<em>Ex utero</em> Electroporation and Whole Hemisphere Explants: A Simple Experimental Method for Studies of Early Cortical Development

Cortical development involves complex interactions between neurons and non-neuronal elements including precursor cells, blood vessels, meninges and ...

SUNY Upstate Medical University

Mutations, toxic insults and radiation exposure are known to slow or arrest the migration of cortical neurons, in most cases by unknown mechanisms. The movement of migrating neurons is saltatory, reflecting the intermittent movement of the nucleus (nucleokinesis) within the confines of the plasma membrane. Each nucleokinetic movement is analogous to a step. Thus, average migration speed could be reduced by lowering step frequency and/or step distance.

Comparison of slow and fast neocortical neuron migration using a new in vitro model.

Les mutations, les agressions toxiques et exposition aux rayonnements sont connus pour ralentir ou arr&ecirc;ter la migration des neurones corticaux, dans la plupart des cas par des m&eacute;canismes inconnus. Le mouvement de migration neurones est saltatoire, refl&eacute;tant le mouvement intermittent du noyau (nucleokinesis) dans les limites de la membrane plasmique. Chaque mouvement de nucleokinetic est analogue &agrave; une &eacute;tape. Ainsi, vitesse moyenne migration pourrait &ecirc;tre r&eacute;duit en diminuant la fr&eacute;quence &eacute;tape et/ou la distance de l&#39;&eacute;tape.

Comparaison de la migration lente et rapide n&eacute;ocorticales neurone en utilisant un nouveau mod&egrave;le in vitro.

Mutazioni, insulti tossici e l&#39;esposizione alle radiazioni sono noti per rallentare o arrestare la migrazione dei neuroni corticali, nella maggior parte dei casi da meccanismi sconosciuti. Il movimento di migrazione dei neuroni &egrave; saltatoria, che riflettono il movimento intermittente del nucleo (nucleokinesis) entro i confini della membrana del plasma. Ogni movimento nucleokinetic &egrave; analogo a un passo. Cos&igrave;, velocit&agrave; media migrazione potrebbe essere ridotto abbassando la frequenza di passo e/o passo di distanza.

Confronto di migrazione neurone lento e veloce neocorticale utilizzando un nuovo modello in vitro.

&#x5DF2;&#x77E5;&#x7A81;&#x53D8;&#x3001; &#x6709;&#x6BD2;&#x7684;&#x4FAE;&#x8FB1;&#x548C;&#x8F90;&#x5C04;&#x7167;&#x5C04;&#x7F13;&#x6162;&#x6216;&#x902E;&#x6355;&#x7684;&#x76AE;&#x5C42;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#xFF0C;&#x5728;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#x7531;&#x672A;&#x77E5;&#x673A;&#x5236;&#x8FC1;&#x79FB;&#x3002;&#x8FC1;&#x79FB;&#x7684;&#x8FD0;&#x52A8;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x662F;&#x8DE8;&#x8D8A;&#x5F0F;&#x7684;&#x53CD;&#x6620;&#x4E86;&#x6838; (nucleokinesis) &#x7684;&#x7B49;&#x79BB;&#x5B50;&#x819C;&#x8303;&#x56F4;&#x5185;&#x7684;&#x95F4;&#x6B47;&#x8FD0;&#x52A8;&#x3002;&#x6BCF;&#x4E2A; nucleokinetic &#x8FD0;&#x52A8;&#x662F;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x8FC8;&#x51FA;&#x7684;&#x4E00;&#x6B65;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x901A;&#x8FC7;&#x964D;&#x4F4E;&#x6B65;&#x9891;&#x548C;/&#x6216;&#x6B65;&#x8DDD;&#x79BB;&#x964D;&#x4F4E;&#x5E73;&#x5747;&#x8FC1;&#x79FB;&#x901F;&#x5EA6;&#x3002;

&#x4F7F;&#x7528;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B0;&#x7684;&#x4F53;&#x5916;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x6162;&#x548C;&#x5FEB;&#x76AE;&#x5C42;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x8FC1;&#x79FB;&#x7684;&#x6BD4;&#x8F83;&#x3002;

&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x3001;&#x6709;&#x6BD2;&#x306A;&#x4FAE;&#x8FB1;&#x3068;&#x653E;&#x5C04;&#x7DDA;&#x88AB;&#x66DD;&#x306F;&#x3001;&#x9045;&#x304F;&#x3057;&#x305F;&#x308A;&#x3001;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306E;&#x5834;&#x5408;&#x4E0D;&#x660E;&#x306A;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x76AE;&#x8CEA;&#x306E;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x79FB;&#x884C;&#x3092;&#x902E;&#x6355;&#x3059;&#x308B;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x79FB;&#x884C;&#x306E;&#x904B;&#x52D5;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x306E;&#x7BC4;&#x56F2;&#x5185;&#x3067;&#x6838; (nucleokinesis) &#x306E;&#x65AD;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x52D5;&#x304D;&#x306A;&#x3069;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x3066;&#x3001;&#x8DF3;&#x8E8D;&#x3002;&#x5404; nucleokinetic &#x306E;&#x52D5;&#x304D;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x306B;&#x4F3C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x5468;&#x6CE2;&#x6570;&#x53CA;&#x3073;/&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x8DDD;&#x96E2;&#x3092;&#x4E0B;&#x3052;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5E73;&#x5747;&#x79FB;&#x884C;&#x901F;&#x5EA6;&#x304C;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x65B0;&#x3057;&#x3044; in vitro &#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x4F4E;&#x901F;&#x3068;&#x9AD8;&#x901F;&#x76AE;&#x8CEA;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x79FB;&#x884C;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3002;

&#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;, &#xB3C5;&#xC131; &#xBAA8;&#xC695;&#xACFC; &#xBC29;&#xC0AC;&#xC120; &#xB178;&#xCD9C; &#xB290;&#xB824;&#xC9C0;&#xAC70;&#xB098; &#xC54C; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB300;&#xB1CC; &#xD53C; &#xC9C8;&#xC758; &#xB274;&#xB7F0;&#xC758; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xCCB4;&#xD3EC; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158;&#xC758; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC2E0;&#xACBD;&#xC740; saltatory, &#xC6D0;&#xD615;&#xC9C8; &#xB9C9;&#xC758; &#xACBD;&#xACC4; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD575; (nucleokinesis)&#xC758; &#xAC04;&#xD5D0;&#xC801;&#xC778; &#xC6C0;&#xC9C1;&#xC784;&#xC744; &#xBC18;&#xC601; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAC01; nucleokinetic &#xBB34;&#xBE0C;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xB294; &#xD55C; &#xB2E8;&#xACC4;&#xB97C; &#xC720;&#xC0AC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xD3C9;&#xADE0; &#xC774;&#xB3D9; &#xC18D;&#xB3C4; &#xB2E8;&#xACC4; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218; &#xBC0F;/&#xB610;&#xB294; &#xB2E8;&#xACC4; &#xAC70;&#xB9AC;&#xB97C; &#xB0AE;&#xCD94;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC10;&#xC18C; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC5C8;&#xB2E4;.

&#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xCCB4; &#xC678; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB290;&#xB9AC;&#xACE0; &#xBE60;&#xB978; neocortical &#xC2E0;&#xACBD; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158;&#xC758; &#xBE44;&#xAD50;.

Mutaciones, insultos t&oacute;xicos y exposici&oacute;n a la radiaci&oacute;n son conocidos para frenar o detener la migraci&oacute;n de neuronas corticales, en la mayor&iacute;a de los casos por mecanismos desconocidos. El movimiento de la migraci&oacute;n de neuronas es saltatoria, reflejando el movimiento intermitente del n&uacute;cleo (nucleokinesis) dentro de los l&iacute;mites de la membrana plasm&aacute;tica. Cada movimiento de nucleokinetic es an&aacute;logo a un paso. As&iacute;, velocidad promedio de migraci&oacute;n podr&iacute;a reducirse disminuyendo la frecuencia de paso o paso de distancia.

Comparaci&oacute;n de la migraci&oacute;n de neuronas lento y r&aacute;pido neocortical utilizando un nuevo modelo in vitro.

Reelin &#x88AB;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x662F;&#x89C4;&#x7BA1;&#x79FB;&#x4F4D;&#x548C;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x7684;&#x524D;&#x77BB;&#x6027;&#x7684;&#x5206;&#x6CCC;&#x7684;&#x914D;&#x6210; preplate &#x4E0A;, &#x8986;&#x5FC3;&#x5BA4;&#x533A;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x4E1B;&#x5C42; 6 (L6) &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BA1;&#x67E5;&#x4E86;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x548C; Reelin-&#x7F3A;&#x76AE;&#x8D28;&#x548C;&#x53D1;&#x73B0;&#x7684; L6 &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7B49;&#x6548;&#x5730;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x4E0B;&#x65B9; pia preplate &#x5206;&#x88C2;&#x548C;&#x521D;&#x59CB;&#x76AE;&#x8D28;&#x677F; (CP) &#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x671F;&#x95F4;&#x3002;&#x6CA1;&#x6709;&#x5728;&#x6B64;&#x53D1;&#x80B2;&#x65F6;&#x95F4;&#x70B9;&quot;&#x5377;&#x7EB8;&#x673A;&quot;&#x76AE;&#x8D28;&#x53EF;&#x63A2;&#x6D4B; L6 &#x5F02;&#x4F4D;&#x6307;&#x793A; L6 &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x8FC1;&#x79FB;&#x6216;&#x6BDB;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x5728; preplate &#x5206;&#x88C2;&#x671F;&#x95F4; Reelin &#x4FE1;&#x53F7;&#x53EF;&#x80FD;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x6709;&#x8C03;&#x8282;&#x3002;&#x63A2;&#x7D22; Reelin L6 &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x6025;&#x6027;&#x53CD;&#x5E94;&#xFF0C;subpial Reelin &#x6CE8;&#x5C04;&#x88AB;&#x5236;&#x6210; Reelin &#x7F3A;&#x690D;&#x3002;Reelin &#x6CE8;&#x5C04;&#x5F15;&#x8D77; L6 &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x5B83;&#x4EEC;&#x7684;&#x539F;&#x5B50;&#x6838;&#x5E76;&#x540C;&#x65F6;&#x542F;&#x52A8;&#x65FA;&#x76DB;&#x6811;&#x7A81;&#x72B6; (MAP2 +) &#x4EA7;&#x7269;&#x5728; 4 h &#x5185;&#x7684;&#x5BF9;&#x7ACB;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x5F80; pia &#x7684;&#x9AD8;&#x5C14;&#x57FA;&#x3002;&#x6B64;&#x5FEB;&#x901F; Reelin &#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x65B9;&#x5411;&#x548C;&#x5BF9;&#x9F50;&#x65B9;&#x5F0F;&#x5728;&#x4EBA;&#x53E3;&#x7684; L6 &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x5E73;&#x5747;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x4E2D;&#x521B;&#x5EFA; CP &#x6837;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5B66;&#x6CA1;&#x6709;&#x4EFB;&#x4F55;&#x91CD;&#x5927;&#x7684;&#x6539;&#x53D8;&#x3002;&#x76F8;&#x53CD;&#xFF0C;&#x5F3A;&#x9707;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x786B;&#x9178;&#x8F6F;&#x9AA8;&#x7D20;&#x86CB;&#x767D;&#x591A;&#x7CD6;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x540E;&#x53D1;&#x73B0;&#x88AB;&#x4ECE;&#x8F6F;&#x8111;&#x819C;&#x8868;&#x9762;&#x66F4;&#x5927;&#x5E45;&#x5EA6;&#x9635;&#x5730;&#x6CE8;&#x5C04;&#xFF0C;&#x6697;&#x793A;&#x90E8;&#x5206; Reelin &#x8425;&#x6551; preplate &#x5206;&#x88C2;&#x5728; 4 h &#x5185;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;Reelin &#x6709;&#x76F4;&#x63A5;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x5FEB;&#x901F;&#x5F62;&#x6001;&#x5206;&#x5316;&#x548C;&#x53D6;&#x5411;&#x7684; L6 &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x5728; preplate &#x62C6;&#x5206;&#x671F;&#x95F4;&#x3002;

Reelin &#x5728; preplate &#x5206;&#x88C2;&#x671F;&#x95F4;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x65B9;&#x5411;&#x548C; dendritogenesis&#x3002;

The secreted ligand Reelin is thought to regulate the translocation and positioning of prospective layer 6 (L6) neurons into the preplate, a plexus of neurons overlying the ventricular zone. We examined wild type and Reelin-deficient cortices and found that L6 neurons were equivalently positioned beneath the pia during the period of preplate splitting and initial cortical plate (CP) formation. The absence of detectable L6 ectopia in "reeler" cortices at this developmental time point indicates that Reelin-signaling might not regulate L6 neuron migration or gross positioning during preplate splitting. To explore the acute response of L6 neurons to Reelin, subpial injections of Reelin were made into Reelin-deficient explants. Reelin injection caused L6 neurons to orient their nuclei and polarize their Golgi toward the pia while initiating exuberant dendritic (MAP2+) outgrowth within 4 h. This rapid Reelin-dependent neuronal orientation and alignment created CP-like histology without any significant change in the mean position of the population of L6 neurons. Conversely, subplate cells and chondroitin sulfate proteoglycan immunoreactivity were found at significantly deeper positions from the pial surface after injection, suggesting that Reelin partially rescues preplate splitting within 4 h. Thus, Reelin has a direct role in promoting rapid morphological differentation and orientation of L6 neurons during preplate splitting.

Reelin promotes neuronal orientation and dendritogenesis during preplate splitting.

Le ligand s&eacute;cr&eacute;t&eacute; reeline est cens&eacute; r&eacute;glementer la translocation et le positionnement des &eacute;ventuels couche 6 (L6) neurones dans le preplate, un plexus de neurones recouvrant la zone ventriculaire. Nous avons examin&eacute; des type sauvage et cortex reeline d&eacute;ficient et constat&eacute; que les neurones L6 &eacute;taient plac&eacute;s de mani&egrave;re &eacute;quivalente sous l&#39;&Eacute;FVP pendant la p&eacute;riode de s&eacute;paration preplate et formation de la plaque corticale initiale (CP). L&#39;absence de d&eacute;tectable L6 ectopie dans cortex &laquo; touret &raquo; &agrave; ce stade de la dur&eacute;e du d&eacute;veloppement indique que la reeline-signalisation pourrait contr&ocirc;ler pas L6 neuron migration ou positionnement brut pendant un fractionnement preplate. Pour &eacute;tudier la r&eacute;ponse aigu&euml; des neurones L6 &agrave; reeline, subpial injections de reeline ont &eacute;t&eacute; transform&eacute;es en reeline d&eacute;ficient des explants. Injection reelin caus&eacute; L6 neurones &agrave; orienter leurs noyaux et polarisent leur Golgi vers l&#39;assembly pia tout en initiant dendritique (MAP2 +) excroissance exub&eacute;rante moins de 4 h. Cette orientation neuronale reeline d&eacute;pendant et l&#39;alignement rapide cr&eacute;&eacute; histologie de type CP sans changement significatif dans la position moyenne de la population de neurones L6. &Agrave; l&#39;inverse, cellules de l&#39;embase et la chondro&iuml;tine sulfate prot&eacute;oglycane immunor&eacute;activit&eacute; trouv&eacute;es &agrave; des positions beaucoup plus profondes de la surface pial apr&egrave;s l&#39;injection, ce qui sugg&egrave;re que Reelin partiellement sauve un fractionnement preplate moins de 4 h. Ainsi, la reeline joue un r&ocirc;le direct dans la promotion de diff&eacute;renciation morphologique rapide et l&#39;orientation des neurones L6 pendant preplate fractionnement.

Reelin favorise l&#39;orientation neuronale et dendritogenesis pendant le fractionnement preplate.

Il ligando secreta Reelin &egrave; pensato per regolare la traslocazione e posizionamento dei futuri strato 6 (L6) neuroni in preplate, un plesso di neuroni sovrastanti la zona ventricolare. Abbiamo esaminato il tipo selvatico e cortecce Reelin-carenti e trovato che i neuroni L6 equivalentemente erano posizionati sotto il pia durante il periodo del preplate spaccare e la formazione di placca corticale iniziale (CP). L&#39;assenza di rilevabile ectopia L6 in cortecce &quot;avvolgitore&quot; a questo punto dello sviluppo tempo indica che la segnalazione Reelin non possa regolare migrazione neurone L6 o lordo di posizionamento durante la suddivisione preplate. Per esplorare la risposta acuta dei neuroni L6 a Reelin, subpial sono state fatte iniezioni di Reelin in deficit di Reelin explants. Iniezione Reelin causato L6 neuroni orientare i loro nuclei e polarizzi loro Golgi verso il pia mentre avvio esuberante dendritica (MAP2 +) escrescenza entro 4 ore. Questo rapido orientamento neuronale Reelin-dipendente e allineamento creato istologia CP-come senza alcun cambiamento significativo nella posizione media della popolazione di neuroni L6. Al contrario, le cellule a piastra e chondroitin sulfate proteoglycan immunoreattivit&agrave; furono trovati a posizioni significativamente pi&ugrave; profondi dalla superficie piale dopo l&#39;iniezione, suggerendo che reelina parzialmente salv&ograve; preplate spaccare entro 4 ore. Cos&igrave;, Reelin ha un ruolo diretto nel promuovere la rapida differenziazione morfologica e l&#39;orientamento dei neuroni L6 durante preplate spaccare.

Reelina promuove orientamento neuronale e dendritogenesis durante la suddivisione preplate.

&#x30EA;&#x30FC;&#x30EA;&#x30F3;&#x8EE2;&#x6D41;&#x3068;&#x5C06;&#x6765;&#x306E;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x6C7A;&#x3081;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x5206;&#x6CCC;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9; preplate &#x306B;&#x3001;&#x5FC3;&#x5BA4;&#x306E;&#x30BE;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x8986;&#x3046;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x53E2; 6 (L6) &#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3092;&#x5C64;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x3068;&#x30EA;&#x30FC;&#x30EA;&#x30F3;&#x6B20;&#x4E4F;&#x91CE;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3001;L6 &#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x304C;&#x540C;&#x7B49; preplate &#x5206;&#x5272;&#x3068;&#x521D;&#x671F;&#x76AE;&#x8CEA;&#x9AA8;&#x677F; (CP) &#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x671F;&#x9593;&#x4E2D;&#x306B;&#x3001;pia &#x306E;&#x4E0B;&#x306B;&#x914D;&#x7F6E;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x691C;&#x51FA;&#x306E; L6 &#x8EE2;&#x4F4D;&#x300D;&#x30EA;&#x30FC;&#x30E9;&#x30FC;&quot;&#x76AE;&#x8CEA;&#x767A;&#x9054;&#x3053;&#x306E;&#x6642;&#x70B9;&#x3067;&#x306E;&#x4E0D;&#x5728;&#x30EA;&#x30FC;&#x30EA;&#x30F3; &#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB; L6 &#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x79FB;&#x884C;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x6C7A;&#x3081;&#x7DCF; preplate &#x5206;&#x5272;&#x306E;&#x969B;&#x306B;&#x898F;&#x5236;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;L6 &#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x6025;&#x6027;&#x5FDC;&#x7B54;&#x30EA;&#x30FC;&#x30EA;&#x30F3;&#x3092;&#x63A2;&#x7D22;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x6CE8;&#x5C04;&#x30EA;&#x30FC;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x30EA;&#x30FC;&#x30EA;&#x30F3;&#x6B20;&#x640D;&#x306B;&#x4F5C;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x8EDF;&#x690D;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30EA;&#x30FC;&#x30EA;&#x30F3;&#x6CE8;&#x5165;&#x304C;&#x6838;&#x306E;&#x65B9;&#x5411;&#x3092;&#x8A2D;&#x5B9A;&#x3057;&#x3001;&#x30B4;&#x30EB;&#x30B8; pia &#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066; 4 &#x6642;&#x9593;&#x4EE5;&#x5185;&#x3042;&#x3075;&#x308C;&#x3093;&#x3070;&#x304B;&#x308A;&#x306E;&#x6A39;&#x72B6;&#x7A81;&#x8D77; (MAP2 +) &#x4F38;&#x9577;&#x3092;&#x958B;&#x59CB;&#x3059;&#x308B;&#x5206;&#x6975;&#x306B; L6 &#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x304C;&#x539F;&#x56E0;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x6025;&#x901F;&#x306A;&#x30EA;&#x30FC;&#x30EA;&#x30F3;&#x4F9D;&#x5B58;&#x795E;&#x7D4C;&#x65B9;&#x5411;&#x3068;&#x914D;&#x7F6E; CP &#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x7D44;&#x7E54;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5909;&#x66F4;&#x306A;&#x3057; L6 &#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x4EBA;&#x53E3;&#x306E;&#x5E73;&#x5747;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x306B;&#x4F5C;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x9006;&#x306B;&#x3001;&#x30B5;&#x30D6;&#x30D7;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x53D6;&#x4ED8;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C1;&#x30F3;&#x786B;&#x9178;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30B0;&#x30EA;&#x30AB;&#x30F3;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;, &#x8EDF;&#x819C;&#x8868;&#x9762;&#x304B;&#x3089;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x6DF1;&#x3044;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x6295;&#x4E0E;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x30EA;&#x30FC;&#x30EA;&#x30F3;&#x5185; 4 h preplate &#x5206;&#x5272;&#x3092;&#x6551;&#x3046;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;.&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x30EA;&#x30FC;&#x30EA;&#x30F3;&#x6025;&#x901F;&#x306A;&#x5F62;&#x614B;&#x5B66;&#x7684;&#x5206;&#x5316;&#x3068;&#x5206;&#x5272; preplate L6 &#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x30AA;&#x30EA;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C6;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x63A8;&#x9032;&#x306F;&#x3001;&#x76F4;&#x63A5;&#x7684;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30EA;&#x30FC;&#x30EA;&#x30F3;&#x795E;&#x7D4C;&#x5411;&#x304D;&#x3068; dendritogenesis preplate &#x306E;&#x5206;&#x5272;&#x4E2D;&#x306B;&#x4FC3;&#x9032;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Reelin&#xC740; &#xADDC;&#xC81C;&#xB294; &#xC804; &#xC88C;&#xC640; &#xC608;&#xBE44;&#xC758; &#xC704;&#xCE58;&#xB97C; &#xC0DD;&#xAC01; &#xD558;&#xB294; secreted ligand preplate, overlying &#xC2EC; &#xC2E4; &#xC601;&#xC5ED; &#xB274;&#xB7F0;&#xC758; &#xC2E0;&#xACBD; &#xCD1D; 6 (L6) &#xB274;&#xB7F0; &#xACC4;&#xCE35;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC57C;&#xC0DD; &#xC720;&#xD615;&#xACFC; Reelin &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xC678;&#xD53C;&#xAC00; &#xAC80;&#xC0AC; &#xBC0F; L6 &#xB274;&#xB7F0; preplate &#xBD84;&#xD560; &#xBC0F; &#xCD08;&#xAE30; &#xB300;&#xB1CC; &#xD53C; &#xC9C8;&#xC758; &#xD50C;&#xB808;&#xC774;&#xD2B8; (CP) &#xD615;&#xC131; &#xAE30;&#xAC04; &#xB3D9;&#xC548; pia &#xC544;&#xB798; &#xB3D9;&#xB4F1; &#xD558; &#xAC8C; &#xBC30;&#xCE58; &#xD588;&#xB2E4; &#xBC1C;&#xACAC;. &quot;Reeler&quot; &#xC678;&#xD53C;&#xAC00; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC2DC;&#xAC04; &#xC2DC;&#xC810;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC10;&#xC9C0; L6 &#xACB0;&#xC815;&#xC758; &#xBD80;&#xC7AC;&#xB294; Reelin &#xC2E0;&#xD638; &#xC218; &#xADDC;&#xC81C; &#xD558;&#xC9C0; L6 &#xC2E0;&#xACBD; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xB610;&#xB294; preplate &#xBD84;&#xD560; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC2EC;&#xD55C; &#xC704;&#xCE58; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Reelin&#xB97C; &#xD0D0;&#xD5D8; L6 &#xC2E0;&#xACBD;&#xC758; &#xAE09;&#xC131; &#xBC18;&#xC751;, &#xC8FC;&#xC0AC; Reelin Reelin &#xACB0;&#xD54D;&#xC73C;&#xB85C; &#xB9CC;&#xB4E4;&#xC5B4;&#xC9C4; subpial explants. Reelin &#xC0AC;&#xCD9C; L6 &#xC2E0;&#xACBD; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xD575;&#xC744; &#xC624;&#xB9AC;&#xC5D4;&#xD2B8; &#xBB34;&#xC131; &#xD55C; &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; (MAP2 +) &#xD30C;&#xC0DD;&#xBB3C; 4h &#xC774;&#xB0B4; &#xC2DC;&#xC791; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xACE8;&#xC740; &#xD53C;&#xC544; &#xCABD;&#xC73C;&#xB85C; &#xADF9;&#xC744; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xAE09;&#xC18D; &#xD55C; Reelin &#xC885;&#xC18D; &#xC2E0;&#xACBD; &#xBC29;&#xD5A5; &#xBC0F; &#xB9DE;&#xCDA4; L6 &#xB274;&#xB7F0;&#xC758; &#xC778;&#xAD6C;&#xC758; &#xD3C9;&#xADE0; &#xC704;&#xCE58;&#xC5D0; &#xC911;&#xB300; &#xD55C; &#xC5B4;&#xB5A4; &#xBCC0;&#xD654;&#xB3C4; &#xC5C6;&#xC774; CP &#xAC19;&#xC740; &#xC870;&#xC9C1;&#xD559;&#xC744; &#xB9CC;&#xB4E4;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC18;&#xB300;&#xB85C;, subplate &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xCF58; proteoglycan immunoreactivity &#xBC1C;&#xACAC; &#xB41C; pial &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD788; &#xAE4A;&#xC740; &#xC704;&#xCE58;&#xC5D0; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; preplate &#xBD84;&#xD560; 4 h &#xC774;&#xB0B4; &#xAD6C;&#xCD9C; Reelin &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC8FC;&#xC785; &#xD6C4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, Reelin &#xBE60;&#xB978; &#xD615;&#xD0DC;&#xD559; differentation&#xC640; preplate &#xBD84;&#xD560; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; L6 &#xB274;&#xB7F0;&#xC758; &#xBC29;&#xD5A5;&#xC5D0; &#xC9C1;&#xC811;&#xC801;&#xC778; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;.

Reelin preplate &#xBD84;&#xD560; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC2E0;&#xACBD; &#xBC29;&#xD5A5;&#xACFC; dendritogenesis &#xC2B9;&#xC9C4; &#xC2DC;&#xD0A8;&#xB2E4;.

El ligando secretado Reelin se piensa para regular el desplazamiento y posicionamiento de la prospectiva de la capa 6 neuronas (L6) en preplate, un plexo de neuronas que cubr&iacute;a la zona ventricular. Examinamos tipo salvaje y cortezas de Reelin deficientes y encontr&oacute; que las neuronas L6 equivalente se colocaron debajo de la pia durante el per&iacute;odo de la divisi&oacute;n preplate y la formaci&oacute;n de la placa cortical inicial (CP). La ausencia de la ectopia L6 detectable en cortezas &quot;devanadera&quot; en este momento del desarrollo indica que Reelin signaling podr&iacute;a regular no L6 neurona migraci&oacute;n o posicionamiento bruto durante partir preplate. Para explorar la respuesta aguda de neuronas L6 Reelin, subpial inyecciones de Reelin fueron convertidas en deficiencia de Reelin explantes. Inyecci&oacute;n Reelin causado L6 neuronas orientar sus n&uacute;cleos y polarizar a su Golgi hacia el pia mientras iniciaban exuberante dendr&iacute;tica (MAP2 +) consecuencia dentro de 4 h. Esta orientaci&oacute;n neuronal dependiente de la Reelina y alineaci&oacute;n r&aacute;pida crean CP-como histolog&iacute;a sin cambios significativos en la posici&oacute;n media de la poblaci&oacute;n de neuronas L6. Por el contrario, las c&eacute;lulas subplate e inmunoreactividad de proteoglicanos de condroit&iacute;n sulfato se encontraron en posiciones mucho m&aacute;s profundas de la superficie pial despu&eacute;s de la inyecci&oacute;n, lo que sugiere que Reelina parcialmente rescata a partir preplate en 4 h. As&iacute;, Reelin tiene un papel directo en la promoci&oacute;n r&aacute;pida diferenciaci&oacute;n morfol&oacute;gica y orientaci&oacute;n de L6 neuronas durante preplate divisi&oacute;n.

Anna J. Nichols

Department of Neuroscience and Physiology

SUNY Upstate Medical University

Ex utero Electroporation and Whole Hemisphere Explants: A Simple Experimental Method for Studies of Early Cortical Development

Anna J. Nichols

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SUNY Upstate Medical University

Ex utero Electroporation and Whole Hemisphere Explants: A Simple Experimental Method for Studies of Early Cortical Development

Department of Neuroscience and Physiology