改性技术在小鼠冠状动脉结扎

摘要

用于诱导小鼠实验性心肌梗死的外科手术开始之间的第三和第四肋左侧开胸，为了可视化的心脏的前表面及左肺。左冠状动脉结扎后，胸部被关闭，鼠标被允许自行恢复。

摘要

心肌梗死（MI）是在人类^1-3死亡率的最重要的原因之一。为了提高我们需要更好地了解心肌缺血的病理生理与MI患者的发病率和死亡率。这方面的知识可能是有价值的，创新的心血管治疗⁴定义新的治疗靶点。在小鼠实验性心肌梗死模型是一个日益流行的小动物模型的临床前研究中，MI引起的永久或临时结扎左冠状动脉^{（LCA）5。}在这段视频中，我们描述了如何诱导小鼠实验性心肌梗死的一步一步的方法。

动物是先用2％异氟烷麻醉。无意识的鼠标，然后插管，连接呼吸机进行人工通风。左胸口被刮了胡子，在皮肤上作1.5厘米的切口，沿腋中线。左胸大肌是直言dissoc的的iated直到肋露出。肌肉层被拉到一边，眼睑拉钩固定。这些制剂后，进行左侧开胸之间的第三和第四肋，为了可视化的心脏的前表面及左肺。近段的LCA动脉的连接与一个7-0 ethilon的缝合通常诱导的心肌梗死面积〜40％的左心室。结束时，胸部被关闭和动物接受术后的镇痛（Temgesic，0.3 mg/50毫升，IP）。动物被关在一个温暖的笼子里，直到自然恢复。

研究方案

1。协议文本

1. 在进行手术前，麻醉一个雄性小鼠（C57BL / 6），6个星期以上的老年人吸入2-5％的异氟醚。执行一个脚趾捏确认该动物是充分麻醉。
2. 无意识的鼠标被放置在一个温暖的垫在它的后面，以维持一个恒定的温度为37℃。剃了头的左侧胸部心前区。
3. 鼠标固定到插管装置与异氟醚填充室。将0.2内直径管到鼠标的气管中，通过口，然后在气管插管鼠标上的无菌手术区（37°Ç温度控制器），然后将气管内管连接到一个呼吸机（速度为120每分钟，压力4-6水柱_{2 O），}用聚乙烯吡咯酮碘和75％乙醇消毒区域。
4. 应用眼药膏鼠标的眼睛。地方标准心电图电极上的爪子，将鼠标的心电记录仪。
5. 用无菌剪刀，一个1.5厘米的切口，沿腋中线。剪刀的使用，而不是用手术刀在小鼠的皮下组织，以避免伤害。然后，用钝尖的船舶剪刀进行解剖，收回心前区胸壁肌肉。
6. 之间的第三和第四肋执行左侧开胸，可视化的心脏的前表面及左肺
7. 此外收回胸壁使用合适的牵引器，以提高可视化和可访问性。删除心包，用有齿镊和钝头剪刀。
8. 通过将针（附缝线与7-0 ethilon）下方的动脉与心肌的频带之间的绑带和动脉结扎的左冠状动脉。一个成功的验证闭塞的冠状动脉的前左室壁的运动功能减退/运动不能改变的心电图记录（ 如 ST段抬高，QRS broadeniNG）
9. 关闭两针（6-0 ethilon缝合）的第三和第四肋骨的胸部。
10. 使用5-0 ethilon缝合关闭皮肤。
11. 对于手术后的镇痛，管理单次腹腔注射的丁丙诺啡（0.05毫克/千克）。动物会自发地停止异氟醚麻醉后2-5分钟内恢复。最后，将鼠标在一个温暖的笼子里，并提供0.6毫克/毫升的饮用水（文字叠加：0.6毫克/毫升饮用水中），以防止手术后的困扰丁丙诺啡。第一次手术后24小时密切监视鼠标。
12. 超声心动图评价心功能心肌梗死后第3天。前左室壁运动不能成功的过程进行验证（见所附的视频结果中）。在实验结束时，心脏将被收集和储存在-80oC下，作进一步调查。 即基因的表达。

结果

仪器	功能说明
钝尖剪刀	用于切割皮肤，肋间胸部肌肉，缝合
眼睛牵引器	用于揭露外科手术视图
钝尖镊子	用来掌握皮肤和肌肉
持针器	要保持针
5-0缝合	用于缝合皮肤
6-0缝合	用于缝合胸部肌肉
7-0缝合	冠状动脉结扎<...

讨论

本报告中的外科手术的LCA结扎作为证明是一个可靠和可重复的方法诱导实验性心肌梗死的小鼠^，6。从事通常结扎LCA根据本协议引起心肌缺血，左心室^{3％〜40％。}这会引起显着的前心脏表面心电图ST段可见面色苍白。由于的大型心肌梗死的，死亡率可高达^{30％8，9。}应注意事项，各动物品系，心肌梗死面积和心肌梗死后心肌死亡可能是不同的。该方法具有几个优点。皮肤切口...