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Method Article
详细介绍了利用开放系统流生物膜与滴流反应器和旋转磁盘反应堆的协议。
被认为是自然界中最微生物在生物膜表面相关的社区存在。细菌生物膜 1矩阵内的包裹和连接表面生物膜的形成和发展,通常是在实验室使用批处理系统,如微孔板或流量的研究系统,如流细胞。这些方法,筛选突变体和化学库(微孔板)可视化(流动池)4 3或生长生物膜。在这里,我们提出两种其他类型的流量系统生物膜生长在金黄色葡萄球菌的详细协议:滴流生物膜反应器和生物膜反应器的旋转盘。
滴流生物膜反应器是专为低剪切条件下生长的生物膜的研究,5滴流式反应器由四个平行测试通道,每持有一个标准玻璃显微镜玻片大小的优惠券,或导管或限制的长度。滴流式反应器是理想的微传感器监测,一般生物膜研究,生物膜cryosectioning样品,高生物量生产,医用材料的评价,并留置医疗器械检测 6,7,8,9 。
旋转圆盘式反应器由聚四氟乙烯包含可移动优惠券的凹槽的磁盘。10可拆卸的优惠券可以由任何可加工材料。旋转盘的底部有一个条形磁铁,让创建跨磁盘旋转液体表面剪切表面冲洗券。 1000毫升的玻璃侧臂的反应堆压力容器是摆在整个磁盘,其中包含18券。液体增长媒体是通过船只的分发,而磁盘是由磁力搅拌器旋转。优惠券是从反应堆压力容器,然后刮下收集生物膜样本作进一步研究或显微成像。旋转圆盘反应器是专为实验室生物杀灭剂的功效,去除生物膜和防污材料的性能评价。9,11,12,13
1。滴流生物膜反应器
2。旋转盘生物膜反应器
3。代表性的成果
一套加快滴流式反应器的一个例子是,如果图1所示。经过三天流会积累丰富的生物膜上的券面,图2A。总生物量会有所不同取决于菌株和精确的生长条件。甲A S.扫描电子显微镜滴流式反应器中生长的金黄色葡萄球菌生物膜如图2b所示。
旋转盘反应器是在图3a所示。描述的协议,可适应一般的任何微生物形成生物膜的能力的具体要求。图3b显示18贴塑料磁盘旋转的光盘。特别适合于这些磁盘生长的生物膜的抗菌测试和产量高可重复性的结果 11 。
图1。滴流式反应器设置。标记为重要组成部分。
图2的滴流的例子s 金黄色葡萄球菌生物膜。 A)以下的协议描述这种生物膜的生长三天。从反应堆的前两个商会的盖子被删除,显示黄南金黄色葡萄球菌生物膜的生物量。二)Sacnning电子显微镜下的A S.金黄色葡萄球菌生物膜滴流式反应器中生长。
图3。旋转盘堆。一个正在运行的旋转盘反应堆)例。关键部件标记。 b)关闭了一个旋转的磁盘。
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在不同的反应堆生长的生物膜,往往会产生不同的特点和每个反应器具有不同的应用。在这项工作中,我们描述了两个生物膜反应器的使用:滴流生物膜反应器和一个旋转的磁盘反应堆。滴流电抗器是有用和越来越低气 - 液界面剪切生物膜,适应各种条件。我们发现大量的生物膜生物量是可取的研究极为方便。这种设置可以很容易地适应对涉及的微传感器的监测和测试潜在的antibiofilm表面研究。
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NIAID的赠款K22AI081748。
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Name | Company | Catalog Number | Comments |
Drip Flow Reactors | BioSurface Technologies Corporation | DFR 110 | |
Rotating Disk Reactors | BioSurface Technologies Corporation |
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