糖酵解后，带电荷的丙酮酸分子通过主动转运进入线粒体，进行三种酶促反应。这些反应确保丙酮酸盐可以进入下一个代谢途径，这样储存在丙酮酸分子中的能量就可以被细胞利用。

首先，丙酮酸脱氢酶从丙酮酸中除去羧基，并将其释放为二氧化碳。剥离的分子然后被氧化并释放电子，然后被NAD+吸收产生NADH，形成乙酸盐。

最后，辅酶A是从B族维生素中提取的含硫化合物，通过其硫原子附着在乙酸盐上，生成乙酰辅酶A或乙酰辅酶A。乙酰辅酶A然后进入柠檬酸循环，在那里它将被进一步氧化。