<em>In vivo</em> Electroporation of Morpholinos into the Regenerating Adult Zebrafish Tail Fin

Certain species of urodeles and teleost fish can regenerate their tissues. Zebrafish have become a widely used model to study the spontaneous regeneration ...

Colorado State University 

&#x4E00;&#x822C;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269; Hox &#x57FA;&#x56E0;&#x5F00;&#x59CB;&#x8868;&#x8FBE;&#x5728;&#x57FA;&#x5143;&#x6761;&#x7EB9;&#x6216;&#x795E;&#x7ECF;&#x677F;&#x7684;&#x65E9;&#x671F;&#x9636;&#x6BB5;&#x3002;Hox &#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x6A21;&#x5F0F;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x9636;&#x6BB5;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x548C;&#x7A7A;&#x95F4;&#x7684;&#x9650;&#x5236;&#x5173;&#x8054;&#x597D;&#x4E0E;&#x8F74;&#x5411;&#x9635;&#x5217;&#x4E2D;&#x5176;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BC1;&#x660E;&#x8FD9;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7684;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C; hoxc13 ortholog&#xFF0C;hoxc13a&#xFF0C;&#x5177;&#x6709;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x6A21;&#x5F0F;&#x5728;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x56FD;&#x5BB6;&#x7684;&#x5C3E;&#x82BD;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x8F74;&#x5411;&#x9635;&#x5217;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x662F;&#x4E00;&#x81F4;&#x7684;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x4E2A; hoxc13 ortholog&#xFF0C;hoxc13b&#xFF0C;&#x6BCD;&#x7CFB;&#x8868;&#x793A;&#xFF0C;&#x5728;&#x65E9;&#x671F;&#x5375;&#x80DA;&#x80CE;&#x901A;&#x8FC7; gastrulae &#x7684;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x53EF;&#x88AB;&#x89C9;&#x5BDF;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6210;&#x7EE9;&#x5355;&#x53CA;&#x86CB;&#x767D;&#x662F;&#x63A2;&#x6D4B;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x9636;&#x6BB5;&#x3002;19 H &#x540E;&#x65BD;&#x80A5; (hpf)&#xFF0C;&#x5728; hoxc13b &#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x662F;&#x4E0A;&#x8C03;&#x5C3E;&#x542B;&#x82DE;&#x5F85;&#x653E;&#xFF0C;&#x6210;&#x4E3A;&#x9650;&#x5236;&#x5230;&#x5C3E;&#x82BD; 24 hpf&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x7531; 24 hpf&#xFF0C;hoxc13b morphants &#x663E;&#x793A;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x53D1;&#x80B2;&#x8FDF;&#x7F13;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x901A;&#x8FC7; co-injecting &#x5408;&#x6210;&#x5E3D;&#x7684; hoxc13a &#x6216; hoxc13b &#x6D88;&#x606F;&#x6551;&#x51FA;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x7531;&#x4E8E;&#x8868;&#x8FBE;&#x6539;&#x53D8;&#x7684;&#x6A21;&#x5F0F;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A; hoxc13 orthologs &#x540E;&#x91CD;&#x590D;&#x4E00;&#x4E9B;&#x529F;&#x80FD;&#x5206;&#x6B67;&#x3002;Hoxc13b morphant &#x5EF6;&#x8FDF;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x8868;&#x5F81;&#x8868;&#x660E;&#x5B83;&#x662F;&#x53CC;&#x76F8;&#x6027;&#x8D28;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x7B2C;&#x4E00;&#x9636;&#x6BB5;&#x53D1;&#x751F;&#x5728; gastrulation&#xFF0C;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x4E4B;&#x524D;&#x5728;&#x8F74;&#x5411;&#x9635;&#x5217;&#x4E2D;&#x7684;&#x5B88;&#x6052;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269; Hox &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x65B0;&#x89D2;&#x8272;&#x4E4B;&#x524D;&#x7684;&#x5EF6;&#x8FDF;&#x3002;&#x5EF6;&#x8FDF;&#x7684;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x66F4;&#x6539;&#x901A;&#x8FC7; 20 hpf &#xFF1B;&#x4E0D;&#x8FC7;&#xFF0C;&#x989D;&#x5916;&#x7684;&#x5EF6;&#x8FDF;&#x51FA;&#x73B0;&#x5728;&#x6B64;&#x65F6;&#x3002;&#x503C;&#x5F97;&#x6CE8;&#x610F;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x9636;&#x6BB5;&#x7684;&#x5EF6;&#x8FDF;&#x4E0E;&#x6210;&#x4E3A;&#x9650;&#x4E8E;&#x5C3E;&#x82BD; hoxc13b &#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x6A21;&#x5F0F;&#x5173;&#x8054;&#x3002;

&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C; hoxc13 orthologs &#x5728;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x6A21;&#x5F0F;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x533A;&#x522B;&#xFF1A; Hoxc13b &#x62DB;&#x52DF;&#x65E9;&#x671F;&#x80DA;&#x80CE;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Vertebrate Hox genes are generally believed to initiate expression at the primitive streak or early neural plate stages. The timing and spatial restrictions of the Hox expression patterns during these stages correlate well with their demonstrated role in axial patterning. Here we demonstrate that one zebrafish hoxc13 ortholog, hoxc13a, has an expression pattern in the developing tail bud that is consistent with the gene playing a role in axial patterning. However, the second hoxc13 ortholog, hoxc13b, is maternally expressed and is detectable in every cell of early cleavage embryos through gastrulae. In addition, both transcript and protein are detectable at these stages. At 19 h post fertilization (hpf), hoxc13b expression is up-regulated in the tail bud, becoming restricted to the tail bud by 24 hpf. Importantly, by 24 hpf, hoxc13b morphants show a specific developmental delay, which can be rescued by co-injecting synthetic capped hoxc13a or hoxc13b message. These data suggest some functional divergence due to altered expression patterns of the two hoxc13 orthologs after duplication. Further characterization of the hoxc13b morphant delay reveals that it is biphasic in nature, with the first phase of the delay occurring before gastrulation, suggesting a new role for vertebrate Hox genes before their conserved role in axial patterning. The extent of the delay does not change through 20 hpf; however, an additional delay emerges at this time. Notably, this second phase of the delay correlates with hoxc13b expression pattern becoming restricted to the tail bud.

Differences in expression pattern and function between zebrafish hoxc13 orthologs: recruitment of Hoxc13b into an early embryonic role.

Vert&#xE9;br&#xE9;s g&#xE8;nes Hox sont g&#xE9;n&#xE9;ralement consid&#xE9;r&#xE9;s pour initier l&#x26;#39;expression &#xE0; la ligne primitive ou les premiers stades de plaque neurale. Le calendrier et les restrictions spatiales des profils d&#x26;#39;expression Hox au cours de ces &#xE9;tapes sont bien corr&#xE9;l&#xE9;s avec leur r&#xF4;le dans la structuration d&#xE9;montr&#xE9; axiale. Ici, nous d&#xE9;montrons que l&#x26;#39;on z&#xE8;bre hoxc13 orthologue, hoxc13a, a un profil d&#x26;#39;expression dans l&#x26;#39;&#x153;uf la queue en d&#xE9;veloppement qui est compatible avec le g&#xE8;ne jouant un r&#xF4;le dans la structuration axiale. Cependant, la seconde hoxc13 orthologue, hoxc13b, est la m&#xE8;re exprim&#xE9; et est d&#xE9;tectable dans chaque cellule de l&#x26;#39;embryon de clivage pr&#xE9;coce &#xE0; travers gastrulas. En outre, &#xE0; la fois la transcription et des prot&#xE9;ines sont d&#xE9;tectables &#xE0; ces stades. A 19 h apr&#xE8;s la f&#xE9;condation (HPF), l&#x26;#39;expression hoxc13b est r&#xE9;gul&#xE9;e &#xE0; la hausse dans l&#x26;#39;&#x153;uf la queue, devient limit&#xE9;e &#xE0; l&#x26;#39;&#x153;uf queue de 24 HPF. Il est important, de 24 HPF, morphants hoxc13b pr&#xE9;sentent un retard de d&#xE9;veloppement sp&#xE9;cifique, qui peut &#xEA;tre sauv&#xE9; par la co-injection de synth&#xE8;se plafonn&#xE9; hoxc13a ou un message hoxc13b. Ces donn&#xE9;es sugg&#xE8;rent une certaine divergence fonctionnelle en raison de profils d&#x26;#39;expression alt&#xE9;r&#xE9;s de la orthologues deux hoxc13 apr&#xE8;s duplication. Une caract&#xE9;risation plus pouss&#xE9;e du retard hoxc13b morphant r&#xE9;v&#xE8;le qu&#x26;#39;il est de nature biphasique, avec la premi&#xE8;re phase du retard avant la gastrulation, ce qui sugg&#xE8;re un nouveau r&#xF4;le pour les g&#xE8;nes Hox vert&#xE9;br&#xE9;s avant leur r&#xF4;le dans la structuration conserv&#xE9; axiale. La mesure du retard ne change pas &#xE0; 20 HPF, mais un d&#xE9;lai suppl&#xE9;mentaire &#xE9;merge &#xE0; cette &#xE9;poque. Notamment, cette deuxi&#xE8;me phase du retard en corr&#xE9;lation avec profil d&#x26;#39;expression de plus en hoxc13b limit&#xE9;e &#xE0; la bourgeon caudal.

Les diff&#xE9;rences de profil d&#x26;#39;expression et de fonction entre Zebrafish Hoxc13 Orthologues: Recrutement de Hoxc13b dans un r&#xF4;le embryonnaire pr&#xE9;coce

Unterschiede in der Expression und Funktion zwischen Zebrafisch hoxc13 Orthologe: Rekrutierung von Hoxc13b in einer fr&#xFC;hen embryonalen Rolle.

I geni Hox vertebrati sono generalmente creduti di avviare espressione presso la linea primitiva o prime fasi piastra neurale. Le restrizioni di tempi e spaziale dei modelli di espressione Hox durante queste fasi correlano bene con loro ruolo dimostrata nel patterning assiale. Qui dimostriamo che uno zebrafish hoxc13 ortholog, hoxc13a, ha un pattern di espressione nel germoglio coda in via di sviluppo che sia coerenza con il gene un ruolo nel patterning assiale. Tuttavia, il secondo ortholog hoxc13, hoxc13b, maternamente &egrave; espressa ed &egrave; rilevabile in ogni cellula embrioni scissione attraverso gastrulae di. Inoltre, sia il transcript e proteine sono rilevabili in queste fasi. A fecondazione post 19 h (hpf) hoxc13b espressione &egrave; up-regolato in boccio la coda, diventando limitato al germoglio coda da 24 hpf. Importante, da 24 hpf, hoxc13b morphants mostrano un ritardo dello sviluppo specifico, che pu&ograve; essere salvato da co-injecting hoxc13a tappo sintetico o hoxc13b messaggio. Questi dati suggeriscono qualche divergenza funzionale a causa di modelli di espressione alterata della due orthologs hoxc13 dopo la duplicazione. Ulteriore caratterizzazione del ritardo morphant hoxc13b rivela che &egrave; bifasica in natura, con la prima fase del ritardo che si verificano prima di gastrulazione, suggerendo un ruolo nuovo per i geni Hox vertebrati prima loro ruolo conservato nel patterning assiale. L&#39;entit&agrave; del ritardo non cambia attraverso 20 hpf; Tuttavia, un ritardo aggiuntivo emerge in questo momento. In particolare, questa seconda fase di ritardo correla con pattern di espressione hoxc13b diventando limitato al germoglio coda.

Differenze nel pattern di espressione e la funzione orthologs di hoxc13 di zebrafish: assunzione di Hoxc13b in un ruolo embrionale precoce.

&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;Hox&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306B;&#x539F;&#x59CB;&#x7DDA;&#x6761;&#x3084;&#x521D;&#x671F;&#x795E;&#x7D4C;&#x677F;&#x306E;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x958B;&#x59CB;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x30BF;&#x30A4;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x3068;Hox&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x7A7A;&#x9593;&#x7684;&#x306A;&#x5236;&#x9650;&#x306F;&#x3001;&#x8EF8;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3068;&#x3088;&#x304F;&#x76F8;&#x95A2;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;1&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;hoxc13&#x30AA;&#x30EB;&#x30BD;&#x30ED;&#x30B0;&#x3001;hoxc13a&#x306F;&#x3001;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x304C;&#x8EF8;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x4E00;&#x8CAB;&#x6027;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x958B;&#x767A;&#x5C3E;&#x82BD;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x767A;&#x73FE;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x7B2C;&#x4E8C;hoxc13&#x30AA;&#x30EB;&#x30BD;&#x30ED;&#x30B0;&#x3001;hoxc13b&#x306F;&#x3001;&#x6BCD;&#x6027;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3001;&#x539F;&#x8178;&#x80DA;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x65E9;&#x671F;&#x306B;&#x5207;&#x65AD;&#x80DA;&#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x3067;&#x691C;&#x51FA;&#x53EF;&#x80FD;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x8EE2;&#x5199;&#x7523;&#x7269;&#x3068;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x304C;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x691C;&#x51FA;&#x53EF;&#x80FD;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002; 19&#x3067;&#x6642;&#x9593;&#x5F8C;&#x306B;&#x53D7;&#x7CBE;&#xFF08;HPF&#xFF09;&#x3001;hoxc13b&#x5F0F;&#x306F;24 HPF&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5C3E;&#x82BD;&#x306B;&#x9650;&#x5B9A;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x5C3E;&#x82BD;&#x3067;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x306E;&#x306F;&#x3001;24 HPF&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;hoxc13b&#x306E;morphants&#x306F;&#x3001;&#x5408;&#x6210;&#x30AD;&#x30E3;&#x30C3;&#x30D7;hoxc13a&#x307E;&#x305F;&#x306F;hoxc13b&#x30E1;&#x30C3;&#x30BB;&#x30FC;&#x30B8;&#x3092;&#x5171;&#x6CE8;&#x5165;&#x3057;&#x3066;&#x6551;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x9045;&#x5EF6;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x8907;&#x88FD;&#x5F8C;&#x306E;2 hoxc13&#x30AA;&#x30FC;&#x30BD;&#x30ED;&#x30B0;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x76F8;&#x9055;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; hoxc13b morphant&#x9045;&#x5EF6;&#x306E;&#x3055;&#x3089;&#x306A;&#x308B;&#x7279;&#x5FB4;&#x306F;&#x3001;&#x8EF8;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x3059;&#x308B;&#x524D;&#x306B;&#x3001;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;Hox&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x65B0;&#x305F;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3001;&#x539F;&#x8178;&#x9665;&#x5165;&#x3059;&#x308B;&#x524D;&#x306B;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x9045;&#x5EF6;&#x6642;&#x9593;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x304C;&#x81EA;&#x7136;&#x306E;&#x4E2D;&#x3067;&#x4E8C;&#x76F8;&#x6027;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9045;&#x5EF6;&#x306E;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x306F;&#x3001;20 HPF&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x5909;&#x66F4;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x304C;&#x3001;&#x8FFD;&#x52A0;&#x306E;&#x9045;&#x5EF6;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x6642;&#x70B9;&#x3067;&#x51FA;&#x3066;&#x304F;&#x308B;&#x3002;&#x7279;&#x306B;&#x3001;&#x9045;&#x5EF6;&#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x30D5;&#x30A7;&#x30FC;&#x30BA;&#x3067;&#x306F;&#x3001;hoxc13b&#x767A;&#x73FE;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306F;&#x5C3E;&#x82BD;&#x306B;&#x9650;&#x5B9A;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x3068;&#x76F8;&#x95A2;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;Hoxc13&#x30AA;&#x30EB;&#x30BD;&#x30ED;&#x30B0;&#x9593;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#xFF1A;&#x521D;&#x671F;&#x80DA;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306B;Hoxc13b&#x306E;&#x52DF;&#x96C6;

&#xCC99;&#xCD94; Hox &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB294; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAE30;&#xBCF8; &#xC5F0;&#xC18D; &#xB610;&#xB294; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD310; &#xCD08;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC2DD; &#xC2DC;&#xC791; &#xBBFF;&#xACE0; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xB2E8;&#xACC4; &#xB3D9;&#xC548; Hox &#xC2DD; &#xD328;&#xD134;&#xC758; &#xD0C0;&#xC774;&#xBC0D; &#xBC0F; &#xACF5;&#xAC04; &#xC81C;&#xD55C; &#xCD95; &#xD328;&#xD134;&#xD654; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xAC80;&#xC99D; &#xB41C; &#xC5ED;&#xD560; &#xC798; &#xC5F0;&#xAD00;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xADF8; &#xD558;&#xB098;&#xC758; zebrafish hoxc13 ortholog hoxc13a, &#xC2DD; &#xD328;&#xD134; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xAF2C;&#xB9AC; &#xAF43; &#xBD09; &#xC624;&#xB9AC; &#xCD95; &#xD328;&#xD134;&#xD654;&#xC5D0; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD558;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; hoxc13 ortholog, hoxc13b&#xC740; &#xC784;&#xC0B0;&#xBD80; &#xD45C;&#xD604; &#xB418; &#xACE0; gastrulae &#xD1B5;&#xD574; &#xCD08;&#xAE30; &#xBD84;&#xC5F4; &#xBC30;&#xC544;&#xC758; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xAC10;&#xC9C0; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xB300; &#xBCF8; &#xBC0F; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC740;&#xC774; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC10;&#xC9C0;. 19 H &#xAC8C;&#xC2DC;&#xBB3C; &#xC218;&#xC815; (hpf), hoxc13b &#xC2DD;&#xC740; &#xC704;&#xB85C; &#xAF2C;&#xB9AC; &#xC0C8;&#xC2F9;&#xC5D0;&#xC11C; 24&#xB85C; &#xAF2C;&#xB9AC; &#xAF43; &#xBD09; &#xC624;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xC81C;&#xD55C; &#xB418; &#xACE0; hpf. &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAC83;&#xC740;, 24&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; hpf, hoxc13b morphants co-injecting &#xD569;&#xC131; &#xCD9C;&#xC7A5;&#xB41C; hoxc13a &#xB610;&#xB294; hoxc13b &#xBA54;&#xC2DC;&#xC9C0;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAD6C;&#xCD9C; &#xB418; &#xACE0; &#xD2B9;&#xC815; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC9C0;&#xC5F0;&#xC744; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xBCF5;&#xC81C; &#xD6C4; &#xB450; hoxc13 orthologs&#xC758; &#xBCC0;&#xACBD; &#xB41C; &#xC2DD; &#xD328;&#xD134;&#xC73C;&#xB85C; &#xC778;&#xD574; &#xC77C;&#xBD80; &#xAE30;&#xB2A5; &#xCC28;&#xC774; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Hoxc13b morphant &#xC9C0;&#xC5F0; &#xCD94;&#xAC00; &#xD2B9;&#xC131; gastrulation, &#xCD95; &#xD328;&#xD134;&#xD654;&#xC5D0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; &#xC5ED;&#xD560; &#xC804;&#xC5D0; &#xCC99;&#xCD94; Hox &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xAE30; &#xC804;&#xC5D0; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xC9C0;&#xC5F0;&#xC758; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC640; &#xC790;&#xC5F0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB098;&#xC544;&#xC84C;&#xB2E4;&#xB294; &#xAC83;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900;&#xB2E4;. &#xC9C0;&#xC5F0;&#xC758; &#xC815;&#xB3C4; 20&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xBCC0;&#xACBD; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; hpf; &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xCD94;&#xAC00; &#xC9C0;&#xC5F0;&#xC774; &#xC774;&#xBC88;&#xC5D0; &#xB098;&#xC628;&#xB2E4;. &#xD2B9;&#xD788;, &#xC9C0;&#xC5F0;&#xC758;&#xC774; &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; &#xB2E8;&#xACC4;&#xB294; hoxc13b &#xC2DD; &#xD328;&#xD134; &#xAF2C;&#xB9AC; &#xAF43; &#xBD09; &#xC624;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xC81C;&#xD55C; &#xB418; &#xACE0; &#xC5F0;&#xAD00; &#xC2DC;&#xD0B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Zebrafish hoxc13 orthologs&#xC758; &#xD328;&#xD134; &#xBC0F; &#xAE30;&#xB2A5; &#xCC28;&#xC774;&#xC810;: &#xCD08;&#xAE30; &#xBC30;&#xC544;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC5D0; hoxc13b&#xC758; &#xCC44;&#xC6A9;.

Vertebrados genes Hox se cree generalmente para iniciar la expresi&#xF3;n en la l&#xED;nea primitiva o de las primeras etapas de la placa neural. El tiempo y las restricciones espaciales de los patrones de expresi&#xF3;n de Hox durante estas etapas se correlacionan bien con su papel demostrado en el patr&#xF3;n axial. Aqu&#xED; demostramos que un pez cebra hoxc13 ortholog, hoxc13a, tiene un patr&#xF3;n de expresi&#xF3;n en el brote de la cola en desarrollo que sea coherente con el gen juega un papel en el patr&#xF3;n axial. Sin embargo, el segundo ortholog hoxc13, hoxc13b, es la madre expresa y es detectable en todas las c&#xE9;lulas de embriones tempranos a trav&#xE9;s de su desdoblamiento gastrulae. Adem&#xE1;s, tanto la transcripci&#xF3;n y las prote&#xED;nas son detectables en estas etapas. A los 19 h post fertilizaci&#xF3;n (HPF), la expresi&#xF3;n hoxc13b est&#xE1; regulado en el brote de la cola, llegando a ser restringido a la yema de cola por 24 HPF. Es importante destacar que un 24 por HPF, morphants hoxc13b muestran un retraso de desarrollo espec&#xED;fico, que puede ser rescatado por la co-inyecci&#xF3;n sint&#xE9;tica con tapa hoxc13a o mensaje hoxc13b. Estos datos sugieren una divergencia funcional debido a los patrones de expresi&#xF3;n alterados de la orthologs dos hoxc13 despu&#xE9;s de la duplicaci&#xF3;n. Adem&#xE1;s de la caracterizaci&#xF3;n de la demora hoxc13b morphant revela que es bif&#xE1;sica en la naturaleza, con la primera fase de la demora que ocurre antes de la gastrulaci&#xF3;n, lo que sugiere un nuevo papel para los genes Hox vertebrados antes de que su funci&#xF3;n conservada en el patr&#xF3;n axial. La medida del retardo no cambia a trav&#xE9;s de 20 HPF, sin embargo, un retraso adicional surge en este momento. Cabe destacar que esta segunda fase de la demora se correlaciona con el patr&#xF3;n de expresi&#xF3;n hoxc13b ser restringido al brote de la cola.

Las diferencias en el patr&#xF3;n de expresi&#xF3;n y la funci&#xF3;n entre pez cebra Hoxc13 Orthologs: Reclutamiento de Hoxc13b en un papel embrionario temprano

&#x6210;&#x529F;&#x7684;&#x7269;&#x79CD;&#x5236;&#x5B9A;&#x6218;&#x7565;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x4F18;&#x5316;&#x5176;&#x7E41;&#x6B96;&#x6027;&#x80FD;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E00;&#x4F18;&#x5316;&#x53EF;&#x80FD;&#x5305;&#x62EC;&#x4E13;&#x95E8;&#x5141;&#x8BB8;&#x5728;&#x751F;&#x7406;&#x4E0A;&#x5177;&#x6709;&#x6311;&#x6218;&#x6027;&#x7684;&#x6761;&#x4EF6;&#x590D;&#x5236;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8FDB;&#x5316;&#x3002;&#x50AC;&#x4E73;&#x7D20; (PRL) &#x57FA;&#x56E0;&#x5BB6;&#x65CF;&#x7FA4;&#x96C6;&#x662F; 25 &#x9F20;&#x6807;&#x7279;&#x5B9A;&#x57FA;&#x56E0;&#x7C07;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x662F;&#x4E0E;&#x751F;&#x6B96;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x4E4B;&#x4E00;&#x3002;&#x8868;&#x5F81; PRL &#x5BB6;&#x5EAD;&#x666E;&#x904D;&#x4E3B;&#x9898;&#x662F;&#x5176;&#x4E0E;&#x598A;&#x5A20;&#x548C;&#x673A;&#x5236;&#x6765;&#x63A7;&#x5236; viviparity &#x7684;&#x8FDE;&#x63A5;&#x3002;PRL &#x6837;&#x86CB;&#x767D; A (PLP A) &#x662F;&#x4F4D;&#x4E8E;&#x5185; PRL &#x5BB6;&#x5EAD;&#x8F68;&#x8FF9; 26 &#x57FA;&#x56E0;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x3002;&#x5B83;&#x662F;&#x7ECF;&#x5178;&#x7684; PRL &#x5BB6;&#x5EAD;&#x6210;&#x5458; &#xFF08;&#x4F8B;&#x5982;&#xFF0C;&#x8FDB;&#x5DE5;&#x515A; A &#x4E0D;&#x4F7F;&#x7528; PRL &#x53D7;&#x4F53;&#xFF09; &#x6ECB;&#x517B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x80DA;&#x7ED2;&#x6BDB;&#x5C3F;&#x56CA;&#x819C;&#x80CE;&#x76D8;&#x548C;&#x5B50;&#x5BAB;&#x81EA;&#x7136;&#x6740;&#x4F24;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5BF9;&#x884C;&#x4E3A;&#x7684;&#x4EA7;&#x751F;&#x3002;&#x5728;&#x6B64;&#x62A5;&#x544A;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684; PLP A &#x5DF2;&#x901A;&#x8FC7;&#x751F;&#x6210; PLP A &#x7A7A;&#x7A81;&#x53D8;&#x5C0F;&#x9F20;&#x8FDB;&#x884C;&#x8C03;&#x67E5;&#x3002;&#x755C;&#x7267;&#x4E1A;&#x6807;&#x51C6;&#x5316;&#x7684;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x8FDB;&#x5DE5;&#x515A;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5177;&#x6709;&#x9002;&#x5EA6;&#x5BF9;&#x7E41;&#x6B96;&#x6027;&#x80FD;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x540C;&#x6837;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x662F;&#x5173;&#x952E;&#x7E41;&#x6B96;&#x5C0F;&#x9F20;&#x66B4;&#x9732;&#x5728;&#x751F;&#x7406;&#x5E94;&#x6FC0;&#x3002;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x5C0F;&#x9F20;&#x66B4;&#x9732;&#x4E8E;&#x4F4E;&#x538B;&#x7F3A;&#x6C27;&#x5B55;&#x671F;&#x5BB9;&#x6613;&#x9002;&#x5E94;&#x548C;&#x4FDD;&#x6301;&#x5176;&#x6000;&#x5B55;&#xFF0C;&#x800C; PLP A &#x7A7A;&#x57FA;&#x56E0;&#x7A81;&#x53D8;&#x5C0F;&#x9F20;&#x4E0D;&#x80FD;&#x9002;&#x5E94;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x598A;&#x5A20;&#x5931;&#x8D25;&#x3002;PLP A &#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x4F4E;&#x6C27;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x6539;&#x7F16; hemochorial placentation &#x548C;&#x80DA;&#x5916;&#x548C;&#x80DA;&#x80CE;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x56E0;&#x6B64;&#x517B;&#x5206;&#x6D41;&#x5411;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x3002;&#x7ED3;&#x679C;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x7269;&#x79CD;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x751F;&#x6B96;&#x6539;&#x7F16;&#x3002;

&#x50AC;&#x4E73;&#x7D20;&#x5BB6;&#x5EAD; paralog &#x89C4;&#x7BA1;&#x751F;&#x6B96;&#x751F;&#x7406;&#x5E94;&#x6FC0;&#x7684;&#x9002;&#x5E94;&#x3002;

Successful species develop strategies to optimize their reproductive performance. This optimization likely includes the evolution of genes that specifically permit reproduction in physiologically challenging conditions. The prolactin (PRL) family gene cluster is one of 25 mouse-specific gene clusters, the majority of which are associated with reproduction. A prevailing theme characterizing the PRL family is its connection with pregnancy and mechanisms controlling viviparity. PRL-like protein A (PLP-A) is one of 26 genes located within the PRL family locus. It is a nonclassical member of the PRL family (e.g., PLP-A does not use the PRL receptor) produced by trophoblast cells of the chorioallantoic placenta and acts on uterine natural killer cells. In this report, the biology of PLP-A has been investigated by generating mice with a PLP-A null mutation. Under standardized animal husbandry conditions, PLP-A possesses modest effects on reproductive performance. However, this same gene is critical for reproduction when mice are exposed to a physiological stressor. Wild-type mice exposed to hypobaric hypoxia during gestation readily adapt and maintain their pregnancies, whereas PLP-A null mutant mice fail to adapt, resulting in pregnancy failure. PLP-A contributes to hypoxia-induced adaptations critical to hemochorial placentation and thus nutrient flow to extraembryonic and embryonic tissues. The findings provide insights into species-specific reproductive adaptations.

A prolactin family paralog regulates reproductive adaptations to a physiological stressor.

Esp&egrave;ces r&eacute;ussis &eacute;laborer des strat&eacute;gies pour optimiser leur performance reproductive. Cette optimisation probable comprend l&#39;&eacute;volution des g&egrave;nes sp&eacute;cifiquement permettant la reproduction dans des conditions physiologiquement difficiles. Le groupe de g&egrave;nes familiaux de prolactine (PRL) est l&#39;un des 25 groupes de g&egrave;nes de la souris sp&eacute;cifiques, dont la plupart est associ&eacute;e &agrave; la reproduction. Un th&egrave;me dominant qui caract&eacute;risent la famille CTR est son lien avec la grossesse et les m&eacute;canismes qui contr&ocirc;lent la viviparit&eacute;. PRL-like protein A (PPL-A) est l&#39;un des 26 g&egrave;nes localis&eacute;s dans le locus family CTR. Il est membre de la famille PRL non-classiques (p. ex., PLP-A n&#39;utilise pas le r&eacute;cepteur PRL) produites par les cellules trophoblastiques du placenta Chorio et agit sur les cellules tueuses naturelles ut&eacute;rines. Dans ce rapport, la biologie du PLP-A a &eacute;t&eacute; &eacute;tudi&eacute;e en g&eacute;n&eacute;rant des souris pr&eacute;sentant une mutation nulle PLP-A. Dans des conditions normalis&eacute;es de l&#39;&eacute;levage, PLP-A poss&egrave;de des effets modestes sur la capacit&eacute; reproductrice. Toutefois, ce m&ecirc;me g&egrave;ne est essentiel pour la reproduction lorsque les souris sont expos&eacute;es &agrave; un stress physiologique. Souris de type sauvage expos&eacute;es &agrave; l&#39;hypoxie hypobare durant la gestation facilement adapter et maintiennent leurs grossesses, alors que les souris mutantes nulles PLP-A ne parviennent pas &agrave; s&#39;adapter, d&eacute;faillance de la grossesse. PLP-A contribue &agrave; des adaptations induites par l&#39;hypoxie critiques &agrave; placentation hemochorial et les flux ainsi des &eacute;l&eacute;ments nutritifs aux tissus extra-embryonnaires et embryonnaires. Les r&eacute;sultats donnent un aper&ccedil;u dans des adaptations sp&eacute;cifiques &agrave; l&#39;esp&egrave;ce de reproduction.

Un paralogue famille de prolactine r&eacute;gule la reproduction adaptations &agrave; un facteur de stress physiologique.

Ein Prolaktin Familie Paralog regelt reproduktiven Anpassungen an einem physiologischen Stressor.

Successo specie sviluppare strategie per ottimizzare la loro performance riproduttiva. Questa ottimizzazione probabilmente include l&#39;evoluzione dei geni che permettono la riproduzione in fisiologicamente sfidando condizioni specificamente. Il cluster di famiglia genica di prolattina (PRL) &egrave; uno dei 25 ammassi di gene specifico del mouse, la maggior parte dei quali &egrave; associata con la riproduzione. Un tema prevalente che caratterizza la famiglia PRL &egrave; la sua connessione con la gravidanza e meccanismi di controllo viviparit&agrave;. PRL-come proteina (PLP-A) &egrave; uno dei 26 geni localizzati all&#39;interno del locus famiglia PRL. &Egrave; un membro della famiglia PRL nonclassical (ad es., PLP-A non utilizzare il recettore PRL) prodotte dalle cellule del trofoblasto della placenta chorioallantoic e atti su uterine le cellule natural killer. In questa relazione, la biologia di PLP-A &egrave; stata studiata mediante la generazione di topi con una mutazione di PLP-A null. In condizioni di allevamento standardizzato, PLP-A possiede modesti effetti sulla performance riproduttiva. Tuttavia, questo stesso gene &egrave; fondamentale per la riproduzione quando i topi sono esposti a un fattore di stress fisiologico. Selvaggio-tipo topi esposti all&#39;ipossia ipobarica durante la gestazione prontamente adeguare e mantengono loro gravidanze, mentre topi mutanti null PLP-A non riuscire ad adattarsi, con conseguente insufficienza di gravidanza. PLP-A contribuisce all&#39;ipossia indotta adattamenti critici al flusso cos&igrave; nutriente ai tessuti extraembryonic ed embrionali e placentazione hemochorial. I risultati forniscono approfondimenti specifici adattamenti riproduttivi.

Un paralog famiglia prolattina regola adattamenti riproduttivi per un fattore di stress fisiologico.

&#x6210;&#x529F;&#x3057;&#x305F;&#x7A2E;&#x306E;&#x751F;&#x6B96;&#x306E;&#x30D1;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30DE;&#x30F3;&#x30B9;&#x3092;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x6226;&#x7565;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x306B;&#x306F;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x306B;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x6761;&#x4EF6;&#x306B;&#x6311;&#x6226;&#x518D;&#x73FE;&#x53EF;&#x80FD;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x9032;&#x5316;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3; (PRL) &#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x5927;&#x90E8;&#x5206;&#x304C;&#x518D;&#x73FE;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B; 25 &#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E; 1 &#x3064;&#x3067;&#x3059;&#x3002;PRL &#x5BB6;&#x65CF;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x3065;&#x3051;&#x308B;&#x3044;&#x304D;&#x308F;&#x305F;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x4E3B;&#x984C;&#x598A;&#x5A20;&#x3068;&#x7A42;&#x767A;&#x82BD;&#x6027;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3068;&#x306E;&#x63A5;&#x7D9A;&#x3067;&#x3059;&#x3002;PRL &#x69D8;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; (PLP A) PRL &#x5BB6;&#x65CF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30B9;&#x5185;&#x306B;&#x3042;&#x308B; 26 &#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E; 1 &#x3064;&#x3067;&#x3059;&#x3002;PRL &#x306E;&#x5BB6;&#x65CF;&#x306E;&#x975E;&#x53E4;&#x5178;&#x7684;&#x4E00;&#x54E1;&#x3067;&#x3059; (&#x4F8B;&#x3048;&#x3070;&#x3001;PLP A PRL &#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;) &#x7D68;&#x6BDB;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6F3F;&#x5C3F;&#x306E;&#x80CE;&#x76E4;&#x3068;&#x5B50;&#x5BAE; nk &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x884C;&#x70BA;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x5831;&#x544A;&#x3067;&#x306F;, PLP A &#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x5B66; PLP A null &#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3002;&#x6A19;&#x6E96;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x98FC;&#x80B2;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x3067; PLP A &#x7E41;&#x6B96;&#x6210;&#x7E3E;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x3055;&#x3055;&#x3084;&#x304B;&#x306A;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x751F;&#x7406;&#x7684;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x306B;&#x3055;&#x3089;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3068;&#x304D;&#x3053;&#x306E;&#x540C;&#x3058;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x304C;&#x518D;&#x73FE;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;243. &#x306B;&#x598A;&#x5A20;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x3055;&#x3089;&#x3055;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x9069;&#x5FDC;&#x3057;&#x3001;&#x7DAD;&#x6301; PLP A null &#x5909;&#x7570;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306B;&#x9069;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x5931;&#x6557;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x81EA;&#x5206;&#x306E;&#x598A;&#x5A20;&#x306E;&#x598A;&#x5A20;&#x30A8;&#x30E9;&#x30FC;&#x304C;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;PLP &#x306F;&#x4F4E;&#x9178;&#x7D20;&#x8A98;&#x5C0E;&#x9069;&#x5FDC; hemochorial &#x306E;&#x80CE;&#x76E4;&#x3068;&#x521D;&#x671F;&#x80DA;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x80DA;&#x7D44;&#x7E54;&#x3078;&#x3053;&#x3046;&#x3057;&#x3066;&#x6804;&#x990A;&#x6D41;&#x308C;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x8CA2;&#x732E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x7A2E;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x306A;&#x751F;&#x6B96;&#x9069;&#x5FDC;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30D7;&#x30ED;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x5BB6;&#x65CF;&#x30D1;&#x30E9;&#x30ED;&#x30B0;&#x751F;&#x6B96;&#x9069;&#x5FDC;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC131;&#xACF5;&#xC801;&#xC778; &#xC885; &#xC0DD;&#xC2DD; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC131;&#xB2A5;&#xC744; &#xCD5C;&#xC801;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xC804;&#xB7B5;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C;. &#xC774; &#xCD5C;&#xC801;&#xD654; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC774; &#xD3EC;&#xD568; &#xD2B9;&#xD788; &#xC21C;&#xC218; &#xC5B4;&#xB824;&#xC6B4; &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBB34;&#xB2E8; &#xBCF5;&#xC81C;&#xB97C; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC9C4;&#xD654;. Prolactin (PRL) &#xAC00;&#xC871; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130;&#xB294; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84; &#xBCF5;&#xC81C;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; 25 &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xAD00;&#xB828; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. PRL &#xAC00;&#xC871; &#xD2B9;&#xC131;&#xD654; &#xC9C0;&#xBC30;&#xC801; &#xD14C;&#xB9C8; &#xC784;&#xC2E0; &#xBC0F; viviparity &#xC81C;&#xC5B4; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC758; &#xC5F0;&#xACB0; &#xC774;&#xB2E4;. PRL &#xAC19;&#xC740; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (PLP A) 26 &#xC720;&#xC804;&#xC790; PRL &#xAC00;&#xC871; &#xB85C;&#xCEE4; &#xC2A4; &#xB0B4;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. PRL &#xAC00;&#xC871;&#xC758; nonclassical &#xBA64;&#xBC84;&#xB294; (&#xC608;&#xB97C; &#xB4E4;&#xC5B4;, PLP A &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294; PRL &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;) chorioallantoic &#xD0DC; &#xBC18; &#xC790; &#xAD81; &#xC790;&#xC5F0; &#xD0AC;&#xB7EC; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD589;&#xC704;&#xC758; trophoblast &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0DD;&#xC0B0;. &#xC774; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; PLP A &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559; PLP A null &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558; &#xC5EC; &#xC870;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD45C;&#xC900;&#xD654; &#xB41C; &#xCD95;&#xC0B0; &#xC870;&#xAC74; PLP A &#xC0DD;&#xC2DD; &#xC131;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xACB8;&#xC190; &#xD55C; &#xD6A8;&#xACFC;&#xB97C;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xC788;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;,&#xC774; &#xAC19;&#xC740; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xAC00; &#xC0DD;&#xC950;&#xB294; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C; &#xB418; &#xBA74; &#xBCF5;&#xC81C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C;. &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; hypobaric hypoxia &#xC784;&#xC2E0; &#xB3D9;&#xC548; &#xC27D;&#xAC8C; &#xB178;&#xCD9C; &#xC801;&#xC751; &#xD558; &#xACE0; &#xC784;&#xC2E0; &#xC2E4;&#xD328;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC;&#xB85C; PLP A null &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC0DD;&#xC950; &#xC801;&#xC751;&#xC5D0; &#xC2E4;&#xD328; &#xD558;&#xB294; &#xBC18;&#xBA74; &#xC790;&#xC2E0;&#xC758; &#xC784;&#xC2E0;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. PLP A hypoxia &#xC720;&#xBC1C; adaptations hemochorial placentation &#xBC0F; extraembryonic&#xC640; &#xBC30;&#xC544; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC601;&#xC591;&#xC18C; &#xD750;&#xB984;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC885;&#xC758; &#xC0DD;&#xC2DD;&#xC744; &#xAC01; &#xC0C9; &#xD55C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD1B5;&#xCC30;&#xB825;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Prolactin &#xAC00;&#xC871; paralog &#xC0DD;&#xC2DD; &#xC801;&#xC751; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC870;&#xC808;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Especies exitosas estrategias para optimizar su desempe&ntilde;o reproductivo. Esta optimizaci&oacute;n probablemente incluye la evoluci&oacute;n de los genes que permiten espec&iacute;ficamente reproducci&oacute;n fisiol&oacute;gicamente desafiar las condiciones. El cluster de genes familiares de prolactina (PRL) es uno de los 25 grupos de genes espec&iacute;ficos de rat&oacute;n, la mayor&iacute;a de los cuales est&aacute; asociada con la reproducci&oacute;n. Un tema predominante que caracterizan a la familia PRL es su conexi&oacute;n con el embarazo y los mecanismos que controlan la Viviparidad. PRL-como la prote&iacute;na A (PLP-A) es uno de los 26 genes situados en el centro familiar de PRL. Es miembro de la familia PRL nonclassical (p.e., PLP-A no usar el receptor PRL) producida por las c&eacute;lulas del trofoblasto de la placenta corioalantoideas y act&uacute;a sobre las c&eacute;lulas de asesino naturales uterinas. En este informe, la biolog&iacute;a del PLP-A ha sido investigada por la generaci&oacute;n de ratones con una mutaci&oacute;n nula PLP-A. Condiciones estandarizadas de cr&iacute;a de animales, PLP-A posee efectos modestos sobre comportamiento reproductivo. Sin embargo, este mismo gen es fundamental para la reproducci&oacute;n cuando ratones est&aacute;n expuestos a un factor estresante fisiol&oacute;gico. Salvaje-tipo ratones expuestos a hipoxia hipob&aacute;rica durante la gestaci&oacute;n f&aacute;cilmente adaptan y mantienen sus embarazos, mientras que los ratones mutantes nulos PLP-A no adaptar, dando por resultado falta de embarazo. PLP-A contribuye a adaptaciones inducida por hipoxia cr&iacute;ticas hemochorial placentaci&oacute;n y el flujo as&iacute; nutriente a los tejidos embrionarios y extraembrionarias. Los resultados proporcionan penetraciones en adaptaciones reproductivas propios de cada especie.

Una paralog familia de prolactina regula reproductivas adaptaciones a un factor estresante fisiol&oacute;gico.

&#x53EF;&#x4EE5;&#x4F7F;&#x7528;&#x4F53;&#x5916;&#x57F9;&#x517B;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x80BE;&#x3001; &#x7814;&#x7A76; nephrogenesis &#x7684;&#x8BB8;&#x591A;&#x9636;&#x6BB5;&#xFF0C;&#x4F46;&#x6CA1;&#x6709;&#x6709;&#x6548;&#x7684;&#x6280;&#x672F;&#x4F9B;&#x968F;&#x65F6;&#x7EC4;&#x5408;&#x5F0F;&#x6216; overexpress &#x7684;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x5FEB;&#x901F;&#x8BC4;&#x4EF7;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x578B;&#x3002;(ES) &#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5177;&#x6709;&#x65E0;&#x9650;&#x53D1;&#x5C55;&#x6F5C;&#x529B;&#xFF0C;&#x5E76;&#x53EF;&#x4EE5;&#x901A;&#x8FC7;&#x591A;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#x5728;&#x5206;&#x5B50;&#x9057;&#x4F20;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684;&#x64CD;&#x7EB5;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x76EE;&#x7684;&#x662F;&#x786E;&#x5B9A;&#x662F;&#x5426; ES &#x7EC6;&#x80DE;&#x53EF;&#x4EE5;&#x54CD;&#x5E94;&#x9F20;&#x6807;&#x80DA;&#x80CE;&#x7B2C; 12 &#x5929;&#x5185;&#x5230;&#x80DA;&#x80CE;&#x5929; 13 &#xFF08;&#x81F3; E13 E12) &#x80BE;&#x5FAE;&#x73AF;&#x5883;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x4FE1;&#x53F7;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5C06;&#x7EB3;&#x5165;&#x80BE;&#x7ED3;&#x6784;&#x3002;ROSA26 ES &#x7EC6;&#x80DE;&#x88AB;&#x6240;&#x793A;&#x8868;&#x793A; beta-&#x4E73;&#x7CD6;&#x82F7;&#x65E0;&#x5904;&#x4E0D;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x6291;&#x5236;&#x56E0;&#x5B50;&#x6291;&#x5236;&#x5206;&#x5316;&#x5B58;&#x5728;&#x65F6;&#x3002;&#x5F53;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x662F;&#x5FAE;&#x91CF;&#x6CE8;&#x5C04;&#x5165; E12 E13 &#x540E;&#x80BE;&#x7684;&#x7136;&#x540E;&#x653E;&#x5728; transwell &#x5668;&#x5B98;&#x57F9;&#x517B;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3001; &beta;-&#x534A;&#x4E73;&#x7CD6;&#x82F7;&#x9176;&#x6297;&#x4F53;&#x9633;&#x6027;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53D1;&#x73B0;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x80BE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7ED3;&#x6784;&#x4E2D;&#x3002;&#x5728;&#x7F55;&#x89C1;&#x7684;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x7ED3;&#x6784;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x80BE;&#x5C0F;&#x7403;&#x5854;&#x592B;&#x65AF;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x5355;&#x4E2A;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x7535;&#x5B50;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x8868;&#x660E; ES &#x7EC6;&#x80DE;&#x80BE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x57FA;&#x5E95;&#x819C;&#x88AB;&#x5305;&#x56F4;&#x4E86;&#x5FC3;&#x5C16;&#x7ED2;&#x6BDB;&#x548C;&#x7F1D;&#x9699;&#x8FDE;&#x63A5;&#x914D;&#x5408;&#x7269;&#x3002;&#x6807;&#x8BB0;&#x5206;&#x6790;&#x63ED;&#x793A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7684;&#x80BE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5B50;&#x96C6;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x83B2;&#x82B1; tetragonolobus &#x548C; alpha(1) Na(+)/K(+) ATPase &#x8868;&#x793A;&#x3002;ES &#x7EC6;&#x80DE;&#x53D7;&#x5230;&#x611F;&#x67D3;&#x5DE8;&#x7EC6;&#x80DE;&#x75C5;&#x6BD2;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D; (GFP) &#x817A;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6CE8;&#x5C04;&#x524D;&#xFF0C;&#x5E76;&#x65E9;&#x5728; 18 h&#xFF0C;&#x575A;&#x6301;&#x57F9;&#x517B;&#x80BE;&#x8FBE; 48 h &#x4E3A;&#x53D1;&#x73B0;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD; ES &#x7EC6;&#x80DE;&#x6280;&#x672F;&#x53EF;&#x80FD;&#x5B9E;&#x73B0;&#x83B7;&#x53D6;&#x591A;&#x529F;&#x80FD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57F9;&#x517B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x5E72;&#x9884;&#x63AA;&#x65BD;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7528;&#x4F53;&#x5916;&#x548C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6270;&#x52A8;&#x5BF9;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x6B63;&#x5E38;&#x80BE;&#x53D1;&#x5C55;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x7684;&#x540E;&#x679C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x52A0;&#x4EE5;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x76EE;&#x7684;&#x3002;

&#x540E;&#x80BE;&#x80BE;&#x5668;&#x5B98;&#x57F9;&#x517B;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x878D;&#x5408;&#x3002;

Many stages of nephrogenesis can be studied using cultured embryonic kidneys, but there is no efficient technique available to readily knockdown or overexpress transgenes for rapid evaluation of resulting phenotypes. Embryonic stem (ES) cells have unlimited developmental potential and can be manipulated at the molecular genetic level by a variety of methods. The aim of this study was to determine if ES cells could respond to developmental signals within the mouse embryonic day 12 to embryonic day 13 (E12 to E13) kidney microenvironment and incorporate into kidney structures. ROSA26 ES cells were shown to express beta-galactosidase ubiquitously when cultured in the presence of leukemia inhibitory factor to suppress differentiation. When these cells were microinjected into E12 to E13 metanephroi and then placed in transwell organ culture, ES cell-derived, beta-galactosidase-positive cells were identified in epithelial structures resembling tubules. On rare occasions, individual ES cells were observed in structures resembling glomerular tufts. Electron microscopy showed that the ES cell-derived tubules were surrounded by basement membrane and had apical microvilli and junctional complexes. Marker analysis revealed that a subset of these epithelial tubules bound Lotus tetragonolobus and expressed alpha(1) Na(+)/K(+) ATPase. ES cells were infected before injection with a cytomegalovirus promoter-green fluorescence protein (GFP) adenovirus and GFP expression was found as early as 18 h, persisting for up to 48 h in cultured kidneys. This ES cell technology may achieve the objective of obtaining a versatile cell culture system in which molecular interventions can be used in vitro and consequences of these perturbations on the normal kidney development program in vivo can be studied.

Integration of embryonic stem cells in metanephric kidney organ culture.

Plusieurs &eacute;tapes de n&eacute;phrog&eacute;n&egrave;se peuvent &ecirc;tre &eacute;tudi&eacute;s &agrave; l&#39;aide de reins embryonnaires cultiv&eacute;es, mais il n&#39;y a aucune technique efficace permettant de facilement des transg&egrave;nes knockdown ou overexpress pour une &eacute;valuation rapide des ph&eacute;notypes qui en r&eacute;sulte. Les cellules souches embryonnaires (ES) ont des potentialit&eacute;s de d&eacute;veloppement illimit&eacute;e et peut &ecirc;tre manipul&eacute; au niveau g&eacute;n&eacute;tique mol&eacute;culaire par une vari&eacute;t&eacute; de m&eacute;thodes. Le but de cette &eacute;tude &eacute;tait de d&eacute;terminer si les cellules ES pourraient r&eacute;pondre aux signaux du d&eacute;veloppement au sein de la journ&eacute;e embryonnaires de souris 12 &agrave; jour embryonnaire 13 (E12 &agrave; E13) rein microenvironnement et int&eacute;grer dans les structures du rein. ROSA26 CSEh ont &eacute;t&eacute; montr&eacute; pour exprimer la b&ecirc;ta-galactosidase ubiquitaire lorsque cultiv&eacute;es en pr&eacute;sence du facteur inhibiteur de leuc&eacute;mie pour r&eacute;primer la diff&eacute;renciation. Lorsque ces cellules ont &eacute;t&eacute; microinjected dans E12 &agrave; E13 metanephroi et ensuite plac&eacute;s en culture organotypique transwell, cellules de culture cellulaire, la b&ecirc;ta-galactosidase positives ES ont &eacute;t&eacute; identifi&eacute;s dans des structures &eacute;pith&eacute;liales ressemblant aux tubules. En de rares occasions, les cellules ES individuelles ont &eacute;t&eacute; observ&eacute;s dans des structures ressemblant &agrave; des touffes glom&eacute;rulaires. La microscopie &eacute;lectronique montre que les tubules de culture cellulaire ES &eacute;taient entour&eacute;s d&#39;une membrane basale et avaient des microvillosit&eacute;s apicales et complexes de jonction. Marqueur analyse a r&eacute;v&eacute;l&eacute; qu&#39;un sous-ensemble de ces tubules &eacute;pith&eacute;liaux li&eacute; &agrave; Lotus tetragonolobus et exprim&eacute; alpha(1) Na(+)/K(+) ATPase. ES cellules ont &eacute;t&eacute; infect&eacute;es avant l&#39;injection avec un ad&eacute;novirus de prot&eacute;ine (GFP) de fluorescence vert-promoteur cytom&eacute;galovirus et expression de la GFP a &eacute;t&eacute; trouv&eacute;e, d&egrave;s 18 h, persistant pendant 48 h dans les reins. Cette technologie de cellules ES peut atteindre l&#39;objectif d&#39;obtenir un syst&egrave;me de culture cellulaire polyvalent o&ugrave; des interventions mol&eacute;culaires peuvent &ecirc;tre utilis&eacute;es in vitro et des cons&eacute;quences de ces perturbations sur le programme de d&eacute;veloppement du rein normal in vivo peuvent &ecirc;tre &eacute;tudi&eacute;s.

Int&eacute;gration des cellules souches embryonnaires en culture organotypique rein metanephric.

Integration von embryonalen Stammzellen in der Niere metanephrischen Organkultur.

Molte fasi di nephrogenesis possono essere studiati utilizzando reni embrionali coltivati, ma non esiste nessuna tecnica efficiente di transgeni prontamente atterramento o overexpress per la valutazione rapida di fenotipi risultanti. Le cellule staminali embrionali (ES) hanno potenziale dello sviluppo illimitato e pu&ograve; essere manipolato a livello genetico molecolare di una variet&agrave; di metodi. Lo scopo di questo studio era di determinare se le cellule ES potrebbero rispondere ai segnali dello sviluppo entro il giorno embrionali del mouse 12 al microambiente di rene 13 (E12 a E13) del giorno embrionale e incorporare nelle strutture renali. Le cellule ES ROSA26 sono state mostrate per esprimere la beta-galattosidasi ubiquitously Quando coltivate in presenza di fattore inibitorio di leucemia a sopprimere la differenziazione. Quando queste cellule sono state microinjected in E12 a E13 metanephroi e poi collocate nella cultura organo transwell, cellule ES cellule derivate, beta-galattosidasi-positivi sono state identificate nelle strutture epiteliali simile a tubuli. In rare occasioni, singole cellule ES sono state osservate in strutture simili a ciuffi glomerulare. Microscopia elettronica hanno dimostrato che i tubuli derivati da cellule ES sono circondati da una membrana basale e avevano microvilli apicali e complessi giunzionali. Marcatore analisi hanno rivelato che un sottoinsieme di questi tubuli epiteliali associato Lotus tetragonolobus ed espresso alpha(1) Na(+)/K(+) ATPasi. Le cellule ES sono state infettate prima iniezione con un adenovirus di citomegalovirus fluorescenza verde-promotore protein (GFP) ed espressione di GFP &egrave; stato trovato pi&ugrave; presto 18 h, persistendo per 48 h in reni colti. Questa tecnologia di cellule ES possa conseguire l&#39;obiettivo di ottenere un sistema di coltura cellulare versatile in cui gli interventi molecolari possono essere impiegati in vitro e le conseguenze di queste perturbazioni sul programma di sviluppo renale normale in vivo possono essere studiate.

Integrazione delle cellule staminali embrionali nella cultura organo Rene metanefritico.

&#x306A;&#x304B;&#x3067;&#x3082;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x6BB5;&#x968E;&#x57F9;&#x990A;&#x80DA;&#x6027;&#x814E;&#x81D3;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x5B66;&#x3076;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x904E;&#x5270; transgenes &#x751F;&#x3058;&#x308B;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x8FC5;&#x901F;&#x306A;&#x8A55;&#x4FA1;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5229;&#x7528;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x624B;&#x6CD5;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x840C;&#x82BD;&#x671F;&#x306E;&#x830E; (ES) &#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x7121;&#x5236;&#x9650;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3068;&#x5206;&#x5B50;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x64CD;&#x4F5C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x76EE;&#x7684;&#x306F;&#x3001;ES &#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x767A;&#x9054;&#x4FE1;&#x53F7;&#x5185;&#x80CE;&#x751F; 12 &#x65E5;&#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x80DA;&#x4E00;&#x65E5; 13 (E13 &#x3092; E12) &#x814E;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x74B0;&#x5883;&#x306B;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3057;&#x3001;&#x814E;&#x81D3;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x306B;&#x7D44;&#x307F;&#x8FBC;&#x3080;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;ROSA26 ES &#x7D30;&#x80DE;&#x306F; &beta;-&#x30AC;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30B7;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x904D;&#x5728;&#x5206;&#x5316;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3059;&#x308B;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x963B;&#x5BB3;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x57F9;&#x990A;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x30A8;&#x30AF;&#x30B9;&#x30D7;&#x30EC;&#x30B9; &#x30FB;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x3044;&#x305F; E12 &#x306B; E13 &#x539F;&#x57FA;&#x306B; microinjected transwell &#x306E;&#x5668;&#x5B98;&#x57F9;&#x990A;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x914D;&#x7F6E;&#x3068; ES &#x7D30;&#x80DE;&#x7531;&#x6765; &beta; &#x30AC;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30B7;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x967D;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x4F3C;&#x305F;&#x7D30;&#x7BA1;&#x4E0A;&#x76AE;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x3067;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x307E;&#x308C;&#x306B;&#x3001;&#x500B;&#x3005; &#x306E; ES &#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x7CF8;&#x7403;&#x4F53;&#x306E;&#x623F;&#x306B;&#x4F3C;&#x305F;&#x69CB;&#x9020;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x96FB;&#x5B50;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x306F; ES &#x7D30;&#x80DE;&#x7531;&#x6765;&#x7D30;&#x7BA1;&#x57FA;&#x5E95;&#x819C;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x56F2;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x9802;&#x5FAE;&#x7D68;&#x6BDB;&#x3068;&#x8907;&#x5408;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x5206;&#x6790;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x7BA1;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8; &#x30ED;&#x30FC;&#x30BF;&#x30B9; tetragonolobus &#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9; alpha(1) Na(+)/K(+) ATPase &#x3092;&#x8868;&#x660E;&#x3057;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3002;ES &#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30E1;&#x30AC;&#x30ED; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9; &#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x7DD1;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; (GFP) &#x30A2;&#x30C7;&#x30CE; &#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3092;&#x6CE8;&#x5165;&#x3059;&#x308B;&#x524D;&#x306B;&#x611F;&#x67D3;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3057;&#x3001;GFP &#x767A;&#x73FE; 18 h 48 h &#x57F9;&#x990A;&#x814E;&#x81D3;&#x3067;&#x6301;&#x7D9A;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3060;&#x3051;&#x65E9;&#x304F;&#x767A;&#x898B;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E; ES &#x7D30;&#x80DE;&#x6280;&#x8853;&#x306F;&#x3001;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x4ECB;&#x5165;&#x306F; in vitro &#x3067;&#x4F7F;&#x7528;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3001;in vivo &#x3067;&#x306E;&#x6B63;&#x5E38;&#x306A;&#x814E;&#x81D3;&#x958B;&#x767A;&#x30D7;&#x30ED;&#x30B0;&#x30E9;&#x30E0;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6442;&#x52D5;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x5B66;&#x3076;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x6C4E;&#x7528;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x57F9;&#x990A;&#x7CFB;&#x3092;&#x53D6;&#x5F97;&#x3059;&#x308B;&#x76EE;&#x7684;&#x3092;&#x9054;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Metanephric &#x814E;&#x81D3;&#x5668;&#x5B98;&#x57F9;&#x990A;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7D71;&#x5408;&#x3002;

&#xAD50;&#xC591;&#xB41C; &#xBC30;&#xC544; &#xC2E0;&#xC7A5;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; nephrogenesis&#xC758; &#xB9CE;&#xC740; &#xB2E8;&#xACC4;&#xB97C; &#xACF5;&#xBD80; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xACB0;&#xACFC; &#xACE0;&#xAE30;&#xC758; &#xC2E0;&#xC18D;&#xD55C; &#xD3C9;&#xAC00; &#xC704;&#xD55C; &#xC27D;&#xAC8C; &#xCD5C;&#xC800;&#xC758; &#xB610;&#xB294; overexpress transgenes&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; &#xAE30;&#xBC95; &#xC774;&#xB2E4;. &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; (ES) &#xC138;&#xD3EC;&#xAC00; &#xBB34;&#xD55C; &#xD55C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825; &#xBD84;&#xC790; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xBC29;&#xBC95;&#xC73C;&#xB85C; &#xC870;&#xC791;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xBAA9;&#xD45C;&#xB294; ES &#xC138;&#xD3EC; &#xBC30;&#xC544; &#xD558;&#xB8E8; 13 (E13 E12) &#xC2E0;&#xC7A5; microenvironment&#xC5D0; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBC30;&#xC544; &#xD558;&#xB8E8; 12 &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xC751;&#xB2F5; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC2E0;&#xC7A5; &#xAD6C;&#xC870;&#xC5D0; &#xD1B5;&#xD569; &#xB418;&#xC5C8;&#xB294;&#xC9C0; &#xD655;&#xC778; &#xD588;&#xB2E4;. ROSA26 ES &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; &#xBCA0;&#xD0C0;-galactosidase &#xAD50;&#xC591; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC73C;&#xB824;&#xBA74; &#xBC31;&#xD608;&#xBCD1; &#xC5B5;&#xC81C; &#xC694;&#xC778;&#xC774; &#xC874;&#xC7AC; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0; &#xD3B8; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB54C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; E13 metanephroi e12&#xC5D0; microinjected&#xC640; transwell &#xC7A5;&#xAE30; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0; &#xBC30;&#xCE58;, ES &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xB798;, &#xBCA0;&#xD0C0; galactosidase &#xC591;&#xC131; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0C1;&#xD53C; &#xAD6C;&#xC870; tubules&#xB97C; &#xB2EE;&#xC740;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xB4DC;&#xBB38; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0;, &#xAC1C;&#xBCC4; ES &#xC138;&#xD3EC; &#xC0AC; tufts&#xC744; &#xB2EE;&#xC740; &#xAD6C;&#xC870;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC804;&#xC790; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD; ES &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xB798; tubules &#xC9C0;&#xD558;&#xC2E4; &#xB9C9;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB458;&#xB7EC;&#xC2F8;&#xC5EC; &#xC788;&#xC5C8;&#xB2E4; &#xAF2D;&#xB300;&#xAE30; microvilli &#xBC0F; &#xC811;&#xD569; &#xB2E8;&#xC9C0; &#xD588;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xCEE4; &#xBD84;&#xC11D; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC0C1;&#xD53C; tubules&#xC758; &#xD558;&#xC704; &#xC9D1;&#xD569;&#xC774; &#xBC14;&#xC6B4;&#xB4DC; Lotus tetragonolobus alpha(1) Na(+)/K(+) ATPase &#xD45C;&#xD604; &#xBC1D;&#xD614;&#xB2E4;. ES &#xC138;&#xD3EC; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xB179;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (GFP) &#xC544; &#xB370; &#xB178; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xACFC; &#xC0BD;&#xC785; &#xC804;&#xC5D0; &#xAC10;&#xC5FC; &#xBC0F; GFP &#xC2DD; &#xAD50;&#xC591;&#xB41C; &#xC2E0;&#xC7A5;&#xC5D0; &#xCD5C;&#xB300; 48 h&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; 18 h &#xC77C;&#xCC0D; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB410;&#xB2E4;. &#xC774; ES &#xC804;&#xC9C0; &#xAE30;&#xC220; &#xBD84;&#xC790; &#xAC1C;&#xC785; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC0F; &#xACB0;&#xACFC; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xC2E0;&#xC7A5; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC5D0; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBB3C;&#xACB0;&#xC758; &#xACF5;&#xBD80; &#xC218; &#xB2E4;&#xC7AC; &#xB2E4;&#xB2A5; &#xD55C; &#xC140; &#xBB38;&#xD654; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC744; &#xC5BB;&#xAE30;&#xC758; &#xBAA9;&#xD45C;&#xB97C; &#xB2EC;&#xC131; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Metanephric &#xC2E0;&#xC7A5; &#xAE30;&#xAD00; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBBF8; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xD1B5;&#xD569;.

Muchas etapas de nephrogenesis pueden ser estudiadas usando los ri&ntilde;ones embrionarios cultivados, pero no hay t&eacute;cnica eficiente disponible para f&aacute;cilmente ca&iacute;da o sobrexpresan transgenes para evaluaci&oacute;n r&aacute;pida de fenotipos resultantes. Las c&eacute;lulas madre embrionarias (ES) tienen potencial de desarrollo ilimitado y puede ser manipulado a nivel gen&eacute;tico molecular por una variedad de m&eacute;todos. El objetivo de este estudio fue determinar si c&eacute;lulas madre embrionarias podr&iacute;an responder a se&ntilde;ales del desarrollo dentro del d&iacute;a embrionarias de rat&oacute;n 12 a microambiente de ri&ntilde;&oacute;n de (E12 a E13) 13 d&iacute;a embrionario e incorporar estructuras del ri&ntilde;&oacute;n. ROSA26 ES las c&eacute;lulas fueron demostradas para expresar la beta-galactosidasa ubicuo cuando cultivadas en presencia de factor inhibidor de leucemia para suprimir la diferenciaci&oacute;n. Cuando estas c&eacute;lulas fueron microinyectadas en E12 a metanephroi E13 y colocan en cultura de &oacute;rgano transwell, c&eacute;lulas madre embrionarias derivadas de c&eacute;lulas, beta-galactosidasa-positivos fueron identificadas en estructuras epiteliales que se asemejan a los t&uacute;bulos. En raras ocasiones, se observaron c&eacute;lulas madre embrionarias individuales en estructuras que se asemejan a penachos glomerulares. La microscopia electr&oacute;nica demostr&oacute; que los t&uacute;bulos de c&eacute;lula-derivados ES fueron rodeados por la membrana basal y apicales microvellosidades y complejos junctional. Marcador an&aacute;lisis revel&oacute; que un subconjunto de estos t&uacute;bulos epiteliales hab&iacute;a obligado tetragonolobus Lotus y expres&oacute; alfa ATPasa de Na(+)/K(+). C&eacute;lulas madre embrionarias fueron infectados antes de la inyecci&oacute;n con un adenovirus de prote&iacute;na (GFP) fluorescencia promotor de citomegalovirus y expresi&oacute;n de GFP se encontr&oacute; tan pronto como 18 h, persistiendo por hasta 48 h en ri&ntilde;ones cultivados. Esta tecnolog&iacute;a de c&eacute;lula ES puede alcanzar el objetivo de obtener un sistema de cultivo celular vers&aacute;til que intervenciones moleculares pueden utilizarse in vitro y se pueden estudiar las consecuencias de estas perturbaciones en el programa de desarrollo normal del ri&ntilde;&oacute;n en vivo.

Integraci&oacute;n de c&eacute;lulas madre embrionarias en cultivo metanephric ri&ntilde;&oacute;n.

&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176; (&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;) &#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x57FA;&#x8D28; (ECM) &#x7684;&#x8425;&#x4E1A;&#x989D;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x5173;&#x952E;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#xFF0C;&#x5728;&#x5F00;&#x53D1;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x5145;&#x5F53;&#x7EC6;&#x80DE; ECM &#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x76D1;&#x7BA1;&#x673A;&#x6784;&#x3002;&#x5B83;&#x4EEC;&#x5728;&#x53D1;&#x5C55;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#xFF0C;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x76F8;&#x5BF9;&#x8F83;&#x5C11;&#x636E;&#x62A5;&#x6709;&#x5173;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x5728;&#x80A2;&#x4F53;&#x53D1;&#x80B2;&#x548C;&#x518D;&#x751F;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;(&#x7FC5;) &#x80A2;&#x4F53;&#x518D;&#x751F;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x63A5;&#x8FD1;&#x7EC6;&#x80DE; ECM &#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x95EE;&#x9898;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x6A21;&#x578B;&#x5229;&#x7528;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x3002;&#x57FA;&#x4E8E;&#x4EE5;&#x524D;&#x7684;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x514B;&#x9686;&#x4ECE;&#x6211;&#x4EEC;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5BA4;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x76EE;&#x524D;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x91CD;&#x70B9;&#x5728;&#x6210;&#x5E74;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x9CCD;&#x518D;&#x751F;&#x8FC7;&#x7A0B; 1 &#x578B;&#x819C;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176; (MT1-&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#xFF09;&#x3001; &#x660E;&#x80F6; (&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-2) &#x548C;&#x5185;&#x6E90;&#x6027; 2 &#x6291;&#x5236;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176; (&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-2&#xFF09; &#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x539F;&#x4F4D;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176; zmt1-zmmp-2 &#x548C; ztimp-2 mRNA &#x6210;&#x7EE9;&#x5355;&#x518D;&#x751F;&#x5C3E;&#x9CCD;&#x5171;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x539F;&#x4F4D;&#x660E;&#x80F6;&#x9176;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x6D3B;&#x6027;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x5728;&#x518D;&#x751F;&#x9CCD;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#x3002;&#x8A8A;&#x672C;&#x671F;&#x95F4;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E86;&#x5728; blastema &#x548C;&#x57FA;&#x5E95;&#x4E0A;&#x76AE;&#x5C3E;&#x9CCD;&#x518D;&#x751F;&#x867D;&#x7136;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684; IV &#x578B;&#x80F6;&#x539F; [zcol-IV(a5)] &#x6210;&#x7EE9;&#x5355; &#xFF08;&#x57FA;&#x819C;&#x7EC4;&#x4EF6;&#xFF09; &#x4EC5;&#x9650;&#x4E8E;&#x57FA;&#x5E95;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176; zmt1-zmmp-2 &#x548C; ztimp-2 mRNA&#x3002;&#x9C7C;&#x7FC5;&#x4EA7;&#x7269; GM6001 &#x9762;&#x524D;&#x5DF2;&#x5927;&#x4E3A;&#x51CF;&#x5C11; (&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#xFF09; &#x6307;&#x793A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x9176;&#x7684;&#x9CCD;&#x518D;&#x751F;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x3002;&#x4F0A;&#x85E4; (&#x6069;&#x535A;&#xFF0C;2001&#x5E74;&#xFF09; &#x4EE5;&#x524D;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x6240;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269; MT1-&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x6784;&#x9020;&#x5305;&#x542B;&#x4EC5; hemopexin-&#x8DE8;&#x819C;&#x80DE;&#x8D28;&#x57DF; (MT1HPX) &#x5BFC;&#x81F4; MT1-&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176; homophilic &#x590D;&#x6742;&#x5730;&#x5C42;&#x5835;&#x585E;&#x53CA;&#x968F;&#x540E;&#x7684; pro-&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-2 &#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;Homophilic &#x590D;&#x6742;&#x5730;&#x5C42;&#x5E72;&#x6270;&#x88AB;&#x7531;&#x4E8E; hemopexin &#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5148;&#x524D;&#x7684;&#x8C03;&#x67E5;&#x7ED3;&#x679C;&#x4E3A;&#x57FA;&#x7840;&#xFF0C;&#x76EE;&#x524D;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x53D1;&#x73B0;&#x5728;&#x9CCD;&#x5C06;&#x4F1A;&#x518D;&#x751F;&#x4E2D;&#x7684; MT1HPX &#x5F02;&#x4F4D;&#x8868;&#x8FBE;&#x6291;&#x5236;&#x518D;&#x751F;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x548C;&#x51CF;&#x5C11; blastema &#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x3002;&#x603B;&#x4E4B;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x5728;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x9CCD;&#x518D;&#x751F;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x6709;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x548C;&#x529F;&#x80FD;&#x671F;&#x95F4;&#x7FC5;&#x7247;&#x518D;&#x751F;&#x7684;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#xFF1A; MT1-&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x3001; &#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176; 2 &#x548C; TIMP2 &#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x3002;

Matrix metalloproteinases (MMPs) play key roles in the turnover of extracellular matrix (ECM) and, thereby, function as key regulators of cell-ECM interactions during development. In spite of their importance during developmental processes, relatively little has been reported about the role of these metalloproteinases during limb development and regeneration. To approach the problem of cell-ECM interactions during limb (fin) regeneration, we have utilized zebrafish as an experimental model. Based on previous MMP cloning studies from our laboratory, the current study has focused on the expression of membrane-type 1 metalloproteinase (MT1-MMP), gelatinase A (MMP-2) and endogenous tissue inhibitor 2 of metalloproteinases (TIMP-2) during fin regeneration in adult zebrafish. In situ analysis indicated co-expression of zmt1-mmp, zmmp-2, and ztimp-2 mRNA transcripts in regenerating caudal fins. In situ gelatin-zymography confirmed the presence of active metalloproteinases in regenerating fins. zmt1-mmp, zmmp-2, and ztimp-2 mRNA transcripts were expressed in the blastema and basal epithelium during caudal fin regeneration while expression of type IV collagen [zcol-IV(a5)] transcripts (a basal lamina component) was restricted to the basal epithelium. Fin outgrowth was greatly reduced in the presence of GM6001 (an inhibitor of MMP activity) indicating the importance of these enzymes during fin regeneration. Previous studies by Itoh (EMBO, 2001) indicated that expression of a vertebrate MT1-MMP construct containing only the hemopexin-transmembrane-cytoplasmic domains (MT1HPX) resulted in blockage of MT1-MMP homophilic complex formation and subsequent inhibition of pro-MMP-2 activation. Interference with homophilic complex formation was attributed to expression of the hemopexin domain at the cell surface. Building upon these earlier findings, the current study found that ectopic expression of MT1HPX in fin regenerates inhibited the regeneration process and resulted in a reduction in cell proliferation in the blastema. Taken together, these results indicate that MMPs have an important role during fin regeneration in zebrafish.

Matrix metalloproteinase expression and function during fin regeneration in zebrafish: analysis of MT1-MMP, MMP2 and TIMP2.

M&#xE9;talloprot&#xE9;ases matricielles (MMP) jouent un r&#xF4;le cl&#xE9; dans le chiffre d&#x26;#39;affaires de la matrice extracellulaire (ECM) et, par cons&#xE9;quent, la fonction de r&#xE9;gulateurs cl&#xE9;s de la cellule-ECM interactions au cours du d&#xE9;veloppement. En d&#xE9;pit de leur importance au cours des processus de d&#xE9;veloppement, relativement peu a &#xE9;t&#xE9; rapport&#xE9; sur le r&#xF4;le de ces m&#xE9;talloprot&#xE9;inases au cours du d&#xE9;veloppement des membres et de la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration. Pour aborder le probl&#xE8;me de la cellule-ECM interactions au cours de branche (fin) de r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration, nous avons utilis&#xE9; le poisson z&#xE8;bre comme mod&#xE8;le exp&#xE9;rimental. Sur la base de pr&#xE9;c&#xE9;dentes &#xE9;tudes de clonage MMP de notre laboratoire, l&#x26;#39;&#xE9;tude actuelle a mis l&#x26;#39;accent sur l&#x26;#39;expression de la membrane de type 1 m&#xE9;talloprot&#xE9;inase (MT1-MMP), la g&#xE9;latinase A (MMP-2) et l&#x26;#39;inhibiteur tissulaire endog&#xE8;ne 2 de m&#xE9;talloprot&#xE9;inases (TIMP-2) au cours la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration nageoire chez le poisson z&#xE8;bre adulte. Dans l&#x26;#39;analyse in situ a indiqu&#xE9; la co-expression de MMP-zmt1, zmmp-2, et ztimp-2 transcrits d&#x26;#39;ARNm dans les nageoires caudales r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration. In situ g&#xE9;latine zymographie confirm&#xE9; la pr&#xE9;sence de m&#xE9;talloprot&#xE9;ases actives dans les ailettes de r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration. zmt1-mmp, zmmp-2, et ztimp-2 transcrits d&#x26;#39;ARNm ont &#xE9;t&#xE9; exprim&#xE9;s dans le blast&#xE8;me et de l&#x26;#39;&#xE9;pith&#xE9;lium basal lors de la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration de la nageoire caudale tandis que l&#x26;#39;expression de collag&#xE8;ne de type IV [zcol-IV (a5)] transcriptions (un composant lame basale) a &#xE9;t&#xE9; limit&#xE9;e &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;pith&#xE9;lium basal. Fin excroissance a &#xE9;t&#xE9; consid&#xE9;rablement r&#xE9;duite en pr&#xE9;sence d&#x26;#39;GM6001 (un inhibiteur de l&#x26;#39;activit&#xE9; des MMP) qui indique l&#x26;#39;importance de ces enzymes lors de la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration fin. &#xC9;tudes ant&#xE9;rieures effectu&#xE9;es par Itoh (EMBO, 2001) indique que l&#x26;#39;expression d&#x26;#39;un vert&#xE9;br&#xE9; MT1-MMP construction contenant seulement les domaines transmembranaire h&#xE9;mopexine--cytoplasmiques MT1HPX) entra&#xEE;n&#xE9; blocage de MT1-MMP homophile formation d&#x26;#39;un complexe et l&#x26;#39;inhibition ult&#xE9;rieure de pro-MMP-2 l&#x26;#39;activation. L&#x26;#39;interf&#xE9;rence avec la formation du complexe homophile a &#xE9;t&#xE9; attribu&#xE9; &#xE0; l&#x26;#39;expression du domaine h&#xE9;mopexine &#xE0; la surface cellulaire. S&#x26;#39;appuyant sur ces conclusions ant&#xE9;rieures, la pr&#xE9;sente &#xE9;tude a constat&#xE9; que l&#x26;#39;expression ectopique de MT1HPX dans r&#xE9;g&#xE9;n&#xE8;re nageoire inhib&#xE9; le processus de r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration et a abouti &#xE0; une r&#xE9;duction de la prolif&#xE9;ration cellulaire dans le blast&#xE8;me. Pris ensemble, ces r&#xE9;sultats indiquent que les MMP ont un r&#xF4;le important lors de la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration chez le poisson z&#xE8;bre fin.

Matrice d&#x26;#39;expression et la fonction Metalloproteinase Lors de la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration chez le poisson z&#xE8;bre Fin: Analyse de la MT1-MMP, MMP-2 et TIMP2

Matrix-Metalloproteinase-Expression und Funktion w&#xE4;hrend der Finne Regeneration im Zebrafisch: Analyse von MT1-MMP, MMP2 und TIMP2.

Metalloproteinasi della matrice (MMP) giocano un ruolo chiave nel fatturato di matrice extracellulare (ECM) e, quindi, fungono da regolatori chiave delle interazioni cellula-ECM durante lo sviluppo. Nonostante la loro importanza nel corso di processi di sviluppo, relativamente poco &egrave; stato segnalato circa il ruolo di questi metalloproteinases durante la rigenerazione e lo sviluppo degli arti. Per affrontare il problema delle interazioni cellula-ECM durante la rigenerazione degli arti (fin), abbiamo utilizzato zebrafish come modello sperimentale. Basato sul precedente MMP clonazione studi dal nostro laboratorio, lo studio attuale &egrave; concentrata sull&#39;espressione di membrana-tipo 1 metalloproteinase (MT1-MMP), gelatinasi A (MMP-2) e inibitore endogeno tessuto 2 di metalloproteinasi (TIMP-2) durante la rigenerazione di pinna in zebrafish adulto. L&#39;analisi in situ indicato co-expression del zmt1-mmp, zmmp-2 e 2 ztimp trascritti di mRNA in rigenerante pinne caudali. Gelatina in situ-zimogramma ha confermato la presenza di metalloproteinasi attivo in pinne di rigenerazione. zmt1-mmp, zmmp-2 e ztimp-2 mRNA trascrizioni sono state espresse nel blastema e basale dell&#39;epitelio durante la rigenerazione di pinna caudale mentre espressione delle trascrizioni [zcol-IV(a5)] di collagene di tipo IV (un componente di lamina basale) &egrave; stata limitata a epitelio basale. Escrescenza pinna &egrave; stato notevolmente ridotto in presenza di GM6001 (un inibitore dell&#39;attivit&agrave; MMP) che indica l&#39;importanza di questi enzimi durante la rigenerazione di pinna. Precedenti studi di Itoh (EMBO, 2001) indicarono che espressione di un vertebrato MT1-MMP costrutto contenente che solo i domini Emopessina-transmembrana-citoplasmatici (MT1HPX) ha portati nel blocco della formazione di complessi omofilo MT1-MMP e conseguente inibizione dell&#39;attivazione pro-MMP-2. Interferenza con la formazione dei complessi omofilo &egrave; stata attribuita all&#39;espressione del dominio Emopessina alla superficie delle cellule. Basandosi su questi risultati precedenti, lo studio corrente ha trovato che espressione ectopica di MT1HPX nella pinna rigenera inibito il processo di rigenerazione e portato ad una riduzione della proliferazione cellulare nel blastema. Presi insieme, questi risultati indicano che MMP hanno un ruolo importante durante la rigenerazione di pinna in zebrafish.

Matrix metalloproteinase espressione e funzione durante fin rigenerazione nello zebrafish: analisi di MT1-MMP, MMP2 e TIMP2.

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- &#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#xFF08;MT1HPX&#xFF09;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x69CB;&#x7BC9;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3002;&#x540C;&#x7A2E;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x306E;&#x5E72;&#x6E09;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x3067;&#x306E;&#x30D8;&#x30E2;&#x30DA;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;&#x3082;&#x306E;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x4EE5;&#x524D;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3092;&#x8E0F;&#x307E;&#x3048;&#x3064;&#x3064;&#x3001;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x518D;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x306B;MT1HPX&#x306E;&#x7570;&#x6240;&#x6027;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;&#x518D;&#x751F;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x3001;&#x82BD;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x304C;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;MMP&#x306F;&#x3001;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x3067;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x6642;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x62C5;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x3067;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x518D;&#x751F;&#x4E2D;&#x306E;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x30E1;&#x30BF;&#x30ED;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#xFF1A;MT1-MMP&#x3001;MMP2&#x3068;TIMP2&#x306E;&#x5206;&#x6790;

&#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; metalloproteinases (MMPs) &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xAE30;&#xC9C8; (ECM)&#xC758; &#xB9E4;&#xCD9C;&#xC5D0; &#xD575;&#xC2EC; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD568;&#xC73C;&#xB85C;&#xC368;, &#xC138;&#xD3EC;-ECM &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xD130;&#xB85C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC791;&#xB3D9;. &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; &#xB3D9;&#xC548; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC911;&#xC694;&#xC131;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC791;&#xC740; &#xBCF4;&#xACE0; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; metalloproteinases&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB2E4;&#xB9AC;&#xB97C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558; &#xACE0; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548;. &#xC0AC;&#xC9C0; (&#xC9C0; &#xB290; &#xB7EC; &#xBBF8;) &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC138;&#xD3EC;-ECM &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xBB38;&#xC81C;&#xB97C; &#xC811;&#xADFC; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; zebrafish &#xC2E4;&#xD5D8; &#xBAA8;&#xB378;&#xB85C; &#xD65C;&#xC6A9; &#xC6B0;&#xB9AC;. &#xC774;&#xC804; MMP &#xBCF5;&#xC81C; &#xBCF8; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC2E4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB97C; &#xBC14;&#xD0D5;&#xC73C;&#xB85C;, &#xD604;&#xC7AC; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xC131;&#xC778; zebrafish&#xC758; &#xC9C0; &#xB290; &#xB7EC; &#xBBF8; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xD0C0;&#xC785; 1 metalloproteinase (MT1 MMP), gelatinase (MMP 2) &#xBC0F; metalloproteinases (TIMP-2)&#xC758; &#xC0DD; &#xC870;&#xC9C1; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; 2 &#xC2DD;&#xC5D0; &#xC9D1;&#xC911; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD604;&#xC7A5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xC11D; &#xAF2C;&#xB9AC; &#xC9C0; &#xB290; &#xB7EC; &#xBBF8; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC5D0; zmt1-mmp, zmmp 2, ztimp 2 mRNA &#xC131;&#xC801;&#xD45C;&#xC758; co-expression&#xC744; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6D0;&#xB798;&#xC758; &#xC7A5;&#xC18C;&#xC5D0; &#xC824;&#xB77C;&#xD2F4; zymography &#xC9C0; &#xB290; &#xB7EC; &#xBBF8; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC5D0;&#xC11C; active metalloproteinases&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xB97C; &#xD655;&#xC778; &#xD588;&#xB2E4;. zmt1-mmp, zmmp 2, ztimp 2 mRNA &#xC131;&#xC801; &#xD45C;&#xD604; &#xD588;&#xB2E4; blastema &#xBC0F; &#xAE30;&#xC800; &#xC0C1;&#xD53C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAF2C;&#xB9AC; &#xC9C0; &#xB290; &#xB7EC; &#xBBF8; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xD45C;&#xD604;&#xC758; &#xC720;&#xD615; IV &#xCF5C;&#xB77C;&#xAC90; [zcol-IV(a5)] &#xC131;&#xC801; &#xC99D;&#xBA85;&#xC11C; (&#xAE30;&#xC800; lamina &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;)&#xB294; &#xAE30;&#xC800; &#xC0C1;&#xD53C;&#xB85C; &#xC81C;&#xD55C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC9C0; &#xB290; &#xB7EC; &#xBBF8; &#xD30C;&#xC0DD;&#xBB3C; GM6001 &#xC874;&#xC7AC; &#xD06C;&#xAC8C; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4; (MMP &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;) &#xC9C0; &#xB290; &#xB7EC; &#xBBF8; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD6A8;&#xC18C;&#xC758; &#xC911;&#xC694;&#xC131;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294;. &#xC774;&#xD1A0; (EMBO, 2001)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC774;&#xC804;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xD3EC;&#xD568; &#xCC99;&#xCD94; MT1 MMP &#xAD6C;&#xC131; &#xD558;&#xB294; hemopexin &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; (MT1HPX) &#xACB0;&#xACFC; MT1 MMP homophilic &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xD615;&#xC131;&#xC758; &#xB9C9;&#xD798;&#xACFC; &#xD6C4;&#xC18D; &#xD504;&#xB85C; MMP 2 &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC800;&#xD574;&#xC758; &#xADF8; &#xD45C;&#xD604;&#xC744; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Homophilic &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xD615;&#xC131;&#xC5D0; &#xBC29;&#xD574;&#xAC00; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; hemopexin &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC758; &#xD45C;&#xD604;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC778; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC774;&#xC804; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xB530;&#xB77C; &#xAC74;&#xBB3C;, &#xD604;&#xC7AC; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC9C0; &#xB290; &#xB7EC; &#xBBF8; &#xC0DD;&#xC131;&#xC5D0; mt1hpx&#xC758; &#xC18C;&#xC131; &#xC2DD; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xACFC;&#xC815;&#xC744; &#xC800;&#xD574; &#xD558; &#xACE0;&#xB294; blastema&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD;&#xC758; &#xAC10;&#xC18C; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xC5C8; &#xB2E4;. &#xD568;&#xAED8; &#xCC0D;&#xC740;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; MMPs zebrafish&#xC758; &#xC9C0; &#xB290; &#xB7EC; &#xBBF8; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; metalloproteinase &#xD45C;&#xD604;&#xACFC; &#xD568;&#xC218; &#xC911; zebrafish&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C0; &#xB290; &#xB7EC; &#xBBF8;: MT1 MMP, MMP2 &#xBC0F; timp2&#xC758; &#xBD84;&#xC11D;.

Metaloproteinasas de matriz (MMP) juegan un papel clave en la rotaci&#xF3;n de la matriz extracelular (MEC) y, por tanto, funcionan como reguladores clave de las interacciones c&#xE9;lula-ECM durante el desarrollo. A pesar de su importancia en los procesos de desarrollo, relativamente poco se ha informado sobre el papel de las metaloproteinasas de estos durante el desarrollo de las extremidades y la regeneraci&#xF3;n. Para abordar el problema de las interacciones c&#xE9;lula-ECM durante la extremidad (fin) la regeneraci&#xF3;n, hemos utilizado el pez cebra como modelo experimental. Sobre la base de estudios previos de MMP clonaci&#xF3;n de nuestro laboratorio, el estudio actual se ha centrado en la expresi&#xF3;n de una membrana de tipo metaloproteinasa (MT1-MMP), gelatinasa A (MMP-2) y tejido inhibidor end&#xF3;geno de dos de las metaloproteinasas (TIMP-2) durante el aleta de la regeneraci&#xF3;n en el pez cebra adulto. En el an&#xE1;lisis in situ indican co-expresi&#xF3;n de MMP-zmt1, zmmp-2, y ztimp-2 transcripciones de ARNm en la regeneraci&#xF3;n de las aletas caudales. En situ gelatina-zimograf&#xED;a confirm&#xF3; la presencia de las metaloproteinasas activos en las aletas de regeneraci&#xF3;n. zmt1-MMP, zmmp-2, y ztimp-2 transcripciones de ARNm se expresaron en el blastema durante la regeneraci&#xF3;n del epitelio basal de la aleta caudal, mientras que la expresi&#xF3;n de col&#xE1;geno tipo IV [zcol-IV (A5)] transcripciones (un componente de la l&#xE1;mina basal) se limit&#xF3; a el epitelio basal. Fin consecuencia se redujo considerablemente en presencia de GM6001 (un inhibidor de la actividad de MMP) que indica la importancia de estas enzimas durante la regeneraci&#xF3;n de la aleta. Estudios previos realizados por Itoh (EMBO, 2001) indica que la expresi&#xF3;n de un vertebrado MT1-MMP construcci&#xF3;n que contiene s&#xF3;lo los dominios transmembrana hemopexina-citoplasma (MT1HPX) dio como resultado el bloqueo de la formaci&#xF3;n de MT1-MMP homophilic complejo y posterior inhibici&#xF3;n de la pro-MMP-2 activaci&#xF3;n. La interferencia con la formaci&#xF3;n de complejos homophilic se atribuy&#xF3; a la expresi&#xF3;n del dominio hemopexina en la superficie celular. Bas&#xE1;ndose en estos hallazgos anteriores, el presente estudio encontr&#xF3; que la expresi&#xF3;n ect&#xF3;pica de MT1HPX regenera en las aletas inhibe el proceso de regeneraci&#xF3;n y dio lugar a una reducci&#xF3;n en la proliferaci&#xF3;n celular en el blastema. En conjunto, estos resultados indican que las MMPs tienen un papel importante durante la regeneraci&#xF3;n de la aleta de pez cebra.

Matrix metaloproteinasa Expresi&#xF3;n y la funci&#xF3;n durante la regeneraci&#xF3;n de aleta de pez cebra: An&#xE1;lisis de MT1-MMP, MMP2 y TIMP2

Cre &#x4ECB;&#x5BFC;&#x91CD;&#x7EC4;&#x5DF2;&#x6210;&#x4E3A;&#x64CD;&#x7EB5;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x7684;&#x5B9D;&#x8D35;&#x5DE5;&#x5177;&#x3002;&#x6709;&#x6761;&#x4EF6;&#x5730;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x6216;&#x751F;&#x6210;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x6539;&#x53D8;&#x4E0E;&#x6B64;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x5DE5;&#x5177;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x5C06;&#x5927;&#x5927;&#x63D0;&#x9AD8;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x57FA;&#x56E0;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7528;&#x4E8E;&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x86CB;&#x767D; 70 &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x533A; inducibly &#x63A7;&#x5236;&#x589E;&#x5F3A;&#x578B;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D; (EGFP)-Cre &#x878D;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D; Cre &#x878D;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x662F;&#x80FD;&#x591F;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x91CD;&#x7EC4; lox &#x7AD9;&#x70B9;&#x6216;&#x4F5C;&#x4E3A; 2 hr post-heat &#x51B2;&#x51FB;&#x611F;&#x5E94;&#x5C3D;&#x65E9;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7EE7;&#x627F;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x4E2D;&#x6CE8;&#x5165;&#x8D28;&#x7C92;&#x4E4B;&#x95F4;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x6240;&#x4E0E;&#x6D3B;&#x529B;&#x517C;&#x5BB9;&#x7684; Cre &#x8868;&#x8FBE;&#x53D6;&#x5F97;&#x643A;&#x5E26; cre-&#x70ED;&#x4F11;&#x514B;&#x86CB;&#x767D; 70-&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x9C7C;&#x7EBF;&#x7684;&#x6C34;&#x5E73;&#xFF0C;&#x7537;&#x6027;&#x548C;&#x5973;&#x6027;&#x7684;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x9C7C;&#x662F;&#x80A5;&#x6C83;&#x7684;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D; Cre &#x8868;&#x8FBE;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x540E;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x8BE5; Cre &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x91CD;&#x7EC4;&#x662F;&#x53EF;&#x884C;&#x624B;&#x6BB5;&#x64CD;&#x7EB5;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

Cre &#x4ECB;&#x5BFC;&#x5728;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x80DA;&#x80CE;&#x4E2D;&#x7279;&#x5B9A;&#x4E8E;&#x7AD9;&#x70B9;&#x7684;&#x91CD;&#x7EC4;&#x3002;

Cre-mediated site-specific recombination has become an invaluable tool for manipulation of the murine genome. The ability to conditionally activate gene expression or to generate chromosomal alterations with this same tool would greatly enhance zebrafish genetics. This study demonstrates that the HSP70 promoter can be used to inducibly control expression of an enhanced green fluorescent protein (EGFP) -Cre fusion protein. The EGFP-Cre fusion protein is capable of promoting recombination between lox sites in injected plasmids or in stably inherited transgenes as early as 2 hr post-heat shock induction. Finally, the levels of Cre expression achieved in a transgenic fish line carrying the HSP70-EGFP-cre transgene are compatible with viability and both male and female transgenic fish are fertile subsequent to induction of EGFP-Cre expression. Hence, our data suggests that Cre-mediated recombination is a viable means of manipulating gene expression in zebrafish.

Cre-mediated site-specific recombination in zebrafish embryos.

Cre-m&#xE9;diation recombinaison sp&#xE9;cifique de site est devenu un outil pr&#xE9;cieux pour la manipulation du g&#xE9;nome murin. La capacit&#xE9; &#xE0; activer l&#x26;#39;expression du g&#xE8;ne conditionnellement ou pour g&#xE9;n&#xE9;rer des alt&#xE9;rations chromosomiques avec ce m&#xEA;me outil am&#xE9;liorerait grandement la g&#xE9;n&#xE9;tique du poisson z&#xE8;bre. Cette &#xE9;tude d&#xE9;montre que le promoteur HSP70 peut &#xEA;tre utilis&#xE9; pour contr&#xF4;ler l&#x26;#39;expression inductible d&#x26;#39;une prot&#xE9;ine verte am&#xE9;lior&#xE9;e (EGFP) fluorescente prot&#xE9;ine de fusion Cre-. La prot&#xE9;ine de fusion EGFP-Cre est capable de promouvoir la recombinaison entre les sites lox dans des plasmides inject&#xE9;s ou dans des transg&#xE8;nes de mani&#xE8;re stable h&#xE9;rit&#xE9;es d&#xE8;s induction 2 h choc post-chauffage. Enfin, les niveaux d&#x26;#39;expression Cre r&#xE9;alis&#xE9; en ligne les poissons transg&#xE9;niques portant le transg&#xE8;ne HSP70-EGFP-cre sont compatibles avec la viabilit&#xE9; et &#xE0; la fois m&#xE2;le et femelle poisson transg&#xE9;nique fertile sont post&#xE9;rieures &#xE0; l&#x26;#39;induction de l&#x26;#39;EGFP-Cre expression. Par cons&#xE9;quent, nos donn&#xE9;es sugg&#xE8;rent que Cre-m&#xE9;diation recombinaison est un moyen viable de manipuler l&#x26;#39;expression des g&#xE8;nes chez le poisson z&#xE8;bre.

Cre-m&#xE9;diation recombinaison sp&#xE9;cifique de site dans embryons de poisson z&#xE8;bre

Cre-vermittelte ortsspezifische Rekombination in Zebrafisch-Embryos.

Ricombinazione sito-specifica cre-mediata &egrave; diventato uno strumento prezioso per la manipolazione del genoma murino. La capacit&agrave; di attivare in modo condizionale espressione genica o per generare alterazioni cromosomiche con questo stesso strumento rafforzerebbe notevolmente zebrafish genetica. Questo studio dimostra che il promotore HSP70 pu&ograve; essere utilizzato per controllare inducibly espressione di una proteina di fusione avanzata proteina fluorescente verde (EGFP) - Cre. La proteina di fusione EGFP-Cre &egrave; in grado di promuovere la ricombinazione tra i siti lox in plasmidi iniettati o stabile ereditato transgeni gi&agrave; come induzione post-heat shock 2 hr. Infine, i livelli di espressione di Cre raggiunto in una linea di pesci transgenici che trasportano il transgene HSP70-EGFP-cre sono compatibili con la redditivit&agrave; e pesce transgenico sia maschio che femmina sono fertile dopo induzione dell&#39;espressione di EGFP-Cre. Quindi, i nostri dati suggeriscono che quello ricombinazione mediata Cre &egrave; uno strumento efficace di manipolazione di espressione genica in zebrafish.

Ricombinazione mediata Cre site-specific in embrioni di zebrafish.

CRE-&#x4ECB;&#x5728;&#x90E8;&#x4F4D;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x3092;&#x64CD;&#x4F5C;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x8CB4;&#x91CD;&#x306A;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6761;&#x4EF6;&#x4ED8;&#x304D;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3068;&#x540C;&#x3058;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x304C;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B66;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x308B;&#x3067;&#x3042;&#x308D;&#x3046;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;HSP70&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x304C;&#x8A98;&#x5C0E;&#x7684;&#x306B;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7DD1;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;EGFP&#xFF09;&#x306E;Cre&#x878D;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; EGFP-Cre&#x30EA;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D3;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x878D;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;2&#x6642;&#x9593;&#x5F8C;&#x306E;&#x71B1;&#x30B7;&#x30E7;&#x30C3;&#x30AF;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306B;&#x306F;&#x65E9;&#x304F;&#x3082;&#x6CE8;&#x5165;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C9;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x3066;&#x7D99;&#x627F;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5C0E;&#x5165;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;lox&#x90E8;&#x4F4D;&#x9593;&#x3067;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;HSP70-EGFP-CRE&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x751F;&#x5B58;&#x7387;&#x3068;&#x7537;&#x6027;&#x3068;&#x5973;&#x6027;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x9B5A;&#x3068;&#x4E92;&#x63DB;&#x6027;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x9B5A;&#x306E;&#x30E9;&#x30A4;&#x30F3;&#x3067;&#x9054;&#x6210;&#x306E;Cre&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306F;EGFP-Cre&#x30EA;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D3;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306B;&#x7D9A;&#x304F;&#x80A5;&#x6C83;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;Cre-&#x5A92;&#x4ECB;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x64CD;&#x4F5C;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6709;&#x52B9;&#x306A;&#x624B;&#x6BB5;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x80DA;&#x3067;&#x306F;&#x3001;Cre-&#x5A92;&#x4ECB;&#x90E8;&#x4F4D;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;

&#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xBCC4; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; Cre &#xC911;&#xC7AC; murine &#xAC8C;&#xB188;&#xC758; &#xC870;&#xC791;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xADC0;&#xC911; &#xD55C; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xAC00; &#xB418;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC744; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558;&#xAC70;&#xB098;&#xC774; &#xAC19;&#xC740; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xB85C; &#xC5FC;&#xC0C9;&#xCCB4; &#xBCC0;&#xACBD; &#xC0DD;&#xC131; &#xB2A5;&#xB825; zebrafish &#xC720;&#xC804;&#xD559;&#xC744; &#xD06C;&#xAC8C; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xC2DC;&#xD0AC; &#xAC83; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; HSP70 &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; inducibly &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xB179;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (EGFP)-Cre &#xC735;&#xD574; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD45C;&#xC815; &#xC81C;&#xC5B4;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. EGFP-Cre &#xD4E8;&#xC804; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0BD;&#xC785; &#xB41C; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4; &#xBBF8;&#xB4DC; &#xB610;&#xB294; 2 &#xC2DC;&#xAC04; post-heat &#xCDA9;&#xACA9; &#xC720;&#xB3C4;&#xB85C; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0C1;&#xC18D; &#xB41C; transgenes &#xC77C;&#xCC0D; lox &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xAC04;&#xC758; &#xC7AC;&#xACB0;&#xD569;&#xC744; &#xCD94;&#xC9C4; &#xAC00;&#xB2A5; &#xD558;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, Cre &#xC2DD; HSP70-EGFP-cre transgene &#xC6B4;&#xBC18; &#xD558;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xBB3C;&#xACE0;&#xAE30; &#xB77C;&#xC778;&#xC5D0; &#xB2EC;&#xC131; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xC0DD;&#xC874; &#xB2A5;&#xB825;&#xC5D0; &#xD638;&#xD658; &#xB418;&#xBA70; &#xB0A8;&#xC131;&#xACFC; &#xC5EC;&#xC131;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xBB3C;&#xACE0;&#xAE30;&#xB294; EGFP-Cre &#xC2DD;&#xC758; &#xC720;&#xB3C4; &#xC774;&#xD6C4;&#xC5D0; &#xBE44;&#xC625;&#xD55C;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; Cre &#xC911;&#xC7AC; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569;&#xC740; zebrafish&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC744; &#xC870;&#xC791; &#xD558;&#xB294; &#xC720;&#xB825;&#xD55C; &#xC218;&#xB2E8; &#xB098;&#xC654;&#xB2E4;.

Cre &#xC911;&#xC7AC; zebrafish &#xD0DC;&#xC544;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xBCC4; &#xC7AC;&#xACB0;&#xD569;.

Cre mediada por recombinaci&#xF3;n espec&#xED;fica de sitio se ha convertido en una valiosa herramienta para la manipulaci&#xF3;n del genoma murino. La capacidad de activar la expresi&#xF3;n g&#xE9;nica de forma condicional o para generar alteraciones cromos&#xF3;micas con esta misma herramienta mejorar&#xED;a en gran medida la gen&#xE9;tica del pez cebra. Este estudio demuestra que el promotor HSP70 puede ser utilizado para controlar la expresi&#xF3;n inducible de una mayor prote&#xED;na verde fluorescente (EGFP) prote&#xED;na de fusi&#xF3;n-Cre. La prote&#xED;na de fusi&#xF3;n EGFP-Cre es capaz de promover la recombinaci&#xF3;n entre los sitios lox en pl&#xE1;smidos inyectados o en los transgenes establemente heredados tan pronto como la inducci&#xF3;n 2 horas despu&#xE9;s de choque t&#xE9;rmico. Por &#xFA;ltimo, los niveles de expresi&#xF3;n de Cre logrado en una l&#xED;nea de peces transg&#xE9;nicos que lleva el transg&#xE9;n EGFP-HSP70-creaci&#xF3;n son compatibles con la viabilidad y los peces transg&#xE9;nicos tanto hombres como mujeres f&#xE9;rtiles son posteriores a la inducci&#xF3;n de la expresi&#xF3;n de Cre-EGFP. Por lo tanto, nuestros datos sugieren que Cre mediada por recombinaci&#xF3;n es un medio viable de manipular la expresi&#xF3;n g&#xE9;nica en el pez cebra.

Cre mediada por recombinaci&#xF3;n espec&#xED;fica de sitio en embriones de pez cebra

&#x4F7F;&#x7528;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x6A21;&#x5F0F;&#x751F;&#x7269;&#x7684;&#x5174;&#x8DA3;&#x589E;&#x52A0;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4E86;&#x7FC5;&#x518D;&#x751F;&#x7814;&#x7A76;&#x7684;&#x91CD;&#x65B0;&#x62AC;&#x5934;&#x3002;&#x8FD9;&#x5C31;&#x5141;&#x8BB8;&#x5927;&#x91CF;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x5BB6;&#x65CF;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x4FE1;&#x53F7;&#x5206;&#x5B50;&#x4E0E;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF0C;&#x5728;&#x518D;&#x751F;&#x671F;&#x95F4;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x9274;&#x5B9A;&#x3002;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x5728;&#x6CA1;&#x6709;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x53EF;&#x4F9B;&#x611F;&#x5174;&#x8DA3;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x4EA7;&#x54C1;&#x7684;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x4F5C;&#x7528;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x4E00;&#x76F4;&#x5F88;&#x56F0;&#x96BE;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x660E;&#x4F53;&#x5185;&#x7535;&#x7A7F;&#x5B54;&#x7684; morpholino &#x5BE1;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x662F;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x649E;&#x7FC5;&#x518D;&#x751F;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7684;&#x53EF;&#x884C;&#x9014;&#x5F84;&#x3002;&#x9488;&#x5BF9; fgfr1 &#x548C; msxb Morpholino &#x5BE1;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x88AB;&#x5229;&#x7528;&#x548C;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x86CB;&#x767D;&#x649E;&#x5BFC;&#x81F4;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684;&#x9C7C;&#x7FC5;&#x4EA7;&#x7269;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;Fgfr1 &#x649E; phenocopied &#x4EA7;&#x7269;&#x6291;&#x5236; Fgfr1 &#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x4E0E;&#x83B7;&#x5F97;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6B64;&#x65B9;&#x6CD5;&#x63D0;&#x4F9B; msxb &#x5C3E;&#x9CCD;&#x518D;&#x751F;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x76F4;&#x63A5;&#x8BC1;&#x636E;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x649E;&#x7684; Fgfr1&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F; Msxb&#xFF0C;&#x53D7;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684; blastemal &#x7684; msxc&#xFF0C;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6280;&#x672F;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7528;&#x4E8E;&#x786E;&#x5B9A;&#x5728;&#x9057;&#x4F20;&#x8DEF;&#x5F84;&#x5F71;&#x54CD;&#x518D;&#x751F;&#x4E0A;&#x4F4D;&#x6027;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x65B9;&#x4FBF;&#x7684;&#x53CD;&#x5411;&#x9057;&#x4F20;&#x65B9;&#x6CD5;&#x5141;&#x8BB8;&#x7814;&#x7A76;&#x4EBA;&#x5458; (1) &#x5FEB;&#x901F;&#x8BC4;&#x4F30;&#x5DF2;&#x77E5;&#x671F;&#x95F4;&#x7FC5;&#x518D;&#x751F;&#xFF0C;&#x7FC5;&#x518D;&#x751F;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x76F8;&#x5173;&#x6027; &#xFF08;2&#xFF09; &#x5C4F;&#x5E55;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x548C; (3) &#x5206;&#x914D;&#x57FA;&#x56E0;&#x4E3A;&#x57FA;&#x7840;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x9014;&#x5F84;&#x7FC5;&#x7247;&#x518D;&#x751F;&#x3002;

&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x9CCD;&#x518D;&#x751F;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x9488;&#x5BF9; fgfr1 &#x548C; msxb morpholinos &#x4F53;&#x5185;&#x7535;&#x7A7F;&#x5B54;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Increased interest in using zebrafish as a model organism has led to a resurgence of fin regeneration studies. This has allowed for the identification of a large number of gene families, including signaling molecules and transcription factors, which are expressed during regeneration. However, in cases where no specific inhibitor is available for the gene product of interest, determination of a functional role for these genes has been difficult. Here we demonstrate that in vivo electroporation of morpholino oligonucleotides is a feasible approach for protein knock-down during fin regeneration. Morpholino oligonucleotides against fgfr1 and msxb were utilized and knock-down of both proteins resulted in reduced fin outgrowth. Importantly, Fgfr1 knock-down phenocopied outgrowth inhibition obtained with an Fgfr1 inhibitor. Furthermore, this method provided direct evidence for a functional role for msxb in caudal fin regeneration. Finally, knock-down of Fgfr1, but not Msxb, affected the blastemal expression of msxc, suggesting this technique can be used to determine epistasis in genetic pathways affecting regeneration. Thus, this convenient reverse genetic approach allows researchers to quickly (1) assess the function of genes known to be expressed during fin regeneration, (2) screen genes for functional relevance during fin regeneration, and (3) assign genes to the molecular pathways underlying fin regeneration.

Inhibition of zebrafish fin regeneration using in vivo electroporation of morpholinos against fgfr1 and msxb.

L&#x26;#39;int&#xE9;r&#xEA;t accru pour l&#x26;#39;utilisation du poisson z&#xE8;bre comme organisme mod&#xE8;le a conduit &#xE0; une r&#xE9;surgence des &#xE9;tudes de r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration des nageoires. Cela a permis l&#x26;#39;identification d&#x26;#39;un grand nombre de familles de g&#xE8;nes, y compris les mol&#xE9;cules de signalisation et des facteurs de transcription, qui sont exprim&#xE9;s lors de la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration. Toutefois, dans les cas o&#xF9; aucun inhibiteur sp&#xE9;cifique est disponible pour le produit du g&#xE8;ne d&#x26;#39;int&#xE9;r&#xEA;t, la d&#xE9;termination d&#x26;#39;un r&#xF4;le fonctionnel de ces g&#xE8;nes a &#xE9;t&#xE9; difficile. Ici, nous d&#xE9;montrons que, in vivo &#xE9;lectroporation d&#x26;#39;oligonucl&#xE9;otides morpholino est une approche possible pour la prot&#xE9;ine knock-down lors de la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration fin. Oligonucl&#xE9;otides morpholino contre FGFR1 et msxb ont &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9;s et le knock-down des deux prot&#xE9;ines a entra&#xEE;n&#xE9; dans l&#x26;#39;expansion de la nageoire r&#xE9;duite. Il est important, FGFR1 knock-down inhibition de l&#x26;#39;excroissance ph&#xE9;nocopies obtenus avec un inhibiteur de FGFR1. En outre, cette m&#xE9;thode fournit une preuve directe d&#x26;#39;un r&#xF4;le fonctionnel pour msxb dans la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration de la nageoire caudale. Enfin, le knock-down de FGFR1, mais pas Msxb, affect&#xE9; l &#x26;#39;expression de blast&#xE8;me msxc, ce qui sugg&#xE8;re cette technique peut &#xEA;tre utilis&#xE9;e pour d&#xE9;terminer &#xE9;pistasie dans les voies g&#xE9;n&#xE9;tiques affectant la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration. Ainsi, cette pratique l&#x26;#39;approche de g&#xE9;n&#xE9;tique inverse permet aux chercheurs de rapidement (1) d&#x26;#39;&#xE9;valuer la fonction des g&#xE8;nes connus pour &#xEA;tre exprim&#xE9;s lors de la nageoire de r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration, les g&#xE8;nes d&#x26;#39;&#xE9;cran (2) pour la pertinence fonctionnelle lors de la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration fin, et (3) attribuer des g&#xE8;nes aux voies mol&#xE9;culaires qui sous-tendent la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration fin.

Inhibition de la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration Fin Zebrafish utilisant &#xE9;lectroporation in vivo de morpholinos contre FGFR1 et Msxb

Verst&auml;rktes Interesse an der Verwendung von Zebrafish als Modellorganismus f&uuml;hrte zu ein Wiederaufleben der Fin-Regenerierung-Studien. Dies hat f&uuml;r die Identifizierung einer gro&szlig;en Zahl der Gen-Familien, einschlie&szlig;lich signalisieren der Molek&uuml;le und Transkriptionsfaktoren, die w&auml;hrend der Regenerierung ausgedr&uuml;ckt sind erlaubt. Jedoch in F&auml;llen, in denen keine spezifischen Inhibitor f&uuml;r das Genprodukt von Interesse, war Bestimmung der eine funktionale Rolle f&uuml;r diese Gene schwierig. Hier zeigen wir, dass in Vivo Electroporation der Morpholino Oligonucleotides einen machbar Ansatz f&uuml;r Protein Knock-Down w&auml;hrend der Fin-Regenerierung. Morpholino Oligonucleotides gegen fgfr1 und Msxb wurden eingesetzt und Knock-Down der beiden Proteine f&uuml;hrte reduzierte Fin Auswuchs. Allem Fgfr1 Knock-Down phenocopied Auswuchs Hemmung mit einem Fgfr1-Hemmer erhalten. Dar&uuml;ber hinaus zur diese Methode direkten Beweise f&uuml;r eine funktionale Rolle f&uuml;r Msxb Schwanzflosse Regeneration. Schlie&szlig;lich Knock-Down Fgfr1, aber nicht Msxb, beeinflusst den blastemal Ausdruck des Msxc, schl&auml;gt diese Technik dient zur Epistase in genetischen Wege beeinflussen Regenerierung zu bestimmen. Also dieser bequeme umgekehrte genetische Ansatz erm&ouml;glicht es Forschern schnell beurteilen (1) die Funktion der Gene, die bekannterma&szlig;en beim Fin regenerieren, (2) Bildschirm-Gene f&uuml;r funktionelle Relevanz beim Fin regenerieren, ausgedr&uuml;ckt werden und (3) zuweisen-Gene zu den molekularen Pfaden, die zugrunde liegenden fin Regenerierung.

Hemmung der Zebrafisch Fin Regeneration mit in-vivo Electroporation der Morpholinos gegen fgfr1 und Msxb.

Maggiore interesse utilizzando zebrafish come organismo modello ha portato a una rinascita degli studi di rigenerazione di pinna. Questo ha permesso l&#39;identificazione di un gran numero di famiglie di gene, compresa la segnalazione di molecole e fattori di trascrizione, che sono espressi durante la rigenerazione. Tuttavia, nei casi in cui nessun inibitore specifico &egrave; disponibile per il prodotto del gene di interesse, determinazione di un ruolo funzionale per questi geni &egrave; stata difficile. Qui dimostriamo che in vivo elettroporazione dei oligonucleotides oligonucleotidi &egrave; un approccio fattibile per proteina knock-down durante la rigenerazione di pinna. Oligonucleotidi oligonucleotides contro fgfr1 e msxb furono utilizzati e knock-down di entrambe le proteine ha portato escrescenza pinna ridotta. Soprattutto, Fgfr1 knock-down phenocopied escrescenza inibizione ottenuto con un inibitore Fgfr1. Inoltre, questo metodo ha fornito prove dirette per un ruolo funzionale per msxb nella rigenerazione della pinna caudale. Infine, knock-down del Fgfr1, ma non Msxb, influenzato l&#39;espressione blastemal di msxc, suggerendo che questa tecnica pu&ograve; essere utilizzata per determinare l&#39;epistasi in percorsi genetici che interessano la rigenerazione. Cos&igrave;, questo approccio di genetico inverso conveniente permettono ai ricercatori di (1) valutare rapidamente la funzione dei geni noti per essere espresso durante la rigenerazione di pinna, (2) geni schermo per rilevanza funzionale durante la rigenerazione di pinna, e (3) assegnare geni per le vie molecolari sottostanti fin rigenerazione.

Inibizione della rigenerazione di pinna zebrafish usando elettroporazione in vivo di morpholinos contro fgfr1 e msxb.

&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x751F;&#x7269;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x306E;&#x95A2;&#x5FC3;&#x306E;&#x9AD8;&#x307E;&#x308A;&#x306F;&#x3001;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x5FA9;&#x6D3B;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x518D;&#x751F;&#x4E2D;&#x306B;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x5206;&#x5B50;&#x3084;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x3001;&#x591A;&#x6570;&#x306E;&#x8B58;&#x5225;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x304C;&#x76EE;&#x7684;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x7523;&#x7269;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5229;&#x7528;&#x3067;&#x304D;&#x306A;&#x3044;&#x5834;&#x5408;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x5F79;&#x5272;&#x306E;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x304C;&#x56F0;&#x96E3;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30E2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A9;&#x30EA;&#x30CE;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;in vivo&#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED;&#x30DD;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3067;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306E;&#x5B9F;&#x73FE;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306F;&#x3001;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x4E2D;&#x306B;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; FGFR1&#x3068;msxb&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x30E2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A9;&#x30EA;&#x30CE;&#x30AA;&#x30EA;&#x30B4;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x3092;&#x200B;&#x200B;&#x5229;&#x7528;&#x3057;&#x3001;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x9084;&#x5143;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x306E;&#x4F38;&#x9577;&#x3092;&#x3082;&#x305F;&#x3089;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x306E;&#x306F;&#x3001;FGFR1&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;phenocopied&#x4F38;&#x9577;&#x963B;&#x5BB3;&#x306F;&#x3001;FGFR1&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306F;&#x3001;&#x5C3E;&#x9C2D;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x306B;msxb&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x5F79;&#x5272;&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x7684;&#x306A;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;Msxb FGFR1&#x306E;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x6280;&#x8853;&#x306F;&#x518D;&#x751F;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x4E0A;&#x4F4D;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x793A;&#x5506;msxc&#x306E;blastemal&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x200B;&#x200B;&#x4E0E;&#x3048;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x4FBF;&#x5229;&#x306A;&#x9006;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B66;&#x7684;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306F;&#x3001;&#x7814;&#x7A76;&#x8005;&#x306F;&#x3059;&#x3050;&#x306B;&#xFF08;1&#xFF09;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x4E2D;&#x306B;&#x3001;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x95A2;&#x9023;&#x6027;&#xFF08;2&#xFF09;&#x753B;&#x9762;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x518D;&#x751F;&#x4E2D;&#x306B;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x3001;&#xFF08;3&#xFF09;&#x57FA;&#x790E;&#x3068;&#x306A;&#x308B;&#x5206;&#x5B50;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x5272;&#x308A;&#x5F53;&#x3066;&#x308B;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x3002;

FGFR1&#x3068;Msxb&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;Morpholinos&#x306E;in vivo&#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED;&#x30DD;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x518D;&#x751F;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;

Zebrafish &#xBAA8;&#xB378; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAD00;&#xC2EC; &#xC99D;&#xAC00; &#xC9C0; &#xB290; &#xB7EC; &#xBBF8; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xBD80;&#xD65C;&#xC744; &#xC8FC;&#xB3C4;&#xD558; &#xACE0; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xAC00;&#xC871;, &#xBD84;&#xC790; &#xBC0F; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418;&#xB294; &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790; &#xC2E0;&#xD638; &#xB4F1;&#xC758; &#xB2E4; &#xC218;&#xC758; &#xC2DD;&#xBCC4;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC544;&#xBB34; &#xD2B9;&#xC815; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; &#xAD00;&#xC2EC;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC81C;&#xD488;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC774; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xC5ED;&#xD560;&#xC758; &#xACB0;&#xC815;&#xC740; &#xC5B4;&#xB824;&#xC6B4; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; vivo morpholino oligonucleotides electroporation &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB215; &#xC9C0; &#xB290; &#xB7EC; &#xBBF8; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC2E4;&#xD604; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xC811;&#xADFC;&#xC740; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. Fgfr1 &#xBC0F; msxb&#xC5D0; &#xB300;&#xD574; Morpholino oligonucleotides &#xD65C;&#xC6A9; &#xD588;&#xB2E4; &#xBC0F; &#xAC10;&#xC18C; &#xB41C; &#xC9C0; &#xB290; &#xB7EC; &#xBBF8; &#xD30C;&#xC0DD;&#xBB3C; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xC5C8; &#xB2E4; &#xB450; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xB179; &#xB2E4;&#xC6B4;. &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAC83;&#xC740;, Fgfr1 &#xB178;&#xD06C; &#xB2E4;&#xC6B4; phenocopied &#xBC1C;&#xC804;&#xC774; &#xC800;&#xD574; Fgfr1 &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xC5BB;&#xC744;. &#xB610;&#xD55C;,&#xC774; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB294; &#xAF2C;&#xB9AC; &#xC9C0; &#xB290; &#xB7EC; &#xBBF8; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC5D0; msxb&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xC5ED;&#xD560;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC9C1;&#xC811;&#xC801;&#xC778; &#xC99D;&#xAC70;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xB179; &#xB2E4;&#xC6B4; Fgfr1, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD558;&#xC9C0; Msxb, blastemal msxc,&#xC774; &#xAE30;&#xC220;&#xC740; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xACBD;&#xB85C;&#xC5D0; epistasis &#xACB0;&#xC815;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC81C;&#xC548; &#xD45C;&#xD604;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;,&#xC774; &#xD3B8;&#xB9AC;&#xD55C; &#xC5ED;&#xBC29;&#xD5A5; &#xC720;&#xC804;&#xC801; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xBA74; &#xC2E0;&#xC18D; &#xD558; &#xAC8C; (1) &#xD3C9;&#xAC00; &#xC9C0; &#xB290; &#xB7EC; &#xBBF8; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xAD00;&#xB828;&#xC131; (2) &#xD654;&#xBA74; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC9C0; &#xB290; &#xB7EC; &#xBBF8; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB420; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xBC0F; &#xAE30;&#xBCF8; &#xBD84;&#xC790; &#xACBD;&#xB85C;&#xB97C; (3) &#xD560;&#xB2F9; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC9C0; &#xB290; &#xB7EC; &#xBBF8; &#xC7AC;&#xC0DD;.

Zebrafish &#xC9C0; &#xB290; &#xB7EC; &#xBBF8; &#xC7AC;&#xC0DD; fgfr1 &#xBC0F; msxb&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; morpholinos&#xC758; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; electroporation&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

El creciente inter&#xE9;s en el uso de pez cebra como modelo ha dado lugar a un resurgimiento de los estudios de regeneraci&#xF3;n de las aletas. Esto ha permitido la identificaci&#xF3;n de un gran n&#xFA;mero de familias de genes, incluyendo mol&#xE9;culas de se&#xF1;alizaci&#xF3;n y factores de transcripci&#xF3;n, que se expresan durante la regeneraci&#xF3;n. Sin embargo, en casos en que no inhibidor espec&#xED;fico est&#xE1; disponible para el producto del gen de inter&#xE9;s, la determinaci&#xF3;n de un papel funcional de estos genes ha sido dif&#xED;cil. Aqu&#xED; demostramos que la electroporaci&#xF3;n in vivo de los oligonucle&#xF3;tidos morfolino es un enfoque viable para la prote&#xED;na de knock-down durante la regeneraci&#xF3;n de la aleta. Oligonucle&#xF3;tidos Morpholino contra FGFR1 y msxb fueron utilizados y knock-down de ambas prote&#xED;nas dio lugar a consecuencia de la aleta reducida. Es importante destacar que FGFR1 derribo consecuencia la inhibici&#xF3;n phenocopied obtenido con un inhibidor de FGFR1. Adem&#xE1;s, este m&#xE9;todo proporciona una evidencia directa de un papel funcional para msxb en la regeneraci&#xF3;n de la aleta caudal. Por &#xFA;ltimo, knock-down de FGFR1, pero Msxb, no afect&#xF3; la expresi&#xF3;n de la blast&#xE9;micas msxc, lo que sugiere que esta t&#xE9;cnica puede ser utilizada para determinar la epistasis en las v&#xED;as gen&#xE9;ticas que afectan a la regeneraci&#xF3;n. Por lo tanto, este pr&#xE1;ctico enfoque gen&#xE9;tico inversa permite a los investigadores de forma r&#xE1;pida (1) evaluar la funci&#xF3;n de genes conocidos que se manifiesten durante la regeneraci&#xF3;n de la aleta, (2) genes en busca de relevancia funcional durante la regeneraci&#xF3;n de la aleta, y (3) asignar a los genes de las v&#xED;as moleculares que subyacen a aleta regeneraci&#xF3;n.

La inhibici&#xF3;n de la regeneraci&#xF3;n de aleta de pez cebra empleando electroporaci&#xF3;n in vivo de la Morpholinos contra FGFR1 y Msxb

Chez la souris, les cellules decidual se diff&eacute;rencient des cellules stromales ut&eacute;rines en r&eacute;ponse aux hormones st&eacute;ro&iuml;des et des signaux provenant de l&#39;embryon. Cellules decidual crucialement participent &agrave; cr&eacute;er l&#39;environnement intra-ut&eacute;rin propice au d&eacute;veloppement de l&#39;embryon. Parmi leurs nombreuses fonctions est la production de cytokines li&eacute;es &agrave; prolactine (PRL), y compris les prot&eacute;ines li&eacute;es &agrave; prolactine d&eacute;ciduale (DPRP). DPRP est une cytokine liant l&#39;h&eacute;parine, qui est abondamment exprim&eacute;e dans la caduque ut&eacute;rine. Dans le cadre de cette enqu&ecirc;te, nous avons isol&eacute; le g&egrave;ne de Dprp souris, caract&eacute;ris&eacute; sa structure et &eacute;valu&eacute; son r&ocirc;le biologique. DPRP null souris ont &eacute;t&eacute; faites en rempla&ccedil;ant les exons 2 &agrave; 6 du g&egrave;ne Dprp avec un g&egrave;ne d&#39;une prot&eacute;ine fluorescente verte dans le cadre (EGFP) et une cassette de r&eacute;sistance &agrave; la n&eacute;omycine (neo). H&eacute;t&eacute;rozygote reproduction intercroisements des souris mutantes ont donn&eacute; le ratio mend&eacute;lien pr&eacute;vues. Les femelles enceintes h&eacute;t&eacute;rozygote exprim&eacute;e EGFP dans decidual tissus dans des endroits identiques &agrave; expression endog&egrave;ne de Dprp ARNm et de prot&eacute;ines. Homozygotes souris m&acirc;les et femelles mutantes de Dprp null ont des taux de croissance de postnatal normal viable, expos&eacute;s, ont &eacute;t&eacute; port&eacute;es normales fertile et produit. Un ph&eacute;notype important a &eacute;t&eacute; observ&eacute; quand les enceintes Dprp null souris ont &eacute;t&eacute; expos&eacute;es &agrave; un stress physiologique. Carence DPRP trafiqu&eacute;, grossesse d&eacute;pendant des adaptations &agrave; l&#39;hypoxie entra&icirc;nant un &eacute;chec grossesse. Interruption de grossesse a &eacute;t&eacute; associ&eacute;e &agrave; des aberrations dans les perturbations dans la morphogen&egrave;se placenta Chorio-mesometrial cellules decidual et l&#39;int&eacute;grit&eacute; vasculaire mesometrial. Les observations sugg&egrave;rent que DPRP participe &agrave; des adaptations de grossesse d&eacute;pendant d&#39;un facteur de stress physiologique.

Une cytokine cellulaire d&eacute;ciduale ut&eacute;rine assure des adaptations grossesse d&eacute;pendant d&#39;un facteur de stress physiologique.

&#x5728;&#x9F20;&#x6807;&#xFF0C;&#x8715;&#x819C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x4ECE;&#x5B50;&#x5BAB;&#x95F4;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x54CD;&#x5E94;&#x7C7B;&#x56FA;&#x9187;&#x6FC0;&#x7D20;&#x548C;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x3002;&#x8715;&#x819C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5173;&#x952E;&#x5728;&#x4E8E;&#x53C2;&#x4E0E;&#x521B;&#x9020;&#x7684;&#x5BAB;&#x5185;&#x73AF;&#x5883;&#x6709;&#x5229;&#x4E8E;&#x80DA;&#x80CE;&#x53D1;&#x80B2;&#x3002;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x5F88;&#x591A;&#x7684;&#x804C;&#x80FD;&#x4E4B;&#x4E00;&#x662F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x6709;&#x5173;&#x7684;&#x50AC;&#x4E73;&#x7D20; (PRL)&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x8715;&#x819C;&#x50AC;&#x4E73;&#x7D20;&#x76F8;&#x5173;&#x86CB;&#x767D; (DPRP) &#x7684;&#x751F;&#x4EA7;&#x3002;DPRP &#x662F;&#x809D;&#x7D20;&#x7ED3;&#x5408;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF0C;&#x800C;&#x6E05;&#x695A;&#x5730;&#x8868;&#x793A;&#x5728;&#x5B50;&#x5BAB;&#x8715;&#x819C;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x6B21;&#x8C03;&#x67E5;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x9694;&#x79BB;&#x9F20;&#x6807; Dprp &#x57FA;&#x56E0;&#x3001; &#x7279;&#x70B9;&#x53CA;&#x5176;&#x7ED3;&#x6784;&#x5E76;&#x8BC4;&#x4EF7;&#x5176;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;Dprp null &#x5C0F;&#x9F20;&#x8A00;&#x7528; 2 &#x5230; 6 &#x7684; Dprp &#x57FA;&#x56E0;&#x66FF;&#x6362;&#x5E27;&#x4E2D;&#x589E;&#x5F3A;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D; (EGFP) &#x57FA;&#x56E0;&#x548C;&#x65B0;&#x9709;&#x7D20; (&#x65B0;) &#x62B5;&#x6297;&#x5361;&#x5E26;&#x3002;&#x57FA;&#x56E0;&#x7A81;&#x53D8;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6742;&#x5408;&#x6027;&#x4EA4;&#x53C9;&#x80B2;&#x79CD;&#x53D6;&#x5F97;&#x4E86;&#x9884;&#x671F;&#x7684;&#x5B5F;&#x5FB7;&#x5C14;&#x6BD4;&#x7387;&#x3002;&#x6000;&#x5B55;&#x5408;&#x5B50;&#x5973;&#x6027;&#x8868;&#x793A;&#x5185;&#x8715;&#x819C;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x5185;&#x6E90;&#x6027; Dprp mRNA &#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x8868;&#x8FBE;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;Dprp null &#x5408;&#x5B50;&#x7A81;&#x53D8;&#x7537;&#x6027;&#x548C;&#x5973;&#x6027;&#x5C0F;&#x9F20;&#x662F;&#x53EF;&#x884C;&#x3001; &#x5C55;&#x51FA;&#x6B63;&#x5E38;&#x751F;&#x957F;&#x53D1;&#x80B2;&#x7387;&#xFF0C;&#x662F;&#x80A5;&#x6C83;&#x548C;&#x751F;&#x4EA7;&#x6B63;&#x5E38;&#x7684;&#x51CB;&#x843D;&#x7269;&#x5927;&#x5C0F;&#x3002;&#x7A81;&#x51FA;&#x8868;&#x578B;&#x6709;&#x4EBA;&#x6000;&#x5B55; Dprp null &#x5C0F;&#x9F20;&#x53D7;&#x5230;&#x751F;&#x7406;&#x5E94;&#x6FC0;&#x3002;DPRP &#x865A;&#x5E72;&#x6270;&#x598A;&#x5A20;&#x4F9D;&#x8D56;&#x9002;&#x5E94;&#x7F3A;&#x6C27;&#x5BFC;&#x81F4;&#x598A;&#x5A20;&#x5931;&#x8D25;&#x3002;&#x7EC8;&#x6B62;&#x598A;&#x5A20;&#x662F;&#x5173;&#x8054; mesometrial &#x8715;&#x819C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3001; mesometrial &#x8840;&#x7BA1;&#x5B8C;&#x6574;&#x6027;&#x548C;&#x4E2D;&#x65AD;&#xFF0C;&#x80DA;&#x7ED2;&#x6BDB;&#x5C3F;&#x56CA;&#x819C;&#x80CE;&#x76D8;&#x5F62;&#x6001;&#x53D1;&#x751F;&#x7578;&#x53D8;&#x3002;&#x610F;&#x89C1;&#x8868;&#x660E; DPRP &#x53C2;&#x4E0E;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x598A;&#x5A20;&#x7684;&#x751F;&#x7406;&#x5E94;&#x6FC0;&#x7684;&#x9002;&#x5E94;&#x3002;

&#x5B50;&#x5BAB;&#x8715;&#x819C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x53EF;&#x786E;&#x4FDD;&#x598A;&#x5A20;&#x4F9D;&#x8D56;&#x9002;&#x5E94;&#x751F;&#x7406;&#x5E94;&#x6FC0;&#x3002;

In the mouse, decidual cells differentiate from uterine stromal cells in response to steroid hormones and signals arising from the embryo. Decidual cells are crucially involved in creating the intrauterine environment conducive to embryonic development. Among their many functions is the production of cytokines related to prolactin (PRL), including decidual prolactin-related protein (DPRP). DPRP is a heparin-binding cytokine, which is abundantly expressed in uterine decidua. In this investigation, we have isolated the mouse Dprp gene, characterized its structure and evaluated its biological role. Dprp-null mice were made by replacing exons 2 to 6 of the Dprp gene with an in-frame enhanced green fluorescent protein (EGFP) gene and a neomycin (neo) resistance cassette. Heterozygous intercross breeding of the mutant mice yielded the expected mendelian ratio. Pregnant heterozygote females expressed EGFP within decidual tissue in locations identical to endogenous Dprp mRNA and protein expression. Homozygous Dprp-null mutant male and female mice were viable, exhibited normal postnatal growth rates, were fertile and produced normal litter sizes. A prominent phenotype was observed when pregnant Dprp-null mice were exposed to a physiological stressor. DPRP deficiency interfered with pregnancy-dependent adaptations to hypoxia resulting in pregnancy failure. Termination of pregnancy was associated with aberrations in mesometrial decidual cells, mesometrial vascular integrity, and disruptions in chorioallantoic placenta morphogenesis. The observations suggest that DPRP participates in pregnancy-dependent adaptations to a physiological stressor.

A uterine decidual cell cytokine ensures pregnancy-dependent adaptations to a physiological stressor.

In der Maus unterscheiden decidual Zellen von uterine stromal Zellen als Reaktion auf Steroidhormone und Signale aus dem Embryo. Decidual Zellen sind entscheidend f&uuml;r die Schaffung der intrauterinen Umwelt, Embryonalentwicklung beteiligt. Unter ihren vielen Funktionen ist die Produktion von Zytokinen mit Bezug zu Prolaktin (PRL), einschlie&szlig;lich decidual Prolaktin-related Protein (DPRP). DPRP ist eine Heparin-Bindung-Cytokine, die reichlich in uterinen Decidua ausgedr&uuml;ckt wird. Bei dieser Untersuchung haben wir isoliert von Maus Dprp gen, charakterisiert seine Struktur und seine biologische Funktion ausgewertet. DprP-Null M&auml;use wurden durch Exon 2 bis 6 des Gens Dprp durch ein Gen in Frame verbesserte gr&uuml;n fluoreszierendes Protein (EGFP) und Neomycin (Neo) Widerstand Kassette zu ersetzen. Heterozygote intercross Zucht der Mutante M&auml;use hat das erwartete Mendel&#39;sche Verh&auml;ltnis ergeben. Schwangere heterozygoten Frauen, EGFP in decidual Gewebe an Standorten identisch mit endogenen Dprp mRNA und Protein-Ausdruck zum Ausdruck gebracht. Homozygote Dprp-Null mutant m&auml;nnliche und weibliche M&auml;use waren brauchbare, ausgestellten normale postnatale Wachstumsraten, waren fruchtbar und produzierten normalen Wurf Gr&ouml;&szlig;en. Ein prominenter Ph&auml;notyp wurde beobachtet, wenn schwangere Dprp-Null-M&auml;use eine physiologische Stressor ausgesetzt waren. DPRP Mangel mischte sich mit Schwangerschaft-abh&auml;ngigen Anpassungen an Hypoxie aufgrund Schwangerschaft scheitern. Der Schwangerschaftsabbruch war verbunden mit Aberrationen in Mesometrial decidual Zellen, Mesometrial vaskul&auml;re Integrit&auml;t und St&ouml;rungen im chorioallantoic Plazenta Morphogenese. Die Beobachtungen legen nahe, dass Schwangerschaft-abh&auml;ngigen Anpassungen an eine physiologische Stressor DPRP beteiligt.

Eine uterine decidual Zelle Cytokine sorgt f&uuml;r Schwangerschaft-abh&auml;ngigen Anpassungen an eine physiologische Stressor.

Nel topo, le cellule deciduali differenziano da cellule stromali uterine in risposta a segnali derivanti dall&#39;embrione e ormoni steroidei. Cellule deciduali sono fondamentalmente coinvolti nella creazione dell&#39;ambiente intrauterino favorevole allo sviluppo embrionale. Tra le molte funzioni &egrave; la produzione di citochine correlate alla prolattina (PRL), tra cui deciduali prolattina-related protein (DPRP). DPRP &egrave; una citochina eparina-associazione, che &egrave; abbondantemente espresso nella decidua uterina. In questa indagine, abbiamo isolato il gene Dprp mouse, caratterizza la sua struttura e valutato il suo ruolo biologico. Null Dprp topi sono state fatte da esoni 2 a 6 del gene Dprp la sostituzione con un gene in telaio migliorato green fluorescent protein (EGFP) e una cassetta di resistenza neomicina (neo). Eterozigote intercross allevamento dei topi mutanti ha reso l&#39;atteso rapporto mendeliana. Femmine eterozigoti incinta espresso EGFP all&#39;interno di tessuti deciduali in localit&agrave; identica all&#39;espressione di mRNA e proteina Dprp endogeno. Omozigoti Dprp null mutanti topi maschi e femmine erano tassi di crescita postnatale normale vitali, esposte, dimensioni lettiera normale fertile e prodotto. Un fenotipo prominente &egrave; stato osservato quando incinti topi Dprp-null sono stati esposti a un fattore di stress fisiologico. Deficit di DPRP interferito con la gravidanza-dipendente adattamenti all&#39;ipossia con conseguente insufficienza di gravidanza. Interruzione della gravidanza &egrave; stato associato con aberrazioni in cellule deciduali mesometrial, mesometrial l&#39;integrit&agrave; vascolare e interruzioni nella morfogenesi chorioallantoic placenta. Le osservazioni suggeriscono che DPRP partecipa adattamenti dipendente dalla gravidanza per un fattore di stress fisiologico.

Una citochina delle cellule deciduali uterine garantisce adattamenti dipendente dalla gravidanza per un fattore di stress fisiologico.

&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x5B50;&#x5BAE;&#x9593;&#x8CEA;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30B9;&#x30C6;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9; &#x30DB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30F3;&#x3068;&#x80DA;&#x304B;&#x3089;&#x751F;&#x3058;&#x308B;&#x4FE1;&#x53F7;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3057;&#x3066;&#x304B;&#x3089;&#x8131;&#x843D;&#x819C;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x533A;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8131;&#x843D;&#x819C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x7684;&#x5B50;&#x5BAE;&#x5185;&#x74B0;&#x5883;&#x3092;&#x52A9;&#x9577;&#x3059;&#x308B;&#x80DA;&#x306E;&#x4F5C;&#x6210;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x9593;&#x3067;&#x8131;&#x843D;&#x819C;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x95A2;&#x9023;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; (DPRP) &#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x95A2;&#x9023;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3; (PRL) &#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x751F;&#x7523;&#x3067;&#x3059;&#x3002;DPRP &#x5B50;&#x5BAE;&#x8131;&#x843D;&#x819C;&#x3067;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x8C4A;&#x304B;&#x306A;&#x30D8;&#x30D1;&#x30EA;&#x30F3;&#x7D50;&#x5408;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9; Dprp &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x5206;&#x96E2;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x3068;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7684;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;Dprp null &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9; &#x30D5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30E0;&#x3067;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7DD1;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA; (EGFP) &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3068;&#x30CD;&#x30AA;&#x30DE;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3; &#xFF08;&#x30CD;&#x30AA;&#xFF09; &#x62B5;&#x6297;&#x30AB;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8; 2 &#x306B; 6 Dprp &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30A8;&#x30AF;&#x30BD;&#x30F3;&#x3092;&#x7F6E;&#x304D;&#x63DB;&#x3048;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4F5C;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5909;&#x7570;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x30D8;&#x30C6;&#x30ED; &#x30A4;&#x30F3;&#x30BF;&#x30FC; &#x30AF;&#x30ED;&#x30B9;&#x7E41;&#x6B96;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C7;&#x30EB;&#x306E;&#x4E88;&#x60F3;&#x6BD4;&#x304C;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x598A;&#x5A20;&#x4E2D;&#x306E;&#x30D8;&#x30C6;&#x30ED;&#x5973;&#x6027; EGFP &#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x306E; Dprp mRNA &#x3068;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x540C;&#x4E00;&#x306E;&#x5834;&#x6240;&#x3067;&#x8131;&#x843D;&#x819C;&#x7D44;&#x7E54;&#x5185;&#x306B;&#x8868;&#x73FE;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30DB;&#x30E2; Dprp null &#x306E;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x96CC;&#x96C4;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x5B9F;&#x884C;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x5C55;&#x793A;&#x901A;&#x5E38;&#x751F;&#x5F8C;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x7387;&#x3001;&#x80A5;&#x6C83;&#x306A;&#x751F;&#x7523;&#x306E;&#x6B63;&#x5E38;&#x304F;&#x305A;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8457;&#x540D;&#x306A;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306F;&#x598A;&#x5A20; Dprp null &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x751F;&#x7406;&#x7684;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x306B;&#x3055;&#x3089;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x306B;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;DPRP &#x6B20;&#x4E4F;&#x3067;&#x598A;&#x5A20;&#x969C;&#x5BB3;&#x3092;&#x751F;&#x3058;&#x308B;&#x4F4E;&#x9178;&#x7D20;&#x75C7;&#x598A;&#x5A20;&#x4F9D;&#x5B58;&#x9069;&#x5FDC;&#x5E72;&#x6E09;&#x3002;&#x598A;&#x5A20;&#x306E;&#x7D42;&#x4E86; mesometrial &#x8131;&#x843D;&#x819C;&#x7D30;&#x80DE;&#x3001;mesometrial &#x8840;&#x7BA1;&#x306E;&#x6574;&#x5408;&#x6027;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6F3F;&#x5C3F;&#x306E;&#x80CE;&#x76E4;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6DF7;&#x4E71;&#x306E;&#x53CE;&#x5DEE;&#x3092;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x89B3;&#x6E2C; DPRP &#x598A;&#x5A20;&#x4F9D;&#x5B58;&#x9069;&#x5FDC;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC;&#x3067;&#x53C2;&#x52A0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x5B50;&#x5BAE;&#x306E;&#x8131;&#x843D;&#x819C;&#x7D30;&#x80DE;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x598A;&#x5A20;&#x4F9D;&#x5B58;&#x9069;&#x5FDC;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30C3;&#x30B5;&#x30FC;&#x3092;&#x4FDD;&#x8A3C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;, decidual &#xC140; &#xC2A4;&#xD14C;&#xB85C;&#xC774;&#xB4DC; &#xD638;&#xB974;&#xBAAC; &#xBC0F; &#xD0DC;&#xC544;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC790; &#xAD81; stromal &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;. Decidual &#xC140; &#xC790;&#xAD81;&#xB0B4; &#xD658;&#xACBD;&#xC744; &#xBC30;&#xC544; &#xBC1C;&#xB2EC;&#xC5D0; &#xB3C4;&#xC6C0;&#xC774; &#xB9CC;&#xB4DC;&#xB294; &#xACB0;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xAD00;&#xB828; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xB9CE;&#xC740; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC911; cytokines prolactin (PRL)&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; decidual prolactin &#xAD00;&#xB828; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (DPRP) &#xB4F1;&#xC758; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC774; &#xC774;&#xB2E4;. DPRP &#xC790; &#xAD81; decidua&#xC5D0; &#xD48D;&#xBD80; &#xD558; &#xAC8C; &#xD45C;&#xD604; &#xB41C; &#xD5E4; &#xD30C; &#xB9B0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; cytokine&#xC740;. &#xC774; &#xC870;&#xC0AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; Dprp &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xBD84;&#xB9AC;, &#xAD6C;&#xC870; &#xD2B9;&#xC9D5; &#xC788;&#xACE0; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD3C9;&#xAC00;. Dprp null &#xC950; &#xD504;&#xB808;&#xC784;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xB179;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (EGFP) &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC640; &#xB124;&#xC624; &#xB9C8;&#xC774; &#xC2E0; (neo) &#xC800;&#xD56D; &#xCE74;&#xC138;&#xD2B8; exons 2-6/Dprp &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xB300;&#xCCB4; &#xD558; &#xC5EC; &#xB9CC;&#xB4E4;&#xC5B4;&#xC84C;&#xB2E4;. &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC0DD;&#xC950;&#xC758; heterozygous intercross &#xBC88; &#xC2DD; &#xC608;&#xC0C1;&#xB41C; &#xBA58;&#xB378;&#xC758; &#xBE44;&#xC728; &#xB098;&#xC654;&#xACE0;. &#xC784;&#xC2E0; heterozygote &#xC5EC;&#xC131; &#xC0DD; Dprp Mrna&#xC640; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC2DD; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xC704;&#xCE58;&#xC5D0;&#xC11C; decidual &#xC870;&#xC9C1; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; EGFP&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C8;&#xB2E4;. Homozygous null&#xC774; Dprp &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xB0A8;&#xC131; &#xBC0F; &#xC5EC;&#xC131; &#xC950; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C;, &#xC804;&#xC2DC; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xCD9C;&#xC0DD; &#xD6C4; &#xC131;&#xC7A5; &#xC18D;&#xB3C4;, &#xBE44;&#xC625;&#xD55C; &#xD558; &#xACE0; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xC77C;&#xBC18; &#xC4F0;&#xB808;&#xAE30; &#xD06C;&#xAE30; &#xC600; &#xACE0;. &#xB208;&#xC5D0; &#xB744;&#xB294; &#xD615; &#xC784;&#xC2E0; Dprp null &#xC950; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C; &#xB41C; &#xB54C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. DPRP &#xACB0;&#xD54D; hypoxia &#xC784;&#xC2E0; &#xC2E4;&#xD328;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC;&#xB97C; &#xC784;&#xC2E0; &#xC885;&#xC18D; &#xC801;&#xC751; &#xBC29;&#xD574;. &#xC784;&#xC2E0; &#xC911; mesometrial decidual &#xC140;, mesometrial &#xD608;&#xAD00; &#xBB34;&#xACB0;&#xC131; &#xBC0F; chorioallantoic &#xD0DC; &#xBC18; morphogenesis &#xC911;&#xB2E8;&#xC5D0; &#xCC29;&#xC624;&#xC640; &#xC5F0;&#xAD00; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xAD00;&#xCE21; DPRP &#xC784;&#xC2E0; &#xC885;&#xC18D; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xB97C; &#xAC01; &#xC0C9; &#xD55C;&#xC5D0; &#xCC38;&#xC5EC; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Decidual &#xC790; &#xAD81; &#xC138;&#xD3EC; cytokine &#xC784;&#xC2E0; &#xC885;&#xC18D; &#xC801;&#xC751; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC7A5;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

En el rat&oacute;n, c&eacute;lulas decidual diferencian en c&eacute;lulas del estroma uterinas en respuesta a las hormonas esteroides y se&ntilde;ales derivadas del embri&oacute;n. C&eacute;lulas decidual crucial participan en crear el ambiente intrauterino conducente al desarrollo embrionario. Entre sus muchas funciones es la producci&oacute;n de citocinas relacionadas con la prolactina (PRL), incluyendo la prote&iacute;na relacionada con la prolactina decidual (DPRP). DPRP es una citoquina de heparina, que se expresa abundantemente en la decidua uterina. En esta investigaci&oacute;n, hemos aislado el gen de rat&oacute;n Dprp, caracteriza su estructura y evalu&oacute; su funci&oacute;n biol&oacute;gica. DPRP nulo ratones se hicieron mediante la sustituci&oacute;n de los exones 2 a 6 del gen Dprp con un gen de la prote&iacute;na fluorescente verde mejorada en-marco (EGFP) y una cinta de resistencia de neomicina (neo). Cr&iacute;a intercross heterozig&oacute;tica de los ratones mutantes rindi&oacute; la proporci&oacute;n mendeliana esperada. Las hembras embarazadas heterocigoto expresan EGFP dentro de tejido decidual en lugares id&eacute;nticos a end&oacute;gena Dprp expresi&oacute;n de mRNA y prote&iacute;na. Homocig&oacute;ticos Dprp nulo masculinos y femeninos ratones mutantes fueron las tasas de crecimiento postnatal normal viable, expuestas, tama&ntilde;os de camada normales f&eacute;rtiles y producido. Un fenotipo prominente observ&oacute; cuando embarazadas ratones Dprp nulo fueron expuestos a un factor estresante fisiol&oacute;gico. Deficiencia DPRP interfiri&oacute; con adaptaciones de embarazo-dependiente a la hipoxia, dando por resultado falta de embarazo. La interrupci&oacute;n del embarazo se asoci&oacute; con aberraciones en c&eacute;lulas decidual mesometrial, integridad vascular mesometrial y perturbaciones en la morfog&eacute;nesis de placenta corioalantoideas. Las observaciones sugieren que DPRP participa en adaptaciones de embarazo-dependiente a un factor estresante fisiol&oacute;gico.

Una citoquina uterina celular decidual asegura adaptaciones de embarazo-dependiente a un factor estresante fisiol&oacute;gico.

&#x5728;&#x8BB8;&#x591A;&#x7269;&#x79CD;&#x5728;&#x518D;&#x751F;&#x671F;&#x95F4; Hox &#x57FA;&#x56E0;&#x662F; re-expressed&#x3002;&#x9274;&#x4E8E;&#x673A;&#x6784;&#x8BA1;&#x5212;&#x53D1;&#x5C55;&#x53D1;&#x6325;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5B83;&#x5047;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x76F4;&#x63A5;&#x663E;&#x793A;&#xFF0C;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x5728;&#x518D;&#x751F;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x804C;&#x80FD;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x5728;&#x672C;&#x6587;&#x4E2D;&#x6211;&#x4EEC;&#x5927;&#x5E45;&#x5EA6;&#x964D;&#x4F4E;&#x518D;&#x751F;&#x4EA7;&#x7269;&#x7684;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x5C3E;&#x9CCD;&#x518D;&#x751F;&#x7ED3;&#x679C;&#x7684;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x663E;&#x793A;&#x8BE5; morpholino &#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x7EC4;&#x5408;&#x5F0F;&#x7684; Hoxc13a &#x6216; Hoxc13b&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A; knockdowns &#x662F;&#x76F4;&#x63A5;&#x53D7;&#x5F71;&#x54CD;&#x5185; blastema &#x7EC6;&#x80DE;&#x589E;&#x6B96;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x80A2;&#x4F53;&#x5F62;&#x6210;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7684;&#x591A;&#x4E2A; Hox &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x72EC;&#x7279;&#x529F;&#x80FD;&#x6F14;&#x793A;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A; Hoxc13 orthologs &#x6709;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x804C;&#x80FD;&#x4E2D;&#x518D;&#x751F;&#x3002;

&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A; Hoxc13 orthologs &#x662F;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x7684;&#x5C3E;&#x9CCD;&#x518D;&#x751F;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;

Hox genes are re-expressed during regeneration in many species. Given their important role in body plan development, it has been assumed, but not directly shown, that they play a functional role in regeneration. In this paper we show that morpholino-mediated knockdown of either Hoxc13a or Hoxc13b during the process of zebrafish tail fin regeneration results in a significant reduction of regenerative outgrowth. Furthermore, cellular proliferation within the blastema is directly affected in both knockdowns. Hence, similar to the demonstration of unique functions of multiple Hox genes during limb formation, both Hoxc13 orthologs have distinct functions in regeneration.

Both Hoxc13 orthologs are functionally important for zebrafish tail fin regeneration.

Les g&#xE8;nes Hox sont r&#xE9;-exprim&#xE9;es au cours de la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration de nombreuses esp&#xE8;ces. Compte tenu de leur r&#xF4;le important dans l&#x26;#39;&#xE9;laboration du plan du corps, il a &#xE9;t&#xE9; suppos&#xE9;, mais pas directement montr&#xE9;, qu&#x26;#39;ils jouent un r&#xF4;le fonctionnel dans la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration. Dans cet article, nous montrons que morpholino-m&#xE9;diation knockdown soit Hoxc13a ou Hoxc13b pendant le processus de r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration des r&#xE9;sultats de la queue de poisson z&#xE8;bre communs dans une r&#xE9;duction significative de l&#x26;#39;excroissance de r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration. En outre, la prolif&#xE9;ration cellulaire dans le blast&#xE8;me est directement touch&#xE9; dans les deux passes rabattues. Par cons&#xE9;quent, semblable &#xE0; la d&#xE9;monstration des fonctions uniques de g&#xE8;nes Hox au cours de la formation des membres de plusieurs, &#xE0; la fois Hoxc13 orthologues ont des fonctions distinctes dans la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration.

Les deux Hoxc13 Orthologues un r&#xF4;le fonctionnel important pour le poisson z&#xE8;bre Queue de r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration Fin

Hox-Gene sind w&auml;hrend der Regenerierung bei zahlreichen Arten re-expressed. Angesichts ihrer wichtigen Rolle in Aufbauentwicklung Plan, es wurde angenommen, aber nicht direkt gezeigt, das sie spielen eine funktionale Rolle bei Regeneration. In diesem Beitrag zeigen wir, dass Morpholino-vermittelte Niederschlag von Hoxc13a oder Hoxc13b w&auml;hrend des Prozesses der Zebrafisch Schwanzflosse Regenerierung Ergebnisse in eine signifikante Reduktion der regenerativen Auswuchs. Dar&uuml;ber hinaus ist zellulare Verbreitung innerhalb der Blastem direkt in beide Niederschl&auml;ge Ringrichter betroffen. Daher haben &auml;hnlich wie die Demonstration von einzigartigen Funktionen mehrere Hox-Gene bei Gliedma&szlig;en Bildung, beide Hoxc13 Orthologen verschiedene Funktionen bei Regeneration.

Beide Hoxc13 Orthologen sind funktionell wichtig f&uuml;r Zebrafisch Schwanzflosse Regeneration.

I geni Hox sono riespresse durante la rigenerazione in molte specie. Dato il loro importante ruolo nel piano di sviluppo di corpo, &egrave; stato assunto, ma non direttamente indicato, che svolgono un ruolo funzionale nella rigenerazione. In questo articolo mostriamo quello mediato oligonucleotides atterramento di Hoxc13a o di Hoxc13b durante il processo di zebrafish pinna caudale risultati di rigenerazione in una significativa riduzione di escrescenza rigenerativa. Inoltre, proliferazione cellulare entro il blastema &egrave; direttamente influenzata in entrambe atterramento. Quindi, simile alla dimostrazione delle funzioni uniche di molteplici geni Hox durante la formazione degli arti, entrambi orthologs Hoxc13 hanno funzioni distinte in rigenerazione.

Entrambi orthologs Hoxc13 sono funzionalmente importanti per la rigenerazione di zebrafish pinna caudale.

Hox&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x7A2E;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x4E2D;&#x306B;&#x518D;&#x8868;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30DC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30D7;&#x30E9;&#x30F3;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5F7C;&#x3089;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x5F7C;&#x3089;&#x304C;&#x518D;&#x751F;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x3001;&#x4EEE;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x76F4;&#x63A5;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7A3F;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x518D;&#x751F;&#x4F38;&#x9577;&#x306E;&#x5927;&#x5E45;&#x306A;&#x524A;&#x6E1B;&#x306B;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x5C3E;&#x30D2;&#x30EC;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x7D50;&#x679C;&#x306E;&#x51E6;&#x7406;&#x4E2D;&#x306B;Hoxc13a&#x307E;&#x305F;&#x306F;Hoxc13b&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x306E;&#x305D;&#x306E;&#x30E2;&#x30EB;&#x30DB;&#x30EA;&#x30CE;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x82BD;&#x5185;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x306F;&#x3001;&#x76F4;&#x63A5;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x56DB;&#x80A2;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x4E2D;&#x306B;&#x8907;&#x200B;&#x200B;&#x6570;&#x306E;Hox&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF;&#x306A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x30C7;&#x30E2;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x3001;Hoxc13&#x30AA;&#x30EB;&#x30BD;&#x30ED;&#x30B0;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x304C;&#x518D;&#x751F;&#x3067;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x6A5F;&#x80FD;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x4E21;&#x65B9;Hoxc13&#x30AA;&#x30EB;&#x30BD;&#x30ED;&#x30B0;&#x306F;&#x3001;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x30C6;&#x30FC;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A3;&#x30F3;&#x518D;&#x751F;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3059;

Hox &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB294; &#xB9CE;&#xC740; &#xC885;&#xC5D0; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; re-expressed. &#xBAB8; &#xACC4;&#xD68D; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xAC10;&#xC548;&#xD560; &#xB54C;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC9C1;&#xC811; &#xD45C;&#xC2DC;, &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xC911;&#xC0DD;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC2E0;&#xBB38;&#xC5D0; zebrafish &#xAF2C;&#xB9AC; &#xC9C0; &#xB290; &#xB7EC; &#xBBF8; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xACB0;&#xACFC;: &#xC7AC;&#xC0DD; &#xD30C;&#xC0DD;&#xBB3C;&#xC758; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xAC10;&#xC18C;&#xC758; &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C; Hoxc13a &#xB610;&#xB294; Hoxc13b morpholino &#xC911;&#xC7AC; &#xCD5C;&#xC800;&#xC758; &#xADF8;&#xB97C; &#xC0B4;&#xD3B4;&#xBCF4;&#xACA0;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xB450; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;&#xC5D0;&#xB294; blastema &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC99D;&#xC2DD;&#xC744; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC9C1;&#xC811;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xB2E4;&#xB9AC;&#xB97C; &#xD615;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC5EC;&#xB7EC; Hox &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xACE0;&#xC720; &#xAE30;&#xB2A5; &#xB370;&#xBAA8;&#xC640; &#xB9C8;&#xCC2C;&#xAC00;&#xC9C0;&#xB85C; &#xB450; Hoxc13 orthologs &#xACE0;&#xC720;&#xD55C; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC5D0;.

Hoxc13 orthologs &#xB450; zebrafish &#xAF2C;&#xB9AC; &#xC9C0; &#xB290; &#xB7EC; &#xBBF8; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC911;&#xC694; &#xD558;&#xB2E4;.

Los genes Hox se re-expresadas durante la regeneraci&#xF3;n de muchas especies. Dado su importante papel en el desarrollo del cuerpo del plan, se ha asumido, pero no se muestra directamente, que desempe&#xF1;an un papel funcional en la regeneraci&#xF3;n. En este trabajo se muestra que morpholino mediada por ca&#xED;da de cualquiera de las Hoxc13a Hoxc13b o durante el proceso de regeneraci&#xF3;n de la cola de pez cebra resultados de aleta en una reducci&#xF3;n significativa de la consecuencia regenerativa. Por otra parte, la proliferaci&#xF3;n celular en el blastema se ve directamente afectado tanto en ca&#xED;das. Por lo tanto, similar a la demostraci&#xF3;n de las funciones &#xFA;nicas de m&#xFA;ltiples genes Hox durante la formaci&#xF3;n de las extremidades, tanto Hoxc13 orthologs tienen funciones distintas en la regeneraci&#xF3;n.

Tanto Hoxc13 Orthologs son funcionalmente importantes para el pez cebra Aleta de cola de regeneraci&#xF3;n

Hox &#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x540C;&#x6E90;&#x76D2;&#x57FA;&#x56E0; C13 &#x4E4B;&#x95F4; (Hoxc13) &#x5DF2;&#x88AB;&#x8BC1;&#x660E;&#x662F;&#x5FC5;&#x4E0D;&#x53EF;&#x5C11;&#x7684;&#x9002;&#x5F53;&#x7684;&#x5934;&#x53D1;&#x8F74;&#x5206;&#x5316;&#xFF0C;&#x5982; Hoxc13 &#x57FA;&#x56E0;&#x9776;&#x5411; &#xFF08;Hoxc13(tm1Mrc)) &#x5C0F;&#x9F20;&#x5B8C;&#x5168;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x5916;&#x90E8;&#x7684;&#x5934;&#x53D1;&#x3002;&#x7531;&#x4E8E;&#x975E;&#x51E1;&#x516C;&#x5F00;&#x8868;&#x578B;&#x5E73;&#x884C;&#x7684; Foxn1(nu) (&#x88F8;) &#x57FA;&#x56E0;&#x7A81;&#x53D8;&#x5C0F;&#x9F20;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BBE;&#x6CD5;&#x786E;&#x5B9A;&#x662F;&#x5426; Hoxc13 &#x548C; forkhead &#x6846; N1 &#xFF08;Foxn1&#xFF09; &#x53EF;&#x80FD;&#x4F1A;&#x884C;&#x4E8B;&#x7684;&#x6BDB;&#x56CA; &#xFF08;HF&#xFF09; &#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x5171;&#x540C;&#x9014;&#x5F84;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x7684; Hoxc13(tm1Mrc) &#x548C; Foxn1(nu) &#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6240;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x7684;&#x8131;&#x53D1;&#x662F;&#x5934;&#x53D1;&#x8F74;&#x5206;&#x5316;&#x60CA;&#x4EBA;&#x5730;&#x76F8;&#x4F3C;&#x7F3A;&#x9677;&#x548C;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x60A3;&#x91CD;&#x75C7;&#x6307;&#x7532;&#x8425;&#x517B;&#x4E0D;&#x826F;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8868;&#x578B;&#x7684;&#x76F8;&#x4F3C;&#x4E4B;&#x5904;&#x90FD;&#x7B26;&#x5408; Hoxc13 &#x548C; Foxn1 &#x8868;&#x8FBE;&#x6A21;&#x5F0F;&#x4E2D;&#x9AD8;&#x9891;&#x548C;&#x9489;&#x77E9;&#x9635;&#x4E4B;&#x95F4;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x91CD;&#x53E0;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x4ECE; Hoxc13(tm1Mrc) &#x5C0F;&#x9F20;&#x76AE;&#x80A4;&#x7684; DNA &#x82AF;&#x7247;&#x5206;&#x6790;&#x786E;&#x5B9A; Foxn1 &#x4E3A;&#x663E;&#x8457;&#x4EE5;&#x53CA;&#x65E0;&#x6570;&#x5934;&#x53D1;&#x89D2;&#x86CB;&#x767D;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x7F16;&#x7801;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x901A;&#x8FC7;&#x8054;&#x5408;&#x8F6C;&#x67D3;&#x548C;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x6C89;&#x6DC0; &#xFF08;&#x82AF;&#x7247;&#xFF09; &#x68C0;&#x6D4B;&#x83B7;&#x5F97;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x6240;&#x793A;&#x6B64; Foxn1 &#x4E0B;&#x8C03;&#x660E;&#x663E;&#x53CD;&#x6620;&#x4E86;&#x901A;&#x8FC7; HOXC13 &#x76F4;&#x63A5;&#x8F6C;&#x5F55;&#x8C03;&#x63A7;&#x7684;&#x635F;&#x5931;&#x3002;&#x5728;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x4E2D;&#x63D0;&#x51FA;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x652F;&#x6301;&#x76D1;&#x7BA1;&#x6A21;&#x5F0F;&#x7684;&#x89D2;&#x8D28;&#x5F62;&#x6210;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x4E2D;&#x54EA;&#x4E9B;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E; HOXC13 &#x7684; Foxn1 &#x7684;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x662F;&#x76D1;&#x7BA1;&#x7684;&#x68AF;&#x7EA7;&#x63A7;&#x5236;&#x7EC8;&#x7AEF;&#x5206;&#x5316;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x7684;&#x4E00;&#x90E8;&#x5206;&#x3002;

&#x88F8;&#x4F53;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x57FA;&#x56E0; Foxn1 &#x5728;&#x6BDB;&#x56CA;&#x548C;&#x9489;&#x5206;&#x5316;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x662F;&#x4E00;&#x4E2A; HOXC13 &#x76D1;&#x7BA1;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;

Among the Hox genes, homeobox C13 (Hoxc13) has been shown to be essential for proper hair shaft differentiation, as Hoxc13 gene-targeted (Hoxc13(tm1Mrc)) mice completely lack external hair. Because of the remarkable overt phenotypic parallels to the Foxn1(nu) (nude) mutant mice, we sought to determine whether Hoxc13 and forkhead box N1 (Foxn1) might act in a common pathway of hair follicle (HF) differentiation. We show that the alopecia exhibited by both the Hoxc13(tm1Mrc) and Foxn1(nu) mice is because of strikingly similar defects in hair shaft differentiation and that both mutants suffer from a severe nail dystrophy. These phenotypic similarities are consistent with the extensive overlap between Hoxc13 and Foxn1 expression patterns in the HF and the nail matrix. Furthermore, DNA microarray analysis of skin from Hoxc13(tm1Mrc) mice identified Foxn1 as significantly downregulated along with numerous hair keratin genes. This Foxn1 downregulation apparently reflects the loss of direct transcriptional control by HOXC13 as indicated by our results obtained through co-transfection and chromatin immunoprecipitation (ChIP) assays. As presented in the discussion, these data support a regulatory model of keratinocyte differentiation in which HOXC13-dependent activation of Foxn1 is part of a regulatory cascade controlling the expression of terminal differentiation markers.

The nude mutant gene Foxn1 is a HOXC13 regulatory target during hair follicle and nail differentiation.

Parmi les g&egrave;nes Hox, bo&icirc;te hom&eacute;otique C13 (Hoxc13) s&#39;est av&eacute;r&eacute; &ecirc;tre essentielle pour la diff&eacute;renciation des cheveux bon arbre, comme Hoxc13 g&egrave;ne cibl&eacute; (Hoxc13(tm1Mrc)) souris manquent compl&egrave;tement cheveux externe. En raison des parall&egrave;les remarquables manifestes ph&eacute;notypiques aux souris mutantes Foxn1(nu) (nues), nous avons cherch&eacute; &agrave; d&eacute;terminer si les Hoxc13 et forkhead box N1 (Foxn1) pourrait agir dans une voie commune de diff&eacute;renciation du follicule pileux (HF). Nous montrons que l&#39;alop&eacute;cie expos&eacute;e par le Hoxc13(tm1Mrc) et le Foxn1(nu) de souris est en raison de d&eacute;fauts frappante dans la diff&eacute;renciation de cheveux arbre et que les deux mutants souffrent d&#39;une dystrophie des ongles s&eacute;v&egrave;re. Ces similitudes ph&eacute;notypiques sont compatibles avec le large chevauchement entre les profils d&#39;expression Hoxc13 et Foxn1 dans la HF et la matrice de l&#39;ongle. En outre, DNA microarray analysis of peau de souris Hoxc13(tm1Mrc) jug&eacute;es Foxn1 significativement diminu&eacute;e ainsi que de nombreux g&egrave;nes de k&eacute;ratine des cheveux. Cette diminution de l&#39;expression Foxn1 refl&egrave;te apparemment la perte de contr&ocirc;le transcriptionnel direct par HOXC13 comme indiqu&eacute; par nos r&eacute;sultats obtenus par le biais de tests de co-transfection et la chromatine immunopr&eacute;cipitation (ChIP). Tel que pr&eacute;sent&eacute; dans la discussion, ces r&eacute;sultats supportent un mod&egrave;le de r&eacute;gulation de la diff&eacute;renciation des k&eacute;ratinocytes dans laquelle HOXC13-d&eacute;pendante, activation de Foxn1 fait partie d&#39;une cascade de r&eacute;glementation contr&ocirc;lant l&#39;expression des marqueurs de diff&eacute;renciation terminale.

Le g&egrave;ne mutant nue Foxn1 est une cible r&eacute;glementaire HOXC13 pendant le follicule pileux et de la diff&eacute;renciation de l&#39;ongle.

Unter den Hox-Genen, Homeobox C13 (Hoxc13) hat sich erwiesen f&uuml;r richtige Haar Welle Differenzierung, Hoxc13 gen-gezielte (Hoxc13(tm1Mrc)) M&auml;use vollst&auml;ndig fehlen externen Haar. Aufgrund der bemerkenswerten offenen ph&auml;notypischen Parallelen zu der Foxn1(nu) (nude) mutierte M&auml;use wollten wir bestimmen, ob Hoxc13 und Forkhead-Box-N1 (Foxn1) in einen gemeinsamen Weg der Haarfollikel (HF) Differenzierung handeln k&ouml;nnte. Wir zeigen, dass die Alopezie, ausgestellt durch die Hoxc13(tm1Mrc) und die Foxn1(nu) M&auml;use wegen auffallend &auml;hnliche Defekte im Haar Welle Differenzierung und beide Mutanten leiden an einer schweren Nageldystrophie. Diese ph&auml;notypischen &Auml;hnlichkeiten sind konsistent mit den umfangreichen &Uuml;berschneidungen zwischen Hoxc13 und Foxn1 Ausdrucksmuster in die HF und die Nagel-Matrix. Au&szlig;erdem identifiziert DNA-Microarray-Analyse der Haut von Hoxc13(tm1Mrc) M&auml;usen Foxn1 als deutlich Downregulated zusammen mit zahlreichen Haar Keratin Gene. Diese Foxn1-Heraufregulation spiegelt offensichtlich den Verlust der direkten transkriptionelle Kontrolle von HOXC13 durch unsere &uuml;ber Co-transfection und Chromatin Immunopr&auml;zipitation (ChIP)-Assays Ergebnisse angezeigt. Wie Sie in der Diskussion, unterst&uuml;tzen diese Daten eine Regulierungsmodell der Differenzierung der Keratinozyten in welche HOXC13-abh&auml;ngigen Aktivierung des Foxn1 Teil einer regulatorischen Kaskade, die Steuerung des Ausdrucks terminal Differenzierung Marker ist.

Das nackte mutierte Gen Foxn1 ist ein HOXC13-regulatorischen-Ziel w&auml;hrend der Haarfollikel und Nagel-Differenzierung.

Tra i geni Hox, homeobox C13 (Hoxc13) ha dimostrato di essere essenziale per la differenziazione dell&#39;albero dei capelli adeguato, come Hoxc13 gene targeting (Hoxc13(tm1Mrc)) topi completamente privi di capelli esterni. A causa della notevole parallels palese fenotipica di topi mutanti (nudi) Foxn1(nu), abbiamo cercato di determinare se Hoxc13 e forkhead box N1 (Foxn1) potrebbe agire in un percorso comune di differenziazione del follicolo pilifero (HF). Mostriamo che la alopecia esposta dai topi la Hoxc13(tm1Mrc) e la Foxn1(nu) &egrave; a causa di difetti straordinariamente simili nella differenziazione dell&#39;albero dei capelli e che entrambi mutanti soffrono di una distrofia ungueale grave. Queste somiglianze fenotipiche sono coerenti con l&#39;ampia sovrapposizione tra Hoxc13 e Foxn1 pattern di espressione in HF e la matrice dell&#39;unghia. Inoltre, analisi microarray del DNA della pelle da topi Hoxc13(tm1Mrc) identificato Foxn1 come significativamente downregolata insieme a numerosi geni di cheratina dei capelli. Questa downregulation Foxn1 apparentemente riflette la perdita di controllo trascrizionale diretto da HOXC13 come indicato dai nostri risultati ottenuti attraverso analisi di immunoprecipitazione (ChIP) di co-transfection e della cromatina. Come presentato nella discussione, questi dati supportano un modello normativo di differenziazione dei cheratinociti, nel cui HOXC13-dipendente attivazione di Foxn1 &egrave; parte di una cascata di regolamentare l&#39;espressione di marcatori di differenziazione terminale di controllo.

Il gene mutante nudo Foxn1 &egrave; un target normativo HOXC13 durante il follicolo pilifero e la differenziazione del chiodo.

Hox &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3001;&#x30DB;&#x30E1;&#x30AA; &#x30DC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9; C13 &#x9593; (Hoxc13) Hoxc13 &#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x6BDB;&#x30B7;&#x30E3;&#x30D5;&#x30C8;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B; (Hoxc13(tm1Mrc)) &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x5916;&#x90E8;&#x9AEA;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x6B20;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9855;&#x8457;&#x306A;&#x3042;&#x304B;&#x3089;&#x3055;&#x307E;&#x306A;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x5E73;&#x884C;&#x7DDA;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B; Foxn1(nu) &#xFF08;&#x30CC;&#x30FC;&#x30C9;&#xFF09; &#x5909;&#x7570;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3001;Hoxc13 &#x3068;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30AF;&#x30D8;&#x30C3;&#x30C9;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x306E;&#x30DC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E; N1 (Foxn1) &#x6BDB;&#x5305; (HF) &#x5206;&#x5316;&#x306E;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306B;&#x884C;&#x52D5;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x6C42;&#x3081;&#x305F;&#x3002;&#x306B;&#x3088;&#x308B; Hoxc13(tm1Mrc) &#x3068; Foxn1(nu) &#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3092;&#x5C55;&#x793A;&#x8131;&#x6BDB;&#x75C7;&#x6BDB;&#x30B7;&#x30E3;&#x30D5;&#x30C8;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x9A5A;&#x304F;&#x307B;&#x3069;&#x4F3C;&#x3066;&#x6B20;&#x9665;&#x306E;&#x305B;&#x3044;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3068;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x91CD;&#x5EA6;&#x306E;&#x722A;&#x30B8;&#x30B9;&#x30C8;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x306B;&#x82E6;&#x3057;&#x3080;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x306E;&#x985E;&#x4F3C;&#x70B9;&#x306F;&#x3001;HF &#x306E; Hoxc13 &#x3068; Foxn1 &#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3068;&#x722A;&#x884C;&#x5217;&#x306E;&#x5E83;&#x7BC4;&#x306A;&#x91CD;&#x306A;&#x308A;&#x3068;&#x4E00;&#x8CAB;&#x6027;&#x304C;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;DNA &#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED; &#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#x89E3;&#x6790; Hoxc13(tm1Mrc) &#x306E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x76AE;&#x819A;&#x306E; Foxn1 &#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x5927;&#x5E45;&#x306B; downregulated &#x3068;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x6570;&#x3005; &#x306E;&#x9AEA;&#x306E;&#x30B1;&#x30E9;&#x30C1;&#x30F3;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x8B58;&#x5225;&#x3002;&#x3053;&#x306E; Foxn1 &#x306E;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3069;&#x3046;&#x3084;&#x3089;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3068;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x514D;&#x75AB;&#x6C88;&#x964D; (ChIP) &#x8A66;&#x91D1;&#x3092;&#x901A;&#x3057;&#x3066;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x6210;&#x679C;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x306E; HOXC13 &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x76F4;&#x63A5;&#x8EE2;&#x5199;&#x5236;&#x5FA1;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x3092;&#x53CD;&#x6620;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8AAC;&#x660E;&#x3067;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x898F;&#x5236;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB; HOXC13 &#x4F9D;&#x5B58;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316; Foxn1 &#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x898F;&#x5236;&#x306E;&#x30AB;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30C9;&#x306E;&#x4E00;&#x90E8;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x8868;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x5316;&#x306E;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30CC;&#x30FC;&#x30C9;&#x306E;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50; Foxn1 HOXC13 &#x898F;&#x5236;&#x5BFE;&#x8C61;&#x6BDB;&#x3068;&#x722A;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x4E2D;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

Hox &#xC720;&#xC804;&#xC790;, homeobox C13 &#xC911; (Hoxc13) Hoxc13 &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD45C;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD558;&#xB294; &#xB9CC;&#xD07C; &#xC801;&#xB2F9; &#xD55C; &#xBA38;&#xB9AC; &#xC0E4;&#xD504;&#xD2B8; &#xCC28;&#xBCC4; &#xD654;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; (Hoxc13(tm1Mrc)) &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xB294; &#xC644;&#xC804;&#xD788; &#xC678;&#xBD80; &#xBA38;&#xB9AC; &#xBD80;&#xC871; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Foxn1(nu) (&#xB204;&#xB4DC;) &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC950; &#xB180;&#xB77C;&#xC6B4; &#xBA85;&#xBC31;&#xD55C; phenotypic &#xD3C9;&#xD589;&#xC120;, &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xBA38;&#xB9AC;&#xCE74;&#xB77D;&#xC744; &#xBAA8; &#xADFC; (HF) &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;&#xC758; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC5D0; Hoxc13 &#xBC0F; forkhead &#xC0C1;&#xC790; N1 (Foxn1) &#xD589;&#xB3D9; &#xC218;&#xB3C4; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC5EC;&#xBD80;&#xB97C; &#xACB0;&#xC815; &#xD558;&#xACE0;&#xC790; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; Hoxc13(tm1Mrc) &#xBC0F; Foxn1(nu) &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC804;&#xC2DC; &#xD0C8;&#xBAA8; &#xC99D;&#xC740; &#xBA38;&#xB9AC; &#xC0E4;&#xD504;&#xD2B8; &#xBD84;&#xD654;&#xC5D0; &#xAE30; &#xB9C9;&#xD788;&#xAC8C; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xACB0;&#xD568; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xB450; &#xBBA4;&#xD134;&#xD2B8;&#xB294; &#xC2EC;&#xD55C; &#xC190;&#xD1B1; &#xC601;&#xC591; &#xC2E4; &#xC870;&#xB85C; &#xACE0;&#xD1B5;&#xC744; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; phenotypic &#xC720;&#xC0AC;&#xC131;&#xC740; HF&#xC5D0;&#xC11C; hoxc13&#xACFC; Foxn1 &#xC2DD; &#xD328;&#xD134; &#xBC0F; &#xC190;&#xD1B1; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; &#xAC04;&#xC758; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xC911;&#xBCF5;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58; &#xD558;&#xB294;. &#xB610;&#xD55C;, Hoxc13(tm1Mrc) &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD53C;&#xBD80;&#xC758; DNA microarray &#xBD84;&#xC11D; &#xC218;&#xB9CE;&#xC740; &#xBA38;&#xB9AC; &#xAC01; &#xC9C8; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xD06C;&#xAC8C; downregulated Foxn1 &#xC2DD;&#xBCC4;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBD84;&#xBA85;&#xD788;&#xC774; Foxn1 downregulation co-transfection &#xBC0F; chromatin immunoprecipitation (&#xCE69;) &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC5BB;&#xC740; &#xACB0;&#xACFC; &#xC758;&#xD574; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xB300;&#xB85C; hoxc13&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; transcriptional &#xC9C1;&#xD560;&#xC758; &#xC190;&#xC2E4;&#xC744; &#xBC18;&#xC601; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD1A0;&#xB860;&#xC5D0; &#xAC83; &#xCC98;&#xB7FC;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; HOXC13 &#xC885;&#xC18D;&#xC5D0;&#xC11C; foxn1&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB294; &#xADDC;&#xC81C; &#xCE90;&#xC2A4;&#xCF00;&#xC774;&#xB4DC; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xBD84;&#xD654; &#xB9C8;&#xCEE4;&#xC758; &#xC2DD;&#xC758; &#xC77C;&#xBD80; keratinocyte &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;&#xC758; &#xADDC;&#xC81C; &#xBAA8;&#xB378; &#xC9C0;&#xC6D0;.

&#xB204;&#xB4DC; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC720;&#xC804;&#xC790; Foxn1 &#xBA38;&#xB9AC; &#xC5EC; &#xD3EC; &#xBC0F; &#xB124;&#xC77C; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; HOXC13 &#xADDC;&#xC81C; &#xB300;&#xC0C1; &#xC774;&#xB2E4;.

Entre los genes Hox, homeobox C13 (Hoxc13) ha demostrado ser esencial para la diferenciaci&oacute;n de eje de pelo adecuado, ya Hoxc13 gene-dirigidas (Hoxc13(tm1Mrc)) ratones completamente carecen de pelo externo. Debido a los notables abiertos fenot&iacute;picos paralelos a los ratones mutantes (desnudos) Foxn1(nu), intentamos determinar si Hoxc13 y forkhead box N1 (Foxn1) puede actuar en un camino com&uacute;n de diferenciaci&oacute;n del fol&iacute;culo piloso (HF). Mostramos que el exhibido por los ratones de la Hoxc13(tm1Mrc) y la Foxn1(nu) de la alopecia es debido a defectos sorprendentemente similares en la diferenciaci&oacute;n de eje de pelo y que ambos mutantes sufren una distrofia severa del clavo. Estas similitudes fenot&iacute;picas son consistentes con la extensa superposici&oacute;n entre Hoxc13 y Foxn1 patrones de expresi&oacute;n en el HF y la matriz ungueal. Adem&aacute;s, el an&aacute;lisis de microarrays de ADN de la piel de ratones Hoxc13(tm1Mrc) hab&iacute;a identificado Foxn1 como significativamente o junto con numerosos genes de la queratina del pelo. Este Foxn1 downregulation aparentemente refleja la p&eacute;rdida de control transcripcional directo por HOXC13 seg&uacute;n lo indicado por los resultados obtenidos a trav&eacute;s de ensayos de co-transfection y cromatina (ChIP) de inmunoprecipitaci&oacute;n. Tal como se presenta en la discusi&oacute;n, estos datos apoyan un modelo normativo de la diferenciaci&oacute;n de queratinocitos en que HOXC13-dependiente activaci&oacute;n de Foxn1 es parte de una cascada de regulaci&oacute;n control de la expresi&oacute;n de marcadores de diferenciaci&oacute;n terminal.

Alan R. Godwin

Department of Microbiology,
Immunology,
and Pathology,
Department of Microbiology, Immunology, and Pathology

Colorado State University

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Regenerating Adult Zebrafish Tail Fin

Alan R. Godwin

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}Department of Microbiology,Immunology,and Pathology,Department of Microbiology, Immunology, and Pathology

Colorado State University

In vivo Electroporation of Morpholinos into the Regenerating Adult Zebrafish Tail Fin

Department of Microbiology,
Immunology,
and Pathology,
Department of Microbiology, Immunology, and Pathology