; p53&#xC640; &#xACBD;&#xC7C1; &#xD558; &#xC5EC; PAb-421&#xC744; &#xD2B9;&#xC815; complementarity &#xD45C;&#xC2DC; &#xD558; &#xACE0; &#xC815;&#xC758; &#xB41C; oligonucleotides p53 &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xD2B9;&#xC774;&#xC131;&#xC73C;&#xB85C; &#xC778;&#xC2DD;. &#xD06C;&#xB85C;&#xC2A4;-&#xC778;&#xC2DD; PAb-421&#xACFC; DNA&#xC758; anti-DNA &#xD56D; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAD6C;&#xC870; &#xAE30;&#xCD08; &#xC5F0;&#xAD6C;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xCEF4;&#xD4E8;&#xD130; &#xBAA8;&#xB378; (&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;-&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB3C4;&#xD0B9;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBBF8;&#xC138;) PAb-421 &#xD55C; &#xB2E8;&#xC77C; &#xD074;&#xB85C; &#xB110; anti-DNA &#xD56D; &#xCCB4;&#xC758; &#xAC74;&#xC124;. &#xBAA8;&#xB378;&#xB41C; &#xAD6C;&#xC870; &#xAD6C;&#xC870; complementarity &#xAC01; &#xC131;. &#xD2B9;&#xD788;, PAb-421&#xC758; &#xBAA8;&#xB378;&#xB41C; &#xAD6C;&#xC870; &#xBD80;&#xC815; &#xCCAD;&#xAD6C; &#xADF8;&#xB8F9; &#xBC0F; &#xC544;&#xB85C;&#xB9C8; &#xC0AC;&#xC774;&#xB4DC; &#xCCB4;&#xC778;&#xC758; &#xC704;&#xCE58;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; DNA&#xC758; &#xAD6C;&#xC870;&#xB97C; &#xB2EE;&#xC740;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBD84;&#xC790;&#xB294; DNA&#xC758; &#xAD6C;&#xC870;&#xB97C; &#xBAA8;&#xBC29; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC0F; anti-DNA &#xD56D; &#xCCB4;&#xC758; &#xAE30;&#xBB18;&#xD55C; &#xC138;&#xB300; p53 &#xAC19;&#xC740; DNA &#xC758;&#xBB34;&#xC801;&#xC778; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xBA74;&#xC5ED; idiotypic&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC124;&#xBA85; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

P53&#xC758; DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC5D0; &#xB2E8;&#xC77C; &#xD074;&#xB860; &#xD56D; &#xCCB4; DNA&#xC758; &#xC694;&#xAE08; &#xAD6C;&#xC870;&#xB97C; &#xBAA8;&#xBC29;&#xD55C;: &#xC548;&#xD2F0;-&#xC548;&#xD2F0;-p53 &#xCCB4; idiotypes&#xB294; anti-DNA.

Anticuerpos contra el ADN es importantes marcadores de varias enfermedades autoinmunes y puede ser pat&oacute;geno; sin embargo, no se entiende su generaci&oacute;n. Divulgamos previamente que se pod&iacute;an inducir anticuerpos anti-DNA en ratones por inmunizaci&oacute;n idiot&iacute;pica a PAb-421, un anticuerpo a un dominio de uni&oacute;n a DNA de p53. Ahora divulgamos que dos anticuerpos monoclonales de afinidad moderada (K(D) asint&oacute;ticamente igual a 10(-7)), criado de ratones PAb-421-inmunizados, espec&iacute;ficamente reconocidos tanto PAb-421 y ADN. Estos anticuerpos presentan m&uacute;ltiples residuos de arginina en el sitio de uni&oacute;n ant&iacute;geno, una caracter&iacute;stica &uacute;nica de anticuerpos anti-DNA asociada a la enfermedad; sin embargo, estos anticuerpos anti-DNA Mostrar complementariedad espec&iacute;fica a PAb-421 compitiendo con p53 para atar PAb-421 y reconocen oligonucle&oacute;tidos definidas con una especificidad similar a la de p53. Para estudiar la base estructural de la Cruz-reconocimiento de PAb-421 y ADN por los anticuerpos anti-DNA, construimos modelos de computadora (afinados por acoplamiento prote&iacute;na-prote&iacute;na) de PAb-421 y uno de los anticuerpos monoclonales anti-DNA. Las estructuras modeladas manifiestan complementariedad estructural. En particular, la estructura modelada de PAb-421 se asemej&oacute; a la estructura del ADN por las posiciones de los grupos cargados negativamente y las cadenas laterales arom&aacute;ticas. As&iacute;, una mol&eacute;cula de prote&iacute;na puede imitar la estructura del ADN y el escurridiza generaci&oacute;n de anticuerpos anti-ADN podr&iacute;a explicarse por idiot&iacute;pica inmunidad a una prote&iacute;na de uni&oacute;n al ADN, como p53.

Anticuerpo monoclonal en un dominio de uni&oacute;n a DNA de p53 imita la estructura de carga del ADN: anti-idiot&iacute;pica al anticuerpo anti-p53 es anti-DNA.

&#x96BE;&#x4EE5;&#x89E3;&#x5256;&#x590D;&#x6742;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x578B;&#x7684;&#x65E2;&#x5B9A;&#x6076;&#x6027;&#x7684;&#x51E0;&#x4E2A;&#x5173;&#x952E;&#x8F6C;&#x5F55;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x5927;&#x5927;&#x963B;&#x788D;&#x4E86;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BF9;&#x6076;&#x6027;&#x8F6C;&#x5316;&#x7684;&#x7406;&#x89E3;&#x3002;&#x51E0;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x8BF4;&#x660E;&#x4E86;&#x53D8;&#x6362;&#x7684;&#x4E00;&#x4E9B;&#x4E3B;&#x8981;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5BF9;&#x81F4;&#x7624;&#x6027;&#x7684;&#x72B6;&#x6001;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x9057;&#x4F20;&#x8981;&#x7D20;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x82B1;&#x4E86;&#x5168;&#x7403;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x5206;&#x6790;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x4F18;&#x70B9;&#xFF0C;&#x5E76;&#x8BD5;&#x56FE;&#x53BB;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x8F6C;&#x578B;&#x7F51;&#x7EDC;&#x7684;&#x5939;&#x5C42;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6B65;&#x9AA4;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BBE;&#x6CD5;&#x67E5;&#x660E;&#x7684;&#x9057;&#x4F20;&#x7279;&#x5F81;&#x7801;&#x548C;&#x5173;&#x952E;&#x76EE;&#x6807;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8282;&#x594F;&#x4E2D; p53&#x3001; Ras&#xFF0C;INK4A &#x8F68;&#x8FF9;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x6539;&#x53D8;&#xFF0C;&#x548C;&#x7AEF;&#x7C92;&#x9176;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x9010;&#x6B65;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x5F15;&#x5165;&#x4E3B;&#x4EBA;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x90FD;&#x662F;&#x6700;&#x4F4E;&#x7684;&#x8981;&#x6C42; sarcomagenesis &#x4F53;&#x5185;&#x9057;&#x4F20;&#x6539;&#x5EFA;&#x3002;&#x5168;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x8868;&#x8FBE;&#x8C31;&#x786E;&#x5B9A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x9057;&#x4F20;&#x7B7E;&#x540D;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x5E94;&#x4E8E;&#x4E0A;&#x9762;&#x5217;&#x51FA;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x6539;&#x53D8;&#x3002;&#x6700;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x552F;&#x4E00;&#x7684;&#x8F6C;&#x6362;&#x6807;&#x5FD7;&#xFF0C;&#x5982;&#x5206;&#x5316;&#x5757;&#x3001; &#x5F02;&#x5E38;&#x6709;&#x4E1D;&#x5206;&#x88C2;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x3001; &#x589E;&#x52A0;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x548C;&#x4FB5;&#x88AD;&#xFF0C;&#x786E;&#x5B9A;&#x5E76;&#x52A0;&#x4E0A;&#x57FA;&#x56E0;&#x7B7E;&#x540D;&#x5206;&#x522B;&#x5206;&#x914D;&#x7ED9;&#x5728; p53&#x3001; INK4A &#x8F68;&#x8FF9;&#x548C; H-Ras &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x6539;&#x53D8;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x5B9A;&#x4E49;&#x5BF9; p53 &#x5931;&#x6D3B;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x662F;&#x4F18;&#x79C0;&#x8F6C;&#x79FB;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E0E;&#x4E73;&#x817A;&#x764C;&#x60A3;&#x8005;&#x4E0D;&#x826F;&#x9884;&#x540E;&#x7684;&#x9884;&#x6D4B;&#x3002;&#x7834;&#x8BD1;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8F6C;&#x578B;&#x6307;&#x7EB9;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x6700;&#x5E38;&#x89C1;&#x7684;&#x764C;&#x57FA;&#x56E0;&#x7A81;&#x53D8;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#xFF0C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x76F8;&#x5F53;&#x6DF1;&#x5165;&#x7684;&#x63A2;&#x8BA8;&#x89C4;&#x7BA1;&#x7535;&#x8DEF;&#x63A7;&#x5236;&#x6076;&#x6027;&#x8F6C;&#x5316;&#x548C;&#x5C06;&#x6709;&#x671B;&#x4E3A;&#x5F00;&#x8F9F;&#x65B0;&#x9014;&#x5F84;&#x5408;&#x7406;&#x6CBB;&#x7597;&#x7684;&#x51B3;&#x5B9A;&#x3002;

&#x8F6C;&#x5F55;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x4E4B;&#x540E;&#x5728; p53&#xFF0C;INK4A&#xFF0C;&#x9057;&#x4F20;&#x5B66;&#x548C;&#x6CBF; H-Ras &#x57FA;&#x56E0;&#x5B9A;&#x4E49;&#x7684;&#x6076;&#x6027;&#x8F6C;&#x5316;&#x9636;&#x6BB5;&#x3002;

The difficulty to dissect a complex phenotype of established malignant cells to several critical transcriptional programs greatly impedes our understanding of the malignant transformation. The genetic elements required to transform some primary human cells to a tumorigenic state were described in several recent studies. We took the advantage of the global genomic profiling approach and tried to go one step further in the dissection of the transformation network. We sought to identify the genetic signatures and key target genes, which underlie the genetic alterations in p53, Ras, INK4A locus, and telomerase, introduced in a stepwise manner into primary human fibroblasts. Here, we show that these are the minimally required genetic alterations for sarcomagenesis in vivo. A genome-wide expression profiling identified distinct genetic signatures corresponding to the genetic alterations listed above. Most importantly, unique transformation hallmarks, such as differentiation block, aberrant mitotic progression, increased angiogenesis, and invasiveness, were identified and coupled with genetic signatures assigned for the genetic alterations in the p53, INK4A locus, and H-Ras, respectively. Furthermore, a transcriptional program that defines the cellular response to p53 inactivation was an excellent predictor of metastasis development and bad prognosis in breast cancer patients. Deciphering these transformation fingerprints, which are affected by the most common oncogenic mutations, provides considerable insight into regulatory circuits controlling malignant transformation and will hopefully open new avenues for rational therapeutic decisions.

Transcriptional programs following genetic alterations in p53, INK4A, and H-Ras genes along defined stages of malignant transformation.

La difficult&eacute; de diss&eacute;quer un ph&eacute;notype complexe des cellules malignes &eacute;tablis &agrave; plusieurs programmes de transcriptionnelles critiques grandement fait obstacle &agrave; notre compr&eacute;hension de la transformation maligne. Les &eacute;l&eacute;ments g&eacute;n&eacute;tiques n&eacute;cessaires pour transformer des cellules humaines primaires &agrave; un &Eacute;tat tumorig&egrave;ne ont &eacute;t&eacute; d&eacute;crits dans plusieurs &eacute;tudes r&eacute;centes. On a eu l&#39;avantage de l&#39;approche globale de profilage g&eacute;nomique et essay&eacute; d&#39;aller un peu plus loin dans la dissection du r&eacute;seau transformation. Nous avons cherch&eacute; &agrave; identifier les signatures g&eacute;n&eacute;tiques et les g&egrave;nes cibles cl&eacute;s qui sous-tendent les alt&eacute;rations g&eacute;n&eacute;tiques dans locus INK4A p53, Ras, et la t&eacute;lom&eacute;rase, introduits de mani&egrave;re progressive dans les fibroblastes humains primaires. Ici, nous montrons que ce sont les alt&eacute;rations g&eacute;n&eacute;tiques minimum requises pour sarcomagenesis in vivo. Un profilage de l&#39;expression du g&eacute;nome identifi&eacute; des signatures g&eacute;n&eacute;tiques distinctes correspondant &agrave; des alt&eacute;rations g&eacute;n&eacute;tiques &eacute;num&eacute;r&eacute;es ci-dessus. Plus important encore, poin&ccedil;ons de transformation unique, comme bloc de diff&eacute;renciation, progression mitotique aberrante, angiogen&egrave;se accrue et pouvoir envahissant, ont &eacute;t&eacute; identifi&eacute;es et coupl&eacute;s avec des signatures g&eacute;n&eacute;tiques assign&eacute;s pour les alt&eacute;rations g&eacute;n&eacute;tiques de la p53, locus INK4A et H-Ras, respectivement. En outre, un programme de transcription qui d&eacute;finit la r&eacute;ponse cellulaire &agrave; l&#39;inactivation de p53 a &eacute;t&eacute; un excellent indicateur du d&eacute;veloppement des m&eacute;tastases et de mauvais pronostic dans le cancer. D&eacute;chiffrage de ces empreintes de transformation, qui sont touch&eacute;s par les mutations oncog&eacute;niques plus communes, donne un aper&ccedil;u consid&eacute;rable des circuits de r&eacute;gulation contr&ocirc;lant la transformation maligne et ouvrira j&#39;esp&egrave;re que de nouvelles voies pour les d&eacute;cisions th&eacute;rapeutiques rationnelles.

Transcription des programmes &agrave; la suite des alt&eacute;rations g&eacute;n&eacute;tiques en p53, INK4A, et H-Ras des g&egrave;nes le long d&eacute;fini les &eacute;tapes de la transformation maligne.

Die Schwierigkeit, einen komplexen Ph&auml;notyp etablierten b&ouml;sartiger Zellen auf mehrere kritische transkriptionelle Programme erheblich zu zergliedern behindert unser Verst&auml;ndnis der malignen Transformation. Die genetische Elemente erforderlich, um einige prim&auml;ren menschlichen Zellen in einen tumorigenic Zustand zu transformieren wurden in mehreren Studien beschrieben. Wir nutzten die genomische Profilerstellung Gesamtansatz und versucht, gehen Sie einen Schritt weiter in die Dissektion des Netzwerks Transformation. Wollten wir die genetischen Signaturen und wichtige Zielgene, die die genetischen Ver&auml;nderungen p53, Ras, INK4A Locus zugrunde liegen, zu identifizieren und Telomerase, prim&auml;ren menschlichen Fibroblasten in gewissem Sinne schrittweise eingef&uuml;hrt. Hier zeigen wir, dass diese sind die minimal erforderlichen genetischen Ver&auml;nderungen f&uuml;r Sarcomagenesis in-vivo. Einer genomweiten Expression profiling identifiziert verschiedene genetische Signaturen, die genetischen Ver&auml;nderungen, die oben aufgef&uuml;hrten entspricht. Vor allem wurden eindeutige Transformation Kennzeichen, wie Differenzierung Block, aberrante mitotische Fortschreiten, verst&auml;rkte Angiogenese und Invasivit&auml;t, identifiziert und gepaart mit genetischen Signaturen bzw. f&uuml;r die genetischen Ver&auml;nderungen in den p53, INK4A Locus und H-Ras, zugewiesen. Dar&uuml;ber hinaus wurde ein transkriptionelle Programm, das die zellul&auml;re Antwort auf p53 Inaktivierung definiert eine ausgezeichnete Pr&auml;diktor f&uuml;r Metastasen Entwicklung und schlechte Prognose bei Brustkrebspatientinnen. Entschl&uuml;sselung dieser Transformation-Fingerabdr&uuml;cke, die die h&auml;ufigsten Onkogene Mutationen betroffen sind, wird bietet erhebliche Einblick in regulatorischen Schaltungen Steuern der malignen Transformation und hoffentlich neue Wege f&uuml;r rational therapeutischen Entscheidungen.

Transcriptional Programme nach genetischen Ver&auml;nderungen p53, INK4A, und H-Ras-gen entlang definierten Phasen einer malignen Transformation.

La difficolt&agrave; di sezionare un fenotipo complesso di cellule maligne stabilite a diversi programmi di transcriptional critici notevolmente impedisce la nostra comprensione della trasformazione maligna. Gli elementi genetici necessari per trasformare alcune cellule umane primarie a uno stato tumorigeno sono state descritte in diversi studi recenti. Abbiamo preso il vantaggio dell&#39;approccio globale analisi genomica e cercato di fare un passo ulteriore nella dissezione della rete trasformazione. Abbiamo cercato di individuare le firme genetiche e geni bersaglio chiave, che sono alla base di alterazioni genetiche di p53, Ras, locus INK4A, e telomerasi, introdotto in maniera graduale in fibroblasti umani primari. Qui, ci mostrano che queste sono le alterazioni genetiche minimamente richieste per sarcomagenesis in vivo. Un genome-wide expression profiling identificato firme genetiche distinte corrispondenti alle alterazioni genetiche sopra elencate. Soprattutto, tratti distintivi unici trasformazione, come il blocco della differenziazione, aberrante progressione mitotica, aumentata angiogenesi e invasivit&agrave;, sono stati identificati e accoppiati con firme genetiche assegnate per alterazioni genetiche nel H-Ras, p53, locus INK4A e rispettivamente. Inoltre, un programma trascrizionale che definisce la risposta cellulare all&#39;inattivazione di p53 &egrave; stato un ottimo predittore di sviluppo di metastasi e di cattiva prognosi nei pazienti con cancro al seno. Decifrare Queste impronte di trasformazione, che subiscono le pi&ugrave; comuni mutazioni oncogenica, fornisce una notevole intuizione normativi circuiti di controllo della trasformazione maligna e speriamo che aprir&agrave; nuove vie per decisioni terapeutiche razionali.

Transcriptional programmi a seguito di alterazioni genetiche in p53, INK4A, e H-Ras geni lungo definite fasi di trasformazione maligna.

&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x8EE2;&#x5199;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x60AA;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3092;&#x89E3;&#x5256;&#x3059;&#x308B;&#x96E3;&#x6613;&#x5EA6;&#x60AA;&#x6027;&#x8EE2;&#x5316;&#x306E;&#x79C1;&#x9054;&#x306E;&#x7406;&#x89E3;&#x3092;&#x59A8;&#x3052;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x3072;&#x3068;&#x521D;&#x4EE3;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x767A;&#x764C;&#x6027;&#x306E;&#x72B6;&#x614B;&#x3092;&#x5909;&#x63DB;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x8981;&#x7D20;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x8FF0;&#x3079;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x3001;&#x30B0;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D0;&#x30EB;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306E;&#x5229;&#x70B9;&#x3092;&#x53D6;&#x308A;&#x3001;&#x5909;&#x63DB;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x306E;&#x90ED;&#x6E05;&#x3067;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x4E00;&#x6B69;&#x3092;&#x884C;&#x304F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x8A66;&#x307F;&#x305F;&#x3002;&#x907A;&#x4F1D;&#x306E;&#x7F72;&#x540D;&#x3068; Ras, p53 INK4A &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5EA7;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5909;&#x5316;&#x306E;&#x6839;&#x5E95;&#x306B;&#x3042;&#x308B;&#x3001;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x52AA;&#x3081;&#x305F;&#x3068;&#x30C6;&#x30ED;&#x30E1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3001;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA;&#x3072;&#x3068;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x3001;&#x6BB5;&#x968E;&#x7684;&#x306B;&#x5C0E;&#x5165;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089; sarcomagenesis in vivo &#x306E;&#x6700;&#x5C0F;&#x9650;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5909;&#x7570;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x767A;&#x73FE;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x4E0A;&#x8A18;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x306B;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B;&#x500B;&#x5225;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x306E;&#x7F72;&#x540D;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6700;&#x3082;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x306F;&#x3001;&#x7570;&#x5E38;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x306E;&#x9032;&#x884C;&#x3001;&#x5897;&#x52A0;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x3001;&#x4FB5;&#x8972;&#x6027;&#x3001;&#x5206;&#x5316;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF;&#x306A;&#x5909;&#x63DB;&#x7279;&#x5FB4;&#x3044;&#x305F;&#x8B58;&#x5225;&#x3001;p53, INK4A &#x8ECC;&#x8DE1;&#x3068;&#x9AD8;-Ras &#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x5272;&#x308A;&#x5F53;&#x3066;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x907A;&#x4F1D;&#x306E;&#x7F72;&#x540D;&#x3092;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;p53 &#x4E0D;&#x6D3B;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3059;&#x308B;&#x8EE2;&#x5199;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x8EE2;&#x79FB;&#x958B;&#x767A;&#x3068;&#x4E73;&#x764C;&#x60A3;&#x8005;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x4E88;&#x5F8C;&#x4E0D;&#x826F;&#x3092;&#x7684;&#x78BA;&#x306B;&#x4E88;&#x6E2C;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6700;&#x3082;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x767A;&#x764C;&#x6027;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x307E;&#x3059;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x5909;&#x63DB;&#x6307;&#x7D0B;&#x3092;&#x89E3;&#x8AAD;&#x60AA;&#x6027;&#x8EE2;&#x5316;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x898F;&#x5236;&#x306E;&#x56DE;&#x8DEF;&#x306B;&#x304B;&#x306A;&#x308A;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x529B;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3001;&#x3046;&#x307E;&#x304F;&#x3044;&#x3051;&#x3070;&#x5408;&#x7406;&#x7684;&#x306A;&#x6CBB;&#x7642;&#x4E0A;&#x306E;&#x610F;&#x601D;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x9053;&#x3092;&#x958B;&#x304F;&#x3067;&#x3057;&#x3087;&#x3046;&#x3002;

&#x8EE2;&#x5199; INK4A, p53 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5909;&#x7570;&#x6B21;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x3001;&#x9AD8;-Ras &#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306B;&#x6CBF;&#x3063;&#x3066;&#x6BB5;&#x968E;&#x60AA;&#x6027;&#x8EE2;&#x5316;&#x306E;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC5B4;&#xB824;&#xC6C0;&#xC744; &#xD06C;&#xAC8C; &#xD558; &#xACE0; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; transcriptional &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8; &#xC124;&#xB9BD;&#xB41C; &#xC545;&#xC131; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xD615; &#xBD80; &#xC545;&#xC131; &#xBCC0;&#xD658;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC774;&#xD574;&#xB97C; &#xBC29;&#xD574; &#xD55C;&#xB2E4;. Tumorigenic &#xC0C1;&#xD0DC;&#xB85C; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC778;&#xAC04; &#xC138;&#xD3EC; &#xC77C;&#xBD80;&#xB97C; &#xBCC0;&#xD658; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC720;&#xC804; &#xC694;&#xC18C;&#xB294; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xCD5C;&#xADFC; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC124;&#xBA85; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xAE00;&#xB85C;&#xBC8C; &#xAC8C;&#xB188; &#xD504;&#xB85C; &#xD30C;&#xC77C;&#xB9C1; &#xBC29;&#xBC95;&#xC758; &#xC7A5;&#xC810;&#xC740; &#xAC14;&#xACE0; &#xBCC0;&#xD658; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C;&#xC758; &#xD574; &#xBD80;&#xC5D0; &#xD55C; &#xAC78;&#xC74C; &#xB354; &#xB098;&#xC544;&#xAC00; &#xC57C; &#xD588;&#xC5B4;&#xC694;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC11C;&#xBA85; &#xBC0F; p53, Ras, INK4A &#xB85C;&#xCEE4; &#xC2A4;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC720;&#xC804; &#xBCC0;&#xACBD; &#xAE30;&#xCD08;, &#xC8FC;&#xC694; &#xB300;&#xC0C1; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xACE0;&#xC790; telomerase, stepwise &#xBC29;&#xC2DD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC778;&#xAC04; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xB3C4;&#xC785; &#xD558; &#xACE0; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC774;&#xB4E4;&#xC740; sarcomagenesis &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCD5C;&#xC18C;&#xD55C;&#xC73C;&#xB85C; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC720;&#xC804; &#xBCC0;&#xACBD; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD504;&#xB85C; &#xD30C;&#xC77C;&#xB9C1; &#xAC8C;&#xB188; &#xB113;&#xC740; &#xC2DD; &#xC720;&#xC804; &#xBCC0;&#xACBD; &#xC704;&#xC5D0; &#xB098;&#xC5F4; &#xB41C;&#xC5D0; &#xD574;&#xB2F9; &#xACE0;&#xC720; &#xC720;&#xC804; &#xC11C;&#xBA85;&#xC744; &#xD655;&#xC778;. &#xAC00;&#xC7A5; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAC83;&#xC740; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xBE14;&#xB85D;, &#xD0C8; &#xC120; mitotic &#xC9C4;&#xD589;, &#xC99D;&#xAC00; &#xB41C; &#xC2E0;&#xC0DD; &#xCE68;&#xC785;, &#xB4F1; &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; &#xBCC0;&#xD658; &#xD2B9;&#xC9D5; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xC5C8;&#xACE0; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC11C;&#xBA85;&#xC744; &#xAC01;&#xAC01; p53, INK4A &#xB85C;&#xCEE4; &#xC2A4;&#xC640; h &#xC870;-&#xB77C;&#xC2A4; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xACBD;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD560;&#xB2F9; &#xD568;&#xAED8;. &#xB610;&#xD55C;, p53 &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xC815;&#xC758; &#xD558;&#xB294; transcriptional &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8; &#xC804;&#xC774; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xBC0F; &#xC720;&#xBC29;&#xC554; &#xD658;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB098;&#xC05C; &#xC608; &#xD6C4;&#xC758; &#xC6B0;&#xC218;&#xD55C; &#xC608;&#xCE21; &#xD588;&#xB2E4;. &#xAC00;&#xC7A5; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xAE08;&#xD558;&#xB294; &#xBCC0;&#xC774; &#xC758;&#xD574; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBC1B;&#xB294;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBCC0;&#xD615; &#xC9C0;&#xBB38; &#xD574;&#xB3C5; &#xADDC;&#xC815; &#xD68C;&#xB85C; &#xC81C;&#xC5B4; &#xC545;&#xC131; &#xBCC0;&#xD658; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xD1B5;&#xCC30;&#xB825;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558; &#xACE0; &#xD76C;&#xB9DD;&#xC744; &#xD569;&#xB9AC;&#xC801;&#xC778; &#xCE58;&#xB8CC; &#xACB0;&#xC815;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4;&#xB3C4; &#xC5F4;&#xB9BD;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Transcriptional p53, INK4A, &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xACBD; &#xB2E4;&#xC74C;&#xACFC; &#xAC19;&#xC740; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xACFC; &#xD568;&#xAED8; h &#xC870;-&#xB77C;&#xC2A4; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC545;&#xC131; &#xBCC0;&#xD654;&#xC758; &#xB2E8;&#xACC4;&#xB97C; &#xC815;&#xC758;.

La dificultad para diseccionar un fenotipo complejo de c&eacute;lulas malignas establecidos varios programas transcripcionales cr&iacute;ticos grandemente impide nuestra comprensi&oacute;n de la transformaci&oacute;n maligna. Los elementos gen&eacute;ticos necesarios para transformar algunas c&eacute;lulas humanas primarios a un estado tumor&iacute;geno fueron descritos en varios estudios recientes. Tomamos la ventaja del enfoque global perfiles gen&oacute;mico y trat&oacute; de dar un paso m&aacute;s en la disecci&oacute;n de la red de transformaci&oacute;n. Intentamos identificar las firmas gen&eacute;ticas de los genes clave que subyacen a las alteraciones gen&eacute;ticas en p53, Ras, INK4A locus, y la telomerasa, introducido de manera gradual en fibroblastos humanos primarios. Aqu&iacute;, demostramos que estas son las alteraciones gen&eacute;ticas m&iacute;nimamente necesarias para sarcomagenesis en vivo. Un perfil de expresi&oacute;n de todo el genoma identificado firmas gen&eacute;ticas distintas correspondientes a las alteraciones gen&eacute;ticas mencionadas anteriormente. Lo m&aacute;s importante, se&ntilde;as de identidad &uacute;nica transformaci&oacute;n, como bloque de diferenciaci&oacute;n, progresi&oacute;n mit&oacute;tica aberrante, aumentada de la angiog&eacute;nesis e invasividad, identificaron y junto con las firmas gen&eacute;ticas asignadas para las alteraciones gen&eacute;ticas en el p53, locus INK4A y H-Ras, respectivamente. Adem&aacute;s, un programa transcripcional que define la respuesta celular a la inactivaci&oacute;n de p53 era un excelente predictor del desarrollo de met&aacute;stasis y mal pron&oacute;stico en pacientes con c&aacute;ncer de mama. Descifrar estas huellas de transformaci&oacute;n, que son afectadas por las mutaciones oncog&eacute;nicas m&aacute;s com&uacute;n, ofrece una visi&oacute;n considerable en circuitos de regulaci&oacute;n control de transformaci&oacute;n maligna y que abrir&aacute; nuevos caminos para las decisiones terap&eacute;uticas racionales.

Transcripcional programas tras alteraciones gen&eacute;ticas en p53, INK4A, y definici&oacute;n de H-Ras genes a lo largo de etapas de transformaci&oacute;n maligna.

Il sistema renina-angiotensina sistemica (RAS) gioca un ruolo cruciale nella patogenesi dell&#39;ipertensione maligna. Tuttavia, il RAS intrarenale potrebbe essere almeno altrettanto importante. Abbiamo studiato la relazione tra intrarenale RAS e mesangiali, cellule epiteliali ed endoteliali proliferazione/apoptosi in un modello di ipertensione maligna.

Enhanced angiotensina II produzione di mesangio renale &egrave; responsabile per il apoptosis/proliferazione delle cellule endoteliali ed epiteliali in un modello di ipertensione maligna.

&#x7CFB;&#x7EDF;&#x6027;&#x80BE;&#x7D20;-&#x8840;&#x7BA1;&#x7D27;&#x5F20;&#x7D20;&#x7CFB;&#x7EDF; (RAS) &#x6076;&#x6027;&#x9AD8;&#x8840;&#x538B;&#x53D1;&#x75C5;&#x673A;&#x5236;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x80BE;&#x5185;&#x7684; RAS &#x53EF;&#x80FD;&#x81F3;&#x5C11;&#x540C;&#x6837;&#x91CD;&#x8981;&#x3002;&#x80BE;&#x5185;&#x7684; RAS &#x548C;&#x80BE;&#x5C0F;&#x7403;&#x7CFB;&#x819C;&#x4E0A;, &#x76AE;&#x548C;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;/&#x51CB;&#x4EA1;&#x5728;&#x6A21;&#x578B;&#x4E2D;&#x7684;&#x6076;&#x6027;&#x9AD8;&#x8840;&#x538B;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x5173;&#x7CFB;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BF9;&#x6B64;&#x8FDB;&#x884C;&#x8C03;&#x67E5;&#x3002;

&#x589E;&#x5F3A;&#x8840;&#x7BA1;&#x7D27;&#x5F20;&#x7D20; II &#x751F;&#x4EA7;&#x7684;&#x80BE;&#x7CFB;&#x8D1F;&#x8D23;&#x7684;&#x6076;&#x6027;&#x9AD8;&#x8840;&#x538B;&#x6A21;&#x578B;&#x4E2D;&#x7684;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x51CB;&#x4EA1;/&#x6269;&#x6563;&#x3002;

The systemic renin-angiotensin system (RAS) plays a crucial role in the pathogenesis of malignant hypertension. However, the intrarenal RAS might be at least equally important. We investigated the relationship between intrarenal RAS and mesangial, epithelial and endothelial cell proliferation/apoptosis in a model of malignant hypertension.

Enhanced angiotensin II production by renal mesangium is responsible for apoptosis/proliferation of endothelial and epithelial cells in a model of malignant hypertension.

Le syst&egrave;me r&eacute;nine-angiotensine syst&eacute;miques (RAS) joue un r&ocirc;le crucial dans la pathogen&egrave;se de l&#39;hypertension maligne. Toutefois, le RAS intrar&eacute;nal peut &ecirc;tre au moins aussi important. Nous avons &eacute;tudi&eacute; la relation entre intrar&eacute;nale RAS et m&eacute;sangiales, prolif&eacute;ration de cellules &eacute;pith&eacute;liales et endoth&eacute;liales/apoptose dans un mod&egrave;le d&#39;hypertension maligne.

Renforc&eacute;e de l&#39;angiotensine II production par mesangium r&eacute;nale est responsable de l&#39;apoptose/prolif&eacute;ration des cellules endoth&eacute;liales et &eacute;pith&eacute;liales dans un mod&egrave;le d&#39;hypertension maligne.

Das systemische Renin-Angiotensin-Aldosteron-System (RAS) spielt eine entscheidende Rolle bei der Entstehung von malignen Hypertonie. Jedoch m&ouml;glicherweise die intrarenal RAS mindestens ebenso wichtig. Wir untersuchten die Beziehung zwischen intrarenal RAS- und mesangialer, epitheliale und endothelial Zelle Vermehrung/Apoptosis in einem Modell der malignen Hypertonie.

Verst&auml;rkte Angiotensin-II-Produktion durch renale Mesangium ist verantwortlich f&uuml;r Apoptose/Proliferation von Endothelzellen und epitheliale Zellen in einem Modell der malignen Hypertonie.

&#x5168;&#x8EAB;&#x30EC;&#x30CB;&#x30F3;-&#x30A2;&#x30F3;&#x30B8;&#x30AA;&#x30C6;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x7CFB; (RAS) &#x60AA;&#x6027;&#x9AD8;&#x8840;&#x5727;&#x75C7;&#x306E;&#x75C5;&#x56E0;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x814E;&#x5185;&#x306E; RAS &#x306F;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3002;&#x814E;&#x5185;&#x306E; RAS &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30E1;&#x30B5;&#x30F3;&#x30AE;&#x30A6;&#x30E0;&#x4E0A;&#x76AE;&#x3068;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;/&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x60AA;&#x6027;&#x9AD8;&#x8840;&#x5727;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306E;&#x95A2;&#x4FC2;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3002;

&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30A2;&#x30F3;&#x30B8;&#x30AA;&#x30C6;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3; II &#x306E;&#x751F;&#x7523;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x814E;&#x30E1;&#x30B5;&#x30F3;&#x30AE;&#x30A6;&#x30E0;&#x60AA;&#x6027;&#x9AD8;&#x8840;&#x5727;&#x75C7;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5185;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30A2;&#x30DD;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;/&#x62E1;&#x6563;&#x306E;&#x8CAC;&#x4EFB;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#xC870;&#xC9C1;&#xC758; renin angiotensin &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; (RAS) &#xC545;&#xC131; &#xACE0;&#xD608;&#xC555;&#xC758; &#xBCD1; &#xC778;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, intrarenal RAS &#xCD5C;&#xC18C;&#xD55C; &#xB3D9;&#xB4F1; &#xD558; &#xAC8C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; intrarenal RAS &#xBC0F; mesangial, &#xC0C1;&#xD53C; &#xBC0F; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD;/apoptosis &#xC545;&#xC131; &#xACE0;&#xD608;&#xC555; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xAD00;&#xACC4;&#xB97C; &#xC870;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4;.

&#xC2E0;&#xC7A5; mesangium&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; angiotensin II &#xC0DD;&#xC0B0; &#xC545;&#xC131; &#xACE0;&#xD608;&#xC555;&#xC758; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0; &#xB0B4; &#xD53C; &#xBC0F; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; apoptosis/&#xD655;&#xC0B0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCC45;&#xC784; &#xC774;&#xB2E4;.

El sistema renina-angiotensina sist&eacute;mico (RAS) desempe&ntilde;a un papel crucial en la patogenia de la hipertensi&oacute;n maligna. Sin embargo, el RAS del intrarenal podr&iacute;a ser al menos igual de importante. Investigamos la relaci&oacute;n entre del intrarenal RAS y mesangiales, c&eacute;lulas epiteliales y endoteliales proliferaci&oacute;n/apoptosis en un modelo de hipertensi&oacute;n maligna.

Mejorada de la angiotensina II producci&oacute;n por Mesangio renal es responsable de la apoptosis/proliferaci&oacute;n de c&eacute;lulas endoteliales y epiteliales en un modelo de hipertensi&oacute;n maligna.

K14-HPV/E(2) &#x5C0F;&#x9F20;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x5BAB;&#x9888;&#x764C;&#x53D1;&#x751F;&#x5728;&#x4EE5;&#x524D;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x6D78;&#x6DA6;&#x7684;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176; 9 (MMP-9)&#xFF0C;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x91CD;&#x8981;&#x80BF;&#x7624;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x548C;&#x8FDB;&#x5C55;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x6765;&#x6E90;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D8B;&#x5316;&#x3001; CCL2 &#x548C;&#x5176;&#x53D7;&#x4F53; CCR2&#xFF0C;&#x8868;&#x8FBE;&#x589E;&#x52A0;&#x4F34;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5927;&#x91CF;&#x6D8C;&#x5165;&#x548C;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-9 &#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x8981;&#x7814;&#x7A76; CCL2 CCR2 &#x4FE1;&#x53F7;&#x9888;&#x690E;&#x80BF;&#x7624;&#x53D1;&#x751F;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x751F;&#x6210; CCR2 &#x7F3A; K14-HPV/E(2) &#x5C0F;&#x9F20;&#x3002;CCR2 null &#x5C0F;&#x9F20; cervixes &#x6240;&#x8F7D;&#x5927;&#x5927;&#x51CF;&#x5C11;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x5947;&#x602A;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x6709;&#x53EA;&#x6E29;&#x548C;&#x5EF6;&#x8BEF;&#x65F6;&#x95F4;&#x8FDB;&#x5C55;&#x4ECE;&#x53D1;&#x80B2;&#x4E0D;&#x826F; CCR2 &#x7F3A;&#x9677;&#x5C0F;&#x9F20;&#xFF0C;&#x764C;&#x548C;&#x7EC8;&#x672B;&#x671F;&#x80BF;&#x7624;&#x53D1;&#x75C5;&#x7387;&#x6216;&#x8D1F;&#x62C5;&#x7684;&#x6CA1;&#x6709;&#x5DEE;&#x522B;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x8FD8;&#x6709;&#x6765;&#x81EA; CCR2 null &#x5C0F;&#x9F20;&#x80BF;&#x7624; MMP-9(+) &#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x52A0;&#x4E30;&#x5EA6;&#x4E0E;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-9 &#x6D3B;&#x52A8;&#x610F;&#x5916;&#x7684;&#x6301;&#x4E45;&#x6027;&#x3002;&#x4F53;&#x5916;&#x751F;&#x7269;&#x9274;&#x5B9A;&#x53D1;&#x73B0;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4EA7;&#x751F;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027; factor(s)&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x6291;&#x5236;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#xFF0C;CXCL8&#xFF0C;&#x54CD;&#x5E94;&#x51CF;&#x5C11;&#x8D8B;&#x5316;&#x6027;&#x53EF;&#x89C1;&#x4E00;&#x6591;&#xFF0C;&#x635F;&#x5BB3;&#x5230;&#x79CD;&#x690D;&#x4F53;&#x5916;&#x4E09;&#x7EF4;&#x80BF;&#x7624;&#x80BF;&#x5757;&#x5165;&#x4FB5;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E; CCL2 &#x5373;&#x5438;&#x5F15;&#x5177;&#x6709;&#x8F85;&#x52A9;&#x80FD;&#x529B;&#x9650;&#x5236;&#x7684;&#x55DC;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6D78;&#x6DA6; proangiogenic CCR2(+) &#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x5982;&#x679C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x80BF;&#x7624;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x88AB;&#x9690;&#x542B;&#xFF0C;MMP-9(+) &#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7136;&#x540E;&#x62DB;&#x52DF;&#xFF0C;&#x80BF;&#x7624;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x548C;&#x8FDB;&#x5C55;&#x63D0;&#x4F9B;&#x66FF;&#x4EE3;&#x65C1;&#x5206;&#x6CCC;&#x652F;&#x6301;&#x3002;

&#x5728;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x80BF;&#x7624;&#x7684;&#x53EF;&#x5851;&#x6027;&#x708E;&#x75C7;&#xFF1A; &#x635F;&#x5BB3;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6D78;&#x6DA6;&#x7684;&#x5524;&#x8D77;&#x8865;&#x507F;&#x7684;&#x4E2D;&#x6027;&#x7C92;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;

Previous studies in the K14-HPV/E(2) mouse model of cervical carcinogenesis demonstrated that infiltrating macrophages are the major source of matrix metalloproteinase 9 (MMP-9), a metalloprotease important for tumor angiogenesis and progression. We observed increased expression of the macrophage chemoattractant, CCL2, and its receptor, CCR2, concomitant with macrophage influx and MMP-9 expression. To study the role of CCL2-CCR2 signaling in cervical tumorigenesis, we generated CCR2-deficient K14-HPV/E(2) mice. Cervixes of CCR2-null mice contained significantly fewer macrophages. Surprisingly, there was only a modest delay in time to progression from dysplasia to carcinoma in the CCR2-deficient mice, and no difference in end-stage tumor incidence or burden. Moreover, there was an unexpected persistence of MMP-9 activity, associated with increased abundance of MMP-9(+) neutrophils in tumors from CCR2-null mice. In vitro bioassays revealed that macrophages produce soluble factor(s) that can suppress neutrophil dynamics, as evidenced by reduced chemotaxis in response to CXCL8, and impaired invasion into three-dimensional tumor masses grown in vitro. Our data suggest a mechanism whereby CCL2 attracts proangiogenic CCR2(+) macrophages with the ancillary capability to limit infiltration by neutrophils. If such tumor-promoting macrophages are suppressed, MMP-9(+) neutrophils are then recruited, providing alternative paracrine support for tumor angiogenesis and progression.

Plasticity in tumor-promoting inflammation: impairment of macrophage recruitment evokes a compensatory neutrophil response.

Des &eacute;tudes ant&eacute;rieures dans le mod&egrave;le de souris K14-HPV/E(2) du cancer du col ut&eacute;rin a d&eacute;montr&eacute; que les macrophages infiltrantes sont la principale source de la m&eacute;talloprot&eacute;inase matricielle 9 (MMP-9), une m&eacute;talloprot&eacute;ase importante pour la progression et l&#39;angiogen&egrave;se tumorale. Nous avons observ&eacute; une expression accrue de la chemoattractant macrophage CCL2 et son r&eacute;cepteur, CCR2, concomitante avec l&#39;afflux de macrophages et d&#39;expression de MMP-9. Afin d&#39;&eacute;tudier le r&ocirc;le de CCL2-CCR2 signalisation dans la tumorigen&egrave;se cervicale, nous avons g&eacute;n&eacute;r&eacute; des souris d&eacute;ficientes CCR2 K14-HPV/E(2). Cervixes des souris CCR2 null contenaient significativement moins de macrophages. &Eacute;tonnamment, on seulement un retard modeste dans le temps jusqu&#39;&agrave; la progression de la dysplasie au cancer chez les souris d&eacute;ficientes en CCR2 et aucune diff&eacute;rence dans l&#39;incidence des tumeurs terminale ou fardeau. En outre, il y avait une persistance inattendue de MMP-9 activit&eacute;, associ&eacute;e &agrave; une plus grande abondance des neutrophiles MMP-9(+) dans les tumeurs des souris CCR2 null. Biologiques in vitro ont r&eacute;v&eacute;l&eacute; que les macrophages produisent des facteurs solubles qui peuvent supprimer neutrophile dynamiques, comme en t&eacute;moigne la chimiotaxie r&eacute;duite en r&eacute;ponse &agrave; CXCL8 et r&eacute;duite d&#39;invasion en masses tumorales tridimensionnelle cultiv&eacute;s in vitro. Nos donn&eacute;es sugg&egrave;rent un m&eacute;canisme par lequel CCL2 attire on CCR2(+) macrophages avec la capacit&eacute; accessoire pour limiter l&#39;infiltration de neutrophiles. Si ces macrophages de tumeur sont supprim&eacute;s, MMP-9(+) neutrophiles sont ensuite recrut&eacute;s, aider paracrine alternatifs pour la progression et l&#39;angiogen&egrave;se tumorale.

Plasticit&eacute; dans la promotion de tumeur inflammation : alt&eacute;ration de recrutement de macrophages &eacute;voque une r&eacute;action compensatoire de neutrophile.

Fr&uuml;here Studien im Mausmodell der zervikalen Karzinogenese K14-HPV/E(2) zeigten, dass infiltrierende Makrophagen die Hauptquelle der Matrix-Metalloproteasen (MMP-9), 9 ein Metalloproteinase wichtig f&uuml;r Tumorangiogenese und Progression. Wir beobachteten erh&ouml;hte Expression von den Makrophagen Botenstoffe, CCL2 und seinen Rezeptor, CCR2, gleichzeitige mit Makrophagen Zustrom und MMP-9-Ausdruck. Um die Rolle der CCL2-CCR2 signalisieren in zervikale Tumorentstehung zu studieren, haben wir K14-HPV/E(2) CCR2-defizienten M&auml;usen generiert. Cervixes CCR2-Null-M&auml;use enthalten deutlich weniger Makrophagen. &Uuml;berraschenderweise gab nur eine geringe Verz&ouml;gerung in der Zeit bis zum Fortschreiten von Dysplasie-Karzinom der CCR2-defizienten M&auml;usen und keinen Unterschied im Endstadium Tumor Inzidenz oder Belastung. Dar&uuml;ber hinaus gab es eine unerwartete Persistenz von MMP-9-Aktivit&auml;t, erh&ouml;hte F&uuml;lle von MMP-9(+) Neutrophilen in Tumoren von M&auml;usen CCR2-Null zugeordnet. In-vitro Bioassays ergab, dass Makrophagen l&ouml;sliche Faktor(en) anzubieten, die k&ouml;nnen neutrophile Dynamik, unterdr&uuml;cken, wie reduzierte Chemotaxis als Reaktion auf CXCL8 belegt, und beeintr&auml;chtigt Invasion in dreidimensionale Tumor Massen in-vitro gewachsen. Unsere Daten zeigen einen Mechanismus, bei dem CCL2 Proangiogenic CCR2(+) Makrophagen mit der zus&auml;tzlichen F&auml;higkeit zieht, Infiltration von Neutrophilen zu begrenzen. Wenn solche Tumor-F&ouml;rderung Makrophagen unterdr&uuml;ckt werden, dann MMP-9(+) Neutrophilen rekrutiert, die alternative parakrine Unterst&uuml;tzung f&uuml;r Tumorangiogenese und Progression.

Plastizit&auml;t im Tumor-F&ouml;rderung der Entz&uuml;ndung: Wertminderung von Makrophagen Rekrutierung evoziert eine kompensatorische neutrophile Antwort.

Precedenti studi nel modello del mouse K14-HPV/E(2) di carcinogenesi cervicale ha dimostrato che i macrofagi infiltranti sono la fonte principale di matrix metalloproteinase 9 (MMP-9), un metalloprotease importante per la progressione e l&#39;angiogenesi tumorale. Abbiamo osservato la maggiore espressione del chemioattrattante macrofago, CCL2 e suo recettore, CCR2, concomitante con l&#39;afflusso dei macrofagi e l&#39;espressione di MMP-9. Per studiare il ruolo di CCL2-CCR2 segnalazione nella tumorigenesi cervicale, abbiamo generato K14-HPV/E(2) CCR2-deficient mice. Cervixes di topi CCR2-null contenuti significativamente meno macrofagi. Sorprendentemente, c&#39;era solo un modesto ritardo nel tempo di progressione da displasia carcinoma in topi CCR2-carenti, e nessuna differenza nell&#39;incidenza di tumore stadio terminale o onere. Inoltre, c&#39;&egrave; stata un&#39;inaspettata persistenza di attivit&agrave; di MMP-9, associati con maggiore abbondanza dei neutrofili MMP-9(+) nei tumori da topi CCR2-null. Analisi biologiche in vitro hanno rivelato che i macrofagi producono fattore solubile (fattori) che possono sopprimere dinamica dei neutrofili, come evidenziato dalla ridotta chemiotassi in risposta a CXCL8 e alterata invasione nelle masse tumorali tridimensionale coltivate in vitro. I nostri dati suggeriscono un meccanismo per cui CCL2 attrae proangiogenic CCR2(+) macrofagi con la funzionalit&agrave; accessoria per limitare l&#39;infiltrazione di neutrofili. Se tale tumore-promozione macrofagi sono soppressi, MMP-9(+) neutrofili sono poi reclutati, fornendo supporto paracrina alternativi per la progressione e l&#39;angiogenesi tumorale.

Plasticit&agrave; nel promuovere il tumore infiammazione: compromissione del reclutamento dei macrofagi evoca una risposta compensatoria dei neutrofili.

&#x4EE5;&#x524D;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x3001;K14-HPV/E(2) &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9; &#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x5B50;&#x5BAE;&#x9838;&#x90E8;&#x767A;&#x304C;&#x3093;&#x306E;&#x6D78;&#x6F64;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8; &#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x30E1;&#x30BF;&#x30ED;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC; 9 (MMP-9&#xFF09;&#x3001;&#x816B;&#x760D;&#x306E;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x3068;&#x9032;&#x884C;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306E;&#x30E1;&#x30BF;&#x30ED;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x6E90;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x904A;&#x8D70;&#x3001;CCL2, &#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x305D;&#x306E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3001;CCR2 &#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306E;&#x6D41;&#x5165;&#x3068; MMP 9 &#x5F0F;&#x3092;&#x4F75;&#x7528;&#x3002;&#x5B50;&#x5BAE;&#x9838;&#x7BA1;&#x767A;&#x304C;&#x3093; CCL2 CCR2 &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;CCR2 &#x6B20;&#x640D; K14-HPV/E(2) &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;CCR2 null &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x306D;&#x3080;&#x3051;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x5C11;&#x306A;&#x3044;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306B;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9A5A;&#x3044;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;&#x9045;&#x5EF6;&#x304C;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3060;&#x3051;&#x3001;&#x3055;&#x3055;&#x3084;&#x304B;&#x306A;&#x6642;&#x9593;&#x3067;&#x9032;&#x884C;&#x3059;&#x308B;&#x7570;&#x5F62;&#x6210;&#x764C; CCR2 &#x6B20;&#x640D;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3068;&#x672B;&#x671F;&#x816B;&#x760D;&#x767A;&#x751F;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x8CA0;&#x62C5;&#x306B;&#x5DEE;&#x306F;&#x306A;&#x3044;&#x304B;&#x3089;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x4E88;&#x671F;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x6C38;&#x7D9A; MMP 9 &#x6D3B;&#x52D5;&#x3001;CCR2 null &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x816B;&#x760D;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; MMP-9(+) &#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306E;&#x8C4A;&#x304B;&#x3055;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x306E;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;In vitro &#x30D0;&#x30A4;&#x30AA;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4; &#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x306E;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x524A;&#x6E1B;&#x5316;&#x5B66;&#x8D70;&#x6027; CXCL8 &#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306B;&#x8A3C;&#x660E;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3057;&#x3001;&#x7121;&#x83CC;&#x57F9;&#x990A; 3&#x6B21;&#x5143;&#x816B;&#x760D;&#x584A;&#x3078;&#x306E;&#x4FB5;&#x5165;&#x969C;&#x5BB3;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x56E0;&#x5B50;&#x3092;&#x4F5C;&#x308A;&#x51FA;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF; whereby CCL2 proangiogenic CCR2(+) &#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x306E;&#x6D78;&#x6F64;&#x3092;&#x5236;&#x9650;&#x3059;&#x308B;&#x88DC;&#x52A9;&#x7684;&#x306A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x5099;&#x3048;&#x305F;&#x5F15;&#x304D;&#x4ED8;&#x3051;&#x308B;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x816B;&#x760D;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x304C;&#x6291;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x5834;&#x5408;&#x306F;&#x3001;&#x9032;&#x884C;&#x3068;&#x816B;&#x760D;&#x8840;&#x7BA1;&#x65B0;&#x751F;&#x306E;&#x4EE3;&#x66FF;&#x30D1;&#x30E9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30F3;&#x652F;&#x63F4;&#x52DF;&#x96C6; MMP-9(+) &#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x304C; [&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x53EF;&#x5851;&#x6027;&#x816B;&#x760D;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x708E;&#x75C7;: &#x6E1B;&#x640D;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x52DF;&#x96C6;&#x306E;&#x4EE3;&#x511F;&#x6027;&#x597D;&#x4E2D;&#x7403;&#x523A;&#x6FC0;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x547C;&#x3073;&#x8D77;&#x3053;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC790; &#xAD81; &#xACBD;&#xBD80; &#xBC1C;&#xC554;&#xC758; K14-HPV/E(2) &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC774;&#xC804; &#xD559;&#xBB38; &#xCE68;&#xD22C; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; metalloproteinase 9 (MMP 9) &#xC885;&#xC591; &#xD608;&#xAD00; &#xC2E0;&#xC0DD; &#xBC0F; &#xC9C4;&#xD589;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; metalloprotease&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xC18C;&#xC2A4; &#xC124;&#xBA85; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC; chemoattractant, CCL2, CCR2, &#xADF8; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xC99D;&#xAC00; &#xC2DD; &#xAD00;&#xCC30; macrophage &#xC720;&#xC785; &#xBC0F; MMP 9 &#xC2DD; &#xC218; &#xBC18;&#xD558;&#xB294;. CCL2 CCR2 &#xACBD;&#xBD80; tumorigenesis&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DC;&#xADF8;&#xB110;&#xB9C1;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xD558;&#xAE30; CCR2 &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; K14-HPV/E(2) &#xC950;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. CCR2 null &#xC0DD;&#xC950;&#xC758; cervixes &#xD3EC;&#xD568; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD788; &#xC801;&#xC740; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;. &#xB180;&#xB78D;&#xAC8C;&#xB3C4;, &#xAC70;&#xAE30;&#xB294; &#xACB8;&#xC190; &#xD55C; &#xC9C0;&#xC5F0; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC5D0; &#xC9C4;&#xD589;&#xC744; CCR2 &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC554; &#xBC0F; &#xB9D0;&#xAE30; &#xC885;&#xC591; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xB960; &#xB610;&#xB294; &#xBD80;&#xB2F4;&#xC5D0; &#xCC28;&#xC774;&#xAC00; &#xBC1C;&#xC721; &#xC774;&#xC0C1;&#xC5D0;&#xC11C;. &#xB610;&#xD55C;, MMP 9 &#xD65C;&#xB3D9;, CCR2 null &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC885;&#xC591;&#xC5D0; MMP-9(+) &#xD638; &#xC911;&#xAD6C;&#xC758; &#xC99D;&#xAC00; &#xD48D;&#xC694;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC608;&#xAE30;&#xCE58; &#xC54A;&#xC740; &#xC720;&#xC9C0;&#xAC00; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; bioassays &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xAC10;&#xC18C; chemotaxis CXCL8&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC785;&#xC99D;&#xC73C;&#xB85C; &#xD638; &#xC5ED;&#xD559;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xCE68;&#xACF5; 3 &#xCC28;&#xC6D0; &#xC885;&#xC591; &#xC9C8;&#xB7C9; &#xCCB4; &#xC678; &#xC131;&#xC7A5;&#xC5D0; &#xC7A5;&#xC560;&#xAC00; &#xC218;&#xC6A9; &#xC131; factor(s) &#xBC1D;&#xD614;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130; CCL2 proangiogenic CCR2(+) &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xD638; &#xC911;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCE68;&#xD22C;&#xB97C; &#xC81C;&#xD55C; &#xD558;&#xB294; &#xBD80;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC720;&#xCE58; &#xD558;&#xB294; &#xADF8;&#xAC83;&#xC5D0; &#xC758;&#xD558;&#xC5EC; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC885;&#xC591;&#xC744; &#xD64D;&#xBCF4; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0; MMP-9(+) neutrophils &#xB2E4;&#xC74C; &#xBAA8;&#xC9D1;, &#xC885;&#xC591; &#xD608;&#xAD00; &#xC2E0;&#xC0DD; &#xBC0F; &#xC9C4;&#xD589;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB300;&#xCCB4; paracrine &#xC9C0;&#xC6D0;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC885;&#xC591;&#xC744; &#xD64D;&#xBCF4;&#xC5D0; &#xC18C;&#xC131; &#xC5FC;&#xC99D;: macrophage &#xBAA8;&#xC9D1; &#xC7A5;&#xC560; &#xBCF4;&#xC0C1; &#xD638; &#xC751;&#xB2F5; &#xB05D;.

Estudios previos en el modelo murino K14-HPV/E(2) de la carcinog&eacute;nesis cervical demostraron que la infiltraci&oacute;n de macr&oacute;fagos son la principal fuente de la metaloproteinasa 9 (MMP-9), una importante progresi&oacute;n y angiog&eacute;nesis tumoral de la metaloproteinasa de matriz. Observamos el aumento de la expresi&oacute;n de la quimioatractiva de macr&oacute;fagos, CCL2 y su receptor, CCR2, concomitante con la afluencia del macr&oacute;fago y la expresi&oacute;n de MMP-9. Para estudiar el papel de la se&ntilde;alizaci&oacute;n CCL2-CCR2 en tumorigenesis cervical, hemos generado ratones deficientes CCR2 K14-HPV/E(2). Cervixes de ratones CCR2 nulo contienen una cantidad significativamente menor de macr&oacute;fagos. Sorprendentemente, hab&iacute;a s&oacute;lo un modesto retraso en tiempo hasta la progresi&oacute;n de la displasia al carcinoma en los ratones deficientes CCR2 y diferencias en la incidencia de tumor de fase final o carga. Adem&aacute;s, hubo una inesperada persistencia de actividad de la MMP-9, asociada con mayor abundancia de neutr&oacute;filos MMP-9(+) en tumores de los ratones CCR2 nulo. Bioensayos in vitro revelaron que los macr&oacute;fagos producen factores solubles que pueden suprimir el neutr&oacute;fila din&aacute;mica, seg&uacute;n lo evidenciado por quimiotactismo reducido en respuesta a CXCL8 y personas con problemas de invasi&oacute;n en masas de tumor tridimensional cultivadas in vitro. Nuestros datos sugieren un mecanismo por el que CCL2 atrae proangiog&eacute;nico CCR2(+) macr&oacute;fagos con la capacidad de auxiliar para limitar la infiltraci&oacute;n por neutr&oacute;filos. Si se suprimen tales tumor-promoci&oacute;n de macr&oacute;fagos, neutr&oacute;filos MMP-9(+) son reclutados luego, apoyo paracrina alternativos para la progresi&oacute;n y la angiog&eacute;nesis tumoral.

Plasticidad en tumor-que promueven inflamaci&oacute;n: deterioro de reclutamiento de macr&oacute;fagos evoca una respuesta compensatoria neutr&oacute;fila.

&#x764C;&#x76F8;&#x5173;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE; (&#x4EBA;&#x4E8B;&#x52B3;&#x52A8;) &#x652F;&#x6301;&#x80BF;&#x7624;&#x53D1;&#x751F;&#x7684;&#x523A;&#x6FC0;&#x8840;&#x7BA1;&#x751F;&#x6210;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x53CA;&#x5165;&#x4FB5;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC1;&#x660E;&#x4EBA;&#x4E8B;&#x52B3;&#x52A8;&#x8FD8;&#x8C03;&#x89E3;&#x63D0;&#x9AD8;&#x80BF;&#x7624;&#x7684;&#x708E;&#x75C7;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x9CDE;&#x72B6;&#x76AE;&#x80A4;&#x764C;&#x53D8;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6A21;&#x578B;&#xFF0C;&#x53D1;&#x73B0;&#x708E;&#x6027;&#x57FA;&#x56E0;&#x7B7E;&#x540D;&#x4EBA;&#x4E8B;&#x52B3;&#x52A8;&#x589E;&#x751F;&#x76AE;&#x80A4;&#x4E2D;&#x5206;&#x79BB;&#x3002;&#x6B64;&#x7B7E;&#x540D;&#x7EF4;&#x6301;&#x4E86;&#x4EBA;&#x4E8B;&#x52B3;&#x52A8;&#x4ECE;&#x968F;&#x540E;&#x7684;&#x76AE;&#x80A4;&#x764C;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5728;&#x4E73;&#x817A;&#x548C;&#x80F0;&#x817A;&#x80BF;&#x7624;&#x5728;&#x5C0F;&#x9F20;&#x548C;&#x540C;&#x6E90;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x764C;&#x75C7;&#x4E2D;&#x660E;&#x663E;&#x770B;&#x51FA;&#x3002;&#x708E;&#x75C7;&#x7684;&#x7B7E;&#x540D;&#x5728;&#x4EBA;&#x4E8B;&#x52B3;&#x52A8;&#x5206;&#x79BB;&#x591A;&#x6B65;&#x76AE;&#x80A4;&#x80BF;&#x7624;&#x53D1;&#x751F;&#x589E;&#x751F;&#x521D;&#x671F;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x88AB;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;&#x4ECE;&#x8FD9;&#x6761;&#x6B65;&#x9053;&#x4EBA;&#x4E8B;&#x52B3;&#x52A8;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x88AB;&#x5E9F;&#x9664;&#x65F6; NF-&#x6D3B;&#x5316;&#x4FE1;&#x53F7;&#x88AB;&#x6291;&#x5236;&#x7684;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6D78;&#x6DA6;&#x3001; &#x65B0;&#x751F;&#x8840;&#x7BA1;&#x548C;&#x80BF;&#x7624;&#x751F;&#x957F;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x6B63;&#x5E38;&#x76AE;&#x80A4;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53EF;&#x4EE5;&#x8FDB;&#x884C;&quot;&#x6559;&#x80B2;&quot;&#x7531;&#x5FEB;&#x9012;&#x708E;&#x6027;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;

&#x5728;&#x65E9;&#x671F;&#x7684;&#x7624;&#x6837;&#x75C5;&#x53D8;&#x5728; NF &#x6D3B;&#x5316;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x534F;&#x8C03;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x80BF;&#x7624;&#x708E;&#x75C7;&#x4E2D;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x764C;&#x76F8;&#x5173;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;

Cancer-associated fibroblasts (CAFs) support tumorigenesis by stimulating angiogenesis, cancer cell proliferation, and invasion. We demonstrate that CAFs also mediate tumor-enhancing inflammation. Using a mouse model of squamous skin carcinogenesis, we found a proinflammatory gene signature in CAFs isolated from dysplastic skin. This signature was maintained in CAFs from subsequent skin carcinomas and was evident in mammary and pancreatic tumors in mice and in cognate human cancers. The inflammatory signature was already activated in CAFs isolated from the initial hyperplastic stage in multistep skin tumorigenesis. CAFs from this pathway promoted macrophage recruitment, neovascularization, and tumor growth, activities that are abolished when NF-kappaB signaling was inhibited. Additionally, we show that normal dermal fibroblasts can be "educated" by carcinoma cells to express proinflammatory genes.

Article	Year
The onset of p53-dependent DNA repair or apoptosis is determined by the level of accumulated damaged DNA. Carcinogenesis\| PubMed ID: 12082025	2002
Falkor, a novel cell growth regulator isolated by a functional genetic screen. Oncogene\| PubMed ID: 12360397	2002
The murine telomerase catalytic subunit shares the PAb-240 mutant specific epitope of the p53 protein. FEBS letters\| PubMed ID: 12832061	2003
Prolonged culture of telomerase-immortalized human fibroblasts leads to a premalignant phenotype. Cancer research\| PubMed ID: 14612508	2003
Expression of prolyl-hydroxylase-1 (PHD1/EGLN2) suppresses hypoxia inducible factor-1alpha activation and inhibits tumor growth. Cancer research\| PubMed ID: 14695194	2003
Hypoxia-dependent regulation of PHD1: cloning and characterization of the human PHD1/EGLN2 gene promoter. FEBS letters\| PubMed ID: 15178343	2004
Activated p53 suppresses the histone methyltransferase EZH2 gene. Oncogene\| PubMed ID: 15208672	2004
p53-dependent down-regulation of telomerase is mediated by p21waf1. The Journal of biological chemistry\| PubMed ID: 15371422	2004
Monoclonal antibody to a DNA-binding domain of p53 mimics charge structure of DNA: anti-idiotypes to the anti-p53 antibody are anti-DNA. European journal of immunology\| PubMed ID: 15495163	2004
Transcriptional programs following genetic alterations in p53, INK4A, and H-Ras genes along defined stages of malignant transformation. Cancer research\| PubMed ID: 15930270	2005
Enhanced angiotensin II production by renal mesangium is responsible for apoptosis/proliferation of endothelial and epithelial cells in a model of malignant hypertension. Journal of hypertension\| PubMed ID: 17414669	2007
Plasticity in tumor-promoting inflammation: impairment of macrophage recruitment evokes a compensatory neutrophil response. Neoplasia (New York, N.Y.)\| PubMed ID: 18392134	2008
Cancer-Associated Fibroblasts Are Activated in Incipient Neoplasia to Orchestrate Tumor-Promoting Inflammation in an NF-kappaB-Dependent Manner. Cancer cell\| PubMed ID: 20138012	2010
Leukocytes as paracrine regulators of metastasis and determinants of organ-specific colonization. International journal of cancer. Journal international du cancer\| PubMed ID: 21387299	2011
The metastatic microenvironment: Brain-derived soluble factors alter the malignant phenotype of cutaneous and brain-metastasizing melanoma cells. International journal of cancer. Journal international du cancer\| PubMed ID: 22447293	2012
From sentinel cells to inflammatory culprits: cancer-associated fibroblasts in tumour-related inflammation. The Journal of pathology\| PubMed ID: 22996812	2013

Neta Erez

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