efficient-polyethylene-glycol-peg-mediated-transformation-moss

Efficient Polyethylene Glycol (PEG) Mediated Transformation of the Moss <em>Physcomitrella patens</em>

A simple and efficient method to transform Physcomitrella pantens protoplasts is described. This method is adapted from protocols for Physocmitrella ...

Worcester Polytechnic Institute- WPI

&#x82B1;&#x7C89;&#x7BA1;&#x4F38;&#x957F;&#x7387;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x5206;&#x6CCC;&#x7684;&#x5927;&#x91CF;&#x82B1;&#x7C89;&#x7BA1;&#x9876;&#x7AEF;&#x4FDD;&#x6301;&#x5FEB;&#x901F;&#x589E;&#x957F;&#x7684;&#x819C;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x58C1;&#x7684;&#x6750;&#x6599;&#x3002;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5927;&#x5BB6;&#x5EAD;&#x7684; RAS &#x76F8;&#x5173;&#x5C0F;&#x86CB;&#x767D;&#x3001; Rabs &#x6216; Ypts&#xFF0C;&#x4F17;&#x6240;&#x5468;&#x77E5;&#xFF0C;&#x89C4;&#x7BA1;&#x987A;&#x884C;&#x548C;&#x9006;&#x884C;&#x8D29;&#x5356;&#x8FD0;&#x8F93;&#x56CA;&#x6CE1;&#x4E0D;&#x540C;&#x5185;&#x819C;&#x8F66;&#x53A2;&#x548C;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x548C;&#x9175;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x819C;&#x4E4B;&#x95F4;&#x3002;&#x529F;&#x80FD;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x690D;&#x7269;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x6B63;&#x5728;&#x51FA;&#x73B0;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x62A5;&#x544A;&#x70DF;&#x8349;&#x82B1;&#x7C89;&#x4E3B;&#x8981; Rab2&#xFF0C;NtRab2&#xFF0C;&#x804C;&#x80FD;&#x4E4B;&#x95F4;&#x5185;&#x8D28;&#x7F51;&#x548C;&#x9AD8;&#x5C14;&#x57FA;&#x5728;&#x62D4;&#x8282;&#x82B1;&#x7C89;&#x5206;&#x6CCC;&#x9014;&#x5F84;&#x4E2D;&#x7BA1;&#x3002;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D; NtRab2 &#x878D;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x62D4;&#x8282;&#x82B1;&#x7C89;&#x7BA1;&#x7684;&#x9AD8;&#x5C14;&#x57FA;&#x673A;&#x6784;&#x8FDB;&#x884C;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x3002;NtRab2 &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x663E;&#x6027;&#x8D1F;&#x7A81;&#x53D8;&#x6291;&#x5236;&#x5176;&#x9AD8;&#x5C14;&#x57FA;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x3001; &#x963B;&#x6B62;&#x9AD8;&#x5C14;&#x57FA;&#x9A7B;&#x5730;&#x7684;&#x4F20;&#x9012;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x8D28;&#x548C;&#x5206;&#x6CCC;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x5BF9;&#x5176;&#x6B63;&#x5E38;&#x7684;&#x4F4D;&#x7F6E;&#xFF0C;&#x548C;&#x6291;&#x5236;&#x82B1;&#x7C89;&#x7BA1;&#x7684;&#x751F;&#x957F;&#x3002;&#x53E6;&#x4E00;&#x65B9;&#x9762;&#xFF0C;&#x5F53;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;-NtRab2 over-expressed &#x5728;&#x77AC;&#x6001;&#x8F6C;&#x5316;&#x7684;&#x53F6;&#x539F;&#x751F;&#x8D28;&#x4F53;&#x548C;&#x8868;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x65F6;&#x5019;&#xFF0C;&#x5728;&#x5176;&#x4E2D; NtRab2 mRNA &#x5E76;&#x672A;&#x5F97;&#x5230;&#x9075;&#x5B88;&#x7D2F;&#x79EF;&#x81F3;&#x53EF;&#x63A2;&#x6D4B;&#x7684;&#x6C34;&#x5E73;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4E0D;&#x9488;&#x5BF9;&#x6709;&#x6548;&#x5730;&#x5411;&#x9AD8;&#x5C14;&#x57FA;&#x673A;&#x6784;&#x3002;&#x5728;&#x4E00;&#x8D77;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x610F;&#x89C1;&#x8868;&#x660E; NtRab2 &#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x82B1;&#x7C89;&#x7BA1;&#x5185;&#x8D29;&#x5356;&#x5185;&#x8D28;&#x7F51;&#x548C;&#x9AD8;&#x5C14;&#x57FA;&#x7684;&#x673A;&#x6784;&#x4E4B;&#x95F4;&#x53EF;&#x80FD;&#x4E13;&#x95E8;&#x63D0;&#x4F9B;&#x6700;&#x4F73;&#x652F;&#x6301;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5C16;&#x751F;&#x957F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5206;&#x6CCC;&#x5F88;&#x9AD8;&#x7684;&#x8981;&#x6C42;&#x3002;

Rab2 &#x86CB;&#x767D;&#x8C03;&#x8282;&#x56CA;&#x6CE1;&#x8D29;&#x8FD0;&#x5185;&#x8D28;&#x7F51;&#x548C;&#x9AD8;&#x5C14;&#x57FA;&#x7684;&#x673A;&#x6784;&#x4E4B;&#x95F4;&#x548C;&#x5BF9;&#x82B1;&#x7C89;&#x7BA1;&#x7684;&#x751F;&#x957F;&#x5F88;&#x91CD;&#x8981;&#x3002;

&#xAF43;&#xAC00;&#xB8E8; &#xAD00; &#xC2E0;&#xC7A5; &#xB300;&#xC6A9;&#xB7C9; &#xAE09;&#xC18D; &#xD55C; &#xC131;&#xC7A5;&#xC744; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xAF43;&#xAC00;&#xB8E8; &#xAD00; &#xB05D;&#xC5D0; &#xB9C9;&#xACFC; &#xC138;&#xD3EC; &#xBCBD; &#xBB3C;&#xC9C8;&#xC758; &#xBD84; &#xBE44;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2EC;&#xB77C; &#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;. RAS &#xAD00;&#xB828; &#xC791;&#xC740; GTPases, Rabs &#xB610;&#xB294; Ypts, &#xD070; &#xAC00;&#xC871; &#xCC38;&#xAC00;&#xC790; &#xBC0F; &#xC804;&#xC1A1; &#xC18C;&#xD3EC; &#xC0AC;&#xC774; &#xB2E4;&#xB978; endomembrane &#xAD6C;&#xD68D; &#xBC0F; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958;&#xC640; &#xD6A8; &#xBAA8; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC6D0;&#xD615;&#xC9C8; &#xB9C9;&#xC758; &#xD1F4;&#xD589; &#xC131; &#xC778;&#xC2E0; &#xB9E4;&#xB9E4;&#xB85C; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC720;&#xC0AC; &#xC2DD;&#xBB3C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xC5ED;&#xD560;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xB098;&#xC624;&#xACE0; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBCF4;&#xACE0; &#xC5EC;&#xAE30;&#xB294; &#xB2F4;&#xBC30; &#xAF43;&#xAC00;&#xB8E8; &#xC6B0;&#xC138; Rab2, NtRab2, endoplasmic &#xADF8;&#xBB3C; elongating &#xAF43;&#xAC00;&#xB8E8;&#xC5D0; Golgi &#xC0AC;&#xC774; &#xBD84; &#xD1B5;&#xB85C;&#xC758; &#xD568;&#xC218; &#xAD00;. &#xB179;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; NtRab2 &#xC735;&#xD569; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; elongating &#xAF43;&#xAC00;&#xB8E8; &#xAD00;&#xC5D0; Golgi &#xC2DC;&#xCCB4;&#xB85C;. NtRab2 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xBCC0;&#xC774; &#xC74C;&#xC774; &#xC9C0;&#xBC30; &#xC790;&#xC2E0;&#xC758; Golgi &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xC800;&#xD574; Golgi &#xC0C1;&#xC8FC;&#xC758; &#xBC30;&#xB2EC;&#xC73C;&#xB85C; plasmalemma &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC815;&#xC0C1; &#xC704;&#xCE58;&#xC5D0; &#xBE44; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xCC28;&#xB2E8; &#xD558; &#xACE0; &#xAF43;&#xAC00;&#xB8E8; &#xAD00; &#xC131;&#xC7A5;&#xC744; &#xC800;&#xD574;. &#xB2E4;&#xB978; &#xD55C;&#xD3B8;&#xC73C;&#xB85C;, &#xB179;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; NtRab2 transiently &#xBCC0;&#xD615; &#xB41C; &#xB9AC;&#xD504; protoplasts &#xBC0F; &#xD45C; &#xD53C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; over-expressed &#xC77C; &#xB54C;&#xB294; NtRab2 mRNA &#xD558;&#xC9C0; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC10;&#xC9C0; &#xB808;&#xBCA8;&#xC744; &#xCD95;&#xC801;&#xC774; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4; &#xD558;&#xC9C0; &#xB300;&#xC0C1; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; Golgi &#xC2DC;&#xCCB4;&#xB97C;. &#xD568;&#xAED8;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAD00;&#xCC30; NtRab2 &#xAF43;&#xAC00;&#xB8E8; &#xAD00;&#xC5D0; Golgi &#xAE30;&#xAD6C; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; endoplasmic &#xADF8;&#xBB3C; &#xC0AC;&#xC774; &#xC778;&#xC2E0; &#xB9E4;&#xB9E4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD558; &#xACE0; &#xCD5C;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD301; &#xC131;&#xC7A5; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xB192;&#xC740; &#xBD84; &#xC694;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC804;&#xBB38; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Rab2 GTPase &#xC18C;&#xD3EC; Golgi &#xAE30;&#xAD6C; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; endoplasmic &#xADF8;&#xBB3C; &#xC0AC;&#xC774; &#xB9E4;&#xB9E4; &#xADDC;&#xC81C;&#xC640; &#xAF43;&#xAC00;&#xB8E8; &#xAD00; &#xC131;&#xC7A5; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC774; &#xC911;&#xC694;.

El alargamiento del tubo pol&#xED;nico depende de la secreci&#xF3;n de grandes cantidades de materiales de la membrana y pared celular en la punta del tubo pol&#xED;nico para sostener un crecimiento r&#xE1;pido. Una gran familia de RAS relacionados con las GTPasas peque&#xF1;as, Rabs o Ypts, se sabe para regular tanto el tr&#xE1;fico anter&#xF3;grado y retr&#xF3;grado de ves&#xED;culas de transporte entre compartimentos diferentes de endomembranas y la membrana plasm&#xE1;tica en c&#xE9;lulas de mam&#xED;feros y levaduras. Los estudios sobre el papel funcional de las prote&#xED;nas vegetales an&#xE1;logos est&#xE1;n surgiendo. Presentamos aqu&#xED; que un tabaco de polen predominante Rab2, NtRab2, las funciones en la v&#xED;a secretora entre el ret&#xED;culo endoplasm&#xE1;tico y el aparato de Golgi en el alargamiento de los tubos pol&#xED;nicos. Prote&#xED;na verde fluorescente-NtRab2 prote&#xED;na de fusi&#xF3;n localizada en los cuerpos de Golgi en el alargamiento de los tubos pol&#xED;nicos. Mutaciones dominantes-negativas en NtRab2 prote&#xED;nas inhibe su localizaci&#xF3;n Golgi, bloque&#xF3; la entrega de Golgi-residente, as&#xED; como prote&#xED;nas plasmalema y secretada a sus lugares normales, e inhibe el crecimiento del tubo pol&#xED;nico. Por otro lado, cuando la prote&#xED;na fluorescente verde-NtRab2 se sobre-expresa en protoplastos de hojas transitoriamente transformadas y las c&#xE9;lulas epid&#xE9;rmicas, en los que NtRab2 ARNm no se ha observado que se acumulan a niveles detectables, estas prote&#xED;nas no focalizar eficientemente a Golgi cuerpos. En conjunto, estas observaciones indican que NtRab2 es importante para el tr&#xE1;fico entre el ret&#xED;culo endoplasm&#xE1;tico y el aparato de Golgi en los tubos de polen y puede ser especializado para apoyar de manera &#xF3;ptima las demandas de secreci&#xF3;n de alta en estas c&#xE9;lulas la punta de crecimiento.

Rab2 GTPasa regula el tr&#xE1;fico de ves&#xED;culas entre el ret&#xED;culo endoplasm&#xE1;tico y el aparato de Golgi y es importante crecimiento del tubo pol&#xED;nico

Pollen tube elongation depends on the secretion of large amounts of membrane and cell wall materials at the pollen tube tip to sustain rapid growth. A large family of RAS-related small GTPases, Rabs or Ypts, is known to regulate both anterograde and retrograde trafficking of transport vesicles between different endomembrane compartments and the plasma membrane in mammalian and yeast cells. Studies on the functional roles of analogous plant proteins are emerging. We report here that a tobacco pollen-predominant Rab2, NtRab2, functions in the secretory pathway between the endoplasmic reticulum and the Golgi in elongating pollen tubes. Green fluorescent protein-NtRab2 fusion protein localized to the Golgi bodies in elongating pollen tubes. Dominant-negative mutations in NtRab2 proteins inhibited their Golgi localization, blocked the delivery of Golgi-resident as well as plasmalemma and secreted proteins to their normal locations, and inhibited pollen tube growth. On the other hand, when green fluorescent protein-NtRab2 was over-expressed in transiently transformed leaf protoplasts and epidermal cells, in which NtRab2 mRNA have not been observed to accumulate to detectable levels, these proteins did not target efficiently to Golgi bodies. Together, these observations indicate that NtRab2 is important for trafficking between the endoplasmic reticulum and the Golgi bodies in pollen tubes and may be specialized to optimally support the high secretory demands in these tip growth cells.

Rab2 GTPase regulates vesicle trafficking between the endoplasmic reticulum and the Golgi bodies and is important to pollen tube growth.

Allongement du tube pollinique d&#xE9;pend de la s&#xE9;cr&#xE9;tion de grandes quantit&#xE9;s de mat&#xE9;riaux de membrane et la paroi cellulaire, &#xE0; l&#x26;#39;extr&#xE9;mit&#xE9; du tube pollinique pour soutenir la croissance rapide. Une grande famille de RAS li&#xE9;s petites GTPases, les RABS ou Ypts, est connu pour r&#xE9;guler &#xE0; la fois le trafic ant&#xE9;rograde et r&#xE9;trograde des v&#xE9;sicules de transport entre les compartiments endomembranaire diff&#xE9;rentes et la membrane plasmique des cellules de mammif&#xE8;res et de levure. Les &#xE9;tudes sur les r&#xF4;les fonctionnels des prot&#xE9;ines v&#xE9;g&#xE9;tales analogues voient le jour. Nous rapportons ici que d&#x26;#39;un tabac de pollen pr&#xE9;dominant Rab2, NtRab2, les fonctions dans la voie de s&#xE9;cr&#xE9;tion entre le r&#xE9;ticulum endoplasmique et l&#x26;#39;appareil de Golgi dans &#xE9;longation des tubes polliniques. Green fluorescent protein prot&#xE9;ine de fusion-NtRab2 localis&#xE9; aux organes de Golgi dans &#xE9;longation des tubes polliniques. Dominant n&#xE9;gatif des mutations dans NtRab2 prot&#xE9;ines inhibe leur localisation Golgi, bloqu&#xE9; la livraison de Golgi-r&#xE9;sident ainsi que des prot&#xE9;ines s&#xE9;cr&#xE9;t&#xE9;es plasmalemme et &#xE0; leurs emplacements normaux, et inhibe la croissance du tube pollinique. D&#x26;#39;autre part, lorsque la prot&#xE9;ine fluorescente verte-NtRab2 &#xE9;tait surexprim&#xE9;e dans les protoplastes de feuilles transform&#xE9;es transitoirement et les cellules &#xE9;pidermiques, dans lequel l&#x26;#39;ARNm NtRab2 n&#x26;#39;ont pas &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9;es &#xE0; s&#x26;#39;accumuler &#xE0; des niveaux d&#xE9;tectables, ces prot&#xE9;ines ne ciblent pas efficacement dans le Golgi corps. Ensemble, ces observations indiquent que NtRab2 est important pour le trafic entre le r&#xE9;ticulum endoplasmique et les corps de Golgi dans des tubes polliniques et peuvent &#xEA;tre sp&#xE9;cialis&#xE9; pour soutenir de mani&#xE8;re optimale aux exigences &#xE9;lev&#xE9;es de s&#xE9;cr&#xE9;tion de ces cellules de croissance de pointe.

Rab2 GTPase r&#xE9;gule le trafic v&#xE9;siculaire entre le r&#xE9;ticulum endoplasmique et les organes de Golgi et est important pour la croissance du tube pollinique

RAB2 GTPase reguliert Vesikeltransport zwischen dem endoplasmatischen Retikulum und Golgi-K&#xF6;rper und ist wichtig, Pollenschlauchwachstum.

Allungamento del tubo pollinico dipende la secrezione di elevate quantit&agrave; di materiali membrana e parete cellulare presso la punta del tubo pollinico per sostenere la rapida crescita. Una grande famiglia di RAS-correlati piccolo GTPases, Rabs o Ypts, &egrave; noto per regolare sia anterograda e retrograda, traffico di vescicole di trasporto tra endomembrane differenti compartimenti e la membrana del plasma nelle cellule di mammifero e lievito. Studi sui ruoli funzionali delle proteine vegetali analoghe stanno emergendo. Riportiamo qui un tabacco polline-predominante Rab2, NtRab2, funzioni nel percorso secretorio tra il reticolo endoplasmatico e il Golgi nel prolungamento del polline tubi. Green fluorescent protein-NtRab2 proteina di fusione localizzata per i corpi di Golgi in allungamento dei tubi pollinici. Dominante negativo mutazioni in proteine NtRab2 inibiscono loro localizzazione Golgi, bloccata la consegna di Golgi-residente cos&igrave; come plasmalemma e proteine secrete nelle posizioni normali e inibiscono la crescita del tubo pollinico. D&#39;altra parte, quando green fluorescent protein-NtRab2 &egrave; stato sovraespresso in protoplasti foglia transitoriamente trasformato e cellule epidermiche, in cui non sono state osservate NtRab2 mRNA ad accumularsi a livelli rilevabili, queste proteine non target in modo efficiente ai corpi di Golgi. Insieme, queste osservazioni indicano che NtRab2 &egrave; importante per il traffico tra il reticolo endoplasmatico e i corpi di Golgi in tubi pollinici e pu&ograve; essere specializzato per supportare in modo ottimale le esigenze elevate secretorie in queste cellule di crescita punta.

Rab2 GTPase regola la vescicola traffico fra il reticolo endoplasmatico e i corpi di Golgi ed &egrave; importante per la crescita del tubo pollinico.

&#x82B1;&#x7C89;&#x7BA1;&#x306E;&#x4F38;&#x9577;&#x306F;&#x3001;&#x6025;&#x901F;&#x306A;&#x6210;&#x9577;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x82B1;&#x7C89;&#x7BA1;&#x306E;&#x5148;&#x7AEF;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x58C1;&#x7269;&#x8CEA;&#x306E;&#x5927;&#x91CF;&#x306E;&#x5206;&#x6CCC;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; RAS&#x95A2;&#x9023;&#x306E;&#x4F4E;&#x5206;&#x5B50;&#x91CF;GTPase&#x3001;Rabs&#x307E;&#x305F;&#x306F;YPTS&#x306E;&#x5927;&#x5BB6;&#x65CF;&#x306F;&#x3001;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x819C;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x54FA;&#x4E73;&#x52D5;&#x7269;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x9175;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x3067;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x9593;&#x306E;&#x8F38;&#x9001;&#x5C0F;&#x80DE;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x9806;&#x884C;&#x6027;&#x3068;&#x9006;&#x884C;&#x6027;&#x8F38;&#x9001;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x985E;&#x4F3C;&#x3057;&#x305F;&#x690D;&#x7269;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x5F79;&#x5272;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6D6E;&#x4E0A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30BF;&#x30D0;&#x30B3;&#x82B1;&#x7C89;&#x512A;&#x4F4D;Rab2&#x3001;NtRab2&#x3001;&#x5C0F;&#x80DE;&#x4F53;&#x3068;&#x82B1;&#x7C89;&#x7BA1;&#x306E;&#x4F38;&#x9577;&#x306E;&#x30B4;&#x30EB;&#x30B8;&#x9593;&#x306B;&#x5206;&#x6CCC;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3067;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7DD1;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;-NtRab2&#x878D;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x82B1;&#x7C89;&#x7BA1;&#x306E;&#x4F38;&#x9577;&#x306B;&#x30B4;&#x30EB;&#x30B8;&#x4F53;&#x306B;&#x5C40;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x3002; NtRab2&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30C9;&#x30DF;&#x30CA;&#x30F3;&#x30C8;&#x30CD;&#x30AC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x5909;&#x7570;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30B4;&#x30EB;&#x30B8;&#x4F53;&#x5C40;&#x5728;&#x5316;&#x3092;&#x6291;&#x5236;&#x3057;&#x3001;&#x901A;&#x5E38;&#x306E;&#x5834;&#x6240;&#x306B;&#x30B4;&#x30EB;&#x30B8;&#x5E38;&#x99D0;&#x306E;&#x914D;&#x4FE1;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x539F;&#x5F62;&#x8CEA;&#x819C;&#x3068;&#x5206;&#x6CCC;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x82B1;&#x7C89;&#x7BA1;&#x4F38;&#x9577;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E00;&#x65B9;&#x3067;&#x3001;&#x3068;&#x304D;&#x306B;&#x7DD1;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;-NtRab2&#x304C;&#x4E00;&#x6642;&#x7684;&#x306B;&#x5909;&#x63DB;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x8449;&#x8089;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C8;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30C8;&#x3068;NtRab2 mRNA&#x304C;&#x691C;&#x51FA;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x307E;&#x3067;&#x84C4;&#x7A4D;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3082;&#x306E;&#x3067;&#x306F;&#x8868;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x305B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x4F53;&#x3092;&#x30B4;&#x30EB;&#x30B8;&#x4F53;&#x306B;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306B;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x89B3;&#x200B;&#x200B;&#x5BDF;&#x306F;NtRab2&#x3001;&#x82B1;&#x7C89;&#x7BA1;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5C0F;&#x80DE;&#x4F53;&#x3068;&#x30B4;&#x30EB;&#x30B8;&#x4F53;&#x306E;&#x9593;&#x3067;&#x4EBA;&#x8EAB;&#x58F2;&#x8CB7;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x6700;&#x9069;&#x306B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5148;&#x7AEF;&#x6210;&#x9577;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x5206;&#x6CCC;&#x306E;&#x8981;&#x6C42;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x7279;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Rab2 GTP&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#x306F;&#x3001;&#x5C0F;&#x80DE;&#x4F53;&#x3068;&#x30B4;&#x30EB;&#x30B8;&#x4F53;&#x9593;&#x5C0F;&#x80DE;&#x8F38;&#x9001;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3057;&#x3001;&#x82B1;&#x7C89;&#x7BA1;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x306B;&#x3068;&#x3063;&#x3066;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;

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&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5728;&#x62D4;&#x8282;&#x82B1;&#x7C89;&#x7BA1;&#x4E2D;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x89E3;&#x805A;&#x56E0;&#x5B50;&#x7684;&#x8C03;&#x8282;&#x3002;

Pollen tube elongation is a polarized cell growth process that transports the male gametes from the stigma to the ovary for fertilization inside the ovules. Actomyosin-driven intracellular trafficking and active actin remodeling in the apical and subapical regions of pollen tubes are both important aspects of this rapid tip growth process. Actin-depolymerizing factor (ADF) and cofilin are actin binding proteins that enhance the depolymerization of microfilaments at their minus, or slow-growing, ends. A pollen-specific ADF from tobacco, NtADF1, was used to dissect the role of ADF in pollen tube growth. Overexpression of NtADF1 resulted in the reduction of fine, axially oriented actin cables in transformed pollen tubes and in the inhibition of pollen tube growth in a dose-dependent manner. Thus, the proper regulation of actin turnover by NtADF1 is critical for pollen tube growth. When expressed at a moderate level in pollen tubes elongating in in vitro cultures, green fluorescent protein (GFP)-tagged NtADF1 (GFP-NtADF1) associated predominantly with a subapical actin mesh composed of short actin filaments and with long actin cables in the shank. Similar labeling patterns were observed for GFP-NtADF1-expressing pollen tubes elongating within the pistil. A Ser-6-to-Asp conversion abolished the interaction between NtADF1 and F-actin in elongating pollen tubes and reduced its inhibitory effect on pollen tube growth significantly, suggesting that phosphorylation at Ser-6 may be a prominent regulatory mechanism for this pollen ADF. As with some ADF/cofilin, the in vitro actin-depolymerizing activity of recombinant NtADF1 was enhanced by slightly alkaline conditions. Because a pH gradient is known to exist in the apical region of elongating pollen tubes, it seems plausible that the in vivo actin-depolymerizing activity of NtADF1, and thus its contribution to actin dynamics, may be regulated spatially by differential H(+) concentrations in the apical region of elongating pollen tubes.

The regulation of actin organization by actin-depolymerizing factor in elongating pollen tubes.

Allongement du tube pollinique est un processus de croissance cellulaire polaris&#xE9;e qui transporte les gam&#xE8;tes m&#xE2;les de la stigmatisation &#xE0; l&#x26;#39;ovaire pour la f&#xE9;condation des ovules &#xE0; l&#x26;#39;int&#xE9;rieur. Actomyosine ax&#xE9;e sur le trafic intracellulaire et remodelage de l&#x26;#39;actine actif dans les r&#xE9;gions apicales et subapicale de tubes polliniques sont deux aspects importants de ce processus de croissance pointe rapide. Actin-d&#xE9;polym&#xE9;risation facteur (ADF) et cofiline sont des prot&#xE9;ines d&#x26;#39;actine contraignantes qui renforcent la d&#xE9;polym&#xE9;risation des microfilaments &#xE0; leur moins, ou &#xE0; croissance lente, se termine. Un chargeur automatique de documents sp&#xE9;cifique au pollen de tabac, NtADF1, a &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9; pour diss&#xE9;quer le r&#xF4;le de la FAD dans la croissance du tube pollinique. La surexpression de NtADF1 abouti &#xE0; la r&#xE9;duction de l&#x26;#39;amende, les c&#xE2;bles d&#x26;#39;actine orient&#xE9;es axialement dans des tubes polliniques et transform&#xE9;es dans l&#x26;#39;inhibition de la croissance du tube pollinique d&#x26;#39;une mani&#xE8;re dose-d&#xE9;pendante. Ainsi, la bonne r&#xE9;gulation du chiffre d&#x26;#39;affaires de l&#x26;#39;actine par NtADF1 est essentiel pour la croissance du tube pollinique. Lorsqu&#x26;#39;il est exprim&#xE9; &#xE0; un niveau mod&#xE9;r&#xE9; dans les tubes polliniques s&#x26;#39;allongent dans des cultures in vitro, la prot&#xE9;ine fluorescente verte (GFP)-&#xE9;tiquet&#xE9; NtADF1 (GFP-NtADF1) associ&#xE9; principalement avec un maillage actine subapicale compos&#xE9; de courts filaments d&#x26;#39;actine et avec des c&#xE2;bles d&#x26;#39;actine longues dans la tige. Mod&#xE8;les d&#x26;#39;&#xE9;tiquetage similaires ont &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9;s pour la GFP-NtADF1 exprimant tubes polliniques s&#x26;#39;allongent dans le pistil. Une conversion Ser-6-&#xE0;-Asp aboli l&#x26;#39;interaction entre NtADF1 et F-actine dans &#xE9;longation des tubes polliniques et r&#xE9;duit son effet inhibiteur sur la croissance du tube pollinique de fa&#xE7;on significative, sugg&#xE9;rant que la phosphorylation au niveau de Ser-6 peut &#xEA;tre un m&#xE9;canisme important de r&#xE9;gulation pour cette ADF pollen . Comme avec certains ADF / cofiline, l&#x26;#39;actine in vitro-d&#xE9;polym&#xE9;risation activit&#xE9; de recombinaison NtADF1 a &#xE9;t&#xE9; renforc&#xE9;e par un peu des conditions alcalines. Parce que un gradient de pH est connue pour exister dans la r&#xE9;gion apicale des tubes polliniques s&#x26;#39;allongent, il semble plausible que l&#x26;#39;actine in vivo-activit&#xE9; de d&#xE9;polym&#xE9;risation NtADF1, et donc sa contribution &#xE0; la dynamique de l&#x26;#39;actine, peut &#xEA;tre r&#xE9;glement&#xE9; par l&#x26;#39;espace diff&#xE9;rentiel H (+) des concentrations dans la r&#xE9;gion apicale de s&#x26;#39;allonger tubes polliniques.

Le r&#xE8;glement de l&#x26;#39;Organisation de l&#x26;#39;actine par d&#xE9;polym&#xE9;risation d&#x26;#39;actine-Factor en &#xE9;longation tubes polliniques

Die Regulation der Aktin-Organisation, die von Aktin-Depolymerisation Faktor verl&#xE4;ngert Pollenschl&#xE4;uche.

Allungamento del tubo pollinico &egrave; un processo di crescita delle cellule polarizzate che trasporta i gameti maschili da stigma per l&#39;ovaio per la fecondazione all&#39;interno gli ovuli. Traffico intracellulare di actomiosina-driven e actina attivo rimodellamento nelle regioni apicali e subapicali di tubi pollinici sono entrambi aspetti importanti di questo processo di crescita punta rapida. Actina-depolymerizing factor (ADF) e cofilin sono proteine leganti actina che esaltano la depolimerizzazione dei microfilamenti alle loro estremit&agrave; meno, o crescita lenta. Un polline specifiche ADF da tabacco, NtADF1, &egrave; stato utilizzato per sezionare il ruolo di ADF in crescita del tubo pollinico. Sovraespressione di NtADF1 ha provocato la riduzione dei cavi sottili, orientati assialmente actina in trasformate tubi pollinici e l&#39;inibizione della crescita del tubo pollinico in modo dose-dipendente. Cos&igrave;, la regolazione corretta del fatturato di actina di NtADF1 &egrave; fondamentale per la crescita del tubo pollinico. Quando espressi ad un livello moderato di tubi pollinici allungando in colture in vitro, green fluorescent protein (GFP)-messo NtADF1 (GFP-NtADF1) associato principalmente con una maglia di actina subapicale composta da filamenti di actina breve e con lunghi cavi di actina nella tibia. Modelli di etichette simili sono stati osservati per tubi pollinici che esprimono GFP-NtADF1 allungamento all&#39;interno del pistillo. Una conversione di Ser-6-a-Asp abolito l&#39;interazione tra NtADF1 e F-actina in allungamento dei tubi pollinici e ridotto il suo effetto inibitorio sulla crescita del tubo pollinico in modo significativo, suggerendo che la fosforilazione in Ser-6 pu&ograve; essere un meccanismo di regolamentazione prominente per questo polline ADF. Come con alcuni ADF/cofilin, l&#39;attivit&agrave; in vitro di actina-depolymerizing di NtADF1 ricombinante &egrave; stato migliorato da condizioni leggermente alcaline. Perch&eacute; un gradiente di pH &egrave; conosciuto per esistere nella regione apicale di allungamento dei tubi pollinici, sembra plausibile che l&#39;attivit&agrave; in vivo di actina-depolymerizing di NtADF1 e cos&igrave; il suo contributo alla dinamica dell&#39;actina, pu&ograve; essere regolamentate spazialmente da differenziale H(+) concentrazioni nella regione apicale di allungamento dei tubi pollinici.

Il regolamento di organizzazione dell&#39;actina actina-depolymerizing fattore di allungamento dei tubi pollinici.

&#x82B1;&#x7C89;&#x7BA1;&#x306E;&#x4F38;&#x9577;&#x306F;&#x3001;&#x67F1;&#x982D;&#x304B;&#x3089;&#x80DA;&#x73E0;&#x5185;&#x306E;&#x53D7;&#x7CBE;&#x306E;&#x5375;&#x5DE3;&#x306B;&#x96C4;&#x6027;&#x914D;&#x5076;&#x5B50;&#x3092;&#x8F38;&#x9001;&#x3059;&#x308B;&#x504F;&#x7D30;&#x80DE;&#x5897;&#x6B96;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C8;&#x30DF;&#x30AA;&#x30B7;&#x30F3;&#x99C6;&#x52D5;&#x578B;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x8F38;&#x9001;&#x3068;&#x82B1;&#x7C89;&#x7BA1;&#x306E;&#x5148;&#x7AEF;&#x3068;apex&#x306E;&#x4E0B;&#x306B;&#x3042;&#x308B;&#x5730;&#x57DF;&#x306B;&#x7A4D;&#x6975;&#x7684;&#x306B;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x30EA;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x6025;&#x901F;&#x306A;&#x5148;&#x7AEF;&#x6210;&#x9577;&#x904E;&#x7A0B;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5074;&#x9762;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x8131;&#x91CD;&#x5408;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF08;ADF&#xFF09;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30B3;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EA;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A4;&#x30CA;&#x30B9;&#x3067;&#x30DF;&#x30AF;&#x30ED;&#x306E;&#x89E3;&#x91CD;&#x5408;&#x3092;&#x5411;&#x4E0A;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x304B;&#x3001;&#x6210;&#x9577;&#x304C;&#x9045;&#x3044;&#x3001;&#x7D42;&#x4E86;&#x3059;&#x308B;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D50;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x30BF;&#x30D0;&#x30B3;&#x3001;NtADF1&#x304B;&#x3089;&#x82B1;&#x7C89;&#x7279;&#x6709;&#x306E;ADF&#x306F;&#x3001;&#x82B1;&#x7C89;&#x7BA1;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x306B;ADF&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002; NtADF1&#x306E;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;&#x5F62;&#x8CEA;&#x8EE2;&#x63DB;&#x82B1;&#x7C89;&#x7BA1;&#x3068;&#x7528;&#x91CF;&#x4F9D;&#x5B58;&#x7684;&#x306B;&#x82B1;&#x7C89;&#x7BA1;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x3067;&#x7F70;&#x91D1;&#x3001;&#x8EF8;&#x65B9;&#x5411;&#x306B;&#x6307;&#x5411;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30B1;&#x30FC;&#x30D6;&#x30EB;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;NtADF1&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x4EE3;&#x8B1D;&#x56DE;&#x8EE2;&#x306E;&#x9069;&#x5207;&#x306A;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306B;&#x306F;&#x82B1;&#x7C89;&#x7BA1;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3068;&#x304D;&#x306B;in vitro&#x57F9;&#x990A;&#x3067;&#x306E;&#x4F38;&#x9577;&#x82B1;&#x7C89;&#x7BA1;&#x306E;&#x4E2D;&#x7B49;&#x5EA6;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3001;&#x7DD1;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;GFP&#xFF09;&#x30BF;&#x30B0;&#x4ED8;&#x304D;&#x306E;&#x77ED;&#x3044;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A3;&#x30E9;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x304B;&#x3089;&#x6210;&#x308B;apex&#x306E;&#x4E0B;&#x306B;&#x3042;&#x308B;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30E1;&#x30C3;&#x30B7;&#x30E5;&#x3068;&#x30B7;&#x30E3;&#x30F3;&#x30AF;&#x306E;&#x9577;&#x3044;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30B1;&#x30FC;&#x30D6;&#x30EB;&#x3068;&#x4E3B;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x305F;NtADF1&#xFF08;GFP-NtADF1&#xFF09;&#x3067;&#x8868;&#x660E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x985E;&#x4F3C;&#x306E;&#x6A19;&#x8B58;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x96CC;&#x3057;&#x3079;&#x306E;&#x4E2D;&#x306B;&#x4F38;&#x9577;&#x3059;&#x308B;&#x82B1;&#x7C89;&#x7BA1;&#x3092;GFP-NtADF1&#x767A;&#x73FE;&#x304C;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x306E;Ser-6&#x301C;-Asp&#x306E;&#x5909;&#x63DB;&#x306F;&#x3001;&#x82B1;&#x7C89;&#x7BA1;&#x306E;&#x4F38;&#x9577;&#x306B;NtADF1&#x304A;&#x3088;&#x3073;F-&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x5EC3;&#x6B62;&#x3057;&#x3001;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x82B1;&#x7C89;&#x7BA1;&#x4F38;&#x9577;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x6291;&#x5236;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3055;&#x305B;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x82B1;&#x7C89;ADF&#x306E;&#x8457;&#x540D;&#x306A;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x6A5F;&#x69CB;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x306E;Ser-6&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;ADF /&#x30B3;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EA;&#x30F3;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x3001;&#x7D44;&#x63DB;&#x3048;NtADF1&#x306E;in vitro&#x3067;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x8131;&#x91CD;&#x5408;&#x6D3B;&#x6027;&#x306F;&#x308F;&#x305A;&#x304B;&#x306B;&#x30A2;&#x30EB;&#x30AB;&#x30EA;&#x6027;&#x306E;&#x6761;&#x4EF6;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002; pH&#x52FE;&#x914D;&#x304C;&#x4F38;&#x9577;&#x82B1;&#x7C89;&#x7BA1;&#x306E;&#x5148;&#x7AEF;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x306E;&#x3067;&#x3001;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x3067;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x304C;&#x8131;&#x91CD;&#x5408;NtADF1&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x3001;&#x5F93;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x3078;&#x306E;&#x8CA2;&#x732E;&#x3001;&#x5DEE;H&#xFF08;+&#xFF09;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7A7A;&#x9593;&#x7684;&#x306B;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3082;&#x3063;&#x3068;&#x3082;&#x3089;&#x3057;&#x3044;&#x82B1;&#x7C89;&#x7BA1;&#x306E;&#x4F38;&#x9577;&#x306E;&#x5148;&#x7AEF;&#x5730;&#x57DF;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C1;

&#x82B1;&#x7C89;&#x7BA1;&#x4F38;&#x9577;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x8131;&#x91CD;&#x5408;&#x56E0;&#x5B50;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;

&#xAF43;&#xAC00;&#xB8E8; &#xAD00; &#xC2E0;&#xC7A5; &#xC548;&#xC5D0; ovules&#xC758; &#xC218;&#xC815;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB09C;&#xC18C;&#xC5D0; &#xC624;&#xBA85;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB0A8;&#xC131; gametes&#xC744; &#xC218;&#xC1A1; &#xD558;&#xB294; &#xD3B8;&#xAD11;&#xB41C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC131;&#xC7A5; &#xACFC;&#xC815; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xBC00;&#xB9E4; actomyosin &#xAD6C;&#xB3D9; &#xBC0F; &#xAF43;&#xAC00;&#xB8E8; &#xD29C;&#xBE0C;&#xC758; &#xAF2D;&#xB300;&#xAE30;&#xC640; subapical &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xB9AC; &#xBAA8;&#xB378;&#xB9C1; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB9D0;&#xB77C;&#xAC00; &#xBE60;&#xB978; &#xD301; &#xC131;&#xC7A5; &#xACFC;&#xC815;&#xC758; &#xB450; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xCE21;&#xBA74;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB9D0;&#xB77C; depolymerizing &#xC694;&#xC18C; (ADF)&#xC640; cofilin&#xB294; &#xC790;&#xC2E0;&#xC758; &#xB9C8;&#xC774;&#xB108;&#xC2A4;, &#xB610;&#xB294; &#xB290;&#xB9B0; &#xC131;&#xC7A5; &#xB05D;&#xC5D0;&#xC11C; microfilaments&#xC758; depolymerization &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB9D0;&#xB77C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;. &#xB2F4;&#xBC30;, NtADF1, &#xAF43;&#xAC00;&#xB8E8; &#xD2B9;&#xC815; ADF &#xAF43;&#xAC00;&#xB8E8; &#xAD00; &#xC131;&#xC7A5;&#xC5D0; ADF&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD574; &#xBD80;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. Ntadf1&#xC758; overexpression &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9; &#xC758;&#xC874; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD1C; &#xCC2E; &#xC544; &#xC694;, &#xCD95;&#xBC29;&#xD5A5; &#xC9C0;&#xD5A5;&#xC801;&#xC778; &#xB9D0;&#xB77C; &#xCF00;&#xC774;&#xBE14; &#xBCC0;&#xD658; &#xB41C; &#xAF43;&#xAC00;&#xB8E8; &#xD29C;&#xBE0C;&#xC640; &#xAF43;&#xAC00;&#xB8E8; &#xAD00; &#xC131;&#xC7A5; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC758; &#xAC10;&#xC18C; &#xACB0;&#xACFC;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, Ntadf1&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB9D0;&#xB77C; &#xD68C;&#xC804;&#xC728;&#xC758; &#xC801;&#xC808; &#xD55C; &#xADDC;&#xC81C; &#xAF43;&#xAC00;&#xB8E8; &#xAD00; &#xC131;&#xC7A5;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCCB4; &#xC678; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0;&#xC11C; elongating &#xAF43;&#xAC00;&#xB8E8; &#xAD00;&#xC5D0; &#xC801;&#xB2F9; &#xD55C; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xBA74; &#xB179;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (GFP)-NtADF1 &#xD0DC;&#xADF8; (GFP-NtADF1) &#xAD00;&#xB828; &#xC8FC;&#xB85C; &#xC9E7;&#xC740; &#xB9D0;&#xB77C; &#xD544; &#xB77C; &#xBA58; &#xD2B8;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131; subapical &#xB9D0;&#xB77C; &#xBA54;&#xC26C; &#xBC0F; &#xCE7C;&#xC5D0; &#xAE34; &#xB9D0;&#xB77C; &#xCF00;&#xC774;&#xBE14;&#xB85C;. &#xC720;&#xC0AC;&#xD55C; &#xB77C;&#xBCA8; &#xD328;&#xD134; elongating&#xB294; &#xC554; &#xC220;&#xC5D0; &#xAF43;&#xAC00;&#xB8E8; &#xD29C;&#xBE0C; GFP NtADF1 &#xD45C;&#xD604;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. Ser 6-Asp &#xBCC0;&#xD658; elongating &#xAF43;&#xAC00;&#xB8E8; &#xAD00;&#xC5D0; NtADF1 F &#xB9D0;&#xB77C;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638;&#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xD3D0;&#xC9C0; &#xD558; &#xACE0; &#xAF43;&#xAC00;&#xB8E8; &#xAD00; &#xC131;&#xC7A5;&#xC5D0; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD6A8;&#xACFC; &#xAC10;&#xC18C; &#xD06C;&#xAC8C;, Ser-6&#xC5D0;&#xC11C; &#xADF8; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654;&#xB97C; &#xC81C;&#xC548;&#xC774; &#xAF43;&#xAC00;&#xB8E8; ADF&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC800;&#xBA85;&#xD55C; &#xADDC;&#xC81C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC77C;&#xBD80; ADF/cofilin&#xC640; &#xB9C8;&#xCC2C;&#xAC00;&#xC9C0;&#xB85C; &#xC7AC;&#xC870;&#xD569; Ntadf1&#xC758; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB9D0;&#xB77C; depolymerizing &#xD65C;&#xB3D9; &#xC54C;&#xCE7C;&#xB9AC; &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. PH &#xADF8;&#xB77C;&#xB370;&#xC774;&#xC158; elongating &#xAF43;&#xAC00;&#xB8E8; &#xD29C;&#xBE0C;&#xC758; &#xAF2D;&#xB300;&#xAE30; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC;, &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xADF8;&#xC758; NtADF1, vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xB9D0;&#xB77C; depolymerizing &#xD65C;&#xB3D9; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC774;&#xB807;&#xAC8C; &#xB9D0;&#xB77C; &#xC5ED;&#xD559;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xADDC;&#xC81C; &#xACF5;&#xAC04;&#xC801; elongating &#xAF43;&#xAC00;&#xB8E8; &#xD29C;&#xBE0C;&#xC758; &#xAF2D;&#xB300;&#xAE30; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xCC28;&#xB3D9; H(+) &#xB18D;&#xB3C4; &#xC758;&#xD574; &#xADF8;&#xB7F4; &#xB4EF; &#xD558; &#xAC8C; &#xBCF4;&#xC778;&#xB2E4;.

&#xB9D0;&#xB77C; &#xC870;&#xC9C1; elongating &#xAF43;&#xAC00;&#xB8E8; &#xAD00;&#xC5D0; &#xB9D0;&#xB77C; depolymerizing &#xC694;&#xC18C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xADDC;&#xC815;.

El alargamiento del tubo pol&#xED;nico es un proceso de crecimiento de las c&#xE9;lulas polarizadas que transporta los gametos masculinos del estigma al ovario para la fertilizaci&#xF3;n de los &#xF3;vulos en el interior. Actomiosina impulsado por el tr&#xE1;fico intracelular y la remodelaci&#xF3;n de la actina activa en la regi&#xF3;n apical y subapical de tubos pol&#xED;nicos son dos aspectos importantes de este proceso de r&#xE1;pido crecimiento de la punta. La actina-despolimerizaci&#xF3;n de los factores (ADF) y cofilina son las prote&#xED;nas actina que mejoran la despolimerizaci&#xF3;n de los microfilamentos en su negativo, o de crecimiento lento, termina. Un alimentador autom&#xE1;tico de documentos de polen espec&#xED;fico del tabaco, NtADF1, se utiliz&#xF3; para diseccionar el papel de la FDA en el crecimiento del tubo pol&#xED;nico. La sobreexpresi&#xF3;n de NtADF1 como resultado la reducci&#xF3;n de los cables finos, actina orientadas axialmente en tubos de polen y transformadas en la inhibici&#xF3;n del crecimiento del tubo pol&#xED;nico en una forma dosis-dependiente. Por lo tanto, la adecuada regulaci&#xF3;n del volumen de negocio de actina NtADF1 es fundamental para el crecimiento del tubo pol&#xED;nico. Cuando se expresa en un nivel moderado en los tubos de polen alarg&#xE1;ndose en cultivos in vitro, la prote&#xED;na verde fluorescente (GFP)-etiquetados NtADF1 (GFP-NtADF1) se asocia predominantemente con una malla de actina subapical compuesto por filamentos de actina cortas y largas, con los cables de actina en la espiga. Patrones similares se observaron para el etiquetado de las buenas pr&#xE1;cticas agrarias-que expresa NtADF1 tubos pol&#xED;nicos alarg&#xE1;ndose en el pistilo. Una conversi&#xF3;n de Ser-6-de-Asp abolido la interacci&#xF3;n entre NtADF1 y F-actina en el alargamiento de los tubos pol&#xED;nicos y la reducci&#xF3;n de su efecto inhibitorio sobre el crecimiento del tubo pol&#xED;nico de manera significativa, lo que sugiere que la fosforilaci&#xF3;n en Ser-6 puede ser un mecanismo importante regulador de este polen alimentador autom&#xE1;tico de documentos . Al igual que con un alimentador autom&#xE1;tico de documentos / cofilina, la actina in vitro-despolimerizaci&#xF3;n de la actividad de recombinaci&#xF3;n NtADF1 fue reforzada por condiciones ligeramente alcalinas. Debido a un gradiente de pH se sabe que existe en la regi&#xF3;n apical de los tubos pol&#xED;nicos alarg&#xE1;ndose, parece plausible que la actina in vivo la actividad de la despolimerizaci&#xF3;n NtADF1, y por lo tanto su contribuci&#xF3;n a la din&#xE1;mica de la actina, se puede regular espacialmente por diferencia de H (+) las concentraciones en la regi&#xF3;n apical de alargar los tubos pol&#xED;nicos.

El Reglamento de Organizaci&#xF3;n de actina por despolimerizaci&#xF3;n de actina-Factor en el alargamiento de los tubos pol&#xED;nicos

In many cases, actin filaments are arranged into bundles and serve as tracks for cytoplasmic streaming in plant cells. We have isolated an actin-filament bundling protein, which is composed of 115-kDa polypeptide (P-115-ABP), from the germinating pollen of lily, Lilium longiflorum [Nakayasu et al. (1998) BIOCHEM: Biophys. Res. Commun. 249: 61]. P-115-ABP shared similar antigenicity with a plant 135-kDa actin-filament bundling protein (P-135-ABP), a plant homologue of villin. A full-length cDNA clone (ABP115; accession no. AB097407) was isolated from an expression cDNA library of lily pollen by immuno-screening using antisera against P-115-ABP and P-135-ABP. The amino acid sequence of P-115-ABP deduced from this clone showed high homology with those of P-135-ABP and four villin isoforms of Arabidopsis thaliana (AtVLN1, AtVLN2, AtVLN3 and AtVLN4), especially AtVLN4, indicating that P-115-ABP can also be classified as a plant villin. The P-115-ABP isolated biochemically from the germinating lily pollen was able to arrange F-actin filaments with uniform polarity into bundles and this bundling activity was suppressed by Ca2+-calmodulin (CaM), similar to the actin-filament bundling properties of P-135-ABP. The P-115-ABP type of plant villin was widely distributed in plant cells, from algae to land plants. In root hair cells of Hydrocharis dubia, this type of plant villin was co-localized with actin-filament bundles in the transvacuolar strands and the sub-cortical regions. Microinjection of the antiserum against P-115-ABP into living root hair cells caused the disappearance of transvaculor strands and alteration of the route of cytoplasmic streaming. In internodal cells of Chara corallina in which the P-135-ABP type of plant villin is lacking, the P-115-ABP type showed co-localization with actin-filament cables anchored on the intracellular surface of chloroplasts. These results indicated that plant villins are widely distributed and involved in the organization of actin filaments into bundles throughout the plant kingdom.

Plant 115-kDa actin-filament bundling protein, P-115-ABP, is a homologue of plant villin and is widely distributed in cells.

&#x5728;&#x8BB8;&#x591A;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x4E1D;&#x6210;&#x675F;&#x6392;&#x5217;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x5728;&#x690D;&#x7269;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x6D41;&#x7684;&#x8F68;&#x9053;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x6709; 115 kDa &#x7684;&#x591A;&#x80BD; (P-115-&#x57FA;&#x5730;&#xFF09; &#x7EC4;&#x6210;&#xFF0C;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x4E1D;&#x6346;&#x7ED1;&#x86CB;&#x767D;&#x5206;&#x79BB;&#x7684;&#x767E;&#x5408;&#xFF0C;&#x767E;&#x5408;&#x53D1;&#x82BD;&#x82B1;&#x7C89; [&#x4EF2;&#x5EB7;&#x7B49;&#x4EBA; (1998 &#x5E74;) &#x8D1D;&#x514B;&#xFF1A; Biophys&#x3002;&#x5171;&#x540C;&#x51B3;&#x8BAE;&#x3002;249&#xFF1A; 61]&#x3002;P-115-&#x603B;&#x90E8;&#x57FA;&#x5730;&#x4E0E;&#x690D;&#x7269; 135 kDa &#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x4E1D;&#x6346;&#x7ED1;&#x86CB;&#x767D; (P-135-&#x57FA;&#x5730;&#xFF09;&#x3001; &#x690D;&#x7269;&#x540C;&#x7CFB;&#x7269;&#x7684;&#x7ED2;&#x6BDB;&#x86CB;&#x767D;&#x5171;&#x4EAB;&#x76F8;&#x4F3C;&#x7684;&#x6297;&#x539F;&#x6027;&#x3002;&#x5168;&#x957F; cDNA &#x514B;&#x9686; &#xFF08;ABP115 &#xFF1B; &#x52A0;&#x5165;&#x65E0;&#x3002;AB097407) &#x5B64;&#x7ACB;&#x4E8E;&#x8389;&#x8389;&#x82B1;&#x7C89;&#x8868;&#x8FBE; cDNA &#x6587;&#x5E93;&#x514D;&#x75AB;&#x7B5B;&#x9009;&#x4F7F;&#x7528;&#x8840;&#x6E05;&#x5BF9; P-115-&#x603B;&#x90E8;&#x57FA;&#x5730;&#x548C; P-135-&#x603B;&#x90E8;&#x57FA;&#x5730;P-115-&#x603B;&#x90E8;&#x57FA;&#x5730;&#x7684;&#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x5E8F;&#x5217;&#x4ECE;&#x4E0E; P-135-&#x603B;&#x90E8;&#x57FA;&#x5730;&#x548C;&#x56DB;&#x4E2A;&#x7ED2;&#x6BDB;&#x86CB;&#x767D;&#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#x7684;&#x62DF;&#x5357;&#x82A5; &#xFF08;AtVLN1&#x3001; AtVLN2&#x3001; AtVLN3 &#x548C; AtVLN4&#xFF09;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E;&#x514B;&#x9686;&#x9AD8;&#x540C;&#x6E90;&#x6027;&#x5730;&#x63A8;&#x65AD;&#x51FA;&#xFF0C;&#x5C24;&#x5176;&#x662F; AtVLN4&#xFF0C;&#x8868;&#x660E; P-115-&#x57FA;&#x5730;&#x4E5F;&#x53EF;&#x88AB;&#x5217;&#x4E3A;&#x690D;&#x7269;&#x7ED2;&#x6BDB;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;&#x751F;&#x5316;&#x5206;&#x79BB;&#x53D1;&#x82BD;&#x7684;&#x767E;&#x5408;&#x82B1;&#x7C89;&#x7684; P-115-&#x57FA;&#x5730;&#x80FD;&#x591F;&#x5B89;&#x6392; F-&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x4E1D;&#x675F;&#x6210;&#x7EDF;&#x4E00;&#x6781;&#x6027;&#x548C;&#x6B64;&#x6346;&#x7ED1;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x88AB;&#x9547;&#x538B;&#x7684; Ca2 +-&#x9499;&#x8C03;&#x86CB;&#x767D; (CaM)&#xFF0C;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x4E1D;&#x7684; P-135-&#x603B;&#x90E8;&#x57FA;&#x5730;&#x7684;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5C5E;&#x6027;P-115-&#x57FA;&#x5730;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x690D;&#x7269;&#x7ED2;&#x6BDB;&#x86CB;&#x767D;&#x662F;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x5206;&#x5E03;&#x4E8E;&#x690D;&#x7269;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x85FB;&#x7C7B;&#x690D;&#x7269;&#x7684;&#x571F;&#x5730;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x690D;&#x7269;&#x7ED2;&#x6BDB;&#x86CB;&#x767D;&#x5728;&#x6839;&#x5934;&#x53D1;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x9CD6;&#xFF0C;co-localized &#x4E0E; transvacuolar &#x80A1;&#x548C;&#x76AE;&#x5C42;&#x4E0B;&#x7684;&#x533A;&#x57DF;&#x4E2D;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x4E1D;&#x675F;&#x3002;&#x663E;&#x5FAE;&#x6CE8;&#x5C04;&#x5230;&#x751F;&#x6D3B;&#x6839;&#x5934;&#x53D1;&#x6297; P-115-&#x57FA;&#x5730;&#x8840;&#x6E05;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9020;&#x6210;&#x5931;&#x8E2A;&#x7684; transvaculor &#x80A1;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x6D41;&#x8DEF;&#x7EBF;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E2D;&#x7ED3;&#x95F4;&#x7684;&#x7279;&#x6027; corallina P-135-&#x57FA;&#x5730;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x690D;&#x7269;&#x7ED2;&#x6BDB;&#x86CB;&#x767D;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x7684; P-115-&#x57FA;&#x5730;&#x7C7B;&#x578B;&#x8868;&#x660E;&#x4EA4;&#x611F;&#x795E;&#x7ECF;&#x4E0E;&#x951A;&#x5B9A;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x7684;&#x53F6;&#x7EFF;&#x4F53;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x4E1D;&#x7535;&#x7F06;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x690D;&#x7269; villins &#x5E7F;&#x6CDB;&#x5206;&#x53D1;&#xFF0C;&#x5E76;&#x53C2;&#x4E0E;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x4E1D;&#x675F;&#x5728;&#x6574;&#x4E2A;&#x690D;&#x7269;&#x738B;&#x56FD;&#x6210;&#x3002;

&#x690D;&#x7269; 115 kDa &#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x4E1D;&#x6346;&#x7ED1;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;P-115-&#x603B;&#x90E8;&#x57FA;&#x5730;&#xFF0C;&#x662F;&#x540C;&#x7CFB;&#x7269;&#x7684;&#x690D;&#x7269;&#x7ED2;&#x6BDB;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x5730;&#x5206;&#x5E03;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x3002;

Dans de nombreux cas, les filaments d&#x26;#39;actine sont dispos&#xE9;s en faisceaux et de servir de pistes pour le streaming cytoplasmiques dans les cellules v&#xE9;g&#xE9;tales. Nous avons isol&#xE9; une prot&#xE9;ine regroupement actine-filament, qui est compos&#xE9; de 115 kDa polypeptide (P-115-ABP), &#xE0; partir du pollen en germination de lys, Lilium longiflorum [al Nakayasu et. (1998) BIOCHEM: Biophys. Res. Commun. 249: 61]. P-115-ABP partag&#xE9; antig&#xE9;nicit&#xE9; similaire avec une usine de 135 kDa regroupement actine-filament (P-135-ABP), un homologue de plantes de la villine. Un clone ADNc de pleine longueur (ABP115;. Adh&#xE9;sion ne AB097407) a &#xE9;t&#xE9; isol&#xE9; &#xE0; partir d&#x26;#39;une banque d&#x26;#39;expression d&#x26;#39;ADNc de pollen de lys par immuno-criblage en utilisant des antis&#xE9;rums contre P-115-ABP et P-135-ABP. La s&#xE9;quence d&#x26;#39;acides amin&#xE9;s de P-115-SPA d&#xE9;duite de ce clone montr&#xE9; une forte homologie avec celles de P-135-SPA et quatre isoformes villine de Arabidopsis thaliana (AtVLN1, AtVLN2, AtVLN3 et AtVLN4), en particulier AtVLN4, indiquant que P-115 -ABP peut &#xE9;galement &#xEA;tre consid&#xE9;r&#xE9;e comme une usine de villine. Le P-115-ABP isol&#xE9;e biochimiquement &#xE0; partir du pollen de lys germination &#xE9;tait en mesure d&#x26;#39;organiser F-actine filaments avec polarit&#xE9; uniforme en faisceaux et cette activit&#xE9; groupage a &#xE9;t&#xE9; supprim&#xE9;e par le Ca2 +-calmoduline (CaM), similaires aux propri&#xE9;t&#xE9;s de groupement actine-filaments de P -135-ABP. Le type P-115-ABP de l&#x26;#39;usine villine a &#xE9;t&#xE9; largement diffus&#xE9; dans les cellules v&#xE9;g&#xE9;tales, des algues aux plantes terrestres. Dans les cellules cili&#xE9;es des racines de Hydrocharis dubia, ce type d&#x26;#39;installation villine a &#xE9;t&#xE9; co-localis&#xE9; avec l&#x26;#39;actine-filaments faisceaux dans les brins transvacuolar et les r&#xE9;gions sous-corticales. Microinjection de l&#x26;#39;antis&#xE9;rum contre le P-115-ABP dans des cellules vivantes poils absorbants caus&#xE9; la disparition de brins transvaculor et une alt&#xE9;ration de la route du streaming cytoplasmiques. Dans les cellules de Chara internodales corallina dans lequel le type P-135-ABP de l&#x26;#39;usine villine fait d&#xE9;faut, le type P-115-ABP a montr&#xE9; la co-localisation avec l&#x26;#39;actine-filaments c&#xE2;bles ancr&#xE9;s &#xE0; la surface intracellulaire de chloroplastes. Ces r&#xE9;sultats indiquent que villins v&#xE9;g&#xE9;tales sont largement diffus&#xE9;s et impliqu&#xE9; dans l&#x26;#39;organisation des filaments d&#x26;#39;actine en faisceaux tout au long du r&#xE8;gne v&#xE9;g&#xE9;tal.

Usine de 115 kDa Regroupement actine-filament, P-115-ABP, est un homologue de l&#x26;#39;usine de Villin et est largement distribu&#xE9; dans les cellules

Pflanze 115-kDa Aktin-Filament-B&#xFC;ndeln Protein, P-115-ABD, ist ein Homolog von Pflanzenschutzmitteln Villin und wird in Zellen verteilt ist.

In molti casi, filamenti di actina sono disposte in fasci e serviscono come tracce per lo streaming citoplasmatiche nelle cellule vegetali. Abbiamo isolato una proteina impacchettante filamenti di actina, che &egrave; composto da 115-kDa polipeptide (P-115-ABP), dal germinazione polline di giglio, Lilium longiflorum [Nakayasu et al (1998) BIOCHEM: Biophys. Res Commun. 249:61]. P-115-ABP condiviso antigenicit&agrave; simile con una 135-kDa filamenti di actina abbinamento proteine vegetali (P-135-ABP), un omologo di pianta di villina. Un clone del cDNA full-length (ABP115; no di adesione. AB097407) &egrave; stata isolata da una libreria di cDNA espressione di polline di giglio da immuno-screening utilizzando antisieri contro ABP-115-P e P-135-Msgr La sequenza dell&#39;amminoacido di P-115-ABP dedotta da questo clone ha mostrato elevata omologia con quelle di P-135-ABP e quattro isoforme villina di Arabidopsis thaliana (AtVLN1, AtVLN2, AtVLN3 e AtVLN4), specialmente AtVLN4, che indica che P-115-ABP possono essere classificati anche come un furfante di pianta. Il P-115-ABP isolati biochimicamente dal germinazione polline di giglio &egrave; stato in grado di organizzare i filamenti di F-actina con polarit&agrave; uniforme in fasci e questa abbinamento attivit&agrave; fu soppressa dal Ca2 +-calmodulina (CaM), simile alle propriet&agrave; di P-135-Msgr impacchettante filamenti di actina Il tipo P-115-ABP di villina pianta era largamente diffuso nelle cellule vegetali, da alghe a piante della terra. Nelle cellule della radice dei capelli di Hydrocharis dubia, questo tipo di pianta villina era co-localized con fasci di filamenti di actina i filamenti transvacuolar e regioni subcorticali. Microiniezione di antisiero contro P-115-ABP in vita radice dei capelli cellule ha causato la scomparsa dei filamenti transvaculor e alterazione del percorso del flusso citoplasmatico. Nelle cellule gli internodi di Chara corallina in cui manca il tipo P-135-ABP di villina pianta, il tipo P-115-ABP ha mostrato la collocazione con cavi di filamenti di actina ancorati sulla superficie intracellulare dei cloroplasti. Questi risultati hanno indicato che la pianta villins sono ampiamente distribuiti e coinvolto nell&#39;organizzazione dei filamenti di actina in pacchi in tutto il regno vegetale.

Piantare il filamento di actina 115-kDa proteina che impacchetta, P-115-ABP, &egrave; un omologo della pianta villina ed &egrave; ampiamente distribuito nelle cellule.

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&#xFF08;1998&#xFF09;BIOCHEM&#xFF1A;Biophys&#x3002;&#x89E3;&#x50CF;&#x5EA6;&#x3002;&#x60C5;&#x5831;&#x901A;&#x4FE1;&#x3002; 249&#xFF1A;61]&#x3002; P-115-ABP&#x306F;&#x3001;&#x690D;&#x7269;135-kDa&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A3;&#x30E9;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x30D0;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;P-135-ABP&#xFF09;&#x3001;&#x30D3;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x690D;&#x7269;&#x30DB;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B0;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x6297;&#x539F;&#x6027;&#x3092;&#x5171;&#x6709;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5B8C;&#x5168;&#x9577;cDNA&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#xFF08;ABP115;&#x52A0;&#x76DF;&#x306A;&#x3044;AB097407&#xFF09;&#x306F;&#x3001;P-115-ABP&#x3068;P-135-ABP&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x6297;&#x8840;&#x6E05;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x514D;&#x75AB;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x30E6;&#x30EA;&#x306E;&#x82B1;&#x7C89;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;cDNA&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA;&#x30FC;&#x304B;&#x3089;&#x5358;&#x96E2;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x304B;&#x3089;&#x63A8;&#x5B9A;P-115-ABP&#x306E;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x914D;&#x5217;&#x306F;&#x3001;P-115&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3001;P-135-ABP&#x306E;&#x3082;&#x306E;&#x3001;&#x7279;&#x306B;&#x30B7;&#x30ED;&#x30A4;&#x30CC;&#x30CA;&#x30BA;&#x30CA;&#x306E;4&#x30D3;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#xFF08;AtVLN1&#x3001;AtVLN2&#x3001;AtVLN3&#x3068;AtVLN4&#xFF09;&#x3001;AtVLN4&#x3068;&#x9AD8;&#x3044;&#x76F8;&#x540C;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;-ABP&#x306F;&#x3001;&#x690D;&#x7269;&#x30D3;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x5206;&#x985E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x767A;&#x82BD;&#x30E6;&#x30EA;&#x82B1;&#x7C89;&#x304B;&#x3089;&#x751F;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x306B;&#x5358;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x305F;P-115-ABP&#x306F;&#x3001;&#x30D0;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x3053;&#x306E;&#x30D0;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x6D3B;&#x6027;&#x306F;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6291;&#x5236;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x306B;&#x5747;&#x4E00;&#x306A;&#x6975;&#x6027;&#x3092;&#x6301;&#x3064;F-&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A3;&#x30E9;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x914D;&#x7F6E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3057;&#x305F;P&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A3;&#x30E9;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x30D0;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D1;&#x30C6;&#x30A3;&#x306B;&#x4F3C;&#x3066;+ &#x200B;&#x200B; - &#x30AB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30EA;&#x30F3;&#xFF08;CaM&#xFF09;&#x3001; -135-ABP&#x3002;&#x690D;&#x7269;&#x30D3;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;P-115-ABP&#x306E;&#x7A2E;&#x985E;&#x304C;&#x5E83;&#x304F;&#x85FB;&#x985E;&#x304B;&#x3089;&#x9678;&#x4E0A;&#x690D;&#x7269;&#x3078;&#x3001;&#x690D;&#x7269;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x3067;&#x914D;&#x5E03;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002; Hydrocharis dubia&#x306E;&#x6839;&#x6BDB;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x690D;&#x7269;&#x30D3;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;&#x306F;transvacuolar&#x30B9;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C9;&#x3068;&#x30B5;&#x30D6;&#x76AE;&#x8CEA;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A3;&#x30E9;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x675F;&#x3068;&#x5171;&#x5C40;&#x5728;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x751F;&#x304D;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x6839;&#x6BDB;&#x7D30;&#x80DE;&#x3078;&#x306E;P-115-ABP&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x6297;&#x8840;&#x6E05;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B8;&#x30A7;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;transvaculor&#x9396;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x306E;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306E;&#x5909;&#x66F4;&#x306E;&#x6D88;&#x5931;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x690D;&#x7269;&#x30D3;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;P-135-ABP&#x306E;&#x578B;&#x304C;&#x6B20;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30AD;&#x30E3;&#x30E9;Corallina&#x306B;&#x306E;&#x7D50;&#x7BC0;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306F;&#x3001;P-115-ABP&#x306E;&#x7A2E;&#x985E;&#x306F;&#x3001;&#x8449;&#x7DD1;&#x4F53;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x306B;&#x56FA;&#x5B9A;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A3;&#x30E9;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x30B1;&#x30FC;&#x30D6;&#x30EB;&#x3068;&#x5171;&#x5C40;&#x5728;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x690D;&#x7269;villins&#x304C;&#x5E83;&#x304F;&#x690D;&#x7269;&#x754C;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x675F;&#x306B;&#x5206;&#x5E03;&#x3057;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A3;&#x30E9;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;

&#x690D;&#x7269;115-kDa&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A3;&#x30E9;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x30D0;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3001;P-115-ABP&#x306F;&#x3001;&#x690D;&#x7269;&#x30D3;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x30DB;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B0;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x5E83;&#x304F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x5206;&#x5E03;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;

&#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB9D0;&#xB77C; &#xD544; &#xB77C; &#xBA58; &#xD2B8; &#xBC88;&#xB4E4;&#xC73C;&#xB85C; &#xC815;&#xB82C; &#xB418; &#xACE0; &#xC2DD;&#xBB3C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9AC;&#xBC0D;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD2B8;&#xB799;&#xC73C;&#xB85C;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB9B4;&#xB9AC;, Lilium longiflorum germinating &#xAF43;&#xAC00;&#xB8E8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB9D0;&#xB77C;-&#xD544; &#xB77C; &#xBA58; &#xD2B8; &#xBC88;&#xB4E4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; 115 kDa polypeptide (P-115-ABP) &#xC774;&#xB8E8;&#xC5B4;&#xC838; &#xC788;&#xB294; &#xACA9;&#xB9AC; [&#xB098;&#xCE74; &#xC57C; &#xC2A4; &#xC678;. (1998) BIOCHEM: Biophys. Res. &#xC704;&#xD574;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. 249: 61]. P-115-ABP &#xC2DD;&#xBB3C; 135 kDa &#xB9D0;&#xB77C;-&#xD544; &#xB77C; &#xBA58; &#xD2B8; &#xBC88;&#xB4E4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (P-135-ABP) villin&#xC758; &#xACF5;&#xC7A5; homologue &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; antigenicity &#xACF5;&#xC720;. &#xC804;&#xCCB4; &#xAE38;&#xC774;&#xC758; cDNA &#xD074;&#xB860; (ABP115; &#xAC00;&#xC785; no. AB097407) &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;-&#xC0C1;&#xC601; &#xD558; &#xC5EC; &#xBC31;&#xD569; &#xAF43;&#xAC00;&#xB8E8;&#xC758; &#xC2DD; cDNA &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB7EC;&#xB9AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACA9;&#xB9AC;&#xB294; P-115-ABP&#xC640; P 135 ABP. antisera&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; P-115-ABP&#xC758; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xC0B0; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; P-135-ABP&#xC758;&#xC640; Arabidopsis thaliana (AtVLN1, AtVLN2, AtVLN3 &#xBC0F; AtVLN4)&#xC758; 4 &#xAC1C;&#xC758; villin isoforms &#xD074;&#xB860; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900; &#xB192;&#xC740; homology&#xC774;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD2B9;&#xD788; AtVLN4, P-115-ABP &#xACF5;&#xC7A5; villin&#xB85C; &#xBD84;&#xB958; &#xB610;&#xD55C; &#xC218; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xCD94;&#xB860;. P-115-ABP germinating &#xBC31;&#xD569; &#xAF43;&#xAC00;&#xB8E8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD654;&#xD559;&#xC801; &#xC808;&#xC5F0; &#xBC88;&#xB4E4;&#xC73C;&#xB85C; &#xADE0;&#xC77C; &#xD55C; &#xADF9;&#xC131;&#xC73C;&#xB85C; F-&#xB9D0;&#xB77C; &#xD544; &#xB77C; &#xBA58; &#xD2B8; &#xC815;&#xB82C; &#xC218; &#xC788;&#xC5C8;&#xACE0; Ca2 +&#xC774; &#xBC88;&#xB4E4; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC5B5;&#xC81C;-calmodulin (&#xCEA0;) P 135 ABP.&#xC758; &#xB9D0;&#xB77C;-&#xD544; &#xB77C; &#xBA58; &#xD2B8; &#xBC88;&#xB4E4; &#xC18D;&#xC131;&#xACFC; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xACF5;&#xC7A5; villin P-115-ABP &#xC720;&#xD615;&#xC758; &#xC870;&#xB958; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC744; &#xB545;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DD;&#xBB3C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD558; &#xAC8C; &#xBC30;&#xD3EC; &#xD588;&#xB2E4;. Hydrocharis dubia&#xC758; &#xB8E8;&#xD2B8; &#xD558;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC;, &#xC2DD;&#xBB3C; villin&#xC758;&#xC774; &#xC885;&#xB958;&#xB294; co-localized transvacuolar &#xAC00;&#xB2E5; &#xBC0F; sub-cortical &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC88;&#xB4E4; &#xB9D0;&#xB77C;-&#xD544; &#xB77C; &#xBA58; &#xD2B8;&#xC640; &#xD568;&#xAED8;. Microinjection &#xC0DD;&#xD65C; &#xB8E8;&#xD2B8; &#xBA38;&#xB9AC;&#xC5D0; P-115-ABP &#xC0C1;&#xB300;&#xB85C; &#xC6D0;&#xC73C;&#xB85C;&#xC758; &#xC140; transvaculor &#xAC00;&#xB2E5;&#xC758; &#xC2E4;&#xC885; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9AC;&#xBC0D;&#xC758; &#xACBD;&#xB85C; &#xBCC0;&#xACBD; &#xC778;&#xD574; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xACF5;&#xC7A5; villin P-135-ABP &#xC720;&#xD615;&#xC758; &#xBD80;&#xC871; &#xD55C; &#xC9C0; corallina&#xC758; internodal &#xC140; P-115-ABP &#xD615;&#xC2DD; chloroplasts &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xACE0;&#xC815; &#xD558;&#xB294; &#xB9D0;&#xB77C;-&#xD544; &#xB77C; &#xBA58; &#xD2B8; &#xCF00;&#xC774;&#xBE14;&#xB85C; co-localization&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xD45C;&#xC2DC; &#xACF5;&#xC7A5; villins&#xB294; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD558; &#xAC8C; &#xBC30;&#xD3EC; &#xD558; &#xACE0; &#xACF5;&#xC7A5; &#xC655;&#xAD6D;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xBC88;&#xB4E4;&#xC73C;&#xB85C; &#xB9D0;&#xB77C; &#xD544; &#xB77C; &#xBA58; &#xD2B8;&#xC758; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xCC38;&#xC5EC;.

115-KDa &#xB9D0;&#xB77C;-&#xD544; &#xB77C; &#xBA58; &#xD2B8; &#xACF5;&#xC7A5; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC88;&#xB4E4;, P-115-ABP, &#xACF5;&#xC7A5; villin homologue &#xD558; &#xACE0; &#xC140;&#xC5D0; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD558; &#xAC8C; &#xBC30;&#xD3EC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

En muchos casos, los filamentos de actina est&#xE1;n dispuestas en haces y sirven como pistas para la transmisi&#xF3;n de citoplasm&#xE1;ticas en c&#xE9;lulas vegetales. Hemos aislado una prote&#xED;na agrupaci&#xF3;n actina-filamento, que se compone de 115-kDa polip&#xE9;ptido (P-115-ABP), desde la germinaci&#xF3;n del polen de lirio, Lilium longiflorum [Nakayasu et al. (1998) Biochem: Biophys. Res.. Commun. 249: 61]. P-115-ABP comparte antigenicidad similar con una planta de 135-kDa prote&#xED;na actina del filamento agrupaci&#xF3;n (P-135-ABP), un hom&#xF3;logo de la planta de vellosidades. Un clon de ADNc de longitud completa (ABP115;. No la adhesi&#xF3;n AB097407) se aisl&#xF3; de una biblioteca de expresi&#xF3;n de ADNc de polen lirio por inmuno-cribado utilizando antisueros contra P-115-ABP y P-135-ABP. La secuencia de amino&#xE1;cidos de P-115-ABP deducirse de este clon mostr&#xF3; una alta homolog&#xED;a con los de P-135-ABP y cuatro isoformas Villin de Arabidopsis thaliana (AtVLN1, AtVLN2, AtVLN3 y AtVLN4), especialmente AtVLN4, lo que indica que P-115 -ABP tambi&#xE9;n se puede clasificar como un villina planta. El P-115-ABP aislados bioqu&#xED;micamente del polen del lirio germinaci&#xF3;n fue capaz de organizar la F-actina filamentos con la polaridad uniforme en haces y esta actividad la agrupaci&#xF3;n fue suprimida por el Ca2 +-calmodulina (CaM), similar a las propiedades de agrupaci&#xF3;n de filamentos de actina de P -135-ABP. El tipo P-115-ABP de la planta de vellosidades se distribuy&#xF3; ampliamente en las c&#xE9;lulas vegetales, desde algas y plantas terrestres. En las c&#xE9;lulas de la ra&#xED;z del cabello de Hydrocharis dubia, este tipo de plantas villina fue co-localizada con haces de filamentos de actina en los filamentos transvacuolar y las regiones subcorticales. Microinyecci&#xF3;n del antisuero contra el P-115-ABP en la que viven las c&#xE9;lulas de la ra&#xED;z del cabello causado la desaparici&#xF3;n de hilos transvaculor y la alteraci&#xF3;n de la ruta de la corriente citoplasm&#xE1;tica. En las c&#xE9;lulas internodales de Chara corallina en la que el tipo P-135-ABP de la planta de vellosidades que falta, el tipo P-115-ABP mostr&#xF3; co-localizaci&#xF3;n con los cables de filamentos de actina anclados en la superficie intracelular de los cloroplastos. Estos resultados indican que villins de plantas se encuentran ampliamente distribuidas y que participan en la organizaci&#xF3;n de los filamentos de actina en haces de todo el reino vegetal.

Planta de 115-kDa prote&#xED;na actina de filamento Agrupaci&#xF3;n, P-115-ABP, es un hom&#xF3;logo de la planta de Villin y est&#xE1; ampliamente distribuida en las c&#xE9;lulas

In precedenza, abbiamo dimostrato che la profilina in eccesso inibisce la crescita del tubo pollinico a concentrazioni significativamente inferiori che blocca il flusso citoplasmatico. A delucidare il meccanismo da cui la profilina realizza questa funzione, noi abbiamo impiegato mutante profilins da Schizosaccharomyces pombe [J. Lu e Pollard T.D. (2001) Mol Biol Cell 12:1161-1175], che hanno difetti nella associazione actina, capacit&agrave; di inibire la polimerizzazione e poly-l-prolina (PLP)-associazione. Utilizzando Lilium longiflorum polline L. e S. pombe profilins come standard di wild-type (wt), mutante profilins sono stati iniettati in tubi pollinici di Lilium ed esaminate per i loro effetti sulla morfologia delle cellule e del tasso di crescita. I nostri risultati mostrano che mutante Y5D (68% associazione actina; 1.1% PLP-associazione) &egrave; indistinguibile da wt-standard profilins. Tuttavia mutante K81F (2,7% associazione actina; 77% PLP-associazione) e soprattutto mutante K67E (&lt; associazione actina 1%; 100% PLP-associazione) sono significativamente meno efficaci profilins wt-standard nella loro capacit&agrave; di inibire la crescita del tubo pollinico. PLP inibisce anche la crescita del tubo pollinico. Tuttavia, PLP non &egrave; diverso da K67E/PLP combinati, che non ha nessuna associazione actina, suggerendo che PLP non funziona legandosi a profilina. In aggiunta, ci sono differenze nella morfologia e organizzazione di F-actina nelle cellule iniettate con PLP versus profilina wt. Considerando che la profilina wt provoca una frammentazione e una marcata riduzione della quantit&agrave; di F-actina [L. Vidali et al (2001) Mol Biol Cell 12:2534-2545], PLP genera un&#39;ampia disorganizzazione senza alcuna apparente riduzione della quantit&agrave; di F-actina. Concludiamo che insieme a actina-associazione attivit&agrave; di profilina, PLP contenenti proteine anche partecipano al processo di controllo di crescita e possono farlo indipendentemente dall&#39;associazione a profilina.

Profilina inibisce la crescita del tubo pollinico attraverso actina-associazione, ma non poly-L-prolina-associazione.

&#x4EE5;&#x524D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x8868;&#x660E;&#x8FC7;&#x91CF;&#x539F;&#x4E1D;&#x86CB;&#x767D;&#x6291;&#x5236;&#x82B1;&#x7C89;&#x7BA1;&#x751F;&#x957F;&#x663E;&#x8457;&#x8F83;&#x4F4E;&#x6D53;&#x5EA6;&#x6BD4;&#x5B83;&#x4F1A;&#x963B;&#x6B62;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x6D41;&#x3002;&#x6F84;&#x6E05;&#x673A;&#x5236;&#x7531;&#x54EA;&#x4E9B;&#x524D;&#x5B9E;&#x73B0;&#x6B64;&#x529F;&#x80FD;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x96C7;&#x7528;&#x4E86;&#x4ECE;&#x7C9F;&#x9152;&#x88C2;&#x6B96;&#x9175;&#x6BCD;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53; profilins [J.&#x9646;&#x548C; 23.&#x6CE2;&#x62C9;&#x5FB7; (2001) Mol &#x5DE5;&#x4E1A;&#x56ED;&#x6D77;&#x535A;&#x683C; 12:1161-1175&#x5E74;]&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7ED3;&#x5408;&#xFF0C;&#x6291;&#x5236;&#x805A;&#x5408;&#x3001; &#x548C;&#x805A;-l-&#x812F;&#x6C28;&#x9178; (PLP) &#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x6709;&#x7F3A;&#x9677;-&#x7ED1;&#x5B9A;&#x3002;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x91CE;&#x751F;&#x578B; (wt) &#x6807;&#x51C6;&#x4F7F;&#x7528;&#x767E;&#x5408;&#x9E9D;&#x9999;&#x767E;&#x5408;&#x82B1;&#x7C89;&#x548C; S.&#x6B96;&#x9175;&#x6BCD; profilins&#xFF0C;&#x6CE8;&#x5165;&#x7684;&#x767E;&#x5408;&#xFF0C;&#x82B1;&#x7C89;&#x7BA1;&#x6709;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53; profilins &#x548C;&#x5BA1;&#x67E5;&#x5176;&#x5BF9;&#x589E;&#x957F;&#x901F;&#x7387;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5F62;&#x6001;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x663E;&#x793A;&#xFF0C;&#x7A81;&#x53D8; Y5D (68%&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7ED3;&#x5408; &#xFF1B; 1.1 %plp &#x7ED1;&#x5B9A;&#xFF09; wt &#x6807;&#x51C6; profilins &#x65E0;&#x6CD5;&#x533A;&#x5206;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53; K81F (2.7%&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7ED3;&#x5408; &#xFF1B; 77 %plp &#x7ED1;&#x5B9A;&#xFF09; &#x53CA;&#x7279;&#x522B;&#x662F;&#x7A81;&#x53D8;&#x578B; K67E &#xFF08;&lt;-1%&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7ED3;&#x5408; &#xFF1B; 100 %plp &#x7ED1;&#x5B9A;&#xFF09; &#x5927;&#x5927;&#x4E0D;&#x5982; wt &#x6807;&#x51C6; profilins &#x6291;&#x5236;&#x82B1;&#x7C89;&#x7BA1;&#x751F;&#x957F;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x6709;&#x6548;&#x3002;&#x5DE5;&#x515A;&#x4E5F;&#x6291;&#x5236;&#x82B1;&#x7C89;&#x7BA1;&#x751F;&#x957F;&#x3002;&#x4E0D;&#x8FC7;&#xFF0C;&#x5DE5;&#x515A;&#x4E0D;&#x4E0D;&#x540C;&#x4E8E; K67E/&#x5DE5;&#x515A;&#x76F8;&#x7ED3;&#x5408;&#xFF0C;&#x5DF2;&#x65E0;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x5177;&#x6709;&#x7EA6;&#x675F;&#x529B;&#xFF0C;&#x6697;&#x793A;&#x5DE5;&#x515A;&#x901A;&#x8FC7;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x524D;&#x4E0D;&#x8D77;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x8FD8;&#x6709;&#x5F62;&#x6001;&#x7684;&#x5DEE;&#x5F02;&#x548C; F-&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x6CE8;&#x5C04;&#x8FDB;&#x5DE5;&#x515A;&#x4E0E; wt &#x539F;&#x4E1D;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x3002;&#x800C; wt &#x524D;&#x5BFC;&#x81F4;&#x788E;&#x7247;&#x548C; F-&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x660E;&#x663E;&#x7684;&#x51CF;&#x5C11; [L.Vidali &#x7B49;&#x4EBA; &#xFF08;2001 &#x5E74;&#xFF09; Mol &#x5DE5;&#x4E1A;&#x56ED;&#x6D77;&#x535A;&#x683C; 12:2534-2545&#x5E74;]&#xFF0C;&#x8FDB;&#x5DE5;&#x515A;&#x751F;&#x6210;&#x65E0;&#x4EFB;&#x4F55;&#x660E;&#x663E;&#x51CF;&#x5C11; F-&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x89E3;&#x4F53;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x4E0E;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7ED3;&#x5408;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x524D;&#xFF0C;PLP &#x542B;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4E5F;&#x53C2;&#x4E0E;&#x589E;&#x957F;&#x63A7;&#x5236;&#x8FC7;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x5E76;&#x53EF;&#x4EE5;&#x72EC;&#x7ACB;&#x4E8E;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x524D;&#x8FD9;&#x6837;&#x505A;&#x3002;

&#x539F;&#x4E1D;&#x86CB;&#x767D;&#x6291;&#x5236;&#x82B1;&#x7C89;&#x7BA1;&#x751F;&#x957F;&#x901A;&#x8FC7;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;-&#x7ED1;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x805A;-L-&#x812F;&#x6C28;&#x9178;-&#x7ED1;&#x5B9A;&#x3002;

Previously, we have shown that excess profilin inhibits pollen tube growth at significantly lower concentrations than it blocks cytoplasmic streaming. To elucidate the mechanism by which profilin achieves this function, we have employed mutant profilins from Schizosaccharomyces pombe [J. Lu and T.D. Pollard (2001) Mol Biol Cell 12:1161-1175], which have defects in actin-binding, ability to inhibit polymerization, and poly- l-proline (PLP)-binding. Using Lilium longiflorum L. pollen and S. pombe profilins as wild-type (wt) standards, mutant profilins have been injected into pollen tubes of Lilium, and examined for their effects on growth rate and cell morphology. Our results show that mutant Y5D (68% actin-binding; 1.1% PLP-binding) is indistinguishable from wt-standard profilins. However mutant K81F (2.7% actin-binding; 77% PLP-binding) and especially mutant K67E (<1% actin-binding; 100% PLP-binding) are significantly less effective than wt-standard profilins in their ability to inhibit pollen tube growth. PLP also inhibits pollen tube growth. However, PLP is not different from K67E/PLP combined, which has no actin-binding, suggesting that PLP does not function by binding to profilin. In addition, there are differences in the morphology and F-actin organization in cells injected with PLP versus wt-profilin. Whereas wt-profilin causes a fragmentation and marked reduction in the amount of F-actin [L. Vidali et al. (2001) Mol Biol Cell 12:2534-2545], PLP generates an extensive disorganization without any apparent reduction in the amount of F-actin. We conclude that along with actin-binding activity of profilin, PLP-containing proteins also participate in the growth control process, and can do so independently of binding to profilin.

Profilin inhibits pollen tube growth through actin-binding, but not poly-L-proline-binding.

Auparavant, nous avons montr&#xE9; que la profiline exc&#xE8;s inhibe la croissance du tube pollinique &#xE0; des concentrations nettement plus faibles que il bloque le streaming cytoplasmiques. Pour &#xE9;lucider le m&#xE9;canisme par lequel la profiline r&#xE9;alise cette fonction, nous avons employ&#xE9; profilines mutantes de Schizosaccharomyces pombe [J. Lu et TD Pollard (2001) Mol Cell Biol 12:1161-1175], qui pr&#xE9;sentent des d&#xE9;fauts de liaison d&#x26;#39;actine dans, la capacit&#xE9; &#xE0; inhiber la polym&#xE9;risation, et le poly-L-proline (PLP) de liaison. Utilisation de Lilium longiflorum L. pollen et profilines S. pombe comme de type sauvage (WT) les normes, profilines mutantes ont &#xE9;t&#xE9; inject&#xE9;s dans des tubes polliniques de Lilium, et examin&#xE9;s pour leurs effets sur le taux de croissance et la morphologie des cellules. Nos r&#xE9;sultats montrent que mutant Y5D (68% liant l&#x26;#39;actine; 1,1% PLP-contraignant) est indiscernable de la masse standard profilines. Cependant mutant K81F (2,7% liant l&#x26;#39;actine; 77% PLP-contraignant) et surtout mutant K67E (&#x26;lt;1% liant l&#x26;#39;actine; 100% PLP-contraignant) sont nettement moins efficaces que les poids standard profilines dans leur capacit&#xE9; &#xE0; inhiber tube pollinique la croissance. PLP inhibe &#xE9;galement la croissance du tube pollinique. Toutefois, PLP n&#x26;#39;est pas diff&#xE9;rente de K67E/PLP combin&#xE9;, qui n&#x26;#39;a pas de liaison d&#x26;#39;actine, ce qui sugg&#xE8;re que PLP ne fonctionne pas en se liant &#xE0; la profiline. En outre, il existe des diff&#xE9;rences dans la morphologie et la F-actine organisation dans les cellules inject&#xE9;es avec PLP par rapport poids-profiline. Consid&#xE9;rant en poids profiline provoque une r&#xE9;duction de la fragmentation et marqu&#xE9;e de la quantit&#xE9; de F-actine [L. Vidali et al. (2001) Mol Biol Cell 12:2534-2545], PLP g&#xE9;n&#xE8;re une d&#xE9;sorganisation importante sans aucune r&#xE9;duction apparente de la quantit&#xE9; de F-actine. Nous concluons que, avec l&#x26;#39;actine-activit&#xE9; de liaison de la profiline, PLP-prot&#xE9;ines contenant &#xE9;galement participer au processus de contr&#xF4;le de la croissance, et peut le faire ind&#xE9;pendamment de la fixation &#xE0; la profiline.

Profilin Inhibe croissance du tube pollinique Gr&#xE2;ce liant l&#x26;#39;actine, mais pas de poly-L-proline-contraignant

Profilin hemmt Pollenschlauchwachstum durch Aktin-bindende, aber nicht Poly-L-Prolin-Bindung.

&#x4EE5;&#x524D;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x904E;&#x5270;&#x306A;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A3;&#x306F;&#x305D;&#x308C;&#x304C;&#x539F;&#x5F62;&#x8CEA;&#x6D41;&#x52D5;&#x3092;&#x963B;&#x6B62;&#x3059;&#x308B;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x306F;&#x308B;&#x304B;&#x306B;&#x4F4E;&#x3044;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3067;&#x82B1;&#x7C89;&#x7BA1;&#x4F38;&#x9577;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A3;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x5B9F;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x89E3;&#x660E;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x5206;&#x88C2;&#x9175;&#x6BCD;[J.&#x304B;&#x3089;&#x5909;&#x7570;profilins&#x3092;&#x63A1;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;Lu&#x3068;TD&#x30DD;&#x30E9;&#x30FC;&#x30C9;&#xFF08;2001&#xFF09;&#x306E;Mol Biol&#x7D30;&#x80DE;12:1161-1175]&#x3001;&#x91CD;&#x5408;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D50;&#x5408;&#x3001;&#x80FD;&#x529B;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30DD;&#x30EA;-L-&#x30D7;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#xFF08;PLP&#xFF09;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#xFF08;WT&#xFF09;&#x306E;&#x898F;&#x683C;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30C6;&#x30C3;&#x30DD;&#x30A6;&#x30E6;&#x30EA;L.&#x306E;&#x82B1;&#x7C89;&#x3068;S.&#x30DD;&#x30F3;&#x30D9;&#x306E;profilins&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;profilins&#x306F;&#x30E6;&#x30EA;&#x306E;&#x82B1;&#x7C89;&#x7BA1;&#x306B;&#x6CE8;&#x5165;&#x3057;&#x3001;&#x6210;&#x9577;&#x7387;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x5F62;&#x614B;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x5F71;&#x97FF;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x91CD;&#x91CF;&#x6A19;&#x6E96;profilins&#x304B;&#x3089;&#x533A;&#x5225;&#x304C;&#x3064;&#x304D;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;Y5D&#xFF08;1.1&#xFF05;PLP&#x7D50;&#x5408;68&#x30D1;&#x30FC;&#x30BB;&#x30F3;&#x30C8;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D50;&#x5408;&#xFF09;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;K81F&#xFF08;2.7&#xFF05;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D50;&#x5408;&#x3001;77&#x30D1;&#x30FC;&#x30BB;&#x30F3;&#x30C8;PLP-&#x7D50;&#x5408;&#xFF09;&#x3067;&#x3001;&#x7279;&#x306B;&#x5909;&#x7570;K67E&#xFF08;&#x26;lt;1&#xFF05;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D50;&#x5408;&#x3001;100&#xFF05;PLP-&#x7D50;&#x5408;&#xFF09;&#x304C;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x5C11;&#x306A;&#x3044;&#x82B1;&#x7C89;&#x7BA1;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x306E;&#x91CD;&#x91CF;&#x6A19;&#x6E96;profilins&#x3088;&#x308A;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x6210;&#x9577;&#x3002; PLP&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x82B1;&#x7C89;&#x7BA1;&#x4F38;&#x9577;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;PLP&#x306F;&#x3001;PLP&#x306F;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A3;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3001;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D50;&#x5408;&#x304C;&#x3042;&#x308B;K67E/PLP&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x304B;&#x3089;&#x3001;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x3082;&#x306E;&#x3067;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;PLP&#x5BFE;&#x91CD;&#x91CF;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A3;&#x3067;&#x6CE8;&#x5165;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5F62;&#x614B;&#x304A;&#x3088;&#x3073;F-&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002; WT-&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A3;&#x306F;&#x3001;&#x65AD;&#x7247;&#x5316;&#x3057;&#x3001;F-&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;[L.&#x91CF;&#x306E;&#x8457;&#x3057;&#x3044;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x306E;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3001; Vidali&#x3089;&#x3002; &#xFF08;2001&#xFF09;&#x306E;Mol Biol&#x7D30;&#x80DE;12:2534-2545]&#x3001;PLP&#x306F;&#x3001;F-&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x91CF;&#x306E;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306A;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306A;&#x3057;&#x3067;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x89E3;&#x4F53;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A3;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D50;&#x5408;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3068;&#x3082;&#x306B;&#x3001;PLP-&#x542B;&#x6709;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x6210;&#x9577;&#x5236;&#x5FA1;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306B;&#x53C2;&#x52A0;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x7D50;&#x8AD6;&#x3057;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A3;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3068;&#x306F;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x3066;&#x884C;&#x3046;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A3;&#x306F;&#x3001;&#x30DD;&#x30EA;-L-&#x30D7;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x7D50;&#x5408;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D50;&#x5408;&#x3092;&#x901A;&#x3057;&#x3066;&#x82B1;&#x7C89;&#x7BA1;&#x4F38;&#x9577;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;

&#xC774;&#xC804;&#xC5D0;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB9AC;&#xBC0D;&#xC744; &#xCC28;&#xB2E8; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xD6E8;&#xC52C; &#xB0AE;&#xC740; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAF43;&#xAC00;&#xB8E8; &#xAD00; &#xC131;&#xC7A5; &#xC5B5;&#xC81C; &#xCD08;&#xACFC; profilin &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBA85;&#xB8CC; &#xD558; &#xAC8C; &#xD558;&#xB294; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744;&#xC774; &#xD568;&#xC218;&#xB97C; &#xC2E4;&#xD604; &#xD558;&#xB294; profilin&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; Schizosaccharomyces pombe&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; profilins&#xB97C; &#xACE0;&#xC6A9; &#xD588;&#xB2E4; [J. &#xB8E8;&#xC640; &#xD3F4;&#xB77C; &#xB4DC; T.D. (2001) &#xBAB0; Biol &#xC140; 12:1161-1175], &#xC911; &#xD569;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xD3F4; &#xB9AC;-l-&#xD504;&#xB864;&#xB9B0; (PLP)&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xB9D0;&#xB77C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xACB0;&#xD568;&#xC744; &#xAC16;&#xACE0; &#xC788;&#xB294;-&#xBC14;&#xC778;&#xB529;. Lilium longiflorum L. &#xAF43;&#xAC00;&#xB8E8;&#xC640; S. pombe profilins&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; (wt) &#xD45C;&#xC900;&#xC73C;&#xB85C;, &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; profilins Lilium&#xC758; &#xAF43;&#xAC00;&#xB8E8; &#xAD00;&#xC5D0; &#xC8FC;&#xC785; &#xB418;&#xC5C8;&#xACE0; &#xC131;&#xC7A5; &#xC18D;&#xB3C4; &#xC138;&#xD3EC; &#xD615;&#xD0DC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC; &#xB300; &#xD55C; &#xAC80;&#xC0AC;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; Y5D (&#xB9D0;&#xB77C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; 68%, 1.1 %plp &#xBC14;&#xC778;&#xB529;) wt &#xD45C;&#xC900; profilins&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD6C;&#xBCC4;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; K81F (2.7% &#xB9D0;&#xB77C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;; 77 %plp &#xBC14;&#xC778;&#xB529;)&#xC640; &#xD2B9;&#xD788; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; K67E (&lt; 1% &#xB9D0;&#xB77C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;; 100 %plp &#xBC14;&#xC778;&#xB529;) &#xD06C;&#xAC8C; &#xB35C; wt &#xD45C;&#xC900; profilins &#xAF43;&#xAC00;&#xB8E8; &#xAD00; &#xC131;&#xC7A5;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD558;&#xB294; &#xB2A5;&#xB825;&#xC5D0; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. PLP&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xAF43;&#xAC00;&#xB8E8; &#xAD00;&#xC758; &#xC131;&#xC7A5;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, PLP K67E/PLP &#xACB0;&#xD569;, &#xB9D0;&#xB77C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC774; &#xC5C6;&#xC73C;&#xBA74;&#xC774; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; PLP profilin &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC774; &#xC791;&#xB3D9; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB2E4;&#xB974;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xAC70;&#xAE30;&#xC5D0; &#xD615;&#xD0DC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCC28;&#xC774; &#xC140; PLP wt profilin &#xB300; &#xC8FC;&#xC0AC;&#xC5D0; F &#xB9D0;&#xB77C; &#xC870;&#xC9C1;. Wt profilin &#xD558;&#xBA74; &#xC870;&#xAC01;&#xD654;&#xC640; F &#xB9D0;&#xB77C; &#xC591;&#xC744; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xAC10;&#xC18C; &#xD558;&#xB294; &#xBC18;&#xBA74; [L. Vidali &#xC678;. (2001) &#xBAB0; Biol &#xC140; 12:2534-2545], PLP F &#xB9D0;&#xB77C; &#xC591;&#xC744; &#xC5B4;&#xB5A4; &#xBA85;&#xBC31;&#xD55C; &#xAC10;&#xC18C; &#xC5C6;&#xC774; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xD574;&#xCCB4;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xACB0;&#xB860;&#xC744; &#xB9D0;&#xB77C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; profilin&#xC758; &#xD65C;&#xB3D9;, &#xD568;&#xAED8; PLP &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xB3C4; &#xC131;&#xC7A5; &#xC81C;&#xC5B4; &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0; &#xCC38;&#xC5EC; profilin &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xC744; &#xBCC4;&#xB3C4;&#xB85C; &#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Profilin &#xD3F4; &#xB9AC;-L-&#xD504;&#xB864;&#xB9B0;-&#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xD558;&#xC9C0; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB9D0;&#xB77C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xD1B5;&#xD574; &#xAF43;&#xAC00;&#xB8E8; &#xAD00; &#xC131;&#xC7A5;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Anteriormente, hemos demostrado que el exceso de profilina inhibe el crecimiento del tubo pol&#xED;nico en concentraciones significativamente m&#xE1;s bajas de lo que bloquea la transmisi&#xF3;n citoplasm&#xE1;ticos. Para dilucidar el mecanismo por el cual profilina logra esta funci&#xF3;n, hemos empleado profilinas mutantes de Schizosaccharomyces pombe [J. Lu y TD Pollard (2001) Mol Cell Biol. 12:1161-1175], que tienen defectos en la actina de uni&#xF3;n, capacidad para inhibir la polimerizaci&#xF3;n, y poli-L-prolina (PLP) vinculante. Uso de polen de Lilium longiflorum L. y S. pombe profilinas como de tipo salvaje (wt) las normas, profilinas mutantes se han inyectado en los tubos de polen de Lilium, y examinado por sus efectos sobre la tasa de crecimiento y morfolog&#xED;a de las c&#xE9;lulas. Nuestros resultados muestran que la mutante Y5D (68% de actina-vinculante; 1,1% PLP-vinculante) es indistinguible de peso est&#xE1;ndar profilinas. Sin embargo mutante K81F (2,7% actina-vinculante, el 77% PLP-vinculante) y, sobre todo mutante K67E (&#x26;lt;1% de actina-vinculante, el 100% PLP-vinculante) son significativamente menos eficaz que el peso est&#xE1;ndar profilinas en su capacidad para inhibir tubo pol&#xED;nico crecimiento. PLP tambi&#xE9;n inhibe el crecimiento del tubo pol&#xED;nico. Sin embargo, el PLP no es diferente de K67E/PLP combinado, que no tiene actina de uni&#xF3;n, lo que sugiere que el PLP no funciona mediante la uni&#xF3;n a profilina. Adem&#xE1;s, hay diferencias en la morfolog&#xED;a y la organizaci&#xF3;n de F-actina en c&#xE9;lulas inyectadas con PLP versus peso profilina. Considerando que el peso de la profilina provoca una reducci&#xF3;n de la fragmentaci&#xF3;n y el marcado en la cantidad de F-actina [L. Vidali et al. (2001) Mol Cell Biol 12:2534-2545], PLP genera una desorganizaci&#xF3;n amplia sin aparente reducci&#xF3;n en la cantidad de F-actina. Llegamos a la conclusi&#xF3;n de que, junto con la actina actividad de uni&#xF3;n de la profilina, PLP-que contienen prote&#xED;nas tambi&#xE9;n participan en el proceso de control de crecimiento, y puede hacerlo de forma independiente de unirse a la profilina.

Profilin Inhibe crecimiento del tubo pol&#xED;nico a trav&#xE9;s de actina vinculante, pero no poli-L-prolina-vinculante

Los estudios previos de Rac1 en fibroblastos han utilizado construcciones dominantes negativas, que pueden tener efectos no espec&#xED;ficos. Se utiliz&#xF3; un alelo condicional de Rac1 para examinar cr&#xED;ticamente la funci&#xF3;n de Rac1 en fibroblastos de rat&#xF3;n. La falta de Rac1 tenido efectos dram&#xE1;ticos sobre las c&#xE9;lulas nonconfluent, que fueron alargados y ten&#xED;a blebbing extensa, pero no la formaci&#xF3;n de lamellipodia o volante. Sin embargo, Rac1 nulo fibroblastos trasladadas utilizando seud&#xF3;podos, como protuberancias, sin lamellipodia, migrando hacia un factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF) gradiente de la forma m&#xE1;s eficiente que sus hom&#xF3;logos de tipo salvaje. Rac1 son nulos los fibroblastos in vitro heridas cerradas y se extendi&#xF3; sobre un sustrato de la fibronectina, aunque a un ritmo m&#xE1;s lento que c&#xE9;lulas de tipo salvaje. Sin embargo, las c&#xE9;lulas de Rac1-nulos se deterioraron marcadamente en la proliferaci&#xF3;n, con un defecto en la transici&#xF3;n G1 S, a pesar de que eran capaces de sobrevivir en la cultura durante m&#xE1;s de 2 semanas. Estos resultados refinar nuestro conocimiento de las funciones de Rac1, indican que la formaci&#xF3;n lamellipodia no es necesaria para la motilidad celular, y muestran que el PDGF-quimiotaxis inducida puede ocurrir en la ausencia de ambos lamellipodia y Rac1.

Rac1 nulo fibroblastos embrionarios de rat&#xF3;n son m&#xF3;viles y responder a la del factor de crecimiento derivado de plaquetas

&#x4EE5;&#x524D;&#x5BF9; Rac1 &#x7684;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E86;&#x5360;&#x4E3B;&#x5BFC;&#x5730;&#x4F4D;&#x7684;&#x6D88;&#x6781;&#x6784;&#x9020;&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F1A;&#x6709;&#x975E;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x6761;&#x4EF6; Rac1 &#x7B49;&#x4F4D;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x5E94;&#x4ED4;&#x7EC6; Rac1 &#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;Rac1 &#x7F3A;&#x4E4F;&#x4E86;&#x5BF9; nonconfluent &#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x88AB;&#x62C9;&#x957F;&#x5E76;&#x6709;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684; blebbing&#xFF0C;&#x4F46;&#x6CA1;&#x6709;&#x5E72;&#x9884;&#x6216;&#x5F17;&#x5F62;&#x6210;&#x620F;&#x5267;&#x6027;&#x7684;&#x6548;&#x679C;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;Rac1 &#x7A7A;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x518D;&#x8F6C;&#x79FB;&#x4F7F;&#x7528; pseudopodia &#x6837;&#x7A81;&#x8D77;&#x4E0D;&#x5E72;&#x9884;&#xFF0C;&#x5176;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x4E00;&#x6837;&#x6709;&#x6548;&#x5730;&#x8FC1;&#x79FB;&#x5BF9;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x884D;&#x751F;&#x7684;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50; &#xFF08;PDGF&#xFF09; &#x7684;&#x6E10;&#x53D8;&#x3002;Rac1 &#x7A7A;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5173;&#x95ED;&#x867D;&#x7136;&#x901F;&#x5EA6;&#x6162;&#x6BD4;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F53;&#x5916;&#x548C;&#x5206;&#x6563;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x8FDE;&#x63A5;&#x86CB;&#x767D;&#x886C;&#x5E95;&#x4E0A;&#x7684;&#x4F24;&#x53E3;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;Rac1 &#x7A7A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x663E;&#x8457;&#x524A;&#x5F31;&#x4E86;&#x5728;&#x6269;&#x6563;&#xFF0C;&#x7F3A;&#x635F;&#x5728; G1 S &#x8FC7;&#x6E21;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x6709;&#x80FD;&#x529B;&#x8D85;&#x8FC7; 2 wk &#x6587;&#x5316;&#x4E2D;&#x751F;&#x5B58;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x7EC6;&#x5316;&#x6211;&#x4EEC;&#x7406;&#x89E3;&#x7684; Rac1 &#x7684;&#x804C;&#x80FD;&#x3001; &#x6307;&#x793A;&#x5E72;&#x9884;&#x5F62;&#x6210;&#x4E0D;&#x9700;&#x8981;&#x52A8;&#x529B;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x5E76;&#x663E;&#x793A;&#x8BE5;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x884D;&#x751F;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x8D8B;&#x5316;&#x6027;&#x53EF;&#x4EE5;&#x53D1;&#x751F;&#x5728;&#x6CA1;&#x6709;&#x5E72;&#x9884;&#x548C; Rac1&#x3002;

Rac1 null &#x5C0F;&#x9F20;&#x80DA;&#x80CE;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x80FD;&#x52A8;&#x6027;&#x548C;&#x54CD;&#x5E94;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x884D;&#x751F;&#x7684;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x3002;

Previous studies of Rac1 in fibroblasts have used dominant negative constructs, which may have nonspecific effects. We used a conditional Rac1 allele to critically examine Rac1 function in mouse fibroblasts. Lack of Rac1 had dramatic effects on nonconfluent cells, which were elongated and had extensive blebbing, but no lamellipodia or ruffle formation. However, Rac1-null fibroblasts translocated using pseudopodia-like protrusions without lamellipodia, migrating toward a platelet-derived growth factor (PDGF) gradient as efficiently as their wild-type counterparts. Rac1-null fibroblasts closed wounds in vitro and spread on a fibronectin substrate, although at a slower rate than wild-type cells. However, Rac1-null cells were markedly impaired in proliferation, with a defect in G1 to S transition, although they were capable of surviving in culture for more than 2 wk. These results refine our understanding of the functions of Rac1, indicate that lamellipodia formation is not required for cell motility, and show that PDGF-induced chemotaxis can occur in the absence of both lamellipodia and Rac1.

Rac1-null mouse embryonic fibroblasts are motile and respond to platelet-derived growth factor.

Des &#xE9;tudes ant&#xE9;rieures de Rac1 dans les fibroblastes ont utilis&#xE9; dominantes constructions n&#xE9;gatives, qui peuvent avoir des effets non sp&#xE9;cifiques. Nous avons utilis&#xE9; un conditionnel Rac1 all&#xE8;le &#xE0; un examen critique Rac1 fonction dans des fibroblastes de souris. Manque de Rac1 eu des effets dramatiques sur les cellules nonconfluent, qui ont &#xE9;t&#xE9; allong&#xE9;s et avait bourgeonnement vaste, mais pas de formation ou de lamellipodes volant. Toutefois, Rac1-nulles fibroblastes transloqu&#xE9; &#xE0; l&#x26;#39;aide des pseudopodes des saillies semblables sans lamellipodes, de migrer vers un facteur de croissance d&#xE9;riv&#xE9; des plaquettes (PDGF) gradient aussi efficacement que leurs homologues de type sauvage. Rac1-nulles fibroblastes ferm&#xE9;e blessures in vitro et la propagation sur un substrat de fibronectine, bien qu&#x26;#39;&#xE0; un rythme plus lent que cellules de type sauvage. Cependant, les cellules Rac1-nuls ont &#xE9;t&#xE9; grandement alt&#xE9;r&#xE9;es dans la prolif&#xE9;ration, &#xE0; un d&#xE9;faut de G1 &#xE0; la transition S, m&#xEA;me si elles &#xE9;taient capables de survivre dans la culture pendant plus de 2 sem. Ces r&#xE9;sultats affiner notre compr&#xE9;hension des fonctions de Rac1, indiquent que la formation de lamellipodes n&#x26;#39;est pas n&#xE9;cessaire pour la motilit&#xE9; cellulaire, et de montrer que le PDGF-induites chimiotactisme peut se produire en l&#x26;#39;absence des deux lamellipodes et Rac1.

Fibroblastes de souris Rac1-nulles embryonnaires sont mobiles et r&#xE9;pondre au facteur de croissance d&#xE9;riv&#xE9; des plaquettes

Fr&uuml;here Studien der Rac1 in Fibroblasten haben dominante negative Konstrukte, benutzt, die unspezifische Wirkungen haben k&ouml;nnen. Wir verwendeten eine bedingte Rac1-Allel, um Rac1-Funktion in Maus-Fibroblasten kritisch zu pr&uuml;fen. Mangelnde Rac1 hatte dramatische Auswirkungen auf nonconfluent Zellen, die waren l&auml;nglich und hatte umfangreiche Blebbing, aber keine Lamellipodium oder R&uuml;schen-Formation. Rac1-Null Fibroblasten transloziert jedoch mit Pseudopodien-artigen Vorspr&uuml;ngen ohne Lamellipodium, so effizient wie ihre Gegenst&uuml;cke Wildtyp gegen&uuml;ber einem Platelet-derived Growth Factor (PDGF)-Verlauf migrieren. Rac1-Null Fibroblasten geschlossen Wunden in vitro und verteilt auf einem Substrat Fibronektin, obwohl in einem langsameren Tempo als Wild-Typ-Zellen. Jedoch wurden Rac1-Null-Zellen deutlich in Vermehrung, mit einem Defekt in G1 S-&Uuml;bergang, beeintr&auml;chtigt obwohl sie &uuml;berleben in der Kultur f&uuml;r mehr als 2 wk f&auml;hig waren. Diese Ergebnisse verfeinern unser Verst&auml;ndnis der Funktionen der Rac1, anzugeben, dass Lamellipodium Formation nicht erforderlich f&uuml;r Zelle Motilit&auml;t ist und zeigen, dass die PDGF-induzierter Chemotaxis in Abwesenheit von Lamellipodium und Rac1 auftreten kann.

Rac1-Null M&auml;useembryonalen sind beweglich und reagieren auf Platelet-derived Growth Factor.

Precedenti studi di Rac1 nei fibroblasti hanno usato costrutti negativi dominante, che potrebbero avere effetti aspecifici. Abbiamo usato un allele Rac1 condizionale per esaminare criticamente Rac1 funzione nei fibroblasti del mouse. Mancanza di Rac1 ha avuto effetti drammatici sulle cellule nonconfluent, che sono stati allungati ed ha avuto vasta blebbing, ma nessuna formazione lamellipodia o increspatura. Tuttavia, nei fibroblasti Rac1 null traslocata tramite pseudopodi-come sporgenze senza lamellipodia, migrando verso un fattore di crescita derivato dalle piastrine (PDGF) gradiente efficientemente come loro controparti wild-type. Rac1 null fibroblasti chiuso le ferite in vitro e diffusione su un substrato di fibronectina, anche se ad un tasso pi&ugrave; lento di cellule wild-type. Tuttavia, cellule Rac1 null erano alterate marcatamente in proliferazione, con un difetto nella G1 per la transizione di S, anche se erano in grado di sopravvivere nella cultura per pi&ugrave; di 2 sett. Questi risultati affinare la nostra comprensione delle funzioni di Rac1, indicano che non &egrave; richiesto per la motilit&agrave; cellulare lamellipodia formazione e mostrano che chemiotassi indotta da PDGF pu&ograve; verificarsi in assenza di entrambi lamellipodia e Rac1.

Fibroblasti embrionali del mouse RAC1-null sono motili e rispondono al fattore di crescita derivato dalle piastrine.

&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;Rac1&#x306E;&#x4EE5;&#x524D;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x975E;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x306A;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x30C9;&#x30DF;&#x30CA;&#x30F3;&#x30C8;&#x30CD;&#x30AC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x69CB;&#x9020;&#x3092;&#x3001;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x6279;&#x5224;&#x7684;&#x306B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;Rac1&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6761;&#x4EF6;&#x4ED8;&#x304D;Rac1&#x306E;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002; Rac1&#x306E;&#x6B20;&#x5982;&#x306F;&#x7D30;&#x9577;&#x304F;&#x3001;&#x5E83;&#x7BC4;&#x30D6;&#x30EC;&#x30D6;&#x5F62;&#x6210;&#x3001;&#x306A;&#x3044;&#x8449;&#x72B6;&#x4EEE;&#x8DB3;&#x3084;&#x30D5;&#x30EA;&#x30EB;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x975E;&#x878D;&#x5408;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x5287;&#x7684;&#x306A;&#x52B9;&#x679C;&#x304C;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;Rac1&#x306E;null&#x3067;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x7531;&#x6765;&#x5897;&#x6B96;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF08;PDGF&#xFF09;&#x52FE;&#x914D;&#x9650;&#x200B;&#x200B;&#x308A;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306B;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;&#x79FB;&#x884C;&#x3057;&#x3001;&#x8449;&#x72B6;&#x4EEE;&#x8DB3;&#x306A;&#x3057;&#x3067;&#x507D;&#x8DB3;&#x72B6;&#x306E;&#x7A81;&#x8D77;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x79FB;&#x884C;&#x3057;&#x305F;&#x3002; Rac1&#x306E;null&#x3067;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x7D30;&#x80DE;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x9045;&#x3044;&#x901F;&#x5EA6;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x30D5;&#x30A3;&#x30D6;&#x30ED;&#x30CD;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x3001;&#x57FA;&#x677F;&#x4E0A;&#x306B;in vitro&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x666E;&#x53CA;&#x306B;&#x50B7;&#x3092;&#x9589;&#x3058;&#x305F;&#x3002;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x4EE5;&#x4E0A;&#x306E;2&#x9031;&#x9593;&#x57F9;&#x990A;&#x3067;&#x751F;&#x5B58;&#x53EF;&#x80FD;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;Rac1&#x306E;null&#x3067;&#x306A;&#x3044;&#x7D30;&#x200B;&#x200B;&#x80DE;&#x304C;&#x8457;&#x3057;&#x304F;&#x3001;S&#x3078;&#x306E;&#x79FB;&#x884C;&#x306B;G1&#x3067;&#x306E;&#x6B20;&#x9665;&#x3068;&#x3001;&#x5897;&#x6B96;&#x304C;&#x640D;&#x306A;&#x308F;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;Rac1&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x306E;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7406;&#x89E3;&#x3092;&#x7D5E;&#x308A;&#x8FBC;&#x3080;&#x3053;&#x3068;&#x8449;&#x72B6;&#x4EEE;&#x8DB3;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x904B;&#x52D5;&#x6027;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3068;&#x3001;PDGF&#x8A98;&#x5C0E;&#x6027;&#x8D70;&#x5316;&#x6027;&#x306E;&#x8449;&#x72B6;&#x4EEE;&#x8DB3;&#x3068;Rac1&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x304C;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x5834;&#x5408;&#x306B;&#x767A;&#x751F;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

RAC1&#x304C;null&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x80DA;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x904B;&#x52D5;&#x6027;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x8840;&#x5C0F;&#x677F;&#x7531;&#x6765;&#x5897;&#x6B96;&#x56E0;&#x5B50;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;

&#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; rac1&#xC758; &#xC774;&#xC804; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE60; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xC9C0;&#xBC30;&#xC801;&#xC778; &#xBD80;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xAD6C;&#xBB38;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBE44;&#xD310;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; Rac1 &#xD568;&#xC218;&#xB97C; &#xAC80;&#xC0AC; &#xD558;&#xB294; &#xC870;&#xAC74;&#xBD80; Rac1 &#xB300;&#xB9BD; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Rac1 &#xBD80;&#xC871; &#xAE38;&#xCB49;&#xD55C; &#xD588;&#xB2E4; &#xACE0; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; blebbing, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC804;&#xD600; lamellipodia &#xB610;&#xB294; &#xC8FC;&#xB984; &#xD615;&#xC131; &#xD588;&#xB2E4; nonconfluent &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xADF9;&#xC801;&#xC778; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xD588;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; Rac1 null &#xAC8C;&#xC7AC; translocated lamellipodia, &#xD608;&#xC18C;&#xD310; &#xC720;&#xB798; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790; (PDGF) &#xADF8;&#xB77C;&#xB370;&#xC774;&#xC158; &#xD5A5;&#xD574; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xB4E4; &#xCC98;&#xB7FC; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xACE0; pseudopodia &#xAC19;&#xC740; &#xB3CC;&#xCD9C;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;. Rac1 null &#xAC8C;&#xC7AC; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xC140; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB290;&#xB9B0; &#xC18D;&#xB3C4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBE44;&#xB85D; &#xC0C1;&#xCC98; &#xCCB4; &#xC678; &#xBC0F; fibronectin &#xAE30;&#xD310;&#xC5D0; &#xD655;&#xC0B0;&#xC744; &#xD3D0;&#xC1C4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; Rac1 null &#xC140;&#xC740; &#xD604;&#xC800; &#xD558; &#xAC8C; &#xC7A5;&#xC560; &#xD655;&#xC0B0;,&#xC774;&#xC5D0; S &#xC804;&#xD658; g 1&#xC758; &#xACB0;&#xD568;&#xC73C;&#xB85C; &#xBE44;&#xB85D; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; 2 &#xC8FC; &#xC774;&#xC0C1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBB38;&#xD654;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0B4;&#xC544;&#xB0A8;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xB294;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; rac1&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC774;&#xD574;&#xB97C; &#xC218;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; lamellipodia &#xD615;&#xC131; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131;, &#xD544;&#xC694; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0BC; PDGF &#xC720;&#xB3C4; chemotaxis &#xADF8; lamellipodia &#xBC0F; Rac1 &#xACB0;&#xD54D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Rac1 null &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBBF8; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xD558; &#xACE0; &#xD608;&#xC18C;&#xD310; &#xC720;&#xB798; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790;&#xC5D0; &#xB300;&#xC751;.

&#xC778;&#xAC04;&#xC758; Filamin A (FLNA) &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xB300;&#xB1CC; &#xD53C; &#xC9C8; &#xC2E0;&#xACBD;&#xC758; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158;&#xC744; &#xD558; &#xACE0; &#xC2EC;&#xD608; &#xAD00;&#xACC4; &#xACB0;&#xD568;&#xC744; &#xC77C;&#xC73C;&#xD0AC;. &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; Flna&#xC758; &#xC644;&#xC804; &#xD55C; &#xC190;&#xC2E4; &#xBC30;&#xC544; &#xCE58; &#xC0AC; &#xC728; &#xC2EC;, atria, &#xC720;&#xCD9C; &#xCC45;&#xC790; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xD0C8; &#xC120; &#xD608;&#xAD00; &#xD328;&#xD134;&#xD654;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC2EC;&#xAC01;&#xD55C; &#xC2EC;&#xC7A5; &#xAD6C;&#xC870;&#xC801; &#xACB0;&#xD568;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xACB0;&#xD568;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xBC0F; &#xB9CE;&#xC740; &#xC885;&#xB958;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB098;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB300;&#xC2E0;, Flna null &#xBC30;&#xC544; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD608;&#xAD00;, &#xC2EC;&#xC7A5;, &#xB1CC;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xB2E4;&#xB978; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xBE44;&#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xC0C1;&#xD53C; &#xBC0F; &#xB0B4; &#xD53C; &#xC870;&#xC9C1; &#xBC0F; &#xD0C8; &#xC120; adherens &#xC811;&#xD569;&#xC744; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC138;&#xD3EC; &#xC811;&#xD569;&#xBD80;&#xC5D0; FLNA&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xC5ED;&#xD560; FLNA &#xBCC0;&#xC774; &#xAC00;&#xC9C4; &#xD658;&#xC790;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF8; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xACB0;&#xD568;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Filamin A (FLNA)&#xB294; &#xD608;&#xAD00; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xBC0F; &#xC2EC;&#xC7A5; morphogenesis &#xC140; &#xC5F0;&#xB77D;&#xCC98; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Las mutaciones en el filamina humana A (FLNA) de genes alterar la migraci&#xF3;n neuronal de la corteza cerebral y causar defectos cardiovasculares. La p&#xE9;rdida completa de FLNA en ratones resulta en letalidad embrionaria con graves defectos card&#xED;acos estructurales en los ventr&#xED;culos, aur&#xED;culas, y tractos de salida, as&#xED; como los patrones vasculares generalizada aberrante. A pesar de estos defectos en el desarrollo generalizados, la migraci&#xF3;n y la movilidad de los muchos tipos de c&#xE9;lulas no parecen ser afectados. En su lugar, FLNA nulo embriones visualizar organizaci&#xF3;n anormal epitelial y endotelial y las uniones adherentes aberrantes en el desarrollo de los vasos sangu&#xED;neos, coraz&#xF3;n, cerebro y otros tejidos. Funciones esenciales para la FLNA en las uniones intercelulares proporcionan un mecanismo para los diversos defectos de desarrollo se observan en los pacientes con mutaciones FLNA.

Filamina A (FLNA) es necesaria para contacto c&#xE9;lula-c&#xE9;lula en el desarrollo vascular y la morfog&#xE9;nesis card&#xED;aca

&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7684;&#x7EC6;&#x4E1D;&#x86CB;&#x767D; A (FLNA) &#x57FA;&#x56E0;&#x7A81;&#x53D8;&#x5E72;&#x6270;&#x5230;&#x5927;&#x8111;&#x76AE;&#x5C42;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x8FC1;&#x79FB;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5FC3;&#x8840;&#x7BA1;&#x7F3A;&#x9677;&#x3002;Flna &#x5728;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80DA;&#x80CE;&#x81F4;&#x6B7B;&#x7387;&#x4E25;&#x91CD;&#x5FC3;&#x810F;&#x7ED3;&#x6784;&#x7F3A;&#x9677;&#x6D89;&#x53CA;&#x5FC3;&#x5BA4;&#x3001; &#x5FC3;&#x623F;&#xFF0C;&#x548C;&#x6D41;&#x51FA;&#x5927;&#x7247;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x666E;&#x904D;&#x5B58;&#x5728;&#x5F02;&#x5E38;&#x8840;&#x7BA1;&#x9635;&#x5217;&#x5728;&#x7ED3;&#x679C;&#x4E2D;&#x7684;&#x5B8C;&#x5168;&#x4E27;&#x5931;&#x3002;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x666E;&#x904D;&#x7684;&#x53D1;&#x80B2;&#x7F3A;&#x9677;&#xFF0C;&#x8FC1;&#x79FB;&#x548C;&#x52A8;&#x529B;&#x8BB8;&#x591A;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5E76;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x53D7;&#x5230;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x76F8;&#x53CD;&#xFF0C;Flna null &#x80DA;&#x80CE;&#x663E;&#x793A;&#x4E0D;&#x6B63;&#x5E38;&#x7684;&#x4E0A;&#x76AE;&#x548C;&#x8840;&#x7BA1;&#x5185;&#x76AE;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x548C;&#x591A;&#x5F62;&#x6838;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5F02;&#x5E38;&#x5BFC;&#x81F4;&#x8DEF;&#x53E3;&#x5F00;&#x53D1;&#x8840;&#x7BA1;&#x3001; &#x5FC3;&#x810F;&#x3001; &#x5927;&#x8111;&#x3001; &#x548C;&#x5176;&#x4ED6;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x3002;FLNA &#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x7ED3;&#x4E2D;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#x63D0;&#x4F9B; FLNA &#x7A81;&#x53D8;&#x60A3;&#x8005;&#x770B;&#x5230;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x53D1;&#x80B2;&#x7F3A;&#x9677;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x3002;

&#x7EC6;&#x4E1D;&#x86CB;&#x767D; A (FLNA) &#x662F;&#x5FC5;&#x9700;&#x7684;&#x8840;&#x7BA1;&#x53D1;&#x80B2;&#x53CA;&#x5FC3;&#x810F;&#x5F62;&#x6001;&#x5EFA;&#x6210;&#x4E2D;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x8054;&#x7CFB;&#x4EBA;&#x3002;

Mutations in the human Filamin A (FLNA) gene disrupt neuronal migration to the cerebral cortex and cause cardiovascular defects. Complete loss of Flna in mice results in embryonic lethality with severe cardiac structural defects involving ventricles, atria, and outflow tracts, as well as widespread aberrant vascular patterning. Despite these widespread developmental defects, migration and motility of many cell types does not appear to be affected. Instead, Flna-null embryos display abnormal epithelial and endothelial organization and aberrant adherens junctions in developing blood vessels, heart, brain, and other tissues. Essential roles for FLNA in intercellular junctions provide a mechanism for the diverse developmental defects seen in patients with FLNA mutations.

Filamin A (FLNA) is required for cell-cell contact in vascular development and cardiac morphogenesis.

Des mutations dans le filamine A humaine (FLNA) g&#xE8;ne perturbent la migration neuronale dans le cortex c&#xE9;r&#xE9;bral et causer des malformations cardiovasculaires. Perte compl&#xE8;te de la FLNA dans les r&#xE9;sultats de souris dans une l&#xE9;talit&#xE9; embryonnaire avec de graves d&#xE9;fauts structurels cardiaques impliquant ventricules, les oreillettes, et des voies d&#x26;#39;&#xE9;coulement, ainsi que r&#xE9;pandue motifs aberrants vasculaire. En d&#xE9;pit de ces d&#xE9;fauts g&#xE9;n&#xE9;ralis&#xE9;s de d&#xE9;veloppement, la migration et la mobilit&#xE9; de nombreux types cellulaires ne semble pas &#xEA;tre affect&#xE9;e. Au lieu de cela, FLNA nulles embryons affichage anormal organisation &#xE9;pith&#xE9;liales et endoth&#xE9;liales et aberrants jonctions adh&#xE9;rentes dans le d&#xE9;veloppement de vaisseaux sanguins, le c&#x153;ur, le cerveau, et d&#x26;#39;autres tissus. R&#xF4;les essentiels pour FLNA dans les jonctions intercellulaires fournir un m&#xE9;canisme pour les d&#xE9;fauts divers de d&#xE9;veloppement observ&#xE9;s chez les patients pr&#xE9;sentant des mutations FLNA.

Filamine A (FLNA) est requis pour contact cellule-cellule dans le d&#xE9;veloppement vasculaire et cardiaque Morphogen&#xE8;se

Mutationen im menschlichen gen Filamin A (FLNA) st&ouml;ren neuronale Migration in der Hirnrinde und Herz-Kreislauf-Defekte verursachen. Vollst&auml;ndiger Verlust der Flna bei M&auml;usen f&uuml;hrt zu embryonalen T&ouml;dlichkeit mit schweren strukturellen Herzfehler, die Ventrikel, Atrien, sowie Abfluss Traktate und weit verbreitete aberrant Musterung vaskul&auml;re. Trotz dieser weit verbreiteten Entwicklungsst&ouml;rungen M&auml;ngel erscheint Migration und Motilit&auml;t von vielen Zelltypen nicht betroffen sein. Stattdessen zeigen Flna-Null Embryonen St&ouml;rung epitheliale und endothelial Organisation und aberrante Adherens Junctions Blutgef&auml;&szlig;e, Herz, Gehirn und anderen Geweben zu entwickeln. Wesentliche Rollen f&uuml;r FLNA im interzellul&auml;ren Verbindungen bieten einen Mechanismus f&uuml;r diverse Entwicklungsst&ouml;rungen M&auml;ngel bei Patienten mit FLNA Mutationen gesehen.

Filamin A (FLNA) ist erforderlich f&uuml;r Zell-Zell-Kontakt in vaskul&auml;re Entwicklung und kardiale Morphogenese.

Le mutazioni del gene umano della filamina A (FLNA) interrompere migrazione neuronale della corteccia cerebrale e causano difetti cardiovascolari. Perdita completa di Flna nei topi provoca letalit&agrave; embrionale con gravi difetti strutturali cardiaci che coinvolgono i ventricoli, atri e tratti di efflusso, cos&igrave; come diffusa patterning vascolari aberranti. Nonostante questi difetti dello sviluppo diffusi, migrazione e motilit&agrave; dei molti tipi di cellule non sembrano essere influenzati. Invece, gli embrioni Flna-null visualizzare organizzazione epiteliali ed endoteliali anormale e giunzioni adherens aberrante nello sviluppo di vasi sanguigni, cuore, cervello e altri tessuti. Ruoli essenziali per FLNA in giunzioni intercellulari forniscono un meccanismo per i diversi difetti di sviluppo visto in pazienti con mutazioni FLNA.

Filamina A (FLNA) &egrave; richiesto per contatto cellula-cellula in sviluppo vascolare e morfogenesi cardiaca.

&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x30D5;&#x30A3;&#x30E9;&#x30DF;&#x30F3;A&#xFF08;FL&#x200B;&#x200B;NA&#xFF09;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x306F;&#x3001;&#x5927;&#x8133;&#x76AE;&#x8CEA;&#x306B;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x3078;&#x306E;&#x79FB;&#x884C;&#x3092;&#x6DF7;&#x4E71;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3068;&#x5FC3;&#x8840;&#x7BA1;&#x7570;&#x5E38;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3059;&#x3002;&#x5FC3;&#x5BA4;&#x3001;&#x5FC3;&#x623F;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6D41;&#x51FA;&#x7BA1;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x3001;&#x5E83;&#x7BC4;&#x56F2;&#x306B;&#x7570;&#x5E38;&#x306A;&#x8840;&#x7BA1;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x4F34;&#x3046;&#x91CD;&#x7BE4;&#x306A;&#x5FC3;&#x81D3;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x7684;&#x6B20;&#x9665;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x80DA;&#x6027;&#x81F4;&#x6B7B;&#x3067;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3067;Flna&#x306E;&#x5B8C;&#x5168;&#x306A;&#x55AA;&#x5931;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5E83;&#x7BC4;&#x306A;&#x767A;&#x9054;&#x969C;&#x5BB3;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x578B;&#x3078;&#x306E;&#x79FB;&#x884C;&#x3068;&#x904B;&#x52D5;&#x6027;&#x304C;&#x5F71;&#x97FF;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x4EE3;&#x308F;&#x308A;&#x306B;&#x3001;Flna null&#x3067;&#x80DA;&#x306F;&#x7570;&#x5E38;&#x306A;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x5185;&#x76AE;&#x7D44;&#x7E54;&#x3084;&#x8840;&#x7BA1;&#x3001;&#x5FC3;&#x81D3;&#x3001;&#x8133;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x4ED6;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306B;&#x7570;&#x5E38;&#x306A;&#x63A5;&#x7740;&#x7D50;&#x5408;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x63A5;&#x5408;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;FLNA&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x306F;FLNA&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x60A3;&#x8005;&#x306B;&#x898B;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x591A;&#x69D8;&#x306A;&#x767A;&#x9054;&#x969C;&#x5BB3;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30D5;&#x30A3;&#x30E9;&#x30DF;&#x30F3;A&#x306F;&#xFF08;FLNA&#xFF09;&#x8840;&#x7BA1;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5FC3;&#x81D3;&#x5F62;&#x614B;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE; - &#x7D30;&#x80DE;&#x63A5;&#x89E6;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;

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&#x539F;&#x4E1D;&#x86CB;&#x767D;&#x662F;&#x5FC5;&#x4E0D;&#x53EF;&#x5C11;&#x7684;&#x63D0;&#x793A;&#x5728; moss &#x4E2D;&#x7684;&#x589E;&#x957F;&#x7ACB;&#x7897;&#x85D3;&#x3002;

The actin cytoskeleton is critical for tip growth in plants. Profilin is the main monomer actin binding protein in plant cells. The moss Physcomitrella patens has three profilin genes, which are monophyletic, suggesting a single ancestor for plant profilins. Here, we used RNA interference (RNAi) to determine the loss-of-function phenotype of profilin. Reduction of profilin leads to a complete loss of tip growth and a partial inhibition of cell division, resulting in plants with small rounded cells and fewer cells. We silenced all profilins by targeting their 3' untranslated region sequences, enabling complementation analyses by expression of profilin coding sequences. We show that any moss or a lily (Lilium longiflorum) profilin support tip growth. Profilin with a mutation in its actin binding site is unable to rescue profilin RNAi, while a mutation in the poly-l-proline binding site weakly rescues. We show that moss tip growing cells contain a prominent subapical cortical F-actin structure composed of parallel actin cables. Cells lacking profilin lose this structure; instead, their F-actin is disorganized and forms polarized cortical patches. Plants expressing the actin and poly-l-proline binding mutants exhibited similar F-actin disorganization. These results demonstrate that profilin and its binding to actin are essential for tip growth. Additionally, profilin is not needed for formation of F-actin, but profilin and its interactions with actin and poly-l-proline ligands are required to properly organize F-actin.

Profilin is essential for tip growth in the moss Physcomitrella patens.

Le cytosquelette d&#x26;#39;actine est essentielle pour la croissance dans les usines de pointe. La profiline est la prot&#xE9;ine monom&#xE8;re principal actine dans les cellules v&#xE9;g&#xE9;tales. La mousse Physcomitrella patens a trois g&#xE8;nes profiline, qui sont monophyl&#xE9;tiques, ce qui sugg&#xE8;re un anc&#xEA;tre unique pour profilines v&#xE9;g&#xE9;tales. Ici, nous avons utilis&#xE9; l&#x26;#39;interf&#xE9;rence ARN (ARNi) pour d&#xE9;terminer le ph&#xE9;notype de perte de fonction de profiline. R&#xE9;duction de la profiline conduit &#xE0; une perte compl&#xE8;te de la croissance apicale et une inhibition partielle de la division cellulaire, ce qui entra&#xEE;ne des plantes avec de petites cellules arrondies et moins de cellules. Nous taire tous les profilines en ciblant des s&#xE9;quences de leur r&#xE9;gion 3 &#x26;#39;non traduites, ce qui permet des analyses de compl&#xE9;mentation par l&#x26;#39;expression de s&#xE9;quences codantes profiline. Nous montrons que toute la mousse ou une fleur de lys (Lilium longiflorum) la croissance profiline pointe soutien. Profiline avec une mutation dans son site de liaison d&#x26;#39;actine est incapable de r&#xE9;cup&#xE9;rer la profiline ARNi, tandis une mutation dans le site de poly-L-proline liaison sauvetage faiblement. Nous montrons que les cellules pointe mousse croissance contiennent un &#xE9;minent subapicale corticale F-actine structure compos&#xE9;e de c&#xE2;bles d&#x26;#39;actine parall&#xE8;les. Cellules manque profiline perdre cette structure, mais plut&#xF4;t de leur F-actine est d&#xE9;sorganis&#xE9; et les formes polaris&#xE9;es patchs corticales. Les plantes exprimant l&#x26;#39;actine et la poly-L-proline mutants contraignantes expos&#xE9; similaire F-actine d&#xE9;sorganisation. Ces r&#xE9;sultats d&#xE9;montrent que la profiline et sa liaison &#xE0; l&#x26;#39;actine sont essentiels pour la croissance apicale. En outre, la profiline n&#x26;#39;est pas n&#xE9;cessaire pour la formation de F-actine, mais profiline et ses interactions avec l&#x26;#39;actine et la poly-L-proline ligands sont n&#xE9;cessaires pour organiser correctement la F-actine.

La profiline est essentielle pour la croissance dans le Conseil patens Moss Physcomitrella

Das Aktin-Zytoskelett ist kritisch f&uuml;r Tipp Wachstum der Pflanzen. Profilin ist die wichtigste Monomer Aktin verbindliches Protein in Pflanzenzellen. Das Moos Physcomitrella Patens hat drei profilin Gene, die monophyletische, was auf einen einzigen Vorfahren f&uuml;r Pflanzen Profilins sind. Hier haben wir RNA-Interferenz (RNAi) verwendet, um zu bestimmen, der Verlust der Funktion-Ph&auml;notyp von profilin. Reduzierung von profilin f&uuml;hrt zu einem v&ouml;lligen Verlust von Tipp-Wachstum und einen partiellen Hemmung der Zellteilung, was zu Pflanzen mit kleinen abgerundeten Zellen und weniger Zellen. Wir zum Schweigen gebracht alle Profilins durch ihre 3&#39; nicht &uuml;bersetzte Region Sequenzen, gezielte Erg&auml;nzung Analysen durch Ausdruck von profilin Codierung Sequenzen aktivieren. Wir zeigen, dass jeder Moos oder eine Lilie (Lilie) profilin Unterst&uuml;tzung Tipp Wachstum. Profilin mit einer Mutation in den Aktin-Bindungsstelle kann nicht retten, profilin RNAi, w&auml;hrend eine Mutation in der Poly-l-Prolin Bindung Website schwach rettet. Wir zeigen, dass Moos Tipp wachsenden Zellen eine prominente retroflexer kortikale F-Actin Struktur setzt sich aus parallelen Aktin-Kabel enthalten. Zellen fehlt profilin verlieren diese Struktur; stattdessen ihre F-Actin ist unorganisiert und polarisierte kortikale Flecken bildet. Pflanzen, die Ausdruck der Aktin und Poly-l-Prolin Bindung Mutanten ausgestellt &auml;hnlich F-Actin Desorganisation. Diese Ergebnisse zeigen, dass profilin und seine Bindung an Aktin f&uuml;r Tipp-Wachstum notwendig sind. Dar&uuml;ber hinaus profilin ist nicht erforderlich f&uuml;r die Bildung von F-Actin, aber profilin und seine Interaktionen mit Aktin und Poly-l-Prolin-Liganden sind erforderlich, F-Actin richtig zu organisieren.

Profilin ist essentiell f&uuml;r Tipp Wachstum in das Moos Physcomitrella Patens.

Il citoscheletro di actina &egrave; fondamentale per la crescita di punta nelle piante. La profilina &egrave; il monomero principale actin binding protein in cellule vegetali. Il muschio Physcomitrella patens ha tre geni profilin, che sono monofiletici, suggerendo un singolo antenato per impianto profilins. Qui, abbiamo usato interferenza del RNA (RNAi) per determinare il fenotipo della perdita di funzione di profilina. Riduzione di profilina conduce ad una perdita completa della crescita di punta e una parziale inibizione della divisione cellulare, con conseguente piante con piccole cellule arrotondate e poche cellule. Noi tacere tutti profilins designando loro non tradotta 3&#39; sequenze di regione, consentendo analisi complementazione dall&#39;espressione di profilina sequenze di codificazione. Mostriamo che qualsiasi muschio o un giglio (Lilium longiflorum) profilina supporto punta crescita. Profilina con una mutazione nel suo sito di legame dell&#39;actina &egrave; in grado di salvare la profilina RNAi, mentre una mutazione del poly-l-prolina binding sito debolmente salvataggi. Mostriamo che moss punta crescente cellule contengono una prominente subapicale corticale F-actina struttura composta di cavi paralleli di actina. Cellule manca profilina perdono questa struttura; invece, loro F-actina &egrave; disorganizzato e forma polarizzata patch corticale. Piante che esprimono l&#39;actina e mutanti poly-l-prolina associazione esposto simile disorganizzazione di F-actina. Questi risultati dimostrano che la profilina e relativa associazione actina sono essenziali per la crescita di punta. Inoltre, la profilina non &egrave; necessaria per la formazione di F-actina, ma profilina e sue interazioni con leganti actina e poly-l-prolina sono tenuti ad organizzare correttamente-F-actina.

La profilina &egrave; essenziale per il suggerimento la crescita del muschio Physcomitrella patens.

&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x306F;&#x3001;&#x690D;&#x7269;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5148;&#x7AEF;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A3;&#x306F;&#x3001;&#x690D;&#x7269;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x30E2;&#x30CE;&#x30DE;&#x30FC;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D50;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x82D4;&#x30D2;&#x30E1;&#x30C4;&#x30EA;&#x30AC;&#x30CD;&#x30B4;&#x30B1;&#x306F;&#x690D;&#x7269;profilins&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x7956;&#x5148;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3001;&#x5358;&#x7CFB;&#x7D71;&#x3067;&#x3042;&#x308B;3&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A3;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A3;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x55AA;&#x5931;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;RNA&#x5E72;&#x6E09;&#xFF08;RNAi&#xFF09;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A3;&#x306E;&#x524A;&#x6E1B;&#x306F;&#x3001;&#x5C0F;&#x3055;&#x306A;&#x4E38;&#x3044;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x5C11;&#x306A;&#x3044;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x690D;&#x7269;&#x3067;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3001;&#x5148;&#x7AEF;&#x6210;&#x9577;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x5206;&#x88C2;&#x306E;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306A;&#x963B;&#x5BB3;&#x306E;&#x5B8C;&#x5168;&#x306A;&#x55AA;&#x5931;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A3;&#x306E;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x914D;&#x5217;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x76F8;&#x88DC;&#x6027;&#x89E3;&#x6790;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;3 &#x26;#39;&#x975E;&#x7FFB;&#x8A33;&#x9818;&#x57DF;&#x914D;&#x5217;&#x3092;&#x6A19;&#x7684;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;profilins&#x3092;&#x9ED9;&#x3089;&#x305B;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x4EFB;&#x610F;&#x306E;&#x82D4;&#x3084;&#x30E6;&#x30EA;&#xFF08;&#x30C6;&#x30C3;&#x30DD;&#x30A6;&#x30E6;&#x30EA;&#xFF09;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A3;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x5148;&#x7AEF;&#x6210;&#x9577;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x30DD;&#x30EA;-L-&#x30D7;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x7D50;&#x5408;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306B;&#x5909;&#x7570;&#x304C;&#x5F31;&#x304F;&#x6551;&#x52A9;&#x306A;&#x304C;&#x3089;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D50;&#x5408;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306B;&#x5909;&#x7570;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A3;&#x306F;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A3;RNAi&#x3092;&#x6551;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30B3;&#x30B1;&#x306E;&#x5148;&#x7AEF;&#x6210;&#x9577;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x4E26;&#x5217;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30B1;&#x30FC;&#x30D6;&#x30EB;&#x304B;&#x3089;&#x69CB;&#x6210;&#x8457;&#x540D;&#x306A;apex&#x306E;&#x4E0B;&#x306B;&#x3042;&#x308B;&#x76AE;&#x8CEA;&#x306E;F-&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A3;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x3092;&#x5931;&#x3044;&#x6B20;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x306E;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;F-&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x304C;&#x89E3;&#x4F53;&#x3057;&#x3001;&#x504F;&#x5149;&#x76AE;&#x8CEA;&#x306E;&#x30D1;&#x30C3;&#x30C1;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x3068;&#x30DD;&#x30EA;-L-&#x30D7;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x7D50;&#x5408;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x690D;&#x7269;&#x306F;&#x3001;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;F-&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x89E3;&#x4F53;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A3;&#x3068;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x3078;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x306F;&#x3001;&#x5148;&#x7AEF;&#x6210;&#x9577;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A3;&#x306F;&#x3001;F-&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x304C;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A3;&#x3068;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x3068;&#x30DD;&#x30EA;-L-&#x30D7;&#x30ED;&#x30EA;&#x30F3;&#x306E;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x304C;&#x9069;&#x5207;&#x306B;F-&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x3092;&#x6574;&#x7406;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A3;&#x30E2;&#x30B9;&#x30D2;&#x30E1;&#x30C4;&#x30EA;&#x30AC;&#x30CD;&#x30B4;&#x30B1;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5148;&#x7AEF;&#x6210;&#x9577;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3042;&#x308B;

&#xB9D0;&#xB77C; cytoskeleton &#xD301; &#xC131;&#xC7A5; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD558;&#xB2E4;. Profilin &#xC2DD;&#xBB3C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xAE30;&#xBCF8; &#xB2E8;&#xC704;&#xCCB4; &#xB9D0;&#xB77C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC774;&#xB2E4;. &#xBAA8;&#xC2A4; Physcomitrella patens 3 profilin &#xC720;&#xC804;&#xC790; monophyletic &#xACF5;&#xC7A5; profilins&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB2E8;&#xC77C; &#xC0C1;&#xC704; &#xD56D;&#xBAA9;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, RNA &#xAC04;&#xC12D; (RNAi) &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; profilin&#xC758; &#xC190;&#xC2E4;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC758; &#xD45C;&#xD604; &#xD615;&#xC744; &#xACB0;&#xC815; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Profilin&#xC758; &#xAC10;&#xC18C; &#xD301; &#xC131;&#xC7A5;&#xC758; &#xC644;&#xC804; &#xD55C; &#xC190;&#xC2E4; &#xBC0F; &#xBD80;&#xBD84; &#xC791;&#xC740; &#xB465;&#xADFC;&#xB41C; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC0F; &#xC801;&#xC740; &#xC140; &#xACF5;&#xC7A5;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD84;&#xC5F4; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC5D0; &#xC774;&#xB974;&#xAC8C;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; 3&#39; untranslated &#xC9C0;&#xC5ED; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xB97C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xD558; &#xC5EC; &#xBCF4;&#xC644;&#xC131; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xAC00;&#xB2A5; &#xD558; &#xAC8C; &#xCF54;&#xB529; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; profilin&#xC758; &#xC2DD;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBAA8;&#xB4E0; profilins &#xCE68;&#xBB35;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC5B4;&#xB5A4; &#xD45C;&#xC2DC; &#xC774;&#xB07C; &#xB610;&#xB294; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xD301; &#xC131;&#xC7A5; profilin &#xB9B4;&#xB9AC; (Lilium longiflorum). &#xB9D0;&#xB77C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xD568;&#xAED8; profilin &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xC740; RNAi, &#xD3F4; &#xB9AC;-l-&#xD504;&#xB864;&#xB9B0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xC57D;&#xD558;&#xAC8C; &#xAD6C;&#xCD9C;&#xC5D0; &#xBCC0;&#xC774; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; profilin&#xB97C; &#xAD6C;&#xCD9C; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xBAA8;&#xC2A4; &#xD301; &#xC131;&#xC7A5; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; &#xC800;&#xBA85;&#xD55C; subapical &#xB300;&#xB1CC; &#xD53C; &#xC9C8;&#xC758; F &#xB9D0;&#xB77C; &#xAD6C;&#xC870; &#xBCD1;&#xB82C; &#xB9D0;&#xB77C; &#xCF00;&#xC774;&#xBE14;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131;&#xB41C; &#xD3EC;&#xD568; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. Profilin &#xBD80;&#xC871; &#xC140; &#xC190;&#xC2E4;&#xC774; &#xAD6C;&#xC870;; &#xB300;&#xC2E0;, &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; F-&#xB9D0;&#xB77C;&#xB294; &#xBB34;&#xC9C8;&#xC11C;&#xC640; &#xD3B8;&#xAD11;&#xB41C; &#xB300;&#xB1CC; &#xD53C; &#xC9C8;&#xC758; &#xD328;&#xCE58;&#xB97C; &#xD615;&#xC131;. &#xD45C;&#xD604; &#xB9D0;&#xB77C;&#xC640; &#xD3F4; &#xB9AC;-l-&#xD504;&#xB864;&#xB9B0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; &#xC2DD;&#xBB3C; &#xC804;&#xC2DC; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; F &#xB9D0;&#xB77C; &#xD574;&#xCCB4;. &#xC774; &#xACB0;&#xACFC; &#xB9D0;&#xB77C; &#xD558;&#xB294; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xBC0F; profilin&#xB294; &#xD301; &#xC131;&#xC7A5;&#xC5D0; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, F-&#xB9D0;&#xB77C;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; profilin&#xC758; &#xD615;&#xC131;&#xC5D0;&#xB294; profilin &#xD544;&#xC694; &#xD558;&#xC9C0; &#xD558; &#xACE0; &#xB9D0;&#xB77C;&#xC640; &#xD3F4; &#xB9AC;-l-&#xD504;&#xB864;&#xB9B0; ligands&#xC640;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC740; &#xC81C;&#xB300;&#xB85C; F &#xB9D0;&#xB77C;&#xB97C; &#xAD6C;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xD544;&#xC694;&#xD55C;.

Profilin&#xB294; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xD301; &#xC131;&#xC7A5; &#xC774;&#xB07C;&#xC5D0; Physcomitrella patens.

El citoesqueleto de actina es fundamental para el crecimiento de la punta en las plantas. Profilin es la prote&#xED;na principal mon&#xF3;mero actina uni&#xF3;n en las c&#xE9;lulas vegetales. El musgo Physcomitrella patens tiene tres genes PROFILIN, que son monofil&#xE9;tico, lo que sugiere un ancestro &#xFA;nico para profilinas de la planta. En este caso, se utiliz&#xF3; el ARN de interferencia (RNAi) para determinar el fenotipo de p&#xE9;rdida de funci&#xF3;n de la profilina. Reducci&#xF3;n de profilina conduce a una p&#xE9;rdida completa de crecimiento punta y una inhibici&#xF3;n parcial de la divisi&#xF3;n celular, dando lugar a plantas con peque&#xF1;as c&#xE9;lulas redondeadas y menos c&#xE9;lulas. Hemos silenciado todas las profilinas apuntando a secuencias no traducidas de su regi&#xF3;n 3 &#x26;#39;, que permite realizar an&#xE1;lisis de complementaci&#xF3;n mediante la expresi&#xF3;n de secuencias de codificaci&#xF3;n PROFILIN. Se demuestra que cualquier musgo o un lirio (Lilium longiflorum) a apoyar el crecimiento profilina punta. Profilin con una mutaci&#xF3;n en su sitio de uni&#xF3;n actina es incapaz de rescatar profilina ARNi, mientras que una mutaci&#xF3;n en el sitio de uni&#xF3;n de poli-L-prolina d&#xE9;bilmente rescata. Se demuestra que las c&#xE9;lulas de musgo punta de crecimiento contienen un prominente subapical cortical F-actina estructura compuesta de cables de actina paralelos. Las c&#xE9;lulas que carecen profilina pierden esta estructura, sino que su F-actina es desorganizado y forma polarizadas parches corticales. Las plantas que expresan la actina y poli-L-prolina mutantes de uni&#xF3;n exhibieron similares F-actina desorganizaci&#xF3;n. Estos resultados demuestran que profilina y su uni&#xF3;n a la actina son esenciales para el crecimiento punta. Adem&#xE1;s, profilina no es necesario para la formaci&#xF3;n de F-actina, pero profilina y sus interacciones con la actina y ligandos poli-L-prolina tienen la obligaci&#xF3;n de organizar adecuadamente la F-actina.

Profilin es esencial para el crecimiento en el Consejo patens Moss Physcomitrella

Nous avons caract&#xE9;ris&#xE9; le r&#xF4;le de la prot&#xE9;ine tyrosine phosphatase (PTP)-alpha dans l&#x26;#39;adh&#xE9;sion focale (FA) formation et le remodelage en utilisant de type sauvage et d&#xE9;ficient (PTPalpha PTPalpha (- / -)) des cellules. Par rapport &#xE0; cellules de type sauvage, la propagation PTPalpha (- / -) des fibroblastes affich&#xE9; moins de bords d&#x26;#39;attaque et a form&#xE9; allong&#xE9;e alpha-actinine-FA enrichi &#xE0; la p&#xE9;riph&#xE9;rie de la cellule. Ces caract&#xE9;ristiques sugg&#xE8;rent la pr&#xE9;sence d&#x26;#39;adh&#xE9;rences lentement remodelage des cellules et ont &#xE9;t&#xE9; ph&#xE9;nocopies dans des fibroblastes humains dans lequel PTPalpha a &#xE9;t&#xE9; renvers&#xE9; en utilisant petit ARN interf&#xE9;rent (siRNA) ou dans des fibroblastes NIH-3T3 exprimant catalytiquement inactif (C433S/C723S) PTPalpha. Recouvrement de fluorescence apr&#xE8;s photoblanchiment montr&#xE9; plus lent fluorescence verte prot&#xE9;ines alpha-actinine de r&#xE9;cup&#xE9;ration dans la FA de PTPalpha (- / -) que cellules de type sauvage. Ces alt&#xE9;rations en corr&#xE9;lation avec la cellule r&#xE9;duite &#xE9;talement, d&#x26;#39;adh&#xE9;rence, et la polarisation et la contraction retard&#xE9;e de matrices extracellulaires dans PTPalpha (- / -) fibroblastes. L&#x26;#39;activation de Rac1 et son recrutement &#xE0; FA lors de l&#x26;#39;&#xE9;pandage ont &#xE9;t&#xE9; diminu&#xE9;es dans les cellules exprimant C433S/C723S PTPalpha. Rac1 (- / -) des cellules &#xE9;galement affich&#xE9; FA anormalement allong&#xE9;e et &#xE0; la p&#xE9;riph&#xE9;rie distribu&#xE9;e qui a &#xE9;chou&#xE9; &#xE0; remodeler. A l&#x26;#39;inverse, l&#x26;#39;expression de Rac1 constitutivement active restaur&#xE9; remodelage FA normale dans PTPalpha (- / -) des cellules. Nous concluons que PTPalpha est n&#xE9;cessaire pour le remodelage de la FA au cours &#xE9;talement cellulaire par une voie impliquant Rac1.

Tyrosine phosphatase PTPalpha R&#xE9;gule R&#xE9;novation de Focal Adhesion Gr&#xE2;ce &#xE0; Rac1 activation

&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x86CB;&#x767D;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x78F7;&#x9178;&#x9176; (PTP) &#x7684;&#x4F5C;&#x7528;-alpha &#x9ECF;&#x7740; (FA) &#x5F62;&#x6210;&#x548C;&#x91CD;&#x6784;&#x4F7F;&#x7528;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x548C; PTPalpha &#x7F3A; &#xFF08;PTPalpha(-/-)) &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x4E0E;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x76F8;&#x6BD4;&#xFF0C;&#x4F20;&#x64AD; PTPalpha(-/-) &#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x663E;&#x793A;&#x8F83;&#x5C11;&#x7684;&#x524D;&#x7F18;&#x548C;&#x5F62;&#x6210;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x56F4;&#x8292;&#x5BCC; alpha actinin FA&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x529F;&#x80FD;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x6162;&#x6162;&#x91CD;&#x5851;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x8FDE;&#x7684;&#x5B58;&#x5728;&#xFF0C;&#x5728;&#x4EBA;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684; PTPalpha &#x88AB;&#x649E;&#x5012;&#x4E86;&#x4F7F;&#x7528;&#x77ED;&#x5E72;&#x6270; RNA (siRNA) &#x6216;&#x5728; NIH 3T3 &#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x8FBE;&#x50AC;&#x5316;&#x5904;&#x4E8E;&#x975E;&#x6D3B;&#x52A8;&#x72B6;&#x6001; &#xFF08;C433S/C723S&#xFF09; PTPalpha phenocopied&#x3002;&#x8367;&#x5149;&#x6062;&#x590D;&#x540E;&#x5149;&#x6F02;&#x767D; PTPalpha(-/-) FA &#x6BD4;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x53D1;&#x73B0;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;-&alpha;-actinin &#x590D;&#x82CF;&#x8F83;&#x6162;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6539;&#x52A8;&#x4E0E;&#x76F8;&#x5173;&#x51CF;&#x5C11;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F20;&#x64AD;&#x3001; &#x9644;&#x7740;&#x529B;&#x548C;&#x6781;&#x5316;&#x548C;&#x8FDF;&#x949D;&#x7684; PTPalpha(-/-) &#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x57FA;&#x8D28;&#x7684;&#x6536;&#x7F29;&#x3002;Rac1 &#x7684;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x548C;&#x5176;&#x62DB;&#x52DF; FA &#x671F;&#x95F4;&#x8513;&#x5EF6;&#x800C;&#x51CF;&#x5F31;&#x8868;&#x793A; C433S/C723S PTPalpha &#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E2D;&#x3002;Rac1(-/-) &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E5F;&#x4F1A;&#x663E;&#x793A;&#x4E0D;&#x6B63;&#x5E38;&#x62C9;&#x957F;&#x548C;&#x9759;&#x8109;&#x5206;&#x5E03;&#x5F0F;&#x672A;&#x80FD;&#x91CD;&#x5851;&#x7684; FA&#x3002;&#x76F8;&#x53CD;&#xFF0C;&#x4E00;&#x79EF;&#x6781; Rac1 &#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x8FD8;&#x539F; FA &#x91CD;&#x5851; PTPalpha(-/-) &#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x6B63;&#x5E38;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F97;&#x51FA;&#x7ED3;&#x8BBA;&#xFF1A; PTPalpha &#x9700;&#x8981;&#x91CD;&#x6784;&#x7684; FA &#x671F;&#x95F4;&#x8513;&#x5EF6;&#x7684;&#x9014;&#x5F84;&#xFF0C;&#x6D89;&#x53CA;&#x5230; Rac1 &#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;

&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x78F7;&#x9178;&#x9176; PTPalpha &#x89C4;&#x7BA1;&#x7C98;&#x7740;&#x91CD;&#x5851;&#x901A;&#x8FC7; Rac1 &#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;

We characterized the role of protein tyrosine phosphatase (PTP)-alpha in focal adhesion (FA) formation and remodeling using wild-type and PTPalpha-deficient (PTPalpha(-/-)) cells. Compared with wild-type cells, spreading PTPalpha(-/-) fibroblasts displayed fewer leading edges and formed elongated alpha-actinin-enriched FA at the cell periphery. These features suggest the presence of slowly remodeling cell adhesions and were phenocopied in human fibroblasts in which PTPalpha was knocked down using short interfering RNA (siRNA) or in NIH-3T3 fibroblasts expressing catalytically inactive (C433S/C723S) PTPalpha. Fluorescence recovery after photobleaching showed slower green fluorescence protein-alpha-actinin recovery in the FA of PTPalpha(-/-) than wild-type cells. These alterations correlated with reduced cell spreading, adhesion, and polarization and retarded contraction of extracellular matrices in PTPalpha(-/-) fibroblasts. Activation of Rac1 and its recruitment to FA during spreading were diminished in cells expressing C433S/C723S PTPalpha. Rac1(-/-) cells also displayed abnormally elongated and peripherally distributed FA that failed to remodel. Conversely, expression of constitutively active Rac1 restored normal FA remodeling in PTPalpha(-/-) cells. We conclude that PTPalpha is required for remodeling of FA during cell spreading via a pathway involving Rac1.

Tyrosine phosphatase PTPalpha regulates focal adhesion remodeling through Rac1 activation.

Wir zeichnen sich die Rolle der Protein-Tyrosin-Phosphatase (PTP)-alpha in fokale Adh&auml;sion (FA) Bildung und Umbau mit Wildtyp und PTPalpha-Mangel (PTPalpha(-/-))-Zellen. Im Vergleich zu Wildtyp Zellen, Verbreitung PTPalpha(-/-) Fibroblasten angezeigt weniger Vorderkanten und l&auml;ngliche Alpha-Actinin angereicherten FA an der Peripherie der Zelle gebildet. Diese Features vorschlagen das Vorhandensein von langsam Umbau Zelle Adh&auml;sionen und waren phenocopied in menschlichen Fibroblasten, in denen PTPalpha abgerissen wurde mit kurzen interfering RNA (SiRNA) oder NIH-3T3 Fibroblasten katalytisch inaktiv (C433S/C723S) PTPalpha zum Ausdruck zu bringen. Fluoreszenz-Wiederherstellung nach Photobleaching langsamer gr&uuml;ne Fluoreszenz-Protein-Alpha-Actinin-Erholung in den FA PTPalpha(-/-) als Wildtyp Zellen zeigte. Diese Ver&auml;nderungen korreliert mit Zelle verbreiten, Adh&auml;sion und Polarisation und Kontraktion der extrazellularen Matrizen in PTPalpha(-/-) Fibroblasten gehemmt. Aktivierung der Rac1 und seine Einstellung zu FA w&auml;hrend der Ausbreitung wurden abgenommen, in Zellen, die C433S/C723S PTPalpha zum Ausdruck zu bringen. Rac1(-/-) Zellen auch ungew&ouml;hnlich angezeigt l&auml;nglich und am Rande verteilt FA, die nicht umgestalten. Umgekehrt wiederhergestellt Ausdruck der konstitutiv aktive Rac1 normalen FA Umbau in PTPalpha(-/-) Zellen. Wir schlie&szlig;en, dass PTPalpha f&uuml;r Umbau des FA w&auml;hrend Zelle verbreitet sich &uuml;ber einen Weg mit Rac1 erforderlich ist.

Tyrosin-Phosphatase PTPalpha regelt die fokale Adh&auml;sion Umbau durch Rac1-Aktivierung.

Abbiamo caratterizzato il ruolo di proteina tirosina fosfatasi (PTP)-Alfa nella formazione di aderenze focale (FA) e rimodellamento con selvaggio-tipo e deficit di PTPalpha (cellule PTPalpha(-/-)). Confrontato con selvaggio-tipo celle, diffusione PTPalpha(-/-) fibroblasti visualizzato meno bordi e forma allungata FA alfa-actinina-arricchito alla periferia delle cellule. Queste caratteristiche suggeriscono la presenza di rimodellamento lentamente aderenze cella e sono stati phenocopied in fibroblasti umani in cui PTPalpha fu abbattuto mediante short interfering RNA (siRNA) o nei fibroblasti NIH 3T3 esprimendo cataliticamente inattivo (C433S/C723S) PTPalpha. Recupero di fluorescenza dopo photobleaching ha mostrato pi&ugrave; lento recupero di proteina-alfa-actinina fluorescenza verde in FA di PTPalpha(-/-) delle cellule wild-type. Queste alterazioni correlate con ridotta diffusione delle cellule, adesione e polarizzazione e ritardato la contrazione delle matrici extracellulari nei fibroblasti PTPalpha(-/-). Attivazione di Rac1 e il suo reclutamento FA durante la diffusione sono stati diminuiti in cellule che esprimono C433S/C723S PTPalpha. Rac1(-/-) cellule anche visualizzate anormalmente allungate e distribuite perifericamente FA che non &egrave; riuscito a rimodellare. Al contrario, espressione di Rac1 costitutivamente attivo ripristinato normale FA rimodellamento nelle cellule PTPalpha(-/-). Concludiamo che PTPalpha &egrave; richiesto per rimodellamento di FA durante la cella diffondere attraverso un percorso che coinvolge Rac1.

Fosfatasi tirosina PTPalpha regola adesione focale rimodellamento attraverso l&#39;attivazione di Rac1.

&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#xFF08;PTP&#xFF09;-&#x3B1;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x304A;&#x3088;&#x3073;PTPalpha&#x6B20;&#x640D;&#x3092;&#xFF08; -  /  - &#xFF09;PTPalpha&#xFF08;&#xFF09;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x63A5;&#x7740;&#x6591;&#xFF08;FA&#xFF09;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x30EA;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x62E1;&#x6563;PTPalpha&#xFF08; -  /  - &#xFF09;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x5C11;&#x306A;&#x3044;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x30A8;&#x30C3;&#x30B8;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x3001;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x5468;&#x56F2;&#x306B;&#x7D30;&#x9577;&#x3044;&#x3B1;-&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30CB;&#x30F3;&#x6FC3;&#x7E2E;FA&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306F;&#x5F90;&#x3005;&#x306B;&#x7D30;&#x80DE;&#x63A5;&#x7740;&#x3092;&#x6539;&#x9020;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3059;&#x308B;&#x3068;PTPalpha&#x304C;&#x77ED;&#x3044;&#x5E72;&#x6E09;RNA&#xFF08;siRNA&#xFF09;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x89E6;&#x5A92;&#x7684;&#x306B;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x6027;&#xFF08;C433S/C723S&#xFF09;PTPalpha&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;NIH-3T3&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30D2;&#x30C8;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;phenocopied&#x305F;&#x3002;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x7D30;&#x80DE;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#xFF08; -  /  - &#xFF09;&#x9000;&#x8272;&#x5F8C;&#x86CD;&#x5149;&#x56DE;&#x5FA9;&#x306F;PTPalpha&#x306E;FA&#x306E;&#x9045;&#x3044;&#x7DD1;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;-&#x3B1;-&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30CB;&#x30F3;&#x306E;&#x56DE;&#x5FA9;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002; &#xFF08; -  /  - &#xFF09;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x306F;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x62E1;&#x6563;&#x3001;&#x63A5;&#x7740;&#x6027;&#x3001;&#x504F;&#x5149;&#x3068;PTPalpha&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;&#x9045;&#x5EF6;&#x53CE;&#x7E2E;&#x3068;&#x76F8;&#x95A2;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x62E1;&#x6563;&#x6642;&#x306B;FA&#x306B;Rac1&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x63A1;&#x7528;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306F;C433S/C723S PTPalpha&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x305F;&#x3002; Rac1&#x306E;&#xFF08; -  /  - &#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x6539;&#x9020;&#x306B;&#x5931;&#x6557;&#x3057;&#x305F;&#x7570;&#x5E38;&#x306B;&#x7D30;&#x9577;&#x3044;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x672B;&#x68A2;&#x914D;&#x5E03;FA&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; &#xFF08; -  /  - &#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x9006;&#x306B;&#x3001;&#x69CB;&#x6210;&#x7684;&#x306B;&#x6D3B;&#x6027;&#x306A;Rac1&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;PTPalpha&#x306E;&#x901A;&#x5E38;&#x306E;FA&#x6539;&#x9020;&#x3092;&#x5FA9;&#x5143;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;PTPalpha&#x306F;Rac1&#x306E;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x200B;&#x200B;&#x308B;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x62E1;&#x6563;&#x30BB;&#x30EB;&#x4E2D;&#x306B;FA&#x306E;&#x6539;&#x9020;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x7D50;&#x8AD6;&#x4ED8;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;PTPalpha&#x306F;&#x3001;Rac1&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x63A5;&#x7740;&#x6591;&#x30EA;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;

&#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; &#xC778;&#xC0B0; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; &#xD6A8;&#xC18C; (PTP)&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD2B9;&#xC9D5;-&#xC54C;&#xD30C; &#xCD08;&#xC810; &#xC811;&#xCC29; (FA) &#xD615;&#xC131; &#xBC0F; &#xB9AC; &#xBAA8;&#xB378;&#xB9C1; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xBC0F; PTPalpha &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xC0AC;&#xC6A9; (PTPalpha(-/-)) &#xC140;. &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; &#xC140;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574;, &#xC804;&#xD30C; PTPalpha(-/-) &#xAC8C;&#xC7AC; &#xC801;&#xC740; &#xC120;&#xB450; &#xAC00;&#xC7A5;&#xC790;&#xB9AC;&#xB97C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD558; &#xACE0; &#xAE38;&#xCB49;&#xD55C; &#xC54C;&#xD30C; actinin &#xB18D;&#xCD95; FA &#xC140; &#xC8FC;&#xBCC0;&#xC5D0; &#xD615;&#xC131;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAE30;&#xB2A5; &#xCC9C;&#xCC9C;&#xD788; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xCC29; &#xAC1C;&#xC7A5;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xB97C; &#xC81C;&#xC548; &#xD558; &#xACE0; phenocopied&#xB294; Ptpalpha&#xB294; &#xB728; &#xC9E7;&#xC740; &#xAC04;&#xC12D; RNA (siRNA)&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC; &#xB610;&#xB294; NIH-3T3 &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC; (C433S/C723S) PTPalpha catalytically &#xBE44;&#xD65C;&#xC131;&#xC744; &#xD45C;&#xD604; &#xD588;&#xB2E4;. Photobleaching &#xC640;&#xC77C;&#xB4DC; &#xD615; &#xC138;&#xD3EC; &#xBCF4;&#xB2E4; PTPalpha(-/-) FA&#xC5D0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB290;&#xB9B0; &#xB179;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;-&#xC54C;&#xD30C;-actinin &#xBCF5;&#xAD6C; &#xD6C4; &#xBCF5;&#xAD6C;&#xB97C; &#xD615;&#xAD11;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xBCC0;&#xACBD; &#xC5F0;&#xAD00; &#xC140; &#xD655;&#xC0B0;, &#xC811;&#xCC29;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC591;&#xADF9; &#xD654; &#xAC10;&#xC18C; &#xD558; &#xACE0; &#xC800; &#xB2A5; &#xC544;&#xC758; PTPalpha(-/-) &#xC12C;&#xC720; &#xC544; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4;&#xC758; &#xC218;&#xCD95;. Rac1&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC640; &#xD655;&#xC0B0; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; FA&#xC758; &#xCC44;&#xC6A9; C433S/C723S Ptpalpha&#xC744; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xC140;&#xC5D0; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4;. Rac1(-/-) &#xC140;&#xB3C4; &#xBE44;&#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xAE38;&#xCB49;&#xD55C; &#xBC0F; &#xC8FC;&#xBCC0; &#xB9AC; &#xBAA8;&#xB378;&#xB9C1;&#xC744; &#xD558;&#xC9C0; &#xBABB;&#xD55C; FA&#xB97C; &#xBD84;&#xC0B0;. &#xBC18;&#xB300;&#xB85C;, constitutively &#xD65C;&#xC131; Rac1 &#xC2DD; PTPalpha(-/-) &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; FA &#xAC1C;&#xC7A5; &#xBCF5;&#xC6D0;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; PTPalpha &#xC140; Rac1 &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xD1B5;&#xB85C; &#xD1B5;&#xD574; &#xD655;&#xC0B0; &#xC911; FA&#xC758; &#xB9AC; &#xBAA8;&#xB378;&#xB9C1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC694; &#xD558;&#xB2E4;&#xB294; &#xACB0;&#xB860;.

&#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; &#xC778;&#xC0B0; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; &#xD6A8;&#xC18C; PTPalpha &#xC870;&#xC808; &#xCD08;&#xC810; &#xC811;&#xCC29; Rac1 &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xB9AC; &#xBAA8;&#xB378;&#xB9C1;.

Nos caracteriza el papel de la prote&#xED;na tirosina fosfatasa (PTP)-alfa en la adhesi&#xF3;n focal (FA), la formaci&#xF3;n y remodelaci&#xF3;n con la naturaleza y tipo PTPalpha deficientes (PTPalpha (- / -)) c&#xE9;lulas. En comparaci&#xF3;n con c&#xE9;lulas de tipo salvaje, la difusi&#xF3;n de PTPalpha (- / -) muestra un menor n&#xFA;mero de fibroblastos bordes de ataque y la forma alargada de alfa-actinina enriquecida con FA en la periferia de la c&#xE9;lula. Estas caracter&#xED;sticas sugieren la presencia de adherencias poco a poco la remodelaci&#xF3;n de la c&#xE9;lula y se phenocopied en los fibroblastos humanos en los que PTPalpha fue derribada mediante ARN corto de interferencia (siRNA) o en fibroblastos NIH-3T3 que expresan catal&#xED;ticamente inactiva (C433S/C723S) PTPalpha. Recuperaci&#xF3;n despu&#xE9;s de fluorescencia photobleaching mostr&#xF3; lento verde fluorescencia de la prote&#xED;na alfa-actinina recuperaci&#xF3;n de la FA de PTPalpha (- / -) que c&#xE9;lulas de tipo salvaje. Estas alteraciones correlacionaron con menor difusi&#xF3;n celular, la adhesi&#xF3;n, y la polarizaci&#xF3;n y la contracci&#xF3;n del retraso de las matrices extracelulares en PTPalpha (- / -) fibroblastos. La activaci&#xF3;n de Rac1 y su contrataci&#xF3;n para la FA durante la extensi&#xF3;n se encontraba disminuida en las c&#xE9;lulas que expresan C433S/C723S PTPalpha. Rac1 (- / -) de las c&#xE9;lulas tambi&#xE9;n se muestra FA anormalmente alargada y distribuidos perif&#xE9;ricamente que no se pudo remodelar. Por el contrario, la expresi&#xF3;n de Rac1 constitutivamente activa restaurado remodelaci&#xF3;n FA normal en PTPalpha (- / -) de las c&#xE9;lulas. Llegamos a la conclusi&#xF3;n de que PTPalpha se requiere para la remodelaci&#xF3;n de la FA en la propagaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas a trav&#xE9;s de una v&#xED;a que implica Rac1.

La tirosina fosfatasa PTPalpha Regula Remodelaci&#xF3;n de adhesi&#xF3;n focal a trav&#xE9;s del Rac1 activaci&#xF3;n

&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x89E3;&#x805A;&#x56E0;&#x5B50; (ADF) / cofilin &#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x8C03;&#x8282;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x548C;&#x690D;&#x7269;&#x4E2D;&#x88AB;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x662F;&#x63D0;&#x793A;&#x589E;&#x957F;&#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x7531;&#x4E8E;&#x5728;&#x8BB8;&#x591A;&#x690D;&#x7269;&#x4E2D;&#x7684;&#x591A;&#x4E2A; ADF &#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#x7684;&#x5B58;&#x5728; ADF &#x5FC5;&#x8981;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x4E00;&#x76F4;&#x662F;&#x53EF;&#x671B;&#x800C;&#x4E0D;&#x53EF;&#x53CA;&#x3002;&#x5728; moss Physcomitrella &#x4F4E;&#x80FD;&#xFF0C;ADF &#x7531;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5355;&#x4E00;&#x7684; intronless &#x57FA;&#x56E0;&#x7F16;&#x7801;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528; RNA &#x5E72;&#x6270;&#x6280;&#x672F;&#x6F14;&#x793A; ADF &#x662F;&#x690D;&#x7269;&#x751F;&#x5B58;&#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;ADF &#x7684;&#x635F;&#x5931;&#x5927;&#x5927;&#x6539;&#x53D8;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684; F-&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7684;&#x63D0;&#x793A;&#x751F;&#x957F;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; ADF &#x662F;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x4F53;&#x5185;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E92;&#x8865;&#x7814;&#x7A76;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x7A81;&#x53D8;&#x7684;&#x9884;&#x6D4B;&#x78F7;&#x9178;&#x5316;&#x7F51;&#x7AD9;&#x90E8;&#x5206;&#x62EF;&#x6551;&#x690D;&#x7269;&#x751F;&#x5B58;&#x80FD;&#x529B;&#xFF0C;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x5DEE;&#x5F02;&#x5F71;&#x54CD;&#x5BF9;&#x5C16;&#x751F;&#x957F;&#x3002;&#x5177;&#x4F53;&#x800C;&#x8A00;&#xFF0C;unphosphorylatable ADF S6A &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x751F;&#x6210;&#x5C0F;&#x6781;&#x5316;&#x7684;&#x690D;&#x7269;&#x4E0E; F-&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x6B63;&#x5E38;&#x7EC4;&#x7EC7;&#xFF0C;&#x800C; phosphomimetic S6D &#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x751F;&#x6210;&#x4E0E;&#x6742;&#x4E71;&#x65E0;&#x7AE0;&#x7684; F-&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#x5C0F;&#x3001; &#x81EA;&#x7136;&#x5149;&#x7684;&#x690D;&#x7269;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;phosphoregulation &#x5728;&#x4E1D;&#x6C28;&#x9178; 6 &#x662F;&#x9700;&#x8981;&#x5145;&#x5206;&#x7684; ADF &#x51FD;&#x6570;&#x4F53;&#x5185;&#xFF0C;&#xFF0C;&#xFF0C;&#x7279;&#x522B;&#x662F; ADF &#x548C;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x63D0;&#x793A;&#x589E;&#x957F;&#x3002;

&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x89E3;&#x805A;&#x56E0;&#x5B50;&#x5728;&#x690D;&#x7269;&#x91CC;&#xFF0C;&#x751F;&#x5B58;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#xFF0C;&#x5176; phosphoregulation &#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x63D0;&#x793A;&#x589E;&#x957F;&#x3002;

Actin depolymerizing factor (ADF)/cofilin is important for regulating actin dynamics, and in plants is thought to be required for tip growth. However, the degree to which ADF is necessary has been elusive because of the presence of multiple ADF isoforms in many plant species. In the moss Physcomitrella patens, ADF is encoded by a single, intronless gene. We used RNA interference to demonstrate that ADF is essential for plant viability. Loss of ADF dramatically alters the organization of the F-actin cytoskeleton, and leads to an inhibition of tip growth. We show that ADF is subject to phosphorylation in vivo, and using complementation studies we show that mutations of the predicted phosphorylation site partially rescue plant viability, but with differential affects on tip growth. Specifically, the unphosphorylatable ADF S6A mutant generates small polarized plants with normal F-actin organization, whereas the phosphomimetic S6D mutant generates small, unpolarized plants with a disorganized F-actin cytoskeleton. These data indicate that phosphoregulation at serine 6 is required for full ADF function in vivo, and, in particular, that the interaction between ADF and actin is important for tip growth.

Actin depolymerizing factor is essential for viability in plants, and its phosphoregulation is important for tip growth.

(ADF) &#xC694;&#xC18C; &#xB9D0;&#xB77C; depolymerizing/cofilin &#xB9D0;&#xB77C; &#xC5ED;&#xD559;, &#xADDC;&#xC81C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD558; &#xACE0; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xD301; &#xC131;&#xC7A5;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0DD;&#xAC01; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, ADF &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC815;&#xB3C4;&#xB294; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC560;&#xB9E4; &#xB9CE;&#xC740; &#xC2DD;&#xBB3C; &#xC885;&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; ADF isoforms&#xC758; &#xC874;&#xC7AC; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0;. &#xBAA8;&#xC2A4; Physcomitrella patens, ADF&#xB294; &#xB2E8;&#xC77C;, intronless &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. RNA &#xAC04;&#xC12D; ADF &#xC2DD;&#xBB3C; &#xC0DD;&#xC874;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC218;&#xC801; &#xC774;&#xB2E4; &#xC124;&#xBA85; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. ADF&#xC758; &#xC190;&#xC2E4; &#xADF9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; F-&#xB9D0;&#xB77C; cytoskeleton&#xC758; &#xC870;&#xC9C1; &#xBCC0;&#xACBD; &#xBC0F; &#xD301; &#xC131;&#xC7A5; &#xC800;&#xD574;&#xB97C; &#xB9AC;&#xB4DC;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; ADF&#xB294; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xCC28;&#xB3D9; &#xD568;&#xAED8; &#xD301; &#xC131;&#xC7A5;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294; &#xBCF4;&#xC644;&#xC131; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC608;&#xCE21;&#xB41C; &#xC778; &#xC0B0;&#xD654; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC758; &#xBCC0;&#xC774; &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC2DD;&#xBB3C; &#xC0DD;&#xC874; &#xAD6C;&#xC870; &#xD45C;&#xC2DC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD2B9;&#xD788;, unphosphorylatable ADF S6A &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; phosphomimetic S6D &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC640; &#xBE44; &#xC870;&#xC9C1;&#xB41C; F &#xB9D0;&#xB77C; cytoskeleton &#xC791;&#xC740;, unpolarized &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC744; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xBC18;&#xBA74; &#xC77C;&#xBC18; F &#xB9D0;&#xB77C; &#xC870;&#xC9C1;&#xACFC; &#xC791;&#xC740; &#xD3B8;&#xAD11;&#xB41C; &#xC2DD;&#xBB3C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xD574;&#xB2F9; phosphoregulation &#xB5A0;&#xB4E4;&#xACE0; 6&#xC740; &#xC804;&#xCCB4; ADF &#xAE30;&#xB2A5; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0;, &#xD2B9;&#xD788;, ADF &#xB9D0;&#xB77C;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638;&#xC791;&#xC6A9;&#xC740; &#xD301; &#xC131;&#xC7A5;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB9D0;&#xB77C; depolymerizing &#xC694;&#xC18C; &#xC2DD;&#xBB3C;, &#xC0DD;&#xC874;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xD544;&#xC218;&#xC801; &#xC774;&#xBA70; &#xC790;&#xC0AC;&#xC758; phosphoregulation &#xD301; &#xC131;&#xC7A5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD558;&#xB2E4;.

Facteur de d&#xE9;polym&#xE9;risation d&#x26;#39;actine (ADF) / cofiline est important pour la r&#xE9;gulation dynamique de l&#x26;#39;actine, et dans les usines est pens&#xE9; pour &#xEA;tre requis pour la croissance apicale. Toutefois, la mesure dans laquelle ADF est n&#xE9;cessaire a &#xE9;t&#xE9; &#xE9;vasif en raison de la pr&#xE9;sence d&#x26;#39;isoformes multiples FAD dans de nombreuses esp&#xE8;ces v&#xE9;g&#xE9;tales. Dans la mousse Physcomitrella patens, ADF est cod&#xE9;e par un seul g&#xE8;ne sans intron. Nous avons utilis&#xE9; l&#x26;#39;interf&#xE9;rence ARN pour d&#xE9;montrer que l&#x26;#39;ADF est essentielle pour la viabilit&#xE9; des plantes. Perte de l&#x26;#39;ADF modifie consid&#xE9;rablement l&#x26;#39;organisation du cytosquelette d&#x26;#39;actine F-, et conduit &#xE0; une inhibition de la croissance apicale. Nous montrons que l&#x26;#39;ADF est soumise &#xE0; la phosphorylation in vivo, et en utilisant des &#xE9;tudes de compl&#xE9;mentation, nous montrons que des mutations du site de phosphorylation pr&#xE9;dit partiellement sauver la viabilit&#xE9; des plantes, mais avec diff&#xE9;rentiel sur la croissance affecte la pointe. Plus pr&#xE9;cis&#xE9;ment, le non phosphorylable ADF S6A mutant g&#xE9;n&#xE8;re de petites plantes polaris&#xE9;s avec la normale F-actine organisation, alors que le mutant phosphomimetic S6D g&#xE9;n&#xE8;re de petites plantes non polaris&#xE9;s avec un F-d&#xE9;sorganis&#xE9; cytosquelette d&#x26;#39;actine. Ces donn&#xE9;es indiquent que phosphoregulation &#xE0; s&#xE9;rine 6 est n&#xE9;cessaire pour l&#x26;#39;ADF pleine fonction in vivo, et, en particulier, que l&#x26;#39;interaction entre l&#x26;#39;ADF et l&#x26;#39;actine est important pour la croissance apicale.

Facteur actine d&#xE9;polym&#xE9;risation est essentielle pour la viabilit&#xE9; dans les usines, et son Phosphoregulation est importante pour la croissance Astuce

Aktin depolymerizing Faktor (ADF) / Cofilin ist wichtig f&uuml;r die Regulierung der Aktin-Dynamik und in Pflanzen wird gedacht, um f&uuml;r Tipp-Wachstum erforderlich. Inwieweit die ADF notwendig ist hat jedoch wegen der Anwesenheit von mehreren ADF-Isoformen in vielen Pflanzenarten tr&uuml;gerisch erwiesen. In das Moos Physcomitrella Patens, ADF ist eine einzelne, intronless-Gen codiert. Wir verwendeten RNA-Interferenz um zu demonstrieren, dass ADF f&uuml;r Pflanzen &Uuml;berleben wichtig. Verlust der ADF dramatisch ver&auml;ndert die Organisation des Zytoskeletts F-Actin und f&uuml;hrt zu einer Hemmung der Tipp Wachstum. Wir zeigen, dass ADF in-vivo Phosphorylierung unterliegt und mit Erg&auml;nzung-Studien, die wir zeigen, dass Mutationen der vorhergesagten Phosphorylierung Website teilweise Pflanze Lebensf&auml;higkeit retten, aber mit Differential Tipp Wachstum beeinflusst. Insbesondere generiert die unphosphorylatable ADF S6A Mutant kleine polarisierte Pflanzen mit normalen F-Actin-Organisation, w&auml;hrend der Phosphomimetic S6D-Mutant kleine, unpolarisiertes Pflanzen mit einer desorganisierten F-Actin-Zytoskeletts generiert. Diese Daten zeigen, dass Phosphoregulation bei Serin 6 ist erforderlich f&uuml;r volle ADF-Funktion, die in-vivo und, vor allem, dass die Interaktion zwischen ADF und Actin Tipp Wachstum wichtig ist.

Aktin depolymerizing Faktor ist wichtig f&uuml;r die Rentabilit&auml;t in Pflanzen, und seine Phosphoregulation ist wichtig f&uuml;r Tipp-Wachstum.

Actina depolymerizing factor (ADF) / cofilin &egrave; importante per la regolazione dinamica dell&#39;actina e nelle piante &egrave; pensato per essere necessari per la crescita di punta. Tuttavia, il grado a cui &egrave; necessario ADF &egrave; stato sfuggente a causa della presenza di molteplici isoforme ADF in molte specie di piante. Nel muschio Physcomitrella patens, ADF &egrave; codificato da un gene singolo, intronless. Abbiamo usato l&#39;interferenza del RNA per dimostrare che ADF &egrave; essenziale per la vitalit&agrave; della pianta. Perdita di ADF drammaticamente altera l&#39;organizzazione del citoscheletro F-actina e porta ad un&#39;inibizione della crescita di punta. Mostriamo che ADF &egrave; soggetta a fosforilazione in vivo, e utilizzando gli studi di complementazione mostriamo che mutazioni del sito predetto fosforilazione parzialmente salvataggio vitalit&agrave; della pianta, ma con differenziale influisce sulla crescita di punta. In particolare, il mutante ADF S6A unphosphorylatable genera piccole piante polarizzate con normale organizzazione di F-actina, considerando che il mutante phosphomimetic S6D genera piante piccole, polarizzate con un disorganizzata citoscheletro di F-actina. Questi dati indicano che phosphoregulation a serina 6 &egrave; necessaria per la piena funzione ADF in vivo e, in particolare, che l&#39;interazione tra ADF e actina &egrave; importante per la crescita di punta.

Actina depolimerizzanti fattore &egrave; essenziale per la vitalit&agrave; nelle piante, e la phosphoregulation &egrave; importante per la crescita di punta.

&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x8131;&#x91CD;&#x5408;&#x56E0;&#x5B50;&#xFF08;ADF&#xFF09;/&#x30B3;&#x30D5;&#x30A3;&#x30EA;&#x30F3;&#x306F;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x690D;&#x7269;&#x3067;&#x306F;&#x5148;&#x7AEF;&#x6210;&#x9577;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;ADF&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5EA6;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x690D;&#x7269;&#x7A2E;&#x3067;&#x8907;&#x6570;&#x306E;ADF&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x306E;&#x3068;&#x3089;&#x3048;&#x3069;&#x3053;&#x308D;&#x306E;&#x306A;&#x3044;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x82D4;&#x30D2;&#x30E1;&#x30C4;&#x30EA;&#x30AC;&#x30CD;&#x30B4;&#x30B1;&#x3067;&#x306F;&#x3001;ADF&#x306F;&#x3001;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30F3;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;ADF&#x304C;&#x690D;&#x7269;&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;RNA&#x5E72;&#x6E09;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x3002; ADF&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x306F;&#x5287;&#x7684;&#x306B;F-&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3057;&#x3001;&#x5148;&#x7AEF;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;ADF&#x306F;&#x3001;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x3067;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x306E;&#x5BFE;&#x8C61;&#x3068;&#x306A;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3001;&#x76F8;&#x88DC;&#x6027;&#x8A66;&#x9A13;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x4E88;&#x6E2C;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x90E8;&#x4F4D;&#x306E;&#x5909;&#x7570;&#x304C;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306B;&#x690D;&#x7269;&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x3092;&#x6551;&#x3046;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x5DEE;&#x304C;&#x5148;&#x7AEF;&#x6210;&#x9577;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x3068;&#x3002; phosphomimetic S6D&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x7121;&#x79E9;&#x5E8F;&#x306A;F-&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x306E;&#x5C0F;&#x578B;&#x3001;&#x504F;&#x690D;&#x7269;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x4E00;&#x65B9;&#x3001;&#x5177;&#x4F53;&#x7684;&#x306B;&#x306F;&#x3001;unphosphorylatable ADF S6A&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x901A;&#x5E38;&#x306E;F-&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x306B;&#x5C0F;&#x3055;&#x306A;&#x504F;&#x690D;&#x7269;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x30BB;&#x30EA;&#x30F3;6&#x3067;&#x305D;&#x306E;phosphoregulation&#x306F;ADF&#x3068;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;&#x5148;&#x7AEF;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3001;&#x7279;&#x306B;&#x3001;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x5B8C;&#x5168;&#x306A;ADF&#x6A5F;&#x80FD;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x3001;&#x3068;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3002;

&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x8131;&#x91CD;&#x5408;&#x56E0;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x690D;&#x7269;&#x306E;&#x751F;&#x5B58;&#x306B;&#x5FC5;&#x9808;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x305D;&#x306E;Phosphoregulation&#x306F;&#x5148;&#x7AEF;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;

Factor de despolimerizante de actina (ADF) / cofilina es importante para la regulaci&#xF3;n din&#xE1;mica de la actina, y en las plantas se cree que se requiere para el crecimiento de la punta. Sin embargo, el grado en que ADF es necesario ha sido dif&#xED;cil debido a la presencia de m&#xFA;ltiples isoformas ADF en muchas especies de plantas. En el musgo Physcomitrella patens, alimentador autom&#xE1;tico de documentos est&#xE1; codificada por un solo gen, intrones. Se utiliz&#xF3; la interferencia de ARN para demostrar que ADF es esencial para la viabilidad de la planta. La p&#xE9;rdida de la ADF altera dram&#xE1;ticamente la organizaci&#xF3;n del citoesqueleto de actina F, y da lugar a una inhibici&#xF3;n del crecimiento de la punta. Se demuestra que el ADF est&#xE1; sujeto a la fosforilaci&#xF3;n in vivo, y mediante estudios de complementaci&#xF3;n nos muestran que las mutaciones del sitio de fosforilaci&#xF3;n predicho parcialmente rescatar viabilidad de la planta, pero con diferencial afecta en el crecimiento punta. En concreto, el alimentador autom&#xE1;tico de documentos unphosphorylatable S6A mutante genera peque&#xF1;as plantas polarizadas normales con la F-actina organizaci&#xF3;n, mientras que el mutante phosphomimetic S6D genera peque&#xF1;as plantas, no polarizados con un desorganizado F-actina del citoesqueleto. Estos datos indican que phosphoregulation en serina 6 se requiere para la completa funci&#xF3;n ADF in vivo, y, en particular, que la interacci&#xF3;n entre ADF y actina es importante para el crecimiento punta.

Factor despolimerizante de actina es esencial para la viabilidad de las plantas, y su Phosphoregulation es importante para el crecimiento Consejo

Attivazione di RAC da integrine &egrave; essenziale per la diffusione, la migrazione, la crescita e la sopravvivenza delle cellule. Basato principalmente su sovraespressione di mutanti dominante-negativo, RhoG &egrave; stato proposto di mediare l&#39;attivazione Rac integrina-dipendente a Monte ELMO e Dock180. Topi knockout RhoG, tuttavia, non visualizzare significative anomalie dello sviluppo o funzionale. Per chiarire il ruolo di RhoG nella segnalazione dell&#39;integrina-mediata, abbiamo sviluppato un anticorpo specifico RhoG, che, insieme con shRNA-mediata atterramento, permesso l&#39;analisi della proteina endogena. Nonostante gli effetti drammatici dei costrutti di dominante-negativo, quasi completo esaurimento RhoG non ha fatto sostanzialmente inibiscono la adesione delle cellule, la diffusione, migrazione o attivazione di Rac. Inoltre, RhoG non &egrave; stato attivato rilevabile dall&#39;adesione di fibronectina. Usando le cellule Rac1(-/-), abbiamo trovato che costitutivamente attive RhoG indotta membrana ruffling via sia Rac-dipendente e - percorsi indipendenti. Inoltre, RhoG endogena &egrave; stato importante per la migrazione cellulare Rac-indipendente. Tuttavia, RhoG non ha contribuito significativamente alla cella diffondendo anche in queste cellule. Questi dati, pertanto, chiarire il ruolo di RhoG nella motilit&agrave; delle cellule e la segnalazione dell&#39;integrina.

RhoG endogena &egrave; superfluo per la diffusione di integrina-mediata delle cellule, ma contribuisce alla migrazione Rac-indipendente.

&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x306B;&#x3088;&#x308B;Rac&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x62E1;&#x6563;&#x3001;&#x79FB;&#x52D5;&#x3001;&#x6210;&#x9577;&#x3068;&#x751F;&#x5B58;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x4E3B;&#x306B;&#x30C9;&#x30DF;&#x30CA;&#x30F3;&#x30C8;&#x30CD;&#x30AC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x3001;RhoG&#x306F;&#x3001;ELMO&#x3068;DOCK180&#x306E;&#x4E0A;&#x6D41;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x4F9D;&#x5B58;Rac&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x63D0;&#x6848;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; RhoG&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x6709;&#x610F;&#x306A;&#x767A;&#x9054;&#x3042;&#x308B;&#x3044;&#x306F;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x7570;&#x5E38;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x3092;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306B;RhoG&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x660E;&#x78BA;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x89E3;&#x6790;&#x3092;&#x8A31;&#x53EF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3001;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;shRNA&#x3092;&#x4ECB;&#x5728;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x3068;&#x3001;RhoG&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x6297;&#x4F53;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30C9;&#x30DF;&#x30CA;&#x30F3;&#x30C8;&#x30CD;&#x30AC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x5287;&#x7684;&#x306A;&#x52B9;&#x679C;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x307B;&#x307C;&#x5B8C;&#x5168;&#x306A;RhoG&#x306E;&#x67AF;&#x6E07;&#x306F;&#x3001;&#x5B9F;&#x8CEA;&#x7684;&#x306B;&#x62E1;&#x6563;&#x3001;&#x79FB;&#x884C;&#x3084;Rac&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x63A5;&#x7740;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3057;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;RhoG&#x306F;&#x3001;&#x691C;&#x51FA;&#x53EF;&#x80FD;&#x30D5;&#x30A3;&#x30D6;&#x30ED;&#x30CD;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x3078;&#x306E;&#x63A5;&#x7740;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002; &#xFF08; -  /  - &#xFF09;Rac1&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30BB;&#x30EB;&#x3092;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;Rac&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x975E;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x6CE2;&#x6253;&#x3061;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x6052;&#x5E38;&#x7684;&#x306B;&#x6D3B;&#x6027;RhoG&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x819C;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x306E;RhoG&#x306F;&#x3001;rac-&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x79FB;&#x52D5;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;RhoG&#x304C;&#x8457;&#x3057;&#x304F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x304A;&#x3044;&#x3066;&#x3082;&#x3001;&#x62E1;&#x6563;&#x30BB;&#x30EB;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x904B;&#x52D5;&#x6027;&#x306B;RhoG&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x660E;&#x78BA;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3002;

&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x306E;RhoG&#x306F;&#x62E1;&#x6563;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x3092;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4E0D;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x304C;&#x3001;RAC-&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x305F;&#x79FB;&#x884C;&#x306B;&#x8CA2;&#x732E;

Rac &#xD65C;&#xC131;&#xD654; integrins &#xC140; &#xD655;&#xC0B0;, &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158;, &#xC131;&#xC7A5; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xC874;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC218;&#xC801; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC8FC;&#xB85C; &#xC9C0;&#xBC30; &#xC74C;&#xC218;&#xAC00; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC758; overexpression&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C;, RhoG &#xC5D8; &#xBAA8;&#xC640; dock180&#xC758; &#xC0C1;&#xB958; integrin &#xC885;&#xC18D; Rac &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC911;&#xC7AC; &#xC81C;&#xC548; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; RhoG &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; &#xC950;, &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xB610;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC774;&#xC0C1; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. Integrin &#xC911;&#xC7AC; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; Rhog&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xBA85;&#xD655; &#xD558; &#xAC8C; &#xC6B0;&#xB9AC; shRNA &#xC911;&#xC7AC; &#xCD5C;&#xC800;&#xC758; &#xD568;&#xAED8; &#xC0DD; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; RhoG &#xD2B9;&#xC815; &#xD56D; &#xCCB4;&#xB97C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC9C0;&#xBC30;&#xC801;&#xC778; &#xBD80;&#xC815; &#xAD6C;&#xBB38; &#xADF9;&#xC801;&#xC778; &#xD6A8;&#xACFC;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xC138;&#xD3EC; &#xC811;&#xCC29;, &#xD655;&#xC0B0;, &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xB610;&#xB294; Rac &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xAC70;&#xC758; &#xC644;&#xC804; &#xD55C; RhoG &#xACE0;&#xAC08;&#xC774; &#xC5B5;&#xC81C; &#xB418;&#xB294; &#xAC83; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4; &#xC2E4;&#xC9C8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;. &#xB610;&#xD55C;, Rhog&#xB294; detectably fibronectin&#xC5D0; &#xC811;&#xCC29;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Rac1(-/-) &#xC140;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; RhoG constitutively &#xD65C;&#xC131; &#xC720;&#xB3C4; &#xB9C9; ruffling Rac &#xC885;&#xC18D;&#xC640;-&#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; &#xACBD;&#xB85C; &#xD1B5;&#xD574; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC0DD; RhoG Rac &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; &#xC140; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD588;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, RhoG &#xC140;&#xC774;&#xC774; &#xC140;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xD655;&#xC0B0;&#xC5D0; &#xD06C;&#xAC8C; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; integrin &#xC2E0;&#xD638; &#xBC0F; &#xC140; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; Rhog&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xBA85;&#xD655;&#xD788;.

&#xC0DD; RhoG integrin &#xC911;&#xC7AC; &#xC140; &#xD655;&#xC0B0;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xBD88;&#xAC00;&#xACB0; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; Rac &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801;&#xC778; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC; &#xD55C;&#xB2E4;.

Rac &#x6FC0;&#x6D3B;&#x901A;&#x8FC7;&#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x94FA;&#x5C55;&#xFF0C;&#x8FC1;&#x79FB;&#x3001; &#x751F;&#x957F;&#x548C;&#x5B58;&#x6D3B;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x3002;&#x4E3B;&#x8981;&#x662F;&#x57FA;&#x4E8E;&#x663E;&#x6027;&#x8D1F;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;RhoG &#x5DF2;&#x63D0;&#x51FA;&#x8C03;&#x89E3;&#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#x4F9D;&#x8D56; Rac &#x6FC0;&#x6D3B;&#x4E0A;&#x6E38;&#x7684; ELMO &#x548C; Dock180&#x3002;RhoG &#x57FA;&#x56E0;&#x6572;&#x9664;&#x5C0F;&#x9F20;&#xFF0C;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x663E;&#x793A;&#x6CA1;&#x6709;&#x91CD;&#x5927;&#x7684;&#x53D1;&#x80B2;&#x6216;&#x529F;&#x80FD;&#x5F02;&#x5E38;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x6F84;&#x6E05; RhoG &#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F00;&#x53D1; RhoG &#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x6297;&#x4F53;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x4ECB;&#x5BFC; shRNA &#x7EC4;&#x5408;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x5141;&#x8BB8;&#x7684;&#x5185;&#x6E90;&#x6027;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x5206;&#x6790;&#x3002;&#x663E;&#x6027;&#x8D1F;&#x6784;&#x9020;&#x5E26;&#x6765;&#x7684;&#x5DE8;&#x5927;&#x5F71;&#x54CD;&#xFF0C;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x63A5;&#x8FD1;&#x5B8C;&#x6210; RhoG &#x67AF;&#x7AED;&#x5417;&#x4E0D;&#x5927;&#x5E45;&#x6291;&#x5236;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x9644;&#x3001; &#x4F20;&#x64AD;&#x3001; &#x8FC1;&#x79FB;&#x6216; Rac &#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;RhoG &#x662F;&#x4E0D;&#x80FD;&#x591F;&#x68C0;&#x6D4B;&#x51FA;&#x6765;&#x7531;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x4E0E;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x8FDE;&#x63A5;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x7C98;&#x9644;&#x6027;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528; Rac1(-/-) &#x5355;&#x5143;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x4E00;&#x6D3B;&#x52A8; RhoG &#x8BF1;&#x5BFC;&#x819C;&#x8936;&#x8FB9;&#x901A;&#x8FC7; Rac &#x4F9D;&#x8D56;&#x548C;&#x4E24;&#x79CD;&#x72EC;&#x7ACB;&#x7684;&#x9014;&#x5F84;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x5185;&#x6E90;&#x6027; RhoG &#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x662F;&#x72EC;&#x7ACB;&#x4E8E; Rac &#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC1;&#x79FB;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;RhoG &#x5927;&#x5927;&#x65E0;&#x52A9;&#x5230;&#x4F20;&#x64AD;&#x751A;&#x81F3;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E2D;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6570;&#x636E;&#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6D3B;&#x52A8;&#x4E2D;&#x6F84;&#x6E05; RhoG &#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x5185;&#x6E90;&#x6027; RhoG &#x662F;&#x53EF;&#x6709;&#x53EF;&#x65E0;&#x7684;&#x6574;&#x5408;&#x7D20;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F20;&#x64AD;&#xFF0C;&#x4F46;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x72EC;&#x7ACB; Rac &#x7684;&#x8FC1;&#x79FB;&#x3002;

Rac activation by integrins is essential for cell spreading, migration, growth and survival. Based mainly on overexpression of dominant-negative mutants, RhoG has been proposed to mediate integrin-dependent Rac activation upstream of ELMO and Dock180. RhoG-knockout mice, however, display no significant developmental or functional abnormalities. To clarify the role of RhoG in integrin-mediated signaling, we developed a RhoG-specific antibody, which, together with shRNA-mediated knockdown, allowed analysis of the endogenous protein. Despite dramatic effects of dominant-negative constructs, nearly complete RhoG depletion did not substantially inhibit cell adhesion, spreading, migration or Rac activation. Additionally, RhoG was not detectably activated by adhesion to fibronectin. Using Rac1(-/-) cells, we found that constitutively active RhoG induced membrane ruffling via both Rac-dependent and -independent pathways. Additionally, endogenous RhoG was important for Rac-independent cell migration. However, RhoG did not significantly contribute to cell spreading even in these cells. These data therefore clarify the role of RhoG in integrin signaling and cell motility.

Endogenous RhoG is dispensable for integrin-mediated cell spreading but contributes to Rac-independent migration.

Rac activation des int&#xE9;grines est essentielle pour &#xE9;talement cellulaire, la migration, la croissance et la survie. Bas&#xE9; principalement sur la surexpression de mutants dominants n&#xE9;gatifs, RhoG a &#xE9;t&#xE9; propos&#xE9; &#xE0; la m&#xE9;diation de l&#x26;#39;int&#xE9;grine-d&#xE9;pendante l&#x26;#39;activation Rac en amont de ELMO et DOCK180. RhoG-souris d&#xE9;ficientes en prot&#xE9;ine, cependant, ne pas afficher de fortes anomalies de d&#xE9;veloppement ou fonctionnelle. Afin de clarifier le r&#xF4;le de RhoG dans la signalisation m&#xE9;di&#xE9;e par l&#x26;#39;int&#xE9;grine, nous avons d&#xE9;velopp&#xE9; un anticorps sp&#xE9;cifique RhoG, qui, avec shRNA m&#xE9;diation knockdown, l&#x26;#39;analyse a permis de la prot&#xE9;ine endog&#xE8;ne. En d&#xE9;pit des effets dramatiques de dominants n&#xE9;gatifs des constructions, l&#x26;#39;&#xE9;puisement presque complet RhoG n&#x26;#39;a pas sensiblement inhiber l&#x26;#39;adh&#xE9;sion cellulaire, la diffusion, la migration ou l&#x26;#39;activation Rac. En outre, RhoG n&#x26;#39;a pas &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;tectable activ&#xE9; par l&#x26;#39;adh&#xE9;rence &#xE0; la fibronectine. Utilisation de Rac1 (- / -) des cellules, nous avons constat&#xE9; que la membrane RhoG constitutivement active induite par les deux &#xE9;bouriffant Rac-d&#xE9;pendants et des voies ind&#xE9;pendantes. En outre, RhoG endog&#xE8;ne &#xE9;tait important pour la migration des cellules Rac-ind&#xE9;pendante. Toutefois, RhoG ne contribuent pas sensiblement &#xE0; la cellule propagation, m&#xEA;me dans ces cellules. Ces donn&#xE9;es sont donc de clarifier le r&#xF4;le de l&#x26;#39;int&#xE9;grine RhoG dans la signalisation et la motilit&#xE9; cellulaire.

RhoG endog&#xE8;ne n&#x26;#39;est pas indispensable pour l&#x26;#39;int&#xE9;grine-&#xE0; m&#xE9;diation cellulaire de propagation mais contribue &#xE0; Rac-ind&#xE9;pendante des migrations

RAC-Aktivierung durch Integrine unbedingt Zelle verbreiten, Migration, Wachstum und &uuml;berleben. Basiert vor allem auf eine &Uuml;berexpression von Dominant Negative Mutanten, wurde RhoG vorgeschlagen, Integrin-abh&auml;ngige Rac Aktivierung stromaufw&auml;rts von ELMO und Dock180 zu vermitteln. RhoG-Knockout-M&auml;use, zeigen jedoch keine signifikanten Entwicklungsst&ouml;rungen oder funktionellen Anomalien. Die Rolle der RhoG in Integrin-vermittelte Signalisierung zu kl&auml;ren, entwickelten wir einen RhoG-spezifische Antik&ouml;rper, denen zusammen mit ShRNA-vermittelte Niederschlag, Analyse des endogenen Proteins gestattet. Trotz der dramatischen Auswirkungen der Dominant-negativen Konstrukte fast vollst&auml;ndige RhoG Ersch&ouml;pfung nicht wesentlich Zelladh&auml;sion, Verbreitung, Migration oder Rac Aktivierung hemmen. Dar&uuml;ber hinaus wurde RhoG nicht detectably durch Adh&auml;sion auf Fibronektin aktiviert. Mit Rac1(-/-) Zellen, fanden wir, dass konstitutiv aktive RhoG Membran &uuml;ber Rac-abh&auml;ngige und -unabh&auml;ngige Wege ruffling induziert. Dar&uuml;ber hinaus war die endogene RhoG wichtig f&uuml;r Rac-unabh&auml;ngige Zellmigration. RhoG jedoch nicht wesentlich zu Zelle verbreiten sogar in diesen Zellen beitragen. Diese Daten werden daher die Rolle der RhoG in Integrin-Signalisierung und Zelle Motilit&auml;t kl&auml;ren.

Endogene RhoG ist entbehrlich f&uuml;r die Verbreitung von Integrin-vermittelte Zelle, sondern tr&auml;gt zur Rac-unabh&auml;ngige Migration.

La activaci&#xF3;n de Rac por integrinas es esencial para la propagaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas, la migraci&#xF3;n, el crecimiento y la supervivencia. Basado principalmente en la sobreexpresi&#xF3;n de dominante mutantes negativos, RhoG se ha propuesto para mediar en la integrina dependiente de la activaci&#xF3;n de Rac aguas arriba de ELMO y Dock180. Knockout RhoG-ratones, sin embargo, no muestran alteraciones significativas en el desarrollo o funcionales. Para aclarar el papel de RhoG en la se&#xF1;alizaci&#xF3;n mediada por la integrina, hemos desarrollado un anticuerpo espec&#xED;fico RhoG, que, junto con shRNA mediada por ca&#xED;da, el an&#xE1;lisis permite de la prote&#xED;na end&#xF3;gena. A pesar de los efectos dram&#xE1;ticos de las construcciones dominantes negativas, el agotamiento de RhoG casi completa no inhibe sustancialmente la adhesi&#xF3;n celular, la difusi&#xF3;n, la migraci&#xF3;n o la activaci&#xF3;n de Rac. Adem&#xE1;s, no se activ&#xF3; RhoG detectablemente por adhesi&#xF3;n a la fibronectina. Uso de Rac1 (- / -) de las c&#xE9;lulas, se encontr&#xF3; que la membrana RhoG constitutivamente activa inducida alborotaba tanto a trav&#xE9;s de Rac-dependientes e independientes v&#xED;as. Adem&#xE1;s, RhoG end&#xF3;gena era importante para la migraci&#xF3;n de c&#xE9;lulas Rac-independiente. Sin embargo, RhoG no contribuyen significativamente a la propagaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas, incluso en estas c&#xE9;lulas. Estos datos por lo tanto, clarificar el papel de RhoG en la se&#xF1;alizaci&#xF3;n de integrina y la motilidad celular.

RhoG end&#xF3;geno es prescindible para la integrina mediada por la propagaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas sino que contribuye a Rac-independiente de las Migraciones

La actina es esencial para el crecimiento en las plantas de la punta. Sin embargo, la actina de im&#xE1;genes en las c&#xE9;lulas de plantas vivas hasta ahora ha presentado problemas. En estudios anteriores, las sondas fluorescentes derivadas de actina-prote&#xED;nas de uni&#xF3;n a menudo alteran el crecimiento, porque la agrupaci&#xF3;n de actina y no logran resolver los filamentos de actina.

Lifeact-mEGFP revela una din&#xE1;mica apical F-actina en las c&#xE9;lulas de la red de consejos de cultivo de plantas

&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x662F;&#x63D0;&#x793A;&#x690D;&#x7269;&#x751F;&#x957F;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x6210;&#x50CF;&#x6D3B;&#x4F53;&#x690D;&#x7269;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x8FC4;&#x4ECA;&#x63D0;&#x51FA;&#x4E86;&#x6311;&#x6218;&#x3002;&#x5728;&#x4EE5;&#x524D;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x5F80;&#x5F80;&#x6E90;&#x81EA;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x8367;&#x5149;&#x63A2;&#x9488;&#x6539;&#x53D8;&#x589E;&#x957F;&#x3001; &#x5BFC;&#x81F4;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x6346;&#x7ED1;&#x548C;&#x65E0;&#x6CD5;&#x89E3;&#x6790;&#x5FAE;&#x4E1D;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x3002;

Lifeact-mEGFP &#x663E;&#x793A;&#x52A8;&#x6001;&#x5FC3;&#x5C16; F-&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7F51;&#x7EDC;&#x63D0;&#x793A;&#x79CD;&#x690D;&#x690D;&#x7269;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x3002;

Actin is essential for tip growth in plants. However, imaging actin in live plant cells has heretofore presented challenges. In previous studies, fluorescent probes derived from actin-binding proteins often alter growth, cause actin bundling and fail to resolve actin microfilaments.

Lifeact-mEGFP reveals a dynamic apical F-actin network in tip growing plant cells.

L&#x26;#39;actine est essentielle pour la croissance dans les usines de pointe. Toutefois, l&#x26;#39;actine imagerie dans les cellules v&#xE9;g&#xE9;tales vivantes a jusqu&#x26;#39;ici pr&#xE9;sent&#xE9; des d&#xE9;fis. Dans des &#xE9;tudes ant&#xE9;rieures, les sondes fluorescentes d&#xE9;riv&#xE9;es de prot&#xE9;ines de liaison &#xE0; l&#x26;#39;actine souvent alt&#xE9;rer la croissance, causer des groupage actine et ne parviennent pas &#xE0; r&#xE9;soudre les microfilaments d&#x26;#39;actine.

Lifeact-mEGFP r&#xE9;v&#xE8;le une dynamique apicale F-actine dans les cellules du r&#xE9;seau Astuce de culture de plantes

Aktin ist essentiell f&uuml;r Tipp Wachstum der Pflanzen. Jedoch hat imaging Aktin in live Pflanzenzellen bisher vor Herausforderungen gestellt. In den vorhergehenden Studien fluoreszierende Sonden abgeleitet von Aktin-bindende Proteine oft ver&auml;ndern Wachstum, verursachen Aktin B&uuml;ndelung und Mikrofilamenten Aktin l&ouml;sen.

Lifeact-mEGFP offenbart ein dynamisches apikale F-Actin-Netzwerk in Spitze wachsenden Pflanzenzellen.

Actina &egrave; essenziale per la crescita di punta nelle piante. Tuttavia, actina nelle cellule vegetali vivi di imaging ha finora presentato sfide. In studi precedenti, sonde fluorescenti derivate da proteine actina-associazione spesso alterano la crescita, causano dell&#39;actina che impacchetta e non riescono a risolvere i microfilamenti di actina.

Lifeact-mEGFP rivela una rete dinamica di F-actina apicale in punta di cellule vegetali in crescita.

&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x690D;&#x7269;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5148;&#x7AEF;&#x6210;&#x9577;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x3001;&#x690D;&#x7269;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x307E;&#x3067;&#x306E;&#x8AB2;&#x984C;&#x3092;&#x63D0;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D50;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30D6;&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x5834;&#x5408;&#x3001;&#x6210;&#x9577;&#x7387;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3059;&#x308B;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30F3;&#x30C9;&#x30EB;&#x306E;&#x539F;&#x56E0;&#x3068;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30DF;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A3;&#x30E9;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3092;&#x89E3;&#x6C7A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5931;&#x6557;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Lifeact-mEGFP&#x306F;&#x3001;&#x690D;&#x7269;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x6210;&#x9577;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x30D2;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30D4;&#x30AB;&#x30EB;F-&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x30CD;&#x30C3;&#x30C8;&#x30EF;&#x30FC;&#x30AF;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;

&#xB9D0;&#xB77C; &#xD301; &#xC2DD;&#xBB3C; &#xC131;&#xC7A5;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC218;&#xC801; &#xC774;&#xB2E4;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xC0B4;&#xC544;&#xC788;&#xB294; &#xC2DD;&#xBB3C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB9D0;&#xB77C; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xC9C0;&#xAE08;&#xAE4C;&#xC9C0; &#xACFC;&#xC81C;&#xB97C; &#xC81C;&#xC2DC; &#xD558;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. &#xC774;&#xC804; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD615;&#xAD11; &#xD504;&#xB85C;&#xBE0C; &#xC790;&#xC8FC; &#xB9D0;&#xB77C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xC131;&#xC7A5; &#xBCC0;&#xACBD; &#xD558; &#xACE0; &#xB9D0;&#xB77C; &#xBC88;&#xB4E4;&#xB85C; &#xC778;&#xD574; &#xB9D0;&#xB77C; microfilaments &#xD574;&#xACB0; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC2E4;&#xD328;.

Lifeact mEGFP &#xB3D9;&#xC801; &#xAF2D;&#xB300;&#xAE30; F &#xB9D0;&#xB77C; &#xB124;&#xD2B8;&#xC6CC;&#xD06C; &#xD301; &#xC131;&#xC7A5; &#xD558;&#xB294; &#xC2DD;&#xBB3C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1D;&#xD600;.

Formins &#x6240;&#x6709;&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x4E2D;&#x5B58;&#x5728;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E14;&#x662F;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x57FA;&#x4E8E;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x7ED3;&#x6784;&#x8D1F;&#x8D23;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x7684;&#x5FC5;&#x8981;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;&#x56E0;&#x4E3A;&#x591A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6709;&#x673A;&#x4F53;&#x5305;&#x542B;&#x5927;&#x578B; formin &#x57FA;&#x56E0;&#x5BB6;&#x65CF;&#xFF0C;&#x5EFA;&#x7ACB; formin &#x5F02;&#x6784;&#x4F53;&#x7684;&#x751F;&#x7406;&#x529F;&#x80FD;&#x4E00;&#x76F4;&#x5F88;&#x56F0;&#x96BE;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528; RNAi&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5206;&#x6790;&#x4E86;&#x529F;&#x80FD;&#x7684; formin &#x57FA;&#x56E0; moss Physcomitrella &#x5185;&#x7684;&#x6240;&#x6709; 9 &#x9879;&#x4E13;&#x5229;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A;&#x690D;&#x7269;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x7C7B;&#x4E8C; formins &#xFF08;For2&#xFF09; &#x662F;&#x4E25;&#x91CD;&#x53D1;&#x80B2;&#x4E0D;&#x826F;&#x548C;&#x7684;&#x7403;&#x5F62;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E;&#x4E2D;&#x65AD;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7EC4;&#x6210;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x5728;&#x6B63;&#x5E38;&#x7684;&#x7EC6;&#x957F;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5F62;&#x6001;&#x548C;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x7684;&#x6240;&#x6709;&#x5176;&#x4ED6; formins &#x7ED3;&#x679C;&#x7684;&#x6C89;&#x9ED8;&#x3002;&#x7B26;&#x5408;&#x7684;&#x6781;&#x6027;&#x751F;&#x957F;&#x4E2D;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;For2 apically &#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x751F;&#x957F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x660E; N &#x672B;&#x7AEF;&#x78F7;&#x9178;&#x9176;&#x5F81;&#x8C61; (PTEN)-&#x50CF;&#x57DF;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x5FC3;&#x5C16;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x3002;&#x6291;&#x764C;&#x57FA;&#x56E0; PTEN &#x6837;&#x57DF;&#x540E;&#x8DDF;&#x5B88;&#x6052; formin &#x540C;&#x6E90; (FH) 1 FH2 &#x57DF;&#xFF0C;&#x5DF2;&#x77E5;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x805A;&#x5408;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x786E;&#x5B9A;&#x662F;&#x5426; FH1 FH2 &#x7684;&#x4EFB;&#x4F55;&#x57DF;&#x7684;&#x6839;&#x5C16;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x6781;&#x6027;&#x7684;&#x751F;&#x957F;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6267;&#x884C;&#x57DF;&#x4EA4;&#x6362;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x53EA;&#x6709;&#x7C7B;&#x4E8C; FH1-FH2&#xFF0C;&#x7C7B;&#x4F3C; PTEN &#x7684;&#x57DF;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x7ED3;&#x5408;&#x8425;&#x6551;&#x4E24;&#x6781;&#x5316;&#x7684;&#x589E;&#x957F;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x5B83;&#x4E0D;&#x80FD;&#x66FF;&#x6362;&#x4ECE; For1 &#x7C7B;&#x4F3C;&#x57DF;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7528;&#x4E8E;&#x4F53;&#x5916;&#x805A;&#x5408;&#x5316;&#x9A8C;&#x89E3;&#x5256;&#x8FD9;&#x4E9B; FH1 FH2 &#x57DF;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x5DEE;&#x5F02;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0; FH1 &#x548C;&#x4ECE; For2 FH2 &#x57DF;&#x9700;&#x8981;&#x8C03;&#x89E3;&#x5F02;&#x5E38;&#x8FC5;&#x901F;&#x7387;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x4E1D;&#x4F38;&#x957F;&#x7387;&#xFF0C;&#x6BD4;&#x4EFB;&#x4F55;&#x5176;&#x4ED6;&#x5DF2;&#x77E5; formin &#x5FEB;&#x5F97;&#x591A;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x5FEB;&#x901F;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x4F38;&#x957F;&#x7387;&#x662F;&#x9A7E;&#x9A76;&#x7684;&#x5FC3;&#x5C16;&#x4E1D;&#x72B6;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x5F62;&#x6210;&#x6781;&#x5316;&#x589E;&#x957F;&#x6240;&#x9700;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x3002;

&#x5FEB;&#x901F; formin &#x4ECB;&#x5BFC;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x4E1D;&#x4F38;&#x957F;&#x7387;&#x4E3A;&#x4E24;&#x6781;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x690D;&#x7269;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x751F;&#x957F;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x3002;

Formins are present in all eukaryotes and are essential for the creation of actin-based structures responsible for diverse cellular processes. Because multicellular organisms contain large formin gene families, establishing the physiological functions of formin isoforms has been difficult. Using RNAi, we analyzed the function of all 9 formin genes within the moss Physcomitrella patens. We show that plants lacking class II formins (For2) are severely stunted and composed of spherical cells with disrupted actin organization. In contrast, silencing of all other formins results in normal elongated cell morphology and actin organization. Consistent with a role in polarized growth, For2 are apically localized in growing cells. We show that an N-terminal phosphatase tensin (PTEN)-like domain mediates apical localization. The PTEN-like domain is followed by a conserved formin homology (FH)1-FH2 domain, known to promote actin polymerization. To determine whether apical localization of any FH1-FH2 domain mediates polarized growth, we performed domain swapping. We found that only the class II FH1-FH2, in combination with the PTEN-like domain, rescues polarized growth, because it cannot be replaced with a similar domain from a For1. We used in vitro polymerization assays to dissect the functional differences between these FH1-FH2 domains. We found that both the FH1 and the FH2 domains from For2 are required to mediate exceptionally rapid rates of actin filament elongation, much faster than any other known formin. Thus, our data demonstrate that rapid rates of actin elongation are critical for driving the formation of apical filamentous actin necessary for polarized growth.

Rapid formin-mediated actin-filament elongation is essential for polarized plant cell growth.

Formines sont pr&#xE9;sents chez tous les eucaryotes et sont essentiels pour la cr&#xE9;ation de l&#x26;#39;actine &#xE0; base de structures charg&#xE9;es de divers processus cellulaires. Parce que les organismes multicellulaires contiennent de grandes familles de g&#xE8;nes metformine, &#xE9;tablir les fonctions physiologiques des isoformes metformine a &#xE9;t&#xE9; difficile. Utilisation de l&#x26;#39;ARNi, nous avons analys&#xE9; la fonction de tous les 9 g&#xE8;nes metformine dans les Physcomitrella patens mousse. Nous montrons que les plantes qui n&#x26;#39;ont pas de classe II formines (Pour2) sont s&#xE9;v&#xE8;rement rabougries et compos&#xE9; de cellules sph&#xE9;riques avec l&#x26;#39;organisation d&#x26;#39;actine perturb&#xE9;. En revanche, taire de tous les autres r&#xE9;sultats formines de la morphologie cellulaire normale allong&#xE9;e et l&#x26;#39;organisation d&#x26;#39;actine. Conform&#xE9;ment &#xE0; un r&#xF4;le dans la croissance polaris&#xE9;e, Pour2 sont localis&#xE9;s dans l&#x26;#39;apex des cellules en croissance. Nous montrons que la m&#xE9;diation de domaine N-terminal phosphatase TENsin (PTEN)-comme la localisation apicale. Le domaine en forme de PTEN est suivie par une homologie metformine conserv&#xE9;e (FH) 1-FH2 domaine, connu pour favoriser polym&#xE9;risation de l&#x26;#39;actine. Pour d&#xE9;terminer si la localisation apicale de n&#x26;#39;importe quel domaine de m&#xE9;diateur FH1-FH2 croissance polaris&#xE9;e, nous avons effectu&#xE9; de domaine permutation. Nous avons constat&#xE9; que seule la classe II-FH1 FH2, en combinaison avec le domaine PTEN-like, sauve la croissance polaris&#xE9;e, parce qu&#x26;#39;il ne peut pas &#xEA;tre remplac&#xE9; par un domaine similaire &#xE0; partir d&#x26;#39;un Pour1. Nous avons utilis&#xE9; dans des essais de polym&#xE9;risation in vitro pour diss&#xE9;quer les diff&#xE9;rences fonctionnelles entre ces domaines FH1-FH2. Nous avons trouv&#xE9; que les deux FH1 et FH2 les domaines de Pour2 sont tenus de servir de m&#xE9;diateur taux exceptionnellement rapide de l&#x26;#39;allongement des filaments d&#x26;#39;actine, beaucoup plus rapide que n&#x26;#39;importe quel autre formin connue. Ainsi, nos donn&#xE9;es montrent que les taux d&#x26;#39;allongement rapide actine sont essentiels pour la conduite de la formation de l&#x26;#39;actine filamenteuse apicale n&#xE9;cessaire &#xE0; la croissance polaris&#xE9;e.

Rapid Formin m&#xE9;di&#xE9;e par l&#x26;#39;actine-allongement du filament est essentielle pour la croissance des v&#xE9;g&#xE9;taux cellule polaris&#xE9;e

Formins sind in allen Eukaryoten vorhanden und f&uuml;r die Schaffung des Aktin-basierte Strukturen verantwortlich f&uuml;r diverse zellul&auml;re Prozesse unverzichtbar. Da Mehrzeller Gro&szlig;familien formin gen enthalten, war zur Gr&uuml;ndung der physiologischen Funktionen von Pau Isoformen schwierig. Verwendung von RNAi wir analysiert die Funktion alle 9 braun Gene in das Moos Physcomitrella Patens. Wir zeigen, dass Pflanzen fehlt Klasse II Formins (f&uuml;r 2) sind stark verk&uuml;mmert und bestehend aus kugelf&ouml;rmigen Zellen mit gest&ouml;rte Aktin-Organisation. Im Gegensatz zum Schweigen aller anderen Formins Ergebnisse in normalen l&auml;nglichen Zelle Morphologie und Actin-Organisation. In &Uuml;bereinstimmung mit eine Rolle f&uuml;r polarisierte Wirtschaftswachstum, f&uuml;r 2 sind apically lokalisiert in wachsende Zellen. Wir zeigen, dass eine N-terminale Phosphatase tensin (PTEN)-wie Dom&auml;ne apikale Lokalisierung vermittelt. Die PTEN-&auml;hnliche Dom&auml;ne folgt eine konservierte formin-Homologie (FH) 1-FH2 Gebiets bekannt, Aktin-Polymerisation zu f&ouml;rdern. Um festzustellen, ob die apikale Lokalisierung einer beliebigen Dom&auml;ne FH1-FH2 polarisierte Wachstum vermittelt, f&uuml;hrten wir die Dom&auml;ne zu tauschen. Wir fanden, dass nur die Klasse II FH1-FH2, in Kombination mit der PTEN-&auml;hnliche Dom&auml;ne polarisierter Wachstum, rettet, weil es nicht mit einer &auml;hnlichen Domain aus einem For1 ersetzt werden kann. Wir haben in-vitro-Polymerisation Proben, um die funktionalen Unterschiede zwischen diesen FH1-FH2-Dom&auml;nen zu zergliedern. Wir fanden, dass die FH1 und FH2 Dom&auml;nen aus f&uuml;r 2 erforderlich sind, um die au&szlig;ergew&ouml;hnlich schnelle Preise von Aktin-Filamenten Dehnung, viel schneller als alle anderen bekannten Pau zu vermitteln. So zeigen unsere Daten, dass rapid Preise der Aktin-Dehnung kritisch f&uuml;r das fahren der Bildung von apikalen filament&ouml;sen Aktin f&uuml;r polarisierte Wachstum erforderlich sind.

Schnelle Pau-vermittelte Aktin-Filament Dehnung unbedingt polarisierten Zelle Pflanzenwachstum.

Formins sono presenti in tutti gli eucarioti e sono essenziali per la creazione di strutture basate su actina responsabile di diversi processi cellulari. Perch&eacute; gli organismi pluricellulari contengono grandi famiglie gene formin, stabilendo le funzioni fisiologiche del formin isoforme &egrave; stato difficile. Utilizzo di RNAi, abbiamo analizzato la funzione di tutti i 9 formin geni all&#39;interno del muschio Physcomitrella patens. Mostriamo che piante manca classe II formins (For2) sono gravemente stentate e composto di cellule sferiche con organizzazione di actina perturbato. Al contrario, mettendo a tacere di tutti gli altri risultati di formins nell&#39;organizzazione di morfologia e actina normale cella allungata. Coerente con un ruolo nella crescita polarizzata, For2 apicalmente sono localizzati nelle cellule in crescita. Che mostriamo un N-terminale della fosfatasi Tensina (PTEN)-come dominio da intermediario localizzazione apicale. Il dominio di PTEN-come &egrave; seguito da un conservata formin omologia (FH) 1-FH2 dominio, noto per promuovere la polimerizzazione dell&#39;actina. Per determinare se la localizzazione apicale di qualsiasi dominio FH1-FH2 Media crescita polarizzata, abbiamo effettuato lo scambio di dominio. Abbiamo trovato che solo la classe II FH1-FH2, in combinazione con il dominio di PTEN-like, salv&ograve; crescita polarizzata, perch&eacute; esso non pu&ograve; essere sostituito con un dominio simile da un For1. Abbiamo usato la polimerizzazione in vitro dosaggi a dissecare le differenze funzionali tra questi domini FH1-FH2. Abbiamo trovato che sia la FH1 e i domini FH2 da For2 sono tenuti a mediare tariffe eccezionalmente rapide di allungamento filamento di actina, molto pi&ugrave; veloce di qualsiasi altro conosciuto formin. Cos&igrave;, i nostri dati dimostrano che rapidi tassi di allungamento di actina sono critici per la formazione di actina filamentosa apicale di guida necessarie per la crescita polarizzata.

Allungamento rapido formin-mediata actina-filamento &egrave; essenziale per la crescita delle cellule vegetali polarizzata.

Formins&#x306F;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x771F;&#x6838;&#x751F;&#x7269;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x591A;&#x69D8;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x8CAC;&#x4EFB;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x4F5C;&#x6210;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x591A;&#x7D30;&#x80DE;&#x751F;&#x7269;&#x306F;&#x3001;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x30D5;&#x30A9;&#x30EB;&#x30DF;&#x30F3;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x30D5;&#x30A9;&#x30EB;&#x30DF;&#x30F3;&#x30A2;&#x30A4;&#x30BD;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x751F;&#x7406;&#x7684;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x56F0;&#x96E3;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002; RNAi&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x82D4;&#x30D2;&#x30E1;&#x30C4;&#x30EA;&#x30AC;&#x30CD;&#x30B4;&#x30B1;&#x306E;&#x30D2;&#x30E1;&#x30C4;&#x30EA;&#x30AC;&#x30CD;&#x30B4;&#x30B1;&#x5185;&#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;9&#x30D5;&#x30A9;&#x30EB;&#x30DF;&#x30F3;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x89E3;&#x6790;&#x3092;&#x884C;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x3001;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;II formins&#xFF08;For2&#xFF09;&#x3092;&#x6B20;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x690D;&#x7269;&#x304C;&#x6DF1;&#x523B;&#x306A;&#x767A;&#x80B2;&#x4E0D;&#x5168;&#x306E;&#x7834;&#x7815;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x7403;&#x72B6;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x901A;&#x5E38;&#x306E;&#x7D30;&#x9577;&#x3044;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x3068;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x5185;&#x306E;&#x4ED6;&#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;formins&#x7D50;&#x679C;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x3002;&#x504F;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3001;For2&#x306F;&#x6839;&#x5C16;&#x306B;&#x5897;&#x6B96;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x5C40;&#x5728;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;N&#x672B;&#x7AEF;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;&#x30C6;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#xFF08;PTEN&#xFF09;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x9802;&#x7AEF;&#x5C40;&#x5728;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; PTEN&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x91CD;&#x5408;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x4FDD;&#x5B58;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30D5;&#x30A9;&#x30EB;&#x30DF;&#x30F3;&#x76F8;&#x540C;&#x6027;&#xFF08;FH&#xFF09;&#x306E;1-FH2&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3001;&#x7D9A;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;FH1-FH2&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x4EF2;&#x4ECB;&#x504F;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x9802;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30B9;&#x30EF;&#x30C3;&#x30D7;&#x9818;&#x57DF;&#x3092;&#x5B9F;&#x884C;&#x3057;&#x305F;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3092;&#x5224;&#x65AD;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x306F;For1&#x304B;&#x3089;&#x985E;&#x4F3C;&#x3057;&#x305F;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3067;&#x7F6E;&#x304D;&#x63DB;&#x3048;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x306E;&#x3067;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;PTEN&#x69D8;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3068;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3067;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x552F;&#x4E00;&#x306E;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;II&#x306E;FH1-FH2&#x304C;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3001;&#x504F;&#x6210;&#x9577;&#x3092;&#x6551;&#x3046;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;FH1-FH2&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x306A;&#x9055;&#x3044;&#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;in vitro&#x91CD;&#x5408;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3067;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;For2&#x304B;&#x3089;FH1&#x3068;FH2&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x304C;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x4ED6;&#x306E;&#x65E2;&#x77E5;&#x306E;&#x30D5;&#x30A9;&#x30EB;&#x30DF;&#x30F3;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x306F;&#x308B;&#x304B;&#x306B;&#x901F;&#x3044;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A3;&#x30E9;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x4F38;&#x9577;&#x306E;&#x6025;&#x901F;&#x306A;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3092;&#x5A92;&#x4ECB;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x4F38;&#x9577;&#x7387;&#x306F;&#x6025;&#x901F;&#x306B;&#x504F;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x306A;&#x5C16;&#x7E4A;&#x7DAD;&#x72B6;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x99C6;&#x52D5;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x6025;&#x901F;&#x30D5;&#x30A9;&#x30EB;&#x30DF;&#x30F3;&#x5A92;&#x4ECB;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A3;&#x30E9;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x4F38;&#x9577;&#x306F;&#x3001;&#x504F;&#x690D;&#x7269;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3042;&#x308B;

Formins &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC9C4;&#xD575;&#xC0DD;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xC874;&#xC7AC; &#xD558;&#xB294; &#xBC0F; &#xB9D0;&#xB77C; &#xAE30;&#xBC18; &#xAD6C;&#xC870; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCC45;&#xC784;&#xC758; &#xCC3D;&#xC870;&#xB97C; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB2E4;&#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xBB3C; formin &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xAC00;&#xC871; &#xD3EC;&#xD568;, isoforms&#xB97C; formin&#xC758; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC218;&#xB9BD; &#xC5B4;&#xB835;&#xAC8C; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBAA8;&#xB4E0; 9 formin &#xBAA8;&#xC2A4; Physcomitrella &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBD84;&#xC11D; Rnai&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, patens. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; II formins (For2) &#xBD80;&#xC871; &#xD55C; &#xC2DD;&#xBB3C;&#xC740; &#xC2EC;&#xAC01; &#xD558; &#xAC8C; &#xC800;&#xD558; &#xD558; &#xACE0; &#xBC29;&#xD574; &#xB9D0;&#xB77C; &#xC870;&#xC9C1;&#xACFC; &#xAD6C;&#xD615; &#xC140;&#xB85C; &#xAD6C;&#xC131; &#xB41C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC18;&#xBA74;, &#xC77C;&#xBC18; &#xAE38;&#xCB49;&#xD55C; &#xC138;&#xD3EC; &#xD615;&#xD0DC;&#xD559;&#xACFC; &#xB9D0;&#xB77C; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E4;&#xB978; &#xBAA8;&#xB4E0; formins &#xACB0;&#xACFC;&#xC758; &#xC785;&#xC744;. &#xD3B8;&#xAD11;&#xB41C;&#xC758; &#xC131;&#xC7A5;&#xC5D0; &#xC5ED;&#xD560;&#xC640; &#xC77C;&#xCE58;, For2 &#xC138;&#xD3EC; &#xC131;&#xC7A5;&#xC5D0; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; apically &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; N &#xB2E8;&#xC790; &#xC778;&#xC0B0; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; &#xD6A8;&#xC18C; tensin (PTEN) &#xBCF4;&#xC5EC;-&#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xAF2D;&#xB300;&#xAE30; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;&#xB97C; &#xC911;&#xC7AC; &#xD558;&#xB294; &#xCC98;&#xB7FC;. &#xBCF4;&#xC874;&#xB41C; formin homology (FH) 1 FH2 &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;, &#xB9D0;&#xB77C; &#xC911; &#xD569;&#xC744; &#xCD09;&#xC9C4;&#xC73C;&#xB85C; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4; PTEN &#xAC19;&#xC740; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xB4A4;&#xC5D0;. &#xC5B4;&#xB5A4; FH1 FH2 &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC758; &#xAF2D;&#xB300;&#xAE30; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xC911;&#xC7AC; &#xD3B8;&#xAD11;&#xB41C; &#xC131;&#xC7A5; &#xC5EC;&#xBD80;&#xB97C; &#xD655;&#xC778; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xAD50;&#xD658;&#xC744; &#xC218;&#xD589;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xD568;&#xAED8; PTEN &#xAC19;&#xC740; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xD074;&#xB798;&#xC2A4; II FH1-FH2&#xB9CC; &#xAD6C;&#xCD9C; &#xD3B8;&#xAD11;&#xB41C; &#xC131;&#xC7A5; &#xD55C; for1&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC0AC;&#xD55C; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC14;&#xAFC0; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; FH1 FH2 &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC801; &#xCC28;&#xC774; &#xD574; &#xBD80; &#xCCB4; &#xC678; &#xD569; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; fh1&#xC640; for2&#xC5D0;&#xC11C; FH2 &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xB9D0;&#xB77C; &#xD544; &#xB77C; &#xBA58; &#xD2B8; &#xC5F0;&#xC2E0; &#xC728;, &#xC5B4;&#xB5A4; &#xB2E4;&#xB978; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4; formin &#xBCF4;&#xB2E4; &#xD6E8;&#xC52C; &#xBE60;&#xB974;&#xAC8C;&#xC758; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xBE60;&#xB978; &#xC18D;&#xB3C4; &#xC911;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xB9D0;&#xB77C; &#xC5F0;&#xC2E0; &#xC728;&#xC758; &#xBE60;&#xB978; &#xC18D;&#xB3C4; &#xAF2D;&#xB300;&#xAE30; filamentous &#xB9D0;&#xB77C; &#xD615;&#xC131; &#xD3B8;&#xAD11;&#xB41C; &#xC131;&#xC7A5;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xC6B4;&#xC804;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C;&#xB294; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBE60;&#xB978; formin &#xC911;&#xC7AC; &#xB9D0;&#xB77C; &#xBA58; &#xC2E0;&#xC7A5; &#xD3B8;&#xAD11;&#xB41C; &#xC2DD;&#xBB3C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC131;&#xC7A5;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC218;&#xC801; &#xC774;&#xB2E4;.

Forminas est&#xE1;n presentes en todos los eucariotas y son esenciales para la creaci&#xF3;n de actina a base de estructuras responsables de diversos procesos celulares. Debido a que los organismos multicelulares contienen grandes familias de genes Formin, el establecimiento de las funciones fisiol&#xF3;gicas de las isoformas Formin ha sido dif&#xED;cil. Utilizando ARNi, se analiz&#xF3; la funci&#xF3;n de los 9 genes Formin dentro de las patenas musgo Physcomitrella. Se demuestra que las plantas que carecen de la clase II forminas (For2) est&#xE1;n muy poco desarrollados y compuesto por c&#xE9;lulas esf&#xE9;ricas con la organizaci&#xF3;n de la actina interrumpido. En contraste, el silenciamiento de todas las dem&#xE1;s forminas resultados en la morfolog&#xED;a normal de las c&#xE9;lulas alargadas y la organizaci&#xF3;n de actina. De acuerdo con un papel en el crecimiento polarizado, se For2 apical localizada en las c&#xE9;lulas de crecimiento. Se demuestra que un N-terminal de la fosfatasa tensina (PTEN)-como la media de dominio localizaci&#xF3;n apical. El dominio PTEN-como es seguida por una homolog&#xED;a formin conservada (HF) de dominio 1-FH2, conocido para promover la polimerizaci&#xF3;n de la actina. Para determinar si la localizaci&#xF3;n apical de cualquier FH1-FH2 de dominio de crecimiento media polarizada, se realiz&#xF3; un intercambio de dominio. Se encontr&#xF3; que s&#xF3;lo la clase II-FH1 FH2, en combinaci&#xF3;n con el dominio PTEN-como, rescata crecimiento polarizado, porque no puede ser reemplazado con un dominio similar de un for1. Se utiliz&#xF3; en los ensayos de polimerizaci&#xF3;n in vitro para diseccionar las diferencias funcionales entre estos dominios-FH1 FH2. Se encontr&#xF3; que tanto el FH1 y los dominios de FH2 For2 se requieren para mediar excepcionalmente r&#xE1;pidas tasas de elongaci&#xF3;n de filamentos de actina, mucho m&#xE1;s r&#xE1;pido que cualquier otro conocido metformina. Por lo tanto, nuestros datos demuestran que las r&#xE1;pidas tasas de elongaci&#xF3;n actina son cr&#xED;ticos para la conducci&#xF3;n de la formaci&#xF3;n de actina filamentosa apical necesaria para el crecimiento polarizado.

R&#xE1;pido Formin mediada por actina alargamiento de filamento es esencial para el crecimiento polarizado Plant Cell

Abbiamo sviluppato un metodo semplice e veloce per identificare alleli sensibili alla temperatura di geni vegetali essenziali. Abbiamo utilizzato le informazioni sulla struttura primaria e terziaria per identificare residui nel nucleo della proteina di interesse. Questi residui sono stati mutati e testati per la sensibilit&agrave; alla temperatura, approfittando del dosaggio eccezionalmente rapido 1 settimana complementazione in muschio Physcomitrella patens. Come molecole di test, abbiamo selezionato le proteine actina-associazione profilina e fattore di actina-depolymerizing, perch&eacute; sono essenziali e il loro fenotipo perdita di funzione pu&ograve; essere completamente salvati. Un piccolo numero di mutanti candidato di screening, identificato con successo gli alleli sensibili alla temperatura del fattore profilin e actina-depolymerizing. Piante harboring questi alleli &egrave; cresciuto bene alla temperatura permissiva di 20 &deg; C a 25 &deg; C, ma ha mostrato una perdita completa della funzione alla restrittiva temperatura di 32 gradi C. in particolare, il profilin mutazione nel gene moss pu&ograve; essere trasferita a profilins da altre specie di piante, rendendoli anche la temperatura al sensibile. La capacit&agrave; di generare routine alleli sensibili alla temperatura di proteine vegetali essenziali fornisce un potente strumento per lo studio della funzione genica in piante.

Screening rapido per alleli sensibili alla temperatura nelle piante.

&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x672C;&#x8CEA;&#x7684;&#x306A;&#x690D;&#x7269;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6E29;&#x5EA6;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30B7;&#x30F3;&#x30D7;&#x30EB;&#x304B;&#x3064;&#x9AD8;&#x901F;&#x306A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x76EE;&#x7684;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30B3;&#x30A2;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6B8B;&#x57FA;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x4E09;&#x6B21;&#x69CB;&#x9020;&#x306E;&#x60C5;&#x5831;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6B8B;&#x57FA;&#x306F;&#x82D4;&#x30D2;&#x30E1;&#x30C4;&#x30EA;&#x30AC;&#x30CD;&#x30B4;&#x30B1;&#x306E;&#x30D2;&#x30E1;&#x30C4;&#x30EA;&#x30AC;&#x30CD;&#x30B4;&#x30B1;&#x3067;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x6025;&#x901F;&#x306A;1&#x9031;&#x9593;&#x306E;&#x76F8;&#x88DC;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3092;&#x6D3B;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6E29;&#x5EA6;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x5909;&#x7570;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x8A66;&#x9A13;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x5FC5;&#x8981;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x55AA;&#x5931;&#x8868;&#x73FE;&#x578B;&#x304C;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x6551;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x306E;&#x3067;&#x3001;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x5206;&#x5B50;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x7D50;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A3;&#x3068;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x8131;&#x91CD;&#x5408;&#x56E0;&#x5B50;&#x3092;&#x9078;&#x629E;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5019;&#x88DC;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x6570;&#x304C;&#x5C11;&#x306A;&#x3044;&#x306E;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x6B63;&#x5E38;&#x306B;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A3;&#x3068;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x8131;&#x91CD;&#x5408;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x6E29;&#x5EA6;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x4FDD;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x690D;&#x7269;&#x304C;25&#x2103;&#x301C;20&#x2103;&#x306E;&#x8A31;&#x5BB9;&#x6E29;&#x5EA6;&#x3067;&#x3088;&#x304F;&#x80B2;&#x3061;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x7279;&#x306B;32&#x5EA6;C&#x306E;&#x5236;&#x9650;&#x6E29;&#x5EA6;&#x3067;&#x306E;&#x95A2;&#x6570;&#x306E;&#x5B8C;&#x5168;&#x306A;&#x55AA;&#x5931;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3001;&#x30B3;&#x30B1;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3067;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A3;&#x5909;&#x7570;&#x306F;&#x304B;&#x3089;profilins&#x306B;&#x8EE2;&#x9001;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;&#x690D;&#x7269;&#x7A2E;&#x3001;&#x6E29;&#x5EA6;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x3092;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C0;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x65E5;&#x5E38;&#x7684;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x306A;&#x690D;&#x7269;&#x6027;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x6E29;&#x5EA6;&#x611F;&#x53D7;&#x6027;&#x5BFE;&#x7ACB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x306F;&#x3001;&#x690D;&#x7269;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

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&#xC2DD;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xC628;&#xB3C4; &#xBBFC;&#xAC10;&#xD55C; &#xB300;&#xB9BD;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC2E0;&#xC18D;&#xD55C; &#xC2EC;&#xC0AC;.

Nous avons d&#xE9;velopp&#xE9; une m&#xE9;thode simple et rapide pour identifier sensibles &#xE0; la temp&#xE9;rature all&#xE8;les de g&#xE8;nes v&#xE9;g&#xE9;taux essentiels. Nous avons utilis&#xE9; les informations de structure primaire et tertiaire afin d&#x26;#39;identifier les r&#xE9;sidus pr&#xE9;sents dans le noyau de la prot&#xE9;ine d&#x26;#39;int&#xE9;r&#xEA;t. Ces r&#xE9;sidus ont &#xE9;t&#xE9; mut&#xE9;s et test&#xE9;s pour sensibilit&#xE9; &#xE0; la temp&#xE9;rature, en profitant de l&#x26;#39;essai de compl&#xE9;mentation de 1 semaine exceptionnellement rapide dans les Physcomitrella patens mousse. Comme les mol&#xE9;cules de test, nous avons choisi le profiline liant l&#x26;#39;actine et des prot&#xE9;ines d&#x26;#39;actine-d&#xE9;polym&#xE9;risation facteur, parce qu&#x26;#39;elles sont essentielles et leur perte de fonction de ph&#xE9;notype peut &#xEA;tre enti&#xE8;rement sauv&#xE9;. Criblage d&#x26;#39;un petit nombre de mutants candidats, on a r&#xE9;ussi &#xE0; identifier sensibles &#xE0; la temp&#xE9;rature de deux all&#xE8;les profiline et actine-d&#xE9;polym&#xE9;risation facteur. Plantes h&#xE9;bergeant ces all&#xE8;les a bien grandi &#xE0; la temp&#xE9;rature permissive de 20 &#xB0; C &#xE0; 25 &#xB0; C, mais a montr&#xE9; une perte compl&#xE8;te de fonction &#xE0; la temp&#xE9;rature restrictive de 32 degr&#xE9;s C. Notamment, la mutation profiline identifi&#xE9;es dans le g&#xE8;ne de la mousse peut &#xEA;tre transf&#xE9;r&#xE9; &#xE0; partir de profilines d&#x26;#39;autres esp&#xE8;ces v&#xE9;g&#xE9;tales, les rendant &#xE9;galement sensible &#xE0; la temp&#xE9;rature. La capacit&#xE9; de g&#xE9;n&#xE9;rer des syst&#xE9;matiquement sensibles &#xE0; la temp&#xE9;rature all&#xE8;les de prot&#xE9;ines v&#xE9;g&#xE9;tales essentielles fournit un outil puissant pour l&#x26;#39;&#xE9;tude de la fonction des g&#xE8;nes dans les plantes.

Le d&#xE9;pistage rapide pour les sensibles &#xE0; la temp&#xE9;rature all&#xE8;les dans les plantes

Wir entwickelten eine einfache und schnelle Methode um temperaturempfindliche Allele der wesentlichen Pflanzengene zu identifizieren. Wir verwendeten prim&auml;ren und terti&auml;ren Strukturinformationen R&uuml;ckst&auml;nde im Kern des Proteins des Interesses zu identifizieren. Diese R&uuml;ckst&auml;nde wurden mutiert und f&uuml;r Temperaturempfindlichkeit, nutzen die au&szlig;ergew&ouml;hnlich schnelle 1-Woche-Complementation Assay in das Moos Physcomitrella Patens getestet. Als Test-Molek&uuml;le wir die profilin-Aktin-bindende Proteine und Aktin-depolymerizing Faktor ausgew&auml;hlt, weil sie sind essenziell und ihren Verlust der Funktion-Ph&auml;notyp k&ouml;nnen vollst&auml;ndig gerettet werden. Eine kleine Anzahl von Kandidaten Mutanten Screening, haben wir erfolgreich temperaturempfindliche Allele von profilin und Aktin-depolymerizing Faktor identifiziert. Pflanzen beherbergen diese Allele wuchs gut an die permissive Temperatur von 20 Grad C bis 25 &deg; C aber zeigte einem vollst&auml;ndigen Verlust der Funktion bei der restriktiven Temperatur von 32 Grad C. insbesondere profilin Mutation identifiziert im Moos-gen aus anderen Pflanzenarten, auch Rendern sie Temperatur empfindlich auf Profilins &uuml;bertragen werden kann. Routinem&auml;&szlig;ig temperaturempfindliche Allele der wesentlichen Pflanzeneiwei&szlig; Generierung ist ein leistungsstarkes Tool f&uuml;r die Studie der Genfunktion in Pflanzen.

Luis Vidali

Department of Biology and Biotechnology

Worcester Polytechnic Institute- WPI

Efficient Polyethylene Glycol (PEG) Mediated Transformation of the Moss Physcomitrella patens

Luis Vidali

.css-o250i3{font-size:18px;font-family:Open Sans,sans-serif;line-height:21.6px;}Department of Biology and Biotechnology

Worcester Polytechnic Institute- WPI

Efficient Polyethylene Glycol (PEG) Mediated Transformation of the Moss Physcomitrella patens

Department of Biology and Biotechnology