Odorant-induced Responses Recorded from Olfactory Receptor Neurons using the Suction Pipette Technique

Animals sample the odorous environment around them through the chemosensory systems located in the nasal cavity. Chemosensory signals affect complex ...

University of Cambridge 

&#x4ECE;&#x5B64;&#x7ACB;&#x7684;&#x877E;&#x8788;&#x68D2;&#x542B; Ca(2+) &#x654F;&#x611F;&#x7684;&#x8367;&#x5149;&#x67D3;&#x6599;&#x8367;&#x5149; 5 &#x697C;&#x5916;&#x6BB5;&#x6C29;&#x79BB;&#x5B50;&#x6FC0;&#x5149;&#x6D4B;&#x91CF;&#x8367;&#x5149;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x4E86;&#x3002;&#x5F53;&#x5916;&#x90E8;&#x7684;&#x90E8;&#x5206;&#x88AB;&#x66B4;&#x9732;&#x5728; 0Ca(2+)/0Na(+) &#x7684;&#x89E3;&#x51B3;&#x65B9;&#x6848;&#xFF0C;&#x65E8;&#x5728;&#x51CF;&#x4F4E;&#x8868;&#x9762;&#x819C;&#x7ECF;&#x901A;&#x65F6;&#xFF0C;&#x66B4;&#x9732;&#x5728;&#x5F3A;&#x5149;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x6FC0;&#x5149;&#x8BF1;&#x53D1;&#x7F13;&#x6162;&#x589E;&#x52A0;&#x8367;&#x5149;&#xFF0C;&#x53CD;&#x5C04;&#x5149;&#x5F15;&#x8D77;&#x7684;&#x5916;&#x5C42;&#x90E8;&#x5206; [Ca(2+)](i)&#x3002;&#x8FD9;&#x7F13;&#x6162;&#x7684;&#x8367;&#x5149;&#x4E0A;&#x5347;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x53EF;&#x80FD;&#x88C5;&#x6709;&#x4E24;&#x4E2A;&#x6E10;&#x8FD1;&#x6307;&#x6570;&#x51FD;&#x6570;&#x7684;&#x5927;&#x81F4;&#x76F8;&#x7B49;&#x7684;&#x632F;&#x5E45;&#xFF0C;&#x62E5;&#x6709;&#x5927;&#x7EA6; 200 ms &#x548C; 5.7 &#x65F6;&#x95F4;&#x5E38;&#x6570;&#x7684;&#x603B;&#x548C; s&#x3002;&#x5F53;&#x68D2;&#x53D7;&#x5230;&#x9971;&#x548C;&#x80CC;&#x666F;&#x5149;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x51CF;&#x5C11;&#x5916;&#x6BB5; [Ca(2+)](i) &#x4E4B;&#x524D;&#x6FC0;&#x5149;&#x7167;&#x5C04;&#xFF0C;&#x76F8;&#x5BF9;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x6307;&#x6570;&#x632F;&#x5E45;&#x6539;&#x53D8;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x51CF;&#x5C11;&#x4ECE;&#x4E00;&#x4E2A;&#x8F83;&#x77ED;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x5E38;&#x6570;&#x4E0E;&#x8D21;&#x732E;&#x3002;&#x8367;&#x5149;&#x9AD8;&#x65F6;&#x7A7A;&#x5206;&#x8FA8;&#x7387;&#x5F55;&#x5236;&#x65F6;&#x7684;&#x521D;&#x59CB;&#x65F6;&#x95F4;&#x8BFE;&#x7A0B;&#x8003;&#x8BD5;&#x900F;&#x9732;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x8FC5;&#x901F;&#x5D1B;&#x8D77;&#x7684; 1 2 ms&#xFF0C;&#x8FD9;&#x53EF;&#x80FD;&#x751A;&#x81F3;&#x4ECE;&#x68D2;&#x6797;&#x683C;&#x6EB6;&#x6DB2;&#x4E2D;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x5E38;&#x6570;&#x3002;Pre-exposing &#x6F02;&#x7167;&#x660E;&#x3001; &#x6746;&#x662F;&#x5426;&#x6F02;&#x767D;&#x6C34;&#x9274;&#x4E8E;&#x6797;&#x683C;&#x6EB6;&#x6DB2;&#x4E2D;&#x6216;&#x5728; 0Ca(2+)/0Na(+) &#x89E3;&#x51B3;&#x65B9;&#x6848;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5E9F;&#x9664;&#x6B64;&#x521D;&#x59CB;&#x7684;&#x8FC5;&#x901F;&#x5D1B;&#x8D77;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x5728;&#x8367;&#x5149;&#x8FC5;&#x901F;&#x5D1B;&#x8D77;&#x7531;&#x9686;&#x5BF9;&#x6F02;&#x767D;&#x4EE5;&#x67D0;&#x79CD;&#x65B9;&#x5F0F;&#x751F;&#x6210;&#x3002;&#x4E0E;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x8367;&#x5149;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x901F;&#x5EA6;&#x8F83;&#x6162;&#x7684;&#x7EC4;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x5FEB;&#x901F;&#x521D;&#x59CB;&#x4E0A;&#x5347;&#xFF0C;&#x6CE2;&#x5F62;&#x6216;&#x5E45;&#x5EA6;&#x51E0;&#x4E4E;&#x4E0D;&#x53D7;&#x5F71;&#x54CD;&#x65F6;&#x68D2; pre-exposed &#x6797;&#x683C;&#x6EB6;&#x6DB2;&#x5BF9;&#x5149;&#x7684;&#x8DB3;&#x591F;&#x660E;&#x4EAE;&#xFF0C;&#x5236;&#x6B62;&#x5B8C;&#x5168;&#x5FAA;&#x73AF;&#x7535;&#x6D41;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5176;&#x4E2D;&#x6F02;&#x767D;&#x9686;&#x5BF9;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5FFD;&#x7565;&#x4E0D;&#x8BA1;&#x5206;&#x6570;&#x4E2D;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x4E0A;&#x5348;&#x916F;&#x7ECF;&#x87AF;&#x5408;&#x5242; pre-incubation BAPTA&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x5F7B;&#x5E95;&#x5E9F;&#x9664;&#x7684;&#x8367;&#x5149;&#x589E;&#x52A0;&#x6162;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x4E86;&#x51E0;&#x4E4E;&#x6CA1;&#x6709;&#x5F71;&#x54CD;&#x8FC5;&#x901F;&#x5D1B;&#x8D77;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x5FEB;&#x901F;&#x7684;&#x7EC4;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x4F46;&#x89E6;&#x53D1;&#x7684;&#x89C6;&#x7D2B;&#x7EA2;&#x8D28;&#x6F02;&#x767D;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E0D;&#x53CD;&#x6620;&#x589E;&#x52A0;&#x5916;&#x6BB5; [Ca(2+)](i)&#x3002;&#x65E2;&#x4E0D;&#x8FC5;&#x901F;&#xFF0C;&#x4E5F;&#x4E0D;&#x6162;&#x7684;&#x8367;&#x5149;&#x589E;&#x52A0;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x53D7;&#x5230;&#x5916;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x66B4;&#x9732;&#x4E8E; 10 microM &#x7684;&#x590D;&#x5408;&#x819C; permeant N&#xFF0C;N&#xFF0C;N&#39;&#xFF0C;N&#39;-&#x56DB; (2-&#x5421;&#x5576;&#x57FA;-&#x7532;&#x57FA;) &#x4E59;&#x4E8C;&#x80FA; (TPEN) &#x7684;&#x87AF;&#x5408;&#x7269; Zn(2+) &#x6216; 100 microM 2-aminoethoxydiphenylborate &#xFF08;2-&#x5EFA;&#x4E1A;) &#x819C; permeant IP(3) &#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x963B;&#x6EDE;&#x7B49;&#x91CD;&#x91D1;&#x5C5E;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x5C06;&#x51FA;&#x73B0;&#x5728;&#x8367;&#x5149;&#x67D3;&#x6599;&#x6392;&#x9664;&#x91CD;&#x91D1;&#x5C5E;&#x6D53;&#x5EA6;&#x6216;&#x7ECF;&#x91CA;&#x653E;&#x7ECF;&#x7531;&#x5149;&#x81F4;&#x589E;&#x52A0; IP(3) &#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x65B9;&#x9762;&#x53D1;&#x6325;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x7EDD;&#x5BF9;&#x7ECF;&#x6D53;&#x5EA6;&#x548C;&#x6746;&#x7F13;&#x51B2;&#x80FD;&#x529B;&#x7684;&#x4F30;&#x8BA1;&#x6570;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x901F;&#x5EA6;&#x8F83;&#x6162;&#x7684;&#x8367;&#x5149;&#x589E;&#x52A0;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x8868;&#x793A;&#x5468;&#x56F4;&#x7684;&#x91CA;&#x653E; 10-50 &#x5FAE;&#x6469;&#x5C14;&#x7ECF;&#x6BCF;&#x516C;&#x5347;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x5377;&#x4ECE;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x6216;&#x87AF;&#x5408;&#x5546;&#x5E97;&#x540E;&#x6F02;&#x767D;&#x3002;

&#x65F6;&#x95F4;&#x8BFE;&#x7A0B;&#x548C;&#x877E;&#x8788;&#x68D2;&#x660E;&#x4EAE;&#x5149;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x9499;&#x91CA;&#x653E;&#x7684;&#x4E25;&#x91CD;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x3002;

Changes in fluorescence were measured with an argon ion laser from the outer segments of isolated salamander rods containing the Ca(2+)-sensitive fluorescent dye fluo-5F. When the outer segments were exposed to a 0Ca(2+)/0Na(+) solution designed to minimise surface membrane Ca(2+) fluxes, exposure to intense light from the laser evoked a slow increase in fluorescence, reflecting a light-induced rise in outer segment [Ca(2+)](i). The time course of this slow fluorescence rise could be fitted with the sum of two asymptotic exponential functions of approximately equal amplitude, having time constants of approximately 200 ms and 5.7 s. When rods were exposed to saturating background light to reduce outer segment [Ca(2+)](i) before laser illumination, the relative amplitude of the two exponentials was altered so as to reduce the contribution from the one with the shorter time constant. Examination of the initial time course of fluorescence when recording at high temporal resolution revealed a further rapid rise with a time constant of 1-2 ms, which could be observed even from rods in Ringer solution. This initial rapid rise could be abolished by pre-exposing the rod to bleaching illumination, whether the bleach was given in Ringer solution or in 0Ca(2+)/0Na(+) solution. It would therefore appear that the rapid rise in fluorescence is generated in some way by the bleaching of the photopigment. Unlike the slower components of fluorescence increase, the rapid initial rise was virtually unaffected in waveform or amplitude when rods were pre-exposed in Ringer solution to light which was bright enough to suppress completely the circulating current but which bleached a negligible fraction of the photopigment. Furthermore, pre-incubation with the AM ester of the Ca(2+) chelator BAPTA, although completely abolishing the slower components of fluorescence increase, had virtually no effect on the rapid rise. These results indicate that the rapid component, though triggered by rhodopsin bleaching, does not reflect an increase in outer segment [Ca(2+)](i). Neither the rapid nor the slower components of fluorescence increase were affected by exposure of the outer segment to 10 microM of the membrane-permeant compound N,N,N',N'-tetrakis(2-pyridyl-methyl)ethylenediamine (TPEN), which chelates heavy metals such as Zn(2+), or 100 microM 2-aminoethoxydiphenylborate (2-APB), a membrane-permeant blocker of IP(3) receptors. These results appear to exclude a role for changes in heavy metal concentration or Ca(2+) release via IP(3) receptors in the light-induced increases in dye fluorescence. Estimates of absolute Ca(2+) concentration and of rod buffering capacity suggest that the slower components of fluorescence increase represent the release of around 10-50 micromoles Ca(2+) per litre cytoplasmic volume from bound or sequestered stores after bleaching.

Time course and magnitude of the calcium release induced by bright light in salamander rods.

Changements de fluorescence ont &eacute;t&eacute; mesur&eacute;s avec un laser &agrave; argon ionis&eacute; depuis les segments externes des tiges de salamandre isol&eacute; contenant le colorant fluorescent Ca(2+) sensibles fluo-5F. Lorsque les segments externes ont &eacute;t&eacute; expos&eacute;s &agrave; une solution de 0Ca(2+)/0Na(+) con&ccedil;ue pour minimiser les flux de surface membranaire heterodimeric, exposition &agrave; la lumi&egrave;re intense du laser a &eacute;voqu&eacute; une augmentation lente de fluorescence, refl&eacute;tant une augmentation induite par la lumi&egrave;re dans le segment externe [Ca(2+)](i). L&#39;&eacute;volution temporelle de cette augmentation de la fluorescence lente pourrait &ecirc;tre install&eacute;e avec la somme de deux fonctions exponentielles asymptotiques d&#39;amplitude &eacute;gale environ, ayant des constantes de temps d&#39;environ 200 ms et 5,7 s. Lorsque les tiges sont expos&eacute;s &agrave; saturer le fond l&eacute;ger pour r&eacute;duire le segment externe [Ca(2+)](i) avant l&#39;illumination laser, l&#39;amplitude relative de deux exponentielles des a &eacute;t&eacute; modifi&eacute;e de mani&egrave;re &agrave; r&eacute;duire la contribution de la partie avec la constante de temps plus courte. Examen de l&#39;&eacute;volution initiale de la fluorescence lors de l&#39;enregistrement &agrave; haute r&eacute;solution temporelle a r&eacute;v&eacute;l&eacute; une hausse plus rapide avec une constante de temps de 1-2 ms, ce qui a pu &ecirc;tre observ&eacute;e m&ecirc;me &agrave; partir de tiges dans une solution Ringer. Cette hausse rapide initiale peut &ecirc;tre abolie par pre-exposing la tige au blanchiment illumination, si l&#39;eau de Javel a &eacute;t&eacute; donn&eacute; dans une solution Ringer ou dans une solution 0Ca(2+)/0Na(+). Il semblerait donc que l&#39;augmentation rapide de la fluorescence est g&eacute;n&eacute;r&eacute;e en quelque sorte par la d&eacute;coloration de la photopigment. Contrairement aux composants plus lents de l&#39;augmentation de la fluorescence, la mont&eacute;e initiale rapide &eacute;tait pratiquement inchang&eacute;e en forme d&#39;onde ou amplitude lorsque les tiges &eacute;taient pr&eacute;expos&eacute;s dans une solution de Ringer &agrave; la lumi&egrave;re qui &eacute;tait assez brillant pour supprimer compl&egrave;tement la circulation actuelle mais qui blanchi une fraction n&eacute;gligeable de la photopigment. En outre, pr&eacute;incubation avec l&#39;ester AM du ch&eacute;lateur du heterodimeric BAPTA, bien que totalement abolir les composants plus lents de l&#39;augmentation de la fluorescence, n&#39;avait pratiquement aucun effet sur la croissance rapide. Ces r&eacute;sultats indiquent que la composante rapide, bien que d&eacute;clench&eacute;e par blanchiment de la rhodopsine, ne refl&egrave;te pas une augmentation de segment externe [Ca(2+)](i). Ni rapide, ni les composants plus lents de l&#39;augmentation de la fluorescence ont &eacute;t&eacute; affect&eacute;s par l&#39;exposition du segment externe &agrave; 10 microM de la membrane perm&eacute;able compos&eacute; N, N, N&#39;, N&#39;-t&eacute;trakis (pyridyl-2-m&eacute;thyl) &eacute;thyl&egrave;nediamine (TPEN), qui ch&eacute;late les m&eacute;taux lourds tels que Zn(2+) ou 100 microM 2-aminoethoxydiphenylborate (2-APB), un membrane perm&eacute;able bloqueur des r&eacute;cepteurs de l&#39;IP(3). Ces r&eacute;sultats semblent exclure un r&ocirc;le pour les changements de concentration en m&eacute;taux lourds ou heterodimeric communiqu&eacute; par l&#39;interm&eacute;diaire de r&eacute;cepteurs IP(3) dans les augmentations induites par la lumi&egrave;re de fluorescence du colorant. Estimations de la concentration absolue de heterodimeric et du b&acirc;ton capacit&eacute; de tamponnage sugg&egrave;rent que les composants plus lents de l&#39;augmentation de la fluorescence repr&eacute;sentent la lib&eacute;ration de pr&egrave;s de 10-50 micromoles heterodimeric par litre volume cytoplasmique de magasins li&eacute;s ou pi&eacute;g&eacute;es apr&egrave;s le blanchiment.

&Eacute;volution temporelle et l&#39;importance de la lib&eacute;ration de calcium induite par la lumi&egrave;re vive dans les barres de la salamandre.

Zeitlichen Verlauf und die Gr&#xF6;&#xDF;enordnung der Calcium-Freisetzung durch helles Licht in Salamander St&#xE4;be induziert.

Modifiche a fluorescenza sono state misurate con un laser a ioni argon da segmenti esterni delle barre di Salamandra isolato contenente la tintura fluorescente fluo-5F Ca(2+)-sensibili. Quando i segmenti esterni sono stati esposti a una soluzione di 0Ca(2+)/0Na(+) progettata per ridurre al minimo la superficie di membrana Ca(2+) disossidanti, esposizione a luce intensa dal laser evocato un lento aumento di fluorescenza, riflettendo un aumento di luce-indotta nel segmento esterno [Ca(2+)](i). Il decorso di questo aumento di fluorescenza lenta potrebbe essere equipaggiata con la somma di due funzioni esponenziali asintotica di ampiezza approssimativamente uguale, aventi costanti di tempo di circa 200 ms e 5.7 s. Quando canne sono stati esposti a saturare sfondo chiaro per ridurre il segmento esterno [Ca(2+)](i) prima di illuminazione laser, l&#39;ampiezza relativa dei due esponenziali &egrave; stata alterata in modo da ridurre il contributo da quello con la costante di tempo pi&ugrave; breve. Esame del corso tempo iniziale di fluorescenza durante la registrazione ad alta risoluzione temporale ha rivelato un aumento ulteriore rapido con una costante di tempo di 1-2 ms, che pu&ograve; essere osservato anche da aste in soluzione di Ringer. Questa rapida ascesa iniziale potrebbe essere abolita dal pre-exposing l&#39;asta per lo sbiancamento illuminazione, se la candeggina &egrave; stato dato in soluzione di Ringer o in soluzione di 0Ca(2+)/0Na(+). Quindi sembrerebbe che il rapido aumento della fluorescenza &egrave; generato in qualche modo Candeggiando il photopigment. A differenza dei componenti pi&ugrave; lenti dell&#39;aumento di fluorescenza, la rapida ascesa iniziale era praticamente inalterato nella forma d&#39;onda o ampiezza quando canne erano pre-exposed in soluzione di Ringer alla luce che era abbastanza luminoso per sopprimere completamente la corrente circolante ma che sbiancato una frazione trascurabile del photopigment. Inoltre, pre-incubazione con l&#39;estere AM del chelante Ca(2+) BAPTA, sebbene abolire completamente i componenti pi&ugrave; lenti dell&#39;aumento di fluorescenza, non aveva praticamente alcun effetto in rapido aumento. Questi risultati indicano che la componente rapida, per&ograve; innescato dalla rodopsina sbianca, non riflettono un aumento nel segmento esterno [Ca(2+)](i). N&eacute; rapido n&eacute; i componenti pi&ugrave; lenti dell&#39;aumento di fluorescenza sono stati influenzati dall&#39;esposizione del segmento esterno a 10 microM della membrana-permeant composto N, N, N&#39;, N&#39;-tetrakis (metil-2-pyridyl) etilendiammina (TPEN), che chelati metalli pesanti come il Zn(2+), o 100 microM 2-aminoethoxydiphenylborate (2-APB), un membrana-permeant bloccanti dei recettori IP(3). Questi risultati sembrano escludere un ruolo per i cambiamenti nella concentrazione di metalli pesanti o Ca(2+) comunicato via IP(3) recettori nel luce-indotta aumenta in fluorescenza di tintura. Stime di concentrazione assoluta di Ca(2+) e di asta buffering capacit&agrave; suggeriscono che i componenti pi&ugrave; lenti dell&#39;aumento di fluorescenza rappresentano il rilascio di intorno 10-50 micromole Ca(2+) per litro di volume citoplasmatico da negozi associati o sequestrati dopo lo sbiancamento.

Decorso e grandezza del rilascio di calcio indotto dalla luce nelle barre di Salamandra.

&#x86CD;&#x5149;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30EB;&#x30B4;&#x30F3; &#x30A4;&#x30AA;&#x30F3; &#x30EC;&#x30FC;&#x30B6;&#x30FC; Ca(2+) &#x654F;&#x611F;&#x306A;&#x86CD;&#x5149;&#x8272;&#x7D20;&#x306E;&#x86CD;&#x5149; 5F &#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x5206;&#x96E2;&#x30B5;&#x30E9;&#x30DE;&#x30F3;&#x30C0;&#x30FC;&#x68D2;&#x306E;&#x5916;&#x5074;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x304B;&#x3089;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x9045;&#x3044;&#x5897;&#x52A0;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B6;&#x30FC;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x5F37;&#x3044;&#x30E9;&#x30A4;&#x30C8;&#x3078;&#x306E;&#x9732;&#x51FA;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3057;&#x3001;&#x5916;&#x5074;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x819C;&#x8868;&#x9762;&#x306E;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x306E;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3092;&#x6700;&#x5C0F;&#x9650;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x8A2D;&#x8A08;&#x3055;&#x308C;&#x3066; 0Ca(2+)/0Na(+) &#x306E;&#x30BD;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x3055;&#x3089;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3001;&#x5916;&#x5074;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3002; 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&#xD615;&#xAD11; &#xB290;&#xB9B0; &#xC0C1;&#xC2B9; &#xC2DC;&#xAC04; &#xACFC;&#xC815; &#xC57D; 200 ms&#xC640; 5.7&#xC758; &#xC2DC;&#xAC04; &#xC0C1;&#xC218;&#xB97C; &#xAC16;&#xB294; &#xC57D; &#xAC19;&#xC740; &#xC9C4;&#xD3ED;&#xC758; &#xB450; &#xC810;&#xADFC; &#xC9C0; &#xC218; &#xD568;&#xC218;&#xC758; &#xD569;&#xC73C;&#xB85C; &#xC7A5;&#xCC29; &#xB418;&#xC5B4; &#xC218; &#xC788;&#xB294; s. &#xC5B8;&#xC81C; &#xBD09; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8; [Ca(2+)](i) &#xC804;&#xC5D0; &#xB808;&#xC774;&#xC800; &#xC870;&#xBA85;, &#xB450; &#xC9C0; &#xC218;&#xC758; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801;&#xC778; &#xC9C4;&#xD3ED; &#xC9E7;&#xC740; &#xC2DC;&#xAC04; &#xC0C1;&#xC218;&#xC640; &#xD558;&#xB098;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAE30;&#xC5EC;&#xB97C; &#xC904;&#xC77C; &#xC218; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D; &#xBCC0;&#xACBD; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;&#xB97C; &#xC904;&#xC774;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xBC30;&#xACBD; &#xBE5B;&#xC744; &#xD760;&#xBED1; &#xC816; &#xAC8C; &#xB178;&#xCD9C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD615;&#xAD11; &#xACE0;&#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4; &#xCE21; &#xB450; &#xC5FD;&#xC5D0; &#xAE30;&#xB85D;&#xD560; &#xB54C;&#xC758; &#xCD08;&#xAE30; &#xC2DC;&#xAC04; &#xACFC;&#xC815;&#xC758; &#xC2DC;&#xD5D8; &#xBD09; &#xBCA8; &#xC194;&#xB8E8;&#xC158;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5D0;&#xC11C;&#xB3C4; &#xAD00;&#xCC30; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC5C8;&#xB2E4; 1-2 ms&#xC758; &#xC2DC;&#xAC04; &#xC0C1;&#xC218;&#xC640; &#xB354; &#xBE60;&#xB978; &#xC0C1;&#xC2B9; &#xBC1D;&#xD600;. &#xC774; &#xCD08;&#xAE30; &#xAE09;&#xC18D; &#xD55C; &#xC99D;&#xAC00; &#xC5EC;&#xBD80; &#xBCA8;&#xC18C;&#xB9AC; &#xC194;&#xB8E8;&#xC158; &#xB610;&#xB294; 0Ca(2+)/0Na(+) &#xC194;&#xB8E8;&#xC158; &#xD45C; &#xBC31;&#xC81C; &#xC8FC;&#xC5B4;&#xC84C;&#xB2E4; &#xC870;&#xBA85;, &#xD45C;&#xBC31; &#xB85C;&#xB4DC; pre-exposing&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD3D0;&#xC9C0; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xD615;&#xAD11;&#xC758; &#xAE09;&#xC18D; &#xD55C; &#xC99D;&#xAC00; photopigment&#xC758; &#xD45C;&#xBC31;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC5B4;&#xB5A4; &#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C;&#xB4E0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0DD;&#xC131; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0A9;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD615;&#xAD11; &#xC99D;&#xAC00;&#xC758; &#xB290;&#xB9B0; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xC640; &#xB2EC;&#xB9AC; &#xBD09; &#xBE5B;&#xC744; &#xC644;&#xC804;&#xD788; &#xC21C;&#xD658; &#xC804;&#xB958;&#xB97C; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xC815;&#xB3C4; &#xBC1D;&#xC740; &#xD588;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xBB34;&#xC2DC;&#xD560; &#xC218; &#xBD84;&#xC218;&#xB294; photopigment&#xC758; &#xD45C;&#xBC31;&#xC744; &#xB458;&#xB7EC;&#xC2FC; &#xC194;&#xB8E8;&#xC158; pre-exposed &#xB54C; &#xCD08;&#xAE30;&#xC758; &#xAE09;&#xC18D; &#xD55C; &#xC99D;&#xAC00; &#xD30C;&#xD615; &#xB610;&#xB294; &#xC9C4;&#xD3ED;&#xC5D0; &#xAC70;&#xC758; &#xC601;&#xD5A5; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, Ca(2+) chelator&#xC758; &#xC624;&#xC804; &#xC5D0;&#xC2A4;&#xD14C; &#xB974;&#xC640; &#xC0AC;&#xC804; BAPTA, &#xD615;&#xAD11; &#xC99D;&#xAC00;&#xC758; &#xB290;&#xB9B0; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xC644;&#xC804;&#xD788; &#xD3D0;&#xC9C0; &#xD588;&#xB2E4; &#xAE09;&#xC18D; &#xD55C; &#xC99D;&#xAC00;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xAC70;&#xC758; &#xC8FC;&#xC9C0;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; rhodopsin &#xD45C;&#xBC31;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC2E4;&#xD589; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xBE60;&#xB978; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8; [Ca(2+)](i) &#xC99D;&#xAC00; &#xBC18;&#xC601; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAE09;&#xC18D; &#xD55C;&#xB3C4; &#xD615;&#xAD11; &#xC99D;&#xAC00;&#xC758; &#xB290;&#xB9B0; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xC5D0; &#xB9C9; permeant &#xBCF5;&#xD569; N, N, N&#xC758; 10 microM &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xC758; &#xB178;&#xCD9C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBC1B;&#xC740; &#39;, N&#39;-tetrakis (&#xBA54; &#xD2F8; 2-pyridyl) Zn(2+), &#xB610;&#xB294; 100 microM 2-aminoethoxydiphenylborate (2-&#xC218; &#xBC30;), IP(3) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xB9C9; permeant &#xCC28;&#xB2E8;&#xAE30; &#xB4F1; &#xC911; &#xAE08;&#xC18D; chelates ethylenediamine (TPEN). &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xD615;&#xAD11; &#xC5FC;&#xB8CC;&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC911; &#xAE08;&#xC18D; &#xB18D;&#xB3C4; &#xB610;&#xB294; &#xBE5B; &#xC720;&#xBC1C; &#xC99D;&#xAC00; IP(3) &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; Ca(2+) &#xBC84;&#xC804;&#xC758; &#xBCC0;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC81C;&#xC678; &#xB4EF;&#xD558;&#xB2E4;. &#xC608;&#xC0C1; &#xC6A9;&#xB7C9; &#xBC84;&#xD37C;&#xB9C1; &#xB9C9;&#xB300;&#xC640; &#xC808;&#xB300; Ca(2+) &#xB18D;&#xB3C4;&#xC758; &#xD615;&#xAD11; &#xC99D;&#xAC00;&#xC758; &#xB290;&#xB9B0; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C; &#xC8FC;&#xC704;&#xC758; &#xCD9C;&#xC2DC;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC81C;&#xC548; 10-50 micromoles Ca(2+) &#xD45C;&#xBC31; &#xD6C4; &#xBC14;&#xC6B4;&#xB4DC; &#xB610;&#xB294; &#xBD84;&#xB9AC; &#xB41C; &#xC0C1;&#xC810;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xBCFC;&#xB968; &#xB9AC;&#xD130; &#xB2F9;.

&#xC2DC;&#xAC04; &#xCF54;&#xC2A4;&#xC640; &#xB3C4;&#xB871;&#xB1FD; &#xBD09;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1D;&#xC740; &#xBE5B;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; &#xCE7C;&#xC298; &#xBC29;&#xCD9C;&#xC758; &#xADDC;&#xBAA8;.

Cambios en la fluorescencia se midieron con un l&aacute;ser de i&oacute;n Arg&oacute;n de los segmentos externos de barras de Salamandra aislado que contiene el Ca(2+) sensibles colorante fluorescente fluo-5F. Cuando los segmentos externos fueron expuestos a una soluci&oacute;n de 0Ca(2+)/0Na(+) dise&ntilde;ada para minimizar los flujos de superficie de la membrana CA, exposici&oacute;n a luz intensa de los l&aacute;ser evocado un lento aumento de fluorescencia, lo que refleja un aumento inducido por la luz del segmento externo [Ca(2+)](i). El curso del tiempo de este aumento de fluorescencia lento podr&iacute;a equiparse con la suma de dos funciones exponenciales asint&oacute;ticas de amplitud aproximadamente igual, tener constantes de tiempo de aproximadamente 200 ms y 5.7 s. Cuando las barras fueron expuestas a saturar la luz de fondo para reducir el segmento externo [Ca(2+)](i) antes de iluminaci&oacute;n l&aacute;ser, la amplitud relativa de los dos exponentes fue alterada para reducir la contribuci&oacute;n de la una con la constante de tiempo m&aacute;s corta. Examen del curso inicial tiempo de fluorescencia cuando se graba en alta resoluci&oacute;n temporal revel&oacute; un aumento m&aacute;s r&aacute;pido con una constante de tiempo de 1-2 ms, que pudo observarse incluso de varillas en soluci&oacute;n de Ringer. Este r&aacute;pido incremento inicial podr&iacute;a ser abolida por pre-exposing la varilla al blanqueo de iluminaci&oacute;n, ya sea el blanqueador fue dado en soluci&oacute;n de Ringer o soluci&oacute;n de 0Ca(2+)/0Na(+). Por lo tanto, parece que el r&aacute;pido incremento en la fluorescencia se genera de alguna manera por el blanqueo de la fotopigmento. A diferencia de los componentes m&aacute;s lentos de aumento de la fluorescencia, el r&aacute;pido incremento inicial era virtualmente inafectado en forma de onda o amplitud cuando las barras eran bebidas en soluci&oacute;n de Ringer a la luz que fue lo suficientemente brillante para suprimir totalmente la circulaci&oacute;n actual pero que blanque&oacute; una fracci&oacute;n insignificante de la fotopigmento. Adem&aacute;s, preincubaci&oacute;n con el &eacute;ster de AM del CA quelante BAPTA, aunque totalmente abolir los componentes m&aacute;s lentos del aumento de la fluorescencia, no ten&iacute;a pr&aacute;cticamente ning&uacute;n efecto sobre el r&aacute;pido ascenso. Estos resultados indican que el componente r&aacute;pido, aunque provocado por blanqueo de la rodopsina, no refleja un aumento en el segmento externo [Ca(2+)](i). El r&aacute;pido ni los componentes m&aacute;s lentos del aumento de la fluorescencia se vieron afectados por la exposici&oacute;n del segmento externo a 10 microM de la membrana-Florescente compuesto N, N, N&#39;, N&#39;-tetrakis (2-metil-pyridyl) etilendiamina (TPEN), que quela metales pesados tales como Zn(2+), o 100 microM 2-aminoethoxydiphenylborate (2-APB), un membrana-Florescente bloqueador de receptores IP(3). Estos resultados parecen excluir un papel para cambios en la concentraci&oacute;n de metales pesados o liberaci&oacute;n de CA trav&eacute;s de receptores IP(3) en los aumentos por la luz de fluorescencia de tinte. Las estimaciones de concentraci&oacute;n absoluta de la CA y de la barra de almacenamiento en b&uacute;fer capacidad sugieren que los componentes m&aacute;s lentos aumento de fluorescencia representan la liberaci&oacute;n de alrededor de 10-50 micromoles CA por litro volumen citopl&aacute;smico de almacenes consolidados o secuestradas despu&eacute;s del blanqueamiento.

Curso del tiempo y la magnitud de la liberaci&oacute;n de calcio inducida por la luz brillante en las barras de la salamandra.

&#x6C29;&#x6FC0;&#x5149;&#x706F; 10 microm &#x70B9;&#x96C6;&#x4E2D;&#x5230;&#x5916;&#x6BB5;&#x5B8C;&#x597D;&#x65E0;&#x635F;&#x9F20;&#x6807;&#x6746;&#x6EE1;&#x8F7D;&#x8367;&#x5149; 3&#x3001; &#x8367;&#x5149; 4 &#x6216;&#x8367;&#x5149;-5 &#x697C;&#xFF0C;&#x4F30;&#x8BA1;&#x6697;&#x3001; &#x4F11;&#x606F;&#x514D;&#x8D39;&#x7684;&#x7ECF;&#x6D53;&#x5EA6; ([Ca(2+)](i)) &#x548C;&#x53D8;&#x5316; [nelson Ca(2+)](i)&#x3002;&#x67D3;&#x6599;&#x6D53;&#x5EA6;&#x4E86;&#x8C03;&#x6574;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x7EF4;&#x6301;&#x6B63;&#x5E38;&#x751F;&#x7406;&#x6746;&#xFF0C;&#x548C;&#x6FC0;&#x5149;&#x5F3A;&#x5EA6;&#x88AB;&#x9009;&#x4E3A;&#x5C3D;&#x91CF;&#x51CF;&#x5C11;&#x6F02;&#x767D;&#x7684;&#x8367;&#x5149;&#x67D3;&#x6599;&#x3002;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x9F20;&#x6807;&#x6746;&#x7167;&#x660E;&#x4E0D;&#x65AD;&#x4E0E;&#x6FC0;&#x5149;&#x5149;&#x663E;&#x793A;&#x8367;&#x5149;&#x597D;&#x88C5;&#x4E0A;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x6307;&#x6570;&#x7684;&#x5E73;&#x5747;&#x65F6;&#x95F4;&#x5E38;&#x6570;&#x7684; 154 &#x548C; 540 &#x5973;&#x58EB;&#x6746;&#x4ECE; transducin &alpha;-&#x4E9A;&#x57FA;&#x4E0E;&#x9010;&#x6B65;&#x51CF;&#x5C11;&#x6572; (Tralpha-/-) &#x52A8;&#x7269;&#x5728;&#x8367;&#x5149;&#x4E0D;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x5149;&#x7684;&#x8DCC;&#x5E45;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5C55;&#x51FA;&#x7684;&#x8367;&#x5149;&#x589E;&#x5E45;&#x53EF;&#x80FD;&#x88C5;&#x6709;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5355;&#x4E00;&#x6307;&#x6570;&#x521D;&#x59CB;&#x5FEB;&#x901F;&#x7EC4;&#x4EF6; (&#x9A6C;&#x5934; ~ 1 4 ms)&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x8367;&#x5149;&#x589E;&#x52A0;&#x5F15;&#x53D1;&#x4E86;&#x89C6;&#x7D2B;&#x7EA2;&#x8D28;&#x6F02;&#x767D;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x5176;&#x632F;&#x5E45;&#x51CF;&#x5C11;&#x4E86;&#x5728;&#x6F02;&#x767D;&#x4EAE;&#x5149;&#x66B4;&#x5E7F;&#xFF0C;&#x5176;&#x65F6;&#x95F4;&#x5E38;&#x6570;&#x4E0E;&#x63D0;&#x9AD8;&#x6FC0;&#x5149;&#x5F3A;&#x5EA6;&#x4E0B;&#x964D;&#x3002;&#x5FEB;&#x901F;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x4E0D;&#x8FC7;&#x662F;&#x53D7;&#x9499;&#x87AF;&#x5408;&#x5242; BAPTA &#x7684;&#x6CD5;&#x56E2;&#xFF0C;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x56E0;&#x6B64;&#x4E0D;&#x53CD;&#x6620;&#x5B9E;&#x9645;&#x589E;&#x52A0; [Ca(2+)](i)&#x3002;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x5FEB;&#x901F;&#x8367;&#x5149;&#x4E5F;&#x4E0A;&#x5347;&#x7684;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x5C0F;&#x9F20;&#x4E2D;&#x8367;&#x5149;&#x7684;&#x53EA;&#x662F;&#x524D;&#x79CB;&#x5B63;&#x751F;&#x4EA7;&#x68D2;&#x4E2D;&#x7684;&#x5149;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E0B;&#x964D; [Ca(2+)](i)&#x3002;&#x89E3;&#x79BB;&#x5E38;&#x6570;&#x6D4B;&#x91CF;&#x4E86;&#x4F53;&#x5916;&#x8367;&#x5149; 3&#x3001; &#x8367;&#x5149; 4 &#x548C;&#x8367;&#x5149; 5F &#x4E0E;&#x65E0; 1 &#x6BEB;&#x7C73; Mg(2+) &#x4ECE; 20 &#x5230; 37 &#x6444;&#x6C0F;&#x5EA6;&#x3002;&#x6240;&#x6709;&#x4E09;&#x4E2A;&#x67D3;&#x6599;&#x5C55;&#x793A;&#x5F3A;&#x5927;&#x7684;&#x6E29;&#x5EA6;&#xFF0C;&#x5728;&#x6B64;&#x8303;&#x56F4;&#x5185;&#x66F4;&#x6539;&#x4E86; 3-4 &#x500D;&#x7684;&#x89E3;&#x79BB;&#x5E38;&#x6570;&#x3002;&#x5728;&#x6444;&#x6C0F; 37 &#x5EA6;&#x7684;&#x6570;&#x503C;&#x7528;&#x6765;&#x4F30;&#x8BA1;&#x7EDD;&#x5BF9;&#x6C34;&#x5E73;&#x6746; [Ca(2+)](i)&#x3002;&#x6240;&#x6709;&#x4E09;&#x4E2A;&#x67D3;&#x6599;&#x7ED9;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x503C; [Ca(2+)](i) + /-20 250 &#x7684;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x68D2;&#x4E2D;&#x5728;&#x9ED1;&#x6697;&#x548C; 23 + /-2 nM nM &#x540E;&#x63A5;&#x89E6;&#x5230;&#x9971;&#x548C;&#x5149;&#x3002;&#x6CA1;&#x6709;&#x4EFB;&#x4F55;&#x91CD;&#x5927;&#x7684;&#x5DEE;&#x522B;&#xFF0C;&#x5728;&#x9ED1;&#x6697;&#x4E2D; [Ca(2+)](i) &#x4E4B;&#x95F4;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x548C; Tralpha/&#x52A8;&#x7269;&#x3002;

&#x68D2;&#x7684;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x548C;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x86CB;&#x767D;&#x5473;&#x857E;&#x6572;&#x9664;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80DE;&#x6D46;&#x9499;&#x79BB;&#x5B50;&#x6D53;&#x5EA6;&#x7684;&#x6D4B;&#x91CF;&#x3002;

A 10 microm spot of argon laser light was focused onto the outer segments of intact mouse rods loaded with fluo-3, fluo-4 or fluo-5F, to estimate dark, resting free Ca(2+) concentration ([Ca(2+)](i)) and changes in [Ca(2+)](i) upon illumination. Dye concentration was adjusted to preserve the normal physiology of the rod, and the laser intensity was selected to minimise bleaching of the fluorescent dye. Wild-type mouse rods illuminated continuously with laser light showed a progressive decrease in fluorescence well fitted by two exponentials with mean time constants of 154 and 540 ms. Rods from transducin alpha-subunit knock-out (Tralpha-/-) animals showed no light-dependent decline in fluorescence but exhibited an initial rapid component of fluorescence increase which could be fitted with a single exponential (tau~1-4 ms). This fluorescence increase was triggered by rhodopsin bleaching, since its amplitude was reduced by pre-exposure to bright bleaching light and its time constant decreased with increasing laser intensity. The rapid component was however unaffected by incorporation of the calcium chelator BAPTA and seemed therefore not to reflect an actual increase in [Ca(2+)](i). A similar rapid increase in fluorescence was also seen in the rods of wild-type mice just preceding the fall in fluorescence produced by the light-dependent decrease in [Ca(2+)](i). Dissociation constants were measured in vitro for fluo-3, fluo-4 and fluo-5F with and without 1 mM Mg(2+) from 20 to 37 degrees C. All three dyes showed a strong temperature dependence, with the dissociation constant changing by a factor of 3-4 over this range. Values at 37 degrees C were used to estimate absolute levels of rod [Ca(2+)](i). All three dyes gave similar values for [Ca(2+)](i) in wild-type rods of 250 +/- 20 nM in darkness and 23 +/- 2 nM after exposure to saturating light. There was no significant difference in dark [Ca(2+)](i) between wild-type and Tralpha-/- animals.

Measurement of cytoplasmic calcium concentration in the rods of wild-type and transducin knock-out mice.

Un spot 10 microm de lumi&egrave;re laser argon s&#39;est concentr&eacute; sur les segments externes des tiges intactes de souris truff&eacute;s de fluo-3, fluo-4 ou fluo-5F, pour estimer sombre, repos libre heterodimeric concentration ([Ca(2+)](i)) et les changements de [Ca(2+)](i) sur l&#39;&eacute;clairage. Concentration de colorant a &eacute;t&eacute; ajust&eacute;e afin de pr&eacute;server la physiologie normale de la tige, et l&#39;intensit&eacute; du laser a &eacute;t&eacute; choisie pour minimiser la d&eacute;coloration du colorant fluorescent. Tiges de souris de type sauvage illumin&eacute;e continuellement avec la lumi&egrave;re laser a montr&eacute; une diminution progressive de la fluorescence bien &eacute;quip&eacute;e de deux exponentielles avec des constantes de temps moyen de tiges de Mme 154 et 540 de la sous-unit&eacute; alpha de transducine knock out (Tralpha-/-) animaux ont montr&eacute; aucune diminution d&eacute;pendante de la lumi&egrave;re de fluorescence, mais pr&eacute;sentaient une composante initiale rapide d&#39;augmentation de la fluorescence peut &ecirc;tre munie d&#39;une seule exponentielle (tau ~ ms 1-4). Cette augmentation de la fluorescence a &eacute;t&eacute; d&eacute;clench&eacute;e par la d&eacute;coloration de la rhodopsine, puisque son amplitude a &eacute;t&eacute; r&eacute;duite d&#39;avant l&#39;exposition &agrave; la lumi&egrave;re de blanchiment et de sa constante de temps diminue avec l&#39;augmentation de l&#39;intensit&eacute; du laser. La composante rapide n&#39;&eacute;tait toutefois pas affect&eacute;e par l&#39;incorporation du ch&eacute;lateur du calcium BAPTA et semblait donc ne pas refl&eacute;ter une augmentation effective [Ca(2+)](i). Une augmentation rapide semblable &agrave; fluorescence voit aussi dans les tiges des souris de type sauvage, juste avant la chute dans la fluorescence produite par la diminution d&eacute;pendante de la lumi&egrave;re [Ca(2+)](i). Constantes de dissociation ont &eacute;t&eacute; mesur&eacute;s in vitro pour fluo-3, 4-fluo et fluo-5F, avec ou sans 1 mM Mg(2+) de 20 &agrave; 37 &deg; C. Tous les trois colorants ont montr&eacute; une d&eacute;pendance forte temp&eacute;rature, avec la constante de dissociation changer par un facteur de 3-4 dans cet intervalle. Valeurs &agrave; 37 degr&eacute;s C ont &eacute;t&eacute; utilis&eacute;es pour estimer les niveaux absolus de canne [Ca(2+)](i). Tous les trois colorants a donn&eacute; des valeurs semblables pour [Ca(2+)](i) dans les barres de type sauvage de 250 +/-20 nM dans l&#39;obscurit&eacute; et 23 +/-2 nM apr&egrave;s exposition &agrave; la lumi&egrave;re saturante. Il n&#39;y n&#39;avait aucun diff&eacute;rence significative dans l&#39;obscurit&eacute; [Ca(2+)](i) entre Tralpha-/-animaux et sauvage.

Mesure de la concentration de calcium cytoplasmique dans les tiges de souris sauvage et TBL1XR1.

Die Messung der cytoplasmatischen Kalziumkonzentration in den St&#xE4;ben von Wildtyp-und Transducin Knock-out-M&#xE4;usen.

Un 10 microm spot di luce laser argon era focalizzato sui segmenti esterni di mouse intatto canne caricati con fluo-3, fluo-4 o fluo-5F, stimare scuro, riposo libero Ca(2+) concentrazione ([Ca(2+)](i)) e modifiche in [Ca(2+)](i) all&#39;illuminazione. Concentrazione di colorante &egrave; stato regolato per mantenere la normale fisiologia dell&#39;asta, e l&#39;intensit&agrave; del laser &egrave; stato selezionato per ridurre al minimo lo sbiancamento della tintura fluorescente. Canne da selvaggio-tipo mouse illuminato continuamente con luce laser ha mostrato una diminuzione progressiva della fluorescenza ben montato da due esponenziali con costanti di tempo medio di 154 e 540 canne MS da transducina subunit&agrave; alfa knock-out (Tralpha-/-) gli animali hanno mostrato nessun declino dipendente dalla luce a fluorescenza ma esposto un componente rapida iniziale di aumento di fluorescenza che potrebbe essere dotato di un singolo esponenziale (tau ~ ms 1-4). Questo aumento di fluorescenza &egrave; stato innescato da rodopsina candeggio, poich&eacute; la sua ampiezza &egrave; stata ridotta da pre-exposure a luce sbiancante e la costante di tempo &egrave; diminuito con l&#39;aumento dell&#39;intensit&agrave; del laser. La componente rapida era tuttavia inalterato dall&#39;incorporazione del chelante del calcio BAPTA e sembrava quindi non riflettono un aumento effettivo [Ca(2+)](i). Un simile aumento rapido in fluorescenza &egrave; stato visto anche in canne di topi wild-type appena precedenti la caduta di fluorescenza prodotta dalla diminuzione luce-dipendente [Ca(2+)](i). Costanti di dissociazione sono state misurate in vitro per fluo-3, 4-fluo e fluo-5F con e senza 1 mM Mg(2+) da 20 a 37 gradi C. Tutti i tre coloranti ha mostrato una dipendenza di temperatura forte, con la costante di dissociazione, cambiando da un fattore di 3-4 sopra questa gamma. Sono stati utilizzati valori a 37 gradi C per stimare i livelli assoluti di rod [Ca(2+)](i). Tutti i tre coloranti ha dato valori simili per [Ca(2+)](i) nel selvaggio-tipo coni retinici di 250 + /-20 nM nelle tenebre e 23 + /-2 nM dopo l&#39;esposizione alla luce di saturazione. Non non c&#39;era alcuna differenza significativa nel buio [Ca(2+)](i) tra wild-type e Tralpha/animali.

Misurazione della concentrazione di calcio citoplasmatico in aste di wild-type e transducin topi knock-out.

&#x30A2;&#x30EB;&#x30B4;&#x30F3; &#x30EC;&#x30FC;&#x30B6;&#x30FC;&#x5149;&#x306E; 10 microm &#x30B9;&#x30DD;&#x30C3;&#x30C8;&#x86CD;&#x5149; 3&#x3001;fluo 4 &#x307E;&#x305F;&#x306F; fluo 5F &#x6697;&#x3044;&#x3001;&#x4F11;&#x61A9;&#x7121;&#x6599;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x6FC3;&#x5EA6; ([Ca(2+)](i)) &#x3068;&#x5909;&#x5316;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x7167;&#x5C04;&#x306B;&#x3002; &#x3092;&#x63A8;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x8AAD;&#x307F;&#x8FBC;&#x307E;&#x308C;&#x305F;&#x305D;&#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x68D2;&#x306E;&#x5916;&#x5074;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x4E0A;&#x306B;&#x7126;&#x70B9;&#x3092;&#x5F53;&#x3066;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x67D3;&#x6599;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306F;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C9;&#x306E;&#x901A;&#x5E38;&#x306E;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x3092;&#x4FDD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x8ABF;&#x6574;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3001;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B6;&#x30FC;&#x5F37;&#x5EA6;&#x306F;&#x86CD;&#x5149;&#x8272;&#x7D20;&#x306E;&#x6F02;&#x767D;&#x3092;&#x6700;&#x5C0F;&#x9650;&#x306B;&#x9078;&#x3070;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x68D2;&#x3092;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8; &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C7;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B7;&#x30F3; &alpha; &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x304B;&#x3089; 154 &#x3068; 540 &#x306E;&#x3055;&#x3093;&#x68D2;&#x306E;&#x5E73;&#x5747;&#x6642;&#x5B9A;&#x6570;&#x3092;&#x6301;&#x3064; 2 &#x3064;&#x306E;&#x6307;&#x6570;&#x95A2;&#x6570;&#x3067;&#x306E;&#x88C5;&#x5099;&#x306F;&#x86CD;&#x5149;&#x306E;&#x9032;&#x6B69;&#x7684;&#x306A;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x9023;&#x7D9A;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B6;&#x5149;&#x306B;&#x7167;&#x3089;&#x3055;&#x308C;&#x305F; (Tralpha-/-) &#x52D5;&#x7269;&#x306A;&#x3044;&#x86CD;&#x5149;&#x306E;&#x5149;&#x4F9D;&#x5B58;&#x7684;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x6307;&#x6570;&#x304C;&#x53D6;&#x308A;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x86CD;&#x5149;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306E;&#x521D;&#x671F;&#x306E;&#x6025;&#x901F;&#x306A;&#x6210;&#x5206;&#x3092;&#x5C55;&#x793A; (&#x30BF;&#x30A6; &#x301C; 1 4 ms)&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x30ED;&#x30C9;&#x30D7;&#x30B7;&#x30F3;&#x3092;&#x6F02;&#x767D;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x632F;&#x5E45;&#x9732;&#x5149;&#x524D;&#x306B;&#x660E;&#x308B;&#x3044;&#x6F02;&#x767D;&#x5149;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x524A;&#x6E1B;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x6642;&#x5B9A;&#x6570;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B6;&#x30FC;&#x5F37;&#x5EA6;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3068;&#x3068;&#x3082;&#x306B;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x305F;&#x306E;&#x3067;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x6025;&#x901F;&#x306A;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x5B9A;&#x6B3E;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0; &#x30AD;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x5264;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x306A;&#x3044;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x5B9F;&#x969B;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3092;&#x53CD;&#x6620;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x306B;&#x898B;&#x3048;&#x305F;&#x3002;&#x86CD;&#x5149;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x6025;&#x6FC0;&#x306A;&#x5897;&#x52A0;&#x304C;&#x898B;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x3061;&#x3087;&#x3046;&#x3069;&#x79CB;&#x86CD;&#x5149;&#x3067;&#x5148;&#x884C;&#x751F;&#x7523;&#x306E;&#x68D2;&#x3067;&#x3082;&#x5149;&#x4F9D;&#x5B58;&#x7684;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3002;&#x89E3;&#x96E2;&#x5B9A;&#x6570;&#x3092;&#x4F53;&#x5916;&#x86CD;&#x5149; 3&#x3001;fluo 4&#x3001;fluo 5 &#x968E;&#x3068; 1 &#x30DF;&#x30EA;&#x30E1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30EB; Mg(2+) 20 &#x304B;&#x3089; 37 &#x2103; &#x3067;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E; 3 &#x3064;&#x306E;&#x67D3;&#x6599;&#x306F; 3-4 &#x306E;&#x8981;&#x56E0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3053;&#x306E;&#x7BC4;&#x56F2;&#x306B;&#x308F;&#x305F;&#x3063;&#x3066;&#x5909;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x89E3;&#x96E2;&#x5B9A;&#x6570;&#x3068;&#x5F37;&#x3044;&#x6E29;&#x5EA6;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;37 &#x2103; &#x3067;&#x306E;&#x5024;&#x306E;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C9;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3002; &#x7D76;&#x5BFE;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x63A8;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E; 3 &#x3064;&#x306E;&#x67D3;&#x6599;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x5024;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x305F; [&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C9;&#x3092; 250 +/-20 nM &#x306E;&#x95C7;&#x3068; 23 +/-2 nM &#x306E;&#x5149;&#x98FD;&#x548C;&#x72B6;&#x614B;&#x3078;&#x306E;&#x66B4;&#x9732;&#x5F8C;&#x3002;&#x6697;&#x95C7;&#x306E;&#x4E2D;&#x3067;&#x6709;&#x610F;&#x306A;&#x5DEE;&#x306F;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F; [&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x9593;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x3068; Tralpha/&#x52D5;&#x7269;&#x3002;

&#x30ED;&#x30C3;&#x30C9;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x3068;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C7;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8; &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x6E2C;&#x5B9A;

&#xC544;&#xB974;&#xACE4; &#xB808;&#xC774;&#xC800; &#xBE5B;&#xC758; 10 microm &#xC790;&#xB9AC;&#xB294; &#xADF8;&#xB300;&#xB85C; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBD09; fluo-3, fluo-4 &#xB610;&#xB294; &#xC5B4;&#xB450;&#xC6B4;, &#xD734;&#xC2DD; &#xBB34;&#xB8CC; Ca(2+) &#xB18D;&#xB3C4; ([ca(2+)](i))&#xACFC; &#xBCC0;&#xD654; [Ca(2+)](i) &#xC870;&#xBA85; &#xC2DC; &#xCD94;&#xC815; fluo-5F &#xB85C;&#xB4DC;&#xC758; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xCD08;&#xC810;&#xC744;. &#xC5FC;&#xB8CC; &#xB18D;&#xB3C4; &#xB9C9;&#xB300;&#xC758; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xC0DD;&#xB9AC;&#xB97C; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC870;&#xC815; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC0F; &#xB808;&#xC774;&#xC800; &#xAC15;&#xB3C4; &#xD45C;&#xBC31; &#xD615;&#xAD11; &#xC5FC;&#xB8CC;&#xC758; &#xCD5C;&#xC18C;&#xD654; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC120;&#xC815; &#xB410;&#xB2E4;. &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBD09; &#xB808;&#xC774;&#xC800; &#xBE5B;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; 154 &#xACE0; 540 &#xC591; &#xBD09; transducin &#xC54C;&#xD30C; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xD3C9;&#xADE0; &#xC2DC;&#xAC04; &#xC0C1;&#xC218;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xB450; &#xC9C0; &#xC218;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC798; &#xC7A5;&#xCC29; &#xB418;&#xC5B4; &#xD615;&#xAD11;&#xC5D0; &#xC9C4;&#xBCF4;&#xC801;&#xC778; &#xAC10;&#xC18C; &#xB178;&#xD06C; &#xC544;&#xC6C3;&#xC73C;&#xB85C; &#xC870;&#xBA85; (Tralpha-/-) &#xB3D9;&#xBB3C; &#xD615;&#xAD11; &#xBE5B; &#xC885;&#xC18D; &#xAC10;&#xC18C; &#xC5C6;&#xC74C;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB2E8;&#xC77C; &#xC9C0; &#xC218;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xC7A5;&#xCC29; &#xB418;&#xC5B4; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xD615;&#xAD11; &#xC99D;&#xAC00;&#xC758; &#xCD08;&#xAE30; &#xAE09;&#xC18D; &#xD55C; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xC804;&#xC2DC; (&#xD0C0;&#xC6B0; ~ ms 1-4). &#xC774; &#xD615;&#xAD11; &#xC99D;&#xAC00; pre-exposure &#xBC1D;&#xC740; &#xD45C;&#xBC31; &#xBE5B;&#xC758; &#xC9C4;&#xD3ED; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xADF8; &#xC2DC;&#xAC04; &#xC0C1;&#xC218; &#xB808;&#xC774;&#xC800; &#xAC15;&#xB3C4; &#xC99D;&#xAC00; &#xD568;&#xAED8; &#xAC10;&#xC18C; rhodopsin &#xD45C;&#xBC31;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCD09;&#xBC1C; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xBE60;&#xB978; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xB294; &#xCE7C;&#xC298; chelator BAPTA&#xC758; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBC1B;&#xC9C0; &#xBC0F; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xD558;&#xC9C0; [Ca(2+)](i) &#xC2E4;&#xC81C; &#xC99D;&#xAC00; &#xBC18;&#xC601; &#xD558; &#xB4EF;. &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xB2E8;&#xC9C0; &#xD615;&#xAD11;&#xC5D0;&#xC11C;&#xAC00; &#xC55E;&#xC758; &#xBD09; [Ca(2+)](i) &#xBE5B; &#xC885;&#xC18D; &#xAC10;&#xC18C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD615;&#xAD11; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xAE09;&#xC18D; &#xD55C; &#xC99D;&#xAC00; &#xB610;&#xD55C; &#xBCF8;. &#xBD84;&#xB9AC; &#xC0C1;&#xC218;&#xB97C; fluo-3, fluo-4&#xC744; fluo-5F 37&#xB3C4; c 20&#xC5D0;&#xC11C; 1 m m Mg(2+) &#xC720;&#xBB34;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCE21;&#xC815; &#xD588;&#xB2E4; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC138; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC5FC;&#xB8CC; 3-4 &#xBC30;&#xC774; &#xBC94;&#xC704; &#xBCC0;&#xACBD; &#xBD84;&#xB9AC; &#xC0C1;&#xC218;&#xC640; &#xAC15;&#xD55C; &#xC628;&#xB3C4; &#xC758;&#xC874;&#xC131;&#xC744; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;. 37&#xB3C4; C&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC12; &#xB85C;&#xB4DC; [Ca(2+)](i) &#xC808;&#xB300; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xCD94;&#xC815; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD55C;. &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC138; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC5FC;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xAC12; &#xC900; [20 + 250&#xC758; &#xC57C;&#xC0DD; &#xD615; &#xBD09;&#xC5D0;&#xC11C; Ca(2+)](i) &#xC5B4;&#xB460;&#xACFC; 23 &plusmn; 2 nM &#xD760;&#xBED1; &#xC816; &#xAC8C; &#xBE5B;&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C; &#xB41C; &#xD6C4; nM. &#xC5B4;&#xB460; &#xC18D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD070; &#xCC28;&#xC774;&#xAC00; &#xC5C6;&#xC5C8;&#xB2E4; [Ca(2+)](i) &#xC0AC;&#xC774; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xBC0F; Tralpha/&#xB3D9;&#xBB3C;.

&#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xBC0F; transducin &#xB178;&#xD06C; &#xC544;&#xC6C3; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC758; &#xBD09;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xCE7C;&#xC298; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC758; &#xCE21;&#xC815;.

Un lugar de 10 microm de luz de l&aacute;ser de arg&oacute;n se centr&oacute; en los segmentos externos de rat&oacute;n intacto barras cargadas con fluo-3, 4-fluo o fluo-5F, estimar oscuro, descanso libre CA concentraci&oacute;n ([Ca(2+)](i)) y cambios en [Ca(2+)](i) sobre iluminaci&oacute;n. Concentraci&oacute;n de tinte se ajust&oacute; para preservar la fisiolog&iacute;a normal de la barra, y la intensidad del l&aacute;ser fue seleccionada para minimizar la decoloraci&oacute;n del tinte fluorescente. Barras salvaje-tipo rat&oacute;n iluminado continuamente con luz l&aacute;ser mostraron una disminuci&oacute;n progresiva en fluorescencia bien equipada por dos exponentes con constantes de tiempo promedio de 154 y 540 barras ms. de Transducina alfa-subunidad knock-out (Tralpha-/-) animales no mostraron disminuci&oacute;n dependientes de la luz fluorescencia pero exhibi&oacute; un componente r&aacute;pido inicial de aumento de fluorescencia que podr&iacute;a estar equipado con un solo exponencial (tau ~ ms de 1-4). Este aumento de la fluorescencia fue provocado por el blanqueo de la rodopsina, ya que su amplitud se redujo en preexposici&oacute;n a la luz brillante de blanquea y su constante de tiempo disminuye con el aumento de la intensidad del l&aacute;ser. El componente r&aacute;pido era sin embargo inafectado por la incorporaci&oacute;n del quelante de calcio BAPTA y por lo tanto no parec&iacute;a reflejar un aumento real en [Ca(2+)](i). Un similar aumento r&aacute;pido en fluorescencia tambi&eacute;n fue visto en las barras de los ratones de tipo salvaje justo antes de la ca&iacute;da en fluorescencia producido por la disminuci&oacute;n de dependientes de la luz [Ca(2+)](i). Constantes de disociaci&oacute;n se midieron in vitro para fluo-3, 4-fluo y fluo-5F con y sin 1 mM mg de 20 a 37 grados cent&iacute;grados. Todos los tres tintes mostraron una dependencia fuerte de temperatura, con la constante de disociaci&oacute;n, pasar por un factor de 3-4 esta gama. Valores a 37 grados C fueron utilizados para estimar los niveles absolutos de barra [Ca(2+)](i). Todos los tres tintes dieron valores similares para [Ca(2+)](i) en barras de tipo salvaje de 250 +/-20 nM en la oscuridad y 23 + /-2 nM despu&eacute;s de exposici&oacute;n a saturar la luz. No hubo diferencias significativas en la oscuridad [Ca(2+)](i) entre salvaje-tipo y Tralpha/animales.

Medici&oacute;n de la concentraci&oacute;n de calcio citoplasm&aacute;tico en las barras de tipo salvaje y transducin ratones knock-out.

Transducins &#xCEE4;&#xD50C; cGMP &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574;&#xB97C; &#xC2DC;&#xAC01;&#xC801; &#xC548;&#xB8CC;, &#xC720;&#xC77C;&#xD55C; &#xCC99;&#xCD94; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xB300;&#xB1CC;&#xC5D0;&#xC11C; phototransduction &#xACBD;&#xB85C; &#xC778;&#xC2DD;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; zebrafish &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;, &#xC544;&#xB2C8; optokinetic &#xC751;&#xB2F5; f(w21) (nof) &#xCF58; transducin&#xC758; &#xC54C;&#xD30C; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704;&#xB97C; &#xC778;&#xCF54;&#xB529; &#xD558;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xB10C;&#xC13C;&#xC2A4; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xD568;&#xAED8; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9DD;&#xB9C9; &#xD615;&#xD0DC;&#xC640; &#xC218;&#xC900;&#xC758; phototransduction &#xD6A8;&#xC18C;&#xB294; &#xC815;&#xC0C1; nof &#xB9DD;&#xB9C9;&#xC5D0; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xCF58; transducin &#xAC10;&#xC9C0; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Nof &#xCF58; &#xC5B4;&#xB450;&#xC6B4; &#xD604;&#xC7AC; &#xC815;&#xC0C1; &#xC774;&#xAE30;&#xB3C4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC801;&#xB2F9; &#xD55C; &#xAC15;&#xB3C4;&#xC758; &#xBE5B;&#xC5D0; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; nof &#xCF58; &#xBC1D;&#xC740; &#xBE5B;&#xC5D0; &#xC751;&#xB2F5; &#xD560;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC751;&#xB2F5; &#xCF58; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8;&#xC5D0; Ca2 +&#xC758; &#xBE5B;&#xC744; &#xC790;&#xADF9; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; transducin &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0DD;&#xC131; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, transducin, &#xAD11; &#xC790;&#xADF9; &#xC774;&#xC678;&#xC5D0; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xC9C0; &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9AC;&#xC149;&#xD130; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8;&#xC5D0; Ca2 +&#xC758; &#xCD9C;&#xC2DC;.

&#xBE5B;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; Ca2 + transducin &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; &#xC99D;&#xAC00; &#xBC0F; zebrafish &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; nof&#xC5D0;&#xC11C; &#xCF58;&#xC5D0; &#xC804;&#xB958; &#xC5B5;&#xC81C; &#xC790;&#xADF9;.

Transducins pigmentos visuales de par a la hidr&oacute;lisis del GMPC, la &uacute;nica reconocida v&iacute;a fototransducci&oacute;n en vertebrados fotorreceptores. Aqu&iacute; describimos a un mutante de pez cebra, no f(w21) de respuesta optokinetic (nof), con una mutaci&oacute;n de absurdo en el gene que codifica la subunidad alfa de cono Transducina. Morfolog&iacute;a retiniana y niveles de las enzimas de la fototransducci&oacute;n son normales en nof retinas, pero cono Transducina es indetectable. Corriente oscura en conos de nof tambi&eacute;n es normal, pero es insensible a la luz de intensidad moderada. Los conos de nof responde, sin embargo, a la luz brillante. Estas respuestas son producidas por una luz-estimulado, pero independiente de la Transducina, liberaci&oacute;n de Ca2 + en el citoplasma de cono. As&iacute;, adem&aacute;s de estimular la transducin, la luz tambi&eacute;n independientemente induce liberaci&oacute;n de Ca2 + en el citoplasma del fotorreceptor.

Luz estimula un aumento de la Transducina independiente de Ca2 + citoplasm&aacute;tico y supresi&oacute;n de la corriente en los conos de la nof mutante de pez cebra.

Transducins &#x592B;&#x5987;&#x89C6;&#x89C9;&#x8272;&#x7D20;&#x5BF9; cGMP &#x6C34;&#x89E3;&#xFF0C;&#x552F;&#x4E00;&#x627F;&#x8BA4; phototransduction &#x901A;&#x8DEF;&#x5728;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x611F;&#x5149;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x3002;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x4ECB;&#x7ECD;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x79CD;&#xFF0C;&#x4E00;&#x6D3E;&#x80E1;&#x8A00;&#x7A81;&#x53D8;&#x57FA;&#x56E0;&#x7F16;&#x7801;&#x7684;&#x9525; transducin &#x7684; alpha &#x4E9A;&#x5355;&#x4F4D;&#x4E2D;&#x6CA1;&#x6709;&#x89C6;&#x52A8;&#x53CD;&#x5E94; f(w21) &#xFF08;nof)&#x3002;&#x5728; nof &#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x89C6;&#x7F51;&#x819C;&#x5F62;&#x6001;&#x5B66;&#x548C; phototransduction &#x9176;&#x7684;&#x6C34;&#x5E73;&#x662F;&#x6B63;&#x5E38;&#x4F46;&#x9525; transducin &#x4F1A;&#x5BDF;&#x89C9;&#x4E0D;&#x5230;&#x3002;&#x6697;&#x7535;&#x6D41;&#x5728; nof &#x9525;&#x4E5F;&#x662F;&#x6B63;&#x5E38;&#x7684;&#x4F46;&#x5B83;&#x4E0D;&#x80FD;&#x611F;&#x77E5;&#x5230;&#x4E2D;&#x7B49;&#x5F3A;&#x5EA6;&#x7684;&#x5149;&#x3002;Nof &#x9525;&#x56DE;&#x5E94;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x8FC7;&#xFF0C;&#x660E;&#x4EAE;&#x7684;&#x5149;&#x7EBF;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x53CD;&#x5E94;&#x662F;&#x7531;&#x5165;&#x9525;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x7684;&#x5149;&#x523A;&#x6FC0;&#xFF0C;&#x4F46; transducin-&#x72EC;&#x7ACB;&#x3001; &#x91CA;&#x653E; Ca2 + &#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x9664;&#x4E86;&#x523A;&#x6FC0;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x86CB;&#x767D;&#x5473;&#x857E;&#x3001; &#x8F7B;&#x8FD8;&#x72EC;&#x7ACB;&#x5730;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x91CA;&#x653E;&#x5230;&#x611F;&#x5149;&#x5668;&#x80DE;&#x8D28;&#x4E2D;&#x7684; Ca2 +&#x3002;

&#x5149;&#x523A;&#x6FC0;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28; Ca2 + &#x589E;&#x52A0;&#x4E86; transducin &#x72EC;&#x7ACB;&#x548C;&#x5236;&#x6B62;&#x5F53;&#x524D;&#x4ECE;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x7A81;&#x53D8; nof &#x9525;&#x5185;&#x3002;

Transducins couple visual pigments to cGMP hydrolysis, the only recognized phototransduction pathway in vertebrate photoreceptors. Here we describe a zebrafish mutant, no optokinetic response f(w21) (nof), with a nonsense mutation in the gene encoding the alpha subunit of cone transducin. Retinal morphology and levels of phototransduction enzymes are normal in nof retinas, but cone transducin is undetectable. Dark current in nof cones is also normal, but it is insensitive to moderate intensity light. The nof cones do respond, however, to bright light. These responses are produced by a light-stimulated, but transducin-independent, release of Ca2+ into the cone cytoplasm. Thus, in addition to stimulating transducin, light also independently induces release of Ca2+ into the photoreceptor cytoplasm.

Light stimulates a transducin-independent increase of cytoplasmic Ca2+ and suppression of current in cones from the zebrafish mutant nof.

Transducins pigments visuels de couple &agrave; l&#39;hydrolyse du cGMP, la seule reconnue voie phototransduction chez les vert&eacute;br&eacute;s photor&eacute;cepteurs. Nous d&eacute;crivons ici un poisson z&egrave;bre mutant, aucune f(w21) de r&eacute;ponse optocin&eacute;tique (fr), avec une mutation non-sens dans le g&egrave;ne codant pour la sous-unit&eacute; alpha de c&ocirc;ne transducine. Morphologie r&eacute;tinienne et les niveaux des enzymes de la phototransduction sont normaux dans la r&eacute;tine de nof, mais transducine de c&ocirc;ne est ind&eacute;tectable. Courant d&#39;obscurit&eacute; dans les c&ocirc;nes de nof est &eacute;galement normal, mais il n&#39;est pas sensible &agrave; la lumi&egrave;re d&#39;une intensit&eacute; mod&eacute;r&eacute;e. Les c&ocirc;nes de nof r&eacute;pondent, toutefois, &agrave; la lumi&egrave;re vive. Ces r&eacute;ponses sont produites par une lib&eacute;ration stimul&eacute;e par la lumi&egrave;re, mais ind&eacute;pendant de transducine, de Ca2 + dans le cytoplasme de c&ocirc;ne. Ainsi, en plus de stimuler la TBL1XR1, la lumi&egrave;re aussi ind&eacute;pendamment induit la lib&eacute;ration de Ca2 + dans le cytoplasme de la cellule photo&eacute;lectrique.

Lumi&egrave;re stimule une augmentation de transducine ind&eacute;pendant du Ca2 + cytoplasmique et la suppression du courant dans les c&ocirc;nes de poisson-z&egrave;bre mutant fr.

Licht stimuliert eine Transducin-unabh&#xE4;ngige Erh&#xF6;hung der zytoplasmatischen Ca2 + und Unterdr&#xFC;ckung von Strom in T&#xFC;ten aus dem Zebrafisch-Mutante nof.

Transducins pigmenti visivi coppia all&#39;idrolisi di cGMP, l&#39;unico riconosciuto phototransduction pathway in vertebrati fotorecettori. Qui descriviamo un mutante di zebrafish, no f(w21) di risposta optocinetico (nof), con una mutazione del gene che codifica per la subunit&agrave; alfa del cono transducina sciocchezze. Morfologia retinica e i livelli degli enzimi phototransduction sono normali nel nof retine, ma cono transducina &egrave; inosservabile. Corrente di buio in coni nof &egrave; anche normale, ma &egrave; insensibile alla luce di intensit&agrave; moderata. I coni nof rispondere, tuttavia, alla luce brillante. Queste risposte sono prodotte da un luce-stimolata, ma indipendente transducina, rilascio di Ca2 + nel citoplasma cono. Cos&igrave;, oltre a stimolare transducin, luce anche indipendentemente induce rilascio di Ca2 + nel citoplasma fotorecettore.

Luce stimola un aumento transducina-indipendente di citoplasmico Ca2 + e la soppressione di corrente in coni dal nof mutante di zebrafish.

Transducins &#x30AB;&#x30C3;&#x30D7;&#x30EB; visual &#x9854;&#x6599; cGMP &#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x552F;&#x4E00;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x8996;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5149;&#x4F1D;&#x5C0E;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x8A8D;&#x8B58;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3001;&#x306A;&#x3044;&#x30CA;&#x30F3;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B9;&#x5909;&#x7570;&#x306E;&#x30B3;&#x30FC;&#x30F3; &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C7;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B7;&#x30F3; &alpha; &#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x8996;&#x904B;&#x52D5;&#x5FDC;&#x7B54; f(w21) (nof) &#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7DB2;&#x819C;&#x7D30;&#x80DE;&#x5F62;&#x614B;&#x3068;&#x5149;&#x4F1D;&#x5C0E;&#x9175;&#x7D20;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB; nof &#x7DB2;&#x819C;&#x3067;&#x306F;&#x6B63;&#x5E38;&#x3067;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x30B3;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C7;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B7;&#x30F3;&#x691C;&#x51FA;&#x4E0D;&#x53EF;&#x80FD;&#x3067;&#x3059;&#x3002;Nof &#x9310;&#x4F53;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6697;&#x96FB;&#x6D41;&#x3082;&#x6B63;&#x5E38;&#x3067;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x4E2D;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x306E;&#x5F37;&#x5EA6;&#x306E;&#x5149;&#x306B;&#x654F;&#x611F;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x3044;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;nof &#x30B3;&#x30FC;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x660E;&#x308B;&#x3044;&#x5149;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x3067;&#x304F;&#x3060;&#x3055;&#x3044;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306F; ca 2 + &#x306E;&#x5149;&#x523A;&#x6FC0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C7;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B7;&#x30F3;&#x72EC;&#x7ACB;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9; &#x30B3;&#x30FC;&#x30F3;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x3078;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C7;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B7;&#x30F3;, &#x5149;&#x523A;&#x6FC0;&#x306B;&#x52A0;&#x3048;&#x3066;&#x3082;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x3066;&#x5149;&#x53D7;&#x5BB9;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x3078;&#x306E; ca 2 + &#x306E;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x8A98;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;

&#x5149;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185; ca 2 + &#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C7;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B7;&#x30F3;&#x72EC;&#x7ACB;&#x5897;&#x52A0;&#x3068;&#x6291;&#x5236;&#x306E;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x5909;&#x7570;&#x4F53; nof &#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x5186;&#x9310;&#x5F62;&#x306E;&#x96FB;&#x6D41;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x9499;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x4FE1;&#x4F7F;&#x5728;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x6746;&#x3001; &#x8C03;&#x8282;&#x5149;&#x7684;&#x54CD;&#x5E94;&#x7684;&#x6062;&#x590D;&#x9636;&#x6BB5;&#xFF0C;&#x671F;&#x95F4;&#x5149;&#x9002;&#x5E94;&#x8C03;&#x5236;&#x7075;&#x654F;&#x5EA6;&#x3002;&#x81EA;&#x5149;&#x4E0D;&#x53EA;&#x8DCC;&#x5E45;&#x5916;&#x90E8;&#x5206;&#x9499;&#x79BB;&#x5B50;&#x6D53;&#x5EA6; ([Ca2 +] &#x6211;&#xFF09; &#x901A;&#x8FC7;&#x5173;&#x95ED;&#x4F46;&#x53EF;&#x73AF;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x95E8;&#x63A7;&#x901A;&#x9053;&#x4E5F;&#x589E;&#x52A0; [Ca2 +] &#x6211;&#x901A;&#x8FC7;&#x91CA;&#x653E; Ca2 + &#x4ECE;&#x7F13;&#x51B2;&#x533A;&#x7AD9;&#x70B9;&#x6216;&#x80DE;&#x5185;&#x5B58;&#x50A8;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BE6;&#x7EC6;&#x7814;&#x7A76;&#x4E86;&#x5BF9; [Ca2 +] &#x7684;&#x5149;&#x548C;&#x5FAA;&#x73AF;&#x5F53;&#x524D;&#x5F71;&#x54CD;&#x6211;&#x901A;&#x8FC7;&#x4F7F;&#x5438;&#x7684;&#x540C;&#x65F6;&#x6D4B;&#x91CF;&#x5438;&#x7BA1;&#x5F53;&#x524D;&#x548C; [Ca2 +] &#x6211;&#x4ECE;&#x5B64;&#x7ACB;&#x7684;&#x877E;&#x8788; Ambystoma tigrinum &#x68D2;&#x540E;&#x7EB3;&#x5165;&#x8367;&#x5149;&#x67D3;&#x6599;&#x8367;&#x5149;-5 &#x697C;&#x3002;&#x5F53;&#x91CA;&#x653E; Ca2 + &#x8861;&#x91CF;&#x5728; 0 Ca2 +-0 Na + &#x89E3;&#x51B3;&#x65B9;&#x6848;&#xFF0C;&#x5C3D;&#x91CF;&#x51CF;&#x5C11;&#x901A;&#x91CF; Ca2 + &#x8DE8;&#x819C;&#xFF0C;&#x5F88;&#x5927;&#x53EA;&#x7684;&#x706F;&#x5149;&#x7480;&#x707F;&#x8DB3;&#x591F;&#x6F02;&#x767D;&#x9686;&#x5BF9;&#x5F88;&#x5927;&#x4E00;&#x90E8;&#x5206;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E14;&#x53EA;&#x9650;&#x4E8E;&#x5728;&#x6F02;&#x767D;&#x6C34;&#x53D1;&#x751F;&#x5916;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x4E00;&#x90E8;&#x5206;&#x3002;&#x5B83;&#x662F;&#x4E0D;&#x53EF;&#x80FD;&#x7684;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x51FA;&#x5927;&#x8D21;&#x732E; [Ca2 +] &#x6211;&#x7684;&#x6700;&#x68D2;&#x7684;&#x751F;&#x7406;&#x7ECF;&#x8425;&#x8303;&#x56F4;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x7531;&#x4E8E;&#x91CA;&#x653E;&#x662F;&#x534A;-&#x6781;&#x5927;&#x4E3A;&#x5C0F;&#x4E8E; 10%&#x7684;&#x6F02;&#x767D;&#x6C34;&#xFF0C;&#x5B83;&#x4E0D;&#x80FD;&#x7531;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7B80;&#x5355;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x4F8B;&#x5982;&#x4EB2;&#x548C;&#x529B;&#x7684;&#x89C6;&#x7D2B;&#x7EA2;&#x8D28;&#x672C;&#x8EAB;&#x7684;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x7AD9;&#x70B9;&#x4E2D;&#x7684;&#x66F4;&#x6539;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5FC5;&#x987B;&#x8F6C;&#x800C;&#x9700;&#x8981;&#x4E00;&#x4E9B;&#x66F4;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x4EA4;&#x4E92;&#x3002;&#x6797;&#x683C;&#x6EB6;&#x6DB2;&#x4E2D; Ca2 + &#x5149;&#x53EF;&#x8C03;&#x6574;&#x6C60;&#x4E2D;&#x53EF;&#x6392;&#x653E;&#x4E0B;&#x964D; [Ca2 +] &#x7684;&#x53EA;&#x662F;&#x4E00;&#x6240;&#x4E3A;&#x5916;&#x90E8;&#x5206;&#x901A;&#x9053;&#x5173;&#x95ED;&#x65F6;&#x53D1;&#x751F;&#x3002;&#x5728;&#x7A33;&#x5B9A;&#x80CC;&#x666F;&#x5149;&#x6216;&#x9971;&#x548C;&#x7167;&#x660E;&#x66B4;&#x9732;&#x540E;&#xFF0C;Ca2 + &#x5728;&#x6C60;&#x4E2D;&#x7684;&#x5206;&#x6570;&#x51CF;&#x5C11;&#x57FA;&#x672C;&#x4E0A;&#x6309; [Ca2 +] &#x6211;&#x5982; Ca2 + &#x90FD;&#x88AB;&#x79FB;&#x9664;&#xFF0C;&#x5219;&#x4ECE;&#x7F13;&#x51B2;&#x533A;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x5185;&#x7684;&#x7AD9;&#x70B9;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;[Ca2 +] &#x6211;&#x672C;&#x8EAB;&#x66F4;&#x6539;&#x6309;&#x5FAA;&#x73AF;&#x7535;&#x6D41;&#xFF0C;&#x6CA1;&#x6709;&#x8FF9;&#x8C61;&#x8868;&#x660E; Ca2 + &#x91CA;&#x653E;&#x6216;&#x5176;&#x4ED6;&#x673A;&#x5236;&#x7684; Ca2 + &#x7A33;&#x6001;&#x4F5C;&#x51FA;&#x7684;&#x8D21;&#x732E;&#x3002;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E;&#x8DE8;&#x819C;&#x7684; Ca2 + &#x6D41;&#x91CF;&#x662F;&#x5916;&#x6BB5; Ca2 + &#x6D53;&#x5EA6;&#x5728;&#x6746;&#x6B63;&#x5E38;&#x7ECF;&#x8425;&#x5149;&#x7167;&#x5F3A;&#x5EA6;&#x8303;&#x56F4;&#x5185;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x51B3;&#x5B9A;&#x56E0;&#x7D20;&#x3002;&#x4E00;&#x65E6; Ca2 + &#x4ECE;&#x53EF;&#x8C03;&#x6574;&#x6C60;&#x521A;&#x521A;&#x51FA;&#x9662;&#xFF0C;&#x8FD8;&#x539F;&#x540E;&#x660F;&#x6697;&#x7684;&#x7167;&#x660E;&#x663E;&#x7136;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x968F;&#x540E;&#x7684;&#x9ED1;&#x6697; [Ca2 +] &#x6211;&#x548C;&#x91CD;&#x65B0;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x7684; Ca2 + &#x5411;&#x5176;&#x53D1;&#x5E03;&#x7AD9;&#x70B9;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E4B;&#x540E;&#x66F4;&#x4EAE;&#x66F4;&#x5149;&#x6216;&#x8BB8;&#x8FD8;&#x7531;&#x4E8E;&#x9686;&#x5BF9;&#x518D;&#x751F;&#x4FEE;&#x590D;&#x7B80;&#x5355;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;

&#x877E;&#x8788;&#x68D2;&#x5916;&#x90E8;&#x5206;&#x9499;&#x5BF9;&#x5149;&#x7EBF;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;

Calcium acts as a second messenger in vertebrate rods, regulating the recovery phase of the light response and modulating sensitivity during light-adaptation. Since light not only decreases the outer segment calcium concentration ([Ca2+]i) by closing cyclic nucleotide-gated channels but can also increase [Ca2+]i by releasing Ca2+ from buffer sites or intracellular stores, we examined in detail the effect of light and circulating current on [Ca2+]i by making simultaneous measurements of suction pipette current and [Ca2+]i from isolated rods of the salamander Ambystoma tigrinum after incorporation of the fluorescent dye fluo-5F. When the release of Ca2+ is measured in 0 Ca2+-0 Na+ solution, minimising fluxes of Ca2+ across the plasma membrane, it is substantial only for light bright enough to bleach a significant fraction of the photopigment and is restricted to the part of the outer segment in which the bleach occurred. It is unlikely, therefore, to make a large contribution to [Ca2+]i for most of the physiological operating range of the rod. Nevertheless, since release is half-maximal for a bleach of less than 10 %, it cannot be produced by a simple mechanism such as a change in the affinity of a binding site on rhodopsin itself but must instead require some more complex interaction. In Ringer solution, the Ca2+ in the light-releasable pool can be discharged merely by the decrease in [Ca2+]i that occurs as the outer segment channels close. In steady background light or after exposure to saturating illumination, the fraction of Ca2+ in the pool decreases essentially in proportion to [Ca2+]i as if Ca2+ were being removed from a buffer site within the cytoplasm. Furthermore, [Ca2+]i itself changes in proportion to the circulating current, with little evidence for a contribution from Ca2+ release or other mechanisms of Ca2+ homeostasis. This indicates that flux of Ca2+ across the plasma membrane is the major determinant of outer segment Ca2+ concentration within the rod's normal operating light intensity range. Once Ca2+ has been discharged from the releasable pool, it is restored following dim illumination apparently as the simple result of the subsequent restoration of dark [Ca2+]i and the rebinding of Ca2+ to its release site, but after brighter light perhaps also as a consequence of regeneration of the photopigment.

The effect of light on outer segment calcium in salamander rods.

Calcium agit comme un second messager dans les barres de vert&eacute;br&eacute;s, r&eacute;gulation de la phase de r&eacute;tablissement de la sensibilit&eacute; lumineuse et modulation de la sensibilit&eacute; au cours de la lumi&egrave;re-adaptation. Depuis la lumi&egrave;re non seulement diminue la concentration de calcium du segment externe ([Ca2 +] j&#39;ai) en fermant les canaux nucl&eacute;otide cyclique mais peut &eacute;galement augmentation de [Ca2 +] i en lib&eacute;rant le Ca2 + intracellulaire ou sites de m&eacute;moire tampon stocke, nous avons examin&eacute; en d&eacute;tail l&#39;effet de la lumi&egrave;re et la circulation actuelle sur [Ca2 +] i en effectuant des mesures simultan&eacute;es de succion Pipetter actuel et [Ca2 +] i d&#39;isol&eacute; tiges de la salamandre Ambystoma tigrinum apr&egrave;s incorporation de la fluorescence de colorant fluo-5F. Quand la lib&eacute;ration de Ca2 + est mesur&eacute;e en 0 Ca2 +-0 Na + solution, minimisant les flux de Ca2 + &agrave; travers la membrane de plasma, il est important que pour allumer suffisamment lumineux pour blanchir une fraction significative de la photopigment et se limite &agrave; la partie du segment externe dans lequel l&#39;eau de Javel a eu lieu. Il est peu probable, par cons&eacute;quent, d&#39;apporter une contribution importante &agrave; la [Ca2 +] i pendant la majeure partie de la plage de fonctionnement physiologique de la tige. N&eacute;anmoins, puisque la lib&eacute;ration est maximale pour un produit &agrave; base de moins de 10 %, il ne peut &ecirc;tre produit par un m&eacute;canisme simple telle qu&#39;une modification de l&#39;affinit&eacute; d&#39;un site de liaison sur la rhodopsine lui-m&ecirc;me, mais doit au contraire n&eacute;cessitent une intervention plus complexe. Dans une solution de Ringer, le Ca2 + dans le pool de lumi&egrave;re lib&eacute;rable peut se d&eacute;verser simplement par la diminution de la [Ca2 +] i qui se produit dans les canaux du segment externe proches. Dans la lumi&egrave;re de fond constant ou apr&egrave;s une exposition &agrave; saturer l&#39;illumination, la fraction de Ca2 + dans la piscine diminue essentiellement en proportion de [Ca2 +] i comme si Ca2 + ont &eacute;t&eacute; retir&eacute;s d&#39;un lieu de m&eacute;moire tampon dans le cytoplasme. En outre, [Ca2 +] i se modifie en fonction de la circulation actuelle, avec peu de preuves d&#39;une participation de la lib&eacute;ration de Ca2 + ou d&#39;autres m&eacute;canismes de l&#39;hom&eacute;ostasie du Ca2 +. Cela indique que le flux de Ca2 + &agrave; travers la membrane de plasma est le facteur d&eacute;terminant de la concentration de Ca2 + segment externe dans la plage de l&#39;intensit&eacute; lumineuse de fonctionnement normal de la tige. Une fois que le Ca2 + a &eacute;t&eacute; lib&eacute;r&eacute; dans le pool lib&eacute;rable, il est restaur&eacute; apr&egrave;s illumination dim apparemment simple suite &agrave; la restauration de dark [Ca2 +] i et la nouvelle liaison du Ca2 + &agrave; son site de lib&eacute;ration, mais apr&egrave;s plus lumineux lumi&egrave;re peut-&ecirc;tre aussi en raison de la r&eacute;g&eacute;n&eacute;ration de la photopigment.

L&#39;effet de la lumi&egrave;re sur le calcium du segment externe dans les barres de la salamandre.

Die Wirkung von Licht auf &#xE4;u&#xDF;ere Segment Kalzium in Salamander Stangen.

Calcio agisce come secondo messaggero nelle barre di vertebrati, che regolano la fase di recupero della risposta luce e modulando la sensibilit&agrave; durante l&#39;adattamento di luce. Dal chiaro non solo diminuisce la concentrazione di calcio segmento esterno ([Ca2 +] i) chiudendo cyclic nucleotide-gated canali ma pu&ograve; anche aumentare [Ca2 +] i attraverso il rilascio di Ca2 + dai siti di buffer o intracellulare memorizza, abbiamo esaminato in dettaglio l&#39;effetto di luce e circola corrente su [Ca2 +] io effettuando misurazioni simultanee di aspirazione Pipettare corrente e [Ca2 +] i da isolato canne della salamandra Ambystoma tigrinum dopo l&#39;incorporazione della fluorescente tintura fluo-5F. Quando il rilascio di Ca2 + &egrave; misurato in 0 Ca2 +-0 Na + soluzione, riducendo al minimo i disossidanti di Ca2 + attraverso la membrana del plasma, &egrave; notevole solo per luce abbastanza luminoso per una frazione significativa del photopigment di candeggina ed &egrave; limitata alla parte del segmento esterno in cui si &egrave; verificata la candeggina. &Egrave; improbabile, quindi, a dare un grande contributo al [Ca2 +] sono per la maggior parte della gamma funzionamento fisiologica dell&#39;asta. Tuttavia, poich&eacute; il rilascio &egrave; met&agrave;-maximal per una candeggina inferiore al 10%, esso non pu&ograve; essere prodotto da un semplice meccanismo ad esempio una modifica l&#39;affinit&agrave; di un sito di legame sulla rodopsina stessa ma deve invece richiedono alcune interazioni pi&ugrave; complesse. In soluzione di Ringer, il Ca2 + in piscina luce apribili possono essere scaricate soltanto dalla diminuzione [Ca2 +] i, che si verifica come chiudere i canali segmento esterno. In luce di sfondo costante o dopo esposizione a saturare l&#39;illuminazione, la frazione di Ca2 + in piscina diminuisce essenzialmente in proporzione [Ca2 +] i come se Ca2 + sono stati essere rimosso da un sito di buffer all&#39;interno del citoplasma. Inoltre, [Ca2 +] si cambia in proporzione la corrente, che circola con poche prove per un contributo da Ca2 + release o altri meccanismi di omeostasi del Ca2 +. Questo indica che il flusso di Ca2 + attraverso la membrana plasmatica &egrave; il principale determinante del segmento esterno Ca2 + concentrazione all&#39;interno del campo di funzionamento normale dell&#39;asta dell&#39;intensit&agrave; luminosa. Una volta Ca2 + &egrave; appurato dal pool rilasciabile, viene ripristinato dopo illuminazione dim apparentemente come il semplice risultato del restauro successivo di buio [Ca2 +] i e la riassociazione di Ca2 + al suo sito di rilascio, ma dopo pi&ugrave; luminoso di luce forse anche come conseguenza di rigenerazione del photopigment.

L&#39;effetto della luce sul calcio segmento esterno nelle barre di Salamandra.

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[ca 2 +] &#x79C1;&#x3068;&#x3001;ca 2 + &#x304C;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x305D;&#x306E;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9; &#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x306B;&#x660E;&#x308B;&#x304F;&#x518D;&#x304A;&#x305D;&#x3089;&#x304F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x30A8;&#x30F3;&#x30BB;&#x30D5;&#x30A1;&#x30ED;&#x30D7;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x518D;&#x751F;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x5149;&#x306E;&#x5F8C;&#x306E;&#x56DE;&#x5FA9;&#x306E;&#x5358;&#x7D14;&#x306A;&#x7D50;&#x679C;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6B21;&#x304C;&#x5FA9;&#x5143;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x5916;&#x5074;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8; &#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0; &#x30B5;&#x30E9;&#x30DE;&#x30F3;&#x30C0;&#x30FC; &#x30ED;&#x30C3;&#x30C9;&#x306E;&#x5149;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;

&#xCE7C;&#xC298;&#xC758; &#xBE5B; &#xC751;&#xB2F5; &#xBCF5;&#xAD6C; &#xB2E8;&#xACC4;&#xB97C; &#xD1B5;&#xC81C; &#xD558; &#xACE0; &#xBE5B; &#xC801;&#xC751; &#xC911; &#xAC10;&#xB3C4; &#xBCC0;&#xC870; &#xCC99;&#xCD94; &#xBD09;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; &#xBA54;&#xC2E0;&#xC800; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xD6C4; &#xBE5B;&#xC744; &#xAC10;&#xC18C; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8; &#xCE7C;&#xC298; &#xB18D;&#xB3C4; ([Ca2 +] &#xB098;) &#xD3D0;&#xC1C4; &#xC21C;&#xD658; &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC; &#xCC44;&#xB110; &#xC218; &#xB610;&#xD55C; &#xC99D;&#xAC00; [Ca2 +] &#xD558; &#xC5EC; Ca2 + &#xB610;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xBC84;&#xD37C; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD558; &#xC5EC; &#xB0B4;&#xAC00; &#xC800;&#xC7A5;, [Ca2 +] &#xBE5B;&#xACFC; &#xC21C;&#xD658; &#xC804;&#xB958; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC790;&#xC138;&#xD788; &#xC870;&#xC0AC;&#xD55C; &#xD761;&#xC785;&#xC758; &#xB3D9;&#xC2DC; &#xCE21;&#xC815; &#xD558; &#xC5EC; &#xB0B4;&#xAC00; &#xD604;&#xC7AC; pipette&#xC640; [Ca2 +]&#xC5D0;&#xC11C; &#xB098; &#xC808;&#xC5F0; &#xB3C4;&#xB871;&#xB1FD; Ambystoma tigrinum&#xC758; &#xB9C9;&#xB300;&#xB294; &#xD615;&#xAD11;&#xC758; &#xC124;&#xB9BD;&#xC744; fluo-5F &#xC5FC;&#xC0C9; &#xD6C4;. 0 Ca2 +&#xC5D0; Ca2 +&#xC758; &#xCD9C;&#xC2DC;&#xB294; &#xCE21;&#xC815; &#xD558;&#xB294; &#xB54C;-0 Na + &#xC194;&#xB8E8;&#xC158;, &#xC6D0;&#xD615;&#xC9C8; &#xB9C9;&#xC5D0;&#xC11C; Ca2 +&#xC758; &#xCD5C;&#xC18C;&#xD654; &#xD50C;&#xB7ED;&#xC2A4; &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xD45C; &#xBC31;&#xC81C;&#xB294; photopigment&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC77C;&#xBD80;&#xBD84;&#xC744; &#xCDA9;&#xBD84;&#xD788; &#xBC1D;&#xC740; &#xBE5B; &#xACE0; &#xD45C; &#xBC31;&#xC81C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8; &#xBD80;&#xBD84;&#xC5D0; &#xC81C;&#xD55C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5B4;&#xB835;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;, &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; [Ca2 +] &#xD070; &#xACF5;&#xD5CC;&#xC744; &#xD560; &#xB9C9;&#xB300;&#xC758; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xB3D9;&#xC791; &#xBC94;&#xC704;&#xC758; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xB098;. &#xADF8;&#xB7FC;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0;, &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4; &#xC774;&#xAE30; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xBC18; &#xCD5C;&#xB300;&#xD55C; 10%&#xC758; &#xD45C; &#xBC31;&#xC81C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; rhodopsin &#xC790;&#xCCB4;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4;&#xC758; &#xBCC0;&#xACBD;&#xACFC; &#xAC19;&#xC740; &#xAC04;&#xB2E8;&#xD55C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xB420; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB300;&#xC2E0; &#xC880; &#xB354; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xC694;&#xAD6C; &#xD574;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBCA8; &#xC194;&#xB8E8;&#xC158;&#xC5D0;&#xC11C; Ca2 + &#xBE5B; releasable &#xD480; &#xC218; &#xCD9C;&#xB825; &#xB420; [Ca2 +] &#xAC10;&#xC18C; &#xD558; &#xC5EC; &#xB2E8;&#xC9C0; &#xB098; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8; &#xCC44;&#xB110;&#xB85C; &#xAC00;&#xAE4C;&#xC774; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;. &#xAFB8;&#xC900;&#xD788; &#xBC30;&#xACBD; &#xC870;&#xBA85; &#xB610;&#xB294; &#xC870;&#xBA85; &#xD3EC;&#xD654;&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C; &#xB41C; &#xD6C4; &#xC218;&#xC601;&#xC7A5;&#xC5D0;&#xC11C; Ca2 +&#xC758; &#xC77C;&#xBD80;&#xBD84; &#xBCF8;&#xC9C8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBE44;&#xB840;&#xD558;&#xC5EC; &#xC904;&#xC5B4;&#xB4ED;&#xB2C8;&#xB2E4; [Ca2 +] &#xB098; Ca2 +&#xC740; &#xC81C;&#xAC70; &#xB418; &#xACE0; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC84;&#xD37C; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB9C8;&#xCE58;. &#xB610;&#xD55C;, [Ca2 +] i &#xC790;&#xCCB4; Ca2 + &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4; &#xB610;&#xB294; &#xD56D;&#xC0C1;&#xC131; Ca2 +&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAE30;&#xC5EC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC57D;&#xAC04;&#xC758; &#xC99D;&#xAC70;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xC21C;&#xD658; &#xC804;&#xB958;&#xC5D0; &#xBE44;&#xB840;&#xD558;&#xC5EC; &#xBCC0;&#xACBD;. &#xC774; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xB9C9;&#xC5D0;&#xC11C; Ca2 +&#xC758; &#xC790; &#xC18D; &#xB9C9;&#xB300;&#xC758; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xB3D9;&#xC791; &#xBE5B;&#xC758; &#xAC15;&#xB3C4; &#xBC94;&#xC704; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8; Ca2 + &#xB18D;&#xB3C4;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xACB0;&#xC815;&#xC790; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Ca2 + releasable &#xD480;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD1F4;&#xC6D0; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;, &#xC77C;&#xB2E8; &#xC5B4;&#xB460; [Ca2 +] &#xB098;&#xB97C; &#xB2E4;&#xC2DC;&#xC758; Ca2 + &#xD6C4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xADF8;&#xAC83;&#xC758; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xB97C; &#xBC1D;&#xAC8C; &#xBE5B; &#xC544;&#xB9C8;&#xB3C4;&#xB294; photopigment&#xC758; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC;&#xB85C; &#xD6C4;&#xC18D; &#xBCF5;&#xC6D0;&#xC758; &#xAC04;&#xB2E8;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC;&#xB85C; &#xBD84;&#xBA85;&#xD788; &#xD76C;&#xBBF8; &#xD55C; &#xC870;&#xBA85;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xBCF5;&#xC6D0;.

&#xB3C4;&#xB871;&#xB1FD; &#xBD09;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8; &#xCE7C;&#xC298;&#xC5D0; &#xBE5B;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC;.

Calcio act&uacute;a como un segundo mensajero en barras de vertebrados, regulaci&oacute;n de la fase de recuperaci&oacute;n de la respuesta de la luz y la modulaci&oacute;n de sensibilidad durante la adaptaci&oacute;n a la luz. Desde la luz no s&oacute;lo disminuye la concentraci&oacute;n de calcio del segmento externo ([Ca2 +] i) cerrando canales cerrada nucle&oacute;tido c&iacute;clicos pero puede tambi&eacute;n aumento de [Ca2 +] i por liberaci&oacute;n de Ca2 + desde sitios de b&uacute;fer o intracelular almacena, examinamos en detalle el efecto de la luz y de circulaci&oacute;n actual en la [Ca2 +] yo haciendo mediciones simult&aacute;neas de succi&oacute;n Pipetee actual y [Ca2 +] i de aislado las barras de la salamandra Ambystoma tigrinum despu&eacute;s de te&ntilde;ir de incorporaci&oacute;n del fluorescente fluo-5F. Cuando se mide la liberaci&oacute;n de Ca2 + en 0 Ca2 +-0 Na + soluci&oacute;n, minimizando flujos de Ca2 + a trav&eacute;s de la membrana plasm&aacute;tica, es importante s&oacute;lo para luz lo suficientemente brillante para blanquear una fracci&oacute;n significativa de la fotopigmento y se limita a la parte del segmento externo en que se produjo el blanqueador. Es poco probable, por lo tanto, para hacer una gran contribuci&oacute;n a la [Ca2 +] i durante la mayor parte de la escala de funcionamiento fisiol&oacute;gico de la varilla. Sin embargo, puesto que es mitad-m&aacute;ximo para un blanqueo de menos del 10%, no puede ser producida por un mecanismo simple como un cambio en la afinidad de un sitio de Uni&oacute;n en rodopsina s&iacute; mismo pero en su lugar debe exigir alguna interacci&oacute;n m&aacute;s compleja. En soluci&oacute;n de Ringer, el Ca2 + en la luz-liberable piscina puede descargarse simplemente por la disminuci&oacute;n en la [Ca2 +] i que se presenta como los canales del segmento externo cerca. En luz de fondo constante o despu&eacute;s de la exposici&oacute;n a saturar la iluminaci&oacute;n, la fracci&oacute;n de Ca2 + en la piscina disminuye esencialmente proporcional a la [Ca2 +] i como si Ca2 + fueron siendo retirados de un sitio de b&uacute;fer en el citoplasma. Adem&aacute;s, [Ca2 +] i se cambia en proporci&oacute;n a la actual, que circula con poca evidencia para una contribuci&oacute;n de Ca2 + liberaci&oacute;n u otros mecanismos de homeostasis del Ca2 +. Esto indica que el flujo de Ca2 + a trav&eacute;s de la membrana plasm&aacute;tica es el determinante principal del segmento externo Ca2 + concentraci&oacute;n dentro del rango de intensidad de luz de funcionamiento normal de la barra. Una vez Ca2 + ha sido descargada de la piscina liberable, se se restaura despu&eacute;s de iluminaci&oacute;n tenue al parecer como el simple resultado de la posterior restauraci&oacute;n de oscuridad [Ca2 +] i y la reconsolidaci&oacute;n de Ca2 + a su sitio de lanzamiento, pero despu&eacute;s m&aacute;s brillante luz quiz&aacute;s tambi&eacute;n como consecuencia de la regeneraci&oacute;n de la fotopigmento.

El efecto de la luz de calcio del segmento externo en las barras de la salamandra.

L&#39;esposizione delle cellule recettore olfattivo per l&#39;odore stimola l&#39;afflusso di Ca(2+) attraverso canali nucleotide-gated cicliche nel piccolo volume entro le ciglia, il sito di trasduzione olfattiva. Il conseguente innalzamento della concentrazione di Ca(2+) intraciliary ha due effetti opposti: attivazione di un&#39;insolito conduttanza Cl(-) eccitatoria e azioni di feedback negativo su vari stadi del meccanismo di trasduzione dell&#39;odore. Studi recenti stanno cominciando a svelare come Ca(2+) esegue questa duplice funzione, e come la dinamica spaziale e temporale dei Ca(2+) modula la risposta degli odori. Le azioni di feedback di Ca(2+) sui diversi elementi della cascata di trasduzione sembrano verificarsi in tempi diversi e sono quindi responsabili per plasmare le diverse parti della risposta alla stimolazione degli odori corrente del recettore.

Calcio, il Messaggero bifronte di trasduzione olfattiva e adattamento.

&#x81ED;&#x6C17;&#x306E;&#x55C5;&#x899A;&#x53D7;&#x5BB9;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x66DD;&#x9732;&#x306F;&#x3001;&#x7E4A;&#x6BDB;&#x5185;&#x306E;&#x5C0F;&#x3055;&#x306A;&#x30DC;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30E0;&#x306B;&#x74B0;&#x72B6;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x306E;Ca&#x6D41;&#x5165;&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x3001;&#x55C5;&#x899A;&#x60C5;&#x5831;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x90E8;&#x4F4D;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3059;&#x308B;&#x3002; &#xFF08; - &#xFF09;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C0;&#x30AF;&#x30BF;&#x30F3;&#x30B9;&#x3001;&#x81ED;&#x6C17;&#x4F1D;&#x9054;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306E;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x8CA0;&#x5E30;&#x9084;&#x306E;&#x52D5;&#x4F5C;&#x7570;&#x5E38;&#x8208;&#x596E;Cl&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#xFF1A;intraciliary&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x4E0A;&#x6607;&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306F;&#x3001;2&#x3064;&#x306E;&#x76F8;&#x53CD;&#x3059;&#x308B;&#x52B9;&#x679C;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x4E8C;&#x91CD;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x5B9F;&#x884C;&#x3059;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x89E3;&#x660E;&#x3057;&#x59CB;&#x3081;&#x3066;&#x3001;&#x3069;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;Ca&#x306E;&#x7A7A;&#x9593;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6642;&#x9593;&#x7684;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x81ED;&#x6C17;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x4F1D;&#x9054;&#x30AB;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30C9;&#x306E;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;&#x8981;&#x7D20;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;Ca&#x306E;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30C9;&#x30D0;&#x30C3;&#x30AF;&#x884C;&#x52D5;&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x6642;&#x9593;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30EB;&#x3067;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x898B;&#x3048;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x523A;&#x6FC0;&#x3092;&#x5302;&#x3044;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306B;&#x96FB;&#x6D41;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x90E8;&#x5206;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x8CAC;&#x4EFB;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x3001;&#x55C5;&#x899A;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C0;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3068;&#x9069;&#x5FDC;&#x306E;&#x4E8C;&#x3064;&#x306E;&#x9854;&#x306E;&#x30E1;&#x30C3;&#x30BB;&#x30F3;&#x30B8;&#x30E3;&#x30FC;

&#x6C14;&#x5473;&#x55C5;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x63A5;&#x89E6;&#x523A;&#x6FC0;&#x5230;&#x5C0F;&#x5377;&#x5185;&#x7EA4;&#x6BDB;&#x7684;&#x55C5;&#x89C9;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x7F51;&#x7AD9;&#x901A;&#x8FC7;&#x73AF;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x95E8;&#x63A7;&#x901A;&#x9053;&#x7684;&#x7ECF;&#x5927;&#x91CF;&#x6D8C;&#x5165;&#x3002;Intraciliary &#x7ECF;&#x6D53;&#x5EA6;&#x76F8;&#x5E94;&#x4E0A;&#x5347;&#x4E86;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5BF9;&#x7ACB;&#x7684;&#x6548;&#x679C;&#xFF1A; &#x4E0D;&#x5BFB;&#x5E38;&#x7684;&#x5174;&#x594B;&#x6027; Cl(-) &#x7535;&#x5BFC;&#x548C;&#x8D1F;&#x9762;&#x53CD;&#x9988;&#x884C;&#x52A8;&#x5BF9;&#x5404;&#x9636;&#x6BB5;&#x7684;&#x6C14;&#x5473;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x673A;&#x5236;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x5DF2;&#x5F00;&#x59CB;&#x89E3;&#x5F00;&#x7ECF;&#x5982;&#x4F55;&#x6267;&#x884C;&#x8FD9;&#x79CD;&#x53CC;&#x91CD;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x5982;&#x4F55;&#x7ECF;&#x7684;&#x65F6;&#x7A7A;&#x52A8;&#x6001;&#x8C03;&#x8282;&#x6C14;&#x5473;&#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x7ECF;&#x4E0D;&#x540C;&#x8981;&#x7D20;&#x7684;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x68AF;&#x7EA7;&#x7684;&#x53CD;&#x9988;&#x884C;&#x52A8;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x5728;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x5C3A;&#x5EA6;&#x4E0A;&#x53D1;&#x751F;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#x8D1F;&#x8D23;&#x5851;&#x9020;&#x5BF9;&#x6C14;&#x5473;&#x523A;&#x6FC0;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;&#x5F53;&#x524D;&#x54CD;&#x5E94;&#x7684;&#x4E0D;&#x540C;&#x90E8;&#x5206;&#x3002;

&#x9499;&#x3001; &#x55C5;&#x89C9;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x548C;&#x9002;&#x5E94;&#x7684;&#x4E24;&#x9762;&#x6D3E;&#x4F7F;&#x8005;&#x3002;

Exposure of olfactory receptor cells to odour stimulates the influx of Ca(2+) through cyclic nucleotide-gated channels into the small volume within the cilia, the site of olfactory transduction. The consequent rise in intraciliary Ca(2+) concentration has two opposing effects: activation of an unusual excitatory Cl(-) conductance, and negative feedback actions on various stages of the odour transduction mechanism. Recent studies are beginning to unravel how Ca(2+) performs this dual function, and how the spatial and temporal dynamics of Ca(2+) modulate the odour response. The feedback actions of Ca(2+) on different elements of the transduction cascade seem to occur on different timescales, and are therefore responsible for shaping different parts of the receptor current response to odour stimulation.

Calcium, the two-faced messenger of olfactory transduction and adaptation.

L&#x26;#39;exposition de cellules r&#xE9;ceptrices olfactives &#xE0; l&#x26;#39;odeur stimule l&#x26;#39;afflux de Ca (2 +) &#xE0; travers les nucl&#xE9;otides cycliques-d&#xE9;pendants canaux dans le petit volume dans les cils, le site de la transduction olfactive. La hausse cons&#xE9;quente de intraciliary Ca (2 +) la concentration a deux effets oppos&#xE9;s: l&#x26;#39;activation d&#x26;#39;un Cl inhabituelle excitateur (-) la conductance, et les actions de r&#xE9;troaction n&#xE9;gative sur les diff&#xE9;rentes &#xE9;tapes du m&#xE9;canisme de transduction odeur. Des &#xE9;tudes r&#xE9;centes commencent &#xE0; &#xE9;claircir comment Ca (2 +) effectue cette double fonction, et comment les dynamiques spatiales et temporelles de Ca (2 +) de moduler la r&#xE9;ponse odeur. Les actions de feedback de Ca (2 +) sur les diff&#xE9;rents &#xE9;l&#xE9;ments de la cascade de transduction semble se produire sur diff&#xE9;rentes &#xE9;chelles de temps, et sont donc responsables de l&#x26;#39;&#xE9;laboration de diff&#xE9;rentes parties du la r&#xE9;ponse du r&#xE9;cepteur de courant aux odeurs de stimulation.

Calcium, le Messager bi-face de la transduction olfactive et l&#x26;#39;adaptation

Calcium, das mit zwei Gesichtern Bote der olfaktorischen Wahrnehmung und Anpassung.

&#xD6C4; &#xAC01; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xB0C4;&#xC0C8;&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C; &#xD6C4; &#xAC01; &#xBCC0;&#xD658; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xB0B4; &#xC18D;&#xB208;&#xC379;, &#xC791;&#xC740; &#xBCFC;&#xB968;&#xC73C;&#xB85C; &#xC8FC;&#xAE30;&#xC801; &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC; &#xCC44;&#xB110;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; ca(2+)&#xC758; &#xC720;&#xC785;&#xC744; &#xC790;&#xADF9;. Intraciliary Ca(2+) &#xB18D;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xB530;&#xB978; &#xC0C1;&#xC2B9;&#xC774; &#xB450; &#xBC18;&#xB300; &#xD6A8;&#xACFC;: &#xB0C4;&#xC0C8; &#xBCC0;&#xD658; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0; &#xBE44;&#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xD765;&#xBD84; &#xC131;&#xC758; Cl(-) &#xC804;&#xB3C4;&#xB3C4; &#xBC0F; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xD53C;&#xB4DC;&#xBC31; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;. &#xCD5C;&#xADFC; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xD574;&#xBA85; ca(2+)&#xC774; &#xB4C0;&#xC5BC; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC218;&#xD589; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95; &#xBC0F; ca(2+)&#xC758; &#xACF5;&#xAC04; &#xBC0F; &#xC2DC;&#xAC04; &#xC5ED;&#xD559; &#xB0C4;&#xC0C8; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC2DC;&#xC791; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBCC0;&#xD658; &#xCE90;&#xC2A4;&#xCF00;&#xC774;&#xB4DC;&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xC694;&#xC18C;&#xC5D0; ca(2+)&#xC758; &#xD53C;&#xB4DC;&#xBC31; &#xC791;&#xC5C5; &#xB2E4;&#xB978; timescales&#xC5D0; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xAC83; &#xD558; &#xACE0; &#xADF8;&#xB7EC;&#xBBC0;&#xB85C; &#xB0C4;&#xC0C8; &#xC790;&#xADF9; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD604;&#xC7AC; &#xC751;&#xB2F5;&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xBD80;&#xBD84;&#xC744; &#xD615;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCC45;&#xC784;.

&#xCE7C;&#xC298;, &#xD6C4; &#xAC01; &#xBCC0;&#xD658; &#xBC0F; &#xC801;&#xC751;&#xC758; &#xB450; &#xC5BC;&#xAD74; &#xBA54;&#xC2E0;&#xC800;.

La exposici&#xF3;n de las c&#xE9;lulas receptoras del olfato al olor estimula la entrada de Ca (2 +) a trav&#xE9;s de nucle&#xF3;tidos c&#xED;clicos-canales con compuertas en el peque&#xF1;o volumen dentro de los cilios, el sitio de la transducci&#xF3;n olfativa. El consiguiente aumento de intraciliary Ca (2 +) la concentraci&#xF3;n tiene dos efectos opuestos: la activaci&#xF3;n de una excitaci&#xF3;n inusual Cl (-) de la conductancia, y las acciones de retroalimentaci&#xF3;n negativa en las distintas etapas del mecanismo de transducci&#xF3;n de olor. Los estudios recientes est&#xE1;n empezando a desentra&#xF1;ar c&#xF3;mo Ca (2 +) lleva a cabo esta doble funci&#xF3;n, y c&#xF3;mo la din&#xE1;mica espacial y temporal de Ca (2 +) modulan la respuesta olor. Las acciones de retroalimentaci&#xF3;n de Ca (2 +) en diferentes elementos de la cascada de transducci&#xF3;n parece ocurrir en escalas de tiempo diferentes, y son por tanto responsable de dar forma a las diferentes partes de la respuesta del receptor de corriente al olor estimulaci&#xF3;n.

El calcio, el Mensajero de dos caras de la transducci&#xF3;n olfativa y la adaptaci&#xF3;n

&#x5728;&#x5BA4;&#x6E29;&#x4E0B;&#x4F7F;&#x7528;&#x56DB;&#x4E2A;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x7EC4;&#x4E2D;&#x7684;&#x5BBD;&#x677E;&#x7684;&#x4FEE;&#x8865;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x7535;&#x538B;&#x94B3;&#x914D;&#x7F6E;&#x6BD4;&#x8F83;&#x4E86;&#x79BB;&#x5B50;&#x7535;&#x6D41;&#x7684;&#x4E0D;&#x53D8;&#x548C; detubulated &#x9752;&#x86D9;&#x5320;&#x808C;&#x8089;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x3002;(I) &#x6D4B;&#x8BD5;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x662F;&#x7531;&#x53C2;&#x4E0E;&#x5BFC;&#x5165;&#x548C;&#x9000;&#x51FA;&#x7684;&#x80DE;&#x5916;&#x7518;&#x6CB9;&#x8DDF;&#x66B4;&#x9732;&#x4E8E; Ca2 &#x7684;&#x5148;&#x524D;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x7684;&#x6E17;&#x900F;&#x6027;&#x4F11;&#x514B;&#x534F;&#x8BAE; detubulated + Mg2 +-&#x6797;&#x683C;&#x89E3;&#x51B3;&#x65B9;&#x6848;&#x548C;&#x51B7;&#x5374;&#x3002;&#x63A7;&#x5236;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x5E78;&#x514D;&#x4E8E;&#x6E17;&#x900F;&#x6027;&#x4F11;&#x514B;&#x548C; (ii) &#x53EA;&#x662F;&#x7814;&#x7A76;&#x5728;&#x6B63;&#x5E38;&#x7684;&#x6797;&#x683C;&#x89E3;&#x51B3;&#x65B9;&#x6848;&#xFF0C;(iii) &#x66B4;&#x9732;&#x4E8E; 30 &#x5206;&#x949F;&#x7684;&#x7A33;&#x5B9A;&#x51B7;&#x5374;&#x5230; 9-10 &#x5EA6; C &#x4E4B;&#x524D;&#x7684;&#x7535;&#x751F;&#x7406;&#x7814;&#x7A76;&#x6216; (iv) &#x66B4;&#x9732;&#x548C;&#x7518;&#x6CB9;&#x6797;&#x683C;&#x6EB6;&#x6DB2;&#x4E2D;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;Detubulation &#x5B58;&#x5728;&#x88AB;&#x786E;&#x8BA4;&#x901A;&#x8FC7;&#x5E9F;&#x9664;&#x8BC4;&#x4F30;&#x7684;&#x6240;&#x6709;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x7EC4;&#x6216;&#x5176;&#x5B83;&#x7684;&#x5EF6;&#x8FDF;&#x540E;-&#x6781;&#x5316;&#x901A;&#x5E38;&#x5173;&#x8054;&#x52A8;&#x4F5C;&#x7535;&#x4F4D;&#x7E41;&#x6B96;&#x6210;&#x6A2A;&#x5411; (T) &#x80BE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x3002;&#x6240;&#x6709;&#x5149;&#x7EA4;&#x7EC4;&#x90FD;&#x663E;&#x793A;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x9759;&#x606F;&#x7535;&#x4F4D; (-80 &#x81F3;-90 mV) &#x4ECE;&#x800C;&#x786E;&#x4FDD;&#x4E00;&#x81F4;&#x7684;&#x57FA;&#x51C6;&#x7EBF;&#x7535;&#x538B;&#x4ECE;&#x4E2D;&#x65BD;&#x52A0;&#x7535;&#x538B;&#x94B3;&#x6B65;&#x9AA4;&#x4E86;&#x3002;&#x5728;&#x4E09;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x53D8;&#x7684;&#x808C;&#x8089;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x63A7;&#x5236;&#x7EC4; &#xFF08;ii)-(iv) &#x80FD;&#x5E78;&#x514D;&#x6E17;&#x900F;&#x6027;&#x4F11;&#x514B;&#x8868;&#x660E;&#x8FD9;&#x4E24;&#x79CD;&#x5916;&#x6765;&#x7684; Na + &#x548C;&#x5EF6;&#x8FDF;&#x6574;&#x6D41;&#x5916;&#x5411; &#xFF08;K +&#xFF09; &#x7535;&#x6D41;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x5728;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x7EC4; (i) &#x8868;&#x660E; detubulated &#x808C;&#x8089;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7684;&#x4FEE;&#x8865;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x53EA;&#x5EF6;&#x8FDF;&#x5916;&#x5411;&#x7535;&#x6D41;&#xFF0C;&#x7B26;&#x5408;&#x5BF9;&#x6BD4;&#x8D21;&#x732E; Na + &#x548C; K + &#x7535;&#x6D41;&#x4ECE;&#x533A;&#x57DF;&#x7684;&#x819C;&#x53D7;&#x5F71;&#x54CD;&#x6216;&#x7531; detubulation &#x8FC7;&#x7A0B;&#x80FD;&#x5E78;&#x514D;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x7535;&#x538B;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6027;&#x3001; &#x6700;&#x5927;&#x7A33;&#x6001;&#x632F;&#x5E45;&#x548C; timecourses &#x7684;&#x5EF6;&#x8FDF;&#x5916;&#x5411;&#x7535;&#x6D41;&#x5B88;&#x6052;&#x901A;&#x8FC7;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x7684;&#x6240;&#x6709;&#x7EC4;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E0D;&#x662F;&#x7BA1;&#x72B6;&#x7684;&#x819C;&#x8868;&#x9762;&#x9020;&#x6210;&#x66F4;&#x5927;&#x7684;&#x7535;&#x6D41;&#x7684;&#x4E24;&#x6816;&#x7C7B;&#x52A8;&#x7269;&#x9AA8;&#x9ABC;&#x808C;&#x7684;&#x5EF6;&#x8FDF;&#x6574;&#x6D41;&#x3002;

Detubulation &#x5B9E;&#x9A8C;&#x672C;&#x571F;&#x5316;&#x5EF6;&#x8FDF;&#x7684;&#x6574;&#x6D41;&#x7535;&#x6D41;&#x5BF9;&#x4E24;&#x6816;&#x7C7B;&#x52A8;&#x7269;&#x9AA8;&#x9ABC;&#x808C;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7684;&#x8868;&#x9762;&#x819C;&#x3002;

Ionic currents in intact and detubulated frog sartorius muscle fibres were compared at room temperature using a loose-patch voltage clamp configuration in four experimental groups. The test fibres (i) were detubulated by a previously established osmotic shock protocol that involved the introduction and withdrawal of extracellular glycerol followed by exposure to Ca2+/Mg2+-Ringer solution and cooling. The control fibres were spared osmotic shock and (ii) simply studied in normal Ringer solution, (iii) exposed to 30 min of steady cooling to 9-10 degrees C before electrophysiological study or (iv) exposed to and studied in glycerol-Ringer solution. The presence or absence of detubulation was confirmed for all the experimental groups through assessing for the abolition or otherwise of the delayed after-depolarisation normally associated with action potential propagation into the transverse (T) tubules. All fibre groups showed similar resting potentials (-80 to -90 mV) thus ensuring consistent baseline voltages from which the voltage clamp steps were imposed. The intact muscle fibres in the three control groups (ii)-(iv) spared osmotic shock showed both inward Na+ and delayed rectifier outward (K+) currents. In contrast, patches from detubulated muscle fibres in the test group (i) showed only delayed outward currents, consistent with contrasting contributions to Na+ and K+ currents from regions of membrane affected or spared by the detubulation procedure. Nevertheless, the voltage dependence, maximum steady state amplitudes and timecourses of the delayed outward currents were conserved through all the experimental groups. These findings suggest that the surface as opposed to the tubular membrane contributes the greater part of the delayed rectifier current in amphibian skeletal muscle.

Detubulation experiments localise delayed rectifier currents to the surface membrane of amphibian skeletal muscle fibres.

Les courants ioniques dans intact et les fibres de muscle sartorius detubulated grenouille ont &eacute;t&eacute; compar&eacute;s &agrave; la temp&eacute;rature ambiante en utilisant une configuration de tension l&acirc;che-patch clamp dans quatre groupes exp&eacute;rimentaux. Les fibres de test (i) ont &eacute;t&eacute; detubulated par un protocole &eacute;tablie ant&eacute;rieurement un choc osmotique qui implique l&#39;introduction et le retrait du glyc&eacute;rol extracellulaire suivie d&#39;une exposition au Ca2 + / Mg2 +-une solution de Ringer et refroidissement. Les fibres de contr&ocirc;le ont &eacute;t&eacute; &eacute;pargn&eacute;s un choc osmotique et (ii) tout simplement &eacute;tudi&eacute; dans une solution de Ringer normale, (iii) expos&eacute;e &agrave; 30 min de refroidissement stable &agrave; 9-10 degr&eacute;s C avant &eacute;tude &eacute;lectrophysiologique ou (iv) expos&eacute;s &agrave; et a &eacute;tudi&eacute; dans une solution de glyc&eacute;rol-Ringer. La pr&eacute;sence ou l&#39;absence de detubulation a &eacute;t&eacute; confirm&eacute;e pour tous les groupes exp&eacute;rimentaux en &eacute;valuant la suppression ou non de la retard&eacute;e apr&egrave;s-d&eacute;polarisation normalement associ&eacute; &agrave; la propagation du potentiel d&#39;action dans les tubules transverses de (T). Tous les groupes de fibres a montr&eacute; des potentiels de repos similaires (-80 &agrave; -90 mV) assurant ainsi des tensions de r&eacute;f&eacute;rence coh&eacute;rente dont les &eacute;tapes de serrage de tension ont &eacute;t&eacute; impos&eacute;es. Les fibres musculaires intactes dans les trois groupes &agrave; risque (choc osmotique ii)-(iv) &eacute;pargn&eacute; a montr&eacute; les deux Na + entrant et retard&eacute; les courants sortants (K +) redresseur. En revanche, rustines de fibres musculaires detubulated dans le groupe test (i) ont montr&eacute; seulement retard&eacute; les courants sortants, compatibles avec contrastant contributions &agrave; Na + et K + courants des r&eacute;gions de membrane touch&eacute;es ou &eacute;pargn&eacute;es par la proc&eacute;dure detubulation. N&eacute;anmoins, la d&eacute;pendance de la tension, les amplitudes de l&#39;&eacute;tat stationnaire maximale et les timecourses des courants sortants retard&eacute;es ont &eacute;t&eacute; conserv&eacute;s par le biais de tous les groupes exp&eacute;rimentaux. Ces r&eacute;sultats sugg&egrave;rent que la surface plut&ocirc;t que la membrane tubulaire contribue &agrave; la majeure partie de l&#39;actuel dans le muscle squelettique amphibiens de redresseur retard&eacute;.

Exp&eacute;riences Detubulation localiser courants redresseur retard&eacute; &agrave; la membrane de surface des fibres musculaires squelettiques amphibiens.

Detubulation Experimente lokalisieren verz&#xF6;gerten Gleichrichter Str&#xF6;mungen an der Oberfl&#xE4;che der Membran Amphibien Skelettmuskelfasern.

Correnti ioniche in intatto e fibre muscolari detubulated rana sartorius sono stati confrontati a temperatura ambiente utilizzando una configurazione di morsetto allentato-patch tensione in quattro gruppi sperimentali. Le fibre di prova (i) sono stati detubulated da un protocollo precedentemente stabilito scossa osmotica che ha coinvolto l&#39;introduzione e il ritiro di glicerolo extracellulare seguita da esposizione al Ca2 + Mg2 +-soluzione Ringer e raffreddamento. Le fibre di controllo erano state risparmiate scossa osmotica e (ii) semplicemente studiato normale soluzione di Ringer, (iii) esposti a 30 min di raffreddamento costante al 9-10 gradi C prima studio elettrofisiologico o (iv) esposti a e studiato in soluzione Ringer glicerolo. La presenza o l&#39;assenza di detubulation &egrave; stata confermata per tutti i gruppi sperimentali attraverso la valutazione per l&#39;abolizione o meno della ritardata dopo-depolarizzazione normalmente associati con la propagazione del potenziale d&#39;azione in tubuli trasversali (T). Tutti i gruppi di fibre ha mostrato simili potenziali di riposo (-80 a -90 mV) garantendo cos&igrave; tensioni coerente linea di base da cui sono stati imposti i passi del morsetto di tensione. Le fibre muscolari intatta nei tre controllo gruppi (scossa osmotica ii)-(iv) risparmiato ha mostrato sia verso l&#39;interno di Na + e ritardato raddrizzatore esterno (K +) correnti. Al contrario, le patch da fibre muscolari detubulated nel gruppo test (i) ha mostrato solo ritardato correnti verso l&#39;esterno, coerente con contributi di Na + e K + correnti dalle regioni della membrana colpiti o risparmiata dalla procedura detubulation a contrasto. Tuttavia, la dipendenza dalla tensione, Ampiezze massime stazionarie e timecourses di ritardate correnti verso l&#39;esterno sono stati conservati attraverso tutti i gruppi sperimentali. Questi risultati suggeriscono che la superficie in contrasto con la membrana tubolare contribuisce la maggior parte del ritardato raddrizzatore corrente nel muscolo scheletrico di anfibi.

Detubulation esperimenti localizzare ritardato raddrizzatore correnti alla membrana superficiale delle fibre del muscolo scheletrico anfibio.

&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x96FB;&#x6D41;&#x3067;&#x305D;&#x306E;&#x307E;&#x307E; detubulated &#x30AB;&#x30A8;&#x30EB;&#x7E2B;&#x5DE5;&#x7B4B;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x306F;&#x3001;&#x7DE9;&#x3044;&#x30D1;&#x30C3;&#x30C1;&#x96FB;&#x5727;&#x30AF;&#x30E9;&#x30F3;&#x30D7;&#x306E;&#x69CB;&#x6210;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066; 4 &#x3064;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x3067;&#x5BA4;&#x6E29;&#x3067;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x7E4A;&#x7DAD; (i) &#x5C0E;&#x5165;&#x3068; ca 2 &#x3078;&#x306E;&#x66B4;&#x9732;&#x306B;&#x7D9A;&#x3044;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x306E;&#x30B0;&#x30EA;&#x30BB;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x306E;&#x64A4;&#x9000;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6D78;&#x900F;&#x30B7;&#x30E7;&#x30C3;&#x30AF; &#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30B3;&#x30EB;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066; detubulated &#x3055;&#x308C;&#x305F; c++/cli mg 2 +-&#x30EA;&#x30F3;&#x30AC;&#x30FC;&#x6DB2;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x51B7;&#x5374;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x7E4A;&#x7DAD;&#x9AD8;&#x6D78;&#x900F;&#x5727;&#x523A;&#x6FC0;&#x3092;&#x514D;&#x308C;&#x305F;&#x3057;&#x3001;(ii) &#x5358;&#x306B;&#x52C9;&#x5F37;&#x3067;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F; 9 10 &#x2103; &#x306B;&#x51B7;&#x5374;&#x306E;&#x96FB;&#x6C17;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x3084; (iv) &#x306B;&#x3055;&#x3089;&#x3055;&#x30B0;&#x30EA;&#x30BB;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB; &#x30EA;&#x30F3;&#x30B2;&#x30EB;&#x6DB2;&#x3067;&#x52C9;&#x5F37;&#x3059;&#x308B;&#x524D;&#x306B; 30 &#x5206;&#x306B;&#x3055;&#x3089;&#x3055;&#x901A;&#x5E38;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AC;&#x30FC;&#x6DB2; (iii)&#x3002;Detubulation &#x306E;&#x6709;&#x7121;&#x306F;&#x5EC3;&#x6B62;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x5B9F;&#x9A13;&#x7FA4;&#x3092;&#x78BA;&#x5B9A;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x305D;&#x308C;&#x4EE5;&#x5916;&#x306E;&#x5834;&#x5408;&#x3001;&#x9045;&#x5EF6;&#x5F8C;-&#x6D3B;&#x52D5;&#x96FB;&#x4F4D;&#x4F1D;&#x642C;&#x6A2A; (T) &#x306E;&#x5C3F;&#x7D30;&#x7BA1;&#x306B;&#x901A;&#x5E38;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x5206;&#x6975;&#x306E;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30D0; &#x30FB; &#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x5B89;&#x9759;&#x6642;&#x96FB;&#x4F4D;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F; (-80-90 &#x306B; mV) &#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x96FB;&#x5727;&#x30AF;&#x30E9;&#x30F3;&#x30D7;&#x624B;&#x9806;&#x304B;&#x3089;&#x304C;&#x8AB2;&#x305B;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x4E00;&#x8CAB;&#x6027;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x57FA;&#x6E96;&#x96FB;&#x5727;&#x3092;&#x78BA;&#x4FDD;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x7B4B;&#x7E4A;&#x7DAD;&#x3001;3 &#x3064;&#x306E;&#x5BFE;&#x7167;&#x7FA4; (&#x514D;&#x308C;&#x308B; ii)-(iv) &#x9AD8;&#x6D78;&#x900F;&#x5727;&#x523A;&#x6FC0;&#x4E21;&#x65B9;&#x5BFE;&#x5185; Na + &#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3057;&#x3001;&#x9045;&#x5EF6;&#x6574;&#x6D41;&#x5668;&#x3001;&#x5916;&#x5411;&#x304D;&#x96FB;&#x6D41; &#xFF08;K +&#xFF09;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x30D1;&#x30C3;&#x30C1; detubulated &#x7B4B;&#x7E4A;&#x7DAD;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3001;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8; &#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7; (i) &#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x307F;&#x5916;&#x5411;&#x304D;&#x96FB;&#x6D41;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x308B; detubulation &#x30D7;&#x30ED;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B8;&#x30E3;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x514D;&#x308C;&#x308B;&#x819C;&#x306E;&#x5730;&#x57DF;&#x304B;&#x3089; Na + &#x3068; K + &#x96FB;&#x6D41;&#x3078;&#x306E;&#x8CA2;&#x732E;&#x306F;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x3067;&#x4E00;&#x8CAB;&#x6027;&#x306E;&#x3042;&#x308B;&#x9045;&#x5EF6;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x6700;&#x5927;&#x5B9A;&#x5E38;&#x632F;&#x5E45;&#x3001;timecourses &#x9045;&#x5EF6;&#x5916;&#x5411;&#x304D;&#x96FB;&#x6D41;&#x306E;&#x96FB;&#x5727;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x5B9F;&#x9A13;&#x7684;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x3092;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x7BA1;&#x72B6;&#x819C;&#x3068;&#x306F;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x8868;&#x9762;&#x4E21;&#x751F;&#x985E;&#x306E;&#x9AA8;&#x683C;&#x7B4B;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x96FB;&#x6D41;&#x9045;&#x5EF6;&#x6574;&#x6D41;&#x306E;&#x5927;&#x304D;&#x3044;&#x90E8;&#x5206;&#x3092;&#x8CA2;&#x732E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

Detubulation &#x5B9F;&#x9A13;&#x9045;&#x5EF6;&#x6574;&#x6D41;&#x96FB;&#x6D41;&#x4E21;&#x751F;&#x985E;&#x306E;&#x9AA8;&#x683C;&#x7B4B;&#x7E4A;&#x7DAD;&#x306E;&#x819C;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

4 &#xC2E4;&#xD5D8; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD328;&#xCE58; &#xB290;&#xC2A8;&#xD55C; &#xC804;&#xC555; &#xD074;&#xB7A8;&#xD504; &#xAD6C;&#xC131;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC2E4; &#xC628;&#xC5D0;&#xC11C; &#xADF8;&#xB300;&#xB85C;&#xC5D0; &#xC774;&#xC628; &#xC804;&#xB958;&#xC640; detubulated &#xAC1C;&#xAD6C;&#xB9AC; &#xC0AC;&#xD1A0;&#xB9AC; &#xADFC;&#xC721; &#xC12C;&#xC720; &#xBE44;&#xAD50; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. (I) &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC12C;&#xC720; &#xD588;&#xB2E4; &#xAD00;&#xB828; &#xC18C;&#xAC1C; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xAE00;&#xB9AC;&#xC138;&#xB864; ca2&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB2E4;&#xC74C;&#xC758; &#xCCA0;&#xC218; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC124;&#xB9BD; &#xB41C; &#xC0BC; &#xD22C; &#xCDA9;&#xACA9; &#xD504;&#xB85C;&#xD1A0;&#xCF5C; detubulated + Mg2 +-&#xBCA8; &#xC194;&#xB8E8;&#xC158; &#xBC0F; &#xB0C9;&#xAC01;. (Ii)&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC04;&#xB2E8; &#xD558; &#xAC8C; &#xACF5;&#xBD80; &#xD558; &#xACE0; &#xC81C;&#xC5B4; &#xC12C;&#xC720; &#xC0BC; &#xD22C; &#xCDA9;&#xACA9;&#xC744; &#xACAA;&#xC5C8;&#xB358; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xBCA8;&#xC18C;&#xB9AC; &#xC194;&#xB8E8;&#xC158;, (iii)-9-10&#xB3C4; C&#xC5D0; &#xAFB8;&#xC900;&#xD55C; &#xB0C9;&#xAC01; electrophysiological &#xC5F0;&#xAD6C; &#xB610;&#xB294; (iv)&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C; &#xBC0F; &#xAE00;&#xB9AC;&#xC138;&#xB864; &#xBCA8; &#xC194;&#xB8E8;&#xC158;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACF5;&#xBD80; &#xD558;&#xAE30; &#xC804;&#xC5D0; 30 &#xBD84; &#xB178;&#xCD9C;. Detubulation&#xC758; &#xC874;&#xC7AC; &#xC720;&#xBB34;&#xB294; &#xD3D0;&#xC9C0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD1B5;&#xD574; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD655;&#xC778; &#xB610;&#xB294; &#xAE30;&#xD0C0;&#xB294; &#xC9C0;&#xC5F0;&#xB41C; &#xD6C4;-depolarisation &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC00;&#xB85C; (T) tubules&#xC5D0; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC804;&#xC704; &#xC804;&#xD30C;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C;&#xC758;. &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC12C;&#xC720; &#xADF8;&#xB8F9; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xD734;&#xC2DD; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4; (-80-90&#xC5D0; mV) &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC804;&#xC555; &#xD074;&#xB7A8;&#xD504; &#xB2E8;&#xACC4; &#xBD80;&#xACFC; &#xD588;&#xB2E4; &#xC77C;&#xAD00; &#xB41C; &#xAE30;&#xC900; &#xC804;&#xC555;&#xC744; &#xBCF4;&#xC7A5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. 3&#xC5D0;&#xC11C; &#xADF8;&#xB300;&#xB85C; &#xADFC;&#xC721; &#xC12C;&#xC720; &#xC81C;&#xC5B4; &#xADF8;&#xB8F9; (ii)-(iv) &#xAD6C;&#xD574; &#xC900; &#xC0BC; &#xD22C; &#xCDA9;&#xACA9; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC; &#xBAA8;&#xB450; &#xC548;&#xCABD;&#xC73C;&#xB85C; Na + &#xBC0F; &#xC9C0;&#xC5F0; &#xC804;&#xB958; &#xC815;&#xB958;&#xAE30; &#xBC14;&#xAE65;&#xCABD; (K +). &#xBC18;&#xBA74;, &#xD328;&#xCE58; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xADF8;&#xB8F9; (i)&#xC5D0;&#xC11C; detubulated &#xADFC;&#xC721; &#xC12C;&#xC720;&#xB85C; &#xBC14;&#xAE65;&#xCABD;&#xC73C;&#xB85C; &#xC804;&#xB958;, &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBC1B;&#xB294; &#xB610;&#xB294; detubulation &#xC808;&#xCC28;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB9C9;&#xC758; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; Na +&#xC640; K + &#xC804;&#xB958;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xB300;&#xC870;&#xC640; &#xC77C;&#xAD00; &#xB41C; &#xC9C0;&#xC5F0;. &#xADF8;&#xB7FC;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0;, &#xC804;&#xC555; &#xC758;&#xC874;&#xC131;, &#xCD5C;&#xB300; &#xC548;&#xC815; &#xC0C1;&#xD0DC; &#xC9C4;&#xD3ED; &#xBC0F; &#xC9C0;&#xC5F0;&#xB41C; &#xBC14;&#xAE65;&#xCABD;&#xC73C;&#xB85C; &#xD574;&#xB958;&#xC758; timecourses&#xB294; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xBCF4;&#xC874; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xAD00; &#xB9C9; &#xBC18;&#xB300; &#xD45C;&#xBA74; &#xC591;&#xC11C;&#xB958; &#xACE8;&#xACA9; &#xADFC;&#xC721;&#xC5D0; &#xD604;&#xC7AC; &#xC9C0;&#xC5F0;&#xB41C; &#xC815;&#xB958;&#xAE30;&#xC758; &#xB9CE;&#xC740; &#xBD80;&#xBD84;&#xC744; &#xAE30;&#xC5EC; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Detubulation &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC591;&#xC11C;&#xB958; &#xACE8;&#xACA9; &#xADFC;&#xC721; &#xC12C;&#xC720;&#xC758; &#xD45C;&#xBA74; &#xB9C9; &#xC9C0;&#xC5F0;&#xB41C; &#xC815;&#xB958; &#xC804;&#xB958;&#xB97C; &#xB458;&#xB2E4;.

Las corrientes i&oacute;nicas en intacto y fibras musculares de detubulated rana sartorius se compararon a temperatura ambiente utilizando una configuraci&oacute;n de abrazadera de tensi&oacute;n flojo-parche en cuatro grupos experimentales. Las fibras de la prueba (i) fueron detubulated por un protocolo previamente establecido choque osm&oacute;tico que implic&oacute; la introducci&oacute;n y retirada de glicerol extracelular, seguida por la exposici&oacute;n a Ca2 + Mg2 +-soluci&oacute;n de Ringer y enfriamiento. Las fibras de control se salvaron choque osm&oacute;tico y (ii) simplemente estudi&oacute; en soluci&oacute;n de Ringer normal, (iii) expuesto a 30 min de enfriamiento constante a 9-10 grados C antes estudio electrofisiol&oacute;gico o (iv) expuestos a y estudi&oacute; en soluci&oacute;n de glicerol-Ringer. La presencia o ausencia de detubulation fue confirmada por todos los grupos experimentales a trav&eacute;s de la evaluaci&oacute;n para la abolici&oacute;n o no de la normalmente asociada a la propagaci&oacute;n del potencial de acci&oacute;n en los t&uacute;bulos (T) transversales retrasada despu&eacute;s de despolarizaci&oacute;n. Todos los grupos de fibra mostraron similares potenciales de reposo (-80 a -90 mV) asegurando as&iacute; los voltajes de l&iacute;nea de base consistente que impusieron los pasos de la abrazadera de tensi&oacute;n. Las fibras de m&uacute;sculo intacto en los tres controlar grupos (choque osm&oacute;tico de ii)-(iv) ahorrado demostr&oacute; tanto hacia el interior de Na + y retrasado rectificador hacia afuera (K +) corrientes. En cambio, parches de detubulated las fibras musculares en el grupo de prueba (i) mostr&oacute; s&oacute;lo retrasaron corrientes hacia afuera, consistentes con contrastes contribuciones a Na + y K + corrientes de regiones de la membrana afectados o por el procedimiento de detubulation. Sin embargo, la dependencia de voltaje, las amplitudes m&aacute;xima de estado estacionario y timecourses de las corrientes hacia fuera retrasadas se conservaron a trav&eacute;s de todos los grupos experimentales. Estos resultados sugieren que la superficie en comparaci&oacute;n con la membrana tubular contribuye a la mayor parte del rectificador retraso actual en m&uacute;sculo esquel&eacute;tico de anfibios.

Experimentos de Detubulation localizaci&oacute;n corrientes de rectificador retrasada a la membrana de la superficie de las fibras de m&uacute;sculo esquel&eacute;tico de anfibios.

&#x6211;&#x4EEC;&#x7528;&#x5438;&#x5438;&#x7BA1;&#x5F55;&#x5236;&#x548C;&#x8367;&#x5149; 4 &#x8367;&#x5149;&#x6765;&#x7814;&#x7A76;&#x5149;&#x8BF1;&#x5BFC; Ca2 + &#x91CA;&#x653E;&#x7684;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#xFF0C;&#x53EF;&#x89C1;&#x53CC;&#x9525;&#x72B6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x5728;&#x54CD;&#x94C3;&#x4E2D;, &#x5149;&#x4EA7;&#x751F;&#x8367;&#x5149;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x88C5;&#x4E24;&#x4E2A;&#x8150;&#x70C2;&#x6307;&#x6570;&#x51FD;&#x6570;&#x7684;&#x603B;&#x548C;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x5E38;&#x6570;&#x7684; 0.5 &#x548C; 3.8 s &#x4E0E;&#x7F13;&#x6162;&#x4E0B;&#x964D;&#x3002;&#x5728; 0Ca2 +-0Na + &#x89E3;&#x51B3;&#x65B9;&#x6848;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x54EA;&#x4E9B;&#x901A;&#x7684; Ca2 + &#x7684;&#x5916;&#x5C42;&#x90E8;&#x5206;&#x8DE8;&#x7EC6;&#x80DE;&#x819C;&#x5C06;&#x5927;&#x5927;&#x51CF;&#x5C11;&#xFF0C;&#x5149;&#x5728;&#x8367;&#x5149;&#x4E2D;&#x4EA7;&#x751F;&#x7F13;&#x6162;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;&#x51CF;&#x5C11;&#x548C;&#x589E;&#x52A0;&#x5EF6;&#x8FDF;&#x540E;&#x7EB3;&#x5165; Ca2 + &#x87AF;&#x5408;&#x5242; BAPTA&#xFF0C;&#x8BF4;&#x660E;&#x4E24;&#x8005;&#x90FD;&#x7531; Ca2 + &#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x5982;&#x679C;&#x6C60; Ca2 + &#x662F;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x516C;&#x5E03;&#x7684;&#x660E;&#x4EAE;&#x7684;&#x5149;&#x7EBF;&#xFF0C;&#x5728; 0Ca2 +-0Na + &#x89E3;&#x51B3;&#x65B9;&#x6848;&#x548C;&#x9525;&#x56DE;&#x94C3;&#x58F0;&#xFF0C;Ca2 + &#x4E0B;&#x964D;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x5FEB;&#x5F97;&#x591A;&#x6BD4;&#x5728;&#x54CD;&#x94C3;&#x4E2D;&#x6CA1;&#x6709;&#x4EE5;&#x524D;&#x66DD;&#x5149;&#x3002;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E; 0.5 &#x548C; 3.8 s &#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x5E38;&#x6570;&#x5B9E;&#x9645;&#x4E0A;&#x53CD;&#x6620;&#x51FA;&#x4E00;&#x7B14; Na + Ca2 +-K + &#x4EA4;&#x6362;&#x548C;&#x5149;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x91CA;&#x653E; Ca2 +&#x3002;Ca2 + &#x91CA;&#x653E;&#x7684;&#x5149;&#x7EBF;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x6765;&#x81EA;&#x81F3;&#x5C11;&#x4E24;&#x4E2A;&#x7AD9;&#x70B9;&#xFF0C;&#x603B;&#x6570;&#x9996;&#x6B21;&#x7EC4;&#x6210;&#x7684; 66%&#x6C60;&#x548C;&#x534A;&#x53D1;&#x8868;&#x7684;&#x8272;&#x7D20;&#x6F02;&#x767D; 4.8%&#x3002;&#x91CA;&#x653E;&#x5176;&#x4F59; Ca2 + &#x7684;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x4E2A;&#x7AD9;&#x70B9;&#x9700;&#x8981;&#x7684;&#x51E0;&#x4E4E;&#x6240;&#x6709;&#x7684;&#x8272;&#x7D20;&#x6F02;&#x767D;&#x3002;&#x5982;&#x679C;&#x540E;&#x91CA;&#x653E;&#xFF0C;&#x9525;&#x4FDD;&#x6301;&#x5728;&#x9ED1;&#x6697;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x53EF;&#x89C2;&#x7684; Ca2 + &#x8FD4;&#x56DE;&#x5230;&#x5373;&#x4F7F;&#x662F;&#x5728;&#x6CA1;&#x6709;&#x8272;&#x7D20;&#x518D;&#x751F;&#x91CA;&#x653E;&#x6C60;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x5F53;&#x524D;&#x7684;&#x4E0A;&#x5347;&#x65F6;&#x95F4;&#x662F;&#x660E;&#x663E;&#x4F4E;&#x4E8E;&#x6B63;&#x5E38;&#x7684;&#x5149;&#x54CD;&#x5E94;&#x5149;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x91CA;&#x653E; Ca2 + &#x53EF;&#x751F;&#x4EA7; 0.75 &#x5DF4;&#x52D2;&#x65AF;&#x5766;&#x6743;&#x529B;&#x673A;&#x6784;&#x72EC;&#x7ACB;&#x4E8E;&#x6B63;&#x5E38;&#x4F20;&#x5BFC;&#x7EA7;&#x8054;&#xFF0C;&#x4E00;&#x6837;&#x5927;&#x7684;&#x6697;&#x7535;&#x6D41;&#x7684;&#x8C03;&#x5236;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x8868;&#x660E; Ca2 + &#x53EF;&#x4EE5;&#x88AB;&#x91CA;&#x653E;&#x5185;&#x9525;&#x4F53;&#x5916;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x660E;&#x89C6;&#x89C9;&#x751F;&#x7406;&#x8303;&#x56F4;&#x5185;&#x7684;&#x5149;&#x7167;&#x5F3A;&#x5EA6;&#x3002;&#x6B64; Ca2 + &#x91CA;&#x653E;&#x6240;&#x626E;&#x6F14;&#x7684;&#x89D2;&#x8272;&#x4ECD;&#x672A;&#x89E3;&#x51B3;&#x3002;

&#x5149;&#x8BF1;&#x5BFC; Ca2 + &#x91CA;&#x653E;&#x7684;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#xFF0C;&#x53EF;&#x89C1;&#x9525;&#x72B6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x3002;

We used suction-pipette recording and fluo-4 fluorescence to study light-induced Ca2+ release from the visible double cones of zebrafish. In Ringer, light produces a slow decrease in fluorescence which can be fitted by the sum of two decaying exponentials with time constants of 0.5 and 3.8 s. In 0Ca2+-0Na+ solution, for which fluxes of Ca2+ across the outer segment plasma membrane are greatly reduced, light produces a slow increase in fluorescence. Both the decrease and increase are delayed after incorporation of the Ca2+ chelator BAPTA, indicating that both are produced by a change in Ca2+. If the Ca2+ pool is first released by bright light in 0Ca2+-0Na+ solution and the cone returned to Ringer, the time course of Ca2+ decline is much faster than in Ringer without previous light exposure. This indicates that the time constants of 0.5 and 3.8 s actually reflect a sum of Na+/Ca2+-K+ exchange and light-induced release of Ca2+. The Ca2+ released by light appears to come from at least two sites, the first comprising 66% of the total pool and half-released by bleaching 4.8% of the pigment. Release of the remaining Ca2+ from the second site requires the bleaching of nearly all of the pigment. If, after release, the cone is maintained in darkness, a substantial fraction of the Ca2+ returns to the release pool even in the absence of pigment regeneration. The light-induced release of Ca2+ can produce a modulation of the dark current as large as 0.75 pA independently of the normal transduction cascade, though the rise time of the current is considerably slower than the normal light response. These experiments show that Ca2+ can be released within the cone outer segment by light intensities within the physiological range of photopic vision. The role this Ca2+ release plays remains unresolved.

Light-induced Ca2+ release in the visible cones of the zebrafish.

Nous avons utilis&eacute; la pipette d&#39;aspiration enregistrement et fluorescence fluo-4 etudier photo-induits lib&eacute;ration de Ca2 + les c&ocirc;nes doubles visibles du poisson-z&egrave;bre. Dans sonnerie, lumi&egrave;re produit une diminution lente de fluorescence qui peut &ecirc;tre mont&eacute; par la somme de deux exponentielles en d&eacute;composition avec des constantes de temps de 0,5 et 3,8 s. 0Ca2 +-solution 0Na +, pour lequel les flux de Ca2 + &agrave; travers le segment externe, la membrane plasmique sont grandement r&eacute;duits, lumi&egrave;re produit une augmentation lente de fluorescence. La diminution et l&#39;augmentation sont retard&eacute;es apr&egrave;s l&#39;incorporation du Ca2 + ch&eacute;lateur du BAPTA, indiquant que les deux sont produites par un changement de Ca2 +. Si le pool de Ca2 + est le premier publi&eacute; par luminoth&eacute;rapie &agrave; 0Ca2 +-0Na + solution et le c&ocirc;ne sont retourn&eacute;s &agrave; sonnerie, l&#39;&eacute;volution temporelle de la diminution de Ca2 + est beaucoup plus rapide que dans la sonnerie sans pr&eacute;c&eacute;dente exposition &agrave; la lumi&egrave;re. Cela indique que les constantes de temps de 0,5 et 3,8 s refl&egrave;tent en fait une somme de Na + / Ca2 +-K + &eacute;change et la lib&eacute;ration de Ca2 + induite par la lumi&egrave;re. Le Ca2 + lib&eacute;r&eacute; par la lumi&egrave;re semble provenir d&#39;au moins deux sites, le premier comprenant 66 % du total en commun et moiti&eacute; sorti de blanchiment 4,8 % du pigment. Lib&eacute;ration du Ca2 + reste le deuxi&egrave;me site requiert le blanchissement de la quasi-totalit&eacute; du pigment. Si, apr&egrave;s la lib&eacute;ration, le c&ocirc;ne est maintenu dans l&#39;obscurit&eacute;, une fraction substantielle du Ca2 + retourne au pool de sortie m&ecirc;me en l&#39;absence de r&eacute;g&eacute;n&eacute;ration de pigment. La lib&eacute;ration induite par la lumi&egrave;re de Ca2 + peut produire une modulation du courant d&#39;obscurit&eacute; &eacute;gale &agrave; 0,75 pA ind&eacute;pendamment de la cascade de transduction normal, bien que le temps de mont&eacute;e du courant est consid&eacute;rablement plus lent que la r&eacute;action &agrave; la lumi&egrave;re normale. Ces exp&eacute;riences d&eacute;montrent que Ca2 + peut &ecirc;tre lib&eacute;r&eacute; dans le segment externe du c&ocirc;ne de l&#39;intensit&eacute; de la lumi&egrave;re dans les limites physiologiques de la vision photopique. Le r&ocirc;le que joue cette lib&eacute;ration de Ca2 + n&#39;est pas r&eacute;solu.

Photo-induits lib&eacute;ration de Ca2 + dans les c&ocirc;nes visibles du poisson-z&egrave;bre.

Licht-induzierte Ca2 +-Freisetzung in den sichtbaren Kegel des Zebrafisch.

Abbiamo usato registrazione aspirazione-pipetta e fluorescenza fluo-4 per studiare la luce-indotta Ca2 + release da coni doppi visibili di zebrafish. In Ringer, luce produce una lenta diminuzione della fluorescenza che pu&ograve; essere montato per la somma dei due esponenziali decadente con costanti di tempo di 0,5 e 3,8 s. In 0Ca2 +-0Na + soluzione, per cui disossidanti di Ca2 + attraverso il segmento esterno membrana plasmatica sono estremamente ridotti, luce produce un lento aumento di fluorescenza. La diminuzione e l&#39;aumento sono in ritardo dopo l&#39;incorporazione di Ca2 + chelante BAPTA, che indica che entrambi sono prodotti da una variazione di Ca2 +. Se il pool di Ca2 + &egrave; il primo pubblicato dalla luce in 0Ca2 +-0Na + soluzione e il cono restituita al Ringer, il decorso del Ca2 + declino &egrave; molto pi&ugrave; veloce in suoneria senza precedente esposizione alla luce. Questo indica che le costanti di tempo di 0,5 e 3,8 s riflettono in realt&agrave; una somma di Na + / Ca2 +-K + exchange e luce indotta dal rilascio di Ca2 +. Il Ca2 + rilasciato dalla luce sembra provenire da almeno due siti, il primo comprendente 66% del totale piscina e met&agrave;-rilasciato da sbiancamento 4,8% di pigmento. Rilascio dei restanti Ca2 + dal sito secondo richiede il candeggio di quasi tutto il pigmento. Se, dopo il rilascio, il cono &egrave; mantenuto al buio, una frazione sostanziale di Ca2 + restituisce al pool di rilascio anche in assenza di rigenerazione del pigmento. Il rilascio di Ca2 + luce-indotta pu&ograve; produrre una modulazione della corrente scura grande come 0.75 pA indipendentemente la cascata di trasduzione normale, anche se il tempo di salita della corrente &egrave; notevolmente pi&ugrave; lento rispetto la normale risposta luminosa. Questi esperimenti dimostrano che Ca2 + pu&ograve; essere rilasciato entro il segmento esterno del cono di intensit&agrave; luminose entro il range fisiologico di visione fotopica. Il ruolo che svolge questo rilascio di Ca2 + rimane irrisolto.

Luce-indotta Ca2 + release in coni visibili of the zebrafish.

&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x53EF;&#x8996;&#x4E8C;&#x91CD;&#x5186;&#x9310;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x5149;&#x8A98;&#x8D77; ca 2 + &#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5438;&#x5F15;&#x30D4;&#x30DA;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x8A18;&#x9332;&#x3068;&#x86CD;&#x5149; 4 &#x86CD;&#x5149;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AC;&#x30FC;&#x306E;&#x5149;&#x304C; 2 &#x3064;&#x306E;&#x6E1B;&#x8870;&#x6307;&#x6570;&#x306E;&#x5408;&#x8A08; 0.5 &#x3068; 3.8 s &#x306E;&#x6642;&#x5B9A;&#x6570;&#x3092;&#x5408;&#x3046;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x86CD;&#x5149;&#x306E;&#x9045;&#x3044;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;0Ca2 +-&#x3069;&#x306E; ca 2 + &#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x5916;&#x5074;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x819C;&#x304C;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x77ED;&#x7E2E;&#x3001;0Na + &#x30BD;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;, &#x30E9;&#x30A4;&#x30C8;&#x86CD;&#x5149;&#x3067;&#x9045;&#x3044;&#x5897;&#x52A0;&#x304C;&#x4F5C;&#x308A;&#x51FA;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3068;&#x5897;&#x52A0;&#x3001;ca 2 + &#x30AD;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x5264;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E; ca 2 + &#x5909;&#x5316;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x751F;&#x7523;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x8A2D;&#x7ACB;&#x5F8C;&#x306B;&#x9045;&#x5EF6;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;Ca 2 + &#x30D7;&#x30FC;&#x30EB;&#x304C;&#x6700;&#x521D;&#x306E;&#x5834;&#x5408;&#x306F;&#x3001;&#x660E;&#x308B;&#x3044;&#x5149;&#x3067; 0Ca2 + &#x3067;&#x767A;&#x58F2;-0Na + &#x30BD;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3068;&#x30B3;&#x30FC;&#x30F3; &#x30EA;&#x30F3;&#x30AC;&#x30FC;&#x306B;&#x8FD4;&#x3055;&#x308C;&#x308B; ca 2 + &#x306E;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x306E;&#x6642;&#x9593;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x524D;&#x306E;&#x5149;&#x306E;&#x9732;&#x51FA;&#x306A;&#x3057;&#x3067;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AC;&#x30FC;&#x305A;&#x3063;&#x3068;&#x9AD8;&#x901F;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x6642;&#x5B9A;&#x6570; 0.5 &#x3068; 3.8 s &#x306E;&#x5B9F;&#x969B;&#x306B; Na &#x306E;&#x5408;&#x8A08;&#x3092;&#x53CD;&#x6620;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059; c++/cli ca 2 +-K + &#x4EA4;&#x63DB;&#x3068;&#x5149;&#x8A98;&#x8D77;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E; ca 2 +&#x3002;Ca 2 + &#x5149;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x306B;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082; 2 &#x3064;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x304B;&#x3089;&#x6765;&#x3066;&#x8868;&#x793A;&#x3001;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x304B;&#x3089;&#x6210;&#x308B; 66 &#xFF05; &#x30D7;&#x30FC;&#x30EB;&#x3001;&#x534A;&#x5206;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6F02;&#x767D;&#x306E; 4.8 &#xFF05; &#x306E;&#x8272;&#x7D20;&#x3092;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;2 &#x756A;&#x76EE;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x6B8B;&#x308A;&#x306E; ca 2 + &#x653E;&#x51FA;&#x8272;&#x7D20;&#x306E;&#x307B;&#x307C;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x6F02;&#x767D;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x5F8C;&#x3001;&#x5186;&#x9310;&#x306E;&#x6697;&#x95C7;&#x306E;&#x4E2D;&#x3067;&#x7DAD;&#x6301;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x5834;&#x5408;&#x306F;&#x3001;&#x304B;&#x306A;&#x308A;&#x306E;&#x5272;&#x5408;&#x306E; ca 2 + &#x9854;&#x6599;&#x518D;&#x751F;&#x306E;&#x4E0D;&#x5728;&#x3067;&#x3082;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9; &#x30D7;&#x30FC;&#x30EB;&#x306B;&#x8FD4;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5149;&#x8A98;&#x8D77;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E; ca 2 + &#x96FB;&#x6D41;&#x306E;&#x7ACB;&#x4E0A;&#x308A;&#x6642;&#x9593;&#x306F;&#x901A;&#x5E38;&#x306E;&#x5149;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x304B;&#x306A;&#x308A;&#x9045;&#x3044;&#x3067;&#x3059;&#x304C; 0.75 pA &#x901A;&#x5E38;&#x4F1D;&#x9054;&#x30AB;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30C9;&#x3068;&#x306F;&#x7121;&#x95A2;&#x4FC2;&#x3068;&#x540C;&#x3058;&#x5927;&#x304D;&#x3055;&#x306E;&#x6697;&#x96FB;&#x6D41;&#x306E;&#x5909;&#x8ABF;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306F;&#x3001;ca 2 +&#x3001;&#x5186;&#x9310;&#x306E;&#x5916;&#x5074;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x5185;&#x660E;&#x6240;&#x8996;&#x306E;&#x30D3;&#x30B8;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x751F;&#x7406;&#x7684;&#x7BC4;&#x56F2;&#x5185;&#x306E;&#x5149;&#x306E;&#x5F37;&#x5EA6;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x89E3;&#x653E;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E; ca 2 + &#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x672A;&#x89E3;&#x6C7A;&#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x3002;

&#x5149;&#x8A98;&#x8D77;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x53EF;&#x8996;&#x9310;&#x4F53;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B; ca 2 + &#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x3002;

Zebrafish&#xC758; &#xBCF4;&#xC774;&#xB294; &#xB354;&#xBE14; &#xCF58;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBE5B;&#xC744; &#xC774;&#xC6A9;&#xD55C; Ca2 + &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4; &#xACF5;&#xBD80; &#xD761;&#xC785; &#xD53C;&#xD3AB;&#xC740; &#xB179;&#xC74C;&#xC744; fluo-4 &#xD615;&#xAD11;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBCA8;, &#xB77C;&#xC774;&#xD2B8; &#xD615;&#xAD11; 0.5&#xC640; 3.8 s&#xC758; &#xC2DC;&#xAC04; &#xC0C1;&#xC218;&#xC640; &#xB450; &#xBD80;&#xD328; &#xC9C0; &#xC218;&#xC758; &#xD569;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC801;&#xD569; &#xD558; &#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xB290;&#xB9B0; &#xAC10;&#xC18C;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. 0Ca2 +-0Na + &#xC194;&#xB8E8;&#xC158;, &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; &#xC788;&#xB294; &#xC6A9;&#xC758; Ca2 +&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xD06C;&#xAC8C; &#xAC10;&#xC18C; &#xD558; &#xACE0;, &#xBE5B; &#xD615;&#xAD11;&#xC758; &#xB290;&#xB9B0; &#xC99D;&#xAC00; &#xC0DD;&#xC131; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAC10;&#xC18C; &#xBC0F; &#xC99D;&#xAC00; Ca2 + chelator &#xBAA8;&#xB450; Ca2 +&#xC758; &#xBCC0;&#xD654;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; BAPTA&#xC758; &#xC124;&#xB9BD; &#xC774;&#xD6C4; &#xC9C0;&#xC5F0; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. Ca2 + &#xD480; &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; &#xACBD;&#xC6B0; 0Ca2 + &#xBC1D;&#xC740; &#xBE5B;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC1C;&#xD45C;-0Na + &#xC194;&#xB8E8;&#xC158; &#xBC0F; &#xCF58; &#xBCA8;, &#xBC18;&#xD658; Ca2 + &#xAC10;&#xC18C; &#xC2DC;&#xAC04; &#xACFC;&#xC815; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xD6E8;&#xC52C; &#xBE60;&#xB985;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCA8;&#xC18C;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xC774;&#xC804; &#xBE5B; &#xB178;&#xCD9C; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xACE0;. 0.5&#xC640; 3.8 s&#xC758; &#xC2DC;&#xAC04; &#xC0C1;&#xC218; &#xC2E4;&#xC81C;&#xB85C; Na&#xC758; &#xD569;&#xACC4; &#xBC18;&#xC601; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4; + Ca2 +-K + &#xAD50;&#xD658; &#xBC0F; Ca2 +&#xC758; &#xBC29;&#xCD9C; &#xBE5B;&#xC744; &#xC774;&#xC6A9;&#xD55C;. Ca2 + &#xBE5B; &#xBC1C;&#xD45C; &#xC801;&#xC5B4;&#xB3C4; &#xB450; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC628; &#xAC83; &#xCC98;&#xB7FC;, &#xCD1D; 66% &#xC774;&#xB8E8;&#xC5B4;&#xC9C4; &#xCD5C;&#xCD08;&#xC758; &#xD480; &#xC0C9;&#xC18C;&#xC758; &#xD45C;&#xBC31; 4.8% &#xBC18; &#xBC1C;&#xD45C;. &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB098;&#xBA38;&#xC9C0; Ca2 +&#xC758; &#xCD9C;&#xC2DC;&#xB294; &#xAC70;&#xC758; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC0C9;&#xC18C;&#xC758; &#xD45C;&#xBC31; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD9C;&#xC2DC; &#xD6C4;, &#xCF58; &#xC5B4;&#xB460; &#xC18D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0; Ca2 +&#xC758; &#xC2E4;&#xC9C8;&#xC801;&#xC778; &#xBD84;&#xC218; &#xC548;&#xB8CC; &#xC911;&#xC0DD;&#xC758; &#xBD80;&#xC7AC;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4; &#xD480;&#xC5D0; &#xBC18;&#xD658; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Ca2 +&#xC758; &#xBE5B;&#xC744; &#xC774;&#xC6A9;&#xD55C; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4; &#xC804;&#xB958;&#xC758; &#xC0C1;&#xC2B9; &#xC2DC;&#xAC04; &#xC815;&#xC0C1; &#xBE5B; &#xC751;&#xB2F5; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD788; &#xB290;&#xB9BD;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xBCC0;&#xD658; &#xCE90;&#xC2A4;&#xCF00;&#xC774;&#xB4DC; &#xBCC4;&#xB3C4;&#xB85C; 0.75 pA &#xC815;&#xB3C4;&#xB85C; &#xC5B4;&#xB450;&#xC6B4; &#xC804;&#xB958;&#xC758; &#xBCC0;&#xC870;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC2E4;&#xD5D8; Ca2 + &#xD574;&#xC81C; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC74C;&#xC744; &#xCF58; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; photopic &#xBE44;&#xC804;&#xC758; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xBC94;&#xC704; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC00;&#xBCBC;&#xC6B4; &#xAC15;&#xB82C; &#xD558; &#xC5EC; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; Ca2 + &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4; &#xC218;&#xD589; &#xD558;&#xB294; &#xC5ED;&#xD560;&#xC5D0; &#xD574;&#xACB0; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xB85C; &#xC720;&#xC9C0; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBE5B;&#xC744; &#xC774;&#xC6A9;&#xD55C; Ca2 + &#xCD9C;&#xC2DC; &#xB41C; zebrafish&#xC758; &#xBCF4;&#xC774;&#xB294; &#xCF58;&#xC5D0;&#xC11C;.

Utilizamos la grabaci&oacute;n de succi&oacute;n-pipeta y fluo-4 fluorescencia para estudiar Ca2 + liberaci&oacute;n inducida por la luz de los conos dobles visibles del pez cebra. En timbre, luz produce una disminuci&oacute;n lenta de fluorescencia que puede ser montada por la suma de dos exponentes que se decae con constantes del tiempo de 0,5 y 3,8 s. En 0Ca2 +-0Na + soluci&oacute;n, para los que flujos de Ca2 + a trav&eacute;s del segmento externo membrana plasm&aacute;tica se reducen considerablemente, luz produce un lento aumento de fluorescencia. La disminuci&oacute;n y el aumento se retrasan despu&eacute;s de la incorporaci&oacute;n del Ca2 + quelante BAPTA, indicando que ambas son producidas por un cambio de Ca2 +. Si la piscina de Ca2 + es el primera publicado por luz brillante en 0Ca2 +-0Na + soluci&oacute;n y el cono de vuelta a timbre, el curso temporal de Ca2 + disminuci&oacute;n es mucho m&aacute;s r&aacute;pido que en timbre sin previa exposici&oacute;n a la luz. Esto indica que las constantes de tiempo de 0,5 y 3,8 s realmente reflejan una suma de Na + / Ca2 +-K + cambio y liberaci&oacute;n inducida por la luz de Ca2 +. El Ca2 + liberado por la luz parece provenir de al menos dos sitios, la primera integrada por 66% del total de la piscina y mitad-lanzado por blanqueo de 4,8% del pigmento. Liberaci&oacute;n de los restantes Ca2 + desde el segundo sitio requiere el blanqueo de casi todo del pigmento. Si, despu&eacute;s del lanzamiento, el cono se mantiene en la oscuridad, una fracci&oacute;n importante del Ca2 + retorne a la piscina de liberaci&oacute;n incluso en la ausencia de regeneraci&oacute;n de pigmento. La liberaci&oacute;n inducida por la luz de Ca2 + puede producir una modulaci&oacute;n de la corriente oscura tan grande como pA 0.75 independientemente de la cascada de transducci&oacute;n normal, aunque el tiempo de subida de la corriente es considerablemente m&aacute;s lento que la respuesta normal de la luz. Estos experimentos demuestran que Ca2 + puede ser lanzado dentro del segmento externo del cono por intensidades de luz dentro de la gama fisiol&oacute;gica de visi&oacute;n fot&oacute;pica. El papel que desempe&ntilde;a esta liberaci&oacute;n de Ca2 + sigue sin resolverse.

Inducida por la luz Ca2 + liberaci&oacute;n en los conos visibles del pez cebra.

&#x5728;&#x68D2;&#x548C;&#x53EF;&#x89C1;&#x9525;&#x4F53;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#xFF0C;&#x591A;&#x4E2A;&#x6D4B;&#x91CF;&#x65E0;&#x6CD5;&#x8FDB;&#x884C;&#x80DE;&#x5185; Ca2 + &#x6D53;&#x5EA6;&#x7684;&#x4ECE;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4F7F;&#x7528;&#x8367;&#x5149;&#x67D3;&#x6599;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x5355;&#x6B21;&#x63A5;&#x89E6;&#x6D4B;&#x91CF;&#x5149;&#x7684;&#x6F02;&#x767D;&#x5242;&#x9686;&#x5BF9;&#x6746;&#x6216;&#x9525;&#x5F62;&#x7684;&#x592A;&#x5927;&#xFF0C;&#x4E00;&#x5C0F;&#x90E8;&#x5206;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x56E0;&#x6B64;&#x5DF2;&#x786E;&#x5B9A;&#x5E76;&#x63CF;&#x8FF0;&#x7684;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#xFF0C;&#x5176;&#x6CE2;&#x957F;&#x7684;&#x6700;&#x5927;&#x7075;&#x654F;&#x5EA6;&#x662F; 360 &#x5728;&#x7D2B;&#x5916;&#x5149;&#x654F;&#x611F;&#x9525;&#x8DB3;&#x591F;&#x8FDC;&#x4ECE;&#x6211;&#x4EEC;&#x6D4B;&#x91CF;&#x5149;&#x7684;&#x6CE2;&#x957F;&#x662F; nm (514.5 nm&#xFF09; &#x4F7F;&#x5B83;&#x6709;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F7F;&#x5149;&#x7535;&#x6D41;&#x548C; Ca2 + &#x6D53;&#x5EA6;&#x7684;&#x591A;&#x4E2A;&#x88C1;&#x5B9A;&#x4ECE;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x5BF9;&#x4E3A;&#x6570;&#x6709;&#x9650;&#x7684;&#x6D4B;&#x91CF;&#xFF0C;&#x4E3A;&#x9686;&#x9525;&#x5BF9;&#x6F02;&#x767D;&#x662F;&#x5F88;&#x5C11;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x95EA;&#x5B58;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#xFF0C;Ca2 + &#x6D53;&#x5EA6;&#x7684;&#x5916;&#x5C42;&#x90E8;&#x5206;&#x5BC6;&#x5207;&#x9075;&#x5FAA;&#x7531; Na + &#x4E0E; Ca2 + &#x53BB;&#x9664;&#x652F;&#x914D;&#x65F6;&#x95F4;&#x5E38;&#x6570; convolved &#x95EA;&#x5B58;&#x54CD;&#x5E94;&#x7684;&#x6CE2;&#x5F62;-Ca2 +-K + &#x4EA4;&#x6362;&#x3002;&#x4E3A;&#x66F4;&#x591A;&#x7684;&#x6D4B;&#x91CF;&#xFF0C;&#x7531;&#x8272;&#x7D20;&#x6F02;&#x767D;&#x53CD;&#x5E94;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x7684;&#x663E;&#x8457;&#x52A0;&#x901F;&#x4E0D;&#x53EF;&#x907F;&#x514D;&#x5730;&#x4F1A;&#x53D1;&#x751F;&#xFF0C;&#x4F46; Ca2 + &#x6D53;&#x5EA6;&#x4E0D;&#x8FC7;&#x5347;&#x964D;&#x4E0E;&#x95EA;&#x5B58;&#x7684;&#x6CE2;&#x5F62;&#x8FD1;&#x4F3C;&#x534F;&#x8BAE;&#x4E2D;&#x3002;&#x671F;&#x95F4;&#x7A33;&#x6B65;&#x80CC;&#x666F;&#x7684;&#x5149;&#x7EBF;&#x7167;&#x5C04;&#xFF0C;Ca2 + &#x6D53;&#x5EA6;&#x5C5E;&#x4E8E;&#x6BD4;&#x4F8B;&#x7684;&#x7A33;&#x6001;&#x7535;&#x6D41;&#x8FDB;&#x884C;&#x6697;&#x80CC;&#x666F;&#x5728;&#x6240;&#x6709;&#x65F6;&#x95F4;&#x548C;&#x660E;&#x4EAE;&#x7684;&#x80CC;&#x666F;&#xFF0C;&#x5728;&#x7A33;&#x5B9A;&#x72B6;&#x6001;&#x3002;&#x5728;&#x65E9;&#x65F6;&#x95F4;&#x540E;&#x53D1;&#x75C5;&#x7684;&#x660E;&#x4EAE;&#xFF0C;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;Ca2 + &#x6D53;&#x5EA6;&#x662F;&#x80CC;&#x666F;&#x7684;&#x663E;&#x8457;&#x9AD8;&#x4E8E;&#x9884;&#x671F;&#x4ECE;&#x5706;&#x9525;&#x7684;&#x5F53;&#x524D;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A;&#x8FD9;&#x662F;&#x5149;&#x4F9D;&#x8D56; Ca2 + &#x91CA;&#x653E;&#x7684;&#x660E;&#x4EAE;&#x80CC;&#x666F;&#x5149;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5E9F;&#x9664;&#x4E86;&#x5BF9; Ca2 + &#x87AF;&#x5408;&#x5242; BAPTA &#x7684;&#x819C; permeant acetoxymethyl &#x916F;&#x7684;&#x9525;&#x5F62;&#x66B4;&#x5E7F;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x9525;&#x4F53;&#x5916;&#x6BB5; Ca2 + &#x6D53;&#x5EA6;&#x4E3B;&#x8981;&#x7387;&#x7684;&#x6D8C;&#x5165;&#x548C;&#x8DE8;&#x819C;&#x7684; Ca2 + &#x5916;&#x6392;&#x7684;&#x51FD;&#x6570;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5728;&#x660E;&#x4EAE;&#x7684;&#x5149;&#x7EBF;&#xFF0C;&#x6700;&#x6709;&#x53EF;&#x80FD;&#x4ECE;&#x7F13;&#x51B2;&#x533A;&#x7AD9;&#x70B9;&#x5728;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x5185;&#x7684; Ca2 + &#x91CA;&#x653E;&#x53EF;&#x4EE5;&#x77ED;&#x6682;&#x63D0;&#x5347; Ca2 + &#x6D53;&#x5EA6;&#x9AD8;&#x4E8E;&#x9884;&#x671F;&#x4ECE;&#x5149;&#x4F9D;&#x8D56;&#x901A;&#x9053;&#x5F00;&#x653E;&#x6982;&#x7387;&#x7684;&#x6C34;&#x5E73;&#x3002;

&#x540C;&#x65F6;&#x6D4B;&#x91CF;&#x7535;&#x6D41;&#x548C;&#x7D2B;&#x5916;&#x7EBF;&#x654F;&#x611F;&#x9525;&#x7684;&#x6591;&#x9A6C;&#x9C7C;&#x4E2D;&#x7684;&#x9499;&#x3002;

In rods and visible cone photoreceptors, multiple measurements cannot be made of intracellular Ca2+ concentration from the same cell using fluorescent dyes, because a single exposure of the measuring light bleaches too large a fraction of the rod or cone photopigment. We have therefore identified and characterized UV-sensitive cones of the zebrafish, whose wavelength of maximum sensitivity is at 360 nm which is far enough from the wavelength of our measuring light (514.5 nm) so that it has been possible to make multiple determinations of photocurrent and Ca2+ concentration from the same cells. We show that for a limited number of measurements, for which the bleaching of the cone photopigment is too small to affect flash kinetics, the outer segment Ca2+ concentration closely follows the wave form of the flash response convolved with the dominant time constant for Ca2+ removal by Na+-Ca2+-K+ exchange. For a larger number of measurements, significant acceleration of the response kinetics by pigment bleaching inevitably occurs, but the Ca2+ concentration nevertheless rises and falls in approximate agreement with the flash wave form. During exposure to steady background light, the Ca2+ concentration falls in proportion to the steady-state current for dim backgrounds at all times and for bright backgrounds at steady state. At early times following the onset of bright backgrounds, however, the Ca2+ concentration is markedly higher than expected from the current of the cone. We show this to be the result of light-dependent Ca2+ release by bright background light, which can be abolished by pre-exposure of the cone to the membrane-permeant acetoxymethyl ester of the Ca2+ chelator BAPTA. Our results therefore demonstrate that the cone outer segment Ca2+ concentration is predominantly a function of the rate of influx and efflux of Ca2+ across the plasma membrane, but that a release of Ca2+ in bright light most probably from buffer sites within the cell can transiently elevate the Ca2+ concentration above the level expected from the open probability of the light-dependent channels.

Simultaneous measurement of current and calcium in the ultraviolet-sensitive cones of zebrafish.

Dans Cannes et visible c&ocirc;nes photor&eacute;cepteurs, plusieurs mesures ne peut pas &ecirc;tre pr&eacute;lev&eacute;es de la concentration intracellulaire de Ca2 + la m&ecirc;me cellule &agrave; l&#39;aide de colorants fluorescents, car une exposition unique de la mesure de lumi&egrave;re d&eacute;colore trop grande une fraction de la tige ou c&ocirc;ne photopigment. Nous avons donc identifi&eacute; et caract&eacute;ris&eacute; les c&ocirc;nes sensibles aux UV of the zebrafish, dont longueur d&#39;onde du maximum de sensibilit&eacute; est &agrave; 360 nm, ce qui est assez loin de la longueur d&#39;onde de la lumi&egrave;re de notre mesure (514,5 nm) alors qu&#39;il a &eacute;t&eacute; possible de faire plusieurs d&eacute;terminations du photocourant et la concentration de Ca2 + par les cellules de m&ecirc;mes. Nous montrons que pour un nombre limit&eacute; de mesures, dont le blanchiment de la photopigment c&ocirc;ne est trop petit pour influer sur la cin&eacute;tique de flash, le segment externe, la concentration de Ca2 + suit de pr&egrave;s la forme d&#39;onde de la r&eacute;ponse flash convol&eacute;e avec la constante de temps dominante pour enl&egrave;vement Ca2 + par Na +-Ca2 +-K + &eacute;change. Pour un plus grand nombre de mesures, une acc&eacute;l&eacute;ration significative de la cin&eacute;tique de la r&eacute;action de d&eacute;coloration du pigment se produit in&eacute;vitablement, mais n&eacute;anmoins, la concentration de Ca2 + se l&egrave;ve et tombe d&#39;accord approximatif avec la forme d&#39;onde flash. Pendant l&#39;exposition &agrave; la lumi&egrave;re de fond r&eacute;gulier, la concentration de Ca2 + tombe en proportion &agrave; l&#39;actuel &Eacute;tat d&#39;&eacute;quilibre pour les arri&egrave;re-plans dim &agrave; tous les temps et pour des arri&egrave;re-plans lumineuses &agrave; l&#39;&eacute;tat stable. &Agrave; t&ocirc;t times apr&egrave;s l&#39;apparition des arri&egrave;re-plans lumineuses, cependant, la concentration de Ca2 + est nettement plus &eacute;lev&eacute;e que pr&eacute;vu de l&#39;actuelle du c&ocirc;ne. Nous montrons que c&#39;est le r&eacute;sultat de d&eacute;pendant de la lumi&egrave;re lib&eacute;ration de Ca2 + par un fond lumineux lumi&egrave;re, qui peut &ecirc;tre abolie par pr&eacute;-exposition du c&ocirc;ne &agrave; l&#39;ester ac&eacute;toxym&eacute;thyl membrane perm&eacute;able de la ch&eacute;lateur du Ca2 + BAPTA. Nos r&eacute;sultats d&eacute;montrent donc que le segment externe du c&ocirc;ne la concentration de Ca2 + est principalement fonction du taux de l&#39;influx et l&#39;efflux de Ca2 + &agrave; travers la membrane de plasma, mais qu&#39;une lib&eacute;ration de Ca2 + dans la lumi&egrave;re vive, tr&egrave;s probablement &agrave; partir de sites de m&eacute;moire tampon dans la cellule peut &eacute;lever transitoirement la concentration de Ca2 + au-dessus du niveau attendu de la probabilit&eacute; d&#39;ouverture des canaux d&eacute;pendant de la lumi&egrave;re.

Mesure simultan&eacute;e du courant et du calcium dans les c&ocirc;nes sensibles au rayonnement ultraviolet du poisson-z&egrave;bre.

In Stangen und sichtbaren Zapfen-Photorezeptoren k&ouml;nnen nicht mehrere Messungen der intrazellul&auml;ren Ca2 + Konzentration derselben Zelle mit Leuchtstofff&auml;rbungen, vorgenommen werden, weil eine einmalige Verabreichung des messenden Lichts zu gro&szlig;en einen Bruchteil der Stab oder Kegel Photopigment bleicht. Haben wir daher identifiziert und charakterisiert UV-empfindlichen Zapfen der Zebrafisch, deren Wellenl&auml;nge der h&ouml;chsten Empfindlichkeit bei 360 ist nm, das weit genug &uuml;ber die Wellenl&auml;nge von unseren Messen Licht ist (514,5 nm) so, dass es gelungen ist, mehrere Bestimmungen des Photostrommessungen und Ca2 + Konzentration aus den gleichen Zellen zu machen. Wir zeigen, dass f&uuml;r eine begrenzte Anzahl von Messungen, f&uuml;r die zu klein das Bleichen von der Kegel-Photopigment ist Blitz Kinetik, beeinflussen das &auml;u&szlig;ere Segment Ca2 + Konzentration eng der Wellenform der Blitz Antwort gefaltet mit der dominanten Zeitkonstante f&uuml;r Ca2 + Entfernung von Na + folgt-Ca2 +-K + Austausch. F&uuml;r eine gr&ouml;&szlig;ere Anzahl von Messungen erhebliche Beschleunigung der die Kinetik der Reaktion von Pigment bleichen zwangsl&auml;ufig auftritt, aber die Ca2 +-Konzentration jedoch steigt und f&auml;llt im ungef&auml;hren Vereinbarung mit der Blitz-Wellenform. W&auml;hrend der Belichtung zu sicheren Hintergrundlicht f&auml;llt die Ca2 +-Konzentration im Verh&auml;ltnis zum station&auml;ren Strom f&uuml;r dim Hintergrund in allen Zeiten und f&uuml;r helle Hintergr&uuml;nde bei Steady-State. Bei ist fr&uuml;h Mal folgt der Beginn der hellen Hintergrund, dagegen die Ca2 +-Konzentration deutlich h&ouml;her als erwartet aus dem aktuellen des Kegels. Wir zeigen, dass dies das Ergebnis des Licht-abh&auml;ngigen Ca2 + Release von leichten, hellen Hintergrund zu sein, die durch Pre-exposure des Kegels auf der Membran-permeant Oxo-Ester der Chelatbildner Ca2 + BAPTA abgeschafft werden kann. Unsere Ergebnisse zeigen daher, dass im &auml;u&szlig;eren Kegel-Segment Ca2 + Konzentration &uuml;berwiegend eine Funktion der Zustrom und Efflux von Ca2 + &uuml;ber die Plasmamembran ist, aber ein Release von Ca2 + in helles Licht sehr wahrscheinlich vom Puffer Websites innerhalb der Zelle die Ca2 +-Konzentration &uuml;ber dem Niveau erwartet aus der offenen Wahrscheinlichkeit der Licht-abh&auml;ngige Kan&auml;le vor&uuml;bergehend erh&ouml;hen kann.

Gleichzeitige Messung von Strom und Calcium in die UV-empfindlichen Zapfen der Zebrab&auml;rbling.

In canne e fotorecettori cono visibile, misurazioni multiple non possono essere fatto della concentrazione di Ca2 + intracellulare dalla stessa cella usando le tinture fluorescenti, perch&eacute; una singola esposizione della luce misura decoloranti troppo grande una frazione di photopigment l&#39;asta o cono. Pertanto abbiamo identificato e caratterizzato coni sensibili UV di zebrafish, cui lunghezza d&#39;onda di massima sensibilit&agrave; &egrave; a 360 nm che &egrave; abbastanza lontano dalla lunghezza d&#39;onda della nostra misurazione luce (514.5 nm) che &egrave; stato possibile effettuare determinazioni multiple di fotocorrente e concentrazione di Ca2 + dalle cellule stesse. Ci mostrano che per un numero limitato di misurazioni, per cui lo sbiancamento di photopigment il cono &egrave; troppo piccolo per influenzare la cinetica di flash, il segmento esterno Ca2 + concentrazione segue da vicino la forma d&#39;onda della risposta flash convoluzione con la costante di tempo dominante per Ca2 + rimozione di Na +-Ca2 +-K + exchange. Per un pi&ugrave; grande numero di misurazioni, significativa accelerazione della cinetica di risposta da pigmento sbianca inevitabilmente si verifica, ma la concentrazione di Ca2 + tuttavia aumenta e cade in accordo approssimativo con la forma d&#39;onda flash. Durante l&#39;esposizione alla luce di sfondo costante, la concentrazione di Ca2 + cade in proporzione alla corrente stazionario per sfondi dim a tutti i tempi e per gli sfondi luminosi ad uno stato costante. A presto volte seguendo l&#39;insorgenza di sfondi luminosi, tuttavia, la concentrazione di Ca2 + &egrave; nettamente superiore al previsto dalla corrente del cono. Questo &egrave; il risultato della luce-dipendenti Ca2 + release da sfondo luminoso e leggero, che pu&ograve; essere abolita dal pre-exposure del cono a membrana-permeant acetossimetil estere di Ca2 + chelante BAPTA mostriamo. Pertanto i nostri risultati dimostrano che il segmento esterno del cono Ca2 + concentrazione &egrave; principalmente una funzione del tasso di afflusso e di efflusso di Ca2 + attraverso la membrana del plasma, ma che un rilascio di Ca2 + in luce molto probabilmente da siti di buffer all&#39;interno della cellula transitoriamente pu&ograve; elevare la concentrazione di Ca2 + di sopra del livello previsto dalla probabilit&agrave; aperta i canali di luce-dipendenti.

Misura simultanea di corrente e calcio nei coni sensibili ultravioletto di zebrafish.

&#x6F02;&#x767D;&#x5264;&#x306E;&#x5358;&#x56DE;&#x66B4;&#x9732;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x5149;&#x306E;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C9;&#x3084;&#x30B3;&#x30FC;&#x30F3; &#x30A8;&#x30F3;&#x30BB;&#x30D5;&#x30A1;&#x30ED;&#x30D7;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x307B;&#x3093;&#x306E;&#x4E00;&#x90E8;&#x5927;&#x304D;&#x3059;&#x304E;&#x308B;&#x306E;&#x3067;&#x68D2;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x53EF;&#x8996;&#x306E;&#x9310;&#x4F53;&#x5149;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185; ca 2 + &#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x67D3;&#x6599;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x540C;&#x3058;&#x30BB;&#x30EB;&#x304B;&#x3089;&#x306F;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x8B58;&#x5225;&#x3057;&#x3001;UV &#x9310;&#x4F53;&#x304C;&#x6700;&#x5927;&#x611F;&#x5EA6;&#x306E;&#x6CE2;&#x9577;&#x306F; 360 &#x3067;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x7279;&#x5FB4;&#x3068;&#x5341;&#x5206;&#x306B;&#x305A;&#x3063;&#x3068;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306E;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x5149;&#x306E;&#x6CE2;&#x9577;&#x304B;&#x3089;&#x306F; nm (514.5 nm) &#x305D;&#x308C;&#x304B;&#x3089;&#x540C;&#x3058;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x5149;&#x96FB;&#x6D41;&#x3068; ca 2 + &#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3092;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3002;&#x79C1;&#x9054;&#x306F;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x9650;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x6570;&#x306E;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x306F;&#x30B3;&#x30FC;&#x30F3; &#x30A8;&#x30F3;&#x30BB;&#x30D5;&#x30A1;&#x30ED;&#x30D7;&#x30B7;&#x30F3;&#x306E;&#x6F02;&#x767D;&#x5C0F;&#x3055;&#x3059;&#x304E;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x901F;&#x5EA6;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3059;&#x308B; ca 2 + &#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x5916;&#x5074;&#x306E;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x5BC6;&#x63A5;&#x306B;&#x6CE2;&#x578B; ca 2 + &#x306E;&#x9664;&#x53BB;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x652F;&#x914D;&#x7684;&#x306A;&#x6642;&#x5B9A;&#x6570;&#x3068; Na + &#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D1;&#x30EB;&#x30B9;&#x5FDC;&#x7B54;&#x7573;&#x307F;&#x8FBC;&#x3080;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x7D9A;&#x304F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;-ca 2 +-K + &#x4EA4;&#x63DB;&#x3002;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x306E;&#x3088;&#x308A;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x6570;&#x3001;&#x9854;&#x6599;&#x3092;&#x6F02;&#x767D;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x901F;&#x5EA6;&#x306E;&#x52A0;&#x901F;&#x306F;&#x5FC5;&#x7136;&#x7684;&#x306B;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;ca 2 + &#x6FC3;&#x5EA6;&#x306F;&#x305D;&#x308C;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x4E0A;&#x6607;&#x3057;&#x3001;&#x30D5;&#x30E9;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306E;&#x30A6;&#x30A7;&#x30FC;&#x30D6; &#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3068;&#x304A;&#x304A;&#x3088;&#x305D;&#x4E00;&#x81F4;&#x6EDD;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5B9A;&#x5E38;&#x80CC;&#x666F;&#x5149;&#x3078;&#x306E;&#x66B4;&#x9732;&#x4E2D;&#x306B; ca 2 + &#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x5272;&#x5408;&#x3067;&#x5B9A;&#x5E38;&#x96FB;&#x6D41;&#x306E;&#x8584;&#x6697;&#x3044;&#x80CC;&#x666F;&#x306B;&#x56DE;&#x3057;&#x3001;&#x5B9A;&#x5E38;&#x72B6;&#x614B;&#x3067;&#x306E;&#x660E;&#x308B;&#x3044;&#x80CC;&#x666F;&#x306E;&#x843D;&#x3061;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x65E9;&#x671F;&#x767A;&#x75C7;&#x306E;&#x660E;&#x308B;&#x3044;&#x80CC;&#x666F;&#x306E;&#x6B21;&#x306E;&#x56DE;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;ca 2 + &#x6FC3;&#x5EA6;&#x5186;&#x9310;&#x306E;&#x96FB;&#x6D41;&#x304B;&#x3089;&#x4E88;&#x60F3;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x8457;&#x3057;&#x304F;&#x3088;&#x308A;&#x9AD8;&#x3044;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x79C1;&#x9054;&#x306F;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x5186;&#x9310;&#x306E;&#x9732;&#x5149;&#x524D;&#x306B;&#x819C;&#x4E0B;&#x6D41;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C8;&#x30AD;&#x30B7;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x30BB;&#x30D5;&#x30A1;&#x30ED;&#x30B9;&#x30DD;&#x30EA;&#x30F3; &#x30A8;&#x30B9;&#x30C6;&#x30EB;&#x3001;ca 2 + &#x30AD;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x5264;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5EC3;&#x6B62;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x5149;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027; ca 2 + &#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x5149;&#x3001;&#x660E;&#x308B;&#x3044;&#x80CC;&#x666F;&#x3067;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x5186;&#x9310;&#x306E;&#x5916;&#x5074;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8; ca 2 + &#x6FC3;&#x5EA6;&#x304C;&#x4E3B;&#x306B;&#x6D41;&#x5165;&#x306E;&#x7387;&#x304A;&#x3088;&#x3073; ca 2 + &#x306E;&#x6D41;&#x51FA;&#x30D7;&#x30E9;&#x30BA;&#x30DE;&#x819C;&#x306E;&#x95A2;&#x6570;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3001;ca 2 + &#x306E;&#x30EA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30B9;&#x3067;&#x6700;&#x3082;&#x304A;&#x305D;&#x3089;&#x304F;&#x3001;&#x30BB;&#x30EB;&#x5185;&#x306E;&#x30D0;&#x30C3;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x304B;&#x3089;&#x660E;&#x308B;&#x3044;&#x5149;&#x304C;&#x4E00;&#x904E;&#x6027; ca 2 + &#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x5149;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;&#x958B;&#x78BA;&#x7387;&#x304B;&#x3089;&#x671F;&#x5F85;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306E;&#x4E0A;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x96FB;&#x6D41;&#x3068;&#x7D2B;&#x5916;&#x7DDA;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x9310;&#x4F53;&#x306E;&#x30BC;&#x30D6;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x306E;&#x540C;&#x6642;&#x6E2C;&#x5B9A;

&#xBD09; &#xBCF4;&#xC774;&#xB294; &#xCF58; &#xB300;&#xB1CC;&#xC5D0; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xCE21;&#xC815; &#xB9CC;&#xB4E4; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; Ca2 + &#xB18D;&#xB3C4;&#xC758; &#xD615;&#xAD11; &#xC5FC;&#xB8CC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCE21;&#xC815; &#xBE5B;&#xC758; &#xB2E8;&#xC77C; &#xB178;&#xCD9C; &#xD45C; &#xBC31;&#xC81C; &#xB85C;&#xB4DC; &#xB610;&#xB294; &#xCF58; photopigment&#xC758; &#xB108;&#xBB34; &#xD070; &#xBD84;&#xC218;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558; &#xACE0; &#xC790;&#xC678;&#xC120;&#xC5D0; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; &#xCF58;&#xC758; &#xCD5C;&#xB300; &#xAC10;&#xB3C4; &#xADF8; &#xD30C;&#xC7A5;&#xC740; 360 zebrafish&#xC758; &#xD2B9;&#xC9D5; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xCE21;&#xC815; &#xBE5B;&#xC758; &#xD30C;&#xC7A5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCDA9;&#xBD84;&#xD788; &#xBA40;&#xB9AC; nm (514.5 nm)&#xB294; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD11; &#xC804;&#xB958; &#xBC0F; Ca2 + &#xB18D;&#xB3C4;&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xACB0;&#xC815;&#xC744; &#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC81C;&#xD55C; &#xB41C; &#xCE21;&#xC815;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB108;&#xBB34; &#xC791;&#xC740; &#xCF58; photopigment&#xC758; &#xD45C;&#xBC31;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD50C;&#xB798;&#xC2DC; &#xC18D;&#xB3C4; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE60; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8; Ca2 + &#xB18D;&#xB3C4; &#xCDA9;&#xC2E4;&#xD788; Na +&#xC640; Ca2 + &#xC81C;&#xAC70;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xC9C0;&#xBC30;&#xC801;&#xC778; &#xC2DC;&#xAC04; &#xC0C1;&#xC218; convolved &#xD50C;&#xB798;&#xC2DC; &#xC751;&#xB2F5; &#xC6E8;&#xC774;&#xBE0C; &#xD615;&#xD0DC;&#xC758; &#xD45C;&#xC2DC;-Ca2 +-K + &#xAD50;&#xD658;. &#xCE21;&#xC815;&#xC758; &#xB354; &#xD070; &#xC22B;&#xC790;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C9;&#xC18C;&#xB97C; &#xD45C;&#xBC31; &#xD558; &#xC5EC; &#xC751;&#xB2F5; &#xC18D;&#xB3C4;&#xC758; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xAC00;&#xC18D; &#xBD88;&#xAC00;&#xD53C; &#xD558; &#xAC8C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xC9C0; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; Ca2 + &#xB18D;&#xB3C4; &#xADF8;&#xB7FC;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xC0C1;&#xC2B9; &#xD558; &#xACE0; &#xD50C;&#xB798;&#xC2DC; &#xC6E8;&#xC774;&#xBE0C; &#xD615;&#xD0DC;&#xC640; &#xB300;&#xB7B5;&#xC801;&#xC778; &#xACC4;&#xC57D;&#xC5D0;. &#xAFB8;&#xC900;&#xD55C; &#xBC30;&#xACBD; &#xBE5B;&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; Ca2 + &#xB18D;&#xB3C4; &#xD3ED;&#xD3EC; &#xBE44;&#xB840;&#xD558;&#xC5EC;&#xC5D0;&#xC11C; dim &#xBC30;&#xACBD;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC815;&#xC0C1; &#xC0C1;&#xD0DC; &#xC804;&#xB958;&#xB97C; &#xC804;&#xD600; &#xC2DC;&#xAC04; &#xBC0F; &#xC548;&#xC815; &#xB41C; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1D;&#xC740; &#xBC30;&#xACBD;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xC77C;&#xCC0D; &#xBC1D;&#xC740; &#xBC30;&#xACBD;&#xC758; &#xBC1C;&#xBCD1; &#xB2E4;&#xC74C; &#xBC88;, Ca2 + &#xB18D;&#xB3C4; &#xC6D0;&#xBFD4;&#xC758; &#xC804;&#xB958;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC608;&#xC0C1; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xD604;&#xC800; &#xD558; &#xAC8C; &#xB354; &#xB192;&#xC740;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294;&#xC774; &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4;&#xC758; &#xBE5B; &#xC885;&#xC18D; Ca2 + &#xBE5B;, &#xBC1D;&#xC740; &#xBC30;&#xACBD;&#xC73C;&#xB85C; Ca2 + chelator BAPTA &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; permeant acetoxymethyl &#xC5D0;&#xC2A4;&#xD14C; &#xB974;&#xC5D0;&#xB294; &#xC6D0;&#xCD94;&#xD615;&#xC758; pre-exposure&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD3D0;&#xC9C0; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xACB0;&#xACFC;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xCF58; &#xC678;&#xBD80; &#xC138;&#xADF8;&#xBA3C;&#xD2B8; Ca2 + &#xB18D;&#xB3C4; &#xC8FC;&#xB85C; &#xC720;&#xC785; &#xC18D;&#xB3C4; &#xC6D0;&#xD615;&#xC9C8; &#xB9C9;&#xC5D0;&#xC11C; Ca2 +&#xC758; &#xACBD;&#xACFC;&#xC758; &#xD568;&#xC218; &#xC774;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC140; &#xB0B4;&#xC758; &#xBC84;&#xD37C; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xC544;&#xB9C8; &#xBC1D;&#xC740; &#xBE5B;&#xC5D0;&#xC11C; Ca2 +&#xC758; &#xCD9C;&#xC2DC; transiently &#xBE5B; &#xC885;&#xC18D; &#xCC44;&#xB110; &#xC624;&#xD508; &#xD655;&#xB960;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC608;&#xC0C1; &#xD558;&#xB294; &#xC218;&#xC900; &#xC774;&#xC0C1;&#xC758; Ca2 + &#xB18D;&#xB3C4; &#xB192;&#xC77C; &#xC218; &#xC785;&#xC99D;.

&#xD604;&#xC7AC; zebrafish&#xC758; &#xC790;&#xC678;&#xC120;&#xC5D0; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; &#xCF58;&#xC5D0; &#xCE7C;&#xC298; &#xB3D9;&#xC2DC; &#xCE21;&#xC815;.

En barras y fotorreceptores cono visible, mediciones m&uacute;ltiples no se hace de la concentraci&oacute;n de Ca2 + intracelular de la misma c&eacute;lula utilizando tintes fluorescentes, porque una sola exposici&oacute;n de la luz medida blanquea demasiado grande una fracci&oacute;n de la varilla o cono fotopigmento. Por lo tanto hemos identificado y caracterizado los conos sensibles UV del pez cebra, cuya longitud de onda de m&aacute;xima sensibilidad est&aacute; en 360 nm que es lo suficientemente lejos de la longitud de onda de nuestra luz de medici&oacute;n (514,5 nm) por lo que se ha podido hacer m&uacute;ltiples determinaciones de fotocorriente y la concentraci&oacute;n de Ca2 + de las c&eacute;lulas de la mismas. Mostramos que para un n&uacute;mero limitado de medidas, para que el blanqueo de los cono fotopigmento es demasiado peque&ntilde;o para afectar la cin&eacute;tica de flash, el segmento externo Ca2 + concentraci&oacute;n sigue de cerca la forma de onda de la respuesta de flash convolved con la constante de tiempo dominante para eliminaci&oacute;n de Ca2 + por Na +-Ca2 +-K + intercambio. Para un mayor n&uacute;mero de mediciones, aceleraci&oacute;n significativa de la cin&eacute;tica de respuesta por blanqueo de pigmento inevitablemente ocurre, pero sin embargo, la concentraci&oacute;n de Ca2 + aumenta y disminuye aproximadamente de acuerdo con la forma de onda de flash. Durante la exposici&oacute;n a la luz de fondo constante, la concentraci&oacute;n de Ca2 + cae en proporci&oacute;n a la corriente de estado estacionario para fondos dim en todo momento y para los fondos brillantes en estado estacionario. En temprano &Eacute;pocas despu&eacute;s de la aparici&oacute;n de fondos brillantes, sin embargo, la concentraci&oacute;n de Ca2 + es mayor de lo esperado de la corriente del cono. Este es el resultado de dependientes de la luz Ca2 + liberaci&oacute;n por fondo brillante luz, que pueden ser suprimido por preexposici&oacute;n del cono al &eacute;ster acetoxymethyl membrana-Florescente de Ca2 + quelante BAPTA mostramos. Por lo tanto, nuestros resultados demuestran que el segmento externo del cono Ca2 + concentraci&oacute;n es predominantemente una funci&oacute;n de la tasa de flujo y emanaci&oacute;n de Ca2 + a trav&eacute;s de la membrana plasm&aacute;tica, pero que una liberaci&oacute;n de Ca2 + en la luz brillante probablemente desde sitios de tamp&oacute;n dentro de la c&eacute;lula puede elevar transitoriamente la concentraci&oacute;n de Ca2 + por encima del nivel esperado de la probabilidad abierta de los canales dependientes de la luz.

Medici&oacute;n simult&aacute;nea de corriente y calcio en los conos sensibles al ULTRAVIOLETA del pez cebra.

&#x671F;&#x95F4;&#x7684;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x55C5;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5BF9;&#x523A;&#x6FC0;&#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#xFF0C;&#x7ECF;&#x901A;&#x8FC7;&#x73AF;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x95E8;&#x63A7;&#x901A;&#x9053;&#x8FDB;&#x5165;&#x7EA4;&#x6BDB;&#x548C;&#x88AB;&#x62C9;&#x4F38;&#x7684; Na(+)-Ca(2+) &#x4EA4;&#x6D41;&#x3002;&#x7ECF;&#x6D53;&#x5EA6;&#x4E0A;&#x5347;&#x6253;&#x5F00;&#x6FC0;&#x6D3B; Ca(2+) Cl(-) &#x7535;&#x5BFC;&#x8F7D;&#x6709;&#x4E0E;&#x5916;&#x6765;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;&#x7535;&#x6D41;&#x7684;&#x5927;&#x90E8;&#x5206;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x4F7F;&#x7528; Ca(2+) &#x6FC0;&#x6D3B; Cl(-) &#x5F53;&#x524D;&#x78F7;&#x9178;&#x4E8C;&#x916F;&#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x5242; IBMX &#x77ED;&#x6682;&#x63A5;&#x89E6;&#x4E4B;&#x540E;&#x7684;&#x4E0B;&#x8DCC;&#x9636;&#x6BB5;&#x6765;&#x95F4;&#x63A5;&#x5730;&#x76D1;&#x89C6; intraciliary &#x7ECF;&#x6D53;&#x5EA6;&#x8870;&#x53D8;&#x7814;&#x7A76;&#x4E86;&#x7ECF;&#x6324;&#x538B;&#x540E;&#x5916;&#x90E8; Na(+) &#x6D53;&#x5EA6;&#x7684;&#x4F9D;&#x8D56;&#x5173;&#x7CFB;&#x3002;&#x5916;&#x90E8; Na(+) &#x6D53;&#x5EA6;&#x51CF;&#x5C11;&#x4E86;&#x4E0E;&#x80CD;&#x76D0;&#xFF0C;&#x8D2F;&#x7A7F;&#x73AF;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x95E8;&#x63A7;&#x901A;&#x9053;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x652F;&#x6301; Na(+)-Ca(2+) &#x4EA4;&#x6362;&#x79BB;&#x5B50;&#x7684;&#x90E8;&#x5206;&#x66FF;&#x4EE3;&#x3002;&#x5E38;&#x6570;&#x63CF;&#x8FF0;&#x5F53;&#x524D;&#x4EE5;&#x4E0B; IBMX &#x523A;&#x6FC0;&#x8870;&#x53D8;&#x4EE4;&#x4EBA;&#x610F;&#x5916;&#x5C11;&#x53D7;&#x5230;&#x5916;&#x90E8;&#x7684; Na(+)&#xFF0C;&#x66FF;&#x4EE3;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x88AB;&#x5927;&#x5927;&#x8FDF;&#x949D;&#x53EA;&#x6709;&#x5F53;&#x5176;&#x6D53;&#x5EA6;&#x662F;&#x51CF;&#x81F3;&#x7B2C;&#x4E09;&#x6216;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x7684;&#x6797;&#x683C;&#x6EB6;&#x6DB2;&#x4E2D;&#x5176;&#x6B63;&#x5E38;&#x4EF7;&#x503C;&#x3002;&#x7EA4;&#x6BDB; reduced-Na(+) &#x89E3;&#x51B3;&#x65B9;&#x6848;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E00;&#x6BB5;&#x65F6;&#x95F4;&#x540E;&#x88AB;&#x9001;&#x56DE;&#x7684;&#x94C3;&#x58F0;&#x89E3;&#x51B3;&#x65B9;&#x6848;&#xFF0C;&#x4E3A;&#x5F53;&#x524D;&#x7684;&#x6700;&#x540E;&#x8870;&#x53D8;&#x65F6;&#x95F4;&#x5E38;&#x6570;&#x65F6;&#x76F8;&#x4F3C;&#xFF0C;&#x770B;&#x5230;&#x65F6;&#x7ACB;&#x5373;&#x8FD4;&#x56DE;&#x5230; IBMX &#x514D;&#x8D39;&#x94C3;&#x58F0;&#x7684;&#x89E3;&#x51B3;&#x65B9;&#x6848;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E00;&#x89C2;&#x5BDF;&#x8868;&#x660E;&#x901A;&#x8FC7; Na(+)-Ca(2+) &#x4EA4;&#x6362;&#x7ECF;&#x6324;&#x538B;&#x4E3B;&#x5BB0; IBMX&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7528;&#x6765;&#x8BC4;&#x4F30;&#x6362;&#x6D3B;&#x52A8;&#x54CD;&#x5E94;&#x7684;&#x4E0B;&#x964D;&#x9636;&#x6BB5;&#x3002;&#x6765;&#x81EA;&#x4E0D;&#x540C;&#x5916;&#x90E8; Na(+) &#x6D53;&#x5EA6;&#x7535;&#x6D41;&#x8870;&#x51CF;&#x65F6;&#x95F4;&#x5E38;&#x6570;&#x7684;&#x901F;&#x7387;&#x5E38;&#x6570;&#x53EF;&#x4EE5;&#x88C5;&#x5C71;&#x516C;&#x5F0F;&#x4E0E; K(d) &#x7684; + /-4 &#x6BEB;&#x7C73;&#x548C;&#x5C71;&#x7CFB;&#x6570;&#x7684; + /-0.4 3.7 54 &#x6240;&#x3002;&#x5916;&#x90E8; Na(+) &#x6D53;&#x5EA6;&#x4F9D;&#x8D56;&#x7684;&#x4F9D;&#x4ECE;&#x6307;&#x793A;&#x81F3;&#x5C11;&#x4E09;&#x4E2A; Na(+) &#x79BB;&#x5B50;&#x8FDB;&#x5165;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x6362;&#x70ED;&#x5668;&#x5468;&#x671F;&#xFF0C;&#x540C;&#x65F6;&#x4E3A;&#x5916;&#x90E8; Na(+) &#x5BF9;&#x6BD4;&#x611F;&#x5149;&#x5668;&#x548C;&#x5FC3;&#x810F;&#x6362;&#x70ED;&#x5668;&#x7684;&#x9AD8;&#x4EB2;&#x548C;&#x529B;&#x3002;&#x529F;&#x80FD;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x7684;&#x8FD9;&#x4E00;&#x89C2;&#x5BDF;&#x662F;&#x7C98;&#x6DB2;&#x7684;&#x76F8;&#x5BF9;&#x4E0D;&#x533A;&#x5206;&#x5927;&#x5C0F;&#x5199;&#x7684; Na(+)-Ca(2+) &#x6362;&#x5230;&#x5916;&#x90E8; Na(+) &#x6D53;&#x5EA6;&#x5141;&#x8BB8;&#x5373;&#x4F7F;&#x4E4B;&#x540E;&#x5BF9;&#x55C5;&#x89C9;&#x90E8;&#x5206;&#x7A00;&#x91CA;&#x6216;&#x6D53;&#x7F29;&#x7684;&#x6B63;&#x5E38;&#x53CD;&#x5E94;&#x7EC8;&#x6B62;&#x3002;

&#x5916;&#x90E8;&#x94A0;&#x6D53;&#x5EA6;&#x5BF9;&#x9752;&#x86D9;&#x55C5;&#x7EC6;&#x80DE;&#x94A0;&#x9499;&#x4EA4;&#x6362;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;

During the response of vertebrate olfactory receptor cells to stimulation, Ca(2+) enters the cilia via cyclic nucleotide-gated channels and is extruded by Na(+)-Ca(2+) exchange. The rise in Ca(2+) concentration opens a Ca(2+)-activated Cl(-) conductance which carries most of the inward receptor current. The dependence of Ca(2+) extrusion upon external Na(+) concentration was studied by using the falling phase of the Ca(2+)-activated Cl(-) current following a brief exposure to the phosphodiesterase inhibitor IBMX to monitor indirectly the decay in intraciliary Ca(2+) concentration. External Na(+) concentration was reduced by partial substitution with guanidinium, an ion which permeates the cyclic nucleotide-gated channel but does not support Na(+)-Ca(2+) exchange. The time constant describing the decay in current following IBMX stimulation was surprisingly little affected by substitution of external Na(+), being substantially retarded only when its concentration was reduced to a third or less of its normal value in Ringer solution. When the cilia were returned to Ringer solution after a period in reduced-Na(+) solution, the time constant for the final decay of current was similar to that seen when returning immediately to IBMX-free Ringer solution. This observation suggests that Ca(2+) extrusion via Na(+)-Ca(2+) exchange dominates the falling phase of the response to IBMX, which can therefore be used to assess exchanger activity. Rate constants derived from the time constants for current decay at different external Na(+) concentrations could be fitted by the Hill equation with a K(d) of 54 +/- 4 mm and Hill coefficient of 3.7 +/- 0.4. The cooperativity of the dependence upon external Na(+) concentration indicates that at least three Na(+) ions enter for each exchanger cycle, while the high affinity for external Na(+) contrasts with the photoreceptor and cardiac exchangers. The functional importance of this observation is that the relative insensitivity of the Na(+)-Ca(2+) exchanger to external Na(+) concentration allows normal response termination even following partial dilution or concentration of the olfactory mucus.

The effect of external sodium concentration on sodium-calcium exchange in frog olfactory receptor cells.

Au cours de la r&eacute;ponse des cellules de vert&eacute;br&eacute;s de r&eacute;cepteurs olfactifs, de stimulation, Ca(2+) entre les cils via canaux nucl&eacute;otide cyclique et est expuls&eacute; par l&#39;&eacute;change de Na(+)-Ca(2+). L&#39;augmentation de concentration de Ca(2+) ouvre une conductance activ&eacute;s par le Ca(2+) Cl(-) qui supporte le plus du r&eacute;cepteur vers l&#39;int&eacute;rieur actuel. La d&eacute;pendance de l&#39;extrusion de Ca(2+) &agrave; la concentration de Na externe a &eacute;t&eacute; &eacute;tudi&eacute;e en utilisant la phase descendante de la Cl(-) Ca(2+)-activ&eacute; actuelle apr&egrave;s une br&egrave;ve exposition &agrave; l&#39;inhibiteur de la phosphodiest&eacute;rase IBMX pour contr&ocirc;ler indirectement la d&eacute;sint&eacute;gration intraciliary Ca(2+) concentration. Concentration Na externe a &eacute;t&eacute; r&eacute;duite par une substitution partielle avec guanidinium, un ion qui impr&egrave;gne le canal de d&eacute;coupage en nucl&eacute;otides cyclique, mais ne supporte pas l&#39;&eacute;change de Na(+)-Ca(2+). L&#39;&eacute;poque constante qui d&eacute;crit la d&eacute;composition en courante apr&egrave;s la stimulation IBMX &eacute;tait &eacute;tonnamment peu affect&eacute; par la substitution de Na externe, ralentie consid&eacute;rablement uniquement lorsque sa concentration est r&eacute;duite &agrave; un tiers ou moins de sa valeur normale dans une solution de Ringer. Lorsque les cils ont &eacute;t&eacute; renvoy&eacute;s &agrave; une solution de Ringer, apr&egrave;s une p&eacute;riode dans une solution reduced-Na(+), la constante de temps pour la d&eacute;sint&eacute;gration finale de courant &eacute;tait similaire &agrave; celle observ&eacute;e lors du retour imm&eacute;diatement &agrave; une solution de Ringer IBMX libres. Cette observation sugg&egrave;re que l&#39;extrusion Ca(2+) via l&#39;&eacute;change de Na(+)-Ca(2+) domine la phase descendante de la r&eacute;ponse &agrave; IBMX, qui peut donc &ecirc;tre utilis&eacute; pour &eacute;valuer l&#39;activit&eacute; de l&#39;&eacute;changeur. Les constantes de vitesse d&eacute;riv&eacute;s les constantes de temps de d&eacute;croissance actuelle &agrave; diff&eacute;rentes concentrations de na externes pourraient &ecirc;tre mont&eacute;s par l&#39;&eacute;quation de Hill avec un K(d) de 54 +/-4 mm et le coefficient de Hill de 3,7 +/-0,4. La coop&eacute;rativit&eacute; de la d&eacute;pendance &agrave; la concentration de Na externe indique qu&#39;au moins trois ions Na entrent pour chaque cycle d&#39;&eacute;changeur, tandis que la forte affinit&eacute; pour des contrastes na externes avec les &eacute;changeurs photor&eacute;cepteur et cardiaque. L&#39;importance fonctionnelle de cette observation est que l&#39;insensibilit&eacute; relative de l&#39;&eacute;changeur de Na(+)-Ca(2+) &agrave; la concentration de Na externe permet de terminaison de r&eacute;ponse normale m&ecirc;me apr&egrave;s dilution partielle ou la concentration de la muqueuse olfactive.

L&#39;effet de la concentration de sodium externe &agrave; exchange de sodium-calcium dans les cellules de r&eacute;cepteurs olfactifs de grenouille.

W&auml;hrend der Reaktion der Wirbeltiere olfaktorisches Zellen auf Stimulation Ca(2+) gelangt die Flimmerh&auml;rchen &uuml;ber zyklische Nukleotid-Gating-Kan&auml;le und ist von Na(+)-Ca(2+) Exchange extrudiert. Der Anstieg der Konzentration von Ca(2+) &ouml;ffnet ein Ca(2+) aktivierte Cl(-) Leitwert, der Gro&szlig;teil der aktuellen nach innen Rezeptor tr&auml;gt. Die Abh&auml;ngigkeit der Ca(2+) Projektion auf externe Na(+) Konzentration wurde untersucht, mit die fallende Phase des die aktuelle nach eine kurze Exposition gegen&uuml;ber der Phosphodiesterase-Hemmer IBMX Ca(2+) aktivierten Cl(-) um indirekt den Zerfall in intraciliary Ca(2+)-Konzentration zu &uuml;berwachen. Externe Na(+) Konzentration wurde durch partielle Substitution mit Guanidinium, ein Ion reduziert, die durchdringt des zyklischen Nukleotid-Gating-Kanals unterst&uuml;tzt jedoch keine Na(+)-Ca(2+) Austausch. Die Zeit war konstant, beschreibt den Zerfall im aktuellen folgende IBMX Stimulierung &uuml;berraschend wenig beeintr&auml;chtigt durch Substitution von externen Na(+), verz&ouml;gert wird wesentlich nur, wenn seine Konzentration auf ein Drittel reduziert oder weniger von den normalen Wert in Ringer L&ouml;sung war. Wenn die Flimmerh&auml;rchen nach einer Zeit in reduced-Na(+) L&ouml;sung an Ringer L&ouml;sung zur&uuml;ckgegeben wurden, war die Zeitkonstante f&uuml;r die endg&uuml;ltigen Zerfall des aktuellen &auml;hnlich wie beim IBMX-freie Ringer L&ouml;sung sofort wieder zu sehen. Diese Beobachtung legt nahe, dass Ca(2+) Projektion &uuml;ber Na(+)-Ca(2+) Austausch die fallende Phase der Reaktion auf IBMX, dominiert die W&auml;rmetauscher Aktivit&auml;t beurteilen daher verwendet werden kann. Geschwindigkeitskonstanten abgeleitet die Zeitkonstanten f&uuml;r aktuelle Zerfall bei verschiedenen externen Na(+)-Konzentrationen konnte durch die Hill-Gleichung mit einer K(d) von 54 +/-4 mm und Hill-Koeffizient von 3,7 +/-0.4 versehen sein. Die Kooperativit&auml;t der Abh&auml;ngigkeit von externen Na(+) Konzentration bedeutet, dass mindestens drei Na(+) Ionen f&uuml;r jeden W&auml;rmetauscher-Zyklus, w&auml;hrend die hohe Affinit&auml;t f&uuml;r externe Na(+) Kontraste mit der Photorezeptoren und kardiale W&auml;rme&uuml;bertrager eingeben. Die funktionelle Bedeutung dieser Beobachtung ist, dass die relative Unempfindlichkeit des Na(+)-Ca(2+) Exchanger zu externen Na(+) Konzentration normale Reaktion K&uuml;ndigung auch nach teilweiser Verd&uuml;nnung oder Konzentration des olfaktorischen Schleims.

Die Wirkung der externen Natrium-Konzentration an Natrium-Calcium-Exchange in Frosch olfaktorisches Zellen.

Durante la risposta alla stimolazione delle cellule recettore olfattivo vertebrati, Ca(2+) entra le ciglia tramite canali cyclic nucleotide-gated e viene estruso da Na(+)-Ca(2+) exchange. L&#39;aumento della concentrazione di Ca(2+) apre una conduttanza attivato Ca(2+) Cl(-) che trasporta la maggior parte del recettore perfezionamento attivo corrente. La dipendenza dell&#39;estrusione Ca(2+) all&#39;esterno Na(+) concentrazione &egrave; stata studiata utilizzando la fase di caduta della Cl(-) Ca(2+)-attivato corrente seguendo una breve esposizione all&#39;inibitore della fosfodiesterasi IBMX per monitorare indirettamente il decadimento della concentrazione Ca(2+) intraciliary. Esterno Na(+) concentrazione &egrave; stata ridotta da parziale sostituzione con guanidinium, un ione che permea il canale nucleotide-gated ciclico ma non supporta exchange Na(+)-Ca(2+). Tempo costante che descrive il decadimento in corrente stimolazione IBMX seguente era sorprendentemente poco interessati da sostituzione di Na(+) esterno, essendo sostanzialmente ritardato solo quando la concentrazione era ridotta a un terzo o meno del suo valore normale in soluzione di Ringer. Quando le ciglia sono state restituite alla soluzione Ringer dopo un periodo in soluzione reduced-Na(+), la costante di tempo per il decadimento finale della corrente era simile a quello visto quando si torna immediatamente alla soluzione Ringer IBMX-libero. Questa osservazione suggerisce che Ca(2+) estrusione mediante scambio di Na(+)-Ca(2+) domina la fase di caduta della risposta alla IBMX, che quindi pu&ograve; essere utilizzato per valutare le attivit&agrave; dello scambiatore. Costanti di velocit&agrave; derivate da costanti di tempo per il decadimento attuale a differenti concentrazioni di Na(+) esterni potrebbero essere montati mediante l&#39;equazione di Hill con un K(d) di 54 + /-4 mm e coefficiente di Hill di 3,7 + /-0,4. La cooperativit&agrave; della dipendenza esterna Na(+) concentrazione indica che almeno tre ioni Na(+) inserire per ogni ciclo di scambiatore, mentre l&#39;alta affinit&agrave; per esterni Na(+) contrasti con gli scambiatori di fotorecettori e cardiaco. L&#39;importanza funzionale di questa osservazione &egrave; che la relativa insensibilit&agrave; dello scambiatore Na(+)-Ca(2+) esterne Na(+) concentrazione permette di terminazione normale risposta seguendo anche parziale diluizione o concentrazione del muco olfattivo.

L&#39;effetto della concentrazione di sodio esterno sullo scambio sodio-calcio nelle cellule del recettore olfattivo rana.

&#x523A;&#x6FC0;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x55C5;&#x899A;&#x53D7;&#x5BB9;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4E2D;&#x306B;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x7E4A;&#x6BDB;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x74B0;&#x72B6;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9; &#x30FB; &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306B;&#x5165;&#x308B;&#x3057;&#x3001;Na(+)-Ca(2+) exchange &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x62BC;&#x3057;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x4E0A;&#x6607;&#x306F;&#x3001;&#x73FE;&#x5728;&#x5BFE;&#x5185;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x3092;&#x904B;&#x3076; Ca(2+) &#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6; Cl(-) &#x30B3;&#x30F3;&#x30C0;&#x30AF;&#x30BF;&#x30F3;&#x30B9;&#x304C;&#x958B;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x62BC;&#x51FA;&#x3057;&#x5916;&#x90E8; Na(+) &#x6FC3;&#x5EA6;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30B8;&#x30A8;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264; IBMX &#x7C21;&#x5358;&#x306B;&#x66B4;&#x9732;&#x3001;&#x6B21;&#x306B;&#x73FE;&#x5728;&#x306E; Ca(2+) &#x6D3B;&#x6027;&#x5316; Cl(-) &#x306E;&#x4E0B;&#x964D;&#x671F; intraciliary &#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x6E1B;&#x8870;&#x3092;&#x76F4;&#x63A5;&#x76E3;&#x8996;&#x3057;&#x3066;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5916;&#x90E8; Na(+) &#x6FC3;&#x5EA6;&#x90E8;&#x5206;&#x7F6E;&#x63DB;&#x30B0;&#x30A2;&#x30CB;&#x30B8;&#x3001;&#x74B0;&#x72B6;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9; &#x30B2;&#x30FC;&#x30C8; &#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306B;&#x6D78;&#x900F;&#x3059;&#x308B;&#x304C;&#x3001;Na(+)-Ca(2+) exchange &#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x73FE;&#x5728;&#x6B21; IBMX &#x523A;&#x6FC0;&#x3067;&#x6E1B;&#x8870;&#x5B9A;&#x6570;&#x3092;&#x8A18;&#x8FF0;&#x3059;&#x308B;&#x9A5A;&#x304F;&#x307B;&#x3069;&#x5C11;&#x3057;&#x5916;&#x90E8; Na(+) &#x306E;&#x7F6E;&#x63DB;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x6642;&#x9593;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x9045;&#x308C;&#x308B;&#x3060;&#x3051;&#x305D;&#x306E;&#x6FC3;&#x5EA6; 3 &#x5206;&#x306E; 1 &#x306B;&#x6E1B;&#x5C11;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x305D;&#x306E;&#x6B63;&#x5E38;&#x5024;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AC;&#x30FC;&#x6DB2;&#x306E;&#x5C11;&#x306A;&#x3044;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x3002;&#x7E4A;&#x6BDB;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B2;&#x30EB;&#x6DB2;&#x3092; reduced-Na(+) &#x30BD;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3067;&#x671F;&#x9593;&#x5F8C;&#x306B;&#x8FD4;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5834;&#x5408;&#x306F;&#x3001;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x6700;&#x7D42;&#x7684;&#x306A;&#x5D29;&#x58CA;&#x306E;&#x6642;&#x5B9A;&#x6570;&#x306F; IBMX &#x7121;&#x6599;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AC;&#x30FC;&#x6DB2;&#x306B;&#x3059;&#x3050;&#x306B;&#x8FD4;&#x3059;&#x5834;&#x5408;&#x3092;&#x898B;&#x306B;&#x4F3C;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x89B3;&#x6E2C;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x62BC;&#x51FA; Na(+)-Ca(2+) exchange &#x7D4C;&#x7531;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x4EA4;&#x63DB;&#x6D3B;&#x52D5;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059; IBMX &#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x4E0B;&#x964D;&#x671F;&#x3092;&#x652F;&#x914D;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x901F;&#x5EA6;&#x5B9A;&#x6570;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x5916;&#x90E8; Na(+) &#x6FC3;&#x5EA6;&#x3067;&#x73FE;&#x5728;&#x6E1B;&#x8870;&#x6642;&#x5B9A;&#x6570;&#x304B;&#x3089;&#x6D3E;&#x751F; 54 &plusmn; 4 mm &#x3068; 0.4 &plusmn; 3.7 &#x306E;&#x4E18;&#x4FC2;&#x6570;&#x306F; K(d) &#x3068;&#x30D2;&#x30EB;&#x65B9;&#x7A0B;&#x5F0F;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x88C5;&#x5099;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5916;&#x90E8;&#x306E; Na(+) &#x6FC3;&#x5EA6;&#x4F9D;&#x5B58;&#x306E;&#x5354;&#x540C;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082; 3 &#x3064;&#x306E; Na(+) &#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x5916;&#x90E8; Na(+) &#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30E9;&#x30B9;&#x30C8;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x89AA;&#x548C;&#x6027;&#x5149;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5FC3;&#x81D3;&#x4EA4;&#x63DB;&#x5668;&#x3068;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x5404;&#x4EA4;&#x63DB;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x3092;&#x5165;&#x529B;&#x3059;&#x308B;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x89B3;&#x6E2C;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#x5916;&#x90E8; Na(+) &#x6FC3;&#x5EA6;&#x306B; Na(+)-Ca(2+) &#x4EA4;&#x63DB;&#x306E;&#x76F8;&#x5BFE;&#x4E0D;&#x5FDC;&#x3082;&#x6B21;&#x306E;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306A;&#x5E0C;&#x91C8;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x55C5;&#x7C98;&#x6DB2;&#x306E;&#x901A;&#x5E38;&#x5FDC;&#x7B54;&#x7D42;&#x4E86;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#x30CA;&#x30C8;&#x30EA;&#x30A6;&#x30E0;-&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x4EA4;&#x63DB;&#x30AB;&#x30A8;&#x30EB;&#x55C5;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x5916;&#x90E8;&#x30CA;&#x30C8;&#x30EA;&#x30A6;&#x30E0;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3002;

&#xCC99;&#xCD94; &#xD6C4; &#xAC01; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC790;&#xADF9;&#xC5D0; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; Ca(2+) &#xC8FC;&#xAE30;&#xC801; &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC; &#xCC44;&#xB110;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC18D;&#xB208;&#xC379;&#xC744; &#xC785;&#xB825; &#xD558; &#xACE0; Na(+)-Ca(2+) &#xAD50;&#xD658;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC555;&#xCD9C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. Ca(2+) &#xB18D;&#xB3C4;&#xC758; &#xC99D;&#xAC00; Cl(-) Ca(2+) &#xD65C;&#xC131; &#xC804;&#xB3C4;&#xB3C4;&#xB97C; &#xD604;&#xC7AC; &#xC548;&#xCABD;&#xC73C;&#xB85C; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC744; &#xC218;&#xD589; &#xD558;&#xB294; &#xC5F4;&#xB9BD;&#xB2C8;&#xB2E4;. Ca(2+) &#xC555;&#xCD9C; &#xC678;&#xBD80; Na(+) &#xB18D;&#xB3C4; &#xB530;&#xB77C; &#xC758;&#xC874; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130; &#xC9C1;&#xC811; intraciliary Ca(2+) &#xC9D1;&#xC911;&#xB825;&#xC758; &#xAC10;&#xD1F4; &#xD604;&#xC7AC; &#xD3EC;&#xC2A4; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; IBMX&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC04;&#xB2E8;&#xD55C; &#xB178;&#xCD9C; &#xB2E4;&#xC74C; Ca(2+) &#xD65C;&#xC131;&#xD654; cl(-)&#xC758; &#xD558;&#xAC15; &#xB2E8;&#xACC4;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC678;&#xBD80; Na(+) &#xB18D;&#xB3C4; guanidinium, &#xC8FC;&#xAE30;&#xC801; &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC; &#xCC44;&#xB110; &#xBC30;&#xC5B4; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; Na(+)-Ca(2+) exchange&#xB97C; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294; &#xC774;&#xC628;&#xC744; &#xC77C;&#xBD80; &#xB300;&#xCCB4; &#xD558; &#xC5EC; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC758;&#xC678;&#xB85C; &#xC678;&#xBD80; na(+)&#xC758; &#xB300;&#xCCB4;&#xC5D0;&#xC758; &#xD55C; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC57D;&#xAC04;&#xC740; &#xD604;&#xC7AC; &#xB2E4;&#xC74C; IBMX &#xC790;&#xADF9;&#xC5D0; &#xBD80;&#xD328;&#xB97C; &#xC124;&#xBA85; &#xD558;&#xB294; &#xC0C1;&#xC218; &#xC2DC;&#xAC04;&#xB9CC;&#xC758; &#xB18D;&#xB3C4; 3 &#xBD84;&#xC758; 1&#xC744; &#xAC10;&#xC18C; &#xB610;&#xB294; &#xBCA8; &#xC194;&#xB8E8;&#xC158;&#xC5D0; &#xC815;&#xC0C1; &#xAC12;&#xC758; &#xC801;&#xC740; &#xC800; &#xB2A5; &#xC544; &#xC2E4;&#xC9C8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB418; &#xACE0;. &#xC18D;&#xB208;&#xC379; reduced-Na(+) &#xC194;&#xB8E8;&#xC158;&#xC758; &#xAE30;&#xAC04; &#xD6C4; &#xBCA8; &#xC194;&#xB8E8;&#xC158;&#xC5D0; &#xBC18;&#xD658; &#xD588;&#xB2E4;, &#xC804;&#xB958;&#xC758; &#xCD5C;&#xC885; &#xBD80;&#xD328;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC2DC;&#xAC04; &#xC0C1;&#xC218;&#xB294; IBMX &#xBB34;&#xB8CC; &#xBCA8;&#xC18C;&#xB9AC; &#xC194;&#xB8E8;&#xC158;&#xC744; &#xC989;&#xC2DC; &#xBC18;&#xD658; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0; &#xBCF8; &#xC720;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774; &#xAD00;&#xCC30; Na(+)-Ca(2+) exchange &#xD1B5;&#xD574; Ca(2+) &#xC555;&#xCD9C; &#xC9C0;&#xBC30; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xAD50;&#xD658;&#xAE30; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xD3C9;&#xAC00; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB294; IBMX&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC758; &#xD558;&#xAC15; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB098;&#xC654;&#xB2E4;. &#xB2E4;&#xB978; &#xC678;&#xBD80; Na(+) &#xB18D;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xD604;&#xC7AC; &#xBD80;&#xD328;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC2DC;&#xAC04; &#xC0C1;&#xC218;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xC18D;&#xB3C4; &#xC0C1;&#xC218; 4 m m&#xC640; 0.4 &plusmn; 3.7&#xC758; &#xD790; &#xACC4;&#xC218; + 54&#xB294; k(d)&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xC5B8;&#xB355; &#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xC7A5;&#xCC29; &#xB418;&#xC5B4; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Cooperativity &#xC678;&#xBD80; Na(+) &#xB18D;&#xB3C4; &#xB530;&#xB77C; &#xC758;&#xC874;&#xC758; &#xC801;&#xC5B4;&#xB3C4; 3 &#xAC1C;&#xC758; Na(+) &#xC774;&#xC628; &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9AC;&#xC149;&#xD130; &#xC2EC;&#xC7A5; &#xAD50;&#xD658;&#xAE30;&#xC640; &#xC678;&#xBD80; Na(+) &#xB300;&#xC870;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB192;&#xC740; &#xC120;&#xD638;&#xB3C4; &#xD558;&#xBA74;&#xC11C; &#xAC01; &#xAD50;&#xD658;&#xAE30; &#xC0AC;&#xC774;&#xD074;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC785;&#xB825;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xAD00;&#xCC30;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xC911;&#xC694;&#xC131;&#xC740; &#xC678;&#xBD80; Na(+) &#xB18D;&#xB3C4;&#xB97C; Na(+)-Ca(2+) &#xAD50;&#xD658;&#xAE30;&#xC758; &#xC0C1;&#xB300; &#xBB34;&#xAC10;&#xAC01;&#xB3C4; &#xBD80;&#xBD84; &#xD76C;&#xC11D; &#xB610;&#xB294; &#xD6C4; &#xAC01; &#xC810;&#xC561;&#xC758; &#xB18D;&#xB3C4; &#xB530;&#xB77C; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xBC18;&#xC751;&#xC744; &#xC885;&#xB8CC;.

&#xAC1C;&#xAD6C;&#xB9AC; &#xD6C4; &#xAC01; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xB098;&#xD2B8;&#xB968; &#xCE7C;&#xC298; exchange&#xC5D0;&#xC11C; &#xC678;&#xBD80; &#xB098;&#xD2B8;&#xB968; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC;.

Durante la respuesta de las c&eacute;lulas receptoras olfatorias vertebrados al est&iacute;mulo, CA entra en los cilios v&iacute;a c&iacute;clica nucle&oacute;tido-bloqueado y es sacado por cambio de Na(+)-Ca(2+). El aumento de la concentraci&oacute;n de CA abre una conductancia activados Ca(2+) cl (-) que transporta la mayor parte del receptor interno actual. La dependencia de la protuberancia de la CA sobre la concentraci&oacute;n de na externo fue estudiada con la fase descendente de cl (-la Ca(2+)-activado) actual despu&eacute;s de una breve exposici&oacute;n a la IBMX del inhibidor de la fosfodiesterasa para supervisar indirectamente el decaimiento en la concentraci&oacute;n de CA intraciliary. Concentraci&oacute;n de na externo se redujo en sustituci&oacute;n parcial con Guanidinio, un ion que impregna el canal cerrada nucle&oacute;tido c&iacute;clico pero no permite el intercambio de Na(+)-Ca(2+). El tiempo constante que describe la decadencia en la actual despu&eacute;s del est&iacute;mulo IBMX fue sorprendentemente poco afectado por la substituci&oacute;n de na externos, siendo substancialmente retardado solamente cuando su concentraci&oacute;n fue reducido a un tercio o menos de su valor normal en soluci&oacute;n de Ringer. Cuando los cilios fueron devueltos a la soluci&oacute;n de Ringer despu&eacute;s de un per&iacute;odo en la soluci&oacute;n de reduced-Na(+), la constante de tiempo de la decadencia final de corriente fue similar al que se observa al regresar inmediatamente a la soluci&oacute;n de Ringer libre de IBMX. Esta observaci&oacute;n sugiere que la extrusi&oacute;n de CA mediante intercambio de Na(+)-Ca(2+) domina la fase descendente de la respuesta a IBMX, que puede ser utilizada para evaluar la actividad del intercambiador. Constantes de tipo derivados de las constantes de tiempo para la actual decadencia a diferentes concentraciones de na externas podr&iacute;an montarse por la ecuaci&oacute;n de Hill con un K(d) de 54 +/-4 mm y coeficiente de Hill de 3,7 +/-0.4. La cooperatividad de la dependencia externa na concentraci&oacute;n indica que al menos tres iones na entran en cada ciclo de intercambiador, mientras la alta afinidad para externos na contrastes con los intercambiadores de fotorreceptor y cardiaco. La importancia funcional de esta observaci&oacute;n es que la relativa insensibilidad del intercambiador Na(+)-Ca(2+) externos na concentraci&oacute;n permite la terminaci&oacute;n de la respuesta normal incluso despu&eacute;s de diluci&oacute;n parcial o concentraci&oacute;n de la mucosa olfativa.

El efecto de la concentraci&oacute;n de sodio externo en intercambio sodio-calcio en las c&eacute;lulas receptoras olfatorias de rana.

&#x611F;&#x5149;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x7D2B;&#x5916;&#x5149;&#x54CD;&#x5E94;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x523B;&#x5EA6;&#x7531;&#x6700;&#x6162;&#x7684;&#x6B65;&#x9AA4;&#xFF0C;&#x6DEC;&#x706B;&#x7684; phototransduction &#x7EA7;&#x8054;&#x7684;&#x5149;&#x81F4;&#x6D3B;&#x52A8;&#x8BBE;&#x7F6E;&#x3002;&#x5728;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x611F;&#x5149;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x901F;&#x7387;&#x9650;&#x5236;&#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#x88AB;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x662F; photopigment &#x7684;&#x50AC;&#x5316;&#x6D3B;&#x6027;&#x5835;&#x6216;&#x989C;&#x6599;&#x7684;&#x6548;&#x5E94;&#xFF0C;transducin-GTP-&#x78F7;&#x9178;&#x4E8C;&#x916F;&#x9176;&#x590D;&#x5835;&#x3002;&#x5728;&#x4ECE;&#x5B64;&#x7ACB;&#x877E;&#x8788; L &#x9525;&#x5438;&#x5438;&#x6DB2;&#x7BA1;&#x5F55;&#x97F3;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x9632;&#x6B62;&#x5185;&#x90E8; [&#x7ECF;] &#x53D8;&#x5316;&#x63A8;&#x8FDF;&#x7ECF;&#x6D4E;&#x590D;&#x82CF;&#x7684;&#x5149;&#x53CD;&#x5E94;&#x548C;&#x957F;&#x671F;&#x5360;&#x4E3B;&#x5BFC;&#x5730;&#x4F4D;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x5E38;&#x6570;&#x7528;&#x4E8E;&#x6062;&#x590D;&#x3002;Ca(2+) &#x654F;&#x611F;&#x6B65;&#x9AA4;&#x6D89;&#x53CA;&#x989C;&#x6599;&#x672C;&#x8EAB;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x4ECE;&#x989C;&#x6599;&#x7684;&#x9634;&#x79BB;&#x5B50;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x7AD9;&#x70B9; Cl(-) &#x53BB;&#x9664;&#x52A0;&#x901F;&#x4E3B;&#x5BFC;&#x65F6;&#x95F4;&#x5E38;&#x6570;&#x4E3A;&#x54CD;&#x5E94;&#x6062;&#x590D;&#x7684;&#x89C2;&#x5BDF;&#x3002;&#x96C6;&#x4F53;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x610F;&#x89C1;&#x8868;&#x660E; L-&#x9525;&#x4E2D;&#x4E0E;&#x4E24;&#x6816;&#x7C7B;&#x68D2;&#x652F;&#x914D;&#x65F6;&#x95F4;&#x5E38;&#x6570;&#x5728;&#x54EA;&#x91CC;&#x65E0;&#x52A8;&#x4E8E;&#x8877; [&#x7ECF;] &#x989C;&#x6599;&#x4E0D;&#x540C;&#x6DEC;&#x706B;&#x901F;&#x7387;&#x9650;&#x5236;&#x6062;&#x590D;&#x63D0;&#x4F9B;&#x989D;&#x5916;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x671F;&#x95F4;&#x5149;&#x9002;&#x5E94;&#x8C03;&#x8282;&#x9525;&#x54CD;&#x5E94;&#x3002;

Photopigment &#x6DEC;&#x706B;&#x662F; Ca2 + &#x4F9D;&#x8D56;&#x548C;&#x877E;&#x8788; L &#x9525;&#x4F53;&#x611F;&#x53D7;&#x5668;&#x53CD;&#x5E94;&#x6301;&#x7EED;&#x65F6;&#x95F4;&#x7684;&#x63A7;&#x4EF6;&#x3002;

The time scale of the photoresponse in photoreceptor cells is set by the slowest of the steps that quench the light-induced activity of the phototransduction cascade. In vertebrate photoreceptor cells, this rate-limiting reaction is thought to be either shutoff of catalytic activity in the photopigment or shutoff of the pigment's effector, the transducin-GTP-phosphodiesterase complex. In suction pipette recordings from isolated salamander L-cones, we found that preventing changes in internal [Ca(2+)] delayed the recovery of the light response and prolonged the dominant time constant for recovery. Evidence that the Ca(2+)-sensitive step involved the pigment itself was provided by the observation that removal of Cl(-) from the pigment's anion-binding site accelerated the dominant time constant for response recovery. Collectively, these observations indicate that in L-cones, unlike amphibian rods where the dominant time constant is insensitive to [Ca(2+)], pigment quenching rate limits recovery and provides an additional mechanism for modulating the cone response during light adaptation.

Photopigment quenching is Ca2+ dependent and controls response duration in salamander L-cone photoreceptors.

L&#x26;#39;&#xE9;chelle de temps de la photor&#xE9;ponse dans les cellules photor&#xE9;ceptrices est fix&#xE9; par le plus lent des &#xE9;tapes qui &#xE9;teignent l&#x26;#39;activit&#xE9; induite par la lumi&#xE8;re de la cascade de phototransduction. Dans les cellules photor&#xE9;ceptrices vert&#xE9;br&#xE9;s, ce r&#xE9;actionnel limitant la vitesse est jug&#xE9; soit d&#x26;#39;arr&#xEA;t de l&#x26;#39;activit&#xE9; catalytique dans la photopigment ou d&#x26;#39;arr&#xEA;t de l&#x26;#39;effecteur du pigment, le transducine-GTP-phosphodiest&#xE9;rase complexe. Dans les enregistrements pipette d&#x26;#39;aspiration de salamandres isol&#xE9;s L-c&#xF4;nes, nous avons constat&#xE9; que des changements dans la pr&#xE9;vention interne [Ca (2 +)] retard&#xE9; la reprise de la r&#xE9;ponse &#xE0; la lumi&#xE8;re et a prolong&#xE9; le d&#xE9;lai dominante constante pour la r&#xE9;cup&#xE9;ration. Preuve que le Ca (2 +) sensible &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;tape a consist&#xE9; &#xE0; pigment lui-m&#xEA;me a &#xE9;t&#xE9; fourni par l&#x26;#39;observation que la suppression de Cl (-) de liaison des anions le pigment le site a acc&#xE9;l&#xE9;r&#xE9; le temps dominante constante pour la r&#xE9;cup&#xE9;ration de r&#xE9;ponse. Collectivement, ces observations indiquent que, dans L-c&#xF4;nes, contrairement &#xE0; tiges d&#x26;#39;amphibiens o&#xF9; la constante de temps dominante est insensible &#xE0; la [Ca (2 +)], un pigment trempe taux de recouvrement des limites et fournit un m&#xE9;canisme suppl&#xE9;mentaire pour moduler la r&#xE9;ponse des c&#xF4;nes lors de l&#x26;#39;adaptation de la lumi&#xE8;re.

Trempe photopigment est Ca2 + d&#xE9;pendante et Contr&#xF4;le dur&#xE9;e de la r&#xE9;ponse &#xE0; Salamander L-c&#xF4;nes photor&#xE9;cepteurs

Die Zeitskala von Filmprofilen in Sehzellen wird durch die langsamste Schritte festgelegt, die die Licht-induzierte Aktivit&auml;t der Signaltransduktion Kaskade zu stillen. In vertebrate Sehzellen ist diese geschwindigkeitsbestimmende Reaktion vermutlich entweder Abschaltung der katalytischen in das Photopigment oder Abschaltung der das Pigment Effektor, der transducin-GTP-Phosphodiesterase-Komplex. Bei Saug-Pipette-Aufnahmen von isolierten Schwanzlurch L-Zapfen fanden wir, dass die Wiederherstellung der leichte Antwort verz&ouml;gert und die dominierende Zeitkonstante f&uuml;r die Wiederherstellung verl&auml;ngert verhindern von &Auml;nderungen in der internen [Ca(2+)]. Beweise, dass der Ca(2+)-Sensitive-Schritt das Pigment selbst beteiligt lieferte die Beobachtung, dass die Entfernung von Cl(-) aus dem Pigment-Anion-Bindungsstelle die dominierende Zeitkonstante f&uuml;r Antwort Recovery beschleunigt. Zusammenfassend zufolge diese Beobachtungen in L-Zapfen, im Gegensatz zu den Amphibien-Stangen, wobei die dominierende Zeitkonstante unempfindlich gegen [Ca(2+)], Pigment ist, abschrecken Rate begrenzt Erholung und bietet einen zus&auml;tzlichen Mechanismus f&uuml;r die Modulierung der Kegel-Antwort w&auml;hrend der Licht-Anpassung.

Photopigment abschrecken wird Ca2 + abh&auml;ngige und steuert Antwort Dauer in Salamander L-Zapfen-Photorezeptoren.

La scala di tempo di fotorisposta in cellule fotorecettrici &egrave; impostata per il pi&ugrave; lento dei passi che placare l&#39;attivit&agrave; della cascata phototransduction luce-indotta. In cellule fotorecettrici vertebrati, questa limitazione della velocit&agrave; reazione &egrave; pensata per essere arresto dell&#39;attivit&agrave; catalitica nel photopigment o spegnimento del effector del pigmento, il complesso transducina-GTP-fosfodiesterasi. Nelle registrazioni di aspirazione pipetta da Salamandra isolato L-coni, abbiamo scoperto che prevenire cambiamenti interni [Ca(2+)] ritardato il recupero della risposta leggera e prolungata la costante di tempo dominante per il recupero. Evidenza che il passo di Ca(2+)-sensibili coinvolto il pigmento stesso &egrave; stato fornito dall&#39;osservazione che la rimozione di Cl(-) dal sito di legame anione del pigmento accelerato la costante di tempo dominante per il recupero di risposta. Collettivamente, queste osservazioni indicano che in L-coni, a differenza dei coni retinici di anfibi dove la costante di tempo dominante &egrave; insensibile a [Ca(2+)], pigmento tempra tasso limita il recupero e fornisce un meccanismo supplementare per la modulazione della risposta del cono durante l&#39;adattamento di luce.

Photopigment tempra &egrave; Ca2 + dipendente e controlla la durata di risposta in fotorecettori L-cono Salamandra.

&#x8996;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5149;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x6642;&#x9593;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30EB;&#x306F;&#x5149;&#x4F1D;&#x9054;&#x30AB;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30C9;&#x306E;&#x5149;&#x8A98;&#x8D77;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x30AF;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C1;&#x624B;&#x9806;&#x306E;&#x4E2D;&#x3067;&#x6700;&#x3082;&#x9045;&#x3044;&#x8A2D;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x8996;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x5F8B;&#x901F;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306F;&#x3001;&#x9854;&#x6599;&#x306E;&#x30A8;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x3001;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C7;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B7;&#x30F3;&#x3B3;-GTP-&#x30DB;&#x30B9;&#x30DB;&#x30B8;&#x30A8;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x5149;&#x8272;&#x7D20;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x906E;&#x65AD;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x89E6;&#x5A92;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x306E;&#x906E;&#x65AD;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x9694;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30B5;&#x30F3;&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30A6;&#x30AA;L-&#x9310;&#x4F53;&#x304B;&#x3089;&#x5438;&#x5F15;&#x30D4;&#x30DA;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x9332;&#x97F3;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x56DE;&#x5FA9;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;[Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;]&#x5149;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306E;&#x56DE;&#x5FA9;&#x3092;&#x9045;&#x3089;&#x305B;&#x3001;&#x652F;&#x914D;&#x7684;&#x306A;&#x6642;&#x9593;&#x9577;&#x6642;&#x9593;&#x4E00;&#x5B9A;&#x306E;&#x5185;&#x90E8;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x9632;&#x6B62;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002; &#xFF08; - &#xFF09;&#x8272;&#x7D20;&#x306E;&#x30A2;&#x30CB;&#x30AA;&#x30F3;&#x7D50;&#x5408;&#x90E8;&#x4F4D;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x56DE;&#x5FA9;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x652F;&#x914D;&#x7684;&#x306A;&#x6642;&#x5B9A;&#x6570;&#x3092;&#x52A0;&#x901F;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3002;&#x9854;&#x6599;&#x81EA;&#x4F53;&#x306E;&#x95A2;&#x4E0E;&#x306E;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x306B;&#x654F;&#x611F;&#x306A;&#x30B9;&#x30C6;&#x30C3;&#x30D7;&#x306F;Cl&#x306E;&#x9664;&#x53BB;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x89B3;&#x6E2C;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x200B;&#x200B;&#x3066;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x8A3C;&#x62E0;&#x7DCF;&#x79F0;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x89B3;&#x200B;&#x200B;&#x6E2C;&#x304C;&#x652F;&#x914D;&#x7684;&#x306A;&#x6642;&#x5B9A;&#x6570;&#x306E;[Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;]&#x3001;&#x9854;&#x6599;&#x6D88;&#x5149;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x5236;&#x9650;&#x306E;&#x56DE;&#x5FA9;&#x306B;&#x920D;&#x611F;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x660E;&#x9806;&#x5FDC;&#x6642;&#x306E;&#x5909;&#x8ABF;&#x30B3;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8FFD;&#x52A0;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x4E21;&#x751F;&#x985E;&#x306E;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C9;&#x3068;&#x306F;&#x7570;&#x306A;&#x308A;&#x3001;L-&#x9310;&#x4F53;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x5149;&#x8272;&#x7D20;&#x306E;&#x6D88;&#x5149;&#x306F;Ca2 +&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3001;&#x30B5;&#x30E9;&#x30DE;&#x30F3;&#x30C0;&#x30FC;L-&#x9310;&#x4F53;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x6642;&#x9593;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3057;&#x307E;&#x3059;

&#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9AC;&#xC149;&#xD130; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; photoresponse&#xC758; &#xC2DC;&#xAC04; &#xADDC;&#xBAA8; phototransduction &#xCE90;&#xC2A4;&#xCF00;&#xC774;&#xB4DC;&#xC758; &#xBE5B;&#xC744; &#xC774;&#xC6A9;&#xD55C; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xB2F4;&#xAE08;&#xC9C8; &#xD558;&#xB294; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC758; &#xAC00;&#xC7A5; &#xB290;&#xB9B0;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC124;&#xC815; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCC99;&#xCD94; &#xD3EC;&#xD1A0; &#xB9AC;&#xC149;&#xD130; &#xC140;&#xC774; &#xC18D;&#xB3C4; &#xC81C;&#xD55C; &#xBC18;&#xC751;&#xC744; &#xC0DD;&#xAC01; &#xD558;&#xB294; photopigment &#xCD09;&#xB9E4; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xCC28;&#xB2E8; &#xB610;&#xB294; &#xC548;&#xB8CC;&#xC758; &#xC774;&#xD399;&#xD130;, transducin GTP &#xD3EC;&#xC2A4; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xCC28;&#xB2E8; &#xB420;. &#xACA9;&#xB9AC; &#xB41C; &#xB3C4;&#xB871;&#xB1FD; &#xD328;-&#xC6D0;&#xBFD4;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD761;&#xC785; &#xD53C;&#xD3AB;&#xC740; &#xB179;&#xC74C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xADF8; &#xBE5B; &#xC751;&#xB2F5; &#xBCF5;&#xAD6C; &#xC9C0;&#xC5F0; &#xB0B4;&#xBD80; [Ca(2+)]&#xC758; &#xBCC0;&#xD654; &#xBC29;&#xC9C0; &#xBC0F; &#xBCF5;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC9C0;&#xBC30;&#xC801;&#xC778; &#xC2DC;&#xAC04; &#xC0C1;&#xC218;&#xB97C; &#xC5F0;&#xC7A5; &#xBC1C;&#xACAC;. Ca(2+) &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; &#xB2E8;&#xACC4; &#xC790;&#xCCB4; &#xC548;&#xB8CC; &#xAD00;&#xB828; &#xC99D;&#xAC70;&#xB294; &#xC81C;&#xAC70; &#xC548;&#xB8CC;&#xC758; &#xC74C;&#xC774;&#xC628; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; cl(-)&#xC758; &#xC751;&#xB2F5; &#xBCF5;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC9C0;&#xBC30;&#xC801;&#xC778; &#xC2DC;&#xAC04; &#xC0C1;&#xC218; &#xAC00;&#xC18D; &#xAD00;&#xCC30;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC81C;&#xACF5; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC0E8; &#xB2E4;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAD00;&#xCE21; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xACE0; &#xD328;-&#xC6D0;&#xBFD4;&#xC5D0; &#xC591;&#xC11C;&#xB958; &#xBD09; &#xC5B4;&#xB514; &#xC9C0;&#xBC30;&#xC801;&#xC778; &#xC2DC;&#xAC04; &#xC0C1;&#xC218;&#xB294; [Ca(2+)]&#xB97C; &#xAD6C;&#xBD84; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294; &#xC548;&#xB8CC;&#xC640;&#xB294; &#xB2EC;&#xB9AC; &#xB0C9;&#xAC01; &#xC18D;&#xB3C4; &#xBCF5;&#xAD6C; &#xC81C;&#xD55C; &#xBE5B; &#xC801;&#xC751; &#xAE30;&#xAC04; &#xB3D9;&#xC548; &#xCF58; &#xC751;&#xB2F5; &#xBCC0;&#xC870;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCD94;&#xAC00;&#xC801;&#xC778; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Photopigment &#xD574;&#xC18C; Ca2 + &#xC885;&#xC18D; &#xACE0; &#xB3C4;&#xB871;&#xB1FD; L &#xCF58; &#xB300;&#xB1CC;&#xC5D0; &#xC751;&#xB2F5; &#xAE30;&#xAC04;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La escala de tiempo de la foto-en las c&#xE9;lulas fotorreceptoras se establece por el m&#xE1;s lento de los pasos que apagan la actividad inducida por la luz de la cascada de la fototransducci&#xF3;n. En las c&#xE9;lulas fotorreceptoras de vertebrados, esta reacci&#xF3;n limitante de la velocidad se piensa que es o bien de cierre de la actividad catal&#xED;tica en la fotopigmento o cierre de efector del pigmento, la transducina-GTP-fosfodiesterasa complejo. En grabaciones de pipeta de succi&#xF3;n de la aislados salamandra L-conos, hemos encontrado que los cambios en la prevenci&#xF3;n de interior [Ca (2 +)] retras&#xF3; la recuperaci&#xF3;n de la respuesta a la luz y prolonga la constante de tiempo dominante para la recuperaci&#xF3;n. Evidencia de que el Ca (2 +)-sensible paso implicado el pigmento en s&#xED; fue proporcionada por la observaci&#xF3;n de que la eliminaci&#xF3;n de Cl (-) de ani&#xF3;n sitio de uni&#xF3;n del pigmento se aceler&#xF3; la constante de tiempo dominante para la recuperaci&#xF3;n de la respuesta. En conjunto, estas observaciones indican que en L-conos, a diferencia de las barras de anfibios, donde la constante de tiempo dominante es insensible a [Ca (2 +)], pigmento velocidad de enfriamiento l&#xED;mites de recuperaci&#xF3;n y proporciona un mecanismo adicional para la modulaci&#xF3;n de la respuesta de los conos durante la adaptaci&#xF3;n luz.

Temple fotopigmento es dependiente de Ca2 + y controles duraci&#xF3;n de la respuesta en la Salamandra de L-cono fotorreceptores

&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x55C5;&#x89C9;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143; (&#x5965;&#x6069;&#x65AF;&#xFF09;&#xFF0C;&#x6C14;&#x5473;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x6D3B;&#x5316;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x5C42;&#x53E0;&#x7684;&#x6700;&#x7EC8;&#x8FBE;&#x6210;&#x7684;&#x73AF;&#x78F7;&#x9178;&#x817A;&#x82F7;&#x3001; &#x73AF;&#x6838;&#x82F7;&#x9178;&#x95E8;&#x63A7;&#x901A;&#x9053;&#x6253;&#x5F00;&#x542F;&#x7528;&#x7ECF;&#x6D8C;&#x5165;&#x776B;&#x819C;&#x7684;&#x751F;&#x4EA7;&#x4E2D;&#x3002;Intraciliary &#x7ECF;&#x6D53;&#x5EA6;&#x968F;&#x540E;&#x6D77;&#x62D4;&#x6253;&#x5F00;&#x6FC0;&#x6D3B; Ca(2+) Cl(-) &#x7684;&#x6E20;&#x9053;&#xFF0C;&#x8C03;&#x89E3;&#x4ECE;&#x7EA4;&#x6BDB;&#x5174;&#x594B;&#x6027; Cl(-) &#x5C04;&#x6D41;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x54CD;&#x5E94;&#x7EC8;&#x6B62;&#xFF0C;Cl(-) &#x901A;&#x9053;&#x5FC5;&#x987B;&#x5173;&#x95ED;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x5C31;&#x9700;&#x8981; intraciliary &#x7ECF;&#x6D53;&#x5EA6;&#x6062;&#x590D;&#x5230;&#x57FA;&#x5E95;&#x7684;&#x6C34;&#x5E73;&#x3002;&#x5230;&#x76EE;&#x524D;&#x4E3A;&#x6B62;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x7EA4;&#x6BDB;&#x7684;&#x7ECF;&#x6324;&#x538B;&#x60F3;&#x4E3B;&#x8981;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E; Na(+)-Ca(2+) &#x6362;&#x70ED;&#x5668;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A;&#x4E86;&#x4F7F;&#x7528;&#x540C;&#x65F6;&#x5438;&#x5438;&#x7BA1;&#x5F55;&#x5236;&#x548C; Ca(2+) &#x654F;&#x611F;&#x67D3;&#x6599;&#x8367;&#x5149;&#x6D4B;&#x91CF;&#x4E2D;&#x706B;&#x877E;&#x8788;&#x5965;&#x6069;&#x65AF;&#xFF0C;&#x6C90;&#x6D74;&#x7EA4;&#x6BDB;&#xFF0C;&#x8BE5;&#x89E3;&#x51B3;&#x65B9;&#x6848;&#x4ECE;&#x5916;&#x90E8; Na(+) &#x64A4;&#x51FA;&#x7684;&#x63A0;&#x593A; Na (+)-Ca &#xFF08;2 +&#xFF09; &#x4EA4;&#x6362;&#xFF0C;&#x53EA;&#x6E29;&#x548C;&#x5BF9;&#x6709;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x7535;&#x54CD;&#x5E94;&#x6062;&#x590D;&#x548C; intraciliary &#x7ECF;&#x6D53;&#x5EA6;&#x7684;&#x4F34;&#x968F;&#x8870;&#x53D8;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x9492;&#x9178;&#x76D0;&#x6216; carboxyeosin&#x3001; Ca(2+)-ATPase&#xFF0C;&#x5757;&#x800C;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x7684;&#x64CD;&#x7EB5;&#x7684;&#x7EA4;&#x6BDB;&#x66B4;&#x9732;&#x5DF2;&#x54CD;&#x5E94;&#x6062;&#x590D;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x91CD;&#x5927;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7ED3;&#x8BBA; Ca(2+) ATPase &#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x7ECF;&#x6324;&#x538B;&#x5728;&#x5965;&#x6069;&#x65AF;&#x548C; (+)&#xFF0C;Na-Ca &#xFF08;2 +&#xFF09; &#x4EA4;&#x6362;&#x4F7F;&#x53EA;&#x6709;&#x5FAE;&#x8584;&#x7684;&#x8D21;&#x732E;&#x7ECF;&#x7A33;&#x6001;&#x4E2D;&#x8FD9;&#x4E00;&#x7269;&#x79CD;&#x3002;

&#x55C5;&#x89C9;&#x53CD;&#x5E94;&#x7EC8;&#x6B62;&#x6D89;&#x53CA; Ca2 +-ATPase &#x5728;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x55C5;&#x89C9;&#x53D7;&#x4F53;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7EA4;&#x6BDB;&#x3002;

In vertebrate olfactory receptor neurons (ORNs), odorant-induced activation of the transduction cascade culminates in production of cyclic AMP, which opens cyclic nucleotide-gated channels in the ciliary membrane enabling Ca(2+) influx. The ensuing elevation of the intraciliary Ca(2+) concentration opens Ca(2+)-activated Cl(-) channels, which mediate an excitatory Cl(-) efflux from the cilia. In order for the response to terminate, the Cl(-) channel must close, which requires that the intraciliary Ca(2+) concentration return to basal levels. Hitherto, the extrusion of Ca(2+) from the cilia has been thought to depend principally on a Na(+)-Ca(2+) exchanger. In this study, we show using simultaneous suction pipette recording and Ca(2+)-sensitive dye fluorescence measurements that in fire salamander ORNs, withdrawal of external Na(+) from the solution bathing the cilia, which incapacitates Na(+)-Ca(2+)exchange, has only a modest effect on the recovery of the electrical response and the accompanying decay of intraciliary Ca(2+) concentration. In contrast, exposure of the cilia to vanadate or carboxyeosin, a manipulation designed to block Ca(2+)-ATPase, has a substantial effect on response recovery kinetics. Therefore, we conclude that Ca(2+)-ATPase contributes to Ca(2+) extrusion in ORNs, and that Na(+)-Ca(2+)exchange makes only a modest contribution to Ca(2+) homeostasis in this species.

Olfactory response termination involves Ca2+-ATPase in vertebrate olfactory receptor neuron cilia.

En vert&#xE9;br&#xE9;s neurones r&#xE9;cepteurs olfactifs (Orns), odorant induite par l&#x26;#39;activation de la cascade de transduction du culmine dans la production d&#x26;#39;AMP cyclique, qui ouvre les nucl&#xE9;otides cycliques-d&#xE9;pendants canaux dans la membrane ciliaire permettant Ca (2 +) afflux. L&#x26;#39;&#xE9;l&#xE9;vation cons&#xE9;cutive du intraciliary Ca (2 +) de concentration ouvre Ca (2 +)-Cl activ&#xE9; (-) des canaux, qui interviennent dans une Cl excitateur (-) efflux de cils. Pour que la r&#xE9;ponse &#xE0; r&#xE9;silier, le Cl (-) canal doit fermer, ce qui exige que le intraciliary Ca (2 +) retour &#xE0; des niveaux de concentration basale. Jusqu&#x26;#39;&#xE0; pr&#xE9;sent, l&#x26;#39;extrusion de Ca (2 +) &#xE0; partir de cils a &#xE9;t&#xE9; pens&#xE9; pour d&#xE9;pendra principalement sur une Na (+)-Ca (2 +) &#xE9;changeur. Dans cette &#xE9;tude, nous montrons &#xE0; l&#x26;#39;aide l&#x26;#39;enregistrement simultan&#xE9; de la pipette d&#x26;#39;aspiration et de Ca (2 +)-colorant sensible des mesures de fluorescence que dans Orns salamandre de feu, le retrait de Na externe (+) de la baignade solution cils, ce qui handicape Na (+)-Ca (2 +) l&#x26;#39;&#xE9;change, n&#x26;#39;a qu&#x26;#39;un effet modeste sur la r&#xE9;cup&#xE9;ration de la r&#xE9;ponse &#xE9;lectrique et la d&#xE9;cadence d&#x26;#39;accompagnement des intraciliary Ca (2 +) de concentration. En revanche, l&#x26;#39;exposition des cils &#xE0; vanadate ou carboxyeosin, une manipulation destin&#xE9;e &#xE0; bloquer Ca (2 +)-ATPase, a un effet substantiel sur la cin&#xE9;tique de r&#xE9;cup&#xE9;ration de r&#xE9;ponse. Par cons&#xE9;quent, nous concluons que Ca (2 +)-ATPase contribue &#xE0; Ca (2 +) d&#x26;#39;extrusion dans Orns, et que Na (+)-Ca (2 +) l&#x26;#39;&#xE9;change ne fait qu&#x26;#39;une modeste contribution &#xE0; Ca (2 +) l&#x26;#39;hom&#xE9;ostasie dans ce esp&#xE8;ces.

R&#xE9;siliation r&#xE9;ponse olfactive Implique Ca2 +-ATPase dans des vert&#xE9;br&#xE9;s Cilia Receptor neurone olfactif

In vertebrate olfaktorisches Neuronen (ORNs) kulminiert Odorant-induzierte Aktivierung der Transduktion Kaskade in Produktion von zyklischem AMP, die zyklische Nukleotid-Gating-Kan&auml;le in der Zilien Membran aktivieren Ca(2+) Zustrom &ouml;ffnet. Die anschlie&szlig;ende Erhebung der intraciliary Ca(2+) Konzentration &ouml;ffnet Ca(2+) aktivierte Cl(-)-Kan&auml;le, die einer exzitatorischen Cl(-) Efflux aus die Cilien zu vermitteln. In Reihenfolge f&uuml;r die Antwort, zu k&uuml;ndigen muss der Cl(-) Kanal schlie&szlig;en, die erfordert, dass die intraciliary Ca(2+)-Konzentration zu Basalebenen zur&uuml;ckkehren. Bisher hat die Extrusion von Ca(2+) aus die Flimmerh&auml;rchen gedacht worden, haupts&auml;chlich auf einen Na(+)-Ca(2+)-Exchanger abh&auml;ngen. In dieser Studie zeigen wir mit gleichzeitiger Absaugung Pipette Aufnahme- und Ca(2+)-empfindlichen Farbstoff Fluoreszenz-Messungen, dass im Feuersalamander ORNs, Entzug der externen Na(+) aus der L&ouml;sung Baden die Flimmerh&auml;rchen, die Na (+) setzt au&szlig;er Gefecht-Ca (2 +) Exchange, hat nur geringe Auswirkungen auf die Wiederherstellung der elektrischen Antwort und den begleitenden Verfall intraciliary Ca(2+) Konzentration. Im Gegensatz dazu hat Gef&auml;hrdung der die Zilien Vanadate oder Carboxyeosin, eine Manipulation entwickelt, um Block Ca(2+)-ATPase, erheblichen Auswirkungen auf Antwort Wiederherstellung Kinetik. Daher schlie&szlig;en wir Ca(2+)-ATPase zum Ca(2+) Projektion in ORNs und das Na (+) beitr&auml;gt-Ca (2 +) Austausch macht nur einen bescheidenen Beitrag zur Ca(2+)-Hom&ouml;ostase in dieser Spezies.

Olfaktorischen Antwort K&uuml;ndigung beinhaltet Ca2 +-ATPase in vertebrate olfaktorisches Neuron Zilien.

Nei neuroni vertebrati recettore olfattivo (Sonja), odorant-indotta di attivazione della cascata di trasduzione culmina nella produzione di AMP ciclico, che si apre cyclic nucleotide-gated canali nella membrana ciliare consentendo l&#39;afflusso di Ca(2+). La conseguente elevazione della concentrazione Ca(2+) intraciliary apre canali attivati dal Ca(2+) Cl(-), che mediano un efflusso Cl(-) eccitatorio da ciglia. Affinch&eacute; la risposta terminare, deve chiudere il canale di Cl(-), che richiede che la concentrazione di Ca(2+) intraciliary ritorno a livelli basali. Finora, l&#39;estrusione di Ca(2+) dalle ciglia &egrave; stato pensato per dipendono principalmente da uno scambiatore di Na(+)-Ca(2+). In questo studio, mostriamo mediante pipetta d&#39;aspirazione simultanea registrazione e misure di fluorescenza di tintura Ca(2+)-sensibili che in salamandra Sonja, ritiro di Na(+) esterno dalla soluzione bagna le ciglia, che rende incapace Na (+)-scambio di Ca (2++), ha solo un modesto effetto sul recupero della risposta elettrica e accompagnamento decadimento della concentrazione Ca(2+) intraciliary. Al contrario, l&#39;esposizione di ciglia a vanadato o carboxyeosin, una manipolazione progettato per blocco Ca(2+)-ATPasi, ha un effetto notevole sulla cinetica di risposta recupero. Pertanto, possiamo concludere che Ca(2+)-ATPasi contribuiscono ad estrusione Ca(2+) a Sonja e che Na (+)-scambio di Ca (2++) rende solo un modesto contributo all&#39;omeostasi Ca(2+) in questa specie.

Comporta la cessazione della risposta olfattiva Ca2 +-ATPasi in cilia neurone recettore olfattivo vertebrati.

&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x55C5;&#x899A;&#x53D7;&#x5BB9;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#xFF08;ORNs&#xFF09;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x4F1D;&#x9054;&#x30AB;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30C9;&#x306E;&#x5302;&#x3044;&#x8A98;&#x5C0E;&#x6D3B;&#x6027;&#x306F;&#x3001;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x306E;&#x6D41;&#x5165;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x6BDB;&#x69D8;&#x4F53;&#x819C;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3092;&#x958B;&#x304D;&#x3001;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;AMP&#x306E;&#x751F;&#x7523;&#x3067;&#x6700;&#x9AD8;&#x6F6E;&#x306B;&#x9054;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7E4A;&#x6BDB;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x6D41;&#x51FA;&#x3092;&#xFF08; - &#xFF09;&#xFF08; - &#xFF09;&#x8208;&#x596E;Cl&#x3092;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3001;intraciliary&#x306E;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x306E;&#x4E0A;&#x6607;&#x306F;&#x3001;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;Cl&#x3092;&#x958B;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D42;&#x4E86;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x306F;&#x3001;Cl&#xFF08; - &#xFF09;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x57FA;&#x5E95;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306B;&#x305D;&#x306E;intraciliary&#x306E;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306E;&#x623B;&#x308A;&#x5024;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x9589;&#x3058;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x307E;&#x3067;&#x3001;&#x7E4A;&#x6BDB;&#x304B;&#x3089;&#x306E;Ca&#x306E;&#x62BC;&#x3057;&#x51FA;&#x3057;&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x306F;&#x3001;NA&#xFF08;+&#xFF09;-Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x306E;&#x4EA4;&#x63DB;&#x306B;&#x4E3B;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x304D;&#x305F;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x540C;&#x6642;&#x5438;&#x5F15;&#x30D4;&#x30DA;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x8A18;&#x9332;&#x3068;CA&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x8868;&#x793A;&#x3059;&#x308B;&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x8272;&#x7D20;&#x86CD;&#x5149;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3001;&#x706B;&#x707D;&#x30B5;&#x30F3;&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30A6;&#x30AA;ORNs&#x3067;&#x306F;&#x3001;Na&#xFF08;+&#xFF09;-CA&#x304C;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3057;&#x306A;&#x304F;&#x306A;&#x3063;&#x305F;&#x30BD;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x5165;&#x6D74;&#x7E4A;&#x6BDB;&#x304B;&#x3089;&#x5916;&#x90E8;&#x306E;Na&#xFF08;+&#xFF09;&#x306E;&#x64A4;&#x9000;&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x4EA4;&#x63DB;&#x306F;&#x3001;&#x96FB;&#x6C17;&#x7684;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3068;intraciliary&#x306E;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x6DFB;&#x4ED8;&#x306E;&#x6E1B;&#x8870;&#x306E;&#x56DE;&#x5FA9;&#x306E;&#x552F;&#x4E00;&#x306E;&#x3055;&#x3055;&#x3084;&#x304B;&#x306A;&#x52B9;&#x679C;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x30D0;&#x30CA;&#x30B8;&#x30A6;&#x30E0;&#x307E;&#x305F;&#x306F;carboxyeosin&#x306B;&#x7E4A;&#x6BDB;&#x306E;&#x66DD;&#x9732;&#x306F;&#x3001;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;-ATPase&#x3092;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3059;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x8A2D;&#x8A08;&#x64CD;&#x4F5C;&#x306F;&#x3001;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x56DE;&#x5FA9;&#x52D5;&#x614B;&#x306B;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;-ATPase&#x306F;&#x3053;&#x306E;&#x4E2D;&#x306E;Ca ORNs&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x62BC;&#x3057;&#x51FA;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;NA&#xFF08;+&#xFF09;-Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x306E;&#x4EA4;&#x63DB;&#x306F;&#x3001;Ca&#x306E;&#x307F;&#x306B;&#x3055;&#x3055;&#x3084;&#x304B;&#x306A;&#x8CA2;&#x732E;&#x3092;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x6052;&#x5E38;&#x6027;&#x306B;&#x5BC4;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x7D50;&#x8AD6;&#x7A2E;&#x3002;

&#x55C5;&#x899A;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x7D42;&#x7AEF;&#x306F;&#x3001;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x55C5;&#x899A;&#x53D7;&#x5BB9;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x7E4A;&#x6BDB;&#x3067;&#x306E;Ca2 +-ATPase&#x3092;&#x3092;&#x4F34;&#x3044;

&#xCC99;&#xCD94; &#xD6C4; &#xAC01; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xB274;&#xB7F0; (ORNs)&#xC5D0;&#xC11C; odorant &#xC720;&#xB3C4; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBCC0;&#xD658; &#xCE90;&#xC2A4;&#xCF00;&#xC774;&#xB4DC;&#xC758; Ca(2+) &#xC720;&#xC785; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC18D;&#xB208;&#xC379; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xC8FC;&#xAE30;&#xC801; &#xB274;&#xD074;&#xB808;&#xC624;&#xD2F0;&#xB4DC; &#xCC44;&#xB110;&#xC744; &#xC5F4; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC21C;&#xD658; &#xC570;&#xD504;&#xC758; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC808;&#xC815;. &#xB4A4;&#xC774;&#xC5B4; intraciliary Ca(2+) &#xB18D;&#xB3C4; &#xC0C1;&#xC2B9; &#xC18D;&#xB208;&#xC379;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD765;&#xBD84; &#xC131;&#xC758; Cl(-) &#xACBD;&#xACFC; &#xC911;&#xC7AC; Ca(2+) &#xD65C;&#xC131;&#xD654; Cl(-) &#xCC44;&#xB110;&#xC744; &#xC5FD;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC885;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C; intraciliary Ca(2+) &#xB18D;&#xB3C4; &#xAE30;&#xC800; &#xC218;&#xC900;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC18;&#xD658;&#xC744; &#xC694;&#xAD6C; &#xD558;&#xB294; Cl(-) &#xCC44;&#xB110; &#xC885;&#xB8CC; &#xD574;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC9C0;&#xAE08;&#xAE4C;&#xC9C0;, &#xC18D;&#xB208;&#xC379;&#xC5D0;&#xC11C; ca(2+)&#xC758; &#xC555;&#xCD9C; Na(+)-Ca(2+) &#xAD50;&#xD658;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC8FC;&#xB85C; &#xC0DD;&#xAC01; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB3D9;&#xC2DC; &#xD761;&#xC785; &#xD53C;&#xD3AB;&#xC740; &#xB179;&#xC74C; &#xBC0F; ca(2+)&#xC5D0; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; &#xC5FC;&#xB8CC; &#xD615;&#xAD11; &#xCE21;&#xC815; &#xBD88; &#xB3C4;&#xB871;&#xB1FD; ORNs, &#xC18D;&#xB208;&#xC379;, &#xC785;&#xC695; &#xD558;&#xB294; &#xC194;&#xB8E8;&#xC158;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC678;&#xBD80; na(+)&#xC758; &#xCCA0;&#xC218;&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; Na (+) incapacitates&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD45C;&#xC2DC;-Ca (2 +) &#xAD50;&#xD658;&#xB9CC; &#xC804;&#xAE30; &#xC751;&#xB2F5; &#xD68C;&#xBCF5;&#xACFC; intraciliary Ca(2+) &#xB18D;&#xB3C4;&#xC758; &#xB3D9;&#xBC18; &#xBD95;&#xAD34;&#xC5D0; &#xACB8;&#xC190; &#xD558; &#xAC8C; &#xD6A8;&#xACFC;&#xAC00; &#xC788;&#xB2E4;. &#xBC18;&#xBA74;, &#xBC14; &#xB610;&#xB294; carboxyeosin, &#xBE14;&#xB85D; Ca(2+) Atpase&#xC5D0; &#xC124;&#xACC4; &#xC870;&#xC791;&#xC5D0; &#xC18D;&#xB208;&#xC379;&#xC758; &#xB178;&#xCD9C; &#xC751;&#xB2F5; &#xBCF5;&#xAD6C; &#xC18D;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xD6A8;&#xACFC;&#xAC00; &#xC788;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; Ca(2+) Atpase&#xC5D0; ORNs, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xADF8; Na (+) Ca(2+) &#xC555;&#xCD9C;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xACB0;&#xB860;-Ca (2 +) exchange&#xC774; &#xC885;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB9CC; Ca(2+) &#xD56D;&#xC0C1;&#xC131;&#xC744; &#xACB8;&#xC190; &#xD558; &#xAC8C; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD558; &#xAC8C;.

&#xD6C4; &#xAC01; &#xC751;&#xB2F5; &#xC885;&#xB8CC; &#xD3EC;&#xD568; Ca2 +-Atpase&#xC5D0; &#xCC99;&#xCD94; &#xD6C4; &#xAC01; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xB274;&#xB7F0; &#xC18D;&#xB208;&#xC379;.

En vertebrados neuronas olfativas del receptor (ORNs), olor inducida por la activaci&#xF3;n de la cascada de transducci&#xF3;n culmina en la producci&#xF3;n de AMP c&#xED;clico, que se abre de nucle&#xF3;tidos c&#xED;clicos-bloqueados los canales en la membrana ciliar permite Ca (2 +) afluencia. La elevaci&#xF3;n posterior de la intraciliary Ca (2 +) abre la concentraci&#xF3;n de Ca (2 +) activada por Cl (-) los canales, que median un excitador Cl (-) flujo de salida de los cilios. A fin de que la respuesta a terminar, el Cl (-) del canal debe cerrar, lo que requiere que el intraciliary Ca (2 +) regreso a la concentraci&#xF3;n de los niveles basales. Hasta ahora, la extrusi&#xF3;n de Ca (2 +) de los cilios se ha pensado que dependen principalmente de una Na (+)-Ca (2 +) intercambiador. En este estudio, mostramos que usa la grabaci&#xF3;n simult&#xE1;nea de una pipeta de succi&#xF3;n y Ca (2 +) sensibles a las medidas de fluorescencia de colorante que en incendio ORNs salamandra, la retirada de la externa de Na (+) de la soluci&#xF3;n de ba&#xF1;o de los cilios, que incapacita a Na (+)-Ca (2 +) de cambio, tiene s&#xF3;lo un efecto modesto en la recuperaci&#xF3;n de la respuesta el&#xE9;ctrica y la decadencia de acompa&#xF1;amiento de intraciliary Ca (2 +) de concentraci&#xF3;n. En contraste, la exposici&#xF3;n de los cilios de vanadato o carboxyeosin, una manipulaci&#xF3;n dise&#xF1;ada para bloquear Ca (2 +)-ATPasa, tiene un efecto sustancial sobre la cin&#xE9;tica de recuperaci&#xF3;n de respuesta. Por lo tanto, llegamos a la conclusi&#xF3;n de que el Ca (2 +)-ATPasa contribuye a Ca (2 +) de extrusi&#xF3;n en ORNs, y que Na (+)-Ca (2 +) de cambio hace que s&#xF3;lo una modesta contribuci&#xF3;n a Ca (2 +) la homeostasis en este especies.

Hugh R. Matthews

Department of Physiology,
Development & Neuroscience,
Physiological Laboratory,
Department of Physiology, Development & Neuroscience, Physiological Laboratory

University of Cambridge

Odorant-induced Responses Recorded from Olfactory Receptor Neurons using the Suction Pipette Technique

Hugh R. Matthews

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University of Cambridge

Odorant-induced Responses Recorded from Olfactory Receptor Neurons using the Suction Pipette Technique

Department of Physiology,
Development & Neuroscience,
Physiological Laboratory,
Department of Physiology, Development & Neuroscience, Physiological Laboratory